Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2007 / Bibliografia: p. 73-83 / Acupuntura é uma técnica milenar que consiste na inserção de agulhas no corpo em locais especificamente definidos para fins terapêuticos. Com o avanço dos recursos tecnológicos associou-se a esta técnica estímulos elétricos originando a eletroacupuntura, / Acupuncture is a millenarian technique that consists of the insertion of needles inside the body in places specifically defined for therapeutically goals. With the progress of the technological resources, it was associated to nervous electrical stimulatio

Dor neuropática (DN) é definida como “dor iniciada ou causada por lesão primária ou disfunção em sistema nervoso”, porém sua prevalência depende do tipo de trauma e da disfunção relacionada. Apesar desta condição dolorosa ser considerada altamente prevalente e debilitante, os tratamentos disponíveis são relacionados a efeitos adversos dificultando a adesão. Devido a isso, buscam-se alternativas não farmacológicas para o tratamento deste tipo de dor, entre elas, as técnicas de neuromodulação periférica, como acupuntura (AC) e eletroacupuntura (EA). Estas técnicas podem ser combinadas com intervenções farmacológicas e não farmacológicas e têm apresentado resultados promissores no tratamento da dor neuropática. No entanto, seus mecanismos de ação não estão totalmente elucidados, desta forma a utilização de modelos animais é de grande valia para o estudo destes mecanismos no tratamento da dor neuropática e da patofisiologia deste tipo de dor crônica. É importante salientar que a aplicação de AC e EA em animais acordados é complexa, visto que gera desconforto e pode alterar a analgesia induzida pelo tratamento. Em muitos estudos a anestesia com isoflurano é utilizada durante a aplicação dos tratamentos, porém sua utilização pode gerar um viés no estudo, considerando a possível interferência do fármaco nos resultados comportamentais e neuroquímicos. Outro importante foco de estudo consiste em comparar as duas técnicas, AC e EA, buscando determinar qual destas é a mais eficaz no tratamento da dor neuropática. Considerando o exposto acima, os objetivos desta tese foram: 1) avaliar os parâmetros comportamentais e neuroquímicos dos efeitos da utilização de anestesia na aplicação de AC e EA em ratos submetidos ao modelo de DN; 2) comparar os efeitos da AC e EA em modelo animal de DN por meio de parâmentros comportamentais, neuroquímicos e histológicos. Considerando os resultados obtidos nesta tese, concluímos que o isoflurano aumenta a analgesia promovida por AC e EA, provavelmente diminuindo o efeito do estresse gerado pela aplicação dos tratamentos em animais acordados, resultado que é corroborado pela diminuição do nível de S100β periférico (marcador de morte neuronal central); Por outro lado, o isoflurano diminuiu os níveis de fator de crescimento neuronal (NGF) no nervo periférico lesado, indicando diminuição do processo de regeneração neural, enquanto a EA aumentou. Ao mesmo tempo, o isoflurano alterou os efeitos dos tratamentos nos comportamentos exploratórios e nos níveis de N-metil D-aspartato em tronco encefáfio e medula espinhal. A AC apresentou-se mais eficaz no tratamento da DN em comparação à EA, porém nenhum dos tratamentos foi capaz de alterar os danos causados pela indução da DN no músculo gastrocnemio esquerdo dos animais demonstrado na histologia. Todavia, este resultado não alterou a analgesia gerada pelos tratamentos. / Neuropathic pain (NP) is defined as "pain initiated or caused by primary injury or dysfunction in the nervous system," but its prevalence depends on the type of trauma and related dysfunction. Although this painful condition is considered to be highly prevalent and debilitating, the available treatments are related to adverse effects, making adherence difficult. Because of this, non-pharmacological alternatives for the treatment of this type of pain are sought, among them, the techniques of peripheral neuromodulation, such as acupuncture (AC) and electroacupuncture (EA). These techniques can be combined with pharmacological and non-pharmacological interventions and have shown promising results in the treatment of neuropathic pain. However, its mechanisms of action are not fully elucidated, so the use of animal models is of great value for the study of these mechanisms in the treatment of neuropathic pain and the pathophysiology of this type of chronic pain. It is important to emphasize that the application of AC and EA in awake animals is complex, since it generates discomfort and can alter the analgesia induced by the treatment. In many studies, anesthesia with isoflurane is used during the application of the treatments, but its use may generate a bias in the study, considering the possible interference of the drug in the behavioral and neurochemical results. Another important focus of the study is to compare the two techniques, AC and EA, seeking to determine which is the most effective in the treatment of neuropathic pain. Considering the above, the objectives of this thesis were: 1) to evaluate the behavioral and neurochemical parameters of the effects of the use of anesthesia in the application of AC and EA in rats submitted to the DN model; 2) to compare the effects of AC and EA on animal model of DN by means of behavioral, neurochemical and morphological parameters. Considering the results obtained in this thesis, we conclude that isoflurane increases the analgesia promoted by AC and EA, probably decreasing the effect of the stress generated by the application of the treatments in agreed animals, a result that is corroborated by the decrease in the level of peripheral S100β (biomarker of central neuronal injury); On the other hand, isoflurane decreased the levels of neural grown factor (NGF) in the injured peripheral nerve, indicating a decrease in the neural regeneration process, while the EA increased. At the same time, isoflurane altered the effects of treatments on exploratory behaviors and N-metil-D-aspartato (NMDA) levels in the brainstem and spinal cord. AC was more effective in the treatment of DN compared to EA, but none of the treatments was able to alter the damage caused by DN induction in the left gastrocnemius muscle of the animals showed in histology. However, this result did not alter the analgesia generated by the treatments.

Made available in DSpace on 2016-08-29T15:37:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_3368_.pdf: 1259626 bytes, checksum: 291c0db1b7b2757a314245862af6f82e (MD5) Previous issue date: 2010-02-22 / A dor é uma resposta protetora do organismo a estímulos nocivos, que resulta em efeitos indesejáveis quando não controlada. A analgesia pode ser promovida mediante a utilização de vários fármacos que podem causar efeitos adversos, de acordo com a espécie e condição física do paciente. A acupuntura tem se mostrado eficaz como coanalgésico, pois diminui a quantidade de fármacos utilizados para o controle da dor, sem promover efeitos adversos. Assim, buscou-se avaliar os efeitos da eletroacupuntura, aquapuntura e farmacopuntura com morfina nos acupontos TA5 e VB41, sobre parâmetros cardiorrespiratórios, consumo de isofluorano e analgesia no pós-operatório imediato em cadelas submetidas à ovariohisterectomia. Foram utilizados 24 animais, distribuídos igualmente e aleatoriamente em quatro grupos (GDest, GMorf, GElet e GC). Esses foram anestesiados com acepromazina, propofol e isofluorano. Após a estabilização do plano anestésico, os animais do GDest receberam 0,5 mL de água destilada em cada acuponto; nos do GMorf administrou-se morfina na dose de 0,1 mg/kg (dose total por animal) diluída em água destilada, quando necessário, até atingir o volume de 0,5 mL em cada ponto; no GElet, estímulo pela eletroacupuntura; e o GC acupuntura em pontos Sham. Em todos os grupos a acupuntura foi realizada bilateralmente. Os animais do GC receberam após o término do procedimento cirúrgico, e antes do início da avaliação pós-operatória, 2,0 mg/kg de tramadol. Durante o transcirúrgico foram avaliadas as variáveis: temperatura retal, frequência respiratória, frequência cardíaca, pressão arterial média, glicose sanguínea, saturação de oxiemoglobina, volume de vapor inspirado de isofluorano e eletrocardiografia. No pós-operatório, foram avaliadas as variáveis fisiológicas: frequência cardíaca e respiratória, temperatura retal e glicose sanguínea. A avaliação da dor pós-operatória foi realizada por três observadores, utilizando a Escala de Analogia Numérica (EAN) e Escala de Dor da Universidade de Melbourne. A avaliação da dor, iniciada após a extubação dos animais, foi realizada durante duas horas, em intervalos de 15 minutos. Não houve diferença estatística entre os grupos em todas as variáveis estudadas no transcirúrgico, contudo, observou-se redução do volume de vapor inspirado de isofluorano em 5,08%, 10,84% e 25,42% para os grupos GDest, GMorf e GElet, quando comparados ao GC. No pós-operatório, não houve diferença estatística entre os grupos para todas as variáveis. Os resultados obtidos demonstram que a eletroacupuntura nos pontos TA5 e VB41, é superior a aquapuntura e farmacopuntura com morfina na redução do volume de isofluorano inspirado e estabilidade cardíaca, durante o transcirúrgico. No pós-operatório imediato, as técnicas estudadas resultam em analgesia similar ao tramadol. Palavras chave: analgesia, aquapuntura, eletroacupuntura, farmacopuntura, cães. / Pain is a protective answer of the organism to harmful impulses, which results in undesirable effects when not controlled. Analgesia can be achieved by utilizing several drugs that may cause adverse effects, according to the patient’s species and physical condition. Acupuncture has been an efficient co-analgesic, as it reduces the amount of drugs utilized to control the pain, without adverse effects. Therefore, we assessed the effects of electroacupuncture, acquapuncture, and pharmacopuncture with morphine in the TA5 and VB41 acupoints, with regards to cardiorespiratory parameters, consumption of isoflurane and analgesia in the immediate postoperation of dogs undergoing ovariohysterectomy. 24 animals were utilized, equally and randomly distributed into four groups (GDest, GMorf, GElet, and GC). Those were anesthetized with acepromazine, propofol, and isoflurane. After the anesthetic plan stabilization, the GDest group animals received 0.5ml of distilled water in each acupoint, the GMorf group animals received morphine in the 0.1mg/kg dose (total dose per animal) diluted in distilled water, whenever required, until reaching the 0.5ml volume in each point, the GElet group animals received impulses by electroacupuncture, and the GC group animals received acupuncture in Sham points. Acupuncture was performed bilaterally In all groups. The GC group animals received 2.0mg/kg of tramadol after surgical procedure completion and before starting the post-operation assessment. The following variables were assessed during trans surgery: Rectal temperature, respiratory rate, heart rate, average blood pressure, blood glucose, oxyhemoglobin saturation, volume of inspired isoflurane vapor, and electrocardiography. The following physiological variables were assessed in postsurgery: Heart and respiratory rates, rectal temperature, and blood glucose. The post-surgery pain assessment was performed by three observers, utilizing the Numerical Analog Scale (Escala de Analogia Numérica (EAN)) and the Melbourne University Pain Scale (Escala de Dor da Universidade de Melbourne). The pain assessment, initiated after animal extubation, was performed during two hours, with 15-minute intervals. There was no static difference among the groups in all trans surgery studied variables, however, the reduction of inspired isoflurane vapor volume of 5.08%, 10.84%, and 25.42% was noticed for the GDest, GMorf, and GElet groups, when compared to the GC group. In the post-surgery, there was no static difference among the groups for all variables. The obtained results demonstrate that electroacupuncture at TA5 and VB41 points, is superior to acquapuncture and pharmacopuncture with morphine in the reduction of inspired isoflurane volume and heart stability, during trans surgery. In immediate post-surgery, the studied techniques result in analgesia similar to tramadol.

Dor neuropática (DN) é definida como “dor iniciada ou causada por lesão primária ou disfunção em sistema nervoso”, porém sua prevalência depende do tipo de trauma e da disfunção relacionada. Apesar desta condição dolorosa ser considerada altamente prevalente e debilitante, os tratamentos disponíveis são relacionados a efeitos adversos dificultando a adesão. Devido a isso, buscam-se alternativas não farmacológicas para o tratamento deste tipo de dor, entre elas, as técnicas de neuromodulação periférica, como acupuntura (AC) e eletroacupuntura (EA). Estas técnicas podem ser combinadas com intervenções farmacológicas e não farmacológicas e têm apresentado resultados promissores no tratamento da dor neuropática. No entanto, seus mecanismos de ação não estão totalmente elucidados, desta forma a utilização de modelos animais é de grande valia para o estudo destes mecanismos no tratamento da dor neuropática e da patofisiologia deste tipo de dor crônica. É importante salientar que a aplicação de AC e EA em animais acordados é complexa, visto que gera desconforto e pode alterar a analgesia induzida pelo tratamento. Em muitos estudos a anestesia com isoflurano é utilizada durante a aplicação dos tratamentos, porém sua utilização pode gerar um viés no estudo, considerando a possível interferência do fármaco nos resultados comportamentais e neuroquímicos. Outro importante foco de estudo consiste em comparar as duas técnicas, AC e EA, buscando determinar qual destas é a mais eficaz no tratamento da dor neuropática. Considerando o exposto acima, os objetivos desta tese foram: 1) avaliar os parâmetros comportamentais e neuroquímicos dos efeitos da utilização de anestesia na aplicação de AC e EA em ratos submetidos ao modelo de DN; 2) comparar os efeitos da AC e EA em modelo animal de DN por meio de parâmentros comportamentais, neuroquímicos e histológicos. Considerando os resultados obtidos nesta tese, concluímos que o isoflurano aumenta a analgesia promovida por AC e EA, provavelmente diminuindo o efeito do estresse gerado pela aplicação dos tratamentos em animais acordados, resultado que é corroborado pela diminuição do nível de S100β periférico (marcador de morte neuronal central); Por outro lado, o isoflurano diminuiu os níveis de fator de crescimento neuronal (NGF) no nervo periférico lesado, indicando diminuição do processo de regeneração neural, enquanto a EA aumentou. Ao mesmo tempo, o isoflurano alterou os efeitos dos tratamentos nos comportamentos exploratórios e nos níveis de N-metil D-aspartato em tronco encefáfio e medula espinhal. A AC apresentou-se mais eficaz no tratamento da DN em comparação à EA, porém nenhum dos tratamentos foi capaz de alterar os danos causados pela indução da DN no músculo gastrocnemio esquerdo dos animais demonstrado na histologia. Todavia, este resultado não alterou a analgesia gerada pelos tratamentos. / Neuropathic pain (NP) is defined as "pain initiated or caused by primary injury or dysfunction in the nervous system," but its prevalence depends on the type of trauma and related dysfunction. Although this painful condition is considered to be highly prevalent and debilitating, the available treatments are related to adverse effects, making adherence difficult. Because of this, non-pharmacological alternatives for the treatment of this type of pain are sought, among them, the techniques of peripheral neuromodulation, such as acupuncture (AC) and electroacupuncture (EA). These techniques can be combined with pharmacological and non-pharmacological interventions and have shown promising results in the treatment of neuropathic pain. However, its mechanisms of action are not fully elucidated, so the use of animal models is of great value for the study of these mechanisms in the treatment of neuropathic pain and the pathophysiology of this type of chronic pain. It is important to emphasize that the application of AC and EA in awake animals is complex, since it generates discomfort and can alter the analgesia induced by the treatment. In many studies, anesthesia with isoflurane is used during the application of the treatments, but its use may generate a bias in the study, considering the possible interference of the drug in the behavioral and neurochemical results. Another important focus of the study is to compare the two techniques, AC and EA, seeking to determine which is the most effective in the treatment of neuropathic pain. Considering the above, the objectives of this thesis were: 1) to evaluate the behavioral and neurochemical parameters of the effects of the use of anesthesia in the application of AC and EA in rats submitted to the DN model; 2) to compare the effects of AC and EA on animal model of DN by means of behavioral, neurochemical and morphological parameters. Considering the results obtained in this thesis, we conclude that isoflurane increases the analgesia promoted by AC and EA, probably decreasing the effect of the stress generated by the application of the treatments in agreed animals, a result that is corroborated by the decrease in the level of peripheral S100β (biomarker of central neuronal injury); On the other hand, isoflurane decreased the levels of neural grown factor (NGF) in the injured peripheral nerve, indicating a decrease in the neural regeneration process, while the EA increased. At the same time, isoflurane altered the effects of treatments on exploratory behaviors and N-metil-D-aspartato (NMDA) levels in the brainstem and spinal cord. AC was more effective in the treatment of DN compared to EA, but none of the treatments was able to alter the damage caused by DN induction in the left gastrocnemius muscle of the animals showed in histology. However, this result did not alter the analgesia generated by the treatments.

O objetivo deste ensaio clínico cego randomizado foi de observar a influência das terapias com eletroacupuntura e laser-acupuntura no retorno da sensibilidade tátil e dolorosa após cirurgia ortognática combinada e mentoplastia. Foram selecionados trinta voluntários com indicação para cirurgia ortognática, os quais foram avaliados através de fotografias e exame físico, divididos aleatoriamente em três grupos de tratamento: grupo controle, que consistiu na utilização de medicação associada à aplicação de laser placebo nos pontos de acupuntura (Grupo 0) e os grupos experimentais, que consistiram na utilização de medicação associada à eletroacupuntura (Grupo 1) ou à laser-acupuntura (Grupo 2). Para cada tratamento experimental (eletroacupuntura ou laser-acupuntura) realizado em uma hemi-face do voluntário, foi feito o tratamento controle na outra hemi-face (n=15). O Grupo 0 consistiu no uso de medicações prescritas convencionalmente (decadron 8 mg; kefazol 1,0 g; zylium 50 mg; zofran 8 mg; dipirona 2 ml; keflex 500 mg; miosan 10 mg). No Grupo 1, além da medicação, foram colocadas agulhas descartáveis de acupuntura em pontos pré-determinados [E-4(dicang), M-CP-18(Jiachengjiang), VC-24(chengjiang), E-5 (daying), E-6 (jiache) e ponto A1(YNSA)] e os eletrodos foram conectados nas agulhas. Para a eletroestimulação, foram utilizados os seguintes parâmetros: TENS (estimulação nervosa elétrica transcutânea) que mensura modo acupuntura, tipo Burst, com variação de intensidade e frequência, com período (T) de 220 ms e frequência de 4 Hz, por 30 minutos, 2x/semana. No Grupo 2, além da medicação, a irradiação com laser de baixa potência (780 nm) foi realizada nos pontos de acupuntura, considerando os seguintes parâmetros:, área do spot de 0,04 cm2, 70 mW, 6 s/por ponto de irradiação, 0,42 J por ponto de irradiação, densidade de energia de 10 J/cm2, 2x/semana. Todos os voluntários foram avaliados antes de realizarem a cirurgia ortognática e foram tratados e avaliados a partir do sétimo dia pós-operatório. A avaliação foi realizada antes do início de cada sessão clínica de tratamento (antes da próxima intervenção terapêutica). O acompanhamento foi realizado duas vezes por semana, até completar quatro meses do início do atendimento. Foram realizados os seguintes testes: avaliação mecânica por pincelamento (pincéis nº 2 e nº 12); teste de discriminação de dois pontos com o compasso de duas pontas secas, para testar a discriminação de dois pontos (ambos testes táteis) e o teste elétrico pulpar, para estimular nervos intactos no complexo dentina-polpa através de uma aplicação de corrente elétrica na superfície do dente (teste para sensibilidade dolorosa). Todos os dados coletados nas sessões de avaliação foram transcritos para fichas específicas de avaliação e as respostas aos testes foram categorizadas em 2 níveis (com ou sem sensibilidade). Foram realizados os testes de Kaplan-Meier e as curvas de sobrevida foram traçadas para comparação entre os grupos. Os tempos medianos para o retorno da sensibilidade foram calculados e as diferenças entre as curvas de sobrevida dos diferentes tratamentos foi calculada através do teste de logrank. Também foram realizadas análises de regressão de Cox com fragilidade compartilhada para avaliar o efeito dos diferentes tratamentos no retorno da sensibilidade. O nível de significância adotado para todas as análises foi de 5%. Não houve diferenças estatisticamente significativas entre os grupos nos testes de discriminação de dois pontos, tátil do pincel nº 2, tátil do pincel nº 12 (na região de mucosa vestibular) e pulp tester de todas as regiões avaliadas. Porém, no teste tátil do pincel nº 12 houve diferenças estatisticamente significativas entre o grupo de eletroacupuntura e os demais grupos nas regiões de lábio inferior (p=0,024) e mento (p=0,028). Dentro dos limites do presente estudo clínico, pode-se concluir que apenas a eletroacupuntura foi capaz de influenciar positivamente, com uso do teste de pincelamento (nº12), o retorno da sensibilidade tátil nas regiões de mento e lábio inferior após cirurgia ortognática combinada e mentoplastia. / The objective of this randomized, blinded clinical trial was to observe the influence of electroacupuncture and laser-acupuncture in the return of tactile and pain sensitivity in patients submitted to combined orthognathic surgery and genioplasty. Thirty volunteers were selected with indication for orthognathic surgery, which were evaluated under photographs and physical examination and were randomly divided into three treatment groups: control group, which consisted of the use of medication associated with the application of laser placebo in acupuncture points (Group 0) and experimental groups, which consisted in the use of medication associated with electroacupuncture (Group 1) or laser-acupuncture (Group 2). For each experimental group (electro-acupuncture or laser-acupuncture) that was conducted on the volunteer\'s hemi- face, there was a control group on the other hemi-face (n = 15). Group 0 consisted on the use of conventionally prescribed medications (decadron 8 mg; Kefazol 1.0g, zylium 50 mg, 8 mg Zofran; dipyrone 2 ml; keflex 500mg, Miosan 10 mg). In group 1, medication was associated with acupuncture needles that were placed at predetermined points [E-4 (Dicang), F-HN-18 (Jiachengjiang), VC-24 (Chengjiang) E-5 (daying) E-6 (Jiache) and point A1 (YNSA)] and electrodes were connected to these needles. For electrostimulation, the following parameters were used: TENS (transcutaneous electrical nerve stimulation) which measures acupuncture mode, burst type, with intensity and frequency variation, with period (T) of 220 ms and a frequency of 4 Hz for 30 minutes, twice a week. In Group 2, in addition to the medication, irradiation with low power laser (780 nm) was done on acupuncture points by considering the following parameters: beam area of 0.04 cm2, 70 mW, exposure time of 6 s/point, energy of of 0.42 J per irradiation point, energy density of 10 J/cm2, twice a week. All volunteers were evaluated before the orthognathic surgery and were treated and evaluated after 7 days of the surgery. The evaluation was conducted before the beginning of each clinical session (before the next intervention). The monitoring of tactile and pain sensitivity was carried out twice a week up to four months from the beginning of the treatment. The following tests were performed: assessment by mechanical brushing (nº2 and nº12) and by two-points discrimination test using a bow compass (both tactile tests). Also, pulp electrical test was conducted to stimulate intact nerves of the dentin-pulp complex, by applying electric current on the tooth surface (pain test). Data collected throughout the clinical sessions were transcribed to specific evaluation forms and responses to tests were categorized into 2 levels (with or without sensitivity). Kaplan-Meier test was performed and survival curves were plotted for comparison between groups. The average time for the return of sensitivity was calculated for each group, and differences between the survival curves of the different treatments were calculated using the log rank test. Cox regression analyzes was also conducted with shared weakness to evaluate the effect of different treatments on the return of sensitivity. The significance level for all analyzes was set at 5%. There were no statistically significant differences between groups for the two-points discrimination test (brush nº 2 and nº 12) in the buccal mucosa region and for the pulp test on all evaluated regions. However, the tactile test using brush nº 12 revealed significant differences between the electroacupuncture group and the other groups when considering the lower lip (p = 0.024) and chin (p = 0.028) areas. Within the limits of the present clinical study, it can be concluded that only electroacupuncture was able to positively influence, using the brushing test (nº 12), the return of tactile sensitivity on chin and lower lip after combined orthognathic surgery and genioplasty.

Orientador: Edson Rosa Pimentel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-17T20:40:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_MarcosdosSantosde_M.pdf: 1553509 bytes, checksum: 83b5ab6bad050eff3b5f36b0524643b3 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: A eletroacupuntura (EA) tem sido utilizada amplamente para o tratamento de uma variedade de doenças inflamatórias e para o alivio da dor. No entanto, não há relatos na literatura sobre o efeito da EA na composição e organização da matriz extracelular (MEC) de tendões em processo de cicatrização. Objetivo: Investigar através de análises bioquímicas e morfológicas, o efeito da EA durante o pico de síntese dos componentes da MEC, 15 dias após transecção parcial do tendão calcâneo de ratos. Materiais e Métodos: Ratos Wistar machos com 60 dias de idade foram divididos em 3 grupos: Não tenotomizados (G1), tenotomizados (G2) e tenotomizados e submetidos a EA (G3). Agulhas de acupuntura (AC) foram inseridas nos pontos E-36 e B-57 e uma corrente elétrica com onda farádica bipolar assimétrica na freqüência de 2 Hz e intensidade de 2-4 Volts foi aplicada nas agulhas por 20 minutos, 3 vezes por semana em dias alternados, em um total de 6 sessões. Análises bioquímicas foram feitas através da SDS-PAGE, dosagem de proteínas não colagênicas (PNCs), glicosaminoglicanos (GAGs) e hidroxiprolina. Análise da metaloproteinase-2 (MMP-2) foi realizada por zimografia. Para análise morfológica em microscopia de luz comum, os cortes foram corados com hematoxilina-eosina (HE) e azul de toluidina (AT). Para análise em microscopia de polarização os cortes foram corados com Ponceau SS e a birrefringência foi avaliada em termos de valor de média de cinza em pixels utilizando um analisador de imagem. Resultados: EA nos pontos utilizados não alterou a concentração de PNCs, GAGs ou a atividade enzimática da MMP-2 nos tendões transeccionados. Já a concentração de hidroxiprolina foi significativamente aumentada nestes tendões quando tratados com EA. Na análise morfológica nos cortes corados com HE e AT, aparentemente não houve alterações na composição nem na organização da MEC. No entanto, na análise da birrefringência houve uma maior reorganização das fibras de colágeno no grupo tratado com EA. Conclusão: Nossos resultados indicam que a EA pode oferecer benefícios terapêuticos para o tratamento de lesões tendíneas através do aumento do conteúdo do colágeno e da reorganização molecular de suas fibras / Abstract: Electroacupuncture (EA) has been used to treat a variety of inflammatory diseases and pain relief. Therefore, there are no reports in the literature about the effect of EA on the composition and organization of the extracellular matrix (ECM) of tendons in the healing process. Objective: To investigate by morphological and biochemical analysis, the effect of EA during the peak of synthesis of ECM components, 15 days after partial transection of the Achilles tendon of rats. Methods: Male Wistar rats with 60 days old were divided into three groups: no tenotomized (G1), tenotomized (G2) and tenotomized and submitted to EA (G3). Acupuncture (AC) needles were inserted in the E-36 and B-57 points and an electrical current with asymmetrical bipolar faradic wave at frequency of 2 Hz and intensity of 2-4 Volts was applied to the needles for 20 minutes, 3 times per week on alternate days, for a total of 6 sessions. Biochemical analyses were done by SDS-PAGE, dosage of non collagenous proteins (NCPs), glycosaminoglycans (GAGs) and hydroxyproline. Analysis of metalloproteinase-2 (MMP-2) was carried out by zymography. For morphological analyses, the sections were stained with hematoxilin-eosin (HE) and toluidine blue. For polarization microscopy analysis the sections were stained with Ponceau SS and birefringence was evaluated in terms of gray average values in pixels using an image analyzer. Results: EA at points used did not alter the concentration of NCPs, GAGs or the enzymatic activity of MMP-2 in transected tendons. However, the concentration of hydroxyproline was significantly increased when these tendons were treated with EA. In the morphological analysis, apparently there were no changes in the composition and organization of the ECM. However, analysis of the birefringence showed higher reorganization of collagen fibers in the group treated with EA. Conclusion: Our results indicate that EA may offer therapeutic benefits for treatment of tendon injuries by increasing the content of collagen and the molecular reorganization of its fibers / Mestrado / Anatomia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Repeated injections of acidic saline into the gastrocnemius muscle in rats produce a bilateral long-lasting hiperalgesia similar to fibromyalgia syndrome in humans. After the induction, it´s possible to test the efficacy of analgesic strategies such as electroacupuncture and acupuncture. This study aimed to identify the effects of acupuncture and electroacupuncture in the hyperalgesia produced by repeated intramuscular injections of acidic saline. Twenty four male Wistar rats were divided into four groups (n = 6, in each group): control, acupuncture, electroacupuncture (EA) 15 Hz and (EA) 100 Hz. Left gastrocnemius muscle from all animals was injected with 100 μL of pH 4.0 sterile saline twice five days apart. Electroacupuncture, acupuncture or control was daily administered (20 min) for 5 consecutive days under isoflurane anesthesia (2% 5%). Needles were placed in the Zuzanli (St36) and Sanyinjiao (SP6). We assessed the secondary mechanical hyperalgesia, thermal hyperalgesia and motor performance before the two injections, and before and after the treatment each day. The results indicate that there was a significant reduction of both mechanical withdrawal threshold and paw withdrawal latency 24 hours following the second injection. Therefore, both mechanical and thermal hyperalgesia were significantly reversed by EA 15 Hz, EA 100 Hz and acupuncture. It can be suggested that as high and low frequency eletroacupuncture as acupuncture is effective in hiperalgesia reducing in this model of chronic muscle pain. / Repetidas injeções de salina ácida no músculo gastrocnêmio de ratos produzem uma hiperalgesia bilateral de longa duração semelhante a fibromialgia em humanos. Após esta indução, é possível analisar a eficácia de modalidades analgésicas como a acupuntura e eletroacupuntura. O objetivo deste estudo foi identificar o efeito da eletroacupuntura e acupuntura na hiperalgesia bilateral produzida por dupla injeção intramuscular de salina ácida. Foram utilizados 24 ratos Wistar machos, divididos em quatro grupos: controle, acupuntura, eletroacupuntura (EA) de 15 Hz e EA de 100 Hz. No músculo gastrocnêmio esquerdo de todos os animais, foi injetado um volume de 100 μL de solução salina estéril pH 4,0 em duas ocasiões, com intervalo de 5 dias entre elas. O tratamento com EA foi feito diariamente por 5 dias consecutivos, com duração de 20 minutos. Os animais foram anestesiados com isoflurano (2% -5%) para possibilitar a intervenção. As agulhas foram colocadas nos pontos Zuzanli (St36) e Sanyinjiao (SP6). Foram avaliados a hiperalgesia mecânica secundária, hiperalgesia térmica e desempenho motor antes das duas injeções, e antes e após o tratamento. Os resultados indicam que ocorreu uma redução significativa do limiar mecânico e da latência térmica 24 horas após a segunda injeção. Além disso, houve reversão significativa da hiperalgesia mecânica e térmica após administração de EA 15 Hz, EA 100 Hz e acupuntura. Estes dados sugerem que tanto a EA em alta ou baixa freqüência quanto a acupuntura são eficazes na redução da hiperalgesia neste modelo de dor muscular crônica.

O fato da acupuntura ser atualmente considerada eficaz no tratamento de muitos processos patológicos e do fígado ser um órgão alvo de muitas enfermidades tanto em animais como em seres humanos, motivou a realização deste estudo que tem por objetivo verificar o efeito da eletroacupuntura durante a progressão de lesões hepáticas e o seu relacionamento com o funcionamento do órgão através da análise concomitante de marcadores sanguíneos de lesões hepáticas (MSLH). O trabalho foi realizado em ratos albinos (Wistar), machos, com um peso aproximado de 250g, identificados e distribuídos em 7 lotes (CP, CT, CI, E36, E36s, BP6, BP6s), N= 10. Os animais dos lotes: CP, CT e CI foram usados como controle; CP na determinação dos MSLH: alanina aminotransferase (ALT), aspartato aminotransferase (AST), - glutamil transferase (GGT), fosfatase alcalina (ALPK), albumina (ALB), proteína total (TP) e bilirrubina total; CT cujos animais receberam apenas o agente hepatotóxico tioacetamida (25 mg/100g) por via intraperitoneal três vezes por semana, durante 7 semanas e o lote CI, no qual os animais, além dos mesmos procedimentos de CT, também foram submetidos ao anestésico usado no experimento (isoflurano) pelo tempo de 20 minutos, objetivando analisar se esse anestésico teve alguma influência nos resultados do trabalho. Quanto aos demais grupos, E36 recebeu os mesmos procedimentos de CI e seus componentes foram tratados com eletroacupuntura no ponto Zusanli (E-36). E36s recebeu procedimentos similares aos de E36, porém a eletroestimulação foi aplicada em um não-ponto de acupuntura (E36 Sham) localizado próximo ao E36 verdadeiro. Os animais de BP6 tiveram os mesmos procedimentos de E36 diferindo somente na eletroacupuntura, que foi aplicada no ponto Sanyinjiao (BP-6). No lote BP6s os procedimentos foram os mesmos realizados em BP6, porém a eletroestimulação foi realizada em um nãoponto de acupuntura (BP6 Sham) localizado próximo ao ponto BP6 verdadeiro. Numa etapa seguinte, os animais dos nove grupos, tiveram seus fígados coletados para estudo histológico, tendo sido comparado os parâmetros bioquímicos obtidos, com objetivo de analisar se as alterações morfológicas e funcionais dos fígados tiveram influência da eletroacupuntura. Resultados: Os MSLH apresentaram como resultados: marcador ALB nos lotes: CP (2,97±0,3529) com CI(2,46±0,3134) e marcador TP nos lotes CP (6,53±0,2452) com CI(5,73±0,4057) provando haver interferência do isoflurano; marcador ALB nos lotes CI com BP6 (2,84±0,2675) e BP6 com E36s (2,4±0,2828), marcador ALT nos lotes CI com BP6 e BP6 com E36s e marcador AST nos lotes BP6 com E36s, todos provando e eficácia do ponto de acupuntura BP6. Os resultados histológicos confirmaram a atuação da tioacetamida (TAA) nos animais (exceto os do lote CP), através das seguintes lesões: inflamação focal, apoptose, necrose em saca-bocado (Piecemeal-necrosis), necrose e inflamação portal, para as análises em Hematoxilina-Eosina e expansão fibrosa e pontes de colágeno para as colorações em Picrossirius. Essas lesões foram achadas nos lotes: CT, CI, E36s, BP6s, E36 e BP6, porém, nos dois últimos ocorreram em menor grau indicando a atuação de eletroacupuntura sobre a morfologia hepática. / The fact o acupuncture have being considered an efficient method to treat lots of diseases and, being the liver, in men and animals, a common susceptible organ, this research was inspired to verify the electroacupuncture effect in hepatic lesion progression and its relationship with the liver performance at the same time that sanguinenous hepatic lesions markers (MSLH) was analysed. Each one identified, male wistar rats arround 250g was ditribucted in 7 (seven) groups, N=10: CP, CT, CI, ST36, ST36s, SP6 and SP6s. The first three was control-groups: CP to be these MSLH reference: alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), gamma-glutamyl transpeptidase (GGT), alkaline phosphatase (ALKP), albumin.(ALB), total protein (TP) and total bilirubin (TB); CT had the animals receiving only the hepatotoxic agent thioacetamide (25mg/100g) interperitoneal pathway, 3 (three) a week, for 7 (seven) weeks and CI had the same last proceedment increased for 20 minutes in isoflurane anesthetic to verify if interferences occures or not. About the others groups, we had ST36 receiving the same CI proceedments and treated by Zusanli (St-36) electroacupuncture point; ST36s again, but in a false-point (Sham ST36) next the real one. Groups SP6 and SP6s had the analogous treatment to points Sanyinjiao (SP-6) and its no-point. The next step was collect the nine groups livers and study them histologically. They was compared with CP references to mesuere some probable electroacupuncture influence in morphological and functional hepatic processes. MSLH results was: ALB in groups CP (2,97±0,3529) with CI (2,46±0,3134) and sanguinenous marker TP in groups CP (6,53±0,2452) with CI (5,73±0,4057), proving isoflurane interference; ALB in gropus CI with SP6 (2,84±0,2675) and in gropus SP6 with ST36s (2,4±0,2828), sanguinenous marker ALT in groups CI with SP6 and in groups SP6 with ST36 and sanguinenous marker AST in groups SP6 with ST36s, all of them proving the SP6 electroacupuncture point efficacy. The histological results conffirmed thioacetamide (TAA) actuation in animals (except group CP), through these lesions: focalized inflammation, apoptosis, piecemeal-necrosis, necrosis and portal-inflammation to hematoxylin and eosin analysis and fibrosis expansion and collagen bridges to Picrosirius colorations. These lesions was discovered in groups CT, CI, ST36s, SP6s, ST36 and SP6s. However, in the last two group was discovered less then the others, indicating electroacupuncture efficience in hepatic morphology.

Orientador: Edson Rosa Pimentel / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-26T20:21:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_MarcosdosSantosde_D.pdf: 2549790 bytes, checksum: f7c5cf41c1fe21e8441475d830717187 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Vários estudos indicam que a acupuntura (AC) tem efeito anti-inflamatório (AI) sistêmico e mecanotransdutor local. Estes efeitos podem potencialmente acelerar o processo de cicatrização. Portanto, o objetivo deste estudo foi analisar o efeito de diferentes protocolos de AC nas características bioquímicas, organizacionais e ultraestruturais de tendões de ratos durante o processo de cicatrização. Ratos Wistar machos com 60 dias de idade foram divididos nos seguintes grupos: grupo não tenotomizado ou normal (N), grupo tenotomizado (T), tenotomizado e submetido à AC no ponto E-36 (E36), tenotomizado e submetido à AC no B-57 (B57), tenotomizado e submetido à AC manual no ponto E-36 e B-57 (EB) e tenotomizado e submetido à eletroacupuntura (EA) nos dois pontos citados. Os animais foram submetidos à eutanásia nos dias 7, 14 e 21 após a lesão. Em seguida, os tendões calcâneos foram coletados, processados e analisados para quantificação de proteínas não colagênicas através do método de Bradford. Para a análise organizacional, foi utilizada a quantificação da birrefringência das fibras de colágeno através da microscopia de polarização. Na analise ultraestrutural foram mensurados os diâmetros das fibrilas de colágeno e em seguida foram construídos histogramas de distribuição destes diâmetros assim como foi calculado o diâmetro da massa-média - MAD - das fibrilas de colágeno. Os resultados mostraram que o uso associado dos pontos E-36 e B-57 aumenta tanto a birrefringência das fibras de colágeno nos dias 14 e 21 após a lesão quanto o MAD nos três períodos analisados. A reorganização das fibrilas de colágeno também aumentou no dia 21 após a lesão com a aplicação dos dois pontos citados. No entanto, a aplicação da EA não promoveu aumento da birrefringência ou da reorganização das fibrilas assim como diminuiu o MAD no dia 21 após a lesão. Desta forma, concluímos que o uso da AC manual nos pontos E-36 e B-57 tem efeito no restabelecimento das propriedades estruturais e ultraestruturais do colágeno de tendões durante o processo de cicatrização. Estes resultados sugerem o fortalecimento da estrutura tendínea com consequente aumento da resistência a re-ruptura e o potencial uso da AC em protocolos de reabilitação / Abstract: Several studies indicate that acupuncture (AC) has both local mechanotransductor and systemic anti-inflammatory (AI) effects. These effects could potentially accelerate the healing process. Therefore, the aim of this study was to analyze the effect of different protocols of AC on the biochemical, organizational and ultrastructural aspects of rat tendons during the healing process. Male Wistar rats at 60 days of age were divided into the following groups: not tenotomized or normal group (N), tenotomized group (T), tenotomized and submitted to AC at ST-36 point (ST36), tenotomized and submitted to AC at BL-57 point (BL57), tenotomized and submitted to manual AC at ST-36 and BL-57 points (SB) and tenotomized and submitted to electroacupuncture (EA) on the two points mentioned. The animals were euthanized on 7th, 14th and 21th days after injury. Thereafter, the Achilles tendons were collected, processed and analyzed to quantify non-collagenic proteins using the method of Bradford. For organizational analysis, it was quantified the collagen fibers birefringence by polarizing microscopy. In the ultrastructural analysis were measured the diameters of collagen fibrils and then histograms of distribution of these diameters were built as well as mass-average diameter - MAD - of collagen fibrils was calculated. The results showed that the associated use of ST-36 and BL-57 points increases both the birefringence of collagen fibers at 14th and 21th days and the MAD at the three periods analyzed. The reorganization of collagen fibrils also increased at 21th day with the application of the two points mentioned. However, the application of EA did not increase the birefringence or the reorganization of fibrils as well as decreased the MAD of fibrils at 21th after injury. Thus, we conclude that the use of manual AC at ST-36 and BL-57 points is effective in restoring the structural and ultrastructural properties of the collagen of tendons during the healing process. These results suggest strengthening the tendon structure with consequent increased resistance to re-rupture and the potential use of AC in rehabilitation protocols / Doutorado / Anatomia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Made available in DSpace on 2016-01-26T18:55:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 beth[1].pdf: 1005574 bytes, checksum: 2fa927c95f66ff65dd7b52a8dbeedd7a (MD5) Previous issue date: 2012-03-26 / This study aimed to evaluate the efficacy of dobutamine comparatively with electroacupuncture and sham treatment to reversion of isoflurano-induced hypotension in equine. Six adult horses were evaluated using a crossover design with at least 15 days between treatments. All the horses were medicated with xylazine (0.5mg kg-1) by intravenous administration (iv). Guaifenesin (100mg/kg iv) and thiopental (5mg kg-1 iv) were administered, following the inhalation anesthesia with isoflurane. The horses were positionated in left lateral recumbency and they were maintained in mechanical ventilation. After anesthesia was established, the isoflurane concentration was raised until mean blood pressure was maintained between 40 to 45mmHg. After that, the animals were treated with a constant rate of 1.5mg kg -1min-1 intravenously dobutamine (DOB), electroacupunture to PC6 acupoint (EA) and sham treatment (Sham). All the treatments were maintained for 60 minutes. Heart rate, cardiac rhythms, median arterial blood pressure, rectal temperature, arterial blood gases, creatine kinase (CK), aspartate transaminase (AST), recovery time and quality of recovery were investigated. The mean blood pressure increased 50%, 36.5% and 7.5%% in DOB, EA and Sham treatment, respectively. Higher values were observed in the DOB treatment when compared with Sham treatment at 10, 20, 30 and 40 minutes and at 20 minutes when compared with EA treatment. Heart rate, blood gases, CK, AST, recovery time and quality of recovery did not differ among the treatments. It was concluded that the dobutamine treatment was more effective than electroacupuncture and Sham tretament for the reversion of isoflurane induced hypotension in horses. / Este estudo objetivou avaliar a eficiência do tratamento da hipotensão arterial induzida pelo isofluorano em equinos, com dobutamina comparativamente à aplicação de estímulo elétrico no acuponto pericárdio 6 (PC6) e em ponto falso de acupuntura. Foram avaliados seis cavalos adultos, saudáveis, provenientes do Hospital Veterinário da Unoeste. Os mesmos animais foram avaliados nos três tratamentos, com intervalo de 15 dias entre cada experimento. A medicação pré-anestésica foi feita com xilazina (0,5mg kg-1) por via intravenosa (iv). A indução anestésica foi realizada com éter gliceril guaiacol (100mg kg-1 iv, 10%) em associação ao tiopental sódico (5mg kg-1 iv), com posterior manutenção em anestesia geral inalatória com isofluorano, em ventilação mecânica. Após a estabilização da anestesia foi induzida a hipotensão arterial, mediante o incremento da concentração de isofluorano, até a obtenção de pressão arterial média (PAM) entre 40 a 45 mmHg. A partir do estabelecimento da hipotensão, os animais foram submetidos a um dos tratamentos: DOB: dobutamina (1,5µg kg-1 min-1) em infusão contínua iv; EA: aplicação de estímulo elétrico no acuponto PC6 bilateralmente; Sham: aplicação de estímulo elétrico em ponto falso de acupuntura. Todos os tratamentos foram mantidos durante 60 minutos. Foram mensurados: frequência cardíaca (FC) e ritmo cardíaco, pressão arterial média (PAM), temperatura retal (T), fração inspirada e expirada de isofluorano (ETiso), concentração final expirada de dióxido de carbono (ETCO2) e variáveis hemogasométricas (PaO2, PaCO2, pH, HCO3-1), concentração sérica de aspartato aminotransferase (AST) e creatina fosfoquinase (CK), tempo e qualidade da recuperação pós-anestésica. Houve incremento na PAM de 50%, 36,6% e 7,5% nos grupos DOB, EA e Sham, respectivamente. Valores superiores de PAM foram observados no tratamento DOB em relação ao tratamento Sham aos 10, 20, 30 e 40 minutos e aos 20 minutos em relação ao tratamento EA. A FC, as variáveis hemogasométricas, as enzimas CK e AST, o tempo e a qualidade de recuperação pós-anestésica não diferiram entre os grupos. Concluí-se que o tratamento com dobutamina foi mais efetivo para reversão de hipotensão em cavalos sob anestesia inalatória quando comparado ao estímulo elétrico do acuponto PC6 ou ponto falso de acupuntura.