FONTES, Raíssa Matos. Identificação de casos de leptospirose e hantavirose em pacientes com suspeita clínica de dengue no Ceará. 2014. 126 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-06-05T12:58:46Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_rmfontes.pdf: 2531174 bytes, checksum: 852019a5d51e64dc634b555f7a1b6214 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-06-05T12:59:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_rmfontes.pdf: 2531174 bytes, checksum: 852019a5d51e64dc634b555f7a1b6214 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-05T12:59:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_rmfontes.pdf: 2531174 bytes, checksum: 852019a5d51e64dc634b555f7a1b6214 (MD5) Previous issue date: 2014 / Dengue is considered the most important arbovirus in the world in terms of morbidity and mortality, causing 50-270,000,000 infections per year, of which 2,000,000 cases progress to more severe forms and 21,000 result in death. Clinical manifestations range from asymptomatic and undifferentiated febrile syndrome to severe hemorrhagic. Considering that dengue has a wide range and nonspecific clinical spectrum, it is difficult to distinguish it from other diseases, using only clinical and epidemiological criteria. There is a high prevalence of patients with a non-laboratory confirmed dengue in epidemics, there is a need to investigate other possible etiologic agents responsible for these cases in order to take early and effective therapeutic measures. This study aimed to identify cases of leptospirosis and hantavirosis in patients with dengue-like syndrome. Therefore, we evaluated 93 patients, with clinical suspicion of dengue, recruited during January-September in 2012, in the State of Ceará. The samples were tested for dengue through NS1 immunochromatographic, ELISA-IgM and RT-PCR. Dengue negative samples were tested for leptospirosis, through ELISA-IgM and PCR, and for hantaviruses, through RT-PCR. All the samples from this study were tested for hantavirus by ELISA-IgM and ELISA-IgG. Of the 93 patients evaluated for dengue, 48 (51,6%) were positive for at least one of the tests. Of the remaining 45 patients with negative results for dengue, 13 (28,8%) patients were positive for leptospirosis, 5 by ELISA-IgM and 8 by PCR. One (1,07%) patient was positive for hantavirus by ELISA IgM and 30 (31,6%) were positive by ELISA-IgG. Thirty two (32,2%) patients remained negative in tests for dengue, leptospirosis and hantavirus, not having revealed its etiology. Thus, in epidemics of dengue, leptospirosis and hantaviruses cases were underdiagnosed and confused with dengue, leading to inappropriate treatment. Besides these, other etiologic agents should be involved, requiring further investigation to define its etiology and the actual prevalence of these pathologies in State. / A dengue é considerada a mais importante arbovirose no mundo em termos de morbi-mortalidade, causando 50 a 270.000.000 de infecções por ano, dos quais 2.000.000 de casos evoluem para as formas mais graves e 21.000 resultam em morte. As manifestações clínicas variam desde formas assintomáticas e síndrome febril indiferenciada a quadros hemorrágicos graves. Considerando-se que a dengue possui um amplo e inespecífico espectro clínico, torna-se difícil distingui-la de outras doenças, utilizando apenas critérios clínicos e epidemiológicos. Há uma grande prevalência de pacientes com quadro de dengue não confirmado laboratorialmente em epidemias, havendo necessidade de pesquisar outros possíveis agentes etiológicos responsáveis por estes casos a fim de se adotar medidas terapêuticas precoces e efetivas. O presente estudo apresentou como objetivo identificar casos de leptospirose e hantavirose nos pacientes com quadro dengue-símile. Foram avaliados 93 pacientes, com quadro clínico de dengue, atendidos em hospital de referência no Estado do Ceará, no período de janeiro a setembro de 2012. As amostras foram avaliadas para dengue através do teste imunocromatográfico NS1, ELISA-IgM e RT-PCR. As amostras negativas para dengue foram testadas para leptospirose, através de ELISA-IgM e PCR, e para hantavirose, através da reação de RT-PCR. Todas as amostras do estudo foram testadas para hantavírus através de ELISA-IgM e ELISA-IgG. Dos 93 pacientes avaliados para dengue, 48 (51,6%) foram positivos por pelo menos um dos testes utilizados. Dos 45 pacientes com resultados negativos para dengue, 13 (28,8%) foram positivos para leptospirose, sendo 5 por ELISA IgM e 8 por PCR. Um (1,07%) paciente foi positivo para hantavírus, através de ELISA IgM e 30 (31,6%) foram positivos pelo ELISA-IgG. Trinta e dois (32,2%) pacientes permaneceram negativos nos testes realizados para dengue, leptospirose e hantavírus, não tendo sua etiologia revelada. Desta forma, em epidemias de dengue, os casos de leptospirose e hantavirose podem estar sendo subdiagnosticados e confundidos com a dengue, levando a tratamentos inadequados. Além destes, outros agentes etiológicos devem estar envolvidos, sendo necessárias maiores investigações para se definir suas etiologias e as reais prevalências dessas patologias no Estado.

Made available in DSpace on 2012-09-06T01:12:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 880.pdf: 775540 bytes, checksum: 6265c09ec326c40d2c45ed225db6279f (MD5) Previous issue date: 2006 / (...) O objetivo do estudo foi analisar e comparar casos graves de Dengue no Sistema de Agravos de Notificação (SINAN) e no Sistema de Internação Hospitalar (SIH) e dos óbitos por Dengue Clássico ou Febre Hemorrágica do Dengue (FHD) no Sistema de Informação de Mortalidade (SIM) ocorridos no município do Rio de Janeiro, de 2001 a 2003. (...)

Made available in DSpace on 2015-05-27T13:34:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 172.pdf: 4084743 bytes, checksum: a14b960291b86dfd51452b5c15a760c6 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / Dengue (DENV) é a arbovirose de maior prevalência em humanos no mundo. Estudos moleculares são necessários para melhor entendimento de sua origem e história evolucionária. Análises filogenéticas e epidemiológicas sugerem que genótipos mais virulentos estão substituindo os de menor impacto epidemiológico. O presente trabalho teve como objetivo caracterizar geneticamente os sorotipos 1, 2 e 3 do DENV isolados no estado de Pernambuco, de 1995 a 2010, através do sequenciamento e análise de variações do genoma completo do vírus. Os isolados de DENV-1 foram incluídos no genótipo V e três linhagens foram observadas: a linhagem I se relacionou com a cepa BR-90, oriunda do Rio de Janeiro; a linhagem II com isolados da Colômbia e Venezuela; a linhagem III mostrou relação com cepas das Ilhas Virgens e de Cingapura, sugerindo possível origem a partir do Caribe e/ou Ásia. Para o DENV -2 foi identificado o genótipo Sudeste Asiático/Americano. Duas linhagens foram observadas, a linhagem I teve sua origem provável a partir da Venezuela e foi substi tuída pela linhagem II, que possivelmente se originou da Jamaica. Os isolados de DENV-3 foram incluídos no genótipo III cuja origem possivelmente se deu pela introdução de uma cepa do Rio de Janeiro, oriunda das ilhas do Caribe. Substituições em nucleotídeos e aminoácidos foram encontradas ao longo dos genomas, as quais podem estar envolvidas em importantes alterações em funções das proteínas virais, mas nenhuma associação com a forma clínica da doença ou tipo de infecção foi identificada. Apenas alterações nucleotídicas em 5´UTR de DENV-3 previu estrutura secundária diferente. Alterações nucleotídicas e estruturais em 3´UTR não se relacionaram com a gravidade da doença. A pressão evolucionária observada foi seleção purificadora. Foram identificadas mutações que são específicas dos isolados e/ou linhagens de Pernambuco, que podem ser elementos virais genéticos que contribuem para sua contínua circulação na região e seu potencial epidêmico

Made available in DSpace on 2016-03-01T13:55:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 lilha_santos_ioc_mest_2015.pdf: 2513314 bytes, checksum: 68510ffea5f70a295d9cf3358fe43197 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O principal vetor do vírus da dengue no mundo e único comprovado nas Américas é o mosquito Aedes aegypti. Atualmente, este mosquito encontra-se distribuído por todos os Estados do Brasil e diversas populações naturais apresentam elevada competência vetorial aos vírus dengue. Anualmente, estima-se que ocorram 50-100 milhões de infecções pelo dengue, com cerca de 2,5 bilhões de pessoas vivendo em países endêmicos. Um dos mecanismos mais recentes, e promissores, para minimizar a transmissão de dengue reside na utilização da bactéria Wolbachia. Esta bactéria é um simbionte intracelular obrigatório transmitido verticalmente da fêmea adulta para a sua prole. Seu uso se baseia no fato de que mosquitos Ae. aegypti com essa bactéria são capazes de bloquear o vírus dengue em comparação com mosquitos livres de Wolbachia. Para se avançar até a liberação dos mosquitos com Wolbachia em campo, é recomendável que muitos passos anteriores sejam executados. Dentre eles, avaliar aspectos de populações naturais de Aedes aegypti, ou seja, sem a bactéria, são de elevada relevância para propor uma liberação racional de insetos com Wolbachia em campo. Assim, propusemos estimar a densidade populacional relativa de mosquitos, a duração do ciclo gonotrófico e a probabilidade de sobrevivência diária (PDS) nas áreas selecionadas pelo projeto que ainda não possuem estas informações conhecidas pelo nosso grupo Foi coletado um total de 180.728 mosquitos selvagens nas quatro áreas de estudo, sendo que 82.316 destes foram Ae. aegypti, 2.867 eram Ae. albopictus, e 96.754 foram Culex quinquefasciatus pela armadilha BGS-Trap. A média semanal de Ae. aegypti foi mais alta em Vila Valqueire (256 ± 74,3, média ± desvio-padrão), um valor próximo ao dobro do observado na Urca (144,1 ± 40,6, média ± desvio-padrão). Para a duração do ciclo gonotrofico e sobrevivência liberamos em Vila Valqueire 1730 fêmeas, sendo 530 delas alimentadas (coorte A) e 1200 nãoalimentadas (coorte B); em Jurujuba, por sua vez, foram liberadas 900 fêmeas (coorte A) e 2100 (coorte B). Em Vila Valqueire foram coletados 573 indivíduos, sendo 98 fêmeas marcadas correspondendo a uma taxa de recaptura de 5,66% A média da expectativa de vida nesta área variou de 2,8 a 3,9 dias para as duas coortes, 3,83 a 6,63 dias somente para a A e 2,69 a 4,46 dias para a B. A sobrevivência pelo modelo exponencial foi de 0,8 para A, 0,72 para B e 0,73 para A e B juntas. Em Jurujuba foram capturados 174 Ae. aegypti, sendo que 45,4% deles eram nativos. Com 95 mosquitos marcados, observamos uma taxa de recaptura de 3,17%. A média da expectativa de vida nesta área variou de 4,07 a 6,11 dias para as duas coortes, 2,59 a 4,95 somente para a A e 7,43 a 10,6 para a B. A sobrevivência pelo modelo exponencial foi de 0,73 para A, 0,84 para B e 0,81 para A e B juntas. Nossos dados mostram que há condição de invasão da Wolcachia em todas as localidades, mesmo naquela que precisaremos liberar maior quantidade de mosquitos com a bactéria para substituir a população local, neste caso o bairro de Vila Valqueire / he main dengue vector in the world and only proven in the Americas is the mosquito Aedes aegypti . Currently, this mosquito is found distributed in all states of Brazil and several natural populations have highly vector competent for dengue virus. Annuall y, it is estimated 50 to 100 million infections by dengue, with about 2.5 billion people living in endemic countries. One of the newest and promising mechanisms to minimize dengue transmission relies in the use of Wolbachia bacterium. This bacterium is an obligate intracellular symbiont transmitted vertically from adult female to its offspring. Its use is based on the fact that Ae. aegypti with these bacteria are capable to block the dengue virus in comparison with mosquitoes without Wolbachia . To advance t o the release of mosquitoes with Wolbachia in the field, many previous steps must be performed. Among them, evaluating aspects of natural populations of Aedes aegypti , ie without the bacteria are highly relevant to propose a rational release of insects wit h Wolbachia in field. Therefore, we propose to estimate the relative population density of mosquitoes, the duration of gonotrophic cycle and the probability of daily survival (PDS) in the areas selected for the project in which these information are not kn own by our group. A total of 180,728 wild mosquitoes w as collected with BGS - Trap in the four study areas, 82,316 of these were Ae. aegypti, 2,867 were Ae. albopictus and 96,754 Culex quinquefasciatus . The weekly average of Ae. aegypti was higher in Vila Va lqueire (256 ± 74.3, mean ± standard deviation), a value close to twice that observed in Urca (144.1 ± 40.6, mean ± standard deviation). For the duration of the gonotrophic cycle and PDS we released in Valqueire Vila 1730 females, 530 of them being fed (co hort A) and 1200 non - fed (cohort B); Jurujuba in turn, we released 900 (Cohort A) and 2100 (Cohort B) females. In Vila Valqueire were collected 573 individuals, 98 females marked corresponding to a recapture rate of 5.66%. The average life expectancy in t he area ranging from 2.8 to 3.9 days for the two cohorts, 3.83 to 6.63 days only for Cohort A and from 2.69 to 4.46 days for Cohort B. The survival by the exponential model was 0.8 to Cohort A, 0.72 to B and 0.73 summing data from both cohorts. In Jurujub a were captured 174 Ae. aegypti , wherein 45.4% were native. With 95 marked mosquitoes, we observed a recapture rate of 3.17%. The average life expectancy in this area ranging from 4.07 to 6,11 dias for the two cohorts: cohort A varied from 2.59 to 4.95 an d B from 7.43 to 10.6. Survival by the exponential model was 0,73 for A, 0.84 for B and 0.81 to the summing data from both cohorts. Our data show that Wolcachia invasion is expected in all locations, even in those we need to release greater of mosquitoes w ith bacteria to replace the local population, in this case the district of Vila Valqueire

BRAGA, Deborah Nunes de Melo. Aspectos laboratoriais e anatomopatológicos no diagnóstico da dengue no Ceará em 2011 e 2012 : papel do serviço de verificação de óbitos de Fortaleza. 2014. 122 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-10-22T12:53:15Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_dnmbraga.pdf: 2131957 bytes, checksum: 769af99382f009f2a59212680e2b6996 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-10-22T12:53:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_dnmbraga.pdf: 2131957 bytes, checksum: 769af99382f009f2a59212680e2b6996 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-22T12:53:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_dnmbraga.pdf: 2131957 bytes, checksum: 769af99382f009f2a59212680e2b6996 (MD5) Previous issue date: 2014 / There is expressive epidemic outbreaks of dengue in Brazil and not all the cases with fatal evolution are diagnosed by the public health service. Objectives: survey the Coroner’s Office Dr. Rocha Furtado (CO-RF) impact in detecting death related to dengue inunsuspicious case by the clinician in Ceará. Methods: Were evaluated post-mortem examinations performed in the period from 2011 to 2012, due suspect of dengue and cases unsuspected by the clinician but that were suspected by pathologist. Biologic material (blood, cerebrospinal fluid, tissue from brain, liver, heart, lung, and spleen) was collected from all the autopsied bodies with dengue’s suspect. The sample test to IgM, NS1, viral isolation and PCR were sent to Central Laboratory of Public Health of Ceara (LACEN). The immunohistochemical test were performed at Evandro Chagas Institute in Amazon. Deaths due to dengue were confirmed only if they fulfilled the WHO criteria. This work was approved by the ethics committee of the Christus Universitary Center (078/2011). Results: 214 post-mortem examinations was performed and 121 (56,5%) were confirmed as dengue. CO-RF found 90 deaths due to dengue that did not have clinical suspicious throughout evolution of illness. Median age was 36 years old (5 months-84 yo), 54,5% were male and 54,1% had a family income above one minimum wage. Comorbidities were reported in 72.2% of this deaths notably hypertension (36.4%), heart disease (28,8%) and diabetes mellitus (22,9%). Alcoholism (32,9%), obesity (31%) and smoking(30,6%) were the main risk factors reported. Coinfections were detected in 46 cases in which bacterial organisms was the most prevalent (93.5%). Edema and hemorrhage occured in all organs with more marked edema in the lungs (79%) and central nervous system (71%). Hemorrage was predominant in suprarenal (31%) and lung (24%). Acute respiratory failure was the most frequently death’scause registered in death certificate (47,1%) followed by shock (33.8%). Conclusion: The joint between the CO-RF with the Center for Epidemiological Surveillance (NUVEP-CE) and LACEN helped to increased by 5.1 times the number of dengue’s related deaths. This is the largest historic series of autopsied deaths due to dengue in the world. / No Brasil ocorrem epidemias de dengue de grande magnitude e nem todos os casos que evoluem para óbito são diagnosticados pelos serviços de saúde. Objetivo: avaliar o impacto do Serviço de Verificação de Óbitos Dr. Rocha Furtado (SVO-RF) para a detecção de óbitos não suspeitos de dengue no Ceará. Métodos: foram avaliados os óbitos encaminhados para o SVO-RF como suspeitos de dengue e aqueles encaminhados com outra hipótese diagnóstica, mas que os patologistas suspeitaram de dengue. Foi colhido material biológico(sangue, líquor, fragmentos de cérebro, coração, pulmão, fígado e baço) de todos os corpos autopsiados, com suspeita de dengue, entre os anos de 2011 e 2012. As amostras foram encaminhadas ao Laboratório Central de Saúde Pública do Ceará (LACEN-CE) para investigação através dos testes diagnósticos: IgM, NS1, isolamento viral, PCR; e encaminhados para o Instituto Evandro Chagas (IEC) para a realização de imunohistoquímica. Foram confirmados os óbitos que preencheram os critérios de confirmação de caso da OMS. O trabalho foi aprovado pelo CEP do Centro Universitário Christus (078/2011). Resultados: foram realizadas 214 autopsias e 121 (56,5%) foram confirmadas como dengue. O SVO-RF detectou 90 óbitos por dengue que não tiveram suspeita clínica durante a evolução da doença. A mediana de idade foi de 36 anos (5m–84a), 54,1% apresentava renda familiar acima de um salário mínimo e 54,5% do sexo masculino. Comorbidades foram referidas em 72,2% dos óbitos confirmados, com destaque para hipertensão (36,4%), cardiopatia (28,8%) e diabetes mellitus (22,9%). Os principais fatores de risco relatados foram etilismo (32,9%), obesidade (31,0%) e tabagismo (30, 6%). Foram identificadas 46 coinfecções, destacando-se as bactérias como agente etiológico em 93,5%. Foi observado edema e hemorragia em todos os órgãos, destacando- se edema mais acentuado nos pulmões (79%) e sistema nervoso central (71%) e hemorragias mais intensas nas adrenais (31%) e pulmões (24%). A causa imediata de morte registrada com maior frequência nas Declarações de Óbito foi insuficiência respiratória aguda (47,1%), seguida de choque (33,8%). Conclusão: a articulação do SVO-RF com o Núcleo de Vigilância Epidemiológica (NUVEP-CE) da Secretaria de Saúde do Ceará e LACEN-CE contribuiu para o aumento de 5,1 vezes no número de óbitos por dengue. Trata-se da maior série histórica de óbitos por dengue autopsiados no mundo.

Submitted by Maria Creuza Silva (mariakreuza@yahoo.com.br) on 2018-08-27T13:28:47Z No. of bitstreams: 1 Diss MP Maria Cristina Aguiar Lima. 2010.pdf: 701637 bytes, checksum: 958fbfe399cafe951de515c1c37529bf (MD5) / Approved for entry into archive by Maria Creuza Silva (mariakreuza@yahoo.com.br) on 2018-08-27T14:06:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Diss MP Maria Cristina Aguiar Lima. 2010.pdf: 701637 bytes, checksum: 958fbfe399cafe951de515c1c37529bf (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-27T14:06:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Diss MP Maria Cristina Aguiar Lima. 2010.pdf: 701637 bytes, checksum: 958fbfe399cafe951de515c1c37529bf (MD5) / O Dengue é uma das doenças infecciosas de maior relevância na atualidade, cuja forma mais grave, a Febre Hemorrágica do Dengue (FHD), constitui-se uma das principais causas de hospitalização e morte em crianças, em países endêmicos, um importante problema de Saúde Pública para o mundo. A Organização Mundial de Saúde (OMS), desde a década de 1970, recomenda critérios para classificação e confirmação da doença, no entanto os critérios para confirmação de FHD, recomendados a partir de 1997, são considerados rígidos, excluindo casos das estimativas da doença. O Ministério da Saúde brasileiro, buscando identificar todas as formas graves da doença, incluiu a esta classificação mais uma categoria denominada: Dengue com complicações (DCC). Em novembro de 2009, a OMS publicou uma nova classificação da doença em duas formas principais: Dengue e Dengue Severo e uma forma intermediária, denominada Dengue com Sinais de Alarme. Este estudo tem por objetivo conhecer o perfil clínico – epidemiológico dos casos de Dengue com Complicações no Estado da Bahia, qual a proporção desses casos que se enquadraria de fato como FHD bem como Dengue Severo e finalmente verificar, à luz da classificação da OMS, quais os critérios de FHD não foram atendidos. Utilizou-se estudo descritivo de todos os 2.138 casos de DCC, que epresentaram 2,3% das 91.441 notificações de dengue em residentes no Estado da Bahia entre 2007 e 2009. Analisou-se as variáveis: sexo; faixa etária; raça/cor; escolaridade; as manifestações clínicas: hemorragias, extravasamento plasmático, trombocitopenia; tipos de complicações: alterações neurológicas, disfunção cardiorrespiratória, insuficiência hepática, derrames cavitários, hemorragia digestiva, leucometria; sorologia (IgM); classificação final,hospitalização e óbito. Verificou-se a concordância entre os casos de DCC com definições de FHD e Dengue Severo, calculou-se coeficientes de incidência, letalidade e hospitalização. Os resultados revelaram concordância em 13,0% dos casos de DCC com a definição de FHD; em 33,4% com Dengue Severo e elevação em 38% dos casos de FHD no período após revisão da classificação final encontrada no SINAN. Conclui-se que os casos de DCC representam um número expressivo de casos graves da doença, que a rigidez dos critérios da classificação da OMS de 1997, excluiu casos de FHD das estimativas estaduais e que a atual definição de Dengue Severo e Dengue com Sinais de Alarme aumentará a sensibilidade na identificação dos casos mais graves da doença.

Made available in DSpace on 2016-08-29T15:35:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_2440_Eduardo Roberto Cole.pdf: 824296 bytes, checksum: 4e07ddc64143283e79dda5885925fe74 (MD5) Previous issue date: 2008-03-07 / O dengue é considerado a mais importante das arboviroses humanas, constituindo atualmente um dos principais problemas de Saúde Pública no mundo. A doença é causada por um vírus do gênero Flavivirus, com quatro diferentes sorotipos, transmitidos por mosquitos do gênero Aedes, sendo o Aedes aegypti seu principal vetor. O controle do vetor por meio de inseticidas sintéticos figura como a principal medida adotada no combate a doença, uma vez que não existem vacinas efetivas contra os diferentes sorotipos do vírus. Os inseticidas, apesar de eficazes, apresentam sérios problemas relacionados ao seu uso, dentre os quais podem ser destacados os danos ambientais, a toxicidade para uso humano e o risco de desenvolvimento de larvas e adultos resistentes.

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Resumo: A dengue tornou-se, na última década, a mais importante arbovirose em temos de morbidade e mortalidade, afetando, aproximadamente, 100 milhões de pessoas ao ano. A doença é causada por um vírus de RNA cadeia simples, o qual é transmitido através da picada de mosquitos do gênero Aedes, presentes ao longo de toda a região tropical e subtropical do mundo. Uma vez que não existem vacinas contra a dengue e seus sintomas são semelhantes aos de outras doenças, um método diagnóstico rápido e confiável é fundamental para o controle efetivo de epidemias. Os principais métodos diagnósticos utilizados atualmente são os ensaios imunoenzimáticos de captura de IgM (MAC-ELISA) e a detecção do RNA virai através de RT-PCR. A eficiência dessas duas técnicas, no entanto, é variável e depende da qualidade dos reagentes e do protocolo utilizado. A fim de contribuir para a melhoria das técnicas de diagnóstico atualmente utilizadas no Brasil, desenvolveu-se esse trabalho, cujos principais objetivos foram: 1) obter antígenos específicos e a um baixo custo, capazes de substituir antígenos produzidos em cérebro de camundongo, utilizados em um teste de MAC-ELISA desenvolvido no Brasil; 2) estabelecer um protocolo de PCR em tempo real para detectar o RNA do vírus da dengue em amostras de soro humano, utilizando como protótipo o sorotipo 1 do vírus (DEN1). Os antígenos usados no teste de MAC-ELISA foram produzidos em cultivo celular e foram testados utilizando-se 50 soros de indivíduos suspeitos de infecção por dengue. Os resultados foram comparados com os do teste original. Apenas dois resultados discordantes foram obtidos. A análise dessas duas amostras por uma terceira técnica (dot-blot) confirmou os resultados obtidos com o antígeno feito em cultura, sugerindo que este, além de ser mais facilmente produzido, é mais sensível e específico. Os dois testes sorológicos detectaram um número maior de amostras positivas entre os soros coletados após o sétimo dia de início dos sintomas. O protocolo de PCR em tempo real desenvolvido nesse trabalho foi comparado com um protocolo de nested PCR descrito na literatura. Ambos os testes foram avaliados quanto sua sensibilidade e especificidade utilizando RNA de vírus da dengue dos sorotipos 1 (DEN1) e 2 (DEN2) e de vírus da febre amarela. A nested PCR foi capaz de detectar o RNA proveniente de 2x102 FFU/ml, enquanto que a sensibilidade da PCR em tempo real foi inferior a 6,25x10"1 FFU/ml. A PCR em tempo real para DEN1 não foi capaz de amplificar amostras de DEN2, mas detectou como positivas as amostras de febre amarela, o que não ocorreu na nested PCR. O mesmo painel de soros testado por ELISA foi submetido às duas técnicas de PCR e os resultados obtidos foram comparados. A baixa sensibilidade da nested PCR foi confirmada pela baixa taxa de detecção observada quando RNAs extraídos diretamente dos soros foram usados na reação. Quando os soros foram passados em cultura celular antes da extração do RNA, porém, o número de amostras positivas aumentou consideravelmente, indicando que essa etapa é importante para o melhor funcionamento dessa técnica. A maior sensibilidade da PCR em tempo real parece compensar, no entanto, esse problema. As duas técnicas de PCR detectaram um número maior de amostras positivas entre os soros coletados antes do sétimo dia após o início dos sintomas, indicando que os métodos moleculares são complementares aos testes sorológicos e as duas abordagens devem, portanto, ser utilizadas em conjunto a fim de garantir um diagnóstico preciso. Além disso, os resultados até o momento obtidos sugerem que, devido sua maior sensibilidade e simplicidade, a PCR em tempo real é mais apropriada, do que a nested PCR, para o diagnóstico da dengue.