Orientador: Alexandre Secorun Borges / Banca: Francisco Armando de Azevedo Souza / Banca: Júlio Augusto Naylor Lisboa / Resumo: A diarréia é considerada uma das principais causas de doença e mortalidade de bezerros neonatos. Foram colhidas 100 amostras fecais diarréicas e 30 amostras fecais não diarréicas, de bezerros da raça Nelore com até 60 dias de idade para a detecção dos enteropatógenos Salmonella sp., Escherichia coli, rotavírus, coronavírus, Cryptosporidium spp. e ovos de helmintos. O diagnóstico foi realizado respectivamente, pela semeadura em Ágar Salmonella Shigella, Ágar sangue ovino, MacConkey e aglutinação em látex para detecção das E. coliK99+, eletroforese em gel de poliacrilamida, semi-nested PCR, Ziehl-Nielsen modificado e McMaster. Detectaram-se enteropatógenos em 79% das amostras diarréicas e 70% das amostras sem diarréia. No grupo com diarréia, a E. coli (69%) foi o agente mais isolado, seguido do Cryptosporidium spp. (30%), coronavírus (16%) e rotavírus (11%). No grupo controle, a E. coli, Cryptosporidium spp e o coronavírus foram detectados respectivamente em 66,66%, 10% e 3,33% das amostras. A Salmonella sp. e estrongilídeos não foram encontrados em nenhum dos grupos. A fímbria K99 só foi verificada nas cepas de E. coli isoladas de bezerros com diarréia (5.8%). Entre os antimicrobianos testados a enrofloxacina, norfloxacina e gentamicina foram os mais efetivos. Onfalopatias estavam presentes em 43% dos bezerros com diarréia e ausentes nos bezerros do grupo controle. O peso aos 210 dias de vida dos bezerros foi similar nos grupos com e sem diarréia. / Abstract: Diarrhea is considered as one of the main causes of disease and mortality in newborn calves. Fecal samples from 100 diarrheic and 30 fecal samples from non-diarrheic Nelore calves less than 60 days old were collected to detect Salmonella sp, Escherichia coli, rotavirus, coronavirus, Cryptosporidium ssp. and helminthes eggs. The diagnostic techniques employed were, respectively, culture in agar Salmonella Shigella, ovine blood-agar, McConkey and latex agglutination test to detected E. coliK99+, polyacrylamide gel eletroforesis, semi-nested PCR, Ziehl-Nielsen and McMaster tets. Enteropathogens were detected in 79% diarrheic samples and 70% non diarrheic samples. Among diarrheic calves the Escherichia coli (69%) was the most common agent found, following the Cryptosporidium spp. (30%), coronavirus (16%) and rotavirus (11%). In the control group, E. coli, Cryptosporidium spp and coronavirus were detect in 66,66%, 10% and 3,33% of samples respectivelly. Salmonella sp. and strongylids weren’t found on any groups. The K99 fimbrial only was detected only in E. coli strain isolated from diarrheic calves (5,8%). Among the antimicrobials tested, enrofloxacin, norfloxacin and gentamicin, were most effective. Umbilical diseases were detected in 43% of diarrheic calves and not detected in calves of control group. The weight at 210 days old calves was similar in diarrheic and non diarrheic calves. / Mestre

Orientador: Márcia Garcia Ribeiro / Banca: Antonio Carlos Paes / Banca: Lisiane de Almeida Martins / Resumo: A diarreia é causa comum de morbimortalidade em potros neonatos. Os principais agentes causais de origem bacteriana na enterite em potros são: Salmonella spp., Escherichia coli, Clostridium difficile, Clostridium perfringens e Rhodococcus equi. Foram colhidas 80 amostras de fezes de potros com diarreia e 26 sem diarreia, perfazendo 106 animais com idade até três meses de idade, de diferentes raças, provenientes de propriedades do interior do estado de São Paulo. Foi investigado fatores de virulência de Escherichia coli, caracterização dos sorotipos de Salmonella spp., detecção de toxinas de Clostridium difficille e Clostridium perfringens, e perfil de sensibilidade microbiana das linhagens de E. coli e Salmonella spp. Foram isoladas 64 (60,3%) estirpes de Escherichia coli, o gene fimH em 34 (53,9%) linhagens, o gene ag43 em 33 (52,3%) estirpes e o gene papC em seis (9,5%) isolados. Foram isoladas 17 (16,0%) linhagens do gênero Salmonella. Foram identificadas 20 linhagens de Clostridium perfringens,17 positivos para toxina A e três a toxina A beta 2. Duas amostras de fezes foi isolado Clostridium difficile, produtores das toxinas A/B. Infere-se no presente estudo a complexidade etiológica na enterite de potros até três meses de idade, a baixa relação dos fatores de virulência de E. coli pesquisados com linhagens isoladas de animais com diarreia, a relevância em saúde pública dos sorotipos de Salmonella spp. identificados nos potros, o predomínio da toxina A nos isolados de C. perfringens e C. difficile, e a necessidade da adoção de tratamento das enterites com respaldo dos testes de sensibilidade microbiana / Abstract: Diarrhea is a common cause of morbidity and mortality in neonatal foals. The main causative agents of bacterial of enteritis in foals are: Salmonella spp., Escherichia coli, Clostridium difficile, Clostridium perfringens and Rhodococcus equi. Were collected 80 stool samples from foals with diarrhea and 26 without diarrhea, totaling 106 animals, aged three months old, different races and from properties in the state of São Paulo. Were investigated virulence factors from E. coli, characterization of the serotypes of Salmonella spp., detection of toxins of Clostridium perfringens and Clostridium difficille, and antimicrobial susceptibility to E. coli and Salmonella spp. strains. Were isolated 64 (60.3%) E. coli strains, the detection of the fimH gene in 34 (53.9%) strains, the gene ag43 in 33 (52.3%) strains and gene papC in six (9 , 5%) isolated. We isolated 17 (16.0%) strains of Salmonella. Were identified 20 strains of Clostridium perfringens, 17 detected the toxin A and three the toxin A beta 2. Two stool specimens was isolated Clostridium difficile toxin producer A / B. It is inferred in the present study the complexity enteritis in foals up to three months, the low ratio of virulence factors of E. coli strains isolated from animals with diarrhea, the public health relevance of the serotypes of Salmonella spp. identified in foals, the prevalence of toxin A in isolates of C. perfringens and C. difficile, and the need to adopt the treatment of bacterial enteritis in foals with the backing of microbial sensitivity tests / Mestre

Orientador: José Jurandir Fagliari / Banca: Mario Roberto Hatayde / Banca: Roberto Calderon Gonçalves / Resumo: O estudo teve como objetivo avaliar as alterações clínicas e laboratoriais de bezerros infectados experimentalmente com Salmonella Typhimurium e verificar o efeito do tratamento desses bezerros com antibiótico florfenicol associado ou não à fluidoterapia. Para isso, foram constituídos quatro grupos experimentais, compostos por seis bezerros cada, os quais receberam, por via oral, aproximadamente 109 UFC de Salmonella Typhimurium (exceto o grupo 1) e que foram submetidos aos seguintes procedimentos: controle (grupo 1); infectados, mas sem tratamento (grupo 2); tratamento apenas com florfenicol (grupo 3) e tratamento com florfenicol associado à fluidoterapia (grupo 4). Todos os bezerros foram submetidos ao exame físico imediatamente antes da inoculação experimental e a cada 12 horas, até o sexto dia após a inoculação. Foram coletadas amostras de sangue, uma vez ao dia, para a realização de exames hematológicos, hemogasométricos, bioquímicos e proteinograma. Foram também coletadas, diariamente, amostras de fezes por meio de suabes retais para o isolamento de Salmonella através de exames microbiológicos. Durante a fase experimental, os animais foram alojados em bezerreiros individuais e não houve a ocorrência de óbito em nenhum dos grupos, mostrando que este sorotipo tem importância epidemiológica devido à eliminação do agente no ambiente ter ocorrido de forma intermitente ou contínua. A S. Typhimurium foi capaz de causar febre, diarréia de grau variável, tendência a leucocitose, diminuição do teor sérico de ferro, hipoglicemia e hiperfibrinogenemia. Os bezerros que receberam tratamento à base de florfenicol associado ou não à fluidoterapia tiveram menos dias de diarréia e febre e apresentaram menor período de excreção do agente etiológico pelas fezes. / Abstract: The aim of the study was to evaluate clinical and laboratorial changes in experimentally Salmonella Typhimurium-infected calves and the effect of florfenicol antibiotic treatment associated or not to fluid therapy. Four experimental groups, comprising six calves, were formed. With the exception of group 1, animals orally received about 109 CFU of S. Typhimurium and underwent the following procedures: control (group 1), without any treatment (group 2), treatment with florfenicol only (group 3) and treatment with florfenicol associated to fluid therapy (group 4). All calves were submitted to physical examination before experimental inoculation and at every 24 hours up to the 6th day after infection. Blood samples were collected for hematological, hemogasometric, biochemical and protein analysis. Rectal swabs were performed for the isolation of Salmonella by standard microbiological techniques. The calves were maintained individually and there were no deaths during the experiment, which means that this sorovar has an epidemiological importance related to the intermitent or continuous elimination of the bacteria. S. Typhimurium experimental infection was able to cause fever, different degrees of diarrhea, increased values of leukocytes and fibrinogen concentration and decreased values of seric iron and glicemia. The groups treated with antibiotic associated or not to fluid therapy had a shorter period of diarrhea and elimination of the bacteria in the feces. / Mestre

O presente estudo teve como objetivo avaliar a frequência dos fatores de virulência em amostras de Escherichia (E.) coli isoladas de leitões desmamados. Para a classificação de cepas de E. coli do patotipo ETEC, foram coletados suabes retais de leitões com idade entre 25-40 dias (fase de creche) com sinal clínico de diarreia, em granjas dos estados do Rio Grande do Sul, Santa Catarina e Paraná, totalizando 456 amostras. Para isolamento e caracterização bacteriana, foram utilizados métodos fenotípicos e moleculares. Foi realizada a análise estatística da frequência dos fatores de virulência e dos virotipos, para as fímbrias F4, F5, F6, F18, F41 e toxinas LT, STa, STb e STx2e. Das 456 amostras analisadas, 287 apresentaram crescimento significativo de E. coli. As maiores frequências observadas foram para as fímbrias F4 e F18 e para as enterotoxinas LT, STa e STb. Os virotipos mais frequentes foram F18-STa, F4-LT-STa-STb, F4-STa, F4-LT-STb e F18-STa-STx2e. Noventa e três amostras (32,4%) não apresentaram nenhum gene dos fatores analisados. Foi observada a associação significativa entre amostras positivas para a fímbria F4 e as toxinas LT, STa e STb; entre a fímbria F18 e as toxinas STa e STx2e; entre a fímbria F5 e todas as toxinas. Os genes de toxinas mais detectados (LT, STb) apresentaram associação significativa (P<0,02). A beta-hemólise foi observada em 47,4% das amostras e houve associação (P<0,0001) entre as amostras hemolíticas e os fatores de virulência F4, F18, STa e STx2e. Em relação à consistência das fezes, observou-se associação entre as fezes com consistência líquida e F4 e STa. Com base nos resultados obtidos, conclui-se que a ETEC é um importante agente etiológico de diarreia em leitões desmamados. Em diversas amostras (32,4%) não foram detectados fatores de virulência, sugerindo a ação de outros fatores e/ou agentes desencadeantes de diarreia. E além destes, existem várias hipóteses para explicar esta discrepância, as quais foram revisadas neste trabalho. / The frequency of virulence factors in strains of Escherichia (E.) coli isolated from weaned piglets was assessed. For classification of the strains of enterotoxigenic pathotypes of E. coli, rectal swabs were collected from 25-40 days old nursery piglets with clinical signs of diarrhea in the states of Rio Grande do Sul, Santa Catarina and Paraná, totaling 456 samples. For isolation and bacterial characterization of the samples, phenotypic and molecular tests were used. The results of frequency of virulence factors and virotypes to fimbriae F4, F5, F6, F18, F41 and toxins LT, STa, STb and STx2e were submitted to statistical analysis. Out of 456 samples, 287 showed significant growth of E. coli. The highest frequency was observed for F4 and F18 fimbriae and LT, STa and STb enterotoxins. The most prevalent virotypes were F18-STa, F4-LT-STa-STb, STa-F4, F4-LT-STa-STb and F18-STx2e. Ninety-three samples (32.4%) were negative for virulence genes. There was a significant association between positive samples for F4 fimbriae and enterotoxins LT, STa and STb; between the F18 fimbriae and STa and STx2e; between F5 fimbriae and all enterotoxins. The most frequent toxins (LT, STb) presented significant association (P<0.02). Beta-hemolysis was observed in 47.4% of the samples and there was a association (P<0.0001) between hemolysis and fimbriae F4, F18, STa and STx2e. Regarding stool consistency, it was observed a association between liquid consistency and F4 and STa. Based on the results, it can be concluded that ETEC is an important agent of diarrhea in weaned pigs. In several samples (32.4%) virulence factors were not detected, suggesting the action of other factors and/or agents inducing diarrhea. And besides these, there are other hypotheses to explain this discrepancy, which were reviewed in this work.

Rotavírus (RV) é um importante patógeno viral que causa diarreia em leitões e indivíduos jovens de várias outras espécies animais. RV dos grupos A, B, C e E foram descritos como causa de diarreia em suínos. Este estudo reúne achados histopatológicos, imunohistoquímicos e de reação em cadeia da polimerase com transcriptase reversa (RT-PCR) presentes em quatro surtos de diarreia causados por RV de um e de múltiplos grupos na região sul do Brasil. Vacinação para RV não era aplicada em nenhuma das granjas estudadas. Necropsia, exames histológicos e imuni-histoquímicos foram realizados em 34 suínos de maternidade que apresentavam diarreia severa, além disso, realizou-se cultivo bacteriano e RT-PCR para RV dos grupos A, B e C, vírus da gastroenterite transmissível (TGEV), vírus da diarreia epidêmica dos suínos (PEDV), sapovírus (SaV), norovírus (NoV) e kobuvírus (Aichi vírus C) em 30 dessas amostras. Desidratação e conteúdo pastoso a líquido no cólon foram observados em todos os suínos. Exame histológico revelou atrofia de vilosidades em 29 casos, vacuolização de enterócitos em 27 casos e debris celulares na lâmina própria em 20 casos. Houve marcação imunohistoquímica positiva em 21 casos. RT-PCR foi positiva para RV em 20 casos e RV do grupo C foi o mais frequentemente detectado, presente em 17 amostras. Cultivo e isolamento de Escherichia coli ocorreu em todos os casos e quatro destes foram de E. coli α-hemolítica. Em 15 amostras houve isolamento de Clostridium sp. Sapovirus foi detectado em oito amostras, duas amostras foram positivas para norovírus e detectou-se kobuvírus em 11 animais. Os achados histológicos foram consistentes com infecção por RV e a imuno-histoquímica revelou dois padrões de marcação para o agente no intestino delgado. Os resultados de RT-PCR mostraram que o RV do grupo C foi o principal agente detectado neste estudo. O isolamento de E. coli e a detecção de SaV os destacou como agentes associados à infecção por RV. A detecção de kobuvírus o enfatiza como um novo candidato em associação com RV. / Rotavirus is an important viral pathogen causing diarrhea in piglets and other animal species worldwide. Groups A, B, C and E have been described causing diarrhea in swine. This study reunites histopathological, immunohistochemical and reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) findings present in four outbreaks of diarrhea caused by single and multiple groups of rotavirus in the south of Brazil. None of the herds studied applied vaccination against rotavirus. Necropsy, histological examination and immunohistochemistry were performed in 34 nursing piglets that presented severe diarrhea, bacterial culture and reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) for rotavirus from groups A, B and C, transmissible gastroenteritis virus (TGEV), porcine epidemic diarrhea virus (PEDV), sapovirus (SaV), norovirus (NoV) and kobuvirus (Aichi virus C) were carried out in 30 of the animals necropsied. Additionally, RT-PCR was performed in fecal pools from two outbreaks. Dehydration and fluid to pasty contents were observed in the colon of all 34 swine examined. Histological examination revealed villus atrophy in 29 cases, vacuolation of enterocytes in 27 cases and necrotic debris in the lamina propria of 20 cases. IHC was positive in 21 samples. RT-PCR was positive for rotavirus in 20 samples and group C rotavirus was the most frequently detected, present in 17 samples. Escherichia coli was isolated from all cases, and in four cases, it was α-hemolytic. Clostridium sp. was isolated from 15 samples. Sapovirus was detected in eight samples, samples from two animals were positive for norovirus and kobuvirus was detected from 11 samples. Histological findings were consistent with rotavirus infection and immunohistochemistry revealed two patterns of staining for rotavirus in the small intestine. RT-PCR results have shown group C rotavirus as the main agent detected in this study. The isolation of Escherichia coli and the detection of sapovirus highlighted them as possible agents associated to rotavirus infection. Kobuvirus detection has emphasized it as a new candidate in the association with rotavirus.

Introdução. O Ambulatório de Viajantes (DMIP/HC/FMUSP) foi criado em São Paulo em fevereiro de 2001. Atualmente, os viajantes comparecem à clínica para consulta pré-viagem e em caso de doença, quando voltam à cidade. Avaliação pós- viagem não é feita rotineiramente. Esta pesquisa tem como objetivo ampliar as informações sobre as viagens realizadas e avaliar a adequação e a adesão às orientações pré-viagem. Métodos. No período de 03/02/2011 a 31/12/2011 foram convidados a participar do estudo os viajantes que procuraram o ambulatório para consulta pré-viagem. Os viajantes que concordaram em participar assinaram o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido. O estudo foi realizado em duas etapas. Orientação pré-viagem: coleta de dados sobre as medidas de prevenção gerais recomendadas em relação a doenças transmitidas por vetores, água e alimentos, exposição acidental a animais; e dados individuais sobre as condições da viagem, vacinação prévia e histórico de saúde. Avaliação Pósviagem: Um questionário foi enviado aos participantes 15 dias após a data prevista de retorno. As respostas foram armazenadas na base de dados Excel. Foi utilizada estatística descritiva para apresentar todas as variáveis relevantes, utilizando Epi Info (CDC) e SPSS. Regressão logística multivariada foi usada para detectar fatores de risco independentes associados com o desenvolvimento de diarréia. Resultados. Foram obtidas 150 respostas (taxa de resposta de 52,8%), sendo 94 % dos participantes brasileiros, 89% com nível universitário, 55,1% do sexo feminino, a maioria entre 25 e 44 anos (54,5%). O tempo desde a consulta até a viagem foi menor de 28 dias em 60,1 %. Os destinos mais frequentes foram África em 58 viajantes (38,7%), seguida pela Ásia em 43 (28,7%). Demanda por serviços de saúde: 10,9% durante a viagem, e 6% no retorno. Causa da procura de atenção médica, diarréia (31,2%), seguido de acidentes em 18,7% e suspeita de malária em 12,5%. Entre os pacientes com diarréia ficar em casa de nativos (RR = 2,38; P = 0,004) e ter várias acomodações (RR 1,93; P = 0,02) foram fatores de risco na análise univariada. Viagem à Ásia foi também fator de risco (P= 0,024). Na análise multivariada a associação não se manteve. Em relação à adesão às medidas profiláticas recomendadas, a utilização de água mineral foi elevada entre todos os viajantes (94,1%), uso de hipoclorito, água fervida e limpeza dos alimentos antes do consumo foi maior no grupo de viajantes com diarréia. Hipoclorito para o consumo de água foi fator de risco (P = 0,003), independentemente do país visitado. Adesão à quimioprofilaxia da malária foi baixa, no entanto, apenas 9,6 % dos viajantes em risco apresentou malária. Exposição acidental a outros animais ocorreu em 4,7% dos viajantes. Relação sexual com conhecidos durante a viagem foi relatada por 20 % dos viajantes; 43,3 % não usaram preservativos; 46,1 % dos viajantes fizeram comentários favoráveis ao atendimento recebido e a utilidade durante a viagem. Conclusões. A principal causa de doença e procura por assistência médica foi diarreia. Adesão à quimioprofilaxia da malária e outras medidas recomendadas foi baixa. A procura por atendimento médico durante e após a viagem foi alta nessa série. Propõe-se aumentar a divulgação do serviço de forma a atingir outros setores da população / Background. The Travelers Outpatient Clinic (DMIP/HC /FMUSP) was established in São Paulo in February 2001. Currently, patients attend the clinic for pre-travel consultation and in case of illness when return to the city. Post-travel evaluation is not done routinely. This research aims to expand the information about the trips; profile occurrences; assess pre-trip orientations; adherence and adequacy, impact on disease prevention, and may be used to improve the pre-travel orientation and quality of care. Methods. In the period from 03/02/2011 to 31/12/2011 were invited to participate in the study travelers seeking outpatient care for pre-travel consultation. Travelers who agreed to participate signed the informed consent form. The study was conducted in two stages. Pre-travel orientation: collecting data on general prevention measures recommended in relation to vector-borne diseases, food and water, accidental exposure to animals, and individual data on the conditions of travel, prior vaccination and health. Post-travel evaluation: A questionnaire was sent to participants 15 days after the expected travel return date. The responses were stored in Excel database. Descriptive statistics were used to present all relevant variables using Epi Info (CDC) and SPSS. Multivariate logistic regression was used to detect independent risk factors associated with the development of diarrhea. Results. Were obtained 150 responses (52.81% response rate); 94% of participants were Brazilians, (89%) had college education, 54.5% of the participants were between 25 and 44 years and 55.1% were female. The time from consultation until the trip was less than 28 days in 60.1%. Travel destination: Africa in 58 travelers (38.7%), followed by Asia in 43 (28.7%). Demand for medical services: 10.9% during the trip, and 6% in return. Cause of seeking medical care: diarrhea (31.2 %) followed by accidents in 18.7% and suspected malaria in 12.5%. Among the patients with diarrhea the accommodation in native houses (RR=2.38 P = 0.004) and multiple accommodations (RR=2.006 P = 0.020) were risk factors. Travel to Asia was also a risk (RR 1.93 P = 0.024). In multivariate analysis the association was not maintained. Regarding adherence to prophylactic measures recommended; the use of mineral water was high among all travelers (94.1%); use of hypochlorite, boiled water and cleaning food before consumption were higher in the group of travelers with diarrhea; finding hypochlorite for water consumption as a risk factor (P = 0.003) regardless of the country visited. Adherence to chemoprophylaxis for malaria was low, however only 9.6% of travelers at risk had malaria. Reporting of accidental exposure to other animals occurred in 4.7% of our travelers. The sexual relationship with acquaintances during the trip was reported by 20% of travelers; of these 43.3% did not use condoms. 46.1% of travelers made favorable comments to the care received and the utility during the trip. Conclusions. The leading cause of illness and demand for medical care was diarrhea. Adherence to chemoprophylaxis for malaria and other recommended measures was low. Looking for medical service during and after the trip was high in this series.Proposes to increase the disclosure of the service in order to reach other sectors of the population .

O sorotipo O125ac:H6 compreende amostras de Escherichia coli enteropatogênica atípicas que apresentam o padrão de adesão agregativa (AA) em células HEp-2. A construção de um banco de mutantes da amostra protótipo Ec292/84 com o transposon TnphoA gerou quatro mutantes não aderentes. O objetivo deste estudo foi a caracterização genotípica e fenotípica desses mutantes. As regiões adjacentes à inserção do TnphoA no mutante Ec2921/84::01 foram amplificadas, clonadas e seqüenciadas, revelando que a inserção do TnphoA ocorreu no gene secD, parte do sistema de secreção de proteínas do tipo 2 (SST2). O perfil de proteínas de membrana externa (OMP) dos mutantes, em comparação com a amostra selvagem, revelou a ausência de proteínas de 21 e 30 kDa nos mutantes. Um antissoro obtido contra o extrato de OMP da amostra protótipo inibiu o padrão AA e reconheceu a proteína de 30 kDa em immunoblottings com extratos de OMP. Esses dados indicam que esta proteína está envolvida no estabelecimento do padrão AA de E. coli O125ac:H6 e que essa proteína é transportada através do SST2. / The serotype O125ac:H6 comprises atypical Enteropathogenic Escherichia coli strains that express the aggregative adherence (AA) pattern to HEp-2 cells. We obtained four nonadherent mutants using TnphoA insertion in the Ec292/84 strain. The aim of this study was the genetic and phenotypic characterization of these mutants. The genetic analysis of the mutants revealed that the insertion of TnphoA ocurred in the secD gene, part of the bacterial type 2 secretion system (T2SS). The mutant outer membrane proteins (OMP) profile, in comparison to the prototype strain, demonstrated the lack of expression of proteins of 21 and 30 kDa in the mutant profile. An antiserum raised against the OMP extract of the prototype strain, in addition to inhibit the AA pattern, recognized the 30 kDa protein in immunoblotting assays with OMP extract. These data indicate this OMP is involved in the establishment of the AA pattern presented by the atypical EPEC strains of the O125ac:H6 serotype, and that this protein is transported via the T2SS.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A autoeficÃcia das mÃes em relaÃÃo à capacidade para cuidar de seus filhos à relevante para a promoÃÃo da saÃde, sendo considerada uma variÃvel modificÃvel. Diante dos elevados Ãndices de morbimortalidade por diarreia infantil no mundo, faz-se premente a elaboraÃÃo de estratÃgias que visem elevar a autoeficÃcia materna na prevenÃÃo da diarreia infantil. Objetivou-se construir e validar um vÃdeo educativo para promover a autoeficÃcia materna na prevenÃÃo da diarreia infantil. Tratou-se de um estudo multi-mÃtodos: estudo metodolÃgico e de desenvolvimento (elaboraÃÃo do vÃdeo educativo) e ensaio clÃnico randomizado (aplicaÃÃo do vÃdeo educativo). Na construÃÃo do vÃdeo foram seguidas trÃs etapas: prÃ-produÃÃo (sinopse, argumento, roteiro, storyboard), produÃÃo e pÃs-produÃÃo. Para a validaÃÃo do roteiro do vÃdeo, procedeu-se a avaliaÃÃo por 23 juÃzes, profissionais da saÃde e especialistas na Ãrea da diarreia infantil e saÃde da crianÃa; e por cinco juÃzes tÃcnicos especialistas na Ãrea de comunicaÃÃo. O vÃdeo editado passou pela validaÃÃo por 17 mÃes. Em seguida, o vÃdeo foi aplicado ao grupo intervenÃÃo, enquanto que o grupo controle nÃo recebeu nenhuma estratÃgia educativa para a prevenÃÃo da diarreia infantil. Ressalta-se que 90 mÃes de crianÃas menores de cinco anos compuseram cada grupo da investigaÃÃo. Esta fase foi realizada em uma Unidade de AtenÃÃo PrimÃria em SaÃde de Fortaleza-CE, sendo o primeiro contato na unidade de saÃde e o acompanhamento por trÃs meses realizado por contatos telefÃnicos. Os dados foram analisados no Statistical Package for the Social Sciences, versÃo 20.0. O estudo foi aprovado pelo Comità de Ãtica em Pesquisa da Universidade Federal do CearÃ. Verificou-se que nos quatro momentos de acompanhamento das mÃes no estudo, as mÃdias dos escores de autoeficÃcia materna para prevenir a diarreia infantil elevaram-se, individualmente em cada grupo, demonstrando significÃncia estatÃstica (p<0,0001). Com relaÃÃo à comparaÃÃo das mÃdias dos escores na Escala de AutoeficÃcia Materna para PrevenÃÃo da Diarreia Infantil entre os grupos e dentro dos momentos, pode-se verificar relaÃÃo estatisticamente significante no segundo mÃs de acompanhamento das mÃes (p=0,042). Houve uma mudanÃa considerÃvel na mÃdia dos escores de autoeficÃcia quando se comparou o momento inicial, no Centro de SaÃde da FamÃlia com os demais momentos em ambos os grupos. Os grupos assemelharam-se em todos os momentos com relaÃÃo à comparaÃÃo das mÃdias dos domÃnios da escala, com exceÃÃo do domÃnio de prÃticas alimentares/gerais, o qual no primeiro mÃs de acompanhamento apresentou p=0,036. No grupo intervenÃÃo, observou-se que trÃs meses apÃs as mÃes terem assistido ao vÃdeo educativo na unidade, a chance de crianÃas de mÃes com moderada autoeficÃcia na escala terem diarreia foi 2,36 maior do que os filhos daquelas com elevada autoeficÃcia para prevenir diarreia. Conclui-se que o uso de vÃdeo educativo âDiarreia Infantil: vocà à capaz de prevenirâ elevou a autoeficÃcia materna em prevenir diarreia infantil, bem como diminuiu as chances dessa enfermidade em filhos de mÃes que tinham elevada autoeficÃcia. Acredita-se que esta tecnologia educativa aliada a intervenÃÃes participativas e a orientaÃÃes do enfermeiro contribuirÃo para a obtenÃÃo de resultados ainda mais eficazes no que diz respeito à prevenÃÃo da diarreia infantil. / The maternal self-efficacy regarding the ability to care for their children is important for health promotion and consists of a modifiable variable. Given the high rates of morbidity and mortality from infant diarrhea worldwide, there is an urgent need to design strategies aimed at raising maternal self-efficacy in the prevention of infant diarrhea. This study aimed to develop and validate an educational video to promote maternal self-efficacy in the prevention of infant diarrhea. This was a multi-method study: methodological and development study (development of educational video) and randomized clinical trial (application of educational video). For developing the video, we followed three stages: pre-production (synopsis, plot, script, and storyboard), production, and post-production. To validate the video script, we conducted a review by 23 judges, health professionals and experts in the field of infant diarrhea and child health, as well as by five technical judges, experts in the field of communication. Seventeen mothers validated the edited video. After this validation, we applied the video in the intervention group, while the control group received no educational strategy for the prevention of infant diarrhea. It is worth mentioning that 90 mothers of children under five years composed the research group. This phase took place in a primary healthcare unit in Fortaleza-CE, Brazil, in which the first contact was in the health unit and the monitoring for three months happened via telephone. For data analysis, we used the Statistical Package for Social Sciences, version 20.0. The Research Ethics Committee of the Universidade Federal do Cearà approved the project. We verified that, in the four moments of monitoring the mothers in study, the mean scores of maternal self-efficacy for preventing infant diarrhea increased individually in each group, showing statistical significance (p<0.0001). As for the comparison of mean scores in the Maternal Self-Efficacy Scale for Preventing Childhood Diarrhea between groups and within moments, we identified a statistically significant association in the second month of monitoring the mothers (p=0.042). There was a considerable change in the mean self-efficacy scores when comparing the initial moment in the Family Health Center with other moments in both groups. The groups were similar at all moments as regards to the comparison of the mean domain scores of the scale, except for the domain of food/general practices, which in the first month of monitoring presented p=0.036. In the intervention group, we observed that three months after the mothers had watched the educational video at the unit, the chance of children of mothers with moderate self-efficacy having diarrhea was 2.36 higher than in the children of those with high self-efficacy for preventing diarrhea. Thus, we conclude that using the educational video âInfant Diarrhea: you can prevent itâ not only increased maternal self-efficacy in preventing infant diarrhea, but also decreased the chances of this disease in children of mothers who had high self-efficacy. We believe that this educational technology combined with participatory interventions and nursesâ guidance contributes to achieving effective results in the prevention of infant diarrhea.

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Maternal self-efficacy in preventing childhood diarrhea is a modifiable variable, which measures the maternal confidence to adopt the necessary precautions to prevent illness in children, essential for the promotion of health. Considering that nurses should promote and support maternal self-efficacy in preventing childhood diarrhea, educational technologies have emerged in order to favor this practice. The objective was to analyze maternal self-efficacy to prevent childhood diarrhea before and after a combined educational intervention (educational video and dialogue wheel). It was a quasi-experimental study, before and after type, with single group composed by 58 mothers of children aged from zero to five years, developed in two health units belonging to the Regional Secretariat III and V, respectively. Data collection was performed from July to October 2014 in three stages: first, an interview was conducted with the mothers, individually, when it was applied Maternal Self-efficacy Scale for Prevention of Infant Diarrhea and the sociodemographic and diarrhea clinical form; the second stage corresponded to the educational group intervention with the application of educational video and the participation of women in dialogue wheel mediated by the researcher. The third stage corresponded to the telephone follow-up and the implementation of Maternal Self-efficacy Scale for Prevention of Infant Diarrhea and the reduced form of childhood diarrhea occurrence research every fortnight for two months. Data were analyzed using the Statistical Package for Social Sciences version 20.0. The study was approved by the Ethics Committee of the Federal University of CearÃ. Most participants were female from 20-29 years of age (56.9%), with partner (65.5%), with more than eight years of education (62.1%), housewives (74.5%), with monthly income of up to two minimum wages (91.4%). There was statistical significance between the sociodemographic variables health and the means of EAPDI scores in the four moments of follow-up (p <0.05): age, marital status, maternal education, occupation, per capita income, number of residents in the household , number of children and child sex. For sanitary variables: type of home, surface, garbage disposal, flies in the house, water source, origin of the water that the child drinks, treatment, soap near the tap, type of toilet, type of sewage, existence of refrigerator and presence of animal at home. There was no statistical significance relationship between the occurrence of diarrhea and self-efficacy, but it was observed the increase in self-efficacy scores and the reduction of cases of diarrhea over the follow-up times, indicating that the combined educational intervention influenced in reducing the chance of occurrence of childhood diarrhea. It is concluded that the combined educational intervention increased maternal self-efficacy in preventing childhood diarrhea and decreased the chances of occurrence childhood diarrhea in mothers of the study. The use of educational video combined with the guidelines of nurses in dialogue wheel can and should be done consistently for health education activities by health professionals, especially nurses. / A autoeficÃcia materna em prevenir a diarreia infantil à uma variÃvel modificÃvel, que mede a confianÃa materna em adotar os cuidados necessÃrios para prevenir a doenÃa na crianÃa, sendo essencial para a promoÃÃo da saÃde. Considerando que o enfermeiro deve promover e apoiar a autoeficÃcia materna na prevenÃÃo da diarreia infantil, as tecnologias educativas surgiram como favorecedoras dessa prÃtica. Objetivou-se analisar a autoeficÃcia materna para prevenir diarreia infantil antes apÃs uma intervenÃÃo educativa combinada (vÃdeo educativo e roda de conversa). Tratou-se de um estudo quase experimental, do tipo antes e depois, com grupo Ãnico composto por 58 mÃes de crianÃas com idade de zero a cinco anos, desenvolvido em duas unidades de saÃde pertencentes à Secretaria Regional III e V, respectivamente. A coleta de dados foi realizada, no perÃodo de julho a outubro de 2014, em trÃs etapas: na primeira, foi realizada uma entrevista com as mÃes, individualmente, onde se aplicou a Escala de AutoeficÃcia Materna para PrevenÃÃo da Diarreia Infantil e o formulÃrio sociodemogrÃfico e clÃnico da diarreia; a segunda etapa correspondeu à intervenÃÃo educativa grupal com a aplicaÃÃo do vÃdeo educativo e a participaÃÃo das mulheres na roda de conversa mediada pela pesquisadora. A terceira etapa correspondeu ao acompanhamento telefÃnico com a aplicaÃÃo da Escala de AutoeficÃcia Materna para PrevenÃÃo da Diarreia Infantil e o formulÃrio reduzido de investigaÃÃo da ocorrÃncia da diarreia infantil quinzenalmente por dois meses. Os dados foram analisados no Statistical Package for the Social Sciences, versÃo 20.0. O estudo foi aprovado pelo Comità de Ãtica em Pesquisa da Universidade Federal do CearÃ. Predominaram mulheres com 20 a 29 anos de idade (56,9%), com parceiro (65,5%), com mais de oito anos de estudos (62,1%), donas do lar (74,5%), com renda mensal de atà dois salÃrios mÃnimos (91,4%). Verificou-se significÃncia estatÃstica entre as variÃveis sociodemogrÃficas, sanitÃrias e as mÃdias dos escores da EAPDI nos quatro momentos de acompanhamento (p< 0,05): idade, estado civil, escolaridade materna, ocupaÃÃo, renda per capita, nÃmero de residentes no domicÃlio, nÃmero de filhos e sexo da crianÃa. Quanto Ãs variÃveis sanitÃrias: tipo de casa, tipo de piso, destino do lixo, moscas na casa, origem da Ãgua, procedÃncia da Ãgua que a crianÃa ingere, tratamento, sabÃo prÃximo das torneiras, tipo de sanitÃrio, tipo de esgoto, existÃncia de refrigerador e presenÃa de animal no domicÃlio. Observou-se, a partir do primeiro mÃs de acompanhamento, efeito positivo da intervenÃÃo combinada na ocorrÃncia da diarreia infantil e na autoeficÃcia materna, visto que houve reduÃÃo do percentil de crianÃas com diarreia e, tambÃm, elevaÃÃo na classificaÃÃo da autoeficÃcia materna de baixa para moderada e elevada. Conclui-se que a intervenÃÃo educativa combinada elevou a autoeficÃcia materna em prevenir a diarreia infantil, assim como diminuiu as chances ocorrÃncia da diarreia infantil nas mÃes do estudo. A utilizaÃÃo do vÃdeo educativo aliado Ãs orientaÃÃes dos enfermeiros em roda de conversa pode e deve ser realizada constantemente durante as atividades de educaÃÃo em saÃde pelos profissionais de saÃde, em especial o enfermeiro.

O objetivo deste estudo foi avaliar os aspectos clínicos, a eficiência produtiva, reprodutiva, a resposta imune inata e humoral em fêmeas da raça Holandesa persistentemente infectadas (PI) com BVDV. Para tanto, foram selecionadas 25 PI´s por meio do ELISA antígeno, das quais oito eram bezerras &le; 12 meses; seis novilhas entre 13 e 24 meses; e onze animais de 25 a 36 meses de idade. O grupo não infectado (NI) foi composto por fêmeas negativas com faixas etárias pareadas às PIs. Em geral, as fêmeas PIs apresentaram maior frequência de diarreia (P=0,012) e Doença Respiratória Bovina (DRB) (P=0,004), especialmente àquelas entre 25 a 36 meses de idade. As PIs apresentaram maior concentração sérica de haptoglobina (P=0,017). As vacas NI´s produziram mais leite (8-12 litros) do que as PIs (P&le;0.011). A contagem de células somáticas (CCS) foi maior para as vacas PI´s em relação NI´s durante a lactação (P&le;0,066). A média de CCS observada foi de 0,2-0,5 x 105 (células/mL) e 2,0-10,5 x 105 (células/mL) nos grupos PI e NI, respectivamente. A idade na primeira inseminação (P=0,001) e o número de inseminação necessário para a primeira prenhez foi maior para PI do que nas novilhas NI´s (P=0,051). Na avaliação hematológica, as PI´s apresentaram menores valores de hemoglobina (P=0,098), hematócrito (P=0,084), hemoglobina corpuscular média (P=0,092), plaquetas (P=0,040), plaquetócrito (P=0,059) e linfócitos (número absoluto P=0,075; relativo P=0,092) em relação às NI´s. Em contraste, a porcentagem de monócitos foi maior em PI do que animais NI (P=0,014). Em geral, a proporção (%) e a intensidade da fagocitose (MFI) para Staphylococcus aureus e Escherichia coli foram maiores nas PIs do que animais NI (P&lt;0,079). A porcentagem de células que produziram espécies reativas de oxigênio (EROs) endógeno foi menor em PI do que animais de NI (P=0,005). Padrão semelhante foi observado na porcentagem de células que produziram EROs após estímulo com Staphylococcus aureus (P=0,000) ou Escherichia coli (P=0,000). Em contraste, a intensidade da produção de EROS basal foi maior nas PI´s do que nas NI´s (P=0,011). Um padrão semelhante foi observado para a intensidade da produção de EROs quando as células foram estimuladas com Staphylococcus aureus (P=0,011) ou Escherichia coli (P= 0,013). Por meio da soroneutralização, observou-se que os títulos médios dos anticorpos neutralizantes para as BVDV, BRSV e BoHV foram menor no grupo PI (P=0,000). No entanto, os títulos de anticorpos para BPIV-3 foram semelhantes entre os grupos (P=0,146). A proteína sérica total (PT) foi menor nas PI em relação as NI´s (P=0,021). As fêmeas PIs apresentaram maior frequência de diarreia e DRB, além da menor produção leiteira, diminuição da qualidade do leite e menor fertilidade. O leucograma demonstrou diminuição dos tipos celulares, exceto monócitos. No geral, houve resposta imune inata foi exacerbada nas fêmeas PIs, provavelmente pela menor eficiência na produção de EROs. Em relação ao sistema imune específico observou-se linfopenia e títulos nulos ou baixos de anticorpos neutralizantes contra as viroses respiratórias. / The aim of this study was to evaluate the clinical problems, the efficiency of production, reproduction, the innate and humoral immune response of Holstein heifers and cows persistently infected (PI) with BVDV. Therefore, 25 PI animals were selected using ELISA antigen of which, eight were heifers &le; 12 months; six were heifers between 13 to 24 months; and eleven were animals from 25 to 36 months old. An uninfected group (NI) composed by negative females with same age of PI´s. We observed that PI´s presented more frequency of diarrhea (P=0.012) and Bovine Respiratory Disease (BRD) score (P=0.004), especially the animals from 25 to 36 months old. The PI´s showed higher concentration of haptoglobin (P=0.017). During the lactations the milk production from NI cows was higher (8 to 18,2 litters) than PI (P&le;0.011). Somatic cells count (SCC) were higher for PI than NI cows across milk production (P&le;0.066). The mean of SCC observed was 0,2-0,5 x105 (cells/mL) in NI group and 2,0-10,5 x105 (cells/mL) for PI cows. The age at first insemination (P=0.001) and number of insemination required for the first pregnancy was higher for PI than NI heifers (P=0.051). For hematological evaluation, PI´s showed lower hemoglobin (P=0,098), hematocrit (P=0,084), mean corpuscular hemoglobin (P=0,092), platelet (P=0,040), plateletcrit (P=0,059) and lymphocytes (absolute number P=0.092; relative P=0,075) than NI. In contrast, the percentage of monocytes was higher in PI than NI animals (P=0.014). In aggregate, the percent of phagocytic cells and the average phagocytic avidity (expressed as mean fluorescence intensity, MFI) for Staphylococcus aureus and Escherichia coli were higher in PI than NI animals (P&le; 0.079). The percentage of cells producing endogenous reactive oxygen species (ROS) activity was lower in PI than NI animals (P=0.005). A similar pattern was observed in the percentage of cells producing ROS after exposure to Staphylococcus aureus (P= 0.000) or Escherichia coli (P=0.000). In contrast, the value for endogenous ROS per cell activity (MFI) was higher in PI than NI animals (P=0.011). A similar pattern was observed for ROS MFI after stimulating with Staphylococcus aureus (P=0.011) or Escherichia coli stimulation (P=0.013). The median conventional SN titers for specific antibody recognizing BVDV, BRSV and BoHV-1 in serum were lower in PI than NI animals (P=0.000). The antibody titers for BPIV3 were similar between the groups animals (P=0,146). In aggregate, the total serum protein (TP) was lower in PI than NI cattle (P=0.021). In summary, PI heifers had more diarrhea, BRD, produced less milk, worst milk quality and poorer reproductive performance than NI cattle. Leukogram showed decreased cell types except monocytes. Overall, there was a higher endogenous level innate cell reactivity in PI heifers and cows than NI animals, probably because of the lower efficiency in ROS production. In relation to the specific immune system it appear that the PI animals were less efficient in clearance of antigens due to lower numbers of lymphocytes and related lower titers of specific antibody against respiratory viruses.