Orientador:, Edson Luiz Lopes Baldin / Coorientador: Leandro do Prado Ribeiro / Banca: Carlos Frederico Wilcken / Banca: Antonio Eduardo Miller Crotti / Resumo: Helicoverpa armigera (Hübner, 1808) (Lepidoptera: Noctuidae) destaca-se pela grande capacidade de dispersão, hábito polífago e por ocasionar expressivos danos em culturas de interesse econômico em todo o mundo. Dentre os métodos de manejo de insetos-praga, o uso de derivados vegetais é considerado uma promissora alternativa ao controle químico, uma vez que estes produtos apresentam mais de um ingrediente ativo em sua composição, dificultando a seleção de insetos resistentes, além de serem provenientes de recursos renováveis. Dentre as famílias botânicas de ocorrência em regiões neotropicais, Annonaceae constitui uma das principais fontes de compostos naturais bioativos. Assim, visando disponibilizar alternativas mais sustentáveis e ao mesmo tempo eficientes para o manejo de Helicoverpa armigera (Hübner, 1808) (Lepidoptera: Noctuidae), avaliou-se a bioatividade de cinco derivados de anonáceas (Annona montana Macfad., A. mucosa Jacq., A. muricata L., A. reticulata L. e A. sylvatica A. St.-Hil.) e do produto comercial à base de acetogeninas de anonáceas (Anosom® 1 EC) sobre lagartas do inseto. Adicionalmente, o composto majoritário do extrato mais ativo foi identificado e também avaliado quanto à sua bioatividade sobre formas neonatas de H. armigera. Constatou-se que o extrato de A. mucosa (CL50: 411,55 mg kg-1 e CL90: 1.479 mg kg-1 ) assim como o Anosom® 1 EC (CL50: 312,08 mg kg-1 e CL90: 1.151 mg kg-1 ) apresentaram significativa atividade inseticida sobre H. armigera, com toxicidade aguda após sete dias de exposição a dieta artificial tratada. A partir do extrato etanólico de A. mucosa realizou-se fracionamento biomonitorado através de diferentes técnicas cromatográficas, permitindo o isolamento da acetogenina bisterahidrofurano roliniastatina-1. Este composto foi testado a uma concentração de 41,55 mg kg-1, ocasionando mortalidade total das larvas de H. armigera ... / Abstract: Helicoverpa armigera (Hübner, 1808) (Lepidoptera: Noctuidae) is a highly polyphagous species with high dispersion ability and adaptability to different crops of economic interest worldwide. Botanical insecticides emerge as a viable alternative to the use of synthetic insecticides for pest management because they have more of a potentially active ingredient in their composition, delaying the selection of resistant insect, moreover come from renewable resources. Among tropical plant families, the Annonaceae has shown great potential as a source of biopesticides. To determine an alternative tool for H. armigera control, this study evaluated the insecticidal activity of ethanolic seed extracts from five species of Annonaceae (Annona montana Macfad., A. mucosa Jacq., A. muricata L., A. reticulata L. e A. sylvatica A. St.-Hil.) and the acetogenin-based commercial bioinsecticide Anosom® 1 EC on larvae of H. armigera larvae. In addition, the major active compound of the ethanolic extract was isolated using various chromatographic techniques and assessed for its bioactivity on H. armigera neonates. In the initial screening assay we verified that the ethanolic seed extract from A. mucosa (LC50 = 411.55 mg kg-1 and LC90 = 1,479 mg kg-1 ) was the most promising one, showing similar effectiveness to Anosom® 1 EC (LC50 = 312.08 mg kg-1 and LC90 = 1,151 mg kg-1 ) against H. armigera at seven days after exposition to treated diet. The acetogenin bis-tetrahydrofuran rolliniastatin-1 was identified as the major compound in ethanolic extract from A. mucosa. This compound was assessed at 41.55 mg kg- 1, causing 100 % of larval mortality on H. armigera neonates for days after exposition to treated diet. After, in a greenhouse trial using tomato plants, the bioactivity of ethanolic extract of A. mucosa was compared to botanical insecticide Anosom® 1 EC (both at LC90) and a synthetic insecticide (Belt® 48 SC) ... / Mestre

Orientador: Leila Trevisan Braz / Coorientador: Margarete Camargo / Coorientador: Renata Castoldi / Banca: Pablo Forlan Vargas / Banca: Rita de Cássia Panizzi / Resumo: A alface (Lactuca sativa L.) é uma das mais importantes hortaliças cultivadas no mundo, porém com a intensificação da produção, a dificuldade em se cultivar essa planta também tem aumentado, principalmente pela infestação das áreas de produção pelo fitopatógeno, Bremia lactucae Regel, causador do míldio. Apesar da existência de cultivares comerciais com a identificação de resistência ao míldio, muitas delas apresentam-se ineficazes nas condições brasileiras. Com base no exposto, esta pesquisa teve por objetivos: identificação das raças de Bremia lactucae no ano de 2011 nos principais municípios produtores de alface do Estado de São Paulo e avaliação das cultivares de alface comerciais quanto à resistência a Bremia lactucae. Na primeira etapa da pesquisa, foram coletados isolados de B. lactucae de diferentes municípios produtores de alface do Estado de São Paulo, no ano de 2011. Ao término das coletas, multiplicaram-se os esporângios na cultivar suscetível Solaris, com posterior inoculação nas diferenciadoras. Realizaram-se as avaliações no mesmo dia do aparecimento da primeira esporulação na cultivar suscetível Green Tower. Na segunda etapa da pesquisa, foram avaliadas cultivares de alface amplamente comercializadas no Estado de São Paulo. Para tanto, foram semeadas, em caixas gerbox, forradas com papel germitex, sementes de cada cultivar comercial. Posteriormente, foi inoculada nessas plântulas, solução de água destilada + esporângios de cada raça identificada até o ano de 2011. Os dados encontrados permitiram concluir que foram identificadas duas novas raças: SPBl:08 e SPBl:09, com as respectivas codificações: 31/63/51/00 e 31/63/19/00, e apenas as cultivares comerciais Malice e Pira Roxa mostraram-se resistentes à Bremia lactucae / Abstract: Lettuce is one of the most important leafy vegetables grown in Brazil, but with the intensification of production, the difficulty in cultivating this vegetable has increased, mainly due the infestation of producing areas with Bremia lactucae, the causing agent of downy mildew, the worst disease in lettuce. Despite the existence of commercial cultivars with resistance to downy mildew identification, many of these are ineffective in brazilian conditions. Based on the above, this study aimed to: identify of B. lactucae races in 2011 in major cities lettuce growers of the State of Sao Paulo and evaluation of commercial lettuce cultivars. In the first stage of the research were collected isolates of B. lactucae from different municipalities lettuce growers of the of São Paulo State, in 2011. At the end of the collections, multiplied the sporangias in susceptible cultivar Solaris, with subsequent inoculation in differentiating. Evaluations were performed on the same day of the appearance of the first sporulation in susceptible cultivar Green Tower. In the second stage of the research, were evaluated lettuce cultivars widely marketed in the of São Paulo State. So, were sown in gerboxes lined with paper germitex, seeds from each commercial cultivar. Later, were inoculated in seedlings, solution of distilled water + sporangias of each race identified by the year 2011. The data obtained showed that identified two new races: SPBl: 08 and SPBl:09, with their encodings: 31/63/51/00 and 31/63/19/00, and only commercial cultivars 'Malice' and 'Pira Roxa' were resistant to Bremia lactucae / Mestre

Orientador: Maria Aparecida Pessôa da Cruz Centurion / Coorientador: Marcelo da Costa Ferreira / Coorientador: Pedro Luís da Costa Aguiar Alves / Banca: Edson Lazarini / Banca: Edson Luiz Furtado / Banca: Rita de Cássia Panizzi / Banca: Ivana Marino Bárbaro / Resumo: Com esse trabalho objetivou-se avaliar os efeitos do manejo integrado da ferrugem asiática (Phakopsora pachyrhizi Sydow & P. Sydow) da soja, por meio de épocas de semeadura (outubro e novembro), populações de plantas (160, 280 e 400 mil plantas ha-1) e tratamentos fungicidas (doses recomendadas e reduzidas de azoxystrobina + ciproconazol + óleo mineral e de tebuconazol), na severidade da doença e seus reflexos no desenvolvimento vegetativo, produtividade, potencial fisiológico das sementes, qualidade de grãos, e ainda, na deposição e cobertura da calda fungicida em soja, cultivares NK-412113 (V Max) e MG/BR-46 (Conquista). Experimentos de campo foram conduzidos nos anos agrícolas de 2009/2010 e de 2010/2011, na região de Jaboticabal, SP, sob infestação natural da ferrugem asiática. A partir do surgimento dos primeiros sintomas da ferrugem iniciaram-se as pulverizações com os tratamentos fungicidas e as avaliações da severidade da doença. Para ambas as cultivares e anos agrícolas, os tratamentos com azoxystrobina + ciproconazol promoveram menores severidades da doença, refletindo em aumento de produtividade. A redução da população de plantas proporcionou bom controle da doença e maiores produtividades de grãos, apesar de reduzir o índice de área foliar e de não influenciar a deposição e cobertura da calda aplicada. No geral, semeaduras mais precoces proporcionaram melhoria dos caracteres relacionados ao desenvolvimento das plantas, porém houve controle menos eficiente da ferrugem. Foi observada grande desuniformidade de cobertura em relação aos terços das plantas, sendo a deposição no terço superior maior que no inferior para todos os tratamentos. No geral, independente dos tratamentos utilizados, o potencial fisiológico das sementes foi considerado baixo / Abstract: The aim of this work was to evaluate the effects of asian soybean rust (Phakopsora pachyrhizi Sydow & P. Sydow) integrated management, by means of sowing dates (october and november), plant populations (160,000; 280,000 and 400,000 plants per hectare) and fungicide treatments (recommended and reduced doses of azoxystrobina + ciproconazol + mineral oil and tebuconazol), on soybean rust severity and its effects on plant development, yield, quality and seeds physiological potential, and, in the deposition and coverage of fungicides on soybean, cultivars NK-412113 (V Max) and MG/BR-46 (Conquista). Field experiments were conducted in the 2009/2010 and 2010/2011 crop years, under natural infestation of soybean rust. As from the appearance of the first disease symptoms, also began the fungicide spraying and the disease severity assessments. For both cultivars and crop years, treatments with azoxystrobina + ciproconazol promoted smaller disease severities, reflecting in productivity increase. The plant population reduction has provided a good disease control and higher grain yield, despite reducing the leaf area index and not influence the deposition and coverage of spray solution applied. In general, the earliest sowings has provided improvement of characters related to the plants development, but the rust control was less efficient. A low uniformity of coverage was observed in relation to the plants thirds, with deposition in the top third higher than in the lower. Independent of treatments, the seed vigor was considered low / Doutor

Orientador: Antonio de Goes / Banca: Nilton Luiz de Souza / Banca: Marcel Bellato Spósito / Resumo: O presente estudo foi desenvolvido em pomares de citros localizados em propriedade comercial na região de Rio Claro-SP e teve como objetivo a determinação do efeito de práticas culturais na redução das fontes de inóculo e, conseqüente diminuição da severidade da mancha preta dos frutos cítricos, causada por Guignardia citricarpa. Desenvolveram-se dois experimentos em áreas distintas. No primeiro ensaio, testou-se a influência de cultivos intercalares, amendoim forrageiro e capim coastcross e posterior roçagem da massa formada sob a copa de laranjeiras 'Natal', na flutuação populacional de ascósporos e na severidade da doença, enquanto que no segundo, foi avaliado o efeito de diferentes tratamentos [(1) uréia 12,5 g/litro; (2) nitrato de cálcio 12,5 g/litro; (3) calcário dolomítico 2 t/ha; (4) microrganismos eficazes 1% do produto ativado; (5) combinação dos produtos comerciais Stuble Aid® + Compostaid® 0,75 mL/litro + 0,75 g/litro e (6) Testemunha] na aceleração da decomposição de folhas de limoeiros 'Siciliano' caídas sob a copa das plantas e na severidade da doença. Concluiu-se que o capim coastcross foi a espécie mais eficiente na supressão da liberação de ascósporos, com conseqüente redução da severidade da doença. No segundo ensaio, os tratamentos representados pela adição de microrganismos foram os mais eficientes na aceleração da decomposição de folhas de limoeiro, porém quanto à severidade da doença, todos os tratamentos apresentaram o mesmo comportamento, com reduções significativas em relação à testemunha. / Abstract: The present research was developed in citrus orchards located in commercial property in Rio Claro - SP region and it had as an objective the determination of the effect of cultural practice in the reduction of the source of inoculum and, consequently the reduction of strictness black spots in citric fruit, caused by Guignardia citricarpa. Two experiments in distinct areas were developed. In the first one, the influence of intercalary culture (peanut and coastcross grass) and later the skim of the a dough formed on the orange trees top 'Natal', in the floating of ascospores and in the strictness of the disease, while in the second experiment, the effect of different treatments were evaluated [(1) urea 12,5 g/liter; (2) calcium nitrate 12,5 g/liter; (3) dolomitic calcareous 2t/ha; (4) efficient microrganisms 1% from the active product; (5) the combination of the commercial products Stuble Aid® + Compostaid® 0,75 mL/liter + 0,75 g/liter and (6) Control] in the acceleration of the 'Siciliano' lemon trees leaves decomposition fallen down on the top trees and in the severity of the disease. It was concluded that the coastcross grass was the most efficient species in the supression of the discharge of the ascospores and in the decrease of the severity disease. In the second experiment, the treatments represented by the addition of microorganisms were the most efficient in the acceleration of the lemon trees leaves decomposition, however as for the severity of the disease, all the treatments presented the same performance, with statistically significative decreases in relation to control. / Mestre

Orientador: Eduardo Sanches Stuchi / Coorientador: Helvécio Della Coletta Filho / Banca: Antonio Baldo Geraldo Martins / Banca: Simone Rodrigues da Silva / Resumo: O huanglongbing (HLB ou greening) é uma doença altamente destrutiva que ataca a maioria das espécies de citros. Trabalhos e observações recentes sugerem que os porta-enxertos podem ter influência na incidência e severidade da doença. O presente projeto teve como objetivo monitorar a reação de 16 variedades de porta-enxertos sob laranjeira „Valencia‟ frente ao Candidatus Liberibacter asiaticus por meio da técnica de q-PCR, e suas respostas biométricas, tais como: diâmetro 2 cm a baixo e a cima da linha da enxertia, altura do colo da planta ao enxerto e do enxerto a poda, comprimento do lançamento, peso fresco da parte aérea e do sistema radicular, volume do sistema radicular, e análise foliar de macro e micronutrientes. Os porta-enxertos empregados foram os principais em uso comercial: trifloliateiro „Flying Dragon‟, limoeiro „Cravo‟, „Poncirus trifoliata', tangerineira „Sunki‟ e citrumelo „Swingle‟, testados experimentalmente com bons resultados: citrangeiros „Troyer‟ e „Carrizo‟ tetraplóides, HRS 643, HRS 702, HRS 849 e HRS 812, em fase de experimentação: „Clementina x trifoliata‟ (1615), „Cleópatra x Swingle‟ (1614), „Cleópatra x Rubidoux‟ (1600) e „Changsha x English Large‟, além de um híbrido „Rhode Red + Volkameriano‟, também em fase experimental. O experimento foi conduzido no Centro de Citricultura Sylvio Moreira, em Cordeirópolis. Cada associação copa e porta-enxerto apresentaram sete plantas, cinco delas foram inoculadas e duas não inoculadas. Para analisar a evolução da bactéria nas plantas foram realizadas três amostragens (8, 12, 16 meses após a inoculação), de pecíolos e nervuras centrais... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Huanglongbing (HLB or greening) is a highly destructive disease that affects most citrus cultivars, species and hybrids. Recent works and researches suggest that rootstock variety influenced disease severity and incidence. This work aimed to characterize variation in the reaction of 16 cultivars of rootstocks grafted with a sweet orange „Valência‟ scion in response to Candidatus Liberibacter asiaticus by q-PCR and biometric characteristics such as: stem diameter 2 cm above and below the grafting, collar height of the plant to the graft, collar height of the graft to the pruning, length of the first bud after pruning, fresh weight of aerial part of the plant, fresh weight of root system, root volume and leaf analysis of macro and micronutrients. The rootstocks used in the work were the major commercial cultivars: trifoliate orange „Flying Dragon‟, Rangpur lime, „Poncirus trifoliata‟, mandarin „Sunki‟ and citrumelo „Swingle‟, tested experimentally with good results, citrange „Troyer‟ and „Carrizo‟ tetraploid, HRS 643, HRS 702, HRS 849 and HRS 812, in experimental stage, „Clementina x trifoliata‟ (1615), „Cleópatra x Swingle‟ (1614), „Cleópatra x Rubidoux‟ (1600) and „Changsha x English Large‟, plus a hybrid „Rhode Red + Volkameriano‟. The experiment was conducted at Centro de Citricultura Sylvio Moreira in Cordeirópolis. Each cultivar had seven plants, five were inoculated and two were used as control plants. To evaluate the growth of bacteria in plants, three sampling were done at (8, 12, 16 months after inoculation) by visually infected... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

O controle de doenças em plantas geralmente é realizado com o uso de agroquímicos, que podem desencadear efeitos maléficos ao ser humano ou ao ambiente como um todo. Diversos trabalhos mostram o potencial de plantas medicinais no controle de fitopatógenos, tanto por sua ação fungitóxica direta, inibindo o crescimento micelial e a germinação de esporos, quanto pela capacidade de ativar o metabolismo de defesa das plantas, como o acúmulo de fitoalexinas, indicando a presença de moléculas com características elicitoras. Foram desenvolvidos dois experimentos na Universidade Tecnológica Federal do Paraná – Câmpus de Dois Vizinhos, com objetivos de avaliar o pontencial de preparados de Cavalinha (Equisetum sp.) na síntese de metabólitos de defesa em cotilédones de soja (Glycine max L.) e o efeito sobre o crescimento de Rhizoctonia solani, in vitro. O delineamento experimental utilizado para os experimentos foi inteiramente casualizado em esquema fatorial 3x5 resultante da combinação de três formas de extração (extrato alcoólico, infusão e maceração) e cinco concentrações (zero; 1; 10, 20 e 40%), com 4 repetições. No primeiro experimento foi avaliada a indução de fitoalexinas em cotilédones de soja em resposta aos derivados a base de cavalinha. Sementes de soja foram semeadas em areia autoclavada e mantidas em temperatura ambiente por 10 dias. Em seguida os cotilédones das plântulas foram removidos e na face abaxial destes foram aplicados os tratamentos. Após seguir os procedimentos metodológicos da técnica de extração, obteve-se via espectofotometria a quantificação da fitoalexina gliceolina, sendo então utilizados os cotilédones para quantificação da atividade da enzima fenilalanina amônia-liase (FAL) e o teor de fenóis totais. No segundo experimento foi avaliado o potencial fungistático dos preparados sobre Rhizoctonia solani. Em placas de Petri foram adicionados no meio de cultura BDA os preparados nas diferentes concentrações. Após a solidificação foi transferido para o centro de cada placa, um disco de micélio com Rhizoctonia solani. As placas foram incubadas sob alternância de fotoperíodo de 12 horas, em temperatura de 25oC. Os preparados de extrato alcoólico, infusão e maceração de cavalinha apresentam capacidade de indução das fitoalexinas gliceolinas em cotilédones de soja, bem como, ativam o metabolismo de compostos fenólicos. Entre os preparados, o extrato alcoólico e a maceração, se sobressaem sobre a infusão. Os preparados de extrato alcoólico, infusão e maceração de cavalinha em todas as suas concentrações inibem o crescimento do fungo Rhizoctonia solani, in vitro, sendo que o extrato alcoólico apresenta maior capacidade de supressão do crescimento micelial em comparação as demais formas de obtenção dos preparados. / Usually, the plant diseases control is accomplished with the use of chemicals products that can trigger harmful effects for the people or the environment. Several studies showed the potential of medicinal plants in the control of pathogens, either by their direct fungitoxic action, inhibiting the mycelial growth and spore germination, and by ability to activate the metabolism of plant defense, such as phytoalexin accumulation, indicating the presence of molecules with characteristics elicitoras. Two experiments were carried out in the Universidade Tecnológica Federal do Paraná - Câmpus Dois Vizinhos. The aims of these works were to evaluate the potential of "cavalinha" (Equisetum sp.) prepared in the defense metabolites synthesis of soybean cotyledons (Glycine max L.) and the effect on Rhizoctonia solani growth in vitro. The experimental design used for the experiments was completely randomized in factorial 3 x 5 (extract form x concentration), with four replications. The extract forms were alcoholic extract, infusion and maceration and the concentrations tested were zero, 1, 10, 20 and 40%. In the first experiment, the phytoalexins induction in the soybean cotyledons the according with "cavalinha" prepared was evaluated. Soybean seeds were sown in autoclaved sand and kept at room temperature for 10 days. After, the plantlets cotyledons were removed and on the surface of these the treatments were applied. Then, it followed the methodological procedures of extraction technique and it was obtained via spectrophotometry the phytoalexin glyceollin quantification. The cotyledons were then used to quantify of the enzyme phenylalanine ammonia lyase (PAL) activity and total phenols contend. In the second experiment was evaluated the potential fungistatic preparations on Rhizoctonia solani. The prepared with different concentrations was added in Petri dishes with PDA culture medium. After solidification was transferred to the center of each plate, a disc with Rhizoctonia solani mycelia. The plates were incubated alternating the photoperiod in 12 hour, at 25 °C temperature. The alcoholic extract, infusion and maceration "cavalinha" prepared present glyceolin induction of phytoalexins in soybean cotyledons, as well as it to activate the metabolism phenolic compounds. Among the prepared, the alcoholic extract and maceration forms were superior in relation the infusion form. The alcoholic extract, infusion and maceration "cavalinha" prepared using all over the concentrations inhibit Rhizoctonia solani growth in vitro. The alcoholic extract had a higher capacity to suppress mycelial growth compared to other forms of production preparations.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-08-02Bitstream added on 2014-06-13T20:00:25Z : No. of bitstreams: 1 000758468.pdf: 1210376 bytes, checksum: 740c5e00e4212430fd5745c32abe0f1b (MD5) / Parasitoides representam uma ferramenta importante no controle biológico de lepidópteros desfolhadores em plantações de eucalipto. O uso do endoparasitoide Palmistichus elaeisis (Delvare e LaSalle, 1993) (Hymenoptera Eulophidae) possui grande potencial de sucesso no controle de lepidópteros desfolhadores em plantios florestais. Sua polifagia permite seu estabelecimento no campo, mesmo com o declínio da praga. Esse mesmo aspecto facilita sua criação massal em laboratório com o uso de hospedeiros alternativos, como a broca da cana-de-açúcar Diatraea saccharalis (Fabricius 1794) (Lepidoptera: Crambidae). A eficiência do parasitoide em campo pode ser comprometida pela qualidade de sua criação, podendo refletir negativamente no controle biológico. Nesse contexto foram conduzidos experimentos para se conhecer a melhor densidade do parasitoide P. elaeisis por pupa de D. saccharalis, a melhor idade da pupa e parasitoide, avaliação da dispersão e eficiência de controle do parasitoide em áreas florestais, objetivando o aperfeiçoamento das técnicas de criação de P. elaeisis sobre pupas de D. saccharalis e avaliação da dispersão do parasitoide em campo. Os experimentos foram realizados em condições de laboratório e em plantios de eucalipto localizados em Lençóis Paulista, SP. Para determinação da densidade ideal de P. elaeisis, pupas de D. diatraea foram expostas ao parasitismo nas densidades 1:1, 1:9, 1:18, 1:27, 1:36, 1:45, 1:54, 1:63, 1:72, e 1:81 pupa:parasitoide respectivamente.. Na determinação da melhor idade do parasitoide e hospedeiro foram utilizados parasitoides e pupas com idade de 24, 48, 72, 96 e 120 horas, sendo oferecida cada idade de hospedeiro para todas as idades de parasitoides. Para determinação da dispersão e parasitismo em campo foram utilizados adultos de P. elaeisis com, no máximo de 48 horas de idade, pupas de D. saccharalis e armadilhas amarelas foram... / The utilization of parasitoids for biological control of lepidopteran defoliators in Eucalyptus plantations is an important tool in the IPM program. The use of the endoparasitoid Palmistichus elaeisis (Delvare and LaSalle, 1993) (Hymenoptera Eulophidae) presents great potential for success in the control of lepidopteran pests due its polyphagia, allowing its establishment in the field, even when the pest population declines. This aspect facilitates the mass production in the laboratory by use of alternative hosts as Diatraea saccharalis (Fabricius 1794) (Lepidoptera: Crambidae). The efficiency of the parasitoid P. elaeisis in the field can be compromised by the quality of its rearing, which can affect negatively on biological control. In this context, experiments were carried out to determine the best density of the parasitoid P. elaeisis per D. saccharalis pupa, the best parasitoid and pupal age and the dispersion of the parasitoid in Eucalyptus plantations. The experiments were carried out under laboratory conditions and in eucalyptus plantations in Lençóis Paulista, SP, Brazil. To determine the ideal density of P. elaeisis, pupae of D. diatraeae were exposed to the following parasitism densities: 1:1, 1:9, 1:18, 1:27, 1:36, 1:45, 1:54, 1:63, 1:72, and 1:81 pupa: parasitoid, respectively. To determine the best age of host and parasitoid, pupae with 24, 48, 72, 96 and 120 hours of age were offered to parasitoids with 24, 48, 72, 96 and 120 hours of age. The age of pupae interfere in the parasitoid progeny and the rate of parasitism, whereas the age of parasitoid does not interfere in the evaluated parameters. The best parasitoid ages were from 48 to 96 hours old and better pupal age ranged from72 to 96 hours. To determine the dispersion and parasitism in the field adults of P. elaeisis with 48 h of age were used, pupae of D. saccharalis and yellow sticky traps were placed at different heights ...

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, Programa de Pós-Graduação em Fitopatologia, Brasília, 2014. / Submitted by Tania Milca Carvalho Malheiros (tania@bce.unb.br) on 2014-08-12T13:27:23Z No. of bitstreams: 1 2014_RafaelaCristinaFerreiraBorges_Parcial.pdf: 2768328 bytes, checksum: 7e1025646edc62fe1a390d6722f2f79a (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2014-08-12T16:34:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_RafaelaCristinaFerreiraBorges_Parcial.pdf: 2768328 bytes, checksum: 7e1025646edc62fe1a390d6722f2f79a (MD5) / Made available in DSpace on 2014-08-12T16:34:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_RafaelaCristinaFerreiraBorges_Parcial.pdf: 2768328 bytes, checksum: 7e1025646edc62fe1a390d6722f2f79a (MD5) / A teca (Tectona grandis) é uma espécie florestal nativa do subcontinente Índico e do Sudeste Asiático que foi introduzida no Centro-Oeste Brasileiro a partir da década de 1970. Essa espécie possui alto valor comercial por apresentar madeira de alta durabilidade e resistência. A madeira pode ser usada para a confecção de móveis finos, esquadrias, pisos, construção naval e painéis. As duas principais doenças que afetam a cultura da teca são de etiologia fúngica: a ferrugem causada por (Olivea tectonae) e o cancro da teca. Nos últimos anos, o cancro da teca vem ganhando importância pelo grande número de árvores afetadas. Assim, considerando a importância desta doença, é necessária a busca de alternativas de controle, a partir de conhecimentos básicos sobre a enfermidade como: etiologia, variabilidade genética da população do patógeno e caracterização morfocultural, molecular e patogênica de isolados do fungo L. theobromae, identificado como o agente causal. Assim, discos de madeira com sintomas de escurecimento em povoamento de Teca foram coletados no estado do Mato Grosso, dos quais foram obtidos isolados de L. theobromae. As colônias fúngicas foram caracterizadas morfologicamente e a identificação de L. theobromae foi confirmada. Os isolados estudados foram caracterizados morfologicamente em culturais, avaliados quanto ao crescimento micelial em BDA, MEA, V8, Aveia-ágar e Cenoura-ágar, nas temperaturas de 25, 30 e 35°C. Para a caracterização molecular, realizou-se a extração do DNA de todos os isolados estudados através do método CTAB modificado. O DNA total foi submetido à reação de PCR para amplificação das regiões intergênicas do DNA ribossomal (regiões ITS1 e ITS2) e fator de elongação, a partir dos primers ITS1, ITS4 e TEF1-F, EF1-728F. A fim de comprovar a patogenicidade, mudas de teca foram inoculadas com dois isolados de L. theobromae (RB01) e (RB05) em três clones designados A, B e C. As inoculações foram unidirecionais quando se usou isolados de outras hospedeiras no clone A de teca. Os isolados de L. theobromae cresceram melhor em BDA, MEA e V8 a partir de 25°C com temperatura ótima da 35°C. As análises de sequencia das regiões do fator de elongação da tradução e do DNA ribosomal confirmaram a classificação dos isolados de teca como Lasiodiplodia theobromae. De acordo com o teste de patogenicidade, verificou-se que os clones A, B e C mostraram-se susceptíveis aos dois isolados de L. theobromae estudados. O clone A, proveniente de plantas seminais foi o que apresentou maior susceptibilidade ao isolado de L. theobromae, seguido do clone B, enquanto o clone C apresentou maior resistência. Quando realizada a inoculação unidirecional no clone A, verificou-se que esse clone foi susceptível a todos os isolados estudados, independentemente de origem, diferindo apenas em nível de severidade. Os isolados originários de hospedeiras distintas de teca proporcionaram maiores níveis de doença. A diversidade genética dos isolados foi estudada usando-se marcadores moleculares RAPD (“Random amplified polymorphic DNA”), resultando em quatro grupos e quatorze subgrupos com alta variabilidade dentro dos subgrupos. A similaridade dos isolados variou de 50% a 100%, sendo que estes com 100% de similaridade são isolados obtidos de teca. / Teak (Tectona grandis) is a forest species native to the Indian subcontinent and Southeast Asia, and it was introduced in Brazil’s midwestern region in the 1970s. This species has a high commercial value, because its timber is highly durable and resistant. The wood may be used to make fine furniture, door and window frames, floors, naval constructions and panels. The two main diseases that affect teak plantations are of fungal etiology; they are rust caused by Olivea tectonae and teak canker. In recent years, teak canker has been increasingly important in that it affects a large number of trees. Thus, considering the importance of this disease, alternatives for its control need to be sought, using basic knowledge about the disease such as its etiology, the genetic variability of the pathogen population, and the morphocultural, molecular and pathogenic characterization of isolates of the fungus L. theobromae, identified as the causal agent. To this end, discs of wood with darkening symptoms were collected in a teak plantation in the state of Mato Grosso and, from these, isolates of L. theobromae were obtained. The fungal colonies were morphologically characterized, and the identification of L. theobromae was confirmed. The isolates studied were morphologically characterized in culture media and evaluated for mycelial growth in PDA, MEA, V8, oatmeal-agar and carrot-agar, at temperatures of 25, 30 and 35°C. For molecular characterization, extraction of DNA was carried out for all isolates studied, using the modified CTAB method. Total DNA was submitted to PCR for amplification of the intergene regions of ribosomal DNA (regions ITS1 and ITS2) and elongation factor, from the primers ITS1, ITS4 and TEF1-F, EF1-728F. To prove the pathogenicity, teak seedlings were inoculated with two isolates of L. theobromae (RB01) and (RB05) in three clones designated A, B and C. The inoculations were unidirectional when isolates were used from other hosts in clone A of teak. The isolates of L. theobromae grew better on PDA, MEA and V8 from 25°C upwards, with an optimum temperature of 35°C. The isolates studied were not clearly distinguished when only sequences of ITS and TEF were used. In accordance with the pathogenicity test, it was confirmed that clones A, B and C were susceptible to the two isolates of L. theobromae studied. Clone A from the seminal plants was the one that presented the greatest susceptibility to the isolate of L. theobromae, followed by clone B, while clone C presented greatest resistance. When unidirectional inoculation of clone A was done, it was confirmed that this clone was susceptible to all the isolates studied, independent of their origin, differing only in level of severity. The original isolates from non-teak hosts provided the highest disease levels. The genetic diversity of the isolates was studied using RAPD molecular markers (Random amplified polymorphic DNA), resulting in four groups and 14 subgroups with high variability within the subgroups. The similarity of the isolates varied from 50% to 100%, and those with 100% similarity were isolates obtained from teak.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Humanas, Programa de Pós-Graduação em Fitopatologia, 2013. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2014-08-14T11:09:13Z No. of bitstreams: 1 2013_JustinoJoseDiasNeto_Parcial.pdf: 884845 bytes, checksum: 36cc5dad780907257665a443f6a18fdb (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2014-08-19T13:32:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_JustinoJoseDiasNeto_Parcial.pdf: 884845 bytes, checksum: 36cc5dad780907257665a443f6a18fdb (MD5) / Made available in DSpace on 2014-08-19T13:32:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_JustinoJoseDiasNeto_Parcial.pdf: 884845 bytes, checksum: 36cc5dad780907257665a443f6a18fdb (MD5) / A brusone do arroz, causada por Magnaporthe oryzae, é uma das mais importantes doenças da cultura, pela sua ampla distribuição geográfica e capacidade de destruição das lavouras. A doença é um desafio para os orizicultores e constitui-se em um dos fatores limitantes da produtividade do arroz, especialmente na região Central do Brasil, uma área de alta diversidade genética do patógeno. Nesta região, a resistência à brusone tem sido quebrada um a dois anos após o lançamento de uma nova cultivar. Um dos objetivos do presente trabalho foi o mapeamento de genes de resistência à brusone no genoma de arroz para intensificar o desenvolvimento de estratégias de emprego de genes de resistência completa e/ou parcial no desenvolvimento de variedades melhoradas. Neste estudo, a avaliação da interação entre isolados de Magnaporthe oryzae coletados na região do Vale do Rio Araguaia e genitores de uma população de linhagens puras recombinantes de arroz (RILs – Recombinant Inbred Lines), possibilitou a seleção do isolado 623, raça fisiológica IA-1, apresentando reação de incompatibilidade (resistência) com a variedade tradicional japonica tropical Puteca, e de compatibilidade (suscetibilidade) com a variedade tradicional japonica tropical Chorinho. A análise de polimorfismo de DNA em 192 locos microssatélites e SNPs distribuídos pelo genoma de arroz permitiu a construção de um mapa genético com 1074,19 cM e distância de recombinação média entre marcadores de 5,59 cM. A fenotipagem da população RIL e testes de ligação possibilitou a identificação do loco RM7213, próximo ao centrômero do Cromossomo 6, significativamente associado ao controle de resistência ao isolado M. oryzae 623. O gene mapeado foi provisoriamente denominado Pi-Put1. A região do marcador RM7213 possui aglomerados de genes de resistência à brusone, muitos deles de amplo espectro de resistência. Esta região gênica pode ser explorada pelo programas de melhoramento genético na obtenção de cultivares resistentes ao patógeno. Uma das alternativas para o desenvolvimento de cultivares resistentes é a piramidização indireta, baseada na exploração de linhagens quase-isogênicas com diferentes genes de resistência para compor multilinhas. Outro objetivo do presente trabalho foi, portanto, avaliar linhagens quase-isogênicas de arroz com diferentes genes de resistência à brusone e construir multilinhas para testar resistência ao patógeno em condições de campo. As linhagens obtidas apresentaram características agronômicas (ex. produtividade, porte baixo, ciclo, resistência a acamamento, qualidade de grãos, etc.) muito semelhantes às observadas nos seus respectivos genitores recorrentes. As linhagens apresentaram ganho de resistência a diferentes raças de M. oryzae. O efeito de multilinha na contenção da epidemia de brusone no campo foi detectado em experimento baseado na inoculação da bordadura com uma mistura de 15 raças do patógeno e avaliação de sintomas nas linhagens e multilinhas. Observou-se uma redução significativa na taxa de infecção da doença nos tratamentos suscetíveis, atribuída ao emprego de multilinhas. Este resultado sugere que o emprego de multilinhas na produção de arroz no Brasil pode contribuir para a obtenção de resistência mais durável a M. oryzae em regiões com alta diversidade de raças do patógeno. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Rice blast, caused by Magnaporthe oryzae, is one of the most important diseases of rice, due to its broad geographic distribution and capacity to destroy the crop. This disease is a challenge to rice farmers and one of the factors which limit rice yield, especially in the Central Region of Brazil, which is considered an area of high genetic diversity of the pathogen. In this region, rice blast resistance has been overcome only one or two years after a new resistant cultivar is commercially released. One of the objectives of the present work was to map blast resistance genes in the rice genome in order to intensify the development of strategies to use genes conferring major or partial resistance by breeding programs. In this study, the evaluation of the phenotypic interaction between M. oryzae isolates collected in the Araguaia River Valley and parents of a population of recombinant inbred lines (RIL) allowed the identification of isolate 623, physiological race IA-1, which is able to induce incompatibility reaction (resistance) in the traditional tropical japonica variety Puteca, and compatibility (susceptibility) in the traditional tropical japonica variety Chorinho. DNA polymorphism analysis in 192 microsatellite and SNP loci, distributed in the rice genome, allowed the construction of a genetic map with 1074.19 cM and average recombination distance of 5.59 cM between markers. Interaction phenotype and linkage analysis allowed the identification of microsatellite locus RM7213, located near the centromere region of chromosome 6, significantly associated with resistance to M. oryzae 623. This gene was temporarily called Pi-Put1. The region of maker RM7213 has a cluster of blast resistant genes, some of them with broad resistance to blast races. This region can be further explored by breeding programs in order to obtain new cultivars resistant to the pathogen. One of the alternatives for the development of blast resistant cultivars is indirect gene pyramiding, based on the exploration near-isogenic lines with different resistant genes to compose multilines. Another objective of this work was to evaluate near isogenic lines with different resistant genes and build multilines to test for blast resistance in the field. The lines showed agronomic traits (eg. yield, plant height, cycle, lodging resistance, grain quality, etc.) very similar to their respective recurrent parents. The lines also presented additional resistance to different races of M. oryzae in relation to their recurrent parents. The effect of multilines to deter blast epidemics in the field was detected in an experiment based on the inoculation of the experimental borders with a mixture of 15 races of M. oryzae, followed by phenotypic evaluation of the lines and multilines during the epidemics. A significant reduction in the rate of disease infection in susceptible controls was attributed to the use of multilines. This result suggests that the use of multilines in rice production in Brazil could contribute to obtain durable resistance to M. oryzae in regiões with high genetic diversity of the pathogen.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Departamento de Biologia Molecular, 2014. / Submitted by Bruna Cares (brunacares@gmail.com) on 2014-09-03T19:28:19Z No. of bitstreams: 1 2014_LilianSilveiraTravassosdoCarmo.pdf: 5759602 bytes, checksum: 2869ee49cd065fb61c7f9f9a0c1fea8b (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2014-09-17T12:46:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_LilianSilveiraTravassosdoCarmo.pdf: 5759602 bytes, checksum: 2869ee49cd065fb61c7f9f9a0c1fea8b (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-17T12:46:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_LilianSilveiraTravassosdoCarmo.pdf: 5759602 bytes, checksum: 2869ee49cd065fb61c7f9f9a0c1fea8b (MD5) / O tomate é uma cultura de grande importância econômica em todo o mundo, mas é severamente afetada por vários geminivírus, como o begomovírus Tomato chrolotic mottle virus (ToCMoV) que causam perdas significativas na cultura. O objetivo desse estudofoi identificar proteínas diferencialmente expressas na interação ToCMoV-planta hospedeira. Primeiramente foi verificado o efeito do gene AC2 de ToCMoV na planta modelo Nicotiana benthamiana. A proteína AC2 é um fator de virulência que tem um papel crucial no sucesso da interação vírus-planta, atuando como ativador transcricional e em alguns begomovírus, como supressor de silenciamento de RNA. Entretanto, a função ou funções da proteína AC2 do begomovírus ToCMoV ainda não foram determinadas. Para esta etapa do trabalho, plantas de N. benthamiana foram inoculadas com Agrobacterium tumefaciens contendo o vetor viral Potato virus X (PVX) e com a construção PVX-AC2. Eletroforese bidimensional foi realizada e a análise por MALDI TOF-TOF revelou proteínas diferencialmente expressas envolvidas em estresse oxidativo, fotossíntese, defesa contra patógenos, entre outros. Na segunda etapa do trabalho, foi aplicada a metodologia 2D-nanoUPLC/HDMSE para a análise de folhas de tomateiro infectadas com o begomovírus ToCMoV. Foram analisados, pela primeira vez, os perfis proteômicos dos genótipos de tomateiro suscetível (Santa Clara) e resistente (LAM 157 contendo o locus de resistência tcm-1) inoculados com ToCMoV. Proteínas diferencialmente expressas em resposta ao ToCMoV foram identificadas. Os resultados obtidos neste estudo revelaram proteínas que podem estar associadas com a suscetibilidade ao ToCMoV, como a ubiquitina e a proteína de choque térmico 70 (HSP 70). Os efeitos causados pelo fator de patogenicidade AC2 do ToCMoV e pelo vírus íntegro foram semelhantes e resultaram no recrutamento de proteínas envolvidas nas vias de ubiquitinação, tradução e processamento proteíco. Por outro lado, as plantas hospedeiras também desencadearam resposta de defesa na XIV tentativa de combater o avanço viral aumentando a expressão de proteínas como, a histona H4. Os resultados obtidos neste estudo trazem importantes contribuições para a melhor compreensão das interações ToCMoV-planta hospedeira e poderão contribuir para o desenvolvimento de estratégias de controle da infecção por este begomovírus. __________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Tomato is a highly important crop cultivated worlwide, which is severely affected by begomoviruses such as Tomato chrolotic mottle virus (ToCMoV). The aim of the present study was to identify differentially expressed proteins in the ToCMoV-host plant interaction. The virulence factor AC2 is considered crucial for a successful virus-plant interaction and is known to act as a transcriptional activator and in some begomoviruses to function as an RNA silencing suppressor factor. However, the function or functions of the AC2 protein of the begomovírus ToCMoV are not yet determined. In the first part of this study, the model plant Nicotiana benthamiana was inoculated with Agrobacterium tumefaciens containing the viral vector Potato virus X (PVX) and with the PVX-AC2 construction. Bidimensional electrophoresis was performed and MALDI TOF-TOF analysis revealed differentially expressed proteins involved in oxidative stress, photosynthesis, host defence, among others. In the second part of this study, we have applied the 2D-nanoUPLC/HDMSE methodology to analyse tomato plants infected with the begomovirus ToCMoV. For the first time, the proteomic profiles of the susceptible tomato genotypes (Santa Clara) and resistant (LAM 157 containing the locus of resistance tcm-1) inoculated with ToCMoV were analyzed. Differentially expressed proteins in response to ToCMoV were identified. The results of this study revealed proteins that may be associated with the infectivity of ToCMoV, such as ubiquitin and heat shock 70 (HSP 70). The effects caused by the pathogenicity factor AC2 of ToCMoV and the intact virus were similar and resulted in the recruitment of proteins involved in ubiquitination pathways, translation and protein processing. Moreover, the host plant defense response was also triggered in an attempt to combat viral breakthrough increasing the expression of proteins such as histone H4. The results obtained provide important XVI contributions to the understanding of plant-ToCMoV interactions and may contribute to the development of strategies to control this infection caused by begomoviruses.