Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Departamento de Medicina Especializada, Núcleo de Medicina Tropical e Nutrição, 1983. / Submitted by Guimaraes Jacqueline (jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2015-11-19T14:09:21Z No. of bitstreams: 1 1983_MariaDasDoresMedina-Lopes.pdf: 3019387 bytes, checksum: ed2ef11b3ed2a1f1a5d8487e3b35b683 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2015-11-25T13:40:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 1983_MariaDasDoresMedina-Lopes.pdf: 3019387 bytes, checksum: ed2ef11b3ed2a1f1a5d8487e3b35b683 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-25T13:40:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1983_MariaDasDoresMedina-Lopes.pdf: 3019387 bytes, checksum: ed2ef11b3ed2a1f1a5d8487e3b35b683 (MD5) / O objetivo desta tese é estudar a transmissão materno-infantil da Doença de Chagas no Distrito Federal. O trabalho foi dividido em duas partes: A- Estudo clínico epidemiológico e B- Estudo experimental. A - O estudo clinico epidemiológico, realizado no Hospital Regional da Asa Sul, constou de: a) inquérito sorológico, b) exame de mulheres chagásicas, c) exame de crianças de mães chagásicas, d) exame de natimortos e neomortos, e) exame de placentas e f) acompanhamento de chagásica na fase aguda. a) Inquérito sorológico através da reação de Machado Guerreiro em 1737 gestantes, dentre 306 8 atendidas no período de um ano, com 5,9% de reações positivas. b) Cento e quinze gestantes, com três reações sorológicas positivas para Doença de Chagas, foram acompanhadas e inquiridas sobre a evolução de suas 437 gestações anteriores (média de 4,8 por mulher). A frequência de abortamento (12,-7%), partos prematuros (6,4%) e natimortalidade (22,58:1000) neste grupo foi igual a da população em geral. Entretanto, a Doença de Chagas Congênita foi causa de nati mortalidade, prematuridade e baixo peso ao nascer. Três mulheres transmitiram congenitamente a infecção: duas aos conceptos e outra â placenta. c) De 243 filhos resultantes de 552 gestações das 115 chagásicas, 105 foram pesquisadas parasitologicamente através do xenodiagnóstico e/ou do método de Strout modificado, dentro dos cinco primeiros dias de vida. Foi diagnosticada a Doença de Chagas Congênita em apenas um recém-nascido (1%). Em 83 que se encontravam em acompanhamento aos dois meses de idade foi detectada a fase aguda da Doença de Chagas em uma delas (1,2%). Esta criança tinha tido pesquisa negativa para T.cruzi ao nascer, através do método de Strout e pelo xenodiagnóstico. Sua placenta teve xenodiagnóstico negativo e exame histológico normal. Com um mês de vida a criança era clinicamente normal, morava em casa livre de triatomíneo, na periferia do Distrito Federal e, só se alimentava de leite materno. Sua mãe já havia transmitido a infecção em gestação anterior há dois anos. Foram realizadas reações sorológicas nos 105 e em outros 135 filhos das 115 mulheres chagásicas crônicas. Ao nascimento havia anticorpos específicos para Doença de Chagas em títulos semelhantes aos maternos, com variação máxima de duas diluições, exceto aquele com a Doença de Chagas Congênita, que apresentavam títulos de 1/40 na hemaglutinação e na imunofluorescência indireta enquanto em sua mãe esses títulos eram de 1:320. Após os quatro meses de idade havia 10(5,7%) dos filhos com reaçóes positivas. Um deles, aos oi to e meio meses de idade, amamentado ao seio até aos oito meses, nunca tinha saído do Distrito Federal e ao nascer tinha Strout e xenodiagnóstico negativos. Também nos outros nove, maiores de um ano de idade não pudemos determinar o modo de aquisição da infecção, apesar de cinco deles já terem ido a áreas endêmicas para Doença de Chagas. d) Dois natimortos e dois neomortos foram estudados histopatologicamente. Três deles eram portadores de Doença de Chagas Congênita e em um outro, natimorto, foi diagnosticada infecção bacteriana as cendente. e) Quarenta e nove placentas puderam ser estudadas histopatologicamente e formas amastigotas do T.cruzi foram encontradas em uma delas. f) Uma gestantes na fase aguda da Doença de Chagas adquirida no 89 mês foi acompanhada durante cinco meses. As pesquisas parasitológicas na criança até os quatro meses foram negativas. O xenodiagnóstico e o exame histopatológico de placenta evidenciaram o T.cruzi. Foram inoculados em camundongos, a urina, a saliva, o colostro e o leite materno e, o líquido amniótico e o sangue do cordão do recém-nascido. Os animais inoculados com colostro e o leite no 39 e 79 dias após o parto se infectaram. B - No estudo experimental, foram inoculados 80 camundongos fêmeas da linhagem Charles River, cepa CDl, com a cepa NS do T.cruzi, isolado de criança com a forma congênita da Doença de Chagas. Estas fêmeas foram posteriormente acasaladas e apenas 30 (37,7%) delas engravidaram. Vinte e uma foram cesareadas e as 157 crias resultantes e as placentas, foram estudadas histopatologicamente. Sessenta e uma crias das nove fêmeas que pariram naturalmente foram submetidas a xenodiagnóstico e em 41 também foram feitos estudos histopatológicos. Nenhuma cria mostrou-se positiva para T. cruzi. Em uma das 157 placentas foram encontradas amastigotas do T.cruzi na decídua. Pela primeira vez foi descrita a presença de metafisite associada â Doença de Chagas Congênita, observada nos dois recém-nascidos infectados intra-útero. Também a transmissão da infecção através da amamentação ao seio de toma chagásica na fase crônica indeterminada da doença e a presença do T.cruzi no colostro humano. E, ainda, a infecção pelo T.cruzi no estroma vilositário, estando o concepto livre de infecção. _____________________________________________________________________________ ABSTRACT / The objective of this thesis is to study the maternal transmission to the infant of Chagas' disease in the Federal District. The work was devided into two parts:(A) an clinico-epidemiological study and (B) an experimental study. A. The clinico-epidemiological study was done in the regional hospital of the South wing of Brasilia. It consisted of a) a serological survey; b) examination of chagasic mothers; c) examination of children of chagasic mothers; d) examination of neonates dying at or shortly after birth; e) examination of the placenta; f) follow up of an acute phase Chagas'disease patient. a) The complement fixation test (Machado Guerreito) in 1737 pregnant women, among the 3068 seen during a year, was positive in 5,9%. b) One hundred and fifteen pregnant women, with three positive serological reactions for Chagas'disease, were accompanied or their records studied relating to their 437 previous pregnances (mean 4.8 pregnancies). The frequency of miscarriage (12.7%) premature births (6.4%) and death in the neonatal period (22.58:1000) was equal to the general population. However congenital Chagas'disease was a cause of neonatal death, prematurity and low birth weight. The women trasmitted the infection congenitally two the foetus and one to the placenta. c) Of 243 children the result of 552 pregnancies in 115 chagasics,105 were examined parasitologically by xenodiagnosis and/or a modified Strout method during the first five of life. Congenital Chagas'disease was diagnosed in only one neonate (1%). In 83 infants followed up for two months after birth the acute phase of Chagas'disease was detected in one (1.2%). This child was negative for T.cruzi infection at birth on xenodiagnosis and by the method of Strout. The placenta was negative on xenodiagnosis and its histology normal. At one month of age the child was clinically normal, lived in a house free of triatomine bugs on the periphery or the Federal District and was only fed on maternal milk. The monther had already transmitted the infection in a previous pregnancy two years before. Serological tests were done in 105 plus a further 135 children of the 115 mothers with chronic Chagas'disease. At birth they had titres similar to the mother with a maximum variation of two dilutions, with the exception of the congenital Chagas'disease case. Here the baby had a 1/40 positive titre for haemogglutination and indirect immunofluorescence while the mother had titres of 1:320. After four months of age 10(5.7%) of the children had positive serology. One of these at 81/2 months of age, fed on the breast until 8 months of age, had never the Federal District and at birth had a negative Strout and xenodiagnosis. Also in the other nine, one to twenty years of age, we could not determine the mode of acquistion of infection, although five of them had been in endemic areas of Chagas'disease. d) The two still births and the two neonatal deaths were studied histologically. Three were carriers of congenital Chagas'disease while the other death was associated with an ascending bacterial infection. e) Forty-nine placentas were studied histopathologically and amastigotes of T.cruzi found in one of them. f) A pregnant woman acquired acute Chagas'disease in the 8th. month of her pregnancy and was followed for five months. Until the fourth month of age parasito¬logical examinations of the child were negative. Xenodiagnosis and histological examination of the placenta showed T.cruzi. Samples of urine, saliva, colostrum, maternal milk, amniotic fluid and cord blood were innoculated into mice. Further samples of colostrum and milk were innoculated on day 3 and day 7 after parturition. T.cruzi was isolated in mice receiving colostrum. B. In the experimental study 80 female mice of the CDI Charles river strain were innoculated with T.cruzi strain NS isolated from the Child with congenital Chagas'disease. These females were exposed to males afterward and 30(37.7%) became pregnant. Twenty-one were examined by ceasarian section and 157 progeny and their placentas examined histologically. Sixty-one progeny of nine females born naturally were examined by xenodiagnosis and in 41 histopathological studies were done. No foetus or neonate was positive for T.cruzi. In one of the 157 placentas amastigotes of T.cruzi were found in the decidua. For the first time we record metaphysitis associated with congenital Chagas'disease in two neonates infected in utero. Also the transmission of infection by breast freeding in a chagasic in the chronic indeterminate phase and the presence of T.cruzi in colostrum. Also T.cruzi in the villous stroma when the live conceptus was free of infection.

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:28:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo7985_1.pdf: 410655 bytes, checksum: 0f57696723204db7ac286ad6c176ca7e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2003 / O presente estudo objetivou determinar quantitativamente os níveis séricos do peptídeo natriurético cerebral em pacientes com cardiopatia chagásica crônica e em indivíduos com sorologia positiva para Doença de Chagas sem comprometimento cardíaco. A doença de Chagas afeta cerca de 16 milhões de pessoas na América Latina, destes estima-se que 6 a 8 milhões são brasileiros. O PNB por sua potente ação vasodilatadora e natriuretica, encontra-se elevado nos quadros congestivos, sugerindo ser uma resposta compensatória do organismo nos casos de falência da função da bomba cardíaca. Constatou-se ser esta elevação correspondente ao grau de insuficiência cardíaca, daí ser usado para quantificar o grau de disfunção ventricular esquerda, com o marcador prognóstico e também para monitorar a eficácia terapêutica. Concentrações séricas de peptídeo natriurético cerebral foram determinadas por imunofluorescência, através do Kit comercialmente disponível, TriageÒ - BNP Test produzido pela BIOSITEÒ . Foi avaliado o PNB sérico de 25 indivíduos oriundos do Ambulatório de Doença de Chagas do Hospital Universitário Oswaldo Cruz. Os participantes foram distribuídos em dois grupos sendo um composto por 13 indivíduos portadores de sorologia positiva para doença de chagas, assíntomaticos e sem nenhuma cardiopatia detectável pelo eletrocardiograma, Telerradiografia do Tórax e ecocardiograma (G1). O segundo grupo (G2) integrado por doze pacientes, portadores da Doença de Chagas com comprometimento cardíaco. O comprometimento cardíaco foi definido por alteração eletrocardiográfica ou à teleradiografia do tórax ou ainda ao ecoDopplercardiograma, em indivíduos que não fossem portadores de outra cardiopatia associada. Níveis significativamente mais elevados de PNB foram detectados nos pacientes chagásicos com comprometimento cardíaco [G1=4,4(DP=4,4) e G2=293,0(DP=460,2) p<0,01]. Em ambos os grupos não houve correlação dos níveis séricos de PNB com a idade ou com o sexo. Estes níveis foram diretamente proporcionais, a classe funcional, e a área cardíaca no estudo radiológico do tórax. Todavia apesar de demonstrar um tendência de elevação no comprometimento da função sistólica, não houve uma correlação linear com a fração de ejeção ao ecocardiograma. A existência de marca passo definitivo implantado e as alterações eletrocardiográficas encontradas também não modificaram os níveis séricos de PNB. Observou-se que os indivíduos com sorologia positiva para Doença de Chagas, assintomáticos e sem evidencia de disfunção ventricular, possuem níveis séricos de PNB semelhantes aos da população em geral

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Biologia, Pós-Graduação em Biologia Microbiana, 2018. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2018-05-15T20:04:42Z No. of bitstreams: 1 2018_ThainádeMeloLessaAmorim.pdf: 2404105 bytes, checksum: 9fcf175fa9624298e799cbd236095c91 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-05-17T17:45:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2018_ThainádeMeloLessaAmorim.pdf: 2404105 bytes, checksum: 9fcf175fa9624298e799cbd236095c91 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-17T17:45:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2018_ThainádeMeloLessaAmorim.pdf: 2404105 bytes, checksum: 9fcf175fa9624298e799cbd236095c91 (MD5) Previous issue date: 2018-05-16 / O teste de amplificação de ácidos nucleicos (NAT) é baseado na PCR em tempo real (qPCR), sendo atualmente utilizado na triagem de doadores em bancos de sangue, para detectar a presença do material genético dos vírus HIV, HBV e HCV em bolsas destinadas à doação. Este teste é mais sensível do que as técnicas sorológicas, por ser capaz de detectar a infecção na fase aguda antes do aparecimento de anticorpos, reduzindo o período de janela imunológica. Até o momento, nenhum teste NAT foi desenvolvido para a pesquisa de patógenos protozoários e a transmissão de doenças parasitárias via transfusão sanguínea e transplante de órgãos aumentou nos últimos anos. Neste trabalho, desenvolvemos um teste de diagnóstico NAT utilizando qPCR Sybr Green e TaqMan para a pesquisa do DNA de protozoários de alta relevância clínica, transmissíveis via transfusão sanguínea e endêmicos no Brasil, como o Trypanosoma cruzi, causador da doença de Chagas, Leishmania spp., causadoras das leishmanioses, Toxoplasma gondii, causador da Toxoplasmose, e Plasmodium spp., causadores da malária. Para tanto, foram utilizados pares de primers específicos para amplificação de genes conservados de cada um destes patógenos. Com relação aos testes de eficiência dos pares de primers utilizados, não houve perda de linearidade, pois os declives se mantiveram próximos de 100%. A sensibilidade para detecção de T. cruzi, Leishmania sp. e Plasmodium sp. foi semelhante na qPCR Sybr Green e TaqMan, para T. gondii, a qPCR TaqMan foi mais sensível, detectando um limite de 0,005 parasitas/µL. Constatamos que com relação à linearidade e sensibilidade ambas as metodologias são similares e com relação à especificidade, a TaqMan qPCR que utiliza sondas fluorogênicas gene-específicas marcadas com fluoróforos diferentes, apresentouse superior ao Sybr Green qPCR, possibilitando a definição do tipo de protozoário presente na amostra a ser analisada. Deste modo, propomos o sistema de qPCR Sybr Green utilizando primers com alvo no rRNA 28S de Trypanosomatidae para a amplificação dos genes de T. cruzi e Leishmania sp. e com alvo no rRNA 18S para os genes de Plasmodium sp. e T. gondii. para ser utilizado nos testes de triagem. Em uma segunda etapa, o sistema qPCR TaqMan deve ser então utilizado nos testes confirmatórios. Deste modo, o estabelecimento deste teste diagnóstico na rotina de bancos de sangue contribuirá fortemente para o aumento da segurança transfusional. / The nucleic acid amplification test (NAT) is based on real-time PCR (qPCR) and is currently used in blood donor screening to detect the presence of the genetic material of HIV, HBV and HCV viruses in donated pockets. This test is more sensitive than serologic techniques, because it is able to detect acute infection before the appearance of antibodies, reducing the period of immunological window. To date, no NAT test has been developed for protozoan pathogen research, and transmission of parasitic diseases via blood transfusion and organ transplantation has increased in recent years. In this work, we developed a NAT diagnostic test using qPCR Sybr Green and TaqMan to investigate the DNA of protozoa of high clinical relevance, transmissible through blood transfusion and endemic in Brazil, such as Trypanosoma cruzi, which causes Chagas disease, Leishmania spp. , causing the leishmaniasis, Toxoplasma gondii, causative of toxoplasmosis, and Plasmodium spp., causing malaria. For this, specific pairs of primers were used for the amplification of conserved genes of each of these pathogens. Regarding the efficiency tests of the pairs of primers used, there was no loss of linearity, since the slopes remained close to 100%. The sensitivity for detection of T. cruzi, Leishmania sp. and Plasmodium sp. was similar in qPCR Sybr Green and TaqMan, for T. gondii, qPCR TaqMan was more sensitive, detecting a limit of 0.005 parasites / μL. We found that with regard to linearity and sensitivity both methodologies are similar and with respect to specificity, TaqMan qPCR that uses gene-specific fluorogenic probes labeled with different fluorophores, was superior to Sybr Green qPCR, allowing the definition of protozoan type present in the sample to be analyzed. Thus, we propose the Sybr Green qPCR system using target primers in the Trypanosomatidae 28S rRNA for the amplification of the T. cruzi and Leishmania sp. and targeted at the 18S rRNA for the Plasmodium sp genes and T. gondii to be used in the screening tests. In a second step, the TaqMan qPCR system should be used in the confirmatory tests. In this way, the establishment of this diagnostic test in routine blood banks will contribute greatly to the increase of transfusion safety.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:30:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Juliana Boaventura.pdf: 941307 bytes, checksum: 439636680eb32ef1d8b5574e0286aa19 (MD5) Previous issue date: 2008-02-29 / Chagas disease is a zoonotic disease caused by a protozoan plagued called Trypanosoma cruzi, it is a particular problem in Latin America, where it is estimated that 12 to 14 million people are infected. The populations of Trypanosoma cruzi can be divided into two major groups, the Trypanossoma cruzi I (TCI) and Trypanossoma cruzi II (TCII), the last being more heterogeneous and divided into five subgroups TCIIa, TCIIb, TCIIc, TCIId and TCIIe However, little is known of epidemiological and clinical implications of these ratings. The frequency of vertical transmission of Chagas disease can vary from 1.6 to 18.5% in accordance with the region and the methodology used in the studies. The aim of this study was to genetic characterization of 30 isolates of T. cruzi through the blood of patients with Chagas disease in the chronic phase, pregnant and not pregnant. The genetic characterization was performed with three different markers that amplified regions of the 18S and 24S α DNA ribosomal and mini-exon of the gene that allows classify the groups and subgroups of the parasite and the analysis of genetic variability among isolates of T. cruzi was performed the characterization of the variable region of minicicles of kDNA through the technique of Low-Stringency Single Specific Primer-PCR (LSSP-PCR). The 30 patients studied 75% (25/30) were women and 25% (5 / 30) not pregnant. The patients are the four different Brazilian regions being the States of Bahia 53.3% (16/30), Goiás 40.0% (12/30), Paraíba 3.3% (1 / 30) and the Federal District 3, 3% (1 / 30). The analysis of rDNA allowed show the TCII in 100% of the isolated populations in the regions studied, where the subgroup TCIIb/e has been detected in (96.66%) and TCIId in (3.33%) the latter is a sample of the group Control of the State of Bahia. The genetic variability between the 30 samples was 24.08 ± 14.4% share of bands among pairs. There was no difference between the share of bands patients of Bahia and Goiás, where the value of significance was less than 5%. There was no difference between the percentages of bands showed in analyses by age of the patients, gestational age and in the analysis of the groups of pregnant and not pregnant. In reviewing more than one tube of blood per patient coming evidenced profiles of signatures genomic complex and heterogeneous with 62.5% of bands shared less than 77% and only 37.5% had rates higher than 83% of bands sharing among samples. Suggesting so our isolates showed a great genetic variability. / A doença de Chagas é uma zoonose causada por um protozoário flagelado denominado Trypanosoma cruzi, trata-se de um problema específico da América Latina, onde estima-se que 12 a 14 milhões de pessoas estejam infectadas. As populações de Trypanosoma cruzi podem ser divididas em dois grandes grupos, o Trypanossoma cruzi I (TCI) e o Trypanossoma cruzi II (TCII), sendo o último mais heterogêneo e subdividido em cinco subgrupos TCIIa, TCIIb, TCIIc, TCIId e TCIIe, porém, pouco se sabe das implicações clínicas e epidemiológicas dessas classificações. A freqüência da transmissão vertical da doença de Chagas pode variar de 1,6 a 18,5% de acordo com a região e a metodologia usada nos estudos. O objetivo desse estudo foi a caracterização genética de 30 isolados de T. cruzi por meio da hemocultura de pacientes com doença de Chagas na fase crônica, gestantes e não gestantes. A caracterização genética foi realizada com três diferentes marcadores que amplificaram regiões 24Sα e 18S do DNA ribossômico e do gene mini-exon que permite classificar os grupos e subgrupos do parasito e para a análise da variabilidade genética entre os isolados do T. cruzi foi realizada a caracterização da região variável dos minicírculos do kDNA por meio da técnica de Low stringency specifc primer (LSSP-PCR), das 30 pacientes estudadas 75% (25/30) eram gestantes e 25% (5/30) não gestantes. As pacientes são de quarto regiões brasileiras distintas sendo elas dos Estados da Bahia 53,3% (16/30), Goiás 40,0% (12/30), Paraíba 3,3% (1/30) e Distrito Federal 3,3% (1/30). A análise do rDNA permitiu evidenciar o TCII em 100% das populações isoladas nas regiões estudadas, onde o subgrupo TCIIb/e foi detectado em (96,66%) e o TCIId em (3,33%) este último corresponde a uma amostra do grupo controle do Estado da Bahia. A variabilidade genética entre as 30 amostras analisadas foi de 24,08 ± 14,4% de compartilhamento de bandas entre os pares. Houve diferença no compartilhamento de bandas entre as pacientes da Bahia e Goiás, onde o valor de significância foi menor que 5%. Não houve diferença entre as porcentagens de bandas compartilhadas nas análises realizadas por faixa etária das pacientes, idade gestacional e na análise dos grupos de gestantes e não gestantes. Ao analisar mais de um tubo proveniente da hemocultura por paciente evidenciamos perfis de assinaturas gênicas complexas e heterogêneas com 62,5% de bandas compartilhadas menor que 77% e apenas 37,5% tiveram índices maiores que 83% de compartilhamento de bandas entre as amostras. Sugerindo assim que nossos isolados apresentaram uma grande variabilidade genética.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:29:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Daniela do Carmo Rassi.pdf: 1451324 bytes, checksum: b7824d166a44a37a9c0197acfc38badd (MD5) Previous issue date: 2011-04-15 / Introduction: Chagas disease is still considered a serious health and economics problem even one hundred years after its discovery in Latin American countries. In chronic phase the cardiac involvement is the most frequent and severe manifestation. The two-dimensional echocardiography provides important data for diagnosis and prognosis of this disease, mainly by evaluating the degree of ventricular impairment. Objectives: To correlate echocardiographic parameters with cardiovascular mortality (primary end-point) in a population of chagasic patients with severe ventricular dysfunction (ejection fraction <35%). Also establish the correlation between E / Em ratio, end-diastolic pressure of left ventricle (LVEDP) and plasma level of BNP in order to estimate filling pressures. Methods: This study is a retrospective analysis of a cohort of 60 patients included in Randomized Multicenter Study of Cardiac Cell Therapy in Chagas' heart disease - from February 2006 to February 2009. Echocardiographic parameters analyzed were left ventricle end diastolic and end systolic diameter (LVDD and LVSD), left ventricle diastolic and systolic volume (LVDV and LVSV), ejection fraction estimated by Simpson's method (EF), diameter of left atrium (LA), left atrial volume and left atrial volume indexed (LAV and LAV / m²), pulmonary artery systolic pressure (PASP), integral velocity of aortic flow (IVT Ao), index of myocardial performance (IMP), increase rate of left ventricular pressure (dP / dT), isovolumic relaxation time (IVRT), velocity of E , A, Em, Am and Sm waves, deceleration time of E wave (TDA), E / A ratio, E / Em ratio and mitral regurgitation (MR). Statistical analysis as performed by univariate and multivariate Cox regression model and survival curves were calculated by the KM method and compared using the log-rank test (significant p <0.05). Results: Over a mean follow up period of 24.18 months, 27 patients died. The echocardiographic parameters that correlated with primary end-point with statistical significance in univariate analysis were: EF (HR 0.932), LVDV (HR 1.005), LVSV (HR 1.005), LA (HR 1.064), LAV / m² (HR 1.036), PASP (HR 1.039 ), TDA (HR 0.993), IMP (HR 2.423), velocity of A wave (HR 0.976), velocity of E wave (HR 1.029), E / A ratio (HR 1.589), E / Em wave (HR 1.083), MR 1vs 2 (HR 0.325). For multivariate analysis were selected the variables EF, LAV/m², and E/Em, based on their clinical relevance. The results were: EF (HR 0.95 p <0.1261), LAV/m2 (HR 1.033 p <.0001) and E / Em ratio (HR 1.034 p <0.3704). ROC curve identified the best cutoff value to predict the final outcome and a LAV> 70.71 ml / m² was associated with a significant increase in mortality (log rank p <0.0001). No correlation was demonstrated between the E/Em, LVEDP and BNP Conclusions: Echocardiography has proved to be a useful test in the ability to predict mortality outcome even in a population of patients with severe prognosis. Among the variables studied left atrial volume indexed to body surface area was a significant and independent predictor of mortality in patients with heart failure due to Chagas´cardiomyophaty. / Introdução: A doença de Chagas ainda é considerada um problema grave de saúde e economia mesmo após cem anos de sua descoberta em países da América Latina. O envolvimento cardíaco é a manifestação mais frequente e grave em sua fase crônica. O ecocardiograma bidimensional fornece dados importantes para o diagnóstico e prognóstico desta patologia, principalmente quando avalia o grau do comprometimento ventricular. Objetivos: Correlacionar parâmetros ecocardiográficos com desfecho mortalidade cardiovascular, em uma população de pacientes chagásicos com disfunção ventricular importante (FE < 35%). Estabelecer possível relação entre E/Em e pressão diastólica final do ventrículo esquerdo (PDFVE) com nível plasmático do BNP, com o objetivo de estimar as pressões de enchimento do VE. Métodos: Este é um estudo de análise retrospectiva de uma coorte de 60 pacientes incluídos no Estudo Multicêntrico Randomizado de Terapia Celular em Cardiopatias-braço cardiopatia chagásica, no período de fevereiro de 2006 a fevereiro de 2009. Os parâmetros ecocardiográficos analisados foram: diâmetro diastólico e sistólico final do ventrículo esquerdo (DDFVE e DSFVE), volume diastólico e sistólico final do ventrículo esquerdo (VDFVE e VSFVE), fração de ejeção estimada pelo método de Simpson (FE), diâmetro ântero-posterior do átrio esquerdo (AE), volume do átrio esquerdo e volume indexado do átrio esquerdo (VAE e VAE/m²), pressão sistólica em artéria pulmonar (PSAP), integral da velocidade do fluxo aórtico (VTI Ao), índice de performance miocárdica (IPM), taxa de aumento da pressão do ventrículo esquerdo (dP/dT), tempo de relaxamento isovolumétrico (TRIV), medidas da velocidade das onda E, A, Em, Am e Sm, tempo de desaceleração da onda E (TDA) , relação E/A , E/Em e insuficiência mitral. Para análise dos dados foram realizadas análises univariada e multivariada pelo modelo de regressão de COX e as curvas de sobrevida foram calculadas pelo método de KM e comparadas com o teste de Log-rank (p significativo < 0,05). Resultados: Durante um seguimento médio de 24,18 meses, 27 pacientes faleceram. As variáveis ecocardiográficas com significância estatística com desfecho mortalidade na análise univariada foram: FE (HR 0,932), VDFVE (HR 1,005), VSFVE (HR 1,005), AE (HR 1,064), VAE/m²(HR 1,036), PSAP (HR 1,039), DTA (HR 0,993), IPM (HR 2,423), A(HR 0,976), E (HR 1,029), E/A (HR 1,589), E/EM(HR 1,083), IM 1vs2 (HR 0,325). Para a construção do modelo multivariado foram selecionadas as variáveis FE, AE/m² e E/Em baseado em sua relevância clínica. Os resultados foram: FE (HR 0,95 p<0,1261), VAE/m2 (HR 1,033 p<0,0001) e E/Em (HR 1,034 p<0,3704). Através da curva ROC foi identificado o melhor valor de corte para predizer o desfecho final e um VAE > 70,71ml/m² foi associado com aumento significativo na mortalidade (logrank p< 0,0001). Não foi demonstrada correlação entre a relação E/Em e PDFVE com BNP plasmático. Conclusões: O ecocardiograma mostrou ser um exame útil, com capacidade de predizer desfecho mortalidade nesta população de pacientes graves. Dentre as variáveis analisadas o volume do átrio esquerdo indexado para a superfície corpórea foi um preditor importante e independente de mortalidade, em pacientes com insuficiência cardíaca devido à cardiomiopatia chagásica.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:55:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SANDRA ARANTES DE MATTOS CASTRO.pdf: 5216172 bytes, checksum: 0c82fa0e4740cdf88f9a7275f33c4e4b (MD5) Previous issue date: 2006-08-18 / A preliminary study of the wild fauna host of T. cruzi was carried out within the area of influence of the reservoir of the Corumbá IV hydroelectric power plant where through the faunal rescue of vertebrates specimens of possums, armadillos, rodents, monkeys, foxes and anteaters where collected. Blood samples where collected from a total of 23 wild mammals and used to detect T. cruzi using three parasitological diagnostic methods including thin and thick blood scrubs, hemoculture and the polymerase chain reaction (PCR), and an immunonological method represented by indirect fluorescence antibody test (IFAT).The reactions were carried out to evaluate the efficiency of the methods in the diagnostic of the infection in wild reservoirs and the real incidence of T. cruzi in wild mammal. The data obtained were compared with the data of the occurrence of the disease in the region valuated in relation of the environmental impact on the wild fauna. / Um estudo preliminar da fauna silvestre hospedeira de T. cruzi foi realizado na região do entorno de Brasília, na área de influência do reservatório da Usina Hidrelétrica (UHE) Corumbá IV onde, através do resgate da fauna de vertebrados, foram capturados espécimes de gambás, tatus, roedores, macacos, raposas e tamanduás. Amostras de sangue foram coletadas de um total de 23 mamíferos silvestres e submetidas à pesquisa de T. cruzi através de três métodos de diagnóstico parasitológico, incluindo o esfregaço sanguíneo delgado e em gota espessa, a hemocultura e a reação em cadeia da polimerase (PCR), e um método imunológico representado pela imunofluorescência indireta (IFI). As reações foram realizadas com o propósito de avaliar a eficiência dos métodos no diagnóstico da infecção em reservatórios silvestres e a real incidência de T. cruzi em mamíferos silvestres. Os dados obtidos foram posteriormente comparados com os dados de ocorrência da doença na região, e também, avaliados em relação ao impacto ambiental sobre a fauna silvestre.

Utilizando animais FoxP3+GFP+, estudamos as mudanças fenotípicas em TREG esplênicas durante a fase aguda da infecção pelo clone Sylvio X10/4 de T. cruzi e avaliamos sua atividade supressora. Em relação à expressão (MFI) de diferentes marcadores pelas TREG, observamos um aumento em FoxP3, um aumento progressivo na expressão de CD25, uma pequena população CTLA-4HIGH e um aumento tardio na expressão de GITR. Além disso, observamos aumento em ICOS nos últimos dias analisados e aumento na expressão de Fas e FasL. Ainda, CD69 sofre um pequeno e persistente aumento. Com relação à atividade supressora frente à proliferação de CD4+FoxP3- e produção de IFN-<font face=\"Symbol\">g não vimos diferença entre TREG controles e com 7d-infecção. Além disso, CD4+FoxP3- respondedoras 7d-infectadas mostraram suscetibilidade similar a supressão por TREG controles e de animais com 7d de infecção. Demonstramos que durante a fase aguda da infecção por T. cruzi as TREG mantém sua atividade supressora com aumento na expressão de alguns marcadores e que CD4+ respondedoras não se tornam resistentes à supressão. / Using FoxP3+GFP+ mice, we studied the phenotypic changes in spleen TREG along the early infection with Sylvio X10/4 T. cruzi parasites and evaluated their suppressive activity. Regarding expression (MFI) of different markers by TREG, we observed an increase in FoxP3, a progressive increase in CD25 expression, a small CTLA-4HIGH population, and a late increase in GITR expression. Besides, we observed increases in ICOS in the last days analyzed and increased expression of Fas and FasL. In addition, CD69 suffered a slight persistent augment. According to their suppressive activity upon proliferation of CD4+FoxP3- cells and upon IFN-<font face=\"Symbol\">g production, there were no major differences between TREGs cells from control and 7days infected mice. Moreover, responding 7d-CD4+FoxP3- showed similar susceptibility to suppression by control and 7days infected TREG. We demonstrate that during the early infection by T. cruzi TREG maintain their suppressive activity with increase in expression of some markers and responding CD4+ cells do not become resistant to suppression.

Utilizando animais FoxP3+GFP+, estudamos as mudanças fenotípicas em TREG esplênicas durante a fase aguda da infecção pelo clone Sylvio X10/4 de T. cruzi e avaliamos sua atividade supressora. Em relação à expressão (MFI) de diferentes marcadores pelas TREG, observamos um aumento em FoxP3, um aumento progressivo na expressão de CD25, uma pequena população CTLA-4HIGH e um aumento tardio na expressão de GITR. Além disso, observamos aumento em ICOS nos últimos dias analisados e aumento na expressão de Fas e FasL. Ainda, CD69 sofre um pequeno e persistente aumento. Com relação à atividade supressora frente à proliferação de CD4+FoxP3- e produção de IFN-<font face=\"Symbol\">g não vimos diferença entre TREG controles e com 7d-infecção. Além disso, CD4+FoxP3- respondedoras 7d-infectadas mostraram suscetibilidade similar a supressão por TREG controles e de animais com 7d de infecção. Demonstramos que durante a fase aguda da infecção por T. cruzi as TREG mantém sua atividade supressora com aumento na expressão de alguns marcadores e que CD4+ respondedoras não se tornam resistentes à supressão. / Using FoxP3+GFP+ mice, we studied the phenotypic changes in spleen TREG along the early infection with Sylvio X10/4 T. cruzi parasites and evaluated their suppressive activity. Regarding expression (MFI) of different markers by TREG, we observed an increase in FoxP3, a progressive increase in CD25 expression, a small CTLA-4HIGH population, and a late increase in GITR expression. Besides, we observed increases in ICOS in the last days analyzed and increased expression of Fas and FasL. In addition, CD69 suffered a slight persistent augment. According to their suppressive activity upon proliferation of CD4+FoxP3- cells and upon IFN-<font face=\"Symbol\">g production, there were no major differences between TREGs cells from control and 7days infected mice. Moreover, responding 7d-CD4+FoxP3- showed similar susceptibility to suppression by control and 7days infected TREG. We demonstrate that during the early infection by T. cruzi TREG maintain their suppressive activity with increase in expression of some markers and responding CD4+ cells do not become resistant to suppression.

O presente estudo teve como objetivo obter e caracterizar complexos binários e ternários de benznidazol (BNZ) com ciclodextrinas e polímeros hidrossolúveis com a finalidade de melhorar a solubilidade do fármaco. Efetuou-se a caracterização físico-química do fármaco avaliando-se solubilidade, calorimetria exploratória diferencial (DSC), termogravimetria (TGA), investigação de novas formas cristalinas e a definição de parâmetros para o ensaio de dissolução intrínseca. Posteriormente, esses dados foram utilizados como referência nos estudos de caracterização dos complexos de inclusão. Os complexos binários utilizaram as ciclodextrinas naturais &#945;CD, &#946;CD e &#947;CD, e os ternários a &#946;CD e HP&#946;CD e adição de 1,0% de polímeros hidrossolúveis (povidona e copovidona). Os complexos foram secos em estufa e adicionalmente dois métodos de preparo co-evaporação e liofilização foram empregados para comparação e escolha do mais adequado. O estudo de caracterização dos complexos foi realizado através do método de solubilidade de fases, DSC e TGA. A constante de estabilidade, a eficiência de complexação e solubilidade sugeriram maior interação do fármaco com a &#946;CD. Nos complexos ternários, a utilização de copovidona foi mais efetiva que a povidona. Houve aumento da solubilidade quando os complexos foram preparados pelo método de liofilização. A melhor solubilidade foi alcançada pelos complexos BNZ:&#946;CD (0,84 mg/mL) e BNZ:&#946;CD:copovidona (0,86 mg/mL) preparados pelo método de liofilização. / The present study was aimed to obtain and characterize binary and ternary complexes of benznidazole (BNZ) with cyclodextrins and water-soluble polymers with the purpose to improve the solubility of drug. It was performed the physicochemical characterization of BNZ by differential scanning calorimetry (DSC), thermogravimetry (TGA), investigation of new crystalline forms and the definition of parameters for the intrinsic drug dissolution test of intrinsic dissolution. Subsequently, these informations were used as reference in the studies of characterization of the inclusion complexes. The binary complexes were prepared with the cyclodextrins &#945;CD, &#946;CD and &#947;CD and the ternary with &#946;DC and HP&#946;CD and addition of 1.0% of water-soluble polymers (povidone and copovidone). The complexes were dried in tray drayer and additionally two methods of preparation coevaporation and lyophilization were employeed for comparison and the best was selected. The characterization of the complexes was carried out by phase-solubility method, DSC and TGA. The constant of stability, the efficiency of complexation and solubity suggested higher interaction of the drug with the &#946;CD. In the ternary complexes, the use of copovidone was more effective in the solubility than to povidone. There was an increased of solubility when the complexes were prepared by lyophilization. To best solubility was achieved by the complexes BNZ:&#946;CD (0.84 mg/ml) and BNZ:&#946;CD:copovidone (0.86 mg/ml) prepared by lyophilization method.

O presente estudo teve como objetivo obter e caracterizar complexos binários e ternários de benznidazol (BNZ) com ciclodextrinas e polímeros hidrossolúveis com a finalidade de melhorar a solubilidade do fármaco. Efetuou-se a caracterização físico-química do fármaco avaliando-se solubilidade, calorimetria exploratória diferencial (DSC), termogravimetria (TGA), investigação de novas formas cristalinas e a definição de parâmetros para o ensaio de dissolução intrínseca. Posteriormente, esses dados foram utilizados como referência nos estudos de caracterização dos complexos de inclusão. Os complexos binários utilizaram as ciclodextrinas naturais &#945;CD, &#946;CD e &#947;CD, e os ternários a &#946;CD e HP&#946;CD e adição de 1,0% de polímeros hidrossolúveis (povidona e copovidona). Os complexos foram secos em estufa e adicionalmente dois métodos de preparo co-evaporação e liofilização foram empregados para comparação e escolha do mais adequado. O estudo de caracterização dos complexos foi realizado através do método de solubilidade de fases, DSC e TGA. A constante de estabilidade, a eficiência de complexação e solubilidade sugeriram maior interação do fármaco com a &#946;CD. Nos complexos ternários, a utilização de copovidona foi mais efetiva que a povidona. Houve aumento da solubilidade quando os complexos foram preparados pelo método de liofilização. A melhor solubilidade foi alcançada pelos complexos BNZ:&#946;CD (0,84 mg/mL) e BNZ:&#946;CD:copovidona (0,86 mg/mL) preparados pelo método de liofilização. / The present study was aimed to obtain and characterize binary and ternary complexes of benznidazole (BNZ) with cyclodextrins and water-soluble polymers with the purpose to improve the solubility of drug. It was performed the physicochemical characterization of BNZ by differential scanning calorimetry (DSC), thermogravimetry (TGA), investigation of new crystalline forms and the definition of parameters for the intrinsic drug dissolution test of intrinsic dissolution. Subsequently, these informations were used as reference in the studies of characterization of the inclusion complexes. The binary complexes were prepared with the cyclodextrins &#945;CD, &#946;CD and &#947;CD and the ternary with &#946;DC and HP&#946;CD and addition of 1.0% of water-soluble polymers (povidone and copovidone). The complexes were dried in tray drayer and additionally two methods of preparation coevaporation and lyophilization were employeed for comparison and the best was selected. The characterization of the complexes was carried out by phase-solubility method, DSC and TGA. The constant of stability, the efficiency of complexation and solubity suggested higher interaction of the drug with the &#946;CD. In the ternary complexes, the use of copovidone was more effective in the solubility than to povidone. There was an increased of solubility when the complexes were prepared by lyophilization. To best solubility was achieved by the complexes BNZ:&#946;CD (0.84 mg/ml) and BNZ:&#946;CD:copovidone (0.86 mg/ml) prepared by lyophilization method.