Orientador : Jose Pedrazzoli Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-01T18:19:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marchioretto_MarcoAntonioMaya_M.pdf: 20814317 bytes, checksum: d0fbf3e360898c90f737afc911ca68d5 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: o objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia de dois esquemas comumente empregados para a erradicação do Helicobacter py/ori e o impacto da resistência bacteriana nas taxas de erradicação. Noventa e dois pacientes Helicobacter py/ori-positivos com doença ulcerosa péptica ulcerosa, comprovada através de endoscopia digestiva alta, foram randomizados e receberam, durante sete dias um dos tratamentos: lansoprazol 30 mg, amoxicilina 1000 mg e claritromicina 500 mg (todos em duas tomadas diárias), ou subcitrato de bismuto 120 mg, tetraciclina 500 mg (ambos em quatro tomadas diárias) e furazolidona 200 mg (em duas tomadas diárias). A presença de Helicobacter py/ori foi investigada trinta dias após o término da terapia medicamentosa, através de nova endoscopia digestiva alta. Cinco pacientes de cada grupo de estudo não retomaram para o seguimento. Ambos os tratamentos resultaram em taxas similares de erradicação do H. py/ori: 66%-60% (pelo protocolo) e 59%-52% (intenção de tratar) no grupo A e B, respectivamente. Entretanto, na ausência de resistência bacteriana à claritromicina ou amoxicilina, foi encontrada taxa de erradicação de 79%. Pode-se concluir que, a resistência primária à claritromicina ou amoxicilina pode estar encobrindo um potencial, sério e não reconhecido problema na erradicação do Helicobacter py/ori. Testes de susceptibilidade a antimicrobianos tornam-se necessários para melhorar a eficácia terapêutica / Abstract: Objective: To compare the efficacy of two regimens of triple therapy in patients with Helicobacter py/ori infection and peptic ulcer disease, and evaluate the impact of bacterial resistance to antibiotics on eradication rate. One of the regimens, consisted of lansoprazole, amoxicillin and clarithromycin, and the other consisted of bismuth, tetracycline and furazolidone. Methods: Ninety-two consecutive Helicobacter y/ori-positive patients with active peptic ulcer disease were randomly enrolled to receive either (A) lanzoprazole (Ogastro, Abbot, Brazil) 30 mg b.i.d., plus 1000 mg of amoxicillin (Amoxil, Smithkline Beecham, Brazil) b.i.d., plus clarithromycin (Klaricid, Abbot, Brazil) 500 mg b.i.d.; or (B) bismuth subcitrate (Peptulan, Farmasa, Brazil) 120 mg q.i.d., plus 500 mg of tetracycline (Terramicina, Pfizer, Brazil) q.i.d., plus furazolidone (Giarlan, UCI Farma, Brazil) 200 mg b.i.d.. Both groups (n = 46 each) received the medication for 1 week. The Helicobacter py/ori status was reassessed 30 days following completion of the therapy in order to evaluate eradication rates and bacterial resistance to the antibiotics was investigated using na in vitro assay. Results: Five patients from each study group were lost to follow up. Side effects were considered to be mild by individuais from both groups, except by one assigned to group B who could not complete the treatment. Both treatments resulted in similar H. py/ori eradication rate: 66% and 60% (per protocol), 59% and 52% (intention-to-treat) in group A and B, respectively (p>0.05, n.s.). However, eradication improved to 79% in the absence of Helicobacter pylori resistance to clarithromycin or amoxicillin. Similar healing rates were observed both groups by per protocol or intention-to-treat analysis. Conclusions: Primary resistance to clarithromycin or amoxicillin may underscore a potentially serious problem for the eradication of H. py/ori infection. Testing for bacterial resistance may become necessary to improve therapeutic efficacy. The results emphasise that caution must be exercised before suggesting Summary a general eradication therapy, which could be universally employed, or even a "test and treat" strategy in developing countries. Key words: clarithromycin, amoxycillin, tetracycline, furazolidone, bismuth subcitrate, lansoprazole, He/icobacter py/ori therapy, antibiotic resistance in Brazil / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador : Jose Pedrazzoli Jr / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T23:21:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ribeiro_MarceloLima_D.pdf: 7826968 bytes, checksum: 9801eddfc5c1b78eed95dfc3b6c2704a (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Helicobacter pylori é uma bactéria Gram-negativa e microaerofilica associada a diversas doenças gástricas, como gastrite crônica, úlcera péptica e câncer gástrico. As terapias de erradicação do H. pylori geralmente consistem no uso de dois ou três antimicrobianos combinados com um inibidor de bombas de prótons. Em geral, o metronidazol, a cIaritromicina e a amoxicilina usados na terapia de erradicação, enquanto os tratamentos com tetraciclina são utilizados como uma segunda opção em pacientes que não erradicaram a bactéria. Embora os tratamentos anti-H. pylori ainda sejam muito efetivos, recentemente as taxas de erradicação têm sido influenciadas negativamente pelo aumento no número de bactérias resistentes. o uso indiscriminado da cIaritromicina tem resultado em um aumento na taxa de resistência a este antibiótico, sendo considerado como a principal causa da falha terapêutica. A resistênda do Helicobacter pylori a cIaritromicina tem sido associada às mutações A2142G e A2143G no gene 235 rRNA. Até o fim do século passado a resistência a tetraciclina não era muito comum, entretanto, nos últimos anos esta resistência vêm aumentando. Alguns estudos indicam que o mecanismo molecular de resistência a tetradclina está relacionado a mutações no sítio primário de ligação deste antibiótico, localizado no gene 165 rRNA. Os objetivos do presente trabalho foram: determinar a prevalência de cada tipo de mutação em 52 linhagens de H. pylori resistentes a cIaritromicina; e caracterizar a influência de cada tipo de mutação no OM e, descrever o mecanismo molecular de resistência a tetraciclina em cinco amostras resistentes a este antibiótico.Alémdisso,desenvolverum métodorápidobaseado em PCR-RFLP para a detecção de linhagens resistentes a tetraciclina. Tendo em vista que em cerca de 94% de nossas amostras a resistência a claritromicinaé mediada pelas mutações de ponto A2142-G e A2143-G, a metodologia empregada para a detecção destas mostrou-se eficiente na identificaçãode linhagensClaR,Desse modo, sugerimosque, devidoà sua rapidez e precisão, a detecção de linhagens resistentes a claritromicinapor PCR-RFLP poderiaser utilizadorotineiramenteantes da escolhada terapia antimicrobiana. Os dados obtidos no presente trabalho confirmam que a substituição AGA926-92T8T-C, presente nas cinco amostras estudadas, é responsável por conferir a resistência à tetraciclina. Além disso, desenvolvemos uma metodologia capaz de detectar a presença da substituição AGA926-92T8T-C, responsável por mediar a resistência à tetraciclina em H. py/ori. O PCR-RFLP mostrou-se muito eficaz na identificação de linhagens resistentes a tetraciclina. Desse modo, podemos concluir que essa metodologia permite uma rápida identificação de linhagens resistentes à tetraciclina sem a necessidade da cultura bacteriana / Abstract: Helícobacterpylori is a gram-negative bacterium that colonizes the human stomach and is associated with a variety of digestive diseases, such as chronic gastritis and peptic ulcer disease. Successful treatment of H. py/ori infection not only results in the eradication of the pathogen, but often also cures and prevents the development of the associatecl diseases. Infection with H. pylori can be effectively treated by the combination of a proton pump inhibitor with multiple antibiotics. The first-line regimen consists mainly of a triple therapy, and clarithromycinis one of the most widely used components. Tetracycline-based combination regimens are often usecl after first-line treatment with amoxicillin, clarithromycin and/or metronidazolefails,or when recluction of treatment costs are important. Although most anti-H. pylori regimens are still highly effective, the eradication rates of these therapies are negatively affectecl by the increasing incidence of antibiotic resistance.The increasing use of clarithromyanhas resulted in the development of resistance. Resistance of Helícobacter pylori to clarithromycin has been associated with A2142G and A2143G point mutations in the 235 rRNA gene. Although most of H. pylori isolates are still susceptible to tetracycline, in the past few years the incidence of tetracycline resistance has increased. The molecular mechanism underlying this resistance is attributed to mutations in the primary binding site of tetracycline in the 165 rRNA gene. Thus, the aims of the present study were: to determine the prevalence of each mutation in 52 clarithromycin-resistant H. pylori strains and to characterize the influence each type of mutation on the MIC;and describe the molecular resistance mechanism of tetracycline resistance in tive high-Ievel tetracycline resistant H. pylori strains. These data have subsequently been used for the developmentof a molecular screening approach for tetracycline resistance using PCR-RFLP. Regarding the clarithromycin resistance, our results support the hypothesis that the A2142G and A2143G mutations in the 235 rRNAgene of H. pylori are linked to clarithromycin resistance. This finding may have a significant impact on patient management, providing rapid information for the clinician, allowing, for example, appropriate antibiotic prescription and prediction of treatment outcome Concerningtetracycline resistance we showed that among ali tetracycline resistant strains the resistance was mediated by the triple basepair substitution AGA926-92-8TTC in the 165 rRNA gene. Additionally,a PCR-based restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP)assay was developed for the rapid detection of the AGA926-92T8T-C substitution, and confirmed the presence of the aforementioned substitution in ali tive Brazilian isolates. This PCR-RFLP based approach that distinguishes the high-Ievel TetR isolates from the low-Ievel TetRand TetS H. pylori strains allowing a rapid detection of clinically relevant levels of tetracycline resistance in H. pylori / Doutorado / Doutor em Farmacologia

Orientador: Aline Aparecida Pizzirani-Kleiner / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-14T21:12:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Legaspe_MaraFonsecaChiarelli_M.pdf: 1661323 bytes, checksum: 10c00ac805ea800b6e675e368a997a62 (MD5) Previous issue date: 1988 / Resumo: Um total de 88 amostras de s. aureus, das quais 44 isoladas da narina e pele de estudantes e outras 44 isoladas do ambiente hospitalar, foram testadas frente à estreptomicina, eritromicina, rifampicina, cloranfenicol, canamicina, netilmicina, oxacilina, cefalotina, amicacina, tetraciclina e penicilina; foram as amostras discriminadas em resistentes, intermediárias e sensíveis de acordo com o método de difusão com discos de Kirby-Bauer. Os resultados obtidos mostraram níveis de resistência relativamente altos, principalmente com relação à penicilinnas amostras de estudantes. Dentre os isolados, de S. aureus, verificou-se uma grande incidência de resistência múltipla, podendo-se presumir a presença de plasmídios; para isso, as amostras M5 e M9 foram tratadas pelo brometo de etídio com a finalidade de se observar a possível origem plasmidial dos genes de resistência / Abstract: A total of 88 samples of S. aureus, 44 of which isolated from the nostril and skin of students, and the remaining 44 samples isolated from a hospital site, were tested with kanamycin, streptomycin, erythromycin, rifampicin, chloran phenicol, netilmicin, oxacillin, cephalotine, amikacin, tetracy cline, and penicillin G, according to the difusion method with discs by Kirby-Bauer, the samples were identified as resistant, intermediary and susceptible. The data showed resistance levels relatively high, specially those related to penicillin in the student samples. Among the isolated S. aureus, a great incidence of multiple resistance was verified, leading us to presume, Lhe presence of plasmids; the samples M5 and M9were treated with ethidium bromide for this with the purpose of observing the possible plasmidial origin of resistance genes / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Odontologia

Orientador: Maria de Lourdes Ribeiro de Souza da Cunha / Coorientador: Carlos Magno Castelo Branco Fortaleza / Banca: Ary Fernandes Júnior / Banca: Antonio Carlos Campos Pignatari / Resumo: Staphylococcus aureus se destaca por sua patogenicidade e alta frequência, permitindo que este agente seja capaz de produzir doenças tanto em indivíduos sadios quanto em imunocomprometidos por sua fácil disseminação. O objetivo deste trabalho foi caracterizar a distribuição de clones de S. aureus sensíveis e resistentes à meticilina (MSSA/MRSA) em 50 isolados provenientes de pacientes com infecções de pele da Seção de Dermatologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina (FMB) de Botucatu, 50 isolados de idosos de Instituições de Longa Permanência (ILP) de Bauru e 50 isolados provenientes de detentos do Centro de Ressocialização (CR) de Avaré. Os isolados de S. aureus foram submetidos à técnica de E-test para determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM). Para determinação do perfil de virulência e resistência à oxacilina nos 150 isolados de S. aureus foram realizadas reações em cadeia da polimerase (PCR) para a detecção dos genes mecA, cassete cromossômico estafilocócio mec (SCCmec), genes codificadores das enterotoxinas (sea, seb e sec-1), toxinas esfoliativas A e B (eta e etb), toxina 1 da síndrome do choque tóxico (tst), leucocidina de Panton-Valentine (lukS-PV e lukF-PV), hemolisinas alfa e delta (hla e hld) e biofilme (icaA e icaD). O perfil clonal dos isolados MSSA e MRSA foi caracterizado por Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE), e os clones de MRSA foram submetidos a tipagem molecular por Multilocus Sequence Typing (MLST) e spa typing. Os resultados revelaram maior prevalência de MRSA nas instituições de longa permanência, além de apresentarem CIM90 64μg/mL para oxacilina e CIM90 > 256 μg/mL para clindamicina. Das 150 amostras de S.aureus ... / Abstract: Staphylococcus aureus is distinguished by its high pathogenicity and frequency, allowing that this agent is capable of producing diseases in both healthy individuals and immunocompromised due to its easy dissemination. The aim of this work was to characterize the distribution of clones of S. aureus sensitive and resistant (MSSA/MRSA) in 50 isolates from patients with skin infections of Section of Dermatology of the University Hospital of the Botucatu Medical School Hospital of the (FMB), 50 isolates of elderly residents of nursing homes of Bauru and 50 isolates from inmates of Detention Center of Avare. The isolates of S. aureus were subjected to the technique of E-test for determination of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). To determine the virulence profile and oxacillin resistance in 150 isolates of S. aureus was used Polymerase Chain Reaction (PCR) for the detection of mecA gene, staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec), genes encoding enterotoxins (sea, seb and sec-1), exfoliative toxins A and B (eta e etb), toxic shock syndrome toxin 1 (tst), Panton-Valentine leukocidin (lukS-PV and lukF-PV), alpha and delta hemolysin (hla and hld) and biofilm (icaA and icaD). The clonal profile of MRSA and MSSA isolates were characterized by Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE), and MRSA clones were subjected to molecular typing Multilocus Sequence Typing (MLST) and spa typing. The results revealed a higher prevalence of MRSA in institutional settings, besides having MIC90 64μg/mL for oxacillin and MIC90 > 256 mg/mL for clindamycin. Of the 150 samples of S. aureus studied, 20 (13.3%) were mecA carriers, being detected seven isolates harboring SCCmec type IV nine carrying the SCCmec type II, only one isolate carrying the SCCmec type I and 3 isolates were not typed by the protocol used. Among the virulence factors, enterotoxin A was the most prevalent in all sources. Is important to note, 10% of isolates from Center Resocialization ... / Mestre

Orientador: Alvimar Jose da Costa / Banca: Gilson Pereira de Oliveira / Banca: Welber Daniel Zanetti Lopes / Resumo: Os objetivos específicos do presente trabalho foram diagnosticar espécies de nematódeos resistentes à ivermectina de alta concentração (3,15% e 3,5%) por meio de necropsias parasitológicas realizadas em bovinos procedentes de oitos municípios dos estados de Minas Gerais, São Paulo e Rio Grande do Sul; avaliar comparativamente as eficácias terapêuticas de duas formulações contendo altas concentrações de ivermectina 3,15% (630 mcg/Kg) e 3,5% (700 mcg/Kg), contra nematódeos parasitos de bovinos naturalmente infectados; fornecer subsídios para um melhor conhecimento sobre a distribuição da resistência de nematódeos à ivermectina, em diferentes regiões do Brasil. Para isto foram utilizados 108 animais, naturalmente infectados, os quais foram selecionados pelas médias de três pré-contagens (-3,-2 e -1) de ovos por grama de fezes (OPG), divididos em grupos experimentais, constituídos por seis repetições. Quatorze dias pós-tratamento (DPT), os animais foram eutanasiados e necropsiados. Resistência à ivermectina 3,15% (630 mcg/Kg) e 3,5% (700 mcg/Kg) foi diagnosticada obtendo eficácia terapêutica insuficientemente efetiva (<90%) pelas médias aritméticas ou 1000 espécimes sobreviveram nos grupos tratados, dentre as quais: Haemonchus placei (0,0-89,27%), Cooperia punctata (0,0-26,46%), Cooperia pectinata (0,0-90,16%), Cooperia spatulata (21,82-71,50%), Trichostrongylus axei (82,23%), Oesophagostomum radiatum (54,93-83,33%) e Trichuris discolor (64,71-82,58%); Considerando apenas os resultados analisados estatisticamente referentes aos oito experimentos realizados (116 necropsias) pode-se inferir que a resistência à ivermectina, em altas concentrações (630 e 700 μg/Kg) está amplamente disseminada, sobretudo nas espécies Haemonchus placei, Cooperia punctat... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The specific objectives of the present study were to diagnose high concentration ivermectin (3,15% and 3,5%) resistance in nematodes through parasitological necropsies conducted in bovines originating from eight cities from the states of Minas Gerais, São Paulo and Rio Grande do Sul; evaluate, by comparison, the therapeutic efficacies of two formulations containing high concentrations of ivermectin, respectively 3,15% (630 mcg/Kg) and 3,5% (700 mcg/Kg), against nematodes parasitizing naturally infected bovines; provide aid for a better knowledge about the distribution of ivermectin resistance in nematodes throughout different regions of Brazil. To achieve these goals 108 naturally infected animals were used, all selected using the average of three EPG counts (-3, -2 and -1), divided in experimental groups consisting of six repetitions. Fourteen days after treatment all animals were euthanized and necropsied. Resistance to 3,15% ivermectin (630 mcg/Kg) and 3,5% ivermectin (700 mcg/Kg) was diagnosed by obtaining insufficient therapeutical efficacy (< 90%) when analyzing arithmetic means or by finding at least 1000 specimens that survived in the treated groups, amongst which, Haemonchus placei (0,0-89,27%), Cooperia punctata (0,0-26,46%), Cooperia pectinata (0,0-90,16%), Cooperia spatulata (21,82-71,50%), Trichostrongylus axei (82,23%), Oesophagostomum radiatum (54,93-83,33%) e Trichuris discolor (64,71-82,58%). Considering only the statistically analyzed results related to the eight experiments conducted (116 necropsies) it can be inferred that resistance to high concentration ivermectin (630 and 700 μg/Kg) is highly disseminated, specially in Haemonchus placei, Cooperia punctata, Cooperia pectinata, Cooperia spatulata, Trichostrongylus axei, Oesophagostomum radiatum and... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: José Roberto Fioretto / Coorientador: João Vicente Braga de Souza / Banca: Mário Ferreira Carpi / Banca: Cilmery Suemi Kurokawa / Banca: Carlos Fernando Rochi / Banca: Leila Inês de Aguiar Raposo da Cãmara Coelho / Resumo: Os Enterococcus spp habitam normalmente o trato gastrointestinal de seres humanos e de animais. Desde 1980, foram identificados como importantes agente de infecções hospitalares. As espécies E. faecalis e E. faecium são agentes de diversas infecções, como bacteriemia, sepse, endocardite, infecção do trato urinário, infecções de feridas e meningite. A resistência adquirida, mais predominantemente a penicilina/ampicilina, aminoglicosídeos (alto nível de resistência) e glicopeptídeos são relatados em um número crescente de isolados e o espectro terapêutico nestes casos é limitado. A principal preocupação é que os genes que codificam a resistência para todos esses antibióticos poderiam ser transferidos para outros enterococos ou mesmo para muitos outros patógenos virulentos. A resistência adquirida aos glicopeptídeos é mediada por vários mecanismos (tipos VanA/B/D/E/G/L), sendo que os genótipos VanA e VanB são transferíveis. Fatores relacionados com o hospedeiro, com o hospital, procedimentos invasivos, meio ambiente, e o uso de antibióticos podem aumentar o risco de colonização ou infecção com VRE. Este estudo visa investigar a ocorrência destes microrganismos, em pacientes de hospitais de Manaus - Amazonas, identificando a distribuição das espécies e o perfil de resistência aos antimicrobianos e dos genes de resistência a vancomicina envolvidos. Foram analisados 38 isolados de Enterococcus spp. provenientes de pacientes internados ou de atendimento ambulatorial no período de outubro de 2011 a setembro de 2012. Foram confirmados 29 isolados de E. faecalis e 8 de E. faecium por testes bioquímicos convencionais, pela metodologia automatizada e por Reação da Polimerase em Cadeia (PCR). Um isolado de Enterococcus spp. foi identificado pelo equipamento automatizado como E. casseliflavus, identificação não confirmada pela PCR. A avaliação dos perfis de suscetibilidade aos ... / Abstract: The Enterococcus spp. normally inhabit the gastrointestinal tract of humans and animals. Since 1980, have been identified as a major cause of nosocomial infections. The species E. faecalis and E. faecium are agents of various infections, such as bacteremia, sepsis, endocarditis, urinary tract infections, wound infections and meningitis. Acquired resistance, most predominantly penicillin / ampicillin, aminoglycosides (high-level resistance) and glycopeptides are reported in an increasing number of isolates and therapeutic spectrum in these cases is limited. The main concern is that the genes which encode resistance to these antibiotics could all be transferred to other Enterococci or for many other virulent pathogens. Acquired resistance to glycopeptides is mediated by several mechanisms (types VanA/B/D/E/G/L), with VanA and VanB genotypes are transferable. Factors related to the host, with the hospital, invasive procedures, environment, and the use of antibiotics may increase the risk of colonization or infection with VRE. This study aims to investigate the occurrence of these microorganisms in hospital patients of Manaus - Amazonas, identifying species distribution and antimicrobial resistance profile and vancomycin resistance genes involved. We analyzed 38 Enterococcus spp. from inpatient or outpatient care from October 2011 to September 2012. 29 isolates E. faecalis and 8 E. faecium were confirmed by conventional biochemical tests, the automated methodology and Polymerase Chain Reaction (PCR). An isolate of Enterococcus spp. was identified by automated equipment as E. casseliflavus, identification was not confirmed by PCR. The evaluation of the antimicrobial susceptibility profiles commonly used in clinical practice were performed by disk diffusion methods and automated. There were differences in the results of sensitivity to penicillin and ampicillin between the two methods. There were no isolated ... / Doutor

Orientador: Jacqueline Teixeira Caramori / Coorientador: Maria de Lourdes Ribeiro de Souza da Cunha / Banca: Pasqual Barretti / Banca: Alessandro Mondelli / Banca: Ronaldo D'Ávila / Banca: Carlos Henrique Camargo / Resumo: Peritonites e infecções do orifício de saída do cateter de diálise representam as principais complicações infecciosas relacionadas à diálise peritoneal, frequentemente respondem pela falência deste método dialítico, portanto com importante impacto na morbidade e mortalidade dos pacientes. Existem associações entre o portador de S. aureus e aumento no risco de infecções nos pacientes tratados por diálise peritoneal. Entretanto, desconhecemos estudos que avaliaram a virulência de Staphylococcus spp. carreados. Fatores de virulência são descritos como responsáveis pelos sintomas e gravidade de diversas infecções causadas por S. aureus. Esses fatores incluem as hemolisinas α, β, γ e δ, lipases, lecitinases, proteases, toxina 1 da Síndrome do Choque tóxico (TSST-1) e as enterotoxinas estafilocócicas (EEs), desoxirribonuclease (DNAse) e de desoxirribonuclease termoestável (TNAse). Este estudo teve como objetivo avaliar se fatores de virulência produzidos por Staphylococcus spp. e as características clinicas e epidemiológicas dos pacientes podem influenciar na ocorrência de infecções relacionadas ao tratamento. Para tal, foram incluídos 32 pacientes tratados por diálise peritoneal na Unidade de Diálise do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu- UNESP, avaliados primariamente quanto à colonização (culturas de coletas nasais e pele pericateter, em três momentos distintos no período de 12 meses) e subsequentemente foram observados quanto ao risco para a ocorrência de infecções, acompanhados por até 36 meses confirmados com culturas do efluente peritoneal na ocorrência de peritonites e secreção da pele pericateter na vigência de infecção de orifício de saída do cateter. As amostras de Staphylococcus spp. carreadas depois de devidamente identificadas, foram reavaliadas usando como critério de similaridade o método de susceptibilidade com ... / Abstract: Peritonitis and infections in the exit orifice of the dialysis catheter represent the main infectious complications related to peritoneal dialysis, and are often responsible for the failure in this dialysis method, therefore with a significant impact on morbidity and mortality of patients. There are associations between the carrier of S. aureus and increased risk of infection in peritoneal dialysis patients. However, studies that evaluated the virulence of Staphylococcus spp. carried are not aware. Virulence factors are described as responsible for the symptoms and severity of different infections caused by S. aureus. These factors include hemolysins α, β, and δ, lipases lecithinases, proteases, toxin 1 in Toxic Shock Syndrome (TSST-1) and staphylococcal enterotoxins (SEs), deoxyribonuclease (DNase) and thermostable deoxyribonuclease (TNAse). This study aimed to evaluate whether virulence factors produced by Staphylococcus spp. and the clinical and epidemiological characteristics of patients may influence the occurrence of infections related to the treatment. In order to do this, 32 patients treated by peritoneal dialysis at the Dialysis Unit of the University Hospital, Botucatu School of Medicine, UNESP, Brazil were included, evaluated primarily by the colonization (cultures collected from the nose and pericatheter skin, at three different times during 12 months) and subsequently were observed regarding the risk for the occurrence of infections, followed by at least 36 months confirmed with cultures from peritoneal effluent in the occurrence of peritonitis and secretion of the pericatheter skin in the occurrence of infection in the outlet orifice of the catheter. Samples of Staphylococcus spp. carriers after being properly identified, were reevaluated using similarity criteria from the method of susceptibility agar drug diffusion technique (Kirby-Bauer method), thus allowing strains selection of ... / Doutor

Orientador: Maria de Lourdes Ribeiro de Souza da Cunha / Coorientador: Luiz Francisco Zafalon / Banca: Ary Fernandes Júnior / Banca: Elizabeth Oliveira da Costa Freitas Guimarães / Resumo: A mastite é uma enfermidade que causa inflamação na glândula mamária e geralmente tem origem infecciosa. É uma das principais doenças que acomete os rebanhos de ovinos causando prejuízos econômicos aos produtores. Na mastite infecciosa, as bactérias do gênero Staphylococcus são os principais causadores de mastite em rebanhos de ovinos. Esses micro-organismos se caracterizam pela capacidade de produzir uma ampla variedade de toxinas extracelulares e outros fatores de virulência como a formação de biofilme, além de apresentarem resistência aos agentes antimicrobianos empregados no tratamento dos animais. Esse estudo teve como objetivos caracterizar o perfil clonal e os fatores de virulência e de resistência aos antimicrobianos em Staphylococcus spp. isolados do leite de ovinos de três rebanhos. Após a realização do California Mastitis Test (CMT) as amostras de leite foram colhidas para contagem de Células Somáticas (CCS) e identificação das espécies de estafilococos isoladas, detecção de genes codificadores de enterotoxinas (sea, seb, sec e sed), da toxina TSST-1, da leucocidina PVL e de biofilme (icaA, icaC, icaD, bap, aap e bhp), além da determinação da resistência a oxacilina pela pesquisa do gene mecA e perfil de sensibilidade a doze antimicrobianos. Os isolados com a presença de genes para toxinas e biofilme foram testados para detecção do RNA mensageiro para avaliação da capacidade de expressão dos fatores de virulência. Foram coletadas 473 amostras de leite de 242 animais, sendo encontrados micro-organismos em 169 (35,7%) amostras. Das 169 amostras em que foram isolados micro-organismos, 132 (78,1%) foram identificados como pertencendo ao gênero Staphylococcus, sendo 20 (15,1%) amostras identificadas como Staphylococcus aureus e as demais 112 (84,9%) como estafilococos coagulase-negativa (ECN). Das 20 amostras de S. aureus isoladas, nenhuma apresentou o gene ... / Abstract: Mastitis is a disease that causes inflammation in the mammary gland and is usually infectious. It is a major disease that affects sheep herds causing economic losses for producers. In infectious mastitis, Staphylococcus bacteria are the major cause of mastitis in sheep flocks. These micro-organisms are characterized by the ability to produce a wide variety of extracellular toxins and other virulence factors such as biofilm formation, besides presenting resistance to antimicrobial agents used in the treatment of animals. This study aimed to characterize the profile and clonal virulence factors and antimicrobial resistance in Staphylococcus spp. isolated from milk of sheep from three flocks. After the completion of the California Mastitis Test (CMT) milk samples were collected for Somatic Cell Count (SCC) and species identification of staphylococci isolated detection of genes encoding enterotoxins (sea, seb, sec and sed), the toxin TSST-1, PVL and Leucocidin of biofilm (icaA, icaC, icaD, bap, aap and bhp), besides the determination of resistance to oxacillin by research mecA and sensitivity profile to twelve antimicrobials. Isolates with the presence of toxin genes and biofilm were tested for the detection of messenger RNA for assessing the ability of expression of virulence factors. We collected 473 milk samples from 242 animals, micro-organisms found in 169 (35.7%) samples. Of the 169 samples that were isolated micro-organisms, 132 (78.1%) were identified as belonging to the genus Staphylococcus, 20 (15.1%) samples identified as Staphylococcus aureus and the remaining 112 (84.9%) as coagulase-negative staphylococci (CNS). Of the 20 samples of S. aureus isolates, none had the mecA and most were sensitive to all drugs tested except one sample that was resistant to tetracycline. Seven samples showed a toxin gene, the gene being the most seb found, present in five samples, followed by sea on three, two ... / Mestre

Orientador: Estevam Guilherme Lux Hoppe / Banca: Adjair Antônio do Nascimento / Banca: Paulo Aléscio Canola / Banca: Daniel Cortes Beretta / Banca: José Ribamar Privado Filho / Resumo: O monepantel, anti-helmíntico de uma nova classe, foi desenvolvido e colocado no mercado recentemente, como solução para criações com helmintos de ovinos multirresistentes. Após pouco tempo de utilização, foram relatados casos de resistência contra o produto. Objetivou-se avaliar o perfil de resistência ao monepantel em criações de ovinos em uma microrregião em torno de Jaboticabal-SP e caracterizar experimentalmente a resistência ao monepantel em isolado de Haemonchus contortus. Foi realizado o teste de redução de ovos em dez propriedades ovinocultoras próximas a Jaboticabal/SP, identificando a eficácia do monepantel e levantando o histórico da utilização do produto para determinação de fatores de risco associados à resistência. Obteve-se isolado de H. contortus resistente para teste crítico. Após coleta de fezes dos animais oriundos de propriedade onde o vermífugo foi ineficaz, obteve-se larvas infectantes que foram inoculadas em dois doadores para obtenção de fêmeas de H. contortus. Larvas infectantes deste isolado foram inoculadas em dez animais. Após confirmada a patência, cinco animais receberam monepantel, grupo tratamento, e cinco não receberam, grupo controle. Exames de OPG foram realizados nos dias 0 (dia do tratamento), 2, 4, 6, 8, 10, 12 e 14 e os animais eutanasiados no dia 14, avaliando o número de H. contortus no abomaso dos animais dos dois grupos. Revelou-se que em duas propriedades o monepantel foi ineficaz, em duas foi eficaz e nas outras seis foi altamente eficaz. Os principais fatores predisponentes detectados foram: intervalos curtos entre vermifugações, não alternância com outras bases químicas, tratamento massivo, raça e intensificação da criação. Observou-se H. contortus resistente após realização do teste crítico com eficácia de 24,65%. Conclui-se que helmintos de ovinos já estão resistentes ao monepantel em criações... / Abstract: Monepantel, anthelmintic of a new class, was recently developed and released to the international market, it was presented as a solution for properties with multirresistant helminthes. However, with little time utilization, were related cases of resistance against this product. The objectives of this work were evaluate the resistance profile of monepantel on sheep creations at a microregion around Jaboticabal-SP and characterize experimentally the monepantel resistance on Haemonchus contortus isolate. Initially, was accomplished egg count reduction test at ten ovine properties located around Jaboticabal-SP, identifying the monepantel efficacy and investigating the history of product use for determination risk factors resistance associated. Posteriorly, a H. contortus resistant isolate was obtained for the critic test. After animals collect stoll of a resistance suspected proprierty, there were obtained infective larvae that were inoculated on two donors for females of H. contortus obtainment and after, infective larvae production for inoculation in ten animals. After patency confirmed, five animals received monepantel, treatment group, and five didn't receive, control group. The treatment day was day 0. Fecal egg counts were performed on days 0, 2, 4, 6, 8, 10, 12 and 14 and the animals were euthanized on day 14, evaluating the H. contortus number in the sheep abomaso of both groups. The results of the fisrt part study revealed the monepantel was ineffective in two properties, was effective in two properties and highly effective on six properties. The risk factors detected were: short interval between anthelmintic treatments, no alternation with other chemical bases, massive treatment, breed, intensification of creation. In a second step, was observed H. contortus resistant after performed the critc test, with an efficacy of 24,65%. We concluded that sheep helminths are already monepantel ... / Doutor

Resumo: Os Staphylococcus aureus são os principais microrganismos causadores de infecções nosocomiais, com uma grande variedade de manifestações clínicas, a variação deste espectro de manifestações geralmente depende dos numerosos fatores de virulência que cada cepa produz, entretanto, a importância desses patógenos está inserida na combinação da virulência mediada por suas toxinas, seu caráter invasivo e seu perfil de resistência a antibióticos. O presente estudo teve por objetivos documentar a disseminação de clones endêmicos e identificar os fatores individuais relacionados à sua aquisição, e relacioná-los a prevalência de fatores de resistência e virulência em cepas de MRSA isoladas de culturas clínicas e/ou de vigilância de pacientes de um hospital de ensino. No presente trabalho 1078 amostras de Staphylococcus aureus provenientes de pacientes internados no Hospital Estadual Bauru foram identificadas e testadas fenotipicamente frente a oxacilina (1 g), cefoxitina (30 g), vancomicina (30 g), eritromicina (15 g) e gentamicina (10 g) sendo que dessas, 810 (75.1%) apresentaram perfil fenotípico para Staphylococcus aureus Resistentes a Meticilina - MRSA. A avaliação genotípica do perfil de resistência foi realizada através da amplificação do gene mecA pela técnica de PCR onde foi observado que das 443 amostras testadas foi detectado o gene mecA em 336 amostras (75.8%), e que dessas, 305 amostras (90.8%) apresentaram perfil SCCmec Tipo III ou Tipo IIIA, 6 amostras (1.8%) Tipo II e 25 amostras (7.4%) Tipo IV. A avaliação do perfil genotípico de virulência mostrou a seguinte distribuição, 15.6% (n=69) genes da Leucocidina de Panton Valentine (lukPV), 14% (n=62) gene da Síndrome do Choque Tóxico (tst), 31.8% (n=141) gene da Enterotoxina A (sea), 19.8% (n=88) gene da Enterotoxina B (seb), 38.1% (n=169) gene da... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Staphylococcus aureus are the most common microorganisms causing nosocomial infections, with a wide variety of clinical manifestations, the variation of the spectrum of manifestations generally depends upon the numerous virulence factors that each strain produces, however, the importance of these pathogens is included in the combination of virulence mediated by their toxins, its invasive nature and profile of antibiotic resistance. This study aimed to document the spread of endemic clones and identify the individual factors related to its acquisition, and relate them to the prevalence of resistance and virulence factors in strains of MRSA isolated from clinical cultures and / or surveillance patients a teaching hospital. In this study 1078 samples of Staphylococcus aureus from hospitalized patients in Bauru State Hospital were identified phenotypically and tested against oxacillin (1  g), cefoxitin (30  g), vancomycin (30  g), erythromycin (15  g) and gentamicin (10  g) and that these, 810 (75.8%) showed phenotypic profile for Methicillin Resistant Staphylococcus aureus - MRSA. The evaluation of genotypic resistance profiles was performed by amplification of the mecA gene by PCR where it was observed that of 443 samples tested was detected mecA gene in 336 samples (75.8%), and that these, 305 samples (90.8%) profile were SCCmec type III or type IIIA, six samples (1.8%) type II and 25 samples (7.4%) type IV. The evaluation of virulence genotype was distributed as follows, 15.6% (n = 69) genes of Panton Valentine Leukocidin (lukPV), 14% (n = 62) gene for toxic shock syndrome (tst), 31.8% (n = 141) gene of enterotoxin A (sea), 19.8% (n = 88) gene of enterotoxin B (seb), 38.1% (n = 169) gene of enterotoxin C (sec-1), 100% (n = 443) Delta Hemolysin gene (hld), 99.5% (n = 441) Alpha Hemolysin gene (hla), 0.9% (n = 4) Exfoliative toxin A (eta), 3.6% (n = 16) Exfoliative... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Maria de Lourdes Ribeiro de Souza da Cunha / Coorientador: Carlos Magno Castelo Branco Fortaleza / Banca: Antonio Carlos Pignatari / Banca: Maria Clara Padoveze Fonseca Barbosa / Banca: Ana Marisa Fusco Almeida / Doutor