Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-04-08T18:49:28Z No. of bitstreams: 1 Leandro Cattelan Souza.pdf: 1347752 bytes, checksum: 37af779076bce3e7cf38f50d1bf1dce6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-08T18:49:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leandro Cattelan Souza.pdf: 1347752 bytes, checksum: 37af779076bce3e7cf38f50d1bf1dce6 (MD5) Previous issue date: 2013-01-17 / A doença de Alzheimer (DA) é uma desordem crônico-degenerativa, caracterizada clinicamente por uma perda gradual e progressiva da memória. Há um substancial corpo de evidências demonstrando o papel central do peptídeo beta-amilóide (Aβ) na fisiopatologia da DA. A administração intracerebral desde peptídeo em roedores tem mostrado ser um modelo bastante útil para o estudo desta doença e intervenções neuroprotetoras. Portanto, o objetivo do presente trabalho foi investigar o efeito de um treinamento de natação (ST) sobre o comportamento cognitivo e marcadores de estresse oxidativo e neuroinflamação em um modelo de doença de Alzheimer induzido pelo peptídeo Aβ1-40 em camundongos Swiss Albinos. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em 4 grupos: (1) sedentário/veículo; (2) sedentário/Aβ1-40; (3) exercício/veículo; (4) exercício/Aβ1-40. Os grupos Aβ receberam infusão intracerebroventricular (i.c.v.) do peptídeo Aβ1-40 (3μl/sítio; 400pmol/animal) e os grupos veículo infusão i.c.v. de veículo PBS (phosphate-buffered-saline; 3μl/sítio). Os grupos exercício foram submetidos a um ST com aumento progressivo de intensidade e duração por 8 semanas (5x/semana), e os grupos sedentários mantidos em inatividade física. Após 24 horas da última sessão de exercício, os camundongos receberam Aβ1-40 ou PBS (rota i.c.v.). Sete dias após as infusões i.c.v., os camundongos foram submetidos a testes comportamentais e, finalmente, à eutanásia. O hipocampo (HC) e o córtex pré-frontal (PFC) foram removidos para os ensaios bioquímicos. Nossos resultados demonstraram que o ST foi efetivo em atenuar as seguintes alterações causadas pelo peptídeo Aβ1-40: (1) prejuízos nas memórias de curto e longo prazo no teste de reconhecimento de objetos, sem alterar a atividade locomotora; (2) aumento dos níveis de espécies reativas (RS) e diminuição dos níveis de tióis não-protéicos (NPSH) no HC e PFC; (3) inibição da atividade da superóxido dismutase (SOD) e aumento da atividade da glutationa peroxidase (GPx), glutationa redutase (GR) e glutationa-S-transferase (GST) no HC e PFC; (4) Aumento dos níveis de interleucina-1 beta (IL-1β) e fator de necrose tumor-alfa (TNF-α) e diminuição dos níveis de interleucina-10 (IL-10) no HC e PFC. Em conclusão, nós sugerimos que o exercício regular pode prevenir o declínio cognitivo, o estresse oxidativo e a neuroinflamação induzida pelo peptídeo Aβ1-40 em camundongos, suportando a hipótese de que o exercício pode ser utilizado como uma medida não-farmacológica para reduzir os sintomas da DA. / Alzheimer’s disease (AD) is a chronic degenerative disorder, clinically characterized by gradual and progressive decline in memory. There is a substantial body of evidence demonstrating the central role of beta-amyloid (Aβ) peptide in the pathophysiology of AD. The administration of this peptide into the brain of rodents has been shown to be a useful model for the study of this disease and neuroprotective interventions. Thus, the aim of this study was to investigate the effect of swimming training (ST) on cognitive behavioral and markers of oxidative stress and neuroinflammation in a mouse model of DA induced by Aβ1-40 peptide. The animals were randomly assigned into four groups: (1) sedentary/vehicle; (2) sedentary/Aβ1-40; (3) exercise/vehicle; and (4) exercise/Aβ1-40. Aβ1-40 groups received intracerebroventricular (i.c.v.) injection of Aβ1-40 (3μl/site; 400pmol/mouse) and vehicle groups received i.c.v. injection of PBS (phosphate-buffered-saline; 3μl/site). Exercise groups were submitted to swimming training (ST) with progressive increase in time and duration for 8 weeks (5x/week), and sedentary groups were kept in physical inactivity. After 24h of last bout of ST, mice received Aβ1-40 or vehicle (by i.c.v. route). Seven days after i.c.v. injections, mice were submitted to cognitive behavioural tests and, finally, submitted to euthanasia. The hippocampus (HC) and prefrontal cortex (PFC) were removed for biochemical assays. Our results demonstrated that ST was effective in attenuating the following impairments caused by Aβ1-40 peptide: (1) impairment on short-term and long-term memories in object recognition test, without altering the locomotor activity; (2) increased reactive species (RS) levels and decreased non-protein thiols (NPSH) levels in HC and PFC; (3) inhibition of the superoxide dismutase (SOD) activity and increase in glutathione peroxidase (GPx), glutathione reductase(GR) and glutathione S-transferase (GST) activities in HC and PFC; and (4) increased tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) and interleukin-1 beta (IL-1β) levels and reduced and interleukin-10 (IL-10) levels in HC and PFC. In conclusion, we suggest that regular exercise may prevent cognitive decline, oxidative stress and neuroinflammation induced by Aβ1-40 peptide in mice, supporting the hypothesis that exercise can be used as a non-pharmacological tool to reduce the symptoms of DA.

INTRODUÇÃO: O maior desafio no diagnóstico de perdas cognitivas na nossa população é sua heterogeneidade educacional, com um espectro que vai do analfabetismo, analfabetismo funcional até os escolarizados com diferentes graus de alfabetização mesmo com o mesmo grau de escolarização. OBJETIVOS: Comparar os resultados obtidos no S-TOFHLA entre indivíduos controles, pacientes com comprometimento cognitivo leve (CCL) e pacientes com doença de Alzheimer (DA) e correlacioná-los aos anos de escolarização formal, aos testes de Avaliação Neuropsicológica e aos escores alcançados no teste Matrizes Progressivas Coloridas de Raven e nos subtestes Vocabulário e Cubos do WAIS-III como medida de nível intelectual estimado. MÉTODOS: A amostra foi composta por 148 sujeitos, sendo 61 controles saudáveis, 42 pacientes com CCL e 45 com DA. Todos os participantes foram submetidos a avaliação neuropsicológica, S-TOFHLA e avaliação funcional. RESULTADOS: Na avaliação observou-se que nos testes: Cubos, Raven e QI Estimado foram encontradas diferenças estatísticas entre os grupos controle e CCL; controle e DA, mas não entre os grupos CCL e DA. No S-TOFHLA, observou-se diferença estatisticamente significante no item de Compreensão e Leitura e no escore total nos três grupos (controle, CCL e DA). No item Numérico, a diferença estatística ocorreu somente entre os grupos controle e DA. O S-TOFHLA correlacionou-se fortemente o QI estimado. CONCLUSÕES: O S-TOFHLA sofre influência da progressão da doença apresentando diferença entre os grupos estudados. As alterações em inteligência fluida ocorrem desde início da doença. O subteste Vocabulário permaneceu com resultados semelhantes durante os graus de comprometimento cognitivo, mostrando que memória semântica e inteligência cristalizada são preservadas. / INTRODUCTION: The greatest challenge in the diagnosis of cognitive loss in our population is its educational heterogeneity, with a spectrum ranging from illiteracy, functional illiteracy and various degrees of literacy even with the same level of schooling. OBJECTIVES: To compare the results obtained in the S-TOFHLA among control subjects, patients with mild cognitive impairment (MCI) and patients with Alzheimer\'s disease (AD) and correlate those scores with years of formal schooling, Neuropsychological Assessment, and the scores achieved on Raven\'s Colored Progressive Matrices and Vocabulary and Block Design subtests of the WAIS-III as a measure of estimated intellectual level. METHODS: The sample consisted of 148 subjects, of which 61 were healthy controls, 42 had MCI and 45 had AD. All participants underwent neuropsychological assessment, S-TOFHLA and functional evaluation. RESULTS: In the neuropsychological evaluation it was observed that in the tests Block Design, Raven and IQ Estimate statistical differences were found between MCI and control groups, control and AD, but not between the MCI and AD groups. In the S-TOFHLA, there was a statistically significant difference in reading comprehension and in the total score in all three groups (control, MCI and AD). In the Numeric item, the only statistical difference occurred between control and AD. The S-TOFHLA strongly correlated with the estimated IQ. CONCLUSIONS: The S-TOFHLA is influenced by disease progression showing significant difference between groups. The changes in fluid intelligence occur since the onset of disease. The Vocabulary subtest remained with similar results in different degrees of cognitive impairment, showing that semantic memory and crystallized intelligence are preserved.

O comprometimento do estado nutricional (EN) é um achado frequente em idosos que apresentam demência devido à Doença de Alzheimer (DA), e pode se agravar com a progressão da doença. O objetivo foi identificar as principais alterações do estado nutricional nas fases iniciais da demência devido à DA. Participaram do estudo 38 idosos, alocados em dois grupos: Controle, composto por 19 idosos saudáveis, e grupo Doença de Alzheimer, composto por 19 idosos que apresentavam a demência em estágio inicial (CDR-1), sem comorbidades. Foi realizada avaliação do estado nutricional utilizando a Mini-Avaliação Nutricional (MAN), além do exame de bioimpedância para análise da composição corporal dos idosos. A média de idade do grupo controle foi de 68,6 ± 6,2 anos, e do grupo DA foi de 75,4 ± 4,2 anos (p<0,01). O IMC médio do grupo controle foi 25,2 ± 3,2, enquanto do grupo DA foi 22,9 ± 3,9(p=0,06). Não foi observada diferença significativa em relação à composição corporal entre os grupos. De acordo com a MAN, todos os idosos do grupo controle apresentavam estado nutricional normal. No grupo DA, 11 (57,9%) apresentavam estado nutricional normal, 7 (36,8%) estavam em risco nutricional e 1 (5,3%) estava desnutrido. Em relação ao escore da MAN, o grupo controle apresentou média de 27,7 ± 1,7 pontos, enquanto o DA apresentou 23,2 ± 4,4 pontos (p<0,01). Dados da literatura corroboram com os resultados encontrados, e indicam que a demência devido a Doença de Alzheimer em fase inicial já pode estar associada ao comprometimento do estado nutricional. / The impairment of the nutritional status (NS) is a frequent finding in elder patients with dementia due to Alzheimer\'s disease (AD), and may worsen with the progression of said dementia. The purpose was to identify the main changes in the nutritional status in the early stages of the dementia due to AD. Thirty-eight elderly patients were enrolled in the study; being assigned to two groups: Control, composed of 19 healthy elderly patients, and Alzheimer\'s disease group, composed of 19 elderly patients who experienced early stages of dementia (CDR-1), with no comorbidities. The evaluation of the nutritional status was performed using the Mini Nutritional Assessment (MNA), in addition to the bioimpedance analysis for body composition evaluation in the elderly. The average age of the control group was 68.6 ± 6.2 years, and the AD group was 75.4 ± 4.2 years (p<0,01). The average BMI of the control group was 25.2 ± 3.2, while the AD group was 22.9 ± 3.9 (p=0,06). There was no significant difference observed in relation to the body composition between groups. According to the MNA, all patients in the control group presented with normal nutritional status. In the AD group, 11 (57.9%) presented with normal nutritional status, 7 (36.8%) were at nutritional risk, and one (5.3%) experienced malnutrition, in relation to the MNA score, whilst AD reported 23.2± 4.4 points (p<0.01). Literature data supports the results found, and indicate that dementia, due to early stages of Alzheimer\'s disease, may already be associated with the impairment of the nutritional status.

A doença de Alzheimer, doença neurodegenerativa, em que a dificuldade de encontrar palavras é um dos déficits mais presentes, mesmo em estágios iniciais já ocorrem alterações focalmente no hipocampo e giros parahipocampais. Com o avanço da doença, a dificuldade de encontrar palavras e o uso de itens lexicais efetivos ficam muitas vezes mais comprometidos sugerindo distribuição difusa da doença no encéfalo. A dificuldade em encontrar palavras ou anomia se deve consensualmente à deterioração do processamento semântico e ao déficit da memória operacional. Ainda, mesmo nesses estágios iniciais da doença, muitos pacientes relatam dificuldades em encontrar os itens lexicais adequados para seguir uma conversação, o que os constrange causando isolamento e falta de interações comunicativas verbais. Esse relato indica que eles têm consciência dessa perda cognitiva. Nas conversações ou interações sociais entre pacientes e cuidadores, muitas vezes a dificuldade de encontrar os itens lexicais não é claramente percebida. Entretanto, com o progresso da doença essa incompreensão se acentua, gerando situações estressantes e de sobrecarga, especialmente para o cuidador. A presente pesquisa objetivou analisar os itens lexicais no discurso oral dos pacientes com doença de Alzheimer, verificar aquelas palavras mais preservadas, que visem à elaboração de estratégias linguísticas adequadas e que permitam o desenvolvimento de mecanismos discursivos, a fim de identificar estratégias que possam melhorar a interação entre cuidadores e pacientes. Neste estudo avaliaram-se os itens lexicais verbos e substantivos, hápax e as oito outras categorias gramaticais da língua portuguesa de 23 pacientes com doença de Alzheimer e 23 idosos controles sadios. Os itens selecionados foram extraídos de conversações livres por no máximo 20 minutos com os temas: cidade, família, educação, alimentação, saúde e religião. Foi utilizado o programa Stablex que efetua o tratamento computacional de itens lexicais e confecções de léxico para identificar os itens lexicais mais frequentes e com maior peso ou valor. Os resultados indicam que os pacientes têm maior dificuldade em nomear substantivos, especialmente seres vivos, p<0,05. Ainda, esses pacientes apresentam maior preservação de itens lexicais concretos em relação aos itens lexicais abstratos. Além disso, foi observada maior preservação de verbos do que de substantivos, hápax fica preservado nos pacientes com doença de Alzheimer, p<0.001. Os adjetivos, p<0,001, interjeições, p<0,001,artigos e preposições p<0,001, também são significantes na doença. Conclui-se, assim, que embora os pacientes tenham perda lexical progressiva, suas habilidades comunicativas, semântico-pragmáticas não estão muito alteradas e que os pacientes ao serem estimulados com frases curtas, com aquelas palavras mais preservadas no seu léxico ainda podem se comunicar e interagir oralmente. Portanto, as análises de itens lexicais nos discursos orais dos pacientes com doença de Alzheimer não só contribuirão para o entendimento dos déficits de linguagem, mas também oferecerão formas de melhorar a comunicação entre pacientes e cuidadores / Alzheimer\'s disease, neurodegenerative disease, wherein the word-finding difficulty is one of the most common deficits, even at early stages alterations occur focally in the hippocampus and parahippocampal gyri. With disease progression, the word-finding difficulty and effective use of lexical items are often more affected suggesting diffuse distribution of the disease in the brain. The word-finding difficulty or anomie is consensually to the deterioration of semantic processing or the occurrence of impaired connection between the lexical and semantic level as well as the working memory impairment. Yet, even in these early stages of the disease, many patients report difficulties in finding suitable lexical items to follow a conversation, therefore the patients get constrained, causing isolation and lack of verbal communicative interactions. This indicates that they are aware of this cognitive loss. In conversations or social interactions between patients and caregivers, often the difficulty of finding lexical items is not clearly perceived. These caregivers often help the patient to complete the words and sentences inferring meanings thereby masking the stage of disease. However, with the progress of the disease misunderstanding increases, causing overload and stressful situations, especially for the caregiver. The current study aimed at analyzing the lexical items in oral discourse of patients with Alzheimer\'s disease, to verify the most retained words in order to develop appropriate linguistic strategies enabling the development of discursive mechanisms to identify strategies to improve the interaction between caregivers and patients. This study evaluated the lexical items, verbs, nouns hápax and the other eight grammatical categories of Portuguese language of 23 patients with Alzheimer\'s disease and 23 healthy elderly controls. The selected items were drawn from free conversations of at least 20 minutes with the themes: city, family, education, food, health and religion. We used Stablex program that performs the computational treatment of lexical items and creates lexicons to identify more frequently lexical items and with their weight or value. The results indicate patients have greater difficulty in naming living things, p<0.05. Also, these patients have higher retention of concrete lexical items in relation to abstract lexical items. Moreover, hapax is retained in Alzheimers disease, p<0.001. It is attributed to the greater number of nouns in the languages compared to verbs or because, perhaps, the frontal areas of the brain where the verbs are represented are affected later. Also, it was observed that the lexical item hapax is significant in patients with Alzheimer\'s disease. Adjectives, p<0,001, interjections, p<0,001, articles and prepositions, p<0,001, are also significant during the disease, We conclude, therefore, that although patients have progressive lexical loss, their communication and semantic-pragmatic skills are not much changed, and when patients are stimulated with short sentences with words that are more retained in their lexicons they can still communicate and interact verbally. Therefore, the analysis of lexical items in oral discourse of patients with Alzheimers disease not only contributes to the understanding of language deficits, but also it will offer ways to improve communication between patients and caregivers

Tese de Mestrado em Nutrição Clínica apresentada à Faculdade de Ciências de Nutrição e Alimentação da Universidade do Porto / Abstract: Background The aetiology of weight loss in Alzheimer Disease (AD), has not yet been definitively established. Although appears multifactorial, a decline in food intake may be a contributor. Nutritional supplements are often prescribed, especially to prevention for weight loss, but it has not been demonstrated that a short-term nutritional supplementation has impact in AD-patients nutritional status. Objectives The aim of this study was (1) to evaluate the effect of short-term administration of a high protein, energy-dense Oral liquid Supplement (OS) in patients with mild AD who were malnourished, on nutritional status and in body composition, cognitive function and functional ability; (2) to assess the long-term effect of this intervention after discontinuation of the OS. Methods and Measurements A 21 days prospective randomized nonblinded controlled trial was conducted in a Geriatric Unit of a Psychiatric Hospital. From an initial group of Thirty five patients, twenty were randomly assigned to the Treatment Group (TG) n=20 and Fifteen to the Control Group (CG) n=15. During the study period, the TG received during 21 consecutive days, once a day a 200 mL high protein energy-dense OS, which provided 400kcal from a mixture of protein (18% of energy), fat (17.4% of energy), and carbohydrate (42.8% of energy) plus dietetic advice. Patients in the CG received the same dietetic advice as the TG, but no OS. The nutritional status, body composition, functional status and cognitive function were determined at baseline, 21 days (after intervention) and at 90 days of follow-up. The Mini Nutritional Assessment (MNA), anthropometric measurements, bioelectrical impedance analysis and serum biomarkers (albumin, total-protein, total-cholesterol, vitamin-B12 and folic acid) levels were obtained. Cognitive function was evaluated using the Mini Mental Status Examination (MMSE) tool and the Clock-Drawing Test (CDT). (...)

A linhagem Wistar Audiogenic Rat (WAR), um modelo genético de epilepsia, apresenta diversas comorbidades. Dados prévios demonstraram níveis cerebrais elevados de proteína tau fosforilada (pTau), uma das principais características anatomopatológicas da doença de Alzheimer (DA). Estudos recentes sugerem que a DA seja um terceiro tipo de diabetes. O objetivo deste estudo foi validar a linhagem WAR como um possível modelo para o estudo da DA relacionada com alterações na regulação da via de sinalização da insulina. Para isso, foram selecionados 63 animais machos adultos e envelhecidos (n=28 Wistars, 14 Wistars Hannover e 21 WARs). Os animais foram submetidos ao labirinto aquático de Morris (LAM). Após o LAM, foram eutanasiados e tiveram seus hipocampos dissecados. Avaliou-se a expressão de betaamilóide (A?), tau, pTau (S396), receptor de insulina (IR), receptor de insulina -1 fosforilado em serina 312 (pIRS-1 S312) e glicogênio sintase quinase 3 alfa e beta (pGSK-3?/? S21/9) fosforiladas pelo método de Western blotting nos hipocampos ventral (HV) e dorsal (HD) e/ou confirmados por imunoistoquímica. Os animais da linhagem WAR adultos e envelhecidos apresentaram maior latência para encontrar a plataforma de fuga durante o período de treinamento e maioria dos retestes no LAM. Os animais WAR adultos apresentaram diminuição da expressão de A? e IR no HV, aumento da expressão de pGSK-3?/? (S21/9) no HD e aumento do número de células positivas para pIRS-1 (S312) no hipocampo. Os animais envelhecidos apresentaram aumento da expressão de pTau (S396) nos HV e HD, diminuição de A? e IR no HV e aumento da expressão de pGSK-3?/? (S21/9) nos HV e HD. Apesar de os animais WAR terem sido selecionados geneticamente para estudar epilepsia, nossos achados sugerem a coexistência de alterações comportamentais e moleculares características de DA e resistência central à insulina, podendo se somar ao fenótipo inicialmente selecionado. Portanto, outros estudos moleculares e histológicos são necessários para melhor compreensão dos dados encontrados e para possível validação da linhagem WAR como um modelo para estudar a relação entre DA e resistência central à insulina. / The Wistar Audiogenic Rat (WAR), a genetic model of epilepsy, presents many comorbidities. Previous data suggested elevated brain levels of phosphorylated tau (pTau), one of the the main hallmarks of Alzheimer\'s Disease (AD). Recent studies have hypothesized AD as the third type of diabetes. Therefore, the aim of this study was to validate the WAR strain as a model to study AD and correlate with alterations in the insulin signaling pathway regulation. To this end, we selected 63 male adult and aged animals (n=28 Wistars, 14 Wistars Hannover and 21 WARs). The animals were subjected to the Morris Water Maze (MWM) test. After the MWM, the rats were euthanized and their ventral (VH) and dorsal (DH) hippocampi were dissected for Western blot analysis in order to measure the expression levels of A?, tau, pTau (S396), insulin receptor (IR), alpha and beta phosphorylated glycogen synthase kinase 3 (pGSK-3?/? Ser21/9), and phospho-insulin receptor substrate-1 (pIRS-1 S312) in the ventral (VH) and dorsal hippocampus (DH) by means of the Western blotting method. The results were confirmed by immunohistochemical analysis. Both adult and aged WARs showed longer latency to find the escape platform during the learning period and most retests of the MWM. The adult WARs presented lower A? and IR expression in the VH, higher pGSK-3?/? (S21/9) expression in the DH, and higher levels of positive cells for pIRS-1 (S312) in the hippocampus. The aged WARs presented higher pTau (S396) expression in both VH and DH, lower A? and IR expression in the VH, higher pGSK-3?/? (S21/9) expression in both VH and DH. Although the WAR animals were primarily selected to study epilepsy, our findings in this study suggest the coexistence of an AD-like phenotype and central insulin resistance in addition to the initially selected epilepsy phenotype. Therefore, other molecular and histological studies are needed to better understand our data and to validate the WAR strain as a model to study the relationship between AD and central insulin resistance.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000417575-Texto+Completo-0.pdf: 5448343 bytes, checksum: c2400c3e66de9c19b7b14a8dd168d231 (MD5) Previous issue date: 2009 / The present study was aimed to investigate neuropathological changes in adult and old rats, and in APP/PS1 transgenic mice subjected to supplementary iron administration in a critical postnatal period in order to study the contribution of environmental and genetic risk factors to the pathogenesis of neurodegenerative disorders. No significant differences in abundance of proteins β-amyloid, phosphorylated tau and α-synuclein analysed by IHC in brain were seen, when treated and non-treated rats were compared. Increased astrocytosis, revealed by densitometry of immnoreactive astrocytes marcked with GFAP, was found in old (24 months) treated rats in substantia nigra and striatum and in the hippocampus of adult (3 months) treated rats when compared to age-matching controls. No modifications in β-amyloid burden were seen in treated and non-treated APP/PS1 mice. No differences in microglial reactions were observed when comparing the four groups of mice: transgenic with iron (TgFe), transgenic with sorbitol (TgSb), wild type with iron (WtFe) and wild type with sorbitol (WtSb). Yet increased astrocytosis, as revealed by densitometry of immnoreactive astrocytes marcked with GFAP, and increased expression levels of GFAP, as revealed by western blotting, were found in iron-treated mice (both Tg and Wt) when compared with TgSb and WtSb. This was accompanied by significant changes in brain fatty acid composition in APP/PS1 mice that lead to a lower membrane peroxidizability index and to reduced protein oxidative damage. The present findings clearly document that excess of iron during the neonatal period impacts in the cellular and molecular composition of the adult and old brain rats and APP/PS1 trangenic mice. These observations may encourage further studies focused on the effects of dietary supplementations in children. / O presente estudo foi planejado para investigar alterações neuropatológicas em ratos adultos e velhos, e em camundongos trangênicos APP/PS1 submetidos à administração de ferro suplementar num período crítico pós-natal, com o objetivo de estudar a contribuição de fatores de risco ambientais e genéticos na patogênese de doenças neurodegenerativas. Nenhuma diferença significativa foi vista na abundância das proteínas β-amilóide, tau fosforilada e na α-sinucleína, analisados por IHC no encéfalo, quando ratos tratados com ferro e sem ferro são comparados. Aumento de astrocitose, detectada por densitometria de astrócitos imunoreativos marcados por GFAP, foi encontrado em ratos velhos (24 meses) tratados com ferro na substância negra e estriado e no hipocampo de ratos adultos (3 meses) tratados com ferro quando comparados com controles pareados por idade. Nenhuma modificação nas placas de β-amilóide foram vistas em camundongos trangênicos APP/PS1 tratados e não tratados. Nenhuma diferença na reação microglial foi observada quando comparados os 4 grupos: trangênicos com ferro (TgFe), transgênicos com sorbitol (TgSb), wild type com ferro (WtFe), wild type com sorbitol (WtSb). Ainda, aumento em astrocitose, revelado por densitometria de astrócitos reativos marcados por GFAP, e aumento de níveis de expressão de GFAP, revelados por western blotting, foram encontrados em camundongos tratados com ferro (tanto Tg como Wt) quando comparados com TgSb e WtSb. Este aumento foi acompanhado por alterações significativas na composição de ácidos graxos no cérebro de camundongos APP/PS1 que levaram à diminuição do índice de capacidade peroxidativa de membrana e redução do dano oxidativo protéico. Os presentes achados claramente documentam que o excesso de ferro durante o período neonatal impacta na composição celular e molecular de cérebros de ratos adultos e velhos e de camundongos trangênicos APP/PS1. Estas observações podem encorajar mais estudos focados nos efeitos de suplementações na dieta de crianças.

Introdução: Perda de memória é um dos sintomas mais comuns em pacientes nos estágios iniciais da doença de Alzheimer; esses déficits são um reflexo do envolvimento da formação do hipocampo. O BDNF tem sido relacionado com a plasticidade do hipocampo. Neste sentido, as combinações de biomarcadores, como, por exemplo, a volumetria do hipocampo, pode apresentar um maior valor preditivo para diferenciar doença de Alzheimer do envelhecimento normal em pacientes com comprometimento cognitivo leve. Objetivo: A presente tese de doutorado teve como objetivo avaliar os níveis séricos do BDNF e o volume do hipocampo em pacientes com demência devido à doença de Alzheimer, Comprometimento Cognitivo Leve (CCL) e idosos saudáveis. Métodos: Para realização do estudo foram selecionados 10 idosos saudáveis, 10 CCL e 13 pacientes com demência devido à doença de Alzheimer pelos critérios NIA-AA. Todos participantes foram submetidos a uma avaliação cognitiva. Para as análises do BDNF, foi utilizado método de ELISA e para as análises de volumetria do hipocampo as imagens foram obtidas por meio de equipamento de ressonância de 1.5T e os volumes obtidos por meio do programa NeuroQuant®. Resultados: Idosos saudáveis apresentaram níveis séricos mais elevados de BDNF do que os CCL e pacientes com demência. O grupo de pacientes com demência apresentou menor volume total do hipocampo do que os idosos saudáveis e os CCL. Não houve correlação significativa do BDNF sérico com volume do hipocampo. Conclusão: Considerando nossos resultados em conjunto (baixos níveis de BDNF nos grupos CCL e demência devido à DA e menor volume do hipocampo na demência devido à AD), podemos supor que a diminuição dos níveis de BDNF ocorre antes da lesão neuronal expressa pela redução do hipocampo. / Introduction: Memory impairment is the most common symptom in patients in the early stages of Alzheimer's disease; this deficit is a reflection of the involvement of the hippocampal formation. BDNF has been linked to the hippocampal plasticity. Combinations of biomarkers, such as the hippocampal volumetry may have higher predictive value for differentiating Alzheimer's disease from normal aging in patients with mild cognitive impairment. Objective: The objective of present thesis was to evaluate serum levels of BDNF and hippocampal volume in patients with Mild Cognitive Impairment (MCI) and dementia due to Alzheimer's disease, and healthy elderly participants. Method: Ten healthy elderly subjects, 10 MCI and 13 patients with dementia due to Alzheimer's Disease (NIA-AA criteria) were selected for the study. All participants were assessed cognitively. The ELISA method was used for BDNF analysis, and the analysis of hippocampal volumetric images were acquired with 1.5T magnetic resonance equipment and volumes obtained with NeuroQuant® program. Results: Healthy elderly had higher BDNF serum levels than MCI and dementia due to AD patients. The group of dementia patients had lower total hippocampal volume than MCI and healthy elderly participants. No significant correlation between serum BDNF and hippocampal volume was observed. Conclusion: Taking our results together (lower BDNF levels in MCI and dementia due to AD and smaller hippocampal volume in dementia due to AD) we can hypothesize that the decrease of BDNF may start before the establishment of neuronal injury expressed by the hippocampal reduction.

Doenças neurodegenerativas vem sendo relacionadas a alterações no metabolismo de glicose e deficiência e/ou resistência à insulina encefálica. Além desta relação, parece existir uma modulação dos hormônios tireoideanos (HT) sobre a sinalização de insulina e a função do sistema nervoso central (SNC). O objetivo desse trabalho foi analisar a relação entre o hipertireoidismo e o SNC, associados a DM. Para isso, ratos Wistar adultos foram injetados com monoidratado de aloxana ou veículo e tratados com T3 durante 30 dias, sendo avaliados em testes comportamentais e posteriormente analises proteicas de regiões do córtex e hipocampo. O tratamento crônico com T3 produziu um efeito ansiolítico e um atraso na aquisição de informações aprendidas, apesar da consolidação não ser modificada. Por outro lado, o T3 promoveu a melhora do processo neurodegenerativo e na via da sinalização da insulina no hipocampo de animais diabéticos. Esses dados sugerem, de modo geral, um efeito benéfico do HT sobre o a função encefálica de animais diabéticos. / Neurodegenerative diseases has been related to changes in glucose metabolism and deficiency and /or resistance to brain insulin. In this respect, there appears to be a modulation of thyroid hormones (TH) on insulin signaling and function of the central nervous system (CNS). The objective of this study was to analyze the relationship between hyperthyroidism and the CNS associated with DM. For this, Wistar adult rats were injected with alloxan monohydrate or treated with vehicle and T3 for 30 days and evaluated in behavioral tests and subsequent analyzes of protein in the cortex and hippocampus regions. Chronic treatment with T3 produced an anxiolytic effect and a delay in the acquisition of information, although consolidation not be modified. Furthermore, T3 allowed improvement of the neurodegenerative process and pathway of insulin signaling in the hippocampus of diabetic rats. These data suggest, in general, a beneficial effect of TH on the brain function of the diabetic animals.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-11-24. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:26:31Z : No. of bitstreams: 1 Publico-474.pdf: 1648088 bytes, checksum: ac90101ea1d6072c64d4dd6e9a18d152 (MD5) / Justificativa: O presente trabalho aborda os efeitos de novos inibidores de acetilcolinesterase (AChE) na reatividade farmacológica e neurotransmissão em ratos e camundongos. Os novos anticolinesterásicos, ITH12118 e ITH12117, têm estrutura híbrida, derivada da molécula do anticolinesterásico Tacrina e da 1,4 diidropiridina nimodipina, inibidor de canal de Ca2+ do tipo L. O objetivo da síntese foi obter fármacos candidatos para o tratamento da Doença de Alzheimer. Materiais e métodos. Os experimentos de contração foram feitos inicialmente para comparar a ação de ITH12118 e ITH12117 com Fisostigmina, Tacrina, e Nimodipina em ductos deferentes de ratos (DDR) e camundongos (DDC) em curva concentração-efeito (CCE) para acetilcolina (ACh), avaliando-se os parâmetros efeito máximo (Emax), dose eficaz 50 (DE50), afinidade aparente (pD2), relação de doses (Dose Ratio, DR) para avaliar a potencialização da resposta da ACh pelos inibidores de AChE e responsividade relativa (&#61554;) para avaliar o efeito máximo do receptor de ACh. Para estudar o papel do Ca2+ foram feitas curvas cumulativas e tempo-efeito para o íon na presença dos inibidores de AChE ou nimodipina, além da medida de Ca2+ citosólico com sonda fluorescente FURA-2AM. Realizou-se também curvas por estimulação elétrica transmural para estudar o efeito sobre a contração neurogênica. CCE para NA também foram feitas. Além disso, foi medida a atividade da enzima AChE em microplaca, na presença dos inibidores. Foram feitos testes após o tratamento in vivo com Fisostigmina, e testes de aprendizado e memória em camundongos após tratamento com Tacrina e ITH12118. Resultados. Por alteração de DR, observou-se maior potenciação das curvas de ACh pela Fisostigmina, seguido da Tacrina e ITH12118 em DDR e discreta potenciação na presença de Fisostigmina e Tacrina em DDC. Entretanto, o Emax das curvas de ACh caiu drasticamente na presença dos anticolinesterásicos em DDR e em DDC, na presença de ITH12118 e ITH12117. Os experimentos para Ca2+ evidenciaram uma inibição significativa com a Nimodipina e ITH12118 em DDR, sendo que em DDC o ITH12117 também bloqueou a contração. Em relação à contração por estímulos elétricos, observamos somente bloqueio da fase tônica por ITH12118. Os experimentos em microplaca mostraram inibição da AChE pela Fisostigmina e Tacrina em DDR, DDC e SNC (córtex) de rato e camundongo, com inibição da enzima pelos compostos ITH12118 e ITH12117 somente em maiores concentrações. Em córtex de rato e camundongo, ITH12118 e ITH12117 mostraram maior potência de inibição. Observou-se maior proporção de BuChE em DDR, e experimentos preliminares de contração induzida com ACh realizados na presença de Iso-OMPA, inibidor seletivo de BuChE, e Fisostigmina, mostraram que a diminuição do Emax é menor que na presença de Fisostigmina isoladamente. A CCE para NA foi bloqueada em DDR pela Nimodipina e ITH12118, e em DDC pela Nimodipina, ITH12118 e ITH12117. Após tratamento in vivo, CCE para ACh não foram deslocadas. A avaliação de memória e aprendizado não apresentou diferenças em relação aos controles, porém houve tendência de maior retenção de memória após Tacrina e ITH12118. Conclusões. A potenciação da ACh no eixo das doses é coerente com o mecanismo de inibição da colinesterase pelos antagonistas. Entretanto ainda merece explicação a redução observada no Emax. Conforme os experimentos de contração, os compostos ITH12118 e ITH12117 apresentaram maior potência como bloqueadores de canal de Ca2+ do que como anticolinesterásicos. Os achados em relação às diferenças entre DDR e DDC parecem ser relacionadas à maior concentração de BuChE em DDR, mas esta observação deve ser melhor investigada. / Justification: The present work considers the effects of new inhibitors of acetylcholinesterase (AChE) on the reactivity and neurotransmission in rats and mice. The new anticholinesterase compounds, ITH12118 and ITH12117, have an hybrid stucture, derived from the molecule of of the anticholinesterase Tacrine and the 1,4 dihydropyridine nimodipine, a blocker of l-type calcium channel blocker. The objective of the syntesis was to obtain drugs as candidates for the theatment of Alzheimer’s disease. Material and Methods: Contraction experiments were initialy made to compare de actions of ITH12118 and ITH12117 with that of Physostigmine, Tacrine and Nimodipine in vas deferens of rats (RVD) and mice (MVD) on concentration-response curves (CRC) for ACh, for the measurement of the folowwing parameters: maximum effect (Emax), 50% effective dose (ED50), aparent affinity (pD2), dose ratio for agonist (DR) to evaluate the potentiation by cholinesterase blockers, intrinsic activity (a) of agonists and relative responsiveness (&#61554;) to evaluate the maximum effect of ACh receptor. For the study of the role of calcium, cumulative and time-response curves for this ion were made, in the presence of cholinesterase blockers and Nimodipine, besides the measurement of cytosolic calcium by means of fluorescent FURA-2AM. In addition, curves for transmural electrical stimulation were also made for the study of neurogenic contractions. CRC for NA were also made. Furthermore, the activity of the enzyme AchE was also analysed in microplates, in the presence of blockers. Finaly, tests after treatment in vivo were made for Physostigmine and tests for learning and memory of mice, after treatment with Tacrine and ITH12118. Results: After measuments of DR, we have observer a higher potentiation of the curves of ACh by Physostigmine, followed by Tacrine and ITH12118 in RVD, and a slght potentiation by Physostigmine and Tacrine in MVD. However, the Emax of the CRC for ACh was greatly decreased in the presence of anticholinesterase blockers in RVD and and in MVD after ITH12118 and ITH12117. The experiments with Ca2+ showed a significant block by Nimodipine and ITH12118 in RVD, and by ITH12117 in MVD. In relation to the contraction by electrical transmural stimulation, just a block of tonic contraction was induced by ITH12118. The experiments in microplates showed a block of AChH by Fisotigmine and Tacrine in RVD and MVD, and in rat and mouse in Central Nervous Sistem, with a blockade by higher concentrations of ITH12118 and ITH12117. In rat and mouse cortex ITH12118 and ITH12117 showed a higher potency of blockade. A higher proportion of BuChE was shown in RVD, and in preliminary contraction experiments with Iso-OMPA, a selective blocker of BuChE, and Physostigmine, showed that a reduction of Emax is lower in the presence of Physostigmine isolatedly. The curves for NA were blocked in RVD by Nimodipine and ITH12118 and by Nimodipine, ITH12118 and ITH12117 in MVD. After treatment in vivo, the curves for ACh were not displaced. The evaluation of learning and memory did not show significant differences from controls, but a tendency for a higher retention of memory was presented after Tacrine and ITH12117. Conclusions: The potentiation of ACh in the dosis axis is within the expectations for the block of cholinesterase by the antagonists. However, the decrease of Emax needs further investigation. According to the contraction experiments, compounds ITH12118 and ITH12117 showed a higher potency as blockers of calcium channels than of cholinesterase. The changes between RVD and MVD seem to be related to the higher concentration of BuChE in RVD, but this point needs additional investigation. / TEDE