Resumo: A disfunção dos núcleos da base causada pela degeneração dos neurônios da via nigroestriatal é a principal causa da perda progressiva das capacidades motoras na doença de Parkinson (DP). As principais características da DP são o tremor de repouso, rigidez muscular, bradicinesia e hipocinesia. A conduta de escolha principal utilizada para o tratamento da doença consiste da administração de levodopa, precursor da dopamina. Nos casos mais graves existe a indicação da terapia de intervenção por Estimulação Cerebral Profunda. A estimulação elétrica da coluna dorsal da medula espinhal foi utilizada recentemente para restaurar a locomoção em modelo animal de Doença de Parkinson. A recuperação funcional dos sintomas de bradicinesia e hipocinesia ocorreu paralelamente à quebra do padrão de disparo desses neurônios, conduzindo ao aparecimento de um padrão de atividade neuronal semelhante ao padrão de disparo que precede o início espontâneo da locomoção. A Acupuntura (ACP), Eletroacupuntura (EA) e a Estimulação Nervosa Elétrica Transcutânea (TENS) foram escolhidas, nesta pesquisa, como recursos de baixo custo e risco, de fácil acesso para a população e que podem alcançar os mesmos resultados por um mecanismo de ação comum: a Estimulação Neural Periférica. A eletrogoniometria e o teste de desempenho motor cronometrado (tapping test) foram aplicados em voluntários acometidos pela doença para análise dos sintomas de hipocinesia e bradicinesia. Os testes avaliaram os parâmetros de amplitude e velocidade do movimento, e foram aplicados nos seguintes momentos: antes e logo após a terapia com um dos recursos terapêuticos escolhidos para o experimento (ACP, EA eTENS) para análise quantitativa dos dados relacionados a bradicinesia e hipocinesia. Os testes foram repetidos nos 30, 60 e 90 minutos após a terapia com o intuito de analisar o período de duração do efeito. O efeito de redução da bradicinesia não foi encontrado ao longo de toda a nossa pesquisa, no entanto, observamos efeito procinético de diminuição da hipocinesia nos 03 (três) grupos experimentais. Em função dos pontos de estimulação selecionados em nossa metodologia, este efeito foi demonstrado nos membros superiores, em ambos os lados, mas não foi observado nos membros inferiores. O tempo de duração deste efeito foi de aproximadamente 60 minutos, para um período de 30 minutos de estimulação. Baseados nos resultados acima mencionados, estudos sobre o efeito da estimulação crônica da coluna dorsal da medula espinhal para tratamento dos distúrbios motoras na DP fazem-se necessários.

Resumo

Resumo: A Doença de Parkinson (DP) é um distúrbio neurodegenerativo causado pela morte de neurônios dopaminérgicos da substância negra pars compacta que liberam dopamina no estriado. No estriado há neurônios que expressam receptores de dopamina (D1R), os quais fazem parte da família de receptores acoplados à proteína G e estão associados a proteína Golf. A proteína Ric-8B se liga diretamente a subunidade alfa livre da proteína Golf e trabalhos anteriores indicam que Ric-8B é capaz de amplificar o sinal dessa via, funcionando como uma GEF (Guanine nucleotide Exchange Factor). Como a DP é caracterizada por uma severa diminuição dos níveis de DA no estriado por consequente morte dos neurônios dopaminérgicos, se Ric-8B é capaz de aumentar o sinal dos receptores de DA, torna-se importante investigar uma possível relação entre a proteína Ric-8B e a DP para definir se essa proteína poderá ser usada como alvo para o tratamento da doença. Através do modelo animal de DP lesado com 6-OHDA esse trabalho iniciou a investigação dessa possível relação. Foram retirados os estriados dos animais tratados ou não com a toxina em diferentes tempos (4 horas, 24 horas, 3 dias e 7 dias). Inicialmente padronizou-se a técnica de RT-qPCR utilizando iniciadores específicos para Ric-8B (transcrito longo e transcrito curto) bem como para G?olf. Foram utilizados também 5 genes de expressão constitutivas na normalização: HPRT, GAPDG, HMBS, ACTB e ?2M. Através do uso do programa GeNorm, demonstrou-se que dentro desses 5 genes, para o nosso caso, os melhores genes para calcular a expressão normalizada seriam GAPDH e HMBS. Em seguida, através da mesma técnica de PCR em tempo-real (RT-qPCR), quantificou-se a expressão dos genes de Ric 8B (transcritos longo e curto) e de G?olf, na tentativa de se avaliar a expressão destes genes no decorrer na DP. Os resultados indicaram que há tendência a um aumento da expressão destes genes após 3 dias, porém tanto nos animais que foram tratados com 6-OHDA, quanto nos animais sham. Assim, os dados obtidos no presente trabalho ainda não foram conclusivos com relação a expressão desses genes no decorrer da DP. Entretanto, nesse trabalho foi possível padronizar a técnica de RT-qPCR para o estudo destes genes, o que possibilitará um estudo maior no futuro, utilizando outros modelos animais de DP ou outras regiões do cérebro. Sem dúvida, o desenvolvimento deste projeto foi importante para iniciar o estudo de Ric-8B como um potencial alvo na DP.

Orientador : Prof. Dr. Ricardo L. R. de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Genética. Defesa: Curitiba, 21/07/2017 / Inclui referências : f. 50-61 / Resumo: A doença de Alzheimer (DA) e a forma de demência mais comum, afetando cerca de 44 milhões de pessoas em todo o mundo. A DA e uma doença neurodegenerativa, caracterizada por deposição extracelular do peptídeo ?- amiloide e a formação intracelular de emaranhados neurofibrilares. Recentemente, a neuroinflamação surgiu como um componente importante da patologia da DA e diversos genes inflamatórios já foram associados a DA. Níveis elevados de citocinas e interleucínas inflamatorias foram encontrados em pacientes com DA. A supereexpressão desses mediadores e critica para o inicio do processo inflamatório e medeia a expressão de genes vários genes inflamatórios. O principal objetivo do estudo foi analisar associação entre polimorfismos dos genes TLR6, TLR2, NEK7, IL- 18, IL-1B, NLRP10 e COL4A1, e susceptibilidade a DA, e associação com outras variáveis cognitivas da DA, atraves estudo de associação caso-controle. Um total de 152 pacientes com DA e 120 controles foram incluídos no estudo. Todos os polimorfismos foram genotipados usando a plataforma Sequenom MassARRAY iPLEX. Foram encontradas associações entre o polimorfismo rs6531669 (TLR6) e susceptibilidade a DA, idade de inicio e MMSE; o polimorfismo rs13105517 (TLR2) encontrou-se associado com susceptibilidade a DA, e MMSE; rs9919613 (NLRP10) foi associado com a susceptibilidade a DA, idade de inicio e gravidade da doença; foram encontradas associações entre o polimorfismo rs1143643 (Il-1B) e idade de inicio e gravidade da doença; o polimorfismo rs613430 (COL4A1) encontrou-se associado a gravidade da doença. Em conclusão, o nosso estudo sugere que o TLR6, TLR2 e NLRP10 são genes candidatos para a patogênese da DA, e que esses genes e os genes IL-1B e COL4A1, estão associados a idade de inicio e outras variáveis cognitivas da doença. Palavras-chave: Doença de Alzheimer, inflamação, TLR2, TLR6, IL-1B, NLRP10, COL4A1. / Abstract: Alzheimer's disease (AD) is the world's most common form of dementia, affecting over 44 million people worldwide. AD is a neurodegenerative disease, characterized by extracellular deposition of amyloid-? peptide and the intracellular formation of neurofibrillary tangles. During the last few years, neuroinflammation has been pointed out as an important component of AD pathology and several inflammation-related genes have already been associated with AD. Elevated levels of inflammatory cytokines and interleukins have been found in AD patients. Overexpression of these mediators is critical for the onset of the inflammatory process and mediates the expression of inflammation-related genes. Here we performed a case-control association study to evaluate the association between TLR6, TLR2, NEK7, IL-18, IL-1B, NLRP10, and COL4A1 genetic polymorphisms, and AD susceptibility, and association with other AD cognitive variables. A total of 152 AD patients and 120 controls were included in the study. All the polymorphisms were genotyped using the Sequenom MassARRAY iPLEX Platform. rs6531669 (TLR6) was found to be associated with AD susceptibility, age of onset, and MMSE; rs13105517 (TLR2) was found to be associated with AD susceptibility, and MMSE; rs9919613 (NLRP10) was found to be associated with AD susceptibility, age of onset, and disease severity; rs1143643 (Il-1B) was found to be associated with age of onset, and disease severity; rs613430 (COL4A1) was found to be associated with disease severity. In conclusion, our study suggests that TLR6, TLR2 and NLRP10 are candidate genes for AD pathogenesis, and that these genes and IL-1B and COL4A1 are associated with AD onset and other cognitive variables. Key-words: Alzheimer's disease, inflammation, TLR2, TLR6, IL-1B, NLRP10, COL4A1.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-07-30Bitstream added on 2014-06-13T20:44:51Z : No. of bitstreams: 1 thomazini_cm_dr_botfm.pdf: 892086 bytes, checksum: 330ae89e0fa48c19f97f1eac213d0a4c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Intestinal population of Escherichia coli is increased in patients suffering from inflammatory bowel disease (IBD), but the reason for this elevation and particular features of these bacteria are not fully known. In this study, the adherence abilities and phenotypes of a collection of 131 E. coli isolates cultured from rectal biopsies of 27 subjects diagnosed with ulcerative colitis (UC), 8 with Crohn’s disease (CD) and 19 control patients were investigated, using HEp-2 cells in assays of 3 and 6h of bacteria-cell contact. The isolates were also PCR screened for the presence of markers linked to adherence and invasion: plasmid of aggregative adhesion (pAA) and the aggregative adherence fimbriae R (aggR), E. coli attaching and effacing (eae), invasion-associated locus (ial) and invasion plasmid antigen H (ipaH) genes. Enteroagregative E. coli (EAEC) strains, as detected in 3h adherence assays, were found in 25/35 (71.4%) IBD patients and in 5/19 (26.3%) controls (P<0.02). None of the strains had ial or ipaH, and those from CD patients were also negative for other investigated markers. Three UC patients had strains harboring both pAA and aggR and another 4 UC patients had eae+ strains. The results of the present study showed that EAEC were the dominant E. coli group found in the colonic mucosa of IBD patients. In addition, the detection of virulence markers in strains from 7/27 UC (25,9%), but in none from CD patients (p<0.02) suggests the involvement of known potentially pathogenic (typical) EAEC with ulcerative colitis

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2010. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-05-11T13:08:21Z No. of bitstreams: 1 2010_RitadeCassiaAzevedoMartins.pdf: 2140108 bytes, checksum: 0280485e80cc03ce75b799fefa7fe5c1 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-05-11T13:09:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_RitadeCassiaAzevedoMartins.pdf: 2140108 bytes, checksum: 0280485e80cc03ce75b799fefa7fe5c1 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-11T13:09:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_RitadeCassiaAzevedoMartins.pdf: 2140108 bytes, checksum: 0280485e80cc03ce75b799fefa7fe5c1 (MD5) / Introdução: Os genes do HLA-DQ2 (DQA1*0501 e DQB1*0201) são encontrados de 80% a 100% dos casos de doença celíaca (DC). Nos casos DQ2 negativos, pode-se encontrar o HLA-DQ8, que está associado ao haplótipo DR4 (DRB1*04). Objetivos: Determinar a freqüência de DC entre parentes de celíacos e dos genes do HLA-DQ2 e DRB1*04 entre pacientes celíacos e seus parentes. Métodos: Foram realizados testes sorológicos em 207 parentes de primeiro grau de 90 pacientes celíacos para a determinação da presença de anticorpos IgA anti-transglutaminase (IgA-tTG) e IgA anti-endomísio (IgA-EMA). Os parentes com resultados positivos foram submetidos à biópsia intestinal. Tanto nos pacientes celíacos, como em seus parentes, foi determinada a freqüência dos alelos HLA-DQA1*0501, DQB1*0201 e DRB1*04 por meio de reação em cadeia de polimerase (PCR – Polymerase Chain Reaction). Resultados: Quatorze (6,7%) novos casos de DC foram identificados entre os 207 parentes investigados e todos eles apresentaram os alelos predisponentes HLA-DQ2 (DQA1*0501 e DQB1*0201) e/ou DRB1*04/DQ8, seja isoladamente ou em associação. Entre os pacientes celíacos, o HLA-DQ2 estava presente seja isoladamente ou em conjunto com a DRB1*04, em 86,6% dos casos. Os demais casos apresentaram pelo menos um dos alelos pesquisados e apenas um deles não apresentou nenhum dos alelos predisponentes. Já no grupo de parentes de celíacos, pelo menos um dos alelos de risco foi encontrado em 94,6% e o HLA-DQ2 foi encontrado sozinho ou em conjunto com o alelo DRB1*04 em 57,4%. Onze (5,3%) dos parentes de celíacos não apresentaram nenhum dos alelos predisponentes para DC. Conclusão: As freqüências encontradas no estudo da presença dos alelos HLA predisponentes para DC e do rastreamento sorológico são semelhantes às descritas em estudos já realizados entre parentes de celíacos. A determinação dos genes de susceptibilidade à DC entre parentes de celíacos é útil na exclusão de indivíduos a serem acompanhados por meio de testes sorológicos, e nos casos em que há dúvidas em relação ao diagnóstico da doença. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: HLA-DQ2 genes (DQA1*0501 and DQB1*0201) can be found from 80% to 100% cases of celiac disease (CD). In HLA-DQ2 negative patients, it is possible to find the HLA-DQ8, which is associated with haplotype DR4 (DRB1*04). Objectives: To determine the frequency of CD among celiac patients' relatives and, as well, DQ2 genes and HLA-DRB1*04 among celiac patients and relatives. Methods: Serologic tests were performed in 207 first-degree relatives of 90 celiac patients in order to determine the presence of IgA anti-transglutaminase (IgA-tTG) and IgA anti-transglutaminase (IgA-EMA). Relatives with positive results underwent intestinal biopsy. It was determined the frequency of HLA-DQA1*0501, DQB1*0201 and DRB1*04 by polymerase chain reaction (PCR - Polymerase Chain Reaction) both in celiac patients and their relatives. Results: Fourteen (6.7%) new cases of CD were identified among 207 relatives investigated and all of them had predisposing alleles HLA-DQ2 (DQA1*0501 and DQB1*0201) and/or DRB1*04/DQ8, either alone or in combination. Among patients with celiac disease, HLA-DQ2 was present either alone or in combination with DRB1*04 in 86.6% of the studied cases. The remaining patientes had, at least, one of the alleles studied. Only one of them did not present any of the predisposing alleles. Within the group of celiac patients' relatives, at least one risk allele was found in 94.6%, and HLA-DQ2 was found alone or in combination with the allele DRB1*04 in 57.4%. Eleven (5.3%) relatives have not shown any predisposing alleles to DC. Conclusion: Frequencies found are similar to those described in studies already carried out among relatives of celiac patients. The determination of susceptibility genes for CD among relatives of celiac patients is useful for excluding individuals to be accompanied by serological tests, and where exist doubts about the diagnosis.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Saúde Animal, 2014. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2015-06-02T16:29:05Z No. of bitstreams: 1 2014_SileneManriqueRocha_Parcial.pdf: 581235 bytes, checksum: 06c91e2abfd9133d8817a8d59afad13c (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2015-06-22T21:03:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_SileneManriqueRocha_Parcial.pdf: 581235 bytes, checksum: 06c91e2abfd9133d8817a8d59afad13c (MD5) / Made available in DSpace on 2015-06-22T21:03:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_SileneManriqueRocha_Parcial.pdf: 581235 bytes, checksum: 06c91e2abfd9133d8817a8d59afad13c (MD5) / A raiva é uma das doenças transmissíveis mais importantes no mundo, devido ao elevado impacto em saúde pública e a maior taxa de mortalidade de todos agentes patógenos virais humanos. Estudos apontam a presença do Lyssavirus em reservatórios do ciclo silvestre evidenciando a participação de canídeos silvestres, saguis, morcegos hematófagos e não hematófagos entre os potenciais transmissores da doença para animais domésticos e humanos. Assim, a reintrodução da raiva no ambiente urbano a partir do ciclo silvestre é uma preocupação. Este estudo descreve o perfil de ocorrência de raiva no Brasil, de 2002 a 2012, com ênfase no ciclo de transmissão silvestre da doença. Foi realizado um estudo descritivo utilizando registros de tempo, pessoa e lugar dos casos confirmados em humanos e animais, como também de atendimentos antirrábicos registrados no banco de dados Sinan. No período, foram notificados 82 casos de raiva em humanos, transmitidos por animais silvestres, predominantemente nas regiões Norte e Nordeste em áreas rurais, com maior freqüência no sexo masculino. Observou-se que 72% dos casos humanos não receberam procedimentos de profilaxia pós-exposição (PEP). Dentre os mamíferos silvestres transmissores da doença, houve destaque para o morcego hematófago. Os 460 mamíferos silvestres terrestres confirmados com a doença foram notificados no Nordeste. No período houve registro de 1.703 morcegos infectados com vírus rábico e a região Sudeste se destacou pela frequência de registros de morcegos não hematófagos. Foi observado que as regiões Centro-Oeste e Norte apresentaram menor proporção de registros de raiva em mamíferos silvestres terrestres. O número elevado de casos de raiva em bovinos evidenciou, entretanto, a importância do morcego hematófago, como mantenedor do vírus rábico no ciclo rural. Os resultados apresentados são úteis para planejamento da vigilância da raiva no País. ____________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Rabies is one of the most important communicable diseases in the world, due to high impact on public health and mortality approaches 100%. Studies indicate the presence of Lyssavirus in reservoirs showing the sylvatic cycle involving wild canids, marmosets, vampire bats and nonhematophagous as potential transmitters of disease to animals and humans. Thus, the reintroduction of rabies in the urban environment from the wildlife is a concern. This study describes the profile of the occurrence of rabies in Brazil, in the period 2002-2012, with emphasis on the wildlife transmission cycle of the disease. A descriptive study using the database Sinan data records with time approach, person and place of confirmed cases in humans and animals, as well antirrábico care was conducted. 84 cases of rabies in humans have been reported, predominantly in the North and Northeast regions, in rural areas, more frequently in males and 80 % of these did not receive prophylaxis. Among the wild species, the vampire bat is the largest transmitter of the disease to humans, the same was observed in antirrábicos care in the North. Is 460 terrestrial wild mammals confirmed with the disease were reported in northeast. 1703 bats, especially the vampire bats with no greater proportion of notifications in the Southeast were recorded. The North and Midwest regions showed no reported cases of rabies in wild mammals. The number of cattle was significant, showing that there was presence of vampire bat rabies virus that keeps rural disease cycle. Thus the results may be useful for surveillance of rabies in the country.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Química, 2007. / Submitted by Fabrícia da Silva Costa Feitosa (fabriciascf@gmail.com) on 2010-01-11T22:54:49Z No. of bitstreams: 1 2007_TarcisiodaSilvaVieira.pdf: 1121655 bytes, checksum: 43232c539f7eb94e0a0f261f609e18c4 (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2010-01-11T23:34:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_TarcisiodaSilvaVieira.pdf: 1121655 bytes, checksum: 43232c539f7eb94e0a0f261f609e18c4 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-01-11T23:34:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_TarcisiodaSilvaVieira.pdf: 1121655 bytes, checksum: 43232c539f7eb94e0a0f261f609e18c4 (MD5) Previous issue date: 2007-08-14 / Em virtude da demanda por novos agentes terapêuticos para o tratamento da Doença de Alzheimer (DA) bem como do interesse em desenvolvimento de pesquisas empregando o óleo da casca da castanha de caju (LCC, Anacardium occidentale) como matéria-prima para preparação de novas entidades químicas (NECs) bioativas, o presente estudo tem como foco principal o desenvolvimento de novos candidatos a inibidores da acetilcolinesterase (AchEI). O planejamento racional para os candidatos a AchEI envolve a hibridação molecular entre a subunidades farmacofóricas do DonepezilÒ e tacrina, incluindo o grupo espaçador. No curso do nosso programa de investigação as características estruturais dos componentes do LCC e sua abundância tem nos incentivado a buscar estratégias de conversão deste material em novos candidatos AchEI. A rota sintética sugere uma seqüência de procedimentos clássicos partindo dos constituintes majoritários do LCC, ácidos anacárdicos e cardóis. Diversos procedimentos foram realizados com o ácido anacárdico saturado. Infelizmente, todas as tentativas de uso dessa matériaprima falharam na primeira etapa da rota sintética. Por outro lado, partindo dos cardóis várias transformações químicas e.g. proteção dos grupos fenólicos, nitração, bromação via radicais livres, epoxidação e redução do grupo nitro seguida de ciclização foram tentadas. O melhor resultado na reação de nitração (80%) foi possível pelo uso da combinação AcOH-HNO3. Neste caso, foi obtida uma mistura de mono-nitrometilcardóis (1:1). Bromação radicalar no nitro composto esperado, seguido desalogenação, sob condições brandas, forneceu a olefina em bom rendimento. Conversão deste último no epóxido foi conseguida em rendimento satisfatório. No presente momento, várias tentativas estão em andamento visando à obtenção do sistema heterocíclico de cinco membros via redução do grupo nitro e ciclização intramolecular, em uma única etapa. Os resultados preliminares são promissores e até então sugerem que a otimização da seqüência sintética e modificações estruturais apropriadas na cadeia lateral podem fornecer potenciais candidatos AchEI. Os intermediários iniciais e avançados envolvidos nesta rota sintética têm sido caracterizados por IV, e RMN de 1H e 13C. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Given the demand for new therapeutic agents to Alzheimer’s disease (DA) as well as our ongoing research program concerning to the employment of cashew (Anacardium occidentale) nut-shell liquid (CNSL) as raw material for preparation of bioactive new chemical entities (NCEs), the current study focuses on the development of novel acetilcolinesterase inhibitor (AChEI) candidates. The rational approache for proposal AChEI comprises the molecular hibridization between pharmacoforic subunits of donepezil and tacrine, including the spacer group. In the course of ongoing investigations, the structural features of constitutes of LCC and its abundance has prompted us to search for a strategy to convert this material into new AchEI drug candidates. The synthetic pathway suggested a sequence of classical procedures starting from the major constitutes of CNSL, anacardic acids and cardols. Several attempts were carried with saturated anacardic acid, in order to accomplish the synthetic designed pathway. Unfortunately, all attempts using this starting material failed on the first step of synthetic pathway. On the order hand, starting from cardols, several chemical transformations e.g., protection of phenolic groups, nitration, free radical bromination, epoxidation, reduction of nitro groups, and cyclization were attempted. The best outcome on nitration (80%) was possible with saturated dimethycardol by using of combination AcOH-HNO3. In this case, a mixture of mono-nitrodimethylcardols (1:1) was obtained. Free radical bromination on the expected nitrocompound, followed by dehalogenation under mild basic condition gave the olefin in good yield. Conversion of the latter into epoxide was accomplished in moderate yield. At the present moment, several attempts are in progress in order to obtain the five-membered system by one pot reductive (nitro group reduction) intramolecular cyclization. The preliminary results are promising and to date suggest that optimization of this synthetic pathway and appropriate structural modification on side chain may afford potential AChEI candidates. Initial and advanced intermediates involved in this synthetic route have been characterized by FT-IR, and 1H-, 13C NMR.

Resumo: Mieloperoxidase (MPO) é uma enzima derivada de leucócitos que cataliza a formação de numerosas espécies reativas oxidantes. Além de integrante da resposta imune inata, evidências têm comprovado a contribuição destes oxidantes para o dano tecidual durante inflamação. A MPO participa de atividades biológicas pro-aterogências relacionadas à evolução da doença cardiovascular; incluindo iniciação, propagação e as fases de complicação aguda do processo aterosclerótico. Desta forma, MPO e sua cascata inflamatória representam um alvo atrativo para investigação prognóstica e terapêutica na doença aterosclerótica cardiovascular. Nesta revisão, apresentamos o estado da arte no entendimento das ações biológicas às evidências clínicas da relação entre MPO e doença arterial coronariana.

A diferenciação entre espécies e subespécies de pectobactérias e outras bactérias fitopatogênicas é feita, basicamente, por testes bioquímicos e fisiológicos. Através de arranjos, macro e micro, de sondas de DNA, uma matriz, semelhante á gerada pelos resultados dos testes bioquímicos e fisiológicos, poderia ser construída e utilizada na identificação das estirpes. Para isto, há a necessidade da seleção de sondas de características a nível de gênero, espécie e subespécie. Como as sondas são obtidas por PCR, o objetivo desta pesquisa foi selecionar oligonucleotídeos iniciadores baseados em características fenotípicas e genotípicas. A maioria dos oligonucleotídeos iniciadores selecionados gerou produto, diferindo o padrão de amplificação entre os oligonucleotídeos iniciadores e entre as espécies ou subespécies de pectobactérias. Alguns não produziram fragmentos e outros geraram muitos produtos inespecíficos. Os oligonucleotídeos iniciadores 149LF/L1r amplificaram o DNA de todas as Pectobacterium spp., enquanto Y1/Y2 amplificaram o DNA apenas da espécie P. carotovorum. ADE1/ADE2 gerou produto apenas com a espécie P. chrysanthemi. Y45/Y46 e ECA1F/ECA1R são específicos para a subespécie P. carotovorum subsp. atrosepticum. Outros oligonucleotídeos iniciadores amplificam o DNA de alguns indivíduos dentro da espécie ou subespécie, como RdgF/RdgR e PnlF/PnlR com P. carotovorum, Br1F/L1R e HrpNF/HrpNR com P. caratovorum subsp. brasiliensis e CytR-RdF/CytR-BR com P. carotovorum subsp. atrosepticum. A análise do coeficiente de similaridade da matriz gerada mostrou uma alta similaridade entre as estirpes de cada subespécie, com exceção de P. carotovorum subsp. carotovorum que mostrou uma alta variabilidade. Estes resultados indicam que esta estratégia gera uma matriz que pode ser utilizada no cálculo do coeficiente de similaridade e auxiliar na identificação de estirpes de pectobactérias. / The differences among species and subspecies of pectobacteria and other phytopathogenic bacteria are identified mainly by biochemical and physiological methods. Through arrays (macro and micro) of DNA probes, a matrix, similar to one generated by the results of biochemical and physiological tests, could be built and used to identify strains. To accomplish this, it is necessary to choose probes associated to characteristics at genus, species and subspecies levels. As probes are obtained by PCR, the objective of this research was to select primers based on phenotypic and genotypic traits. Most selected primers amplified the bacterial DNA, giving a distinct pattern to species and subspecies. However, some primers produced no bands or non-specific ones. Primers 149LF/L1r amplified DNA from all Pectobacterium spp., while ADE1/ADE2 generated band only with the DNA of P. chrysanthemi. Y45/Y46 and ECA1F/ECA1R are specific to P. carotovorum subsp. atrosepticum. Other primers amplified DNA of some strains inside of a specific species or subspecies: RdgF/RdgR and PnlF/PnlR to P. carotovorum, Br1F/L1R and HrpNF/HrpNR to P. carotovorum subsp. brasiliensis, and CytR-RdF/CytR-BR to P. carotovorum subsp. atrosepticum. The analysis of the similarity coefficient of the matrix revealed a high level of similarity among the strains of each subspecies, with the except to P. carotovorum subsp. carotovorum. These results indicate that this strategy can be used to create a matrix for the calculation of a similarity coefficient which could be used to identify all major strains of pectobacteria.