Orientador: Maeli Dal Pai Silva / Banca: Margarida Maria Barros / Banca: Fabíola Valdez Domingues / Resumo: A tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus L.), amplamente utilizada na piscicultura brasileira, destaca-se por apresentar inúmeras qualidades para o mercado consumidor. Assim como ocorre com outras espécies de peixes, o desenvolvimento muscular das tilápias pode sofrer a influência de diversos fatores (extrínsecos e intrínsecos), podendo assim comprometer os custos de produção. Neste estudo, objetivamos avaliar a morfologia e a expressão de genes que controlam o crescimento muscular em tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) da linhagem GIFT cultivada em diferentes temperaturas. Noventa peixes (n=10) de uma população monosexo de machos revertidos, pesando aproximadamente 1,4 g, foram distribuídos aleatoriamente em seis caixas d'água de 0,5 m3 em sistema de recirculação d'água e cultivados em três diferentes temperaturas (22, 28 e 30° C) durante 7, 30 e 60 dias. Foram realizadas análises biométricas e morfológicas, bem como análises de expressão gênica dos fatores reguladores miogênicos (MyoD e Miogenina) e do fator de crescimento Miostatina. A análise de expressão gênica foi realizada através da técnica de Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real após Transcrição Reversa (qRT-PCR). Os dados de peso(g) e comprimento padrão (cm) demonstraram que a temperatura pode influenciar o ganho de peso final, sendo que os animais cultivados a 22°C apresentaram menor peso a partir do 30º dia, quando comparado com os animais cultivados a 28 e 30°C. A análise morfométrica (distribuição do diâmetro médio das fibras), não apresentou diferenças significativas entre os animais nas temperaturas estudadas. Entretanto, os animais cultivados a 22 e 30°C apresentaram comportamento similar na distribuição do diâmetro médio das fibras. A análise de expressão gênica para a MyoD, apresentou os maiores... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: The Nile tilapia (Oreochromis niloticus L.), widely used in Brasilian aquaculture, stands out for its numerous qualities to the consumer market. As with other fish species, tilapia muscle development may be influenced by several factors (extrinsic and intrinsic) and, thus, it can lead to compromise production costs. This study aimed to evaluate the morphology and expression of genes that control muscle growth in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) of GIFT strain grown at different temperatures. Ninety fish (n = 10) of a reverted males monosex population, weighing about 1.4 g were randomly divided into six water tanks of 0.5 m3 of water recirculation system and reared in three different temperatures (22, 28 and 30 ° C ) for 7, 30 and 60 days. It was performed biometric and morphological analysis, along with gene expression of myogenic regulatory factors (MyoD and myogenin) and growth factor myostatin analysis. The gene expression analysis was performed using the technique of Polymerase Chain Reaction Real-Time after Reverse Transcription (qRT-PCR). Weight (g) and standard length (cm) data showed that temperature can influence final weight gain, and the animals grown at 22 ° C had lower weight from the 30th day, when compared with animals reared at 28 and 30 ° C. The morphometric analysis (distribution of the fiber mean diameter), did not show significant differences among animals in the studied temperatures. However, animals reared at 22 and 30 ° C showed similar behavior in the distribution of the fiber mean diameter. The gene expression analysis for MyoD, showed the highest mRNA levels in animals grown at 22 ° C, when compared to animals reared at 28 and 30 ° C in almost all studied periods. The levels of mRNA for the myogenin were constant at all studied temperatures and periods. At seven days... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Maeli Dal-Pai / Resumo: Em mamíferos, a miogênese é o processo de desenvolvimento embrionário do tecido muscular que, a nível molecular, é regulado pela interação de transdutores de sinais intracelulares e fatores de transcrição nucleares. Durante o desenvolvimento do músculo esquelético, as células dos somitos comprometem-se à linhagem miogênica e progridem ao longo da via miogênica através de eventos celulares de proliferação e diferenciação terminal e, posteriormente, formação das miofibras multinucleadas. Durante esses processos, há a ativação dos fatores de regulação miogênicos (MRFs), resultando numa reprogramação da expressão gênica responsável pelo orquestramento da miogênese esquelética. Os MRFs são importantes para o desenvolvimento muscular, porém eles não explicam por si só o sofisticado padrão gênico de expressão durante a miogênese. A Osteoglicina (OGN) faz parte dos pequenos proteoglicanos que são secretados pela matriz extracelular e que apresenta expressão gênica alterada durante o processo de miogênese. Embora a OGN já tenha sido identificada como parte do secretoma de células musculares, ainda não foi avaliada a sua função nos processos de proliferação, migração e diferenciação de células musculares. A complexidade dos mecanismos de controle da expressão gênica nesse processo sugere o envolvimento de moléculas reguladoras adicionais, como os micro-RNAs; essas moléculas de RNA codificadas pelo genoma regulam vários processos celulares do músculo esquelético e estão envolvidas em vá... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In mammals, myogenesis is the process of embryonic development of muscle tissue at the molecular level that is regulated by interaction of intracellular signal transducers and nuclear transcription factors. Somite cells are committed to the myogenic lineage and progress along the development of muscle cells and subsequently formation of multinucleated myofiber. During these processes there is the activation of Myogenic Regulatory Factors (MRFs), resulting in a reprogramming of gene expression responsible for the control of skeletal myogenesis. MRFs are important for muscle development, but they do not explain by themselves the sophisticated pattern of gene expression during myogenesis. The Osteoglycin (OGN) is part of the small proteoglycans that are secreted by the extracellular matrix and presenting gene expression changes during the myogenesis process. Although OGN has been identified as part of the muscle cell secretome, it has not been rated it role in proliferation, migration and, differentiation of muscle cells. The complexity of the control mechanisms of gene expression in this process suggests the involvement of additional regulatory molecules, such as micro-RNAs. These RNA molecules encoded by the genome regulate various cellular processes in skeletal muscle and are involved in various diseases. Micro-RNAs work in order to control a common biological pathway or function. Using computer algorithms, we found miR-22 as an important candidate for post-transcriptional re... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Maeli Dal-Pai-Silva / Resumo: Os peixes são um grupo de organismos de extrema importância ecológica, ambiental e principalmente econômica, devido à produção de carne destinada à alimentação dos seres humanos. A carne é composta basicamente por músculo esquelético, um tecido biológico altamente especializado que constitui cerca de 60% da massa corporal dos peixes, e está intimamente relacionado à fisiologia desses animais. A miogênese e o crescimento do músculo esquelético são dependentes da proliferação e migração de células denominadas mioblastos, que podem levar ao aumento do número de fibras musculares (hiperplasia) e/ou aumento do tamanho das fibras musculares (hipertrofia). Esse crescimento é regulado por diversos sinais extrínsecos, como temperatura e oxigenação, e intrínsecos, como fatores transcricionais, microRNAs, hormônios e nutrientes. Além da proliferação e diferenciação dos mioblastos, o tamanho das fibras musculares também é influenciado por esses fatores através de um delicado balanço entre as vias de sinalização de síntese e degradação proteica. Em peixes, essas redes moleculares que controlam a homeostase e o crescimento do músculo esquelético tiveram uma expansão em seu número de componentes devido a um evento de duplicação total do genoma, que culminou com o aumento da complexidade desses organismos e, possivelmente, para uma maior diversidade biológica. Uma das maneiras de estudar essas vias sinalizatórias e entender a complexidade da regulação do crescimento muscular é através das cu... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Fish are a group of organisms of extreme ecological, environmental and mainly economic importance, due to the meat production intended for humans. Meat is primarily composed of skeletal muscle, a highly specialized biological tissue that constitutes about 60% of fish body mass, and it is closely related to the physiology of these animals. Myogenesis and skeletal muscle growth are dependent on the proliferation and migration of cells called myoblasts, which can promote an increase in muscle fibre number (hyperplasia) and/or increase in muscle fibre size (hypertrophy). This growth is regulated by several extrinsic signals, such as temperature and oxygenation, and intrinsic signals, such as transcriptional factors, microRNAs, hormones and nutrients. In addition to myoblasts proliferation and differentiation, the muscle fibre sizes are also influenced by these factors through a delicate balance between protein synthesis and degradation signaling pathways. In fish, these molecular networks that control homeostasis and skeletal muscle growth had an expansion in their number of components due to an event of whole genome duplication, culminating with increased complexity and, possibly, a higher biological diversity of these animals. One way to study these signaling pathways and understand the complexity of muscle growth regulation is through primary cell cultures of fish myoblasts. During the myoblast cell culture development, the main stages of myogenesis are recapitulated, such as ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Camila Coelho Greco / Banca: Adalgiso Coscrato Cardozo / Banca: Renato Aparecido Corrêa Caritá / Resumo: A inclinação da curva força-tempo, obtida durante contrações voluntárias explosivas é definida como taxa de desenvolvimento de força (TDF). Como a TDF reflete a capacidade de desenvolver rapidamente força muscular, ela tem sido considerada uma importante ferramenta para a análise de performance desportiva, principalmente em esportes onde contrações explosivas e/ou ações funcionais (locomoção e manutenção do equilíbrio) são necessárias. Vários protocolos de treinamento com diferentes características (intensidade, número de series, número de repetições, duração) têm produzido melhora significante na TDF. Nesses estudos, vários mecanismos fundamentais para a melhora da TDF foram identificados. No entanto, não há clareza sobre os efeitos que diferentes aspectos do treinamento - tais como o tipo de contração, a velocidade da contração, especificidade de posição corporal entre teste e treinamento e a duração do treinamento - têm sobre a melhora da TDF. Sendo assim, esses aspectos continuam elusivos e são necessárias mais evidências. Então, o objetivo deste estudo foi realizar uma revisão sistemática da literatura sobre a influência do treinamento resistido na TDF em adultos. Adicionalmente, o objetivo da presente meta-análise foi investigar, através da meta regressão, os efeitos das variáveis específicas de treinamento: 1) intenção de realizar o movimento de forma explosiva, independente da velocidade; 2) tipo de treinamento; 3) especificidade; 4) duração total do treinamento na TD... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The slope of the moment (force)-time curve recorded during explosive voluntary contractions has been defined as the rate of force development (RFD). The RFD can be measured at different time intervals from the onset of the muscle contraction, and has been classified as RFD early (< 100 ms) and RFD late (> 100 ms). Since RFD reflects the capacity to rapidly develop muscle force, it has been considered an important tool for the analysis of sports performance, specifically in explosive-type sports and functional tasks (e.g. locomotion and postural balance). Several training protocols with different characteristics (intensity, number of sets, number of repetitions, duration) have produced significant improvement in RFD. In these studies, mechanisms have been identified that are important for RFD enhancement after different resistance training protocols. However, there is no clarity about the effects of different training variables - such as contraction type, contraction speed, body position specificity between training and testing and training duration - on RFD. Therefore, these aspects remain elusive and more data is needed. Thus, the purpose of the present systematic review and meta-analysis is to determine the general effects of resistance training on RFD in adults. Furthermore, the present meta-analysis, using meta-regression, examines how specific training variables, such as: 1) intention of performing explosive muscle actions irrespective of high velocity movements; 2) trai... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Kleber Gomes Franchini / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T20:33:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Corat_MarcusAlexandreFinzi_D.pdf: 5959787 bytes, checksum: 480262d3ceea868b88144ebffae91a99 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Miogênese é um processo altamente ordenado que compromete e direciona células indiferenciadas para um programa de células musculares. Este processo envolve a transição de um alto nível de atividade mitótica, motilidade e período de sobrevivência das células para um período que o ciclo celular é interrompido e começa a expressão de genes músculo-específicos, reconhecimento célula-célula, assim como, formação de miotubos multinucleados. Embora estudos prévios tenham definido extensivamente o mecanismo de miogênese no nível transcricional e identificado genes envolvidos neste programa de diferenciação, tais como: MyoD, Myogenin, Myf-5 e MRF4, assim como, genes mais tardios como MHC, MCK, entre outros; o mecanismo intracelular envolvido com o processo inicial da miogênese permanece pouco entendido. Estudos mostram o envolvimento de proteínas da matriz-extracelular acopladas a receptores integrinas na célula, que quando estimulados, desencadeiam um processo de sinalização através do citoplasma em direção ao núcleo celular. Um papel crítico dessas proteínas sinalizadoras, em sua maioria proteínas tirosina-quinase (PTKs), tem sido evidenciado quanto a sua participação na progressão da miogênese, entre elas podemos destacar MAPKs (ERKI e ERK2), PI3K, PKB/AKT, Integrin, FAK e CASo Apesar destas proteínas aparecerem proeminentes no programa de miogênese, quando estas são superexpressadas ou forçadamente ativadas, o programa de miogênese é interrompido. Isto ressalta a importância de atividade regulatória sobre estas proteínas para o desencadeamento normal do programa de miogênese. Estas proteínas sendo tirosinaquinase- dependentes podem vir a ser reguladas por proteínas tirosina-fosfatases (PTPs). O involvimento de PTPs no programa de miogênese é ainda pouco explorado. No presente estudo, através da utilização de dois modelos, nós focamos a atenção na etapa de regulação da sinalização da proteína tirosina-quinase FAK através da interação com a PTP SHP-2 no período inicial do programa de miogênese. Foi proposta a interação FAK/SHP-2 como um fator crucial para a regulação da Y397 da FAK no período inicial da miogênese. Além de ter reforçado a importância da regulação da FAK para o progresso do programa de diferenciação mioblástica / Abstract: Myogenesis is a highly ordered process tOOtcommits and directs undifferentiated cells into a muscle cell program. This process involves the transition of a high level of mitotic activity, motility and survival of the cell to a period when the cell cycle is disrupted and starts the expression of muscle-specific genes, cell-cell recognition as well as multinucleated myotube formation. Although previous studies have defined extensively the mechanisms of myogenesis at the transcription level and identified early- genes involved on this difIerentiation process such as MyoD, Myogenin, Myf5, MRF4 as well as advanced-genes such as MHC, MCK and others, the intracellular mechanisms engaged on the start of myogenesis remain to this day poorly understood. Some reports show the involvement of extracellular-matrix proteins engaged at integrins receptors of the cell. When such are stimulated, they start a signaling process through cytoplasm toward nucleus. A critical role those signaling proteins, which mostly are tyrosine kinases proteins (PTKs), OOvebeen evident to play on the myogenesis progression, among them, we can stand out MAPKs (ERKI and ERK2), PI3K, PKB/AKT, Integrin, FAK, CASo Despite PTKs figuring prominently in myogenesis, when they are overexpressed or pushed up in their activity, the miogenesis program is impaired. This stands up the importance of regulatory role of these proteins to normal miogenesis program. These PTKs may be regulated by proteins tyrosine phosphatase (PTPs). The engagement of PTPs into the myogenesis program has not been highly explored. In this report, by using two approaches, we OOvefocused on the step of signaling regulation of protein tyrosine-kinase FAK by PTP-SHP-2 on the early stage of myogenesis. We propose the FAK/SHP-2 complex as a crucial factor to regulate the FAK Y397 in this period. Indeed, we corroborated the importance of FAK regulation to the myoblastic differentiation progress / Doutorado / Ciencias Basicas / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Robson Francisco Carvalho / Resumo: A irradiação pelo laser de baixa intensidade (LBI) tem sido utilizada como um método nãoinvasivo para promover ou acelerar a capacidade de regeneração muscular. No entanto, os mecanismos moleculares regulatórios pelos quais o LBI exerce esses efeitos, permanecem em grande parte desconhecidos. Nosso objetivo foi realizar uma análise de sequenciamento de RNA (RNA-Seq) em mioblastos C2C12 após LBI. Foram realizadas as taxas de viabilidade, migração, proliferação e os dados de RNA-Seq dos mioblastos C2C12, identificando 514 genes diferencialmente expressos após LBI. Em seguida, uma análise de ontologia genética e das vias dos genes diferencialmente expressos revelaram transcritos relacionadas ao ciclo celular, biogênese ribossômica, resposta ao estresse, migração celular, estrutura morfológica e proliferação de células musculares. Após, cruzamos nossos dados de RNA-Seq com dados de transcriptomas disponíveis em base de dados públicas, com dados de diferenciação miogênica que mostraram um total de 42 transcritos sobrepostos (mioblastos vs miotubos). Este conjunto de transcritos compartilhados mostrou que os mioblastos irradiados pelo LBI, possuem um perfil transcricional semelhante ao de miotubo, agrupando-se distante do perfil transcricional dos mioblastos. Concluíndo, revelamos pela primeira vez que LBI, induz a uma expressão de um grande conjunto de RNAm, que codificam proteínas reguladoras do ciclo celular que podem controlar a proliferação e diferenciação de mioblastos em mio... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Low-level laser irradiation (LLLT) has been used as a non-invasive method to promote or accelerate muscular regeneration capability. However, the regulatory molecular mechanisms by which LLLT exerts these effects remain largely unknown. Our goal was to perform a RNAsequencing (RNA-Seq) analysis in C2C12 myoblasts after LLLT. C2C12 myoblasts viability, migration, proliferation and RNA-Seq were performed, identifying 514 differentially expressed genes after LLLT. Next, gene ontology and pathway analysis of the differentially expressed genes revealed transcripts among categories related to cell cycle, ribosome biogenesis, response to stress, cell migration, morphological structure and muscle cell proliferation. After, we intersected our RNA-Seq data with transcriptomes publicly available myogenic differentiation data that showed a total of 42 overlapping transcripts (myoblasts vs myotube). This set of shared transcripts showed that the LLLT-myoblasts have a myotube-like profile, clustering away from the myoblast profile. In conclusion, we revealed for the first time that LLLT induces the expression a large set of mRNAs encoding for cell cycle regulatory proteins that may control myoblasts proliferation and differentiation into myotubes. Importantly, these set of mRNA revealed a myotube-like transcriptional profile and provided new insights to the understanding of the specific molecular changes underlying the effects of LLLT irradiation on skeletal muscle cells. / Doutor

Orientador: Lúcia Elvira Alvares / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-17T20:53:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Peterlini_DennerJefferson_M.pdf: 3626461 bytes, checksum: 754caba3e8964b3c91965dc6f4912b32 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Os membros de vertebrados representam uma aquisição importante do grupo, os quais possibilitaram a expansão destes pela Biosfera. As bases moleculares do desenvolvimento dos membros estão sob intensa investigação, e o papel de diversos genes e moléculas de sinalização começam a ser bem compreendidos tanto no contexto do estabelecimento de seus eixos quanto da padronização dos tecidos e estruturas. A família dos genes Dapper (Dpr) tem sido associada a diversos processos da embriogênese de vertebrados, desde a coordenação de movimentos morfogenéticos durante a gastrulação à morfogênese de estruturas tão distintas quanto encéfalo, olhos e coração. No entanto, pouco se sabe sobre o papel destes genes no desenvolvimento dos membros, um sítio marcante de sua expressão durante a embriogênese de vertebrados. Resultados preliminares obtidos com emprego de hibridação in situ em embrião de galinha no nosso laboratório já haviam mostrado a expressão destes genes nos membros, e isto sugeriu que eles pudessem desempenhar um papel importante na ontogênese destas estruturas. assim, os padrões de expressão dos genes Dpr1 e Dpr2 entre os estádios HH24 e HH34 da ontogênese de aves foram caracterizados por meio de hibridação in situ neste trabalho. Também foram avaliadas a expressão dos marcadores moleculares MyoD para desenvolvimento de músculo esquelético, e Sox9 para desenvolvimento de cartilagem, bem como foi feita coloração dos membros com alcian blue, que evidência matriz extra-celular de tecido cartilaginoso. Os resultados obtidos revelaram que, no estádio HH24, a expressão de Dpr1 está presente no mesênquima proximal e medial dos membros anterior e posterior, e ausente da região distal (autópode). Neste estádio, a expressão de Dpr2 é claramente associada à agregação das células mesenquimais em condensações pré-condrogênicas. No estádio HH25, transcritos de Dpr1 e Dpr2 foram localizados pela primeira vez no autópode, delimitando uma região com o formato dos moldes cartilaginosos dos dígitos em formação. No estádio HH28, o padrão de expressão de Dpr1 ainda acompanha o contorno dos dígitos, além de serem observados altos níveis de expressão nos precursores dos tarsos e carpos. Por sua vez, Dpr2 é expresso fortemente nos dígitos 1 e 5 dos membros anterior e posterior, bem como nos blastemas dos dígitos posteriores. Finalmente, no estádio HH34, transcritos Dpr1 e Dpr2 estão concentrados nas regiões das articulações dos membros em desenvolvimento, enquanto Dpr2 é expresso também em tendões e em anexos ectodérmicos em formação. Este estudo suporta fortemente a hipótese de que os genes Dpr1 e Dpr2 desempenham um papel no processo de condrogênese que antecede a formação dos ossos dos membros de aves, bem como no desenvolvimento de outras estruturas, como articulações, tendões e anexos cutâneos / Abstract: The acquisition of vertebrates limbs represents an important novelty for this group and allowed the expansion of vertebrates through the Biosphere. The molecular basis of limbs development are under intense investigation, and the role of several genes and signaling molecules begin to be understood both within the context of axis determination as well as in the patterning of tissues and structures. The Dapper (Dpr) gene family has been associated with different processes of vertebrates embryogenesis, from the coordination of morphogenetic movements during gastrulation to morphogenesis of structures as different as brain, eyes and heart. However, nothing is known about the role of these genes in limb development, am important domain of Dpr expression during the embryogenesis of vertebrates. Preliminary results of in situ hybridization in chicken embryo obtained in our laboratory had already shown the expression of these genes in limb, suggesting that they could play an important role in the ontogeny of these structures. Thus, in this study the Dpr1 and Dpr2 expression pattern was characterized by in situ hybridization between stages HH24 and HH34 of chicken development. We also determined the expression of the molecular markers MyoD (skeletal muscle) and Sox9 (cartilage) and stained limbs at the different stages with alcian blue, that labels the extracellular matrix of cartilage. The results revealed that, at stage HH24, Dpr1 expression is observed in the proximal and medial mesenchyme in the fore and hindlimb buds but avoids the autopod. At this stage, the expression of Dpr2 is clearly associated with mesenchymal condensations of pre-chondrogenic cells. At stage HH25, Dpr1 and Dpr2 transcripts were found for the first time in the autopod, delimiting a region with the shape of the cartilaginous templates of the developing digits. At stage HH28, Dpr1 is still expressed around the developing digits, and transcripts are found at high levels in the tarsi and carpi precursors. In turn, Dpr2 is expressed strongly in the first and fifth digits of the forelimbs and hindlimbs, as well as in the digit blastemas. Finally, at stage HH34, Dpr1 and Dpr2 transcripts are concentrated in the developing joints, while Dpr2 is also expressed in ectodermal tendons and developing skin appendages. This study strongly supports the hypothesis that Dpr1 and Dpr2 play a role in the process of chondrogenesis before the formation of the limb bones in birds as well as the development of other structures such as tendons and skin appendages / Mestrado / Histologia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

A redução no desenvolvimento muscular de filhotes cujas mães foram submetidas ao consumo de dietas baseadas no padrão ocidental pode ser, ao menos em parte, explicada pela resistência periférica à insulina, condição na qual a atividade de proteínas relacionadas à via de sinalização intracelular sensível a esse hormônio encontra-se reduzida. A regulação positiva dessa via resulta no aumento da atividade do Alvo da Rapamicina em Mamíferos (mTOR) que atua como efetor positivo da taxa de tradução de RNAm e, consequentemente, da síntese proteica. Estudos que avaliam a atividade dessa proteína frente ao consumo crônico de dietas hiperlipídicas são escassos e controversos e, até o momento, não são conhecidos trabalhos que avaliaram esses marcadores em animais neonatos ou desmamados, provenientes de mães alimentadas com dieta hiperlipídica gestacional e pós-gestacional. O presente estudo objetiva avaliar o efeito do consumo de uma dieta hiperlipídica por ratas adultas sobre a morfologia e sobre a expressão e a fosforilação das proteínas que compõem a via de sinalização intracelular do mTOR no músculo esquelético da prole em dois momentos: nascimento e desmame. Para isso, inicialmente, 39 ratas foram distribuídas em dois grupos, de acordo com a dieta oferecida: controle (n=19) e hiperlipídica (n=20). Após o nascimento, cerca de seis filhotes por mãe foram eutanasiados para coleta de amostras e análise dos marcadores investigados. Os filhotes selecionados para dar continuidade ao experimento foram dispostos junto às mães que, por sua vez, foram distribuídas em outros quatro grupos, segundo a dieta gestacional e pós-gestacional: CON/CON (n=8); CON/HL (n=9); HL/HL (n=8); HL/CON (n=7). Ao final da lactação, os filhotes foram eutanasiados e amostras foram coletadas para análise. Os resultados obtidos indicam que, em relação aos animais neonatos, há redução das concentrações séricas de leptina e de IGF-I e aumento da fosforilação da Akt e do mTOR musculares, em resposta ao consumo materno da dieta hiperlipídica. Por sua vez, nos animais lactentes, observamos influência da dieta hiperlipídica materna pós-gestacional sobre a promoção de fenótipo obesogênico, com concomitante redução do desenvolvimento muscular e da fosforilação de proteínas alvo do mTOR em estado pós-prandial. Com base nos resultados obtidos, concluímos que a dieta hiperlipídica materna afeta a atividade do mTOR, sendo, esse efeito, dependente da idade e da condição fisiológica dos animais. / The decrease in muscle development of offspring whose mothers consume a typical Western diet can be partly explained by the progression of peripheral insulin resistance, a condition in which the activity of proteins related to the intracellular signaling pathway sensitive to this hormone is reduced. The positive regulation of this pathway results in increased activity of the Mammalian Target of Rapamycin (mTOR) that acts as a positive regulator of the rate of mRNA translation and protein synthesis. Studies that assess the activity of this protein in response to chronic consumption of high fat diets are scarce and controversial and, to date, studies that evaluated these markers in the offspring of mothers fed a high fat diet during gestational and lactation are not known. This study aims to evaluate the effect of consuming a high fat diet for female adult rats in morphology and expression and phosphorylation of proteins that comprise the intracellular signaling pathway of mTOR in skeletal muscle of offspring in two stages: birth and weaning. Therefore, initially, 39 rats were divided into two groups, according to the available diet: control (n = 19) and diet (n = 20). After birth, around six pups per mother were killed for sample collection and analysis of the markers investigated. The pups selected to continue the experiment were placed with the mothers who, in turn, were divided into four groups according to gestational and post-gestational diets: CON/CON (n = 8), CON/HL (n = 9), HL/HL (n = 8), HL/CON (n = 7). At the end of lactation, the pups were euthanized and samples were collected for analysis. The results indicate that, for the newborn animals, there is a reduction of serum leptin and IGF-I concentrations and increased phosphorylation of Akt and mTOR in muscle in response to maternal consumption of high fat diet. In turn, we found that maternal high-fat diet during lactation promoted an obese phenotype in weaned animals, with concomitant reduction of muscle development and mTOR target proteins phosphorylation in the postprandial state. Based on these results, we conclude that maternal high-fat diet affects the activity of mTOR, depending on age and physiological condition of the animals.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2018-09-04T21:36:01Z No. of bitstreams: 1 2017 - Odair Scatolin Rossafa Garcia.pdf: 1812000 bytes, checksum: 37d6d5a375daf6bc6b0ef40d4687a7f7 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-04T21:36:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017 - Odair Scatolin Rossafa Garcia.pdf: 1812000 bytes, checksum: 37d6d5a375daf6bc6b0ef40d4687a7f7 (MD5) Previous issue date: 2017-05-26 / Goat meat has lower levels of fat than those found in other types of meat such as beef, pork, sheep and deer, but the lack of selection criteria for slaughter, storage and commercialization of meat leads to a low level because of the lack of standardization of the product presenting unpleasant sensory characteristics. A study of polymorphism, variation in gene expression and the association of these variations with the desired phenotype allows to broaden the understanding of the physiological processes, which helps in the strategies aimed at improving the characteristic of interest, resulting in the expected final phenotype. The objective of the present study was to evaluate polymorphisms and gene expression among some of the most promising genotypes of pleiotropic genes, comparing the polymorphism and expression among groups of animals with greater and lesser weight at slaughter to verify if there is any relation with the weight difference Or softness of the flesh. For this purpose, genotypes of 40 goats from the Saanen and Alpina breeds for the growth hormone (GH) gene, diacylglycerol acyltransferase 1 gene (DGAT1), myostatin gene (MSTN), growth factor gene Similar to insulin 1 (IGF1), fatty acid carrier protein (FATP1) gene, nuclear factor 1 (NF1) gene, gamma peroxisome proliferator activated receptor (PPAR?) gene. After analyzing the association of the different genotypes with the slaughter weight (AP), carcass weight (PC) and meat softness expressed in shear force (FC), some genes were selected for the analysis of expression and association with them Variables. The GH, NF1 and PPAR genes were not evaluated for expression, the first for not having presented a good result for the efficiency analysis of the other two primers due to the lack of substantial data for the preparation of the primers. For the softness test, previously performed in another study by the same team, the longissimus lumborum muscle was used. Polymerase chain reaction (PCR) technique was used for the genotyping and later, for some genes, the digestion of the fragments amplified by restriction enzymes, a technique known as PCR-RFLP. Gene expression was conducted using the Real Time PCR technique (qPCR) and the meat tenderness phenotype was analyzed in a texturometer. The data were statistically related using the SAS GLM procedure. The UNIVARIATE procedure was used to verify the normality of residues of expression of the genes under study (expressed as 2-?Ct) and softness data. The averages were compared by the Tukey test and the Pearson correlations tested by the t test. The polymorphism already described in the GH was also detected in the population studied in the present study, the genotype heterozygous AB presented a mean 2.78kg at slaughter weight more than the AA individuals, for the MSTN the individuals with heterozygous M1M2 genotype presented higher scores for weight at slaughter, while for the IGF1 gene the heterozygous AB animals present less tender meat. The group with lower weight at slaughter showed higher expression of the DGAT1 and FATP genes, which may reflect a higher deposition of fat in the carcass and greater softness, in comparison with the group of higher weight. / A carne caprina apresenta teores de gordura abaixo dos encontrados em outros tipos de carne como a de bovino, su?no, ovino e veado. Entretanto, a falta de crit?rio de sele??o para o abate, estocagem e comercializa??o da carne, acaba por gerar um baixo n?vel de consumo, devido ? falta de padroniza??o do produto apresentando caracter?sticas sensoriais desagrad?veis. Estudo de polimorfismo, varia??o na express?o g?nica e associa??o destas varia??es com o fen?tipo desejado permite ampliar a compreens?o sobre os processos fisiol?gicos, al?m de auxiliar programas de melhoramento gen?tico animal para a sele??o de animais com fen?tipos superiores para a caracter?stica de interesse. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a associa??o de polimorfismos e express?o g?nica com a caracter?stica peso ao abate e verificar se h? rela??o entre a diferen?a de peso e a maciez da carne. Para este prop?sito foram identificados inicialmente os gen?tipos de cabritos das ra?as Saanen e Alpina para os seguintes genes: horm?nio do crescimento (GH), diacilglicerol aciltransferase 1 (DGAT1), miostatina (MSTN), fator de crescimento semelhante ? insulina 1 (IGF1), prote?na transportadora de ?cidos graxos (FATP1), fator nuclear 1 (NF1), receptor ativado por proliferadores de peroxissomas gama (PPAR?). Ap?s a an?lise de associa??o dos diferentes gen?tipos com o peso ao abate (PA), peso da carca?a (PC) e maciez da carne expressa em for?a de cisalhamento (FC), foram selecionados alguns genes para a an?lises de express?o e associa??o com as mesmas vari?veis. Os genes GH, NF1 e PPAR n?o foram avaliados quanto a express?o, o primeiro por n?o ter apresentado um bom resultado para as analise de efici?ncia dos primers os outros dois devido ? problemas no genoma refer?ncia para a confec??o dos primers. Para o teste de maciez foi utilizado o m?sculo longissimus lumborum. Para a genotipagem foi utilizada a t?cnica da rea??o em cadeia pela polimerase (PCR) e posteriormente, para alguns genes, digest?o dos fragmentos amplificados por enzimas de restri??o (PCR-RFLP). A express?o g?nica foi conduzida utilizando a t?cnica de PCR em Tempo Real (qPCR) e o fen?tipo de maciez da carne foi analisado em textur?metro. Os dados foram analisados estat?sticamente utilizando o procedimento GLM do SAS. O procedimento UNIVARIATE foi utilizado para verificar a normalidade dos res?duos da express?o dos genes em estudo (expressos com 2-?Ct) e dados de maciez. As m?dias foram comparadas pelo teste de Tukey e as correla??es de Pearson testadas pelo teste de t. O polimorfismo j? descrito no GH foi tamb?m detectado na popula??o estudada no presente trabalho, o gen?tipo heterozigoto AB apresentou m?dia 2,78kg a mais de peso ao abate do que os indiv?duos AA, para a MSTN os indiv?duos com gen?tipo heterozigoto M1M2 apresentaram maiores escores para peso ao abate, enquanto para o gene IGF1 os animais heterozigotos AB apresentam carne menos macia. O grupo com menor peso ao abate apresentou maior express?o dos genes DGAT1 e FATP, o que pode refletir maior deposi??o de gordura de gordura na carca?a e maior maciez, em compara??o com o grupo de maior peso.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:31Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-24Bitstream added on 2014-06-13T18:45:17Z : No. of bitstreams: 1 ferraz_alj_dr_jabo.pdf: 613372 bytes, checksum: 0c16778d62f1e6d94f350b8efbbbd6d8 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / A divergência genética entre Bos taurus taurus e Bos taurus indicus é estimada em ~ 250.000 anos mas, apesar dessa proximidade filogenética, estes dois grupos de bovinos apresentam diferenças marcantes em relação à taxa de crescimento muscular e a maciez da carne. De maneira que este estudo foi delineado para avaliar perfil da expressão gênica diferencial no musculo Longissimus dorsi das raças Nelore e Aberdeen Angus com o objetivo de identificar conjuntos de genes cuja expressão está associada à manifestação das características acima mencionadas. Vinte bezerros machos de cada raça foram criados e terminados em regime de confinamento, metade dos quais foi abatida aos 15 e a metade restante aos 19 meses de idade. Nossos resultados sugerem fortemente que a ação autócrina e/ou parácrina do IGF-1 produzido no tecido muscular deve exercer um papel crucial na modulação da taxa de crescimento muscular e na maciez da carne de bovinos. Por outro lado, nossa análise das redes de interação gênica mostrou um grande número de genes que codificam proteínas que agem na proteólise muscular, pequeno número de inibidores e reguladores de proteases, assim como diversos genes relacionados com a morte celular programada nos animais que apresentaram maior maciez da carne, reforçando a hipótese do envolvimento de um complexo multi-enzimático (incluindo as calpaínas e outras proteases) no processo de amaciamento da carne, o qual seria semelhante ao processo de apoptose. / The genetic divergence between Bos taurus taurus and Bos taurus indicus is estimated to be ~ 250.000 years but, in despite of their phylogenetic proximity, this two bovine groups show remarkable differences in regard to the muscle growth rate and meat tenderness. Thus, this study was aimed to evaluate the differential gene expression profile in Longissimus dorsi muscle of Nellore and Aberdeen Angus breeds in order to identify set of genes whose expression is associated with the manifestation of the above-mentioned traits. Twenty male calves of each breed were grown and finished in the feedlot system, half of which was slaughtered at 15 and the remaining half at 19 months of age. Our results strongly suggest that the autocrine and/or paracrine action of the IGF-1 produced in the muscle might play a crucial role in the modulation of muscle growth rate and meat tenderness in beef cattle. On the other hand, our gene interaction network analysis revealed a large number of genes encoding proteins acting in the skeletal muscle proteolysis, a small number of inhibitors and regulators of proteases, as well as several genes related to the programmed cell death in animals that had greater tenderness of meat, reinforcing the hypothesis of the involvement of a multi-enzymatic complex (including calpains and other proteases) in the meat tenderization process, which resembles the apoptosis process.