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Atividades in vitro e in vivo do fruto do guajiruzeiro (Chrysobalanus icaco L.) em biomarcadores de estresse oxidativo, danos ao DNA e inflamação e inflamação / In vitro and in vivo activities of guajiru fruit (Chrysobalanus icaco L.) in oxidative stress, DNA damage, and inflammation biomarkersVenancio, Vinicius de Paula 13 September 2016 (has links)
O guajiru (Chrysobalanus icaco L.) é um fruto rico em antocianinas, as quais exercem vários efeitos benéficos à saúde. Embora as folhas do guajiru sejam utilizadas na medicina popular como hipoglicemiante e antioxidante, os efeitos do fruto na saúde permanecem inexplorados. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do fruto do guajiruzeiro sobre danos ao DNA e estresse oxidativo in vivo e inflamação in vitro e in vivo. Ratos machos Wistar (4-5 semanas, 110 g) foram divididos em oito grupos e tratados por 14 dias com água ou fruto do guajiruzeiro liofilizado (100, 200 ou 400 mg/kg p.c.) por gavagem. No 14º dia, os animais receberam solução fisiológica ou DXR (15 mg/kg p.c. i.p.) e foram eutanasiados após 24 horas. A genotoxicidade e antigenotoxicidade foram avaliadas pelo ensaio do cometa em sangue periférico, fígado, rins e coração. A mutagenicidade e antimutagenicidade foram investigadas pelo teste do micronúcleo em medula óssea e sangue periférico. O burst oxidativo foi avaliado em neutrófilos do sangue periférico. Parâmetros de estresse oxidativo envolveram: concentração de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico, razão glutationa reduzida e oxidada e atividade da catalase em fígado, rins e coração. As expressões de genes de dano/reparo de DNA Gadd45a (growth arrest and DNA damage-inducible alpha), Parp1 (Poly(ADP-ribose) polymerase 1) e Xrcc2 (X-Ray Repair complementing defective repair in Chinese hamster cells 2) e dos marcadores pró-inflamatórios Il-1? (interleukin 1 beta), Il-6 (interleukin 6), Nf-kb (nuclear factor kappa B) e Tnf-? (tumor necrosis factor alpha) foram realizadas por PCR quantitativo em tempo real. Células de cólon humano CCD-18Co (fibroblastos) e HT-29 (adenocarcinoma) foram tratadas com antocianinas do guajiru (1,0 a 20,0 mg/L equivalentes de ácido gálico - GAE) e as expressões de IL-1?, IL-6, NF-kB e TNF-? analizadas a nível de RNA mensageiro e proteína. TNF-? foi utilizado para induzir inflamação em células CCD- 18Co. Os polifenois do fruto do guajiruzeiro foram quantificados/caracterizados por métodos cromatográficos e espectrométricos. As concentrações de 19 elementos químicos foram determinadas por plasma indutivamente acoplado a espectrometria de massas. Delfinidina, cianidina, petunidina e peonidina foram as antocianinas majoritárias encontradas no fruto. Concentrações significantes de polifenois, magnésio e selênio foram encontradas nesse fruto. O fruto do guajiruzeiro exibiu atividade antioxidante in vivo em neutrófilos, antigenotoxicidade em sangue periférico e antimutagenicidade em sangue periférico e medula óssea. O guajiru diminuiu os danos ao DNA no fígado, rins e coração. O fruto também diminuiu as expressões de Gadd45a, Il-1?, e Tnf-? nos tecidos. A proliferação celular foi suprimida em células HT-29, acompanhado por aumento na produção de ROS e diminuição nas expressões de TNF-?, IL-1?, IL-6 e NF-kB. Não foi observado efeito citotóxico das antocianinas em células CCD-18Co. As expressões das proteínas IL- 1?, IL-6 e TNF-? foram reduzidas em células CCD-18Co tratadas com TNF-? e com as antocianinas. Os resultados deste trabalho demonstram que os fitoquímicos e elementos químicos no fruto do guajiruzeiro possuem efeitos antigenotóxico, antimutagênico, antioxidante e anti-inflamatório e encorajam a realização de outros ensaios in vivo e estudos clínicos com esse fruto subutilizado. / Guajiru (Chrysobalanus icaco L.) is a fruit rich in anthocyanins, which exert several beneficial effects on health. Although guajiru leaves are used in folk medicine as hypoglycemic and antioxidant, the fruit effects on health remain unknown. The aim of this study was to evaluate the effects of guajiru fruit against in vivo DNA damage and oxidative stress and in vivo/in vitro inflammation. Male Wistar rats (4-5 weeks old, 110 g) were divided into eight groups and treated for 14 days with water or lyophilized guajiru fruit (100, 200 or 400 mg/kg b.w.) by gavage. On the 14th day, animals received physiologic solution or DXR (15 mg/kg b.w. i.p.) and were euthanized after 24 hours. Genotoxicity and antigenotoxicity were evaluated by comet assay in peripheral blood, liver, kidney, and heart. Mutagenicity and antimutagenicity of guajiru fruit were investigated by micronucleus test in peripheral blood and bone marrow. The oxidative burst was measured in peripheral blood neutrophils. Oxidative stress parameters involved the concentration of thiobarbituric acid reactive substances, reduced/oxidized glutathione ratio, and catalase activity in liver, kidney and heart. The expressions of DNA damage/repair genes Gadd45a (growth arrest and DNA damage-inducible alpha), Parp1 (Poly(ADP-ribose) polymerase 1), and Xrcc2 (X-Ray Repair complementing defective repair in Chinese hamster cells 2) and pro-inflammatory markers Il-1 ? (interleukin 1 beta), Il-6 (interleukin 6), Nf-kb (nuclear factor kappa B), and Tnf-? (tumor necrosis factor alpha) were evaluated by real-time quantitative PCR. Human colon cell lines CCD- 18Co (fibroblasts), and HT-29 (adenocarcinoma) were treated with guajiru anthocyanins (1.0 - 20.0 mg/L gallic acid equivalents - GAE) and the expressions of IL-1 ?, IL-6, NF-kB and TNF-? were analyzed at mRNA and protein levels. TNF-? was used to induce inflammation in CCD-18Co cells. Guajiru fruit phytochemicals were quantified and characterized by chromatographic and spectrometric methods. The concentrations of 19 chemical elements were determined by inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS). Delphinidin, cyanidin, petunidin and peonidin were the major anthocyanins in this fruit. Significant amounts of phytochemicals, magnesium, and selenium were found in this fruit. Guajiru fruit displayed in vivo antioxidant activity in neutrophils, antigenotoxicity in peripheral blood and antimutagenicity in bone marrow and peripheral blood. Guajiru fruit decreased DNA damage in liver, kidney, and heart. This fruit decreased the expression of Gadd45a, Il-1 ?, and Tnf-?, in tissues. Cell proliferation was suppressed in HT-29 cells, and this was accompanied by increased intracellular ROS production as well as decreased TNF-?, IL-1 ?, IL-6, and NF-kB expressions. There was no cytotoxic effect of guajiru fruit anthocyanins in CCD-18Co cells. IL-1 ?, IL-6, and TNF-? protein expressions were reduced in TNF-?-treated CCD-18Co cells by guajiru fruit anthocyanins. The findings from this investigation demonstrated that phytochemicals and chemical elements in guajiru fruit possess antigenotoxic, antimutagenic, antioxidant and antiinflammatory effects and encourage other in vivo and clinical studies with this underutilized fruit.
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Avaliaçãoda ação antimutagênica da Ipriflavonacontra os danos induzidos por ciclofosfamidaDelarmelina, Juliana Macedo 05 May 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-05-05 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Ipriflavone is a synthetic isoflavone derivative from daidzein and clinically prescribed for treating and preventing osteoporosis in postmenopausal women. We investigated the potential of this drug against the cytotoxic and mutagenic effects induced by cyclophosphamide (CPA) chemotherapy, using the micronucleus assay in bone marrow erythrocytes of Swiss albino mice (Mus musculus) in vivo. To evaluate their possible mechanisms of action, performed the evaluation of antioxidant activity by DPPH assay. For in vivo testing was carried out three protocols: pretreatment, simultaneous treatment and post treatment. The ipriflavone was evaluated in three different concentrations dissolved in DMSO (1,71; 8,57 e 42,85mg.kg-1 m.c) and administered by oral via. The bone marrow was collected for the evaluation of polycromatic erythrocytes (PCE) and the ratio PCE/(PCE+NCE) (polychromatic erythrocytes / polychromatic erythrocytes + normochromatic erythrocytes). For the DPPH test were assessed five concentrations of ipriflavone (500, 250, 150, 50 e 10μg.mLˉ¹) using DPPH solution (60μM). The results of in vivo tests show that the three concentrations of ipriflavone studied significantly reduced the frequency of MNPCEs induced by CPA, in the pre-treatment protocol and demonstrated the same effect at the concentrations of 1,71 e 42,85mg.kg-1 m.c in the post-treatment. However, simultaneous treatment did not reduce the frequency of MNPCE in any of the concentrations tested. In all protocols performed, the ratio PCE/(PCE+NCE) increased. There was variation between the genders in some of the experimental groups and the evaluation of antioxidant activity of ipriflavone showed no ability to donate hydrogens, suggesting that it acts through other mechanisms, such as inactivation of the enzyme activity of cytochrome P-450 / Ipriflavona é uma isoflavona sintética derivada da daidzeína e utilizada no tratamento e prevenção da osteoporose em mulheres pós-menopausadas. Investigamos o potencial dessa droga contra os efeitos citotóxico e mutagênico induzidos pelo quimioterápico ciclofosfamida (CPA), por meio do ensaio do micronúcleo em eritrócitos de medula óssea de camundongos albinos Swiss (Mus musculus) in vivo. Para avaliar um de seus possíveis mecanismos de ação realizamos a avaliação de sua atividade antioxidante pelo método de DPPH. Para os testes in vivo foram realizados três protocolos: pré-tratamento, tratamento simultâneo e pós-tratamento. A ipriflavona foi avaliada em três concentrações dissolvidas em DMSO (1,71; 8,57 e 42,85mg.kg-1 m.c) e administrada via oral. A medula óssea foi coletada para a avaliação dos eritrócitos policromáticos micronucleados (MNPCEs) e da razão PCE/(PCE+NCE) (eritrócitos policromáticos/eritrócitos policromáticos + eritrócitos normocromáticos). Para o teste de DPPH foram avaliadas 5 concentrações de ipriflavona (500, 250, 150, 50 e 10μg.mLˉ¹) utilizando solução de DPPH 60μM. Os resultados obtidos nos testes in vivo demonstram que a ipriflavona nas três concentrações pesquisadas reduziu significativamente a frequência de MNPCEs induzidos pela CPA no protocolo de pré-tratamento e demonstrou o mesmo efeito nas concentrações de 1,71 e 42,85mg.kg-1 m.c, no pós-tratamento. Entretanto, no tratamento simultâneo, ela não reduziu a frequência de MNPCE em nenhuma das concentrações testadas. Em todos os protocolos realizados houve o aumento da razão PCE/(PCE+NCE), demonstrando sua eficácia na redução da citotoxicidade induzida pela CPA. Houve variação entre os gêneros em alguns dos grupos experimentais. A avaliação da atividade antioxidante da ipriflavona revelou sua ausência de capacidade em doar hidrogênios para o radical DPPH, sugerindo que a mesma atua por meio de outros mecanismos, como por exemplo, inativação da atividade enzimática das isoenzimas do citocromo P-450
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Avaliação de danos genômicos em pacientes submetidos a hemodiálise, após suplementação vitamínicaBatista, Thatiane Lorena Miranda 02 March 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-03-02 / Chronic renal failure (CRF) is increasingly common in the population and involves the irreversible loss of kidney function necessitating treatment of renal replacement therapy. The most common is hemodialysis that performs a bypass filtration, removing fluids and toxins from the blood of the patient. But this process does not physiological causes an increase in oxidative stress and complications such as diseases of morbidity and mortality among them the cardiovascular disease and cancer. For a reduction in the frequency of these diseases is achieved the use of vitamins is necessary because the nutritional status affects the development of these diseases. The aim of this study was to examine the genotoxicity and cytotoxicity in chronic renal patients using the micronucleus assay in lymphocytes and buccal mucosa cells after vitamin supplementation by folic acid and vitamins E, C and B12. There were 16 voluntary patients provided that each of the three samples for each test, a sample was received before supplementation and during the treatment, after one and two months of use of vitamins. In the assay of lymphocytes with blocking cytokinesis (CBMN) were analyzed nuclear buds, nucleoplasmic bridges and micronuclei in binucleated cells, and nuclear division index. Already in the cells of mucosa were binucleated cells, mononucleated and apoptosis, karyolysis, micronucleus and broken egg. The results show that the frequency of nuclear abnormalities was reduced with the use of vitamins in two trials, and in some assessments there were no statistical differences. In addition, were found gender differences in behavior of supplementation. This study provides evidence that vitamin use by patients with chronic renal failure was associated with reductions in nuclear changes evaluated, which may contribute to better quality of life for these patients / A insuficiência renal crônica (IRC) é cada vez mais frequente na população e implica na perda irreversível das funções renais, o que torna necessário um tratamento de terapia renal substitutiva. A mais comum é a hemodiálise, que realiza uma filtração extracorpórea, removendo líquidos e toxinas do sangue do paciente. Porém, esse processo não fisiológico promove um aumento do estresse oxidativo e de complicações como doenças de morbimortalidade, dentre elas a doença cardiovascular e o câncer. Para que uma redução na frequência dessas doenças seja alcançada a utilização de vitaminas se faz necessária já que o estado nutricional interfere para o desenvolvimento dessas doenças. O objetivo desse estudo foi analisar a genotoxicidade e citotoxicidade em pacientes renais crônicos utilizando o ensaio do micronúcleo em linfócitos e células da mucosa bucal após a suplementação vitamínica por ácido fólico, e vitaminas E, C e B12. Dezesseis pacientes voluntários forneceram, cada um, três amostras para cada ensaio, uma amostra foi antes de receberem a suplementação e duas durante o tratamento, após um e dois meses de utilização das vitaminas. No ensaio dos linfócitos com bloqueio de citocinese (CBMN) foram analisados brotos, pontes nucleoplasmática e micronúcleos em células binucleadas, além do índice de divisão nuclear. Já nas células da mucosa foram analisadas células binucleadas, e as mononucleadas em apoptose, cariólise, com micronúcleos e broken egg. Os resultados obtidos demonstram que a frequência das alterações nucleares foi reduzida com a utilização das vitaminas, nos dois ensaios, sendo que algumas avaliações não tiveram diferenças estatísticas. Além disso, foram encontradas diferenças de comportamento dos gêneros frente à suplementação. Este trabalho fornece evidências de que a utilização vitamínica, pelos pacientes renais crônicos, foi associada a reduções das alterações nucleares avaliadas, o que pode contribuir para melhor qualidade de vida desses indivíduos
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Avaliação do potencial mutagênico de corantes têxteis por meio do ensaio de micronúcleo / Evaluation of the mutagenic potential of textile dyes using the micronucleus assayCesila, Cibele Aparecida 27 October 2015 (has links)
Os corantes possuem grande importância nos diversos segmentos industriais, sendo utilizados em medicamentos, cosméticos, alimentos, roupas, plásticos, borracha, dentre outros. Atualmente, são produzidos no mundo mais de 7 x 105 toneladas de corantes por ano, sendo que aproximadamente 26.500 toneladas/ano são consumidas no Brasil. A produção desses compostos, apesar de ter grande importância econômica é alvo da preocupação ambiental, pois cerca de 2 a 50% dos corantes utilizados na indústria alcançam o ambiente aquático durante o processo de produção e de processamento têxtil. Desta forma aproximadamente 280.000 toneladas de corantes da indústria têxtil são descarregados nos efluentes industriais a cada ano no mundo. Dentro desse contexto, os estudos envolvendo a avaliação de risco de corantes e seus produtos de degradação são de grande importância para a análise do impacto que esses compostos podem causar à saúde humana e ao ecossistema. O Acid Black 210 é um azo corante frequentemente utilizado no tingimento do couro, algodão e tecido de lã, representando aproximadamente 80 a 90% do corante de cor preta utilizado na indústria. O Disperse Red 73 é um azo corante de cor vermelha, frequentemente utilizado no tingimento de tecidos. No entanto, não existem estudos publicados na literatura científica sobre o potencial genotóxico e toxicológico desses corantes e sobre o monitoramento da presença desses corantes em águas superficiais. Estudos preliminares realizados em nosso laboratório, mostraram que o corante Disperse Red 73 induziu mutagenicidade nas linhagens TA98 e TA100 de Salmonella typhimurium e que foi extremamente tóxico para a espécie de Daphnia similis em ensaios de toxicidade aguda. Desse modo, esse trabalho teve como objetivo avaliar o potencial mutagênico dos corantes Acid Black 210 e Disperse Red 73 através do ensaio de micronúcleo em células HepG2 e avaliar os efeitos ecotoxicológicos agudos do corante Acid Black 210 utilizando os organismos da espécie Daphnia similis. Adicionalmente foram realizados os ensaios de avaliação de proliferação celular, ensaio de avaliação da morte celular por necrose e apoptose e ensaio de parada do ciclo celular utilizando o corante Acid Black 210 em células HepG2. Os resultados obtidos mostraram que o corante Disperse Red 73 não induziu danos cromossômicos em células HepG2 nas condições testadas. O Acid Black 210 não provocou a morte celular por apoptose e/ou necrose, em altas concentrações provocou parada no ciclo celular e induziu a citotoxicidade nos ensaios de proliferação celular. Os ensaios de micronúcleo realizados com o corante Acid Black 210 foram inconclusivos. Portando, os resultados obtidos nesse trabalho mostram que não ha indícios de que o corante Disperse Red 73 induza mutações cromossômicas e sugerem que o corante Acid Black 210 possua baixa toxicidade. No entanto, outros ensaios serão necessários, para que seja realizada uma avaliação de risco ambiental e para os seres humanos. Os resultados obtidos nesse trabalho juntamente com outros resultados do nosso grupo de pesquisa fornecerão subsídios para a realização da avaliação do perigo e caracterização do risco de exposição dos seres vivos a esses corantes. / Dyes and pigments are important compounds in different areas, for example in the medicine, cosmetic, food, clothing, plastic, rubber, and other industries. Currently, the production of these compounds is around 7 x 106 tons per year all over the world, with 26,500 tons per year being consumed in Brazil. The production of dyes, despite its economic relevance, is a subject of environmental concern, because 2 to 50 % of dyes are discharged directly into wastewater during their production process, corresponding to approximately 280,000 t of textile dyes being discharged in the environment worldwide through industrial effluents every year. In this context, the studies of the risk assessment of the dyes and their degradation products are very relevant to assess the impact of these compounds to the human health and the ecosystem. The Acid Black 210 is an azo dye commonly used in the dyeing of leather, cotton, and wool, representing approximately 80 to 90 % of the black dye used in the industry. However, there are not published studies in the scientific literature about the genotoxic potential and the toxicological concerns of this dye, including its monitoring presence in surface waters. Preliminary studies in our laboratory had shown that the Disperse Red 73 dye induces mutagenicity in the TA98 and TA100 Salmonella typhimurium strains and it is extremely toxic to Daphnia similis in acute toxicity tests. Thus, this study aimed to evaluate the mutagenic potential of the dyes Acid Black 210 and Disperse Red 73 through the micronucleus assay in HepG2 cell, and the acute ecotoxicological effects of the dye Acid Black 210 using the Daphnia similis test. Additionally, it was performed cell proliferation tests, the evaluation of the cell death by apoptosis and necrosis, and the cell cycle arrest assay using the Acid Black 210 dye in HepG2 cells. The results obtained in this study showed that the Disperse Red 73 dye did not induce chromosomal damage in HepG2 cells under the conditions tested. Acid Black 210 dye did not cause cell death by apoptosis and/or necrosis, at higher concentrations cause arrest cell cycle and induced cytotoxicity in cell proliferation assays. Micronucleus assays performed with the dye Acid Black 210 showed inconclusive. Therefore, the results of this study show that there is no evidence that the Disperse Red 73 dye induces chromosomal mutations and suggest that the Acid Black 210 dye has low toxicity. However, other tests will be required to do environmental and human risk assessments of these dyes. The results of this study along with other results of our research group will provide these additional requirements.
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Avaliação do potencial mutagênico de corantes têxteis por meio do ensaio de micronúcleo / Evaluation of the mutagenic potential of textile dyes using the micronucleus assayCibele Aparecida Cesila 27 October 2015 (has links)
Os corantes possuem grande importância nos diversos segmentos industriais, sendo utilizados em medicamentos, cosméticos, alimentos, roupas, plásticos, borracha, dentre outros. Atualmente, são produzidos no mundo mais de 7 x 105 toneladas de corantes por ano, sendo que aproximadamente 26.500 toneladas/ano são consumidas no Brasil. A produção desses compostos, apesar de ter grande importância econômica é alvo da preocupação ambiental, pois cerca de 2 a 50% dos corantes utilizados na indústria alcançam o ambiente aquático durante o processo de produção e de processamento têxtil. Desta forma aproximadamente 280.000 toneladas de corantes da indústria têxtil são descarregados nos efluentes industriais a cada ano no mundo. Dentro desse contexto, os estudos envolvendo a avaliação de risco de corantes e seus produtos de degradação são de grande importância para a análise do impacto que esses compostos podem causar à saúde humana e ao ecossistema. O Acid Black 210 é um azo corante frequentemente utilizado no tingimento do couro, algodão e tecido de lã, representando aproximadamente 80 a 90% do corante de cor preta utilizado na indústria. O Disperse Red 73 é um azo corante de cor vermelha, frequentemente utilizado no tingimento de tecidos. No entanto, não existem estudos publicados na literatura científica sobre o potencial genotóxico e toxicológico desses corantes e sobre o monitoramento da presença desses corantes em águas superficiais. Estudos preliminares realizados em nosso laboratório, mostraram que o corante Disperse Red 73 induziu mutagenicidade nas linhagens TA98 e TA100 de Salmonella typhimurium e que foi extremamente tóxico para a espécie de Daphnia similis em ensaios de toxicidade aguda. Desse modo, esse trabalho teve como objetivo avaliar o potencial mutagênico dos corantes Acid Black 210 e Disperse Red 73 através do ensaio de micronúcleo em células HepG2 e avaliar os efeitos ecotoxicológicos agudos do corante Acid Black 210 utilizando os organismos da espécie Daphnia similis. Adicionalmente foram realizados os ensaios de avaliação de proliferação celular, ensaio de avaliação da morte celular por necrose e apoptose e ensaio de parada do ciclo celular utilizando o corante Acid Black 210 em células HepG2. Os resultados obtidos mostraram que o corante Disperse Red 73 não induziu danos cromossômicos em células HepG2 nas condições testadas. O Acid Black 210 não provocou a morte celular por apoptose e/ou necrose, em altas concentrações provocou parada no ciclo celular e induziu a citotoxicidade nos ensaios de proliferação celular. Os ensaios de micronúcleo realizados com o corante Acid Black 210 foram inconclusivos. Portando, os resultados obtidos nesse trabalho mostram que não ha indícios de que o corante Disperse Red 73 induza mutações cromossômicas e sugerem que o corante Acid Black 210 possua baixa toxicidade. No entanto, outros ensaios serão necessários, para que seja realizada uma avaliação de risco ambiental e para os seres humanos. Os resultados obtidos nesse trabalho juntamente com outros resultados do nosso grupo de pesquisa fornecerão subsídios para a realização da avaliação do perigo e caracterização do risco de exposição dos seres vivos a esses corantes. / Dyes and pigments are important compounds in different areas, for example in the medicine, cosmetic, food, clothing, plastic, rubber, and other industries. Currently, the production of these compounds is around 7 x 106 tons per year all over the world, with 26,500 tons per year being consumed in Brazil. The production of dyes, despite its economic relevance, is a subject of environmental concern, because 2 to 50 % of dyes are discharged directly into wastewater during their production process, corresponding to approximately 280,000 t of textile dyes being discharged in the environment worldwide through industrial effluents every year. In this context, the studies of the risk assessment of the dyes and their degradation products are very relevant to assess the impact of these compounds to the human health and the ecosystem. The Acid Black 210 is an azo dye commonly used in the dyeing of leather, cotton, and wool, representing approximately 80 to 90 % of the black dye used in the industry. However, there are not published studies in the scientific literature about the genotoxic potential and the toxicological concerns of this dye, including its monitoring presence in surface waters. Preliminary studies in our laboratory had shown that the Disperse Red 73 dye induces mutagenicity in the TA98 and TA100 Salmonella typhimurium strains and it is extremely toxic to Daphnia similis in acute toxicity tests. Thus, this study aimed to evaluate the mutagenic potential of the dyes Acid Black 210 and Disperse Red 73 through the micronucleus assay in HepG2 cell, and the acute ecotoxicological effects of the dye Acid Black 210 using the Daphnia similis test. Additionally, it was performed cell proliferation tests, the evaluation of the cell death by apoptosis and necrosis, and the cell cycle arrest assay using the Acid Black 210 dye in HepG2 cells. The results obtained in this study showed that the Disperse Red 73 dye did not induce chromosomal damage in HepG2 cells under the conditions tested. Acid Black 210 dye did not cause cell death by apoptosis and/or necrosis, at higher concentrations cause arrest cell cycle and induced cytotoxicity in cell proliferation assays. Micronucleus assays performed with the dye Acid Black 210 showed inconclusive. Therefore, the results of this study show that there is no evidence that the Disperse Red 73 dye induces chromosomal mutations and suggest that the Acid Black 210 dye has low toxicity. However, other tests will be required to do environmental and human risk assessments of these dyes. The results of this study along with other results of our research group will provide these additional requirements.
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Triagem fitoquímica e avaliação da sensibilidade antimicrobiana e da genotoxicidade de Sedum praealtum DC. (Bálsamo) / Phytochemical screening and evaluation of antimicrobial susceptibility and genotoxicity of Sedum praealtum DC (Balsam)Marques, Milene Bueno 25 February 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-02-25 / Sedum praealtum DC. (Crassulaceae) is one of 350 species pharmacologically active from the genus Sedum, whose actions in treatment of eyes (pain and swelling) and ulcer, inflammatory problems, as contraception and anti-fertilization, antinociceptive and anti-inflammatory have been reported. The objective was to evaluate the hydroethanolic extract of S. praealtum regarding their potential antimicrobial in vitro (some bacteria, yeasts and micobactéria strains), cytotoxic in vitro and genotoxic in vivo. A fast phytochemical screening of this extract was also performed. The antimicrobial activities were carried out by microdilution in broth and agar diffusion methods (CLSI). The genotoxic effects and systemic toxic and cytotoxicity were evaluated by micronucleus assay in mice bone marrow and cell cultures of Aedes albopictus, respectively. The selectivity index was also established (SI = CI50/MIC). Dosages of flavonoids and phenolic compounds were done by colorimetric and precipitation techniques. A high amount of phenolic compounds were identified in S. praealtum root. The S. praealtum leaves showed broad spectrum of action and variables MICs: Gram-negative bacteria (E. aerogenes, E. coli, P. aeruginosa, P. mirabilis, S. marcescens and S. typhimurium), gram-positive (B. cereus, B. subtilis, E. faecalis, M. luteus and S. aureus) and yeast (S. cerevisiae). The stem and root were restricted to gram-positive bacteria and S. cerevisiae, other than E. coli (stem) and P. mirabilis (root) microbicidal action microorganism- and anatomical part-dependent (leaf, stem or root). S. praealtum showed no inhibition against C. albicans, M. tuberculosis and M. bovis. The root showed acceptable SI (SI  1) for P. mirabilis; B. subtilis; B. cereus; M. luteus; E. faecalis; S. aureus and S. cerevisiae, whereas the sheet only for S. cerevisiae. The hydroalcoholic extract of S. praealtum leaves revealed no genotoxic effects (no clastogeny and/or aneugeny) and toxicity in bone marrow of mice, dose (0.5-2 g.Kg-1) and time-independent (24-48 hours), but sex-dependent (male and female). This was the first scientific study of this nature involving S. praealtum and partially the results provide a theoretical basis for comprehensive development and utilization of plant resources. However, advanced phytochemical characterization together with the various pharmacological and pharmacogenomic studies should be conducted in order to characterize their effects and, importantly, for the establishment of limits for human consumption, the delineation of potential risks to human health, and for rational strategies for implementing chemo-preventive measures. / Sedum praealtum DC. (Crassulaceae) é uma das 350 espécies farmacologicamente ativas do gênero Sedum, cujas ações no tratamento dos olhos (dores e inchaços) e úlcera, de problemas inflamatórios, como contraceptivo e antifertilização, antinociceptiva e anti-inflamatória foram relatadas. O objetivo foi avaliar o extrato hidroetanólico de S. praealtum quanto aos seus prováveis potenciais antimicrobiano in vitro de algumas cepas de bactérias, de leveduras e de micobactérias, citotóxico in vitro e genotóxico in vivo. Uma rápida triagem fitoquímica desse extrato também foi realizada. As atividades antimicrobianas foram realizadas empregando-se os métodos de microdiluição em caldo e em difusão em agar (CLSI). Os efeitos genotóxicos e tóxicos sistêmicos e a citotoxicidade foram avaliados pelo ensaio do micronúcleo na medula óssea de camundongos e pelas culturas celulares de Aedes albopictus, respectivamente. O índice de seletividade também foi estabelecido (IS = CI50/CIM). Dosagens de flavonoides e compostos fenólicos foram feitas usando técnicas colorimétricas e de precipitação. Uma elevada quantia de compostos fenólicos foi identificada na raiz de S. praealtum. As folhas de S. praealtum mostraram ação de amplo espectro e CIM variáveis: bactérias gram-negativas (E. aerogenes, E. coli, P. aeruginosa, P. mirabilis, S. marcescens e S. typhimurium), gram-positivas (B. cereus, B. subtilis, E. faecalis, M. luteus e S. aureus) e levedura (S. cerevisiae). O caule e a raiz foram restritos às bactérias gram-positivas e S. cerevisiae, exceto E. coli (caule) e P. mirabilis (raiz) ação microbicida micro-organismo-dependente e parte anatômica-dependente (folha, caule ou raiz). S. praealtum não apresentou ação contra C. albicans, M. tuberculosis e M. bovis. A raiz mostrou IS aceitável (IS  1) para P. mirabilis; B. subtilis; B. cereus; M. luteus; E. faecalis; S. aureus e S. cerevisae, enquanto que a folha apenas para S. cerevisae. O extrato hidroalcoólico das folhas de S. praealtum revelou efeitos não genotóxicos (ausência de clastogenia e/ou aneugênia) e efeitos tóxicos na medula óssea de camundongos, dose- (0,5-2 g.Kg-1) e tempo-independente (24-48h), porém sexo-dependente (macho e fêmea). Este foi o primeiro estudo científico dessa natureza envolvendo S. praealtum e, parcialmente, os resultados fornecem uma base para a utilização e para o desenvolvimento compreensivo de recursos vegetais. Todavia, a caracterização fitoquímica avançada aliada aos diversos estudos farmacológicos e farmacogenômicos deveriam ser conduzidos a fim de caracterizar os seus efeitos e, mais importante, estabelecer limites para o consumo popular, delinear os riscos potenciais à saúde humana, e implementar estratégias racionais e medidas quimio-preventivas.
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Ausência de genotoxidade e redução dos efeitos genotóxicos induzidos por DOX da tintura de sementes de Helianthus annuus Linné (girassol) reveladas pelo ensaio do micronúcleo / Nongenotoxic effects and a reduction of the DOX-induced genotoxic effects of Helianthus annuus Linné (sunflower) seeds revealed by micronucleus assays in mouse bone marrowSouza, Luiz Silva de 10 July 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-07-10 / In addition to being an important source of nutrients, the potential therapeutic effectiveness of H. annuus L. seeds has been previously demonstrated; the beneficial properties of H. annuus L. seeds include an ability to relieve asthmatic symptoms, protective effects on the stomach, benefits to healing, and anti-inflammatory and anti-microbial properties. This research evaluated the mutagenicity and anti-mutagenicity of oil and tincture of H. annuus L. seeds using the micronucleus assay in bone marrow of mice. The interaction between these preparations and the genotoxic effects of doxorubicin (DOX) was also analyzed. Experimental groups were evaluated after 24-48 h of treatment with N-Nitroso-N-ethylurea (NEU) and DOX (positive controls), NaCl (a negative control), a sunflower tincture (250-2,000 mg.Kg-1 of THALS) and two sources of sunflower oils (250-2,000 mg.Kg-1 of POHALS and FOHALS). Anti-mutagenic assays were carried out using the sunflower tincture and oils separately and in combination with these controls. The frequency of micronucleated polychromatic erythrocytes (MNPCEs) was significantly different (p  0.05) between (i) the positive and negative control treatments, (ii) the positive controls and animals treated with THALS and (iii) animals treated with THALS and and THALS combined with the positive controls. However, a slight genotoxicity was observed in the animals treated with the combination of THALS+DOX. Both sources of oils (FOHALS and POHALS) revealed similar results; in these groups, the frequencies of MNPCEs were similar to those observed in negative controls. Statistically significant differences were also observed between the sunflower oil treatments and their associated positive controls. There was no genotoxicity (clastogenicity/aneugenicity) observed in THALS, POHALS and FOHALS regardless of the dose, time (except FOHALS) and gender of mouse (except POHALS and FOHALS). The moderate anti-genotoxic effects of THALS suggest a potential slight protective mechanism against DOX-induced genotoxic effects. / A efetividade terapêutica potencial das sementes de H. annuus L. tem sido demonstrada (alívio dos sintomas da asma, efeitos da proteção gástrica, cicatrização, propriedades anti-inflamatórias e antimicrobianas), em adição à sua importante fonte de nutrientes. Esta pesquisa avaliou a mutagenicidade e anti-mutagenicidade do óleo e da tintura de sementes de H. annuus L. usando o ensaio do micronúcleo em medula óssea de camundongos. A associação sobre os efeitos genotóxicos induzidos pela doxorrubicina (DOX) também foi analisada. Grupos experimentais foram avaliados após 24-48h de tratamento com N-Nitroso-N-ethylurea (NUE) e DOX (controles positivos), NaCl (controle negativo), tintura (250-2.000 mg.Kg-1 de THALS) e duas fontes de óleo de girassol (250-2.000 mg.Kg-1 de POHALS e FOHALS). Ensaios anti-mutagênicos foram realizados usando os controles positives associados com a tintura e óleos de girassol, separadamente. A frequência de eritrócitos policromáticos micronucleados (MNPCEs) foi estatisticamente diferente (p < 0,05) entre (i) os tratamentos controles positives e negativo, (ii) controles positivos e tratamento com THALS e (iii) tratamento com THALS e sua associação aos controles positivos. Contudo, uma leve genotoxicidade foi observada na associação THALS+DOX. Ambas as fontes de óleos (FOHALS e POHALS) revelaram resultados similares, cujas frequências de MNPCEs foram consistentes com aqueles observados no controle negativo. Diferenças significativas também ocorreram entre os tratamentos de óleos e suas associações com os controles positivos. A ausência de genotoxicidade (clastogenia/aneugenia) da THALS, POHALS e FOHALS pode ser inferida independentemente da dose, tempo (exceto para FOHALS) e gênero de camundongo (exceto para POHALS e FOHALS). Efeitos anti-genotóxicos moderados de THALS sugerem um potencial mecanismo ligeiramente protetor sobre os efeitos genotóxicos induzidos pela DOX.
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Avaliação dos efeitos genotóxicos e antigenotóxicos de Salvia officinalis e seus aspectos terapêuticos em ciência animal / Evaluation of the genotoxic and antigenotoxic effects of Salvia officinalis and its therapeutic aspects in animal scienceTERRA, Roberta Soares 31 March 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-03-31 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG / Salvia officinalis has been widely used in culinary and traditional medicine, and studies have identified numerous chemical compounds and potential therapeutic actions. This study evaluated the genotoxicity of lyophilized hydroalcoholic extract of S. officinalis L. (SO) leaves using the micronucleus assay in mouse bone marrow. The interaction between SO and the genotoxic effects induced by doxorubicin (DXR) was also analyzed – antigenotoxicity assay. Experimental groups consisting of male and female Swiss albinus mice (Unib: SW) were evaluated after 24-48h treatment with cyclophosphamide (CP; 50 mg/kg), DXR (5 mg/kg), NaCl 0.5-2 g/kg) and SO (0.5 g/kg) + DXR (5 mg/kg). The PCEMN analyzes showed differences (p0.05) between SO (1-2 g/kg) and NaCl treatments, regardless of gender and time. DXR induced EPCMNs significantly in both genders and treatment times. Groups of mice treated with DXR showed lower frequencies (p0.05) of PCEMNs when compared to CP control groups (50 mg/kg). Associative treatment (500 mg/kg SO + 5 mg/kg DXR) did not reduce the frequency of DXR-induced PCEMNs (p0.05). The PCE/NCE ratio between control (NaCl, CP and DXR) and experimental genotoxic and antigenotoxic (SO; SO + DXR) treatments were insignificant (p0.05). The results suggest moderately genotoxic effects (clastogeny and/or aneugeny) of S. officinalis L. leaves, dose-dependent (i.e., from 1 g/kg) and gender- and time-independent. However, S. officinalis has no systemic toxicity and antigenotoxic effects (SO + DXR) under the conditions established in the present micronucleus test in mouse bone marrow. / Salvia officinalis tem sido amplamente utilizada na culinária e na medicina tradicional, e estudos têm identificado inúmeros compostos químicos e potenciais ações terapêuticas. Esta pesquisa avaliou a genotoxicidade do extrato hidroalcoólico liofilizado de folhas de S. officinalis L. (SO) usando o ensaio do micronúcleo em medula óssea de camundongos. A interação entre SO e os efeitos genotóxicos induzidos pela doxorrubicina (DXR) também foi analisada – ensaio de antigenotoxicidade. Grupos experimentais constituídos de camundongos machos e fêmeas Swiss albinus (Unib: SW) foram avaliados após 24-48h de tratamento com ciclofosfamida (CP; 50 mg/Kg), DXR (5 mg/Kg), NaCl (150 mM), SO (0,5–2 g/Kg) e SO (0,5 g/Kg) + DXR (5 mg/Kg). As análises de EPCMNs mostraram diferenças (p0,05) entre os tratamentos de SO (1–2 g/Kg) e NaCl, independentemente do gênero e do tempo. DXR induziu EPCMNs significativamente em ambos os gêneros e tempos de tratamento. Grupos de camundongos tratados com DXR mostraram frequências menores (p<0,05) de EPCMNs quando comparados com os grupos controles CP (50 mg/Kg). O tratamento associativo (500 mg/Kg de SO + 5 mg/Kg de DXR) não reduziu a frequência de EPCMNs (p<0,05) induzida por DXR. As proporções de EPC/ENC entre tratamentos controles (NaCl, CP e DXR) e experimentais genotóxicos e antigenotóxicos (SO; SO + DXR) foram insignificantes (p0,05). Os resultados sugerem efeitos moderadamente genotóxicos (clastogenia e/ou aneugenia) de folhas de S. officinalis L., dose-dependente (i.e., a partir de 1 g/Kg) e gênero- e tempo-independentes. Contudo, S. officinalis não apresenta toxicidade sistêmica e efeitos antigenotóxicos (SO + DXR) nas condições estabelecidas no presente teste do micronúcleo em medula óssea de camundongos.
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Genotoxicidade de Handroanthus impetiginosus e lapachol potencialmente aplicáveis na produção animal / Genotoxicity of Handroanthus impetiginosus and lapachol potentially applicable to livestock productionCASTRO, Maysa M. E. 21 February 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018-02-21 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG / Handroanthus impetiginosus (Mart. ex DC.) Mattos (HI) it has been widely used for an extended period in traditional medicine, and several studies have shown the presence of chemical compounds and phytotherapeutic potentials of this plant. The objective was to evaluate the genotoxicity of the extract of H. impetiginosus and lapachol (LAP), one of the main compounds found in this plant, using the mouse bone marrow micronucleus assay. Experimental groups consisting of male and female Swiss albinus mice (Unib: SW) were evaluated after 24-48h (HI) e 24h (LAP) post treatment with Cyclophosphamide (CYCLO, 50 mg.kg-1), NaCl (150 mM), HI (0.5; 1.2 g.kg-1), LAP (0.075, 0.15, 0.30 g.kg-1). For HI, analysis of the MNPCEs showed significant differences between treatment doses (500–2,000 mg.kg-1) and NaCl. PCE/NCE showed significant differences between treatment doses (500–2,000 mg.kg-1) or NaCl compared to CP (50 mg.kg-1). This research suggests presence of genotoxicity in treatment doses 2,000 mg.kg-1, and mild genotoxicity in the others treatment doses (500–1,000 mg.kg-1) of HI, sex and time-independent and absence of toxicity doses-, time- and sex-independent. However, for lapacho, analysis of the MNPCEs showed significant differences between treatment dose (300 mg.kg-1) and NaCl. PCE/NCE showed significant differences between treatment doses (500–2,000 mg.kg-1) or NaCl compared to CP (50 mg.kg-1). This research suggests presence of genotoxicity of LAP, dose-dependent (300 mg.kg-1), but time- and sex-independent and absence of toxicity doses-, time- and sex-independent. / Handroanthus impetiginosus (Mart. ex DC.). Mattos (HI) tem sido muito utilizada por um extenso período na medicina tradicional e vários estudos têm mostrado a presença de compostos químicos e potenciais fitoterapêuticos dessa planta. O objetivo foi avaliar a genotoxicidade do extrato de H. impetiginosus e do lapachol (LAP), um dos principais compostos encontrados nessa planta, usando o ensaio do micronúcleo em medula óssea de camundongos. Grupos experimentais constituídos de camundongos machos e fêmeas Swiss albinus (Unib: SW) foram avaliados após 24-48h (HI) e 24h (LAP) de tratamento com Ciclofosfamida (CICLO; 50 mg.Kg-1), NaCl (150 mM), HI (0,5; 1; 2 g.Kg-1), LAP (0,075; 0,15; 0,30 g.Kg-1). As análises de MNPCEs do grupo tratado com HI mostraram diferenças (p 0,05) entre todas as doses de tratamento (500–2.000 mg.Kg-1) e controle negativo (NaCl). As proporções PCE/NCEapresentaram diferenças significativas (p 0,05) entre as doses de HI (500–2.000 mg.Kg-1) ou controle negativo (NaCl), frente ao controle positivo ciclofosfamida (50 mg.Kg-1).Os resultados sugeremum efeito potencialmente genóxico dependente da dose (2.000 mg.Kg-1) e levemente genotóxico nas demais doses (500–1.000 mg.Kg-1) do extrato de HI, independentemente do tempo de tratamento (24 e 48 h) e do sexo (macho e fêmea), e ausência de toxicidade sistêmica do HI dose, sexo e tempo-independente. Contudo, as análises de MNPCEs do grupo tratado com LAP apresentaram diferenças significativas (p 0,05) entre a dose de tratamento (300 mg.Kg-1) e controle negativo (NaCl), jáas proporções PCE/NCEapresentaram diferenças significativas (p 0,05) entre as doses de LAP (75–300 mg.Kg-1) ou controle negativo (NaCl), frente ao controle positivo ciclofosfamida (50 mg.Kg-1), sugerindopresença de genotoxicidade do LAP, dependentemente da dose de administração fitoterapêutica (300 mg.Kg-1), mas independente do tempo de tratamento (24 e 48 h), e sexo (macho e fêmea), e ausência de toxicidade sistêmica do LAP nas condições do ensaio MN, dose, sexo e tempo-independente.
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Evidências simultâneas de ausência de genotoxicidade e anti genotoxicidade de Zizyphus joazeiro Mart. (raspa-de-juá) usando o ensaio do micronúcleo / Reduction of the DOX-induced genotoxic effects and nonmutagenic effects of Ziziphus joazeiro mart. revealed by micronucleus assaysPúblio, Juliana Yoshida 30 August 2012 (has links)
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Juliana Yoshida Publio-dissertacao.pdf: 1433924 bytes, checksum: f76aaa29ff10b2a7e4052e7a161ab87e (MD5)
Previous issue date: 2012-08-30 / The therapeutic activity of Ziziphus joazeiro Mart. (raspa-de-Juá) has been demonstrated from some studies, such as, antifungal, antibacterial, antipyretic and antioxidant properties. The aim of this research was to evaluate the mutagenicity of glycolic extract of Z. joazeiro Mart. (GEZJ) barks using the micronucleus assay in bone marrow of mice (heterogenetic Swiss albinus Unib: SW). The interaction between GEZJ and the genotoxic effects of doxorubicin (DOX) was also analysed. Experimental groups were evaluated after 24-48 h of treatment with N-Nitroso-N-ethylurea (NEU) and DOX (positive controls), NaCl (a negative control) and GEZJ (250-2,000 mg.Kg-1). Anti-mutagenic assays were carried out using the GEZJ in combination with these positive controls (GEZJ+NEU and GEZJ+DOX). The frequency of micronucleated polychromatic erythrocytes (MNPCEs) was significantly different (p < 0.05) between (i) the positive and negative control treatments, (ii) the positive controls and animals treated with GEZJ and (iii) animals treated with positive controls (NEU or DOX) and GEZJ combined with these positive controls. There was no mutagenicity (clastogenicity/aneugenicity) observed in GEZJ regardless of the dose and time, but a variable response was observed among genders of mouse. The anti-mutagenic effects of GEZJ suggest a potential protective mechanism against DOX-induced genotoxic effects. / A atividade terapêutica de Zizyphus joazeiro Mart. (Raspa-de-Juá) tem sido demonstrada a partir de algumas pesquisas, como por exemplo, propriedades antifúngica, antibacteriana, antipirética e antioxidante. O objetivo dessa pesquisa foi avaliar a mutagenicidade do extrato glicólico da casca de Z. joazeiro Mart. (GEZJP) usando o ensaio do micronúcleo in vivo na medula óssea de camundongos heterogenéticos Swiss albinus (Unib:SW). A sua associação sobre os efeitos genotóxicos induzidos pela DOX também foi analisada. Grupos experimentais foram avaliados após 24-48h de tratamento com NEU e DOX (controles positivos), NaCl (controle negativo), e GEZJP (500-2.000 mg.Kg-1). Ensaios anti-mutagênicos foram realizados usando os controles positivos associados à GEZJP, separadamente. As freqüências de PCEs e PCEMNs, e a relação PCE/NCE por animal foram analisadas. Diferenças significantes (p < 0,05) foram observadas (i) entre as freqüências de PCEMNs dos tratamentos controles positivos e negativos, (ii) entre os tratamentos controles positivos (NEU/DOX) e experimentais mutagênicos (500-2.000 mg.Kg-1 de GEZJP), e (iii) entre os tratamentos controles positivos (NEU/DOX) e experimentais anti-mutagênicos (GEZJP+DOX ou GEZJP+NEU). Quanto à relação PCE/NCE, diferenças significativas não foram encontradas entre (i) os tratamentos controles negativos e anti-mutagênicos (i.e., GEZJP+DOX), e (ii) entre os tratamentos mutagênicos (GEZJP), controles positivos e anti-mutagênicos (i.e., GEZJP+NEU). Os resultados sugerem inexistência de mutagenicidade (mecanismos clastogênicos e/ou aneugênicos) do GEZJP, independentemente da dose e do tempo de tratamento, muito embora uma resposta variável tenha sido observada entre os gêneros (masculino e feminino). As relações PCE/NCE observadas sugerem toxicidade sistêmica do GEZJP, independentemente da dose, do tempo e do gênero do animal. Contudo, o GEZJP pode apresentar propriedades fitoquímicas contra os efeitos genotóxicos e/ou tóxicos induzidos pelo quimioterápico DOX.
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