Made available in DSpace on 2015-01-26T13:21:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-06-26Bitstream added on 2015-01-26T13:30:36Z : No. of bitstreams: 1 000793045.pdf: 198695 bytes, checksum: adc16ea3cdb610acdec5679f22a1a6f8 (MD5) / A indução de múltiplas ovulações nas espécies domésticas é de extrema importância para a melhoria dos resultados e custos de biotécnicas como a transferência de embriões, inseminação com sêmen de baixa fertilidade, transferência de oócitos, entre outras. Este estudo teve como objetivo determinar se a sulpirida poderia induzir multiplas ovulações em éguas. Dezessete éguas foram aleatoriamente utilizadas nos dois grupos experimentais. No grupo de éguas tratadas com sulpirida 1mg/kg (IM) a cada 12 horas, o protocolo foi iniciado apenas em éguas que alcançaram um folículo de 24 mm ± 2mm de diâmetro e um segundo folículo ≥ 20 ± 2 mm de diâmetro. No grupo controle, utilizou-se o mesmo protocolo de início do tratamento porém as éguas foram tratadas com solução salina 0,9% (IM) a cada 12 horas. Em ambos os grupos, se durante as avaliações ultrassonográficas era verificado crescimento folicular concomitante de dois ou mais folículos, o tratamento perdurava até quando o menor folículo atingisse no mínimo 33 mm de diâmetro. Neste momento a ovulação foi induzida com 1500 UI de hCG. A inseminação artificial foi realizada 24 horas após a indução, e os embriões foram coletados no oitavo dia após a primeira ovulação. As variáveis estudadas foram analisadas utilizando o teste t de Student e teste exacto de Fisher. No grupo tratado, 35% das éguas tiveram mais que uma ovulação e uma média de 1,4 ovulações por ciclo enquanto que no grupo controle apenas 11% das éguas tiveram mais que uma ovulação e uma média de 1,1 ovulações por ciclo. No grupo tratado com sulpirida o tempo de início do tratamento até a primeira ovulação foi de 3,9 ± 0,9 dias enquanto que no grupo controle foi de 4,9 ± 1,0 (P<0,001). A administração da Sulpirida durante o desenvolvimento folicular, estimulou a atividade ovariana e não contribuiu para um aumento significativo nas taxas de duplas ou triplas ... / The induction of multiple ovulations in domestic species is of extreme importance to provide improvements of results and costs of biotechnologies such as embryo transfer, artificial insemination with poor quality semen, oocyte transfer among others. This study aimed to determine if sulpiride could induce multiple ovulations in mares. Seventeen mares randomly passed the two experimental groups. In the group of mares treated with sulpiride 1mg/kg (IM) every 12 hours, the protocol was initiated only in mares that have achieved a follicle of 24 mm ± 2 mm in diameter and a second follicle ≥ 20 ± 2 mm in diameter. In the control group, were used the same protocol, but the mares were treated with 0.9% saline solution (IM) every 12 hours. During the ultrasound evaluation if was observed the follicular growth the treatment even when the lower follicle reached at least 33 mm in diameter. At this time the ovulation was induced with 1500 IU of hCG. Artificial insemination was performed 24 hours after ovulation induction, and the embryos were collected on the eighth day after the first ovulation. The variables were analyzed using Student's t Fisher's exact test and test. In group treated, 35% of the mares had more than one ovulation and ovulation an average of 1.4 per cycle while in control group only 11% of the mares had more than one ovulation and ovulation an average of 1.1 per cycle. In the group treated with sulpiride the time of the treatment beginning to the first ovulation was 3,9 ± 0.9 days whereas the control group was 4.9 ± 1.0 (P<0,001). Administration of Sulpiride during follicular development stimulated ovarian activity but did not contribute to a significant increase in the rates of double or triple ovulations, however some mares had a higher incidence of multiple ovulations when subjected to the proposed protocol, suggesting that further studies should be conducted for clarification of these results

O objetivo deste experimento foi determinar a sobrevivência de blastocistos Mus domesticus domesticus vitrificado em palhetas na presença de uma haste metálica .Blastocistos Mus domesticus domesticus coletados no quarto dia após a fecundação, foram avaliados morfologicamente e divididos aleatoriamente em três grupos. Os embriões do grupo controle foram transferidos para gotas de meio KSOM e cultivados in vitro por 48 horas. Os embriões selecionados para criopreservação foram expostos a uma solução crioprotetora constituída por PBSm + de 10% etileno-glicol + 10% propileno-glicol, para promover uma desidratação das células embrionárias. Após foram transferidos para a solução de vitrificação que continha 20% etilenoglicol + 20% propilenoglicol diluídos em PBSm, e mantidos durante 25 segundos, sendo imediatamente imersos em nitrogênio submetido à vácuo. As taxas de sobrevivência embrionária revelaram uma maior eficiência da técnica com a inserção da peça metálica (56,21% - 86/153) em relação ao método convencional (18,84% - 26/138). Concluímos assim que a presença da peça metálica em contato com a amostra propiciou maior taxa de sobrevivência dos embriões submetidos à vitrificação envasados em palhetas de 0,25 mL. / The aim of this experiment was determine the Mus domesticus domesticus blastocysts survival rates after vitrification in straws containing a metallic stick, that allows to increase the temperature changes among the nitrogen and the embryo sample. Day 4 Mus domesticus domesticus blastocysts were collected from superovulated donnors and after morphologically evaluation were randomly divided in three groups. The embryos select as control group were transferred to KSOM medium drops and in vitro cultured during 48 hours. The crioperservation selected embryos were first exposed to a cryoprotective solution (modified PBS + 10% ethylene-glycol and 10% propylene-glycol) to promote embryo cell dehydration and after exposed during 25 seconds to the vitrification solution composed by modified PBS + 20% ethylene-glycol and 20% propylene-glycol, and immediately plunged into slush liquid nitrogen. The embryo survival rate in group vitrified in the straws containing the metallic stick (56,21% - 86/153) was significantly different from the observed in the group loaded in original straws (18,84% - 26/138). In conclusion, the presence of the metallic stick in contact with the sample was efficient to enhance more suitable survival rates after vitrification of Mus domesticus domesticus blastocysts loaded in 0,25 mL straws.

O desenvolvimento de protocolos eficientes para a vitrificação de embriões mamíferos ainda é um desafio para os especialistas em reprodução. Soluções crioprotetoras de baixa toxicidade associadas a técnicas seguras de envase são fatores fundamentais, para proporcionarem uma eficiente identificação e controle sanitário das amostras. Dois experimentos foram realizados para determinar a taxa de sobrevivência de embriões Mus domesticus domesticus envasados em palhetas convencionais (0,25 mL), na presença de uma haste metálica de ouro, empregando soluções crioprotetoras descritas para a vitrificação em microvolume. No experimento 1, avaliou-se a toxicidade da solução de desidratação (SD: PBSm + 10% EG + 10% PROH + 0,5 M sacarose), expondo-se os embriões por diferentes tempos: 1 (T1), 3 (T2) ou 10 min (T3). A toxicidade da solução de vitrificação (SV: PBSm + 20% EG + 20% PROH) foi determinada pela exposição dos embriões durante 25, 60 ou 180 seg, previamente desidratados por 1 ou 3 min. No experimento 2, avaliou-se a utilização do macrovolume (palhetas com a haste de ouro) e microvolume (micropipetas de vidro - GMP) na vitrificação dos blastocistos expostos à SV por 25 seg, previamente desidratados por 1 ou 3 min. Os dados foram analisados pelo teste Qui-Quadrado (P<0,05). No experimento 1, não foi observada diferença estatística entre as taxas de eclosão dos embriões desidratados: T1=68,0% (38/56), T2=72,0% (36/50), T3=71,0% (39/55) e o grupo controle, (74,0% - 48/65). No entanto, houve diferença significativa (P<0,05) na taxa de eclosão em relação ao tempo de exposição dos embriões à SV. Os embriões desidratados por 1 ou 3 min e expostos à SV por 25 seg proporcionaram maiores taxas de re-expansão (79,0% vs 84,0%) e de eclosão (58,0% vs 72,0%), em relação aos tempos de exposição de 60 e 180 seg. No experimento 2, após a vitrificação dos embriões envasados nas palhetas com a haste de ouro, a taxa de eclosão dos blastocistos previamente desidratados por 1 min foi de 16,0% (10/64) e de 4,0% (2/57) quando previamente desidratados por 3 min. Por outro lado, os embriões envasados nas GMP, e previamente desidratados por 3 min, foram os que apresentaram maior taxa de eclosão (60,0% - 52/86). A vitrificação de embriões utilizando soluções crioprototetoras descritas para microvolume não foi eficiente na crioproteção dos blastocistos envasados em palhetas convencionais com a haste de ouro. / The development of efficient vitrification protocols for mammalian embryos still is a challenge for reproductive biologists. Low toxicity cryoprotectant solutions and safe vitrifications procedures that allow sample identification and sanitary control are fundamental factors. Two experiments were conducted to determine the survival rate of vitrified Mus domesticus domesticus embryos loaded into straws containing a metallic piece (manufactured in gold), using cryoprotectant solutions described for microvolume vitrification procedures. In Experiment 1, the toxicity of the dehydratation solution (SD: PBSm +10% EG + 10% PROH + 0,5 M sucrose) was evaluated using three different embryo exposure times: 1 (T1), 3 (T2) or 10 min (T3), in addition as well as the toxicity of the vitrification solution (SV: PBSm + 20% EG + 20% PROH) was also tested upon embryo exposure for 25, 60 or 180 sec, previously dehydration for 1 or 3 min. In Experiment 2, the use of macrovolume (straw with a stem of gold) or microvolume (glass micropipettes – GMP) was evaluated for the vitrification of blastocysts after exposure to SV for 25 sec and previous dehydration for 1 or 3 min. Data were analized by the Chi-square test (P<0,05). In Experiment 1, statistical differences were not observed between hatching rates of dehydrated embryos: T1=68.0% (38/56), T2=72.0% (36/50), T3=71.0% (39/55) and control group embryos, (74.0% - 48/65). However, a significant difference (P <0,05) was observed between hatching rates after embryos exposure to the SV. Embryos dehydrated for 1 or 3 min and exposed for 25 sec to the SV showed higher re-expansion (79.0% vs. 84.0%) and hatching rates (58.0% vs. 72.0%) than embryos exposed to SV for 60 or 180 sec. In Experiment 2, after vitrification of the embryos loaded into straws containing a metallic piece showed a hatching rate of 16.0% (10/64) when previouslly dehydrated for 1 min, and 4.0% (2/57) when for 3 min. On the other hand, embryos loaded into GMP, previouslly dehydrated for 3 min, showed a higher hatching rate, (60.0% - 52/60). Embryo vitrification using a cryoprotectant solution described as suitable for microvolume was not efficient to cryoprotect blastocysts loaded into macrovolume straws containing a metallic piece.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-18Bitstream added on 2014-06-13T19:14:32Z : No. of bitstreams: 1 borges_la_me_jabo.pdf: 248872 bytes, checksum: bb6dce02b71fa4434990be14d38d0fe8 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1), agente etiológico da rinotraqueite infecciosa bovina (IBR)/Vulvovaginite Pustular Bovina (IPV), tem grande importância como agente causador de problemas reprodutivos em vacas por determinar baixas taxas de concepção ou parição, acarretando consideráveis perdas econômicas para o produtor. Assim, o presente estudo conduzido em rebanhos de três fazendas (A, B e C) onde se processa a transferência de embriões (TE) no município de Prata no Estado de Minas Gerais teve como objetivo verificar as condições sorológicas de 209 animais antes do processamento biotécnico, determinar a resposta imune de esquema vacinal pré-definido e analisar a relação entre títulos médios geométricos (TMG) de anticorpos antes e depois da vacinação com os parâmetros reprodutivos de fêmeas receptoras de embriões vacinadas contra o BoHV-1. O título dos anticorpos para BoHV-1 foi determinado por meio do teste de virusneutralização (VN), conforme protocolo definido pelo Organização Mundial de Saúde Animal (OIE) e o quadro reprodutivo foi caracterizado por meio do exame de ultrassonografia transretal. Com isso, verificou-se que as prevalências de 39,7% (27/68) na fazenda A, 27,5% (11/40) na fazenda B e 36,6% (37/101) na fazenda C não foram estatisticamente diferentes; essa situação epidemiológica definiu o aumento de títulos de anticorpos para o BoHV-1 em 72,7% (152/209) dos animais pela vacinação com dose única; o maior sucesso de prenhez (75%) na 1ª TE foi observada nos animais que eram positivos e atingiram títulos acima de 256 após a vacinação; mesmo assim, no contexto estatístico, os índices gerais de gestação não tiveram influência significativa em decorrência da vacinação com dose única / The bovine herpesvirus type 1 (BoVH-1), which causes infectious bovine rhinotracheitis (IBR) / infectious pustular vulvovaginitis (IPV), has major importance as an agent that causes reproductive problems by determining low conception or calving rates causing significant economical losses for the producer. The present study, was carried out in the cattle of three farms (A, B and C), where the embryos transfer is processed (ET), at Prata municipality in Minas Gerais State, aiming to verify the serological conditions of 209 animals before biotechnical processing, to determine immune response to a pre defined vaccination schedule and to analyze the relationship between geometric mean titers (TMG) of antibodies before and after vaccination with the reproductive parameters in embryo recipient heifers vaccinated against BoHV-1. The antibodies titers of BoHV-1 were determined by the virusneutralization test (VN), according to the protocol established by the World Organization for Animal Health (OIE) and the reproductive performance was characterized by transrectal ultrasonography examination. Thus, it was verified that the prevalence rates of 39.7% (27/68) in farm A, 27.5% (11/40) in farm B and 36.6% (37/101) in farm C had no statistical difference; this epidemiological situation defined the increase of antibody titers for BoHV-1 in 72.7% (152/209) of the animals by vaccination with a single dose; the greater success of pregnancy (75%) in the first ET was observed in animals that were positive and reached titers higher than 256 after vaccination; in the statistical context, the single dose vaccination had no significative influence in the overall rates of pregnancy

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-12-18Bitstream added on 2014-06-13T18:48:18Z : No. of bitstreams: 1 sanchesjunior_cp_me_botfmvz.pdf: 521404 bytes, checksum: c19df2c844afe1ed0e76070de6937621 (MD5) / Objetivou-se com este estudo avaliar a utilização de dois dispositivos intravaginais de P4 (CIDR®, Zoetis) em vacas Holandesas em lactação sem CL e com P4 ≤1,0 ng/mL no início de um protocolo de sincronização da ovulação à base de E2/P4 para IATF (exp 1) ou TETF (exp 2) no sucesso da prenhez. Estes experimentos foram realizados em 9 fazendas, sendo 4 destinadas a IATF (n = 341) e 5, a TETF (n = 356). O protocolo utilizado nos experimentos foi: d-10 2mg IM BE (2,0mL de Estrogin, Farmavet, SP, Brasil) + CIDR (1,9g de P4, CIDR®, Zoetis, SP, Brasil); d-3 25mg IM Dinoprost Trometamina (5,0mL de Lutalyse®, Zoetis, SP, Brasil); d-2 remoção do CIDR + 1mg IM de Cipionato de Estradiol (0,5mL ECP®, Zoetis, SP, Brasil); d 0 IATF (exp1) ou d 7 TETF (exp 2). No d-10, os animais sem corpo lúteo à ultrassonografia (US) foram distribuídos aleatoriamente para receberem 1 CIDR (1CIDR) ou 2 CIDR (2CIDR). O diâmetro do folículo ovulatório [d0 (exp 1)] e presença de CL [d7 (exp 1 e 2)] foram avaliados por US. Amostras de sangue foram colhidas para dosagem de P4 nos dias -10, -3 e 7. Foram consideradas sincronizadas vacas com CL 7 dias após a IA (d7) ou com CL no momento da TE, consistente com a ovulação do folículo ovulatório; no exp 2, apenas vacas com CL (d7) que receberam embrião foram utilizadas. Diagnósticos de gestação foram realizados por US aos 32 e 60 d. Para avaliar as variáveis binomiais, foi utilizado o PROC GLIMMIX, e as contínuas, o PROC MIXED. Efeitos foram considerados significantes quando P ≤0,05 e tendência quando P >0,05 e P ≤0,10. Não houve efeito do tratamento na taxa de sincronização [1CIDR = 74,1% (329/451) vs. 2CIDR = 71,1% (298/423)]. A concentração de P4 no d-10 não diferiu entre os tratamentos (1CIDR = 0,59 ± 0,12 ng/mL vs. 2CIDR = 0,68 ± 0,12 ng/mL)... / The aim of this study was to evaluate the use of two progesterone (P4) intravaginal devices (CIDR ®, Zoetis) in lactating Holstein cows without CL with P4 ≤ 1.0 ng / mL at the start of a E2/P4 ovulation synchronization protocol for TAI (exp 1) or TET (exp 2) on pregnancy success. These experiments were conduced in 9 farms, 4 destined to TAI (n = 341) and 5 TET (n = 356). The protocol used in the experiments was: d-10 2 mg IM EB (2.0 mL Estrogin, Farmavet, SP, Brazil) + CIDR (1.9 g of P4, CIDR ®, Zoetis, SP, Brazil); d-3 25 mg dinoprost tromethamine IM (5.0 mL Lutalyse ®, Zoetis, SP, Brazil), d-2 CIDR removal + 1 mg estradiol cypionate IM (0.5 mL, ECP ®, Zoetis, SP, Brazil); TAI d0 (exp 1) or TET d7(exp 2). On d-10, animals without a corpus luteum detected by ultrasonography (US) were randomly divided into groups to receive 1 CIDR (1CIDR) or 2 CIDR (2CIDR). The ovulatory follicle diameter [d0 (exp 1)] and presence of CL [d7 (exp 1 and 2)] were evaluated by US. Blood samples were collected for P4 measurement on days -10, -3 and 7. Were considered synchronized cows when they had CL 7 days after AI (d7) or CL at the time of ET, consistent with ovulation of detected ovulatory follicle; In exp 2 only cows CL (d7) receiving embryo were used. Pregnancy diagnosis were performed using US on days 32 and 60. Was used to evaluate binomial variables PROC GLIMMIX and PROC MIXED for continuous. Effects were considered significant when P ≤ 0.05 and tendency when P> 0.05 and P ≤ 0.10. There was no effect of treatment on synchronization rate [1CIDR = 74.1% (329/451) vs. 2CIDR = 71.1% (298/423). P4 concentration on d-10 did not differ between treatments (1CIDR = 0.59 ± 0.12 ng/mL vs. 2CIDR = 0.68 ± 0.12 ng/mL). P4 concentration was higher for 2CIDR treatment (2.14 ± 0.31 ng / mL) compared to 1CIDR (1.71 ± 0.28 ng / mL) at d-3 (PGF moment)... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-03-26T12:54:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1973320 bytes, checksum: aa4f936802e91a3fcfd777d09de0f494 (MD5) Previous issue date: 2013-10-11 / We aimed with this study to evaluate the effect of photoperiod changes on reproductive characteristics of Pêgabreed jennies along the year and to verify the embryo recovery rate and embryo characteristics on days 7, 8 and 9 postovulation. In Experiment 1, 279 estrous cycles of 44 jennies were evaluated during 3 consecutive years. The experimental groups were split in two periods according to photoperiod along the year in the southern hemisphere: P1: October to March (Long photoperiod); P2: April to September (Short photoperiod). The sexual behavior, ovarian and uterine characteristics, and fertility during 3 years were evaluated. Jennies were checked for estrous behavior by a jack and were evaluated by transrectal palpation every two days to identify females in estrous. Jennies with sexual signs of estrous or with anovarian follicle bigger than 25 mm in diameter were controlled daily until ovulation was detected.Artificial insemination or natural breed was performed every two days when a follicle reached &#8805; 35 mm until ovulation. Pregnancy diagnose was done on days 13, 25 and 35 postovulation by ultrasonography using a transrectal linear transducer (5 MHz). Differences were not detected (P>0.05) between the two periods in the following characteristics: follicle diameter at the beginning of estrous (29.80 ± 0.18mm), follicle diameter at ovulation (44.61± 0.24mm), estrous length (7.44± 0.05days),interval from the onset of estrous to ovulation (5.99± 0.06days), interval from ovulation to the estrous end (1.45± 0.03days), follicle growth rate (2.50± 0.04mm/day)frequency of double (16.49%, 46/279) and triple (1.43%, 4/279)ovulations, frequency of ovulation in the left (52.65%, 146/279)and right (47,35%, 133/279)ovaries, and frequency of ovulations with visual signs in the pre-ovulatory follicle (77.85%, 217/279).Total pregnancy rate was 60%; a difference in pregnancy rate between the two periods was not detected (P>0.1).Photoperiod variation did not affect the characteristics of follicle growth, sexual behavior and fertility in jennies of Pêga breed under the present environment conditions.In Experiment 2, the recovery rate, development and quality of embryos on days 7, 8 and 9 were evaluated. For embryo recovery, 90 uterine flushes were performed in seven Pêga breed jennies, aging 6 to 14 years old. Sixty-three embryos from 90 flushes (70%) and 107 ovulations (58.9%) were recovered. Averaged embryo diameter was 747.38 ± 76.45 &#956;m. The proportions of embryos development stages were as follow: morulas,1.59% (1/63);early blastocysts, 6.35% (4/63);blastocysts, 23.81% (15/63); and expanded blastocysts,68.25% (43/63). For quality grades, 90.5% (57/63) of embryos were classified as excellent or good (Grade I and II) and 9.5% (6/63) as regular or poor (Grade III and IV). No difference (P>0.1) in embryo recovery rate was detected between the two year periods. The embryo quality observed in the present study is considered satisfactory in a embryo transfer program. / Objetivou-se nesse estudo avaliar o efeito da variação do fotoperíodo sobre as características reprodutivas de jumentas da raça Pêga ao longo do ano; verificar a taxa de recuperação e viabilidade embrionária de lavados feitos nos dias 7, 8 e 9 pós-ovulação. No Experimento 1 foram avaliados 279 ciclos de 44 jumentas durante 3 anos consecutivos, sendo os grupos experimentais divididos de acordo com os períodos do ano: P1: outubro a março (período de fotoperíodo mais longo); P2: abril a setembro (período de fotoperíodo mais curto). Foram avaliadas as características de comportamento sexual, características ovarianas, uterinas e fertilidade. As jumentas foram rufiadas e avaliadas por palpação retal e ultrassonografia a cada dois dias. Aquelas que apresentavam comportamento de estro ou a presença de folículo maior que 25 mm de diâmetro em um dos ovários, foram controladas diariamente até a ovulação. Após a detecção de um folículo maior ou igual a 35 mm de diâmetro as jumentas foram artificialmente inseminadas ou cobertas a cada 48 horas até a ovulação. Os diagnósticos de gestação foram realizados aos 13, 25 e aos 35 dias após a ovulação por ultra-sonografia utilizando transdutor linear trans-retal de 5 MHz. Os valores médios das características diâmetro folicular no início do estro, diâmetro folicular pré- ovulação, duração do estro, intervalo início do estro à ovulação, intervalo da ovulação ao fim do estro, taxa de crescimento folicular, foram de 29,80±0,18 mm, 44,61±0,24 mm, 7,44±0,05 dias, 5,99±0,06 dias, 1,45±0,03 dias, 2,50±0,04 mm/dia, respectivamente. A porcentagem de duplas e triplas ovulações, frequência de ovulações entre os ovários direito e esquerdo e porcentagem de ovulações com alterações do folículo pré-ovulatório foram de 16,49% (46/279), 1,43% (4/279), 52,65% (146/279), 47,35% (133/279) e 77,85% (217/279), respectivamente. A taxa de prenhez geral foi de 60%. Não foram observadas entre os períodos, diferenças (P>0,05) nas características avaliadas. A variação do fotoperíodo não afetou as características foliculares, comportamento sexual e fertilidade de jumentas da raça Pêga nas condições experimentais avaliadas. No Experimento 2 avaliou-se a taxa de recuperação, as características morfométricas e estádio de desenvolvimento embrionário de embriões coletados nos dias D7, D8 e D9. Foram realizados 90 lavados uterinos de 7 jumentas da raça Pêga com idade variando de 6 a 14 anos. Foram recuperados 63 embriões de 90 lavados (70%) referentes a 107 ovulações (58,9%). O diâmetro médio dos embriões foi de 747.38 ± 76.45 &#956;m. Dentre os embriões colhidos, as mórulas corresponderam a 1,59% (1/63), os blastocistos iniciais a 6,35% (4/63), os blastocistos a 23,81% (15/63) e os blastocistos expandidos 68,25% (43/63), dos embriões totais. Quanto à qualidade, 90,5% (57/63) dos embriões foram classificados como excelentes ou bons (Graus I e II) e 9,5% (6/63) como regulares ou ruins (Graus III e IV). Não foi observada diferença da taxa de recuperação embrionária entre os períodos do ano. Os dados de qualidade dos embriões obtidos no presente estudo são considerados satisfatórios para um programa de TE.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 121852 bytes, checksum: 95e74174c41e234507979d7c0f9223a2 (MD5) Previous issue date: 2004-12-17 / It was objectified with this study to characterize and evaluate the reproductive efficiency in donor and recipient mares of Mangalarga Marchador race in commercial programs of Embryos Transfer (TE) and verify the relationship of some reproductive characteristics, zootechnics and methodology in the TE among conception rates in recipients. Data collected in four different farms, from 1998 to 2004, were analyzed where 1141 crops were accomplished with recovery of 830 embryos. The percentile of embryos recovery found because of the number of crops of the six reproductive seasons was 72.74%. Differences were not observed among the rates of embryonic recovery in the different reproductive seasons (P>0.05). Generally, 90% of the recovered embryos were 8 to 9 days of age. There was no difference among the embryonic recovery from the first to the ninth embryos crop of the reproductive season, as well as among mares inseminated during the colt heat and another subsequent heat (P>0.05). The size of the first follicle and the donor's artificial insemination in preovulatory phase were the characteristics that presented positive correlation with the embryonic recovery in donors (P<0.05). The conception rates observed in the sum of all of the seasons in 15, 30, 45 and 60 days were 73.4; 69.9; 66.7 and 64.46%, respectively. The early embryonic losses between 15-30; 15-45 and 15-60 days were 4.8; 9 and 12.15%, respectively, not differing among the seasons (P>0.05). Differences were not observed in the conception rate and early embryonic loss in the embryos transferred immediately after the crop (66.8 and 13.5%) and embryos transported at room temperature for periods inferior to 1 hour (62.9 and 14.4%) (P>0.05). A correlation was not observed between the studied variables and the conception rate in the recipients (P>0.05). Regarding the rate of early embryonic loss, there was no difference among the different intervals of ovulation s synchrony among the donors and recipients (P>0.05). Related to the conception rate, better results were verified in the intervals of -3 and -2 days regarding the ovulation s synchrony of donors and recipients (P <0.05) and the smallest rates in the intervals of -6 (P <0.05) with intermediary values in the intervals of -1, 0 and +1, although the last two didn't differ of the interval -6 (P>0.05). The use of that flexibility in the technique provides advantages for commercial programs of equine embryos transfer, making possible the optimization in the use of recipient mares, costs reduction and improvements in the farms management. / Objetivou-se com este estudo caracterizar e avaliar a eficiência reprodutiva de éguas doadoras e receptoras da raça Mangalarga Marchador em programas comerciais de transferência de Embriões (TE) e verificar a relação de algumas características reprodutivas, zootécnicas e metodologia na TE com taxas de prenhez em receptoras. Foram analisados dados coletados em quatro diferentes fazendas, de 1998 a 2004, onde foram realizadas 1141 colheitas com recuperação de 830 embriões. O percentual de recuperação de embriões observado em função do número de colheitas das seis estações reprodutivas foi de 72,74%. Não foi observada diferença entre as taxas de recuperação embrionária nas diferentes estações reprodutivas (P>0,05). No geral 90% dos embriões recuperados encontravam-se com 8 a 9 dias de idade. Não houve diferença entre a recuperação embrionária da primeira a nona colheita de embriões da estação reprodutiva, assim como entre éguas inseminadas durante o cio do potro e em outros cios subseqüentes (P>0,05). O tamanho do primeiro folículo e a inseminação artificial da doadora na fase pré-ovulatória foram as características que apresentaram correlação positiva com a recuperação embrionária em doadoras (P< 0,05). As taxas de prenhez observadas na soma de todas as estações aos 15, 30, 45 e 60 dias foram de 73,4; 69,9; 66,7 e 64,46% respectivamente. As perdas embrionárias precoces entre 15- 30; 15-45 e 15-60 dias foram de 4,8; 9 e 12,15%, respectivamente, não diferindo entre as estações (P>0,05). Não foi observada diferença na taxa de prenhez e perda embrionária precoce nos embriões transferidos imediatamente após a colheita (66,8 e 13,5%) e embriões transportados à temperatura ambiente por períodos inferiores a 1 hora (62,9 e 14,4%) (P>0,05). Não foi observada correlação entre as variáveis estudadas e a taxa de prenhez nas receptoras (P>0,05). Com relação à taxa de perda embrionária precoce, não houve diferença entre os diferentes intervalos de sincronia de ovulação entre as doadoras e receptoras (P>0,05). Com relação à taxa de gestação, melhores resultados foram verificados nos intervalos de 3 e 2 dias com relação à sincronia de ovulação das doadoras e receptoras (P<0,05) e as menores taxas nos intervalos de 6 (P<0,05) com valores intermediários nos intervalos de 1, 0 e +1, sendo que os dois últimos não diferiram do intervalo 6 (P>0,05). A utilização dessa flexibilização na técnica proporciona vantagens para programas comerciais de transferência de embriões eqüinos, possibilitando otimização no uso de receptoras, redução de custos e melhorias no manejo das fazendas.

Made available in DSpace on 2016-07-01T13:10:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-06-22. Added 1 bitstream(s) on 2016-07-01T13:14:08Z : No. of bitstreams: 1 000866261.pdf: 2011639 bytes, checksum: de26a1680120fdc75d49c236f0f98bb9 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Com o objetivo de investigar os efeitos da administração de 2,5 mg de benzoato de estradiol (BE) seguido de 1500 mg de progesterona de longa ação (P4 LA) sobre a dinâmica molecular endometrial, características morfológicas do útero e concentrações plasmáticas de estrógeno e progesterona em éguas receptoras acíclicas, foram avaliados: a expressão proteica e as alterações na abundância relativa dos transcritos para os receptores de estrógeno (ER) e progesterona (PR) no endométrio por meio da RT-qPCR e imunohistoquímica; as características morfológicas do útero por ultrassonografia e palpação retal; e as concentrações plasmáticas do estrógeno e progesterona por meio de radioimunoensaio. A aplicação de 2,5 mg, 5 mg ou 10 mg de BE foram eficazes em causar edema uterino máximo 24 h após a administração. A dose de 2,5 mg de BE provocou picos de concentração de estradiol similares aos de éguas tratadas com 5 mg, 10 mg e aos de éguas cíclicas, sem elevar a concentração de estrógeno conjugado como observado com as outras doses de BE. Ainda, a concentração de P4 foi reduzida após a aplicação da P4 LA quando 10 mg de BE foram utilizados. A administração dos tratamentos hormonais alterou a abundância relativa dos transcritos para ERα, ERβ e PR de forma similar às alterações encontradas em éguas cíclicas quando o final do estro e início do diestro foram comparados. Em conclusão, o uso de 2,5 mg de BE seguido de 1500 mg de P4 LA provoca alterações similares na morfologia uterina, abundância relativa dos transcritos para ERα, ERβ e PR no endométrio, e de concentrações circulantes de estrógeno e progesterona às encontradas em éguas cíclicas / To investigate the effects of the administration of 2.5 mg of estradiol benzoate (EB) followed by 1500 mg of long acting progesterone (LA P4) on endometrial molecular dynamics, uterine morphological characteristics, as well as estrogen and progesterone plasma concentrations in non-cyclic recipient mares, we evaluated: protein expression and changes in relative abundance of transcripts for estrogen (ER) and progesterone receptors (PR) in the endometrium by RT-qPCR and immunohistochemistry; uterine morphological characteristics by ultrasonography and rectal palpation; and estrogen and progesterone plasma concentrations by radioimmunoassay. The administration of 2.5 mg, 5 mg or 10 mg of EB were effective at promoting maximum uterine edema 24 h after their injection. The dose of 2.5 mg of EB caused similar estradiol concentration peaks to those observed in mares treated with 5 mg or10 mg of EB and to those observed in cyclic mares, which was not followed by increased concentrations of estrogen conjugate as observed for the other doses. Moreover, P4 concentration was reduced 24 h after LA P4 administration when the dose of 10 mg of EB was injected. The administration of the hormonal protocols altered the relative abundance of transcripts for ERα, ERβ and PR in non-cyclic mares as observed in cyclic ones when late estrus and early diestrus were compared. In conclusion, the use of 2.5 mg of EB followed by 1500 mg of LA P4 causes similar uterine morphology changes, relative abundance of transcripts for ERα, ERβ and PR, and estrogen and progesterone circulating concentrations to those found in cyclic mares

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:39:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-09. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:08Z : No. of bitstreams: 1 000870620.pdf: 854848 bytes, checksum: 8c79744870f5da8cb69ae19583f3ce62 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / The process of embryonic and placental development is under high epigenetic control, with different epigenetic processes regulating the differentiation of pluripotent cells into specialized cells. An abnormal placental development is observed frequently in pregnancies produced by nuclear transfer, and is associated with incomplete epigenetic reprogramming of the donor cell and formed embryo. The objective of this study was to evaluate the expression of the imprinted genes TSSC4 e PHLDA2 in cotiledonary and intercotiledonary tissues, after 60 days of pregnancy, in placentas produced by Embryo Transfer (ET) In Vitro Fertilization (IVF) and Nuclear Transfer (NT) in cattle, and also to investigate the epigenetic control of this gene in the bovine placenta evaluating the epigenetic profile of cotiledonary tissues of the experimental groups (ET, IVF and NT). The TSSC4 gene expression was reduced by 30% in the cotyledons in the NT group, however PHLDA2 expression of the gene was elevated by 11-fold in NT compared to ET. ChIP analysis for histone H3 at the proximal promoter region of TSSC4 and PHLDA2 genes showed an increase to the permissive mark H3K4me2 and a reduction for the inhibitory mark H3K9me2 in the cotyledons of cloned placentae, in relation to placentae produced by ET, for both genes. Interestingly, the inhibitory mark H3K9me2 for TSSC4 gene was also significantly reduced in placentae produced by IVF, compared to ET control group. These results show that expression of the imprinted genes TSSC4 and PHLDA2 is affected in placenta of pregnancies produced by nuclear transfer. Further, changes in expression of gene PHLDA2 and histone modifications in TSSC4 gene cotyledons produced by IVF indicate that the in vitro culture can contribute to the observed changes in NT group.

Submitted by CYNTHIA SILVA MACHADO null (cynthiasilvamachado@yahoo.com.br) on 2017-01-18T16:25:04Z No. of bitstreams: 1 Dissertação.pdf: 7423563 bytes, checksum: d27a59d743d83cca3d9c07d0ab6b69fd (MD5) / Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-01-20T18:42:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 machado_cs_me_fran.pdf: 7423563 bytes, checksum: d27a59d743d83cca3d9c07d0ab6b69fd (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-20T18:42:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 machado_cs_me_fran.pdf: 7423563 bytes, checksum: d27a59d743d83cca3d9c07d0ab6b69fd (MD5) Previous issue date: 2016-09-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A ideia que versa essa dissertação é do esplêndido que a Reprodução Humana Assistida (RHA), traz a possibilidade de fazer um filho em um casal isento de fertilidade. Diante do que se percebe em termos de avanços da tecnociência do crescente número de casais em situação de infertilidade o foco desta pesquisa é a Doação de embriões criopreservados. Mormente existam em outros países leis específicas que regulem a RHA, o Brasil dispõe apenas de uma Lei da engenharia genética - Lei de Biossegurança, n. 11.105, 24/03/2005, o que faz com que profissionais da área se deparem com diversos desafios éticos. Há de se ressaltar, que polêmicas quanto à valoração do embrião em toda a sociedade brasileira permeiam está seara, mais especificamente, a questão da pesquisa com célulastronco embrionárias. É ainda ressaltante dizer da escassez de pesquisas e publicações nesta área, em especial, no que diz respeito às implicações emocionais da Doação de embriões. Para tanto, os objetivos desta pesquisa perfazem a compreensão dos aspectos bioéticos envolvidos na problemática da Reprodução Humana Assistida, bem como o estudo dos aspectos éticos vividos pela Equipe Técnico-administrativa de uma Clínica de Reprodução Humana do Estado de São Paulo, responsável pelo tratamento de Reprodução Humana Assistida de casais que tiveram embriões excedentários após serem submetidos ao tratamento de Fertilização in vitro e a reflexão sobre a dimensão subjetiva vivida pela Equipe Técnico-administrativa de uma Clínica de Reprodução Humana do Estado de São Paulo, responsável pelo tratamento de Reprodução Humana Assistida de casais que tiveram embriões excedentários após serem submetidos ao tratamento de Fertilização in vitro. Sendo a metodologia utilizada neste estudo a abordagem qualitativa, descritiva, bibliográfica, documental, exploratória e de campo, tendo como método o hermenêutico-dialético e a pesquisa de campo com a Equipe Técnico-administrativa da Clínica supracitada. Ao que se chega ao final deste estudo nada mais são que (in)conclusões, pois por certo muitos questionamentos éticos se abrem ao se desvelar o universo pesquisado: a Doação de embriões. O vínculo estabelecido ente o casal com os embriões excedentes criopreservados permeia o processo de decisão do casal quanto ao destino destes, marcado por incertezas, temores e sentimentos de solidariedade, aliado a isto está o fato de que a contemporaneidade representa um modo de viver em que a fluidez de valores é ressaltada, a fragilidade e transitoriedade dos laços afetivos são preponderantes. É forçoso ainda dizer que a importância do pensamento foi apreciada durante todo o percurso e no desfecho deste estudo optou-se por enfatizar quão poderoso ele é. Haja vista que as proposições ou sugestões vislumbram, antes de mais nada, “o Pensar” no sentido da elaboração como saída para quem vivencia a angústia da tomada de Decisão do que fazer com os seus embriões. / The idea that discusses dissertation is from the splendid which the Assisted Human Reproduction (AHR) brings: the possibility of a child in free couple fertility. Given what is perceived in terms of advances of techno science of the growing number of couples in infertility situation, the focus of this research is the cry preserved embryo donation. Especially exist in other countries, specific laws that govern the RHA, Brazil has only a law of genetic engineering - Insecurity Law, n.11.105, 24/03/2005 - with the result that health professionals are experiencing with several ethical challenges. It is noteworthy that controversies regarding the valuation of the embryo in Brazilian society permeate this harvest, more specifically the issue of research with embryonic stem cells. It is also remarking to say the lack of research and publications in this area, particularly with regard to the emotional implications of the donation of embryos. Therefore, the objectives of this research account for the understanding of bioethical issues involved in the issue of Assisted Human Reproduction, and the study of ethical issues experienced by Technical and Administrative Team of a Human Reproduction Clinic of São Paulo, responsible for handling Assisted Human reproduction of couples who have surplus embryos after being subjected to the treatment of in vitro fertilization and reflection on the subjective dimension lived by Technical and Administrative Team of a Human reproduction Clinic of São Paulo, responsible for the treatment of Assisted Human Reproduction of couples who had surplus embryos after being subjected to the treatment of fertilization in vitro and reflection on the subjective dimension experienced by the Technical and Administrative Team of a clinic of Human Reproduction of São Paulo State, responsible for the treatment of Assisted Human Reproduction of couples who had surplus embryos after being subjected to the treatment of fertilization in vitro. Being the used methodology in this study, a qualitative approach, descriptive, bibliographic, documental, exploratory and field, having as a method the dialectic-hermeneutic and the field research had the medical staff of the aforementioned Clinic. Conclusions are the ending of this study because surely many ethical questions open to unfold the universe surveyed: the Donation of embryos. The established link between the couple with cry preserved surplus embryos permeates the couple's decision making about the fate of these, marked by uncertainties, fears and feelings of solidarity, coupled with this is the fact that the contemporary world is a way of life in which the fluidity values is emphasized, the fragility and transience of emotional ties are crucial. It must also say that the importance of the thought was appreciated throughout the course and the outcome of this study was chosen to emphasize how powerful it is. Considering that the propositions or suggestions in sight, before anything else, "the Thinking" in the sense of preparation as output for those who experience the anguish of the decision-making than doing with their embryos. / CAPES: 1530079