Submitted by FERNANDA DA SILVA VON PORSTER (fdsvporster@univates.br) on 2015-08-10T18:31:31Z No. of bitstreams: 3 license_text: 21490 bytes, checksum: 7ff346999f7486617a4302c4f2f02bc7 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) 2015EvelineSimonetti.pdf: 2527066 bytes, checksum: ee30959f60e3f2443928f47e6896623c (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Lisboa Monteiro (monteiro@univates.br) on 2015-08-17T20:05:21Z (GMT) No. of bitstreams: 3 license_text: 21490 bytes, checksum: 7ff346999f7486617a4302c4f2f02bc7 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) 2015EvelineSimonetti.pdf: 2527066 bytes, checksum: ee30959f60e3f2443928f47e6896623c (MD5) / Made available in DSpace on 2015-08-17T20:05:21Z (GMT). No. of bitstreams: 3 license_text: 21490 bytes, checksum: 7ff346999f7486617a4302c4f2f02bc7 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) 2015EvelineSimonetti.pdf: 2527066 bytes, checksum: ee30959f60e3f2443928f47e6896623c (MD5) / As doenças transmitidas por alimentos ocorrem por diversos motivos sendo principalmente devido à ingestão de alimentos contaminados por microrganismos patogênicos, dentre eles a Escherichia coli e Listeria monocytogenes. Uma das alternativas que vêm sendo estudada para minimizar a contaminação é o emprego de plantas como antimicrobiano de origem natural em produtos alimentícios. Desta forma o objetivo do presente estudo foi fornecer dados científicos a respeito de duas plantas nativas do RS ainda não estudadas, Eugenia anomala e Psidium salutare, para um potencial emprego como antimicrobiano natural em alimentos. Para tanto, avaliou-se a atividade antimicrobiana de extratos de E. anomala e P. salutare contra E. coli e L. monocytogenes através da determinação da concentração inibitória mínima (CIM) pelo método de microdiluição, a capacidade antioxidante dos extratos por meio do método de redução do radical 1,1-difenil-2-picrilidrazil (DPPH) e a citotoxicidade in vitro empregando células CHO-K1. Os resultados obtidos mostraram que os extratos de acetato de etila e etanólico de ambas as espécies vegetais possuem ação antioxidante comparável a do padrão. Quanto à atividade antimicrobiana, somente o extrato hexânico de P. salutare apresentou tal ação sendo ela moderada (CIM=312,5 μg/mL) e à citotoxicidade todos os extratos apresentaram ação citotóxica sendo que o extrato clorofórmico de E. anomala e hexânico de P. salutare apresentaram elevada ação e os demais extratos moderada ação citotóxica a uma concentração de 100 μg/mL. Assim, o presente estudo demonstrou que as espécies vegetais estudadas apresentam potencial para emprego em antimicrobiano sendo necessária a otimização do processo de extração. / The foodborne diseases occur for various reasons and mainly due to the ingestion of food contaminated by pathogenic micro-organisms, including Escherichia coli and Listeria monocytogenes. One of the alternatives that have been studied to minimize contamination is the use of plants as an antibacterial of natural origin in food products. Therefore, the objective of this study is to provide scientific data on two native plants of RS have not studied, Eugenia anomala and Psidium salutare for a job potential as natural antimicrobial in food. To this end, we evaluated the antimicrobial activity of extracts of E. and P. anomala salutare against E. coli and L. monocytogenes by determining the minimal inhibitory concentration (MIC) by the broth microdilution method, the antioxidant activity of the extracts by means of method of reducing the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical and in vitro cytotoxicity using CHO-K1 cells. The results showed that the extracts of ethyl acetate and ethanol of both species have antioxidant activity comparable to the standart. As for antimicrobial activity, only the hexane extract of P. salutare showed such action being her moderate (MIC = 312.5 μg/mL) and cytotoxicity all extracts showed cytotoxic action of which the chloroform extract of E. anomala and hexane P. salutare presented high action and the other moderate cytotoxic action extracts at a concentration of 100 μg/mL. Thus, the present study showed that plant species have potential for use in antimicrobial requiring the optimization of the extraction process.

Submitted by Chaylane Marques (chaylane.marques@ufpe.br) on 2015-03-12T18:31:26Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) aDissertação (2).pdf: 2483953 bytes, checksum: f63c561468eb11598704cc10d8d42fc9 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-12T18:31:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) aDissertação (2).pdf: 2483953 bytes, checksum: f63c561468eb11598704cc10d8d42fc9 (MD5) Previous issue date: 2012-05-18 / O gênero Croton pertencente a família Euphorbiaceae é encontrado em áreas tropicais e subtropicais de todo o mundo. No Brasil, os representantes deste gênero, são utilizados por possuírem atividades biológicas conhecidas. De acordo com a literatura, a espécie estudada no presente trabalho, Croton pulegioides, conhecido popularmente como Zabelê, não possui estudos fitoquímicos nem biológicos anteriores. Portanto, este trabalho contribui para a elucidação dos grupos de metabólitos presentes na planta, bem como para o conhecimento sobre as atividades biológicas testadas. No trabalho foi feito um estudo fitoquímico, onde foram investigados e identificados os grupos de metabólitos secundários dos extratos da raiz, do caule e das folhas da planta, através de cromatografia em camada delgada. Foram evidenciada a presença de alcalóides, flavonóides, monoterpenos, sesquiterpenos, triterpenos, esteróides e proantocianidinas, já citadas na literatura para outras espécies do mesmo gênero. Na analise do óleo essencial, foram identificadas 6 possíveis moléculas, sendo algumas delas, já relatadas para outras espécies de Croton. A atividade antimicrobiana, já relatada para outras espécies do mesmo gênero, foi confirmada para o C. pulegioides através de testes com os três extratos já mencionados para as cepas de Staphylococcus aureus AM 103, Staphylococcus epidermidis AM 235, Staphylococcus saprophyticus AM 245, Enterococcus faecalis AM 1056, Pseudomonas aeruginosa AM 206, Escherichia coli AM 1050, Klebsiella pneumoniae AM 410, Bacillus subtilis AM 04, Candida krusei AM 1168, Candida tropicalis AM 1181, Candida albicans AM 1140, utilizando-se a técnica de diluição em poços. O teste de citotoxicidade foi realizado utilizando-se 3 linhagens especificas de células tumorais: HT29 (carcinoma de cólon - humano), HEp-2 (carcinoma de laringe - humano) e NCI H-292 (câncer de pulmão– humano. Os três extratos, bruto e seco da raiz, caule e folhas, testados obtiveram percentual de inibição do crescimento celular (IC%) das amostras nas 3 linhagens tumorais testadas. Para as atividades farmacológicas, foi testado extrato bruto seco da raiz da planta. Para cada teste foram utilizadas 3 doses em diferentes concentrações. Foi realizado o teste de toxicidade aguda. Nenhuma dose apresentou toxicidade nos animais. Após essa avaliação, foram feitos testes anti-inflamatórios - edema de pata e peritonite, os quais obtiveram resultados satisfatórios.

Na engenharia de tecidos os biomateriais são usados tanto para induzir a formação óssea no tecido adjacente quanto agir como matriz temporária de células e outros agentes. Compósitos biodegradáveis a base de hidroxiapatita, colágeno e quitosana foram preparados como arcabouços para permitir a regeneração óssea. Este estudo teve como objetivo avaliar a toxicidade celular in vitro de novos compósitos de substituição óssea e o seu comportamento biológico após implantação subcutânea no processo de remodelação e cicatrização tecidual. Foram confeccionadas mantas a base de hidroxiapatita (HA), obtida por desproteinização e calcinação do osso bovino, colágeno (Col), obtido por tratamento alcalino do tendão bovino e quitosana (Qui), extraída do gládio de lula, nas seguintes proporções: B1) HA (mistura de partículas <0,2 mm e entre 0,2 e 1,18 mm, proporção 1:1) + Blenda (Col 1% + Qui 0,5%, proporção 1:1), proporção HA:Blenda 1:5; B2) HA (mistura de partículas <0,2 mm e entre 0,2 e 1,18 mm, na proporção 1:1) + Col 1%, proporção HA:Col 1:5; B3) HA (partículas <0,2 mm) + Col 1%, na proporção 1:5. O teste de citotoxicidade in vitro foi realizado pelo método de difusão de extrato em solução (brometo de tetrazolio - MTT). Os biomateriais descritos acima foram avaliados juntamente com o controle positivo (látex), sendo que todos foram submetidos a procedimentos de extração de acordo as normas da ISO10993-5. O meio de cultura foi utilizado como controle negativo. Foram utilizadas duas linhagens celulares: células tumorais de laringe humana HEp (ATCC-CCL-23) e células normais de rim de macaco verde africano (Cercopithecus aethiops) VERO (n=3). A citotoxicidade foi avaliada em um espectrofotômetro (absorbância de 570nm). No teste de biocompatibilidade as amostras foram implantadas no subcutâneo da região dorsal de 51 ratos Wistar. Histomorfometria de espessura e qualidade da cápsula fibrosa, interface implante-tecido, infiltrado inflamatório e crescimento celular interno foram realizados aos 3, 7 e 28 dias após cirurgia (n=5). Imunohistoquímica foi realizada para caracterizações adicionais do infiltrado de macrófagos. No teste de citotoxicidade as linhagens celulares mostraram resultados semelhantes. Não houve diferença entre os compósitos e o controle negativo. Foi demonstrado que os compósitos avaliados não apresentaram efeitos tóxicos em comparação ao controle positivo. No teste subcutâneo a qualidade e a espessura da cápsula não apresentaram diferenças significantes entre os biomateriais e os períodos de implantação. A resposta celular inflamatória aos 7 dias foi mais intensa no biomaterial B1, seguido pelo biomaterial B2 e B3. Uma baixa reação de corpo estranho foi observada em todos os biomateriais, caracterizada pela presença de poucos macrófagos. Ocorreu um intenso crescimento celular no interior do biomaterial B3 aos 28 dias. A análise histológica sugere que esses biomateriais são bem tolerados com baixa reação tecidual inflamatória. Concluímos que os três biomateriais avaliados não apresentaram evidências de citotoxicidade in vitro e, in vivo, mostraram uma boa biocompatibilidade. Esses materiais mostraram-se bons candidatos a matrizes para engenharia de tecidos e enxertos para regeneração óssea. / The biodegradable hydroxyapatite / chitosan / collagen composites of similar composition of the normal human bone were prepared as a biomimetic scaffold for bone replacement and regeneration. The aim of the present study was to evaluate the in vitro cytotoxicity of three new bone grafts and the influence of these synthetic grafts on the inflammatory response and remodeling of connective tissue during wound-healing process. Three biomaterials were developed: B1 = hydroxyapatite (particles size <0,2 mm + between 0,2 and 1,18 mm) / collagen 1% / chitosan 0.5%; B2 = hydroxyapatite (particles size <0,2 mm + between 0,2 and 1,18 mm) / collagen 1% and B3 = hydroxyapatite (particles size <0,2 mm) / collagen 1%. These biomaterials were investigated using a tetrazolium-based calorimetric assay (MTT assay). Latex was used as positive control and the culture medium as a negative control. Two cell lines were used to evaluate the effect of cell type on the toxicity results: human tumor cells HEp-2 (ATCC-CCL23) and monkey normal cells (VERO). Extracts from the biomaterials were obtained according to ISO 10993-12 standards. The cytotoxicity was assessed in a spectrophotometer (the absorbance was read at 570 nm). There were two independent experiments in triplicates. All values were expressed as mean values \'+ OU -\' standard deviation. In the biocompatibility test the samples were implanted subcutaneously in the dorsal lumbar region of 51 Wistar rats. Histomorphometric evaluation of capsule thickness, capsule quality, implant-tissue interface, infiltrate / inflammation and cellular growth within implant was performed 3, 7 and 28 days post-operatively (n=5). Immunohistochemistry was performed for further characterization of the macrophages infiltrate. In cytotoxicity test the cell lines showed similar results. There is no difference in values between the composites and negative control. The values of composites were significant different than the positive control. It was showed that none of the tested composites presents toxic effects for the cell lines evaluated in comparison with positive control. In the subcutaneous test the capsule thickness and capsule quality didn\'t show significant differences between the biomaterials and time of implantation. The biomaterial B1 showed significant difference in inflammatory cellular response than B2 and B3 at 7 days. A low ongoing foreign body reaction was observed in all biomaterials characterized by infiltration of few macrophages. A significant cellular growth within the B3 was observed at 28 days. Histological analysis suggested that the biomaterials were well tolerated with low inflammatory response. According to this study, the three bone grafts evaluated showed no evidence of cytotoxicity and good biocompatibility which makes them suitable candidates to design of bone replacement graft material.

Made available in DSpace on 2016-08-15T20:31:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MairaCJSL_DISSERT.pdf: 420836 bytes, checksum: 822f4cc895779b5cc7c308d8152a664d (MD5) Previous issue date: 2011-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study aimed to evaluate the spontaneous cases of poisoning in goats, rats and toxicity in vitro cytotoxicity of Aspidospema pyrifolium. In all spontaneous cases studied, the plant is ingested and the abortion cases occurred exclusively in goats. Most cases of abortion occurred during the dry season and early rainy season, and experienced the goats were less affected than the young goats. We used male and female rats of Wistar strain. The extract of the plant A. pyrifolium was administered in females at day 15 of gestation or from the 15th to the 17th day of gestation, which showed reduced fetal weight and strong evidence of maternal toxicity. Rats subjected to intraperitoneal injection of the extract of A. pyrifolium showed motor dysfunction and death, male rats were more resistant than females. The administration of atropine, diazepam and xylazine did not help in preventing the effects of toxicity. The evaluation of osmotic fragility of red blood cells was performed with the plant extract in different concentrations. In addition, we used larvae from a day of brine shrimp, which were incubated with different concentrations of the extract. It was found that the extract of A. pyrifolium promoted hemolysis and was lethal to A. saline. These in vitro tests may be useful as adjunct tests for further studies with this plant. / O presente trabalho teve por objetivo avaliar casos espontâneos de intoxicação em caprinos, toxicidade em ratos e citotoxicidade in vitro da Aspidospema pyrifolium. Em todos os casos espontâneos estudados, a ingestão da planta e os casos de aborto ocorreram exclusivamente em caprinos. A maioria dos casos de aborto ocorreu durante a estação seca e início da estação chuvosa, e as cabras experientes eram menos afetadas do que as cabras jovens. Foram utilizados ratos machos e fêmeas da linhagem Wistar. O extrato obtido da planta A. pyrifolium foi administrado nas fêmeas no 15º dia de gestação ou a partir do 15º ao 17º dia de gestação, que apresentaram redução do peso fetal e fortes indícios de toxicidade materna. Ratas submetidas a injeção intraperitoneal do extrato da A. pyrifolium apresentaram distúrbios motores e morte; ratos machos foram mais resistentes do que as fêmeas. A administração de atropina, xilazina e diazepam não auxiliou na prevenção dos efeitos de toxicidade. A avaliação da fragilidade osmótica das células vermelhas do sangue foi realizada com o extrato da planta em diferentes concentrações. Além disso, utilizou-se larva de um dia de Artemia salina, que foram incubadas com diferentes concentrações do extrato. Verificou-se que o extrato de A. pyrifolium promoveu hemólise e foi letal para A. salina. Estes testes in vitro podem ser úteis como testes adjuntos de mais estudos com esta planta.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2015-11-06T14:33:38Z No. of bitstreams: 1 GabrielaMedeirosAraujo_DISSERT.pdf: 6196726 bytes, checksum: bb286b387ac4454fac5063e624581413 (MD5) / Approved for entry into archive by Elisangela Moura (lilaalves@gmail.com) on 2015-11-06T14:49:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 GabrielaMedeirosAraujo_DISSERT.pdf: 6196726 bytes, checksum: bb286b387ac4454fac5063e624581413 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-06T14:49:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GabrielaMedeirosAraujo_DISSERT.pdf: 6196726 bytes, checksum: bb286b387ac4454fac5063e624581413 (MD5) Previous issue date: 2014-03-26 / A Helicobacter pylori ? uma bact?ria espiralada, Gram negativa, m?vel emicroaer?bia reconhecida como uma das principais causas de gastrite, ?lcera, c?ncerg?strico e do linfoma de c?lulas B de baixo grau de tecido linfoide associado ? mucosa(MALT), se constituindo um microrganismo em destaque na ?rea da microbiologiam?dica. Sua import?ncia se deve ? dificuldade de tratamento, devido ? necessidade douso concomitante de v?rios medicamentos al?m do crescente surgimento de cepasresistentes e multirresistentes aos antibi?ticos empregados na cl?nica. Com o intuito deampliar a gama de op??es terap?uticas eficazes e seguras, ultimamente, vem sendointensificados estudos qu?micos sobre plantas medicinais, seja atrav?s da obten??o deextratos, fra??es, compostos isolados ou ?leos essenciais que apresentem algum tipode atividade biol?gica. Diante do exposto, objetivouseavaliar a atividade inibit?ria deextratos vegetais oriundos do Syzygium cumini e Encholirium spectabile, plantas comhist?rico de a??o anti?lceras, e do ?leo essencial obtido do S. cumini frente a H. pylori(ATCC 43504) utilizando a t?cnica de difus?o em disco, para avalia??o qualitativa, e adetermina??o da concentra??o inibit?ria m?nima (CIM), atrav?s da t?cnica demicrodilui??o em caldo, para an?lise quantitativa. Tamb?m foi avaliada a toxicidade invitro dos extratos a partir de ensaio hemol?tico, utilizando eritr?citos de carneiro, e emcultura de c?lulas HeLa e VERO, pelo ensaio colorim?trico de viabilidade celularutilizando o MTT. Os extratos de ambos vegetais empregados nos ensaiosantimicrobianos n?o inibiram o crescimento bacteriano, em contrapartida o ?leoessencial do S. cumini (SCFO) mostrouseeficaz, exibindo CIM de 205 ?g/mL (dilui??oequivalente a 0,024% do ?leo bruto). Quanto ao ensaio hemol?tico, o mesmo ?leo aindaexibiu toxicidade intermedi?ria ao promover 25% de hem?lise a 1000 ?g/mL. Em rela??o? citotoxicidade em cultura de c?lulas, o SCFO, a 260 ?g/mL, comprometeu a viabilidadecelular de cerca de 80% das c?lulas HeLa e 50% das c?lulas VERO. Portanto o ?leoobtido das folhas do S. cumini apresenta potencial antibacteriano frente a H. pylori epotencial citot?xico, sugerindoseuma fonte de novas mol?culas candidatas a f?rmacos,desde que novas etapas de toxicidade in vitro e in vivo assim como caracteriza??oqu?mica sejam avaliadas. Al?m disso, o desenvolvimento de um sistema de libera??o def?rmacos pode resultar em um prot?tipo a ser utilizado em testes pr?cl?nicos. / Helicobacter pylori is a spiral, Gram negative, mobile, and microaerophilic bacteria recognized as a major cause of gastritis, ulcer, gastric cancer, and gastric low grade, B cell, mucosa ? associated lymphoid tissue (MALT) lymphoma, constituting an important microorganism in medical microbiology. Its importance comes from the difficulty of treatment because the requirement of multiple drugs use, besides the increasing emergence of resistant and multiresistant strains to antibiotics used in th e clinic. In order to expand safe and effective therapeutic options , chemical studies on medicinal plants by obtaining extracts, fractions, isolated compounds or essential oils with some biological activity has been intensified . Given the above, the objective was to evaluate the inhi bitory activity of organic extracts derived from Syzygium cumini and Encholirium spectabile, with antiulcer history, and the essential oil, obtained from S. cumini, against H. pylori (ATCC 43504) by the disk diffusion method, for qualitative evaluation, an d determination of minimum inhibitory concentration (MIC) using the broth microdilution method, for quantitative analysis. Also was evaluated the extracts in vitro toxicity by a hemolytic assay using sheep red blood cells, and VERO and HeLa cells using the MTT assay to analyze cell viability. The extracts of both plant used in antimicrobial assays did not inhibit bacterial growth, however the essential oil of S. cumini (SCFO) proved effective, showing MIC value of 205 ?g/mL (0.024 % dilution of the original oil). In the hemolytic assay, the same oil shows moderate toxicity, by promote 25% hemolysis at 1000 ?g/mL. Regarding the cytotoxicity in cell culture, the SCFO, at 260 ?g/mL, affected the cell viability around 80% of HeLa and 50% of VERO cells. So the oi l obtained from S. cumini leaves has antimicrobial activity against H. pylori and cytotoxicity potential, suggesting a source of new molecule drug candidates, since new stages of toxicity in vitro and in vivo, as well, chemical characterization be evaluate d. Moreover, the development of a prospective drug delivery system can result in a prototype to be used in preclinical tests.

Na engenharia de tecidos os biomateriais são usados tanto para induzir a formação óssea no tecido adjacente quanto agir como matriz temporária de células e outros agentes. Compósitos biodegradáveis a base de hidroxiapatita, colágeno e quitosana foram preparados como arcabouços para permitir a regeneração óssea. Este estudo teve como objetivo avaliar a toxicidade celular in vitro de novos compósitos de substituição óssea e o seu comportamento biológico após implantação subcutânea no processo de remodelação e cicatrização tecidual. Foram confeccionadas mantas a base de hidroxiapatita (HA), obtida por desproteinização e calcinação do osso bovino, colágeno (Col), obtido por tratamento alcalino do tendão bovino e quitosana (Qui), extraída do gládio de lula, nas seguintes proporções: B1) HA (mistura de partículas <0,2 mm e entre 0,2 e 1,18 mm, proporção 1:1) + Blenda (Col 1% + Qui 0,5%, proporção 1:1), proporção HA:Blenda 1:5; B2) HA (mistura de partículas <0,2 mm e entre 0,2 e 1,18 mm, na proporção 1:1) + Col 1%, proporção HA:Col 1:5; B3) HA (partículas <0,2 mm) + Col 1%, na proporção 1:5. O teste de citotoxicidade in vitro foi realizado pelo método de difusão de extrato em solução (brometo de tetrazolio - MTT). Os biomateriais descritos acima foram avaliados juntamente com o controle positivo (látex), sendo que todos foram submetidos a procedimentos de extração de acordo as normas da ISO10993-5. O meio de cultura foi utilizado como controle negativo. Foram utilizadas duas linhagens celulares: células tumorais de laringe humana HEp (ATCC-CCL-23) e células normais de rim de macaco verde africano (Cercopithecus aethiops) VERO (n=3). A citotoxicidade foi avaliada em um espectrofotômetro (absorbância de 570nm). No teste de biocompatibilidade as amostras foram implantadas no subcutâneo da região dorsal de 51 ratos Wistar. Histomorfometria de espessura e qualidade da cápsula fibrosa, interface implante-tecido, infiltrado inflamatório e crescimento celular interno foram realizados aos 3, 7 e 28 dias após cirurgia (n=5). Imunohistoquímica foi realizada para caracterizações adicionais do infiltrado de macrófagos. No teste de citotoxicidade as linhagens celulares mostraram resultados semelhantes. Não houve diferença entre os compósitos e o controle negativo. Foi demonstrado que os compósitos avaliados não apresentaram efeitos tóxicos em comparação ao controle positivo. No teste subcutâneo a qualidade e a espessura da cápsula não apresentaram diferenças significantes entre os biomateriais e os períodos de implantação. A resposta celular inflamatória aos 7 dias foi mais intensa no biomaterial B1, seguido pelo biomaterial B2 e B3. Uma baixa reação de corpo estranho foi observada em todos os biomateriais, caracterizada pela presença de poucos macrófagos. Ocorreu um intenso crescimento celular no interior do biomaterial B3 aos 28 dias. A análise histológica sugere que esses biomateriais são bem tolerados com baixa reação tecidual inflamatória. Concluímos que os três biomateriais avaliados não apresentaram evidências de citotoxicidade in vitro e, in vivo, mostraram uma boa biocompatibilidade. Esses materiais mostraram-se bons candidatos a matrizes para engenharia de tecidos e enxertos para regeneração óssea. / The biodegradable hydroxyapatite / chitosan / collagen composites of similar composition of the normal human bone were prepared as a biomimetic scaffold for bone replacement and regeneration. The aim of the present study was to evaluate the in vitro cytotoxicity of three new bone grafts and the influence of these synthetic grafts on the inflammatory response and remodeling of connective tissue during wound-healing process. Three biomaterials were developed: B1 = hydroxyapatite (particles size <0,2 mm + between 0,2 and 1,18 mm) / collagen 1% / chitosan 0.5%; B2 = hydroxyapatite (particles size <0,2 mm + between 0,2 and 1,18 mm) / collagen 1% and B3 = hydroxyapatite (particles size <0,2 mm) / collagen 1%. These biomaterials were investigated using a tetrazolium-based calorimetric assay (MTT assay). Latex was used as positive control and the culture medium as a negative control. Two cell lines were used to evaluate the effect of cell type on the toxicity results: human tumor cells HEp-2 (ATCC-CCL23) and monkey normal cells (VERO). Extracts from the biomaterials were obtained according to ISO 10993-12 standards. The cytotoxicity was assessed in a spectrophotometer (the absorbance was read at 570 nm). There were two independent experiments in triplicates. All values were expressed as mean values \'+ OU -\' standard deviation. In the biocompatibility test the samples were implanted subcutaneously in the dorsal lumbar region of 51 Wistar rats. Histomorphometric evaluation of capsule thickness, capsule quality, implant-tissue interface, infiltrate / inflammation and cellular growth within implant was performed 3, 7 and 28 days post-operatively (n=5). Immunohistochemistry was performed for further characterization of the macrophages infiltrate. In cytotoxicity test the cell lines showed similar results. There is no difference in values between the composites and negative control. The values of composites were significant different than the positive control. It was showed that none of the tested composites presents toxic effects for the cell lines evaluated in comparison with positive control. In the subcutaneous test the capsule thickness and capsule quality didn\'t show significant differences between the biomaterials and time of implantation. The biomaterial B1 showed significant difference in inflammatory cellular response than B2 and B3 at 7 days. A low ongoing foreign body reaction was observed in all biomaterials characterized by infiltration of few macrophages. A significant cellular growth within the B3 was observed at 28 days. Histological analysis suggested that the biomaterials were well tolerated with low inflammatory response. According to this study, the three bone grafts evaluated showed no evidence of cytotoxicity and good biocompatibility which makes them suitable candidates to design of bone replacement graft material.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-04-17T23:38:51Z No. of bitstreams: 1 LeticiaStreck_TESE.pdf: 2733282 bytes, checksum: a29543b300520c0b87fa69110b9016dc (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-04-21T00:04:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 LeticiaStreck_TESE.pdf: 2733282 bytes, checksum: a29543b300520c0b87fa69110b9016dc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-21T00:04:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LeticiaStreck_TESE.pdf: 2733282 bytes, checksum: a29543b300520c0b87fa69110b9016dc (MD5) Previous issue date: 2017-02-02 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / Doen?as negligenciadas, incluindo a doen?a de Chagas, representam um problema de sa?de mundial devido ao desinteresse da ind?stria na pesquisa por novos f?rmacos. Benznidazol (BNZ), f?rmaco dispon?vel no Brasil para o tratamento da doen?a de Chagas, e distribu?do pelo Minist?rio da Sa?de, apresenta algumas limita??es quanto ao seu uso, em especial na fase cr?nica da doen?a. A tecnologia farmac?utica proporciona o desenvolvimento de sistemas que aumentam a solubilidade do f?rmaco ou aumento de sua concentra??o nas c?lulas/tecidos infectados o que reflete diretamente no aumento da biodisponibilidade e efici?ncia terap?utica do BNZ. Assim, sistemas l?quidos tais como os sistemas coloidais lip?dicos (SCL), como emuls?es, microemuls?es, nanoemuls?es s?o uma alternativa interessante para o aumento da biodisponilidade oral e parenteral do BNZ. Este trabalho tem como objetivo o desenvolvimento de nanoemuls?es biocompat?veis contendo triglicer?deo de cadeia m?dia (Miglyol?812) estabilizados por uma mistura adequada de tensoativos (fosfatidilcolina de soja e oleato de s?dio), al?m de avaliar o efeito tripanocida. As condi??es ideais para obten??o dos sistemas de interesse foi avaliada pelo estudo da temperatura de invers?o de fases (TIF) e da adi??o de um novo componente. Nanoemuls?es foram formadas com adi??o de 2-metilpirrolidona (NMP) com tamanho de got?cula uniforme e menor que 162,66 nm. Os sistemas permaneceram est?veis at? 60 dias quando armazenados a temperatura de 25 ?C. As propriedades reol?gicas mostraram comportamento dependente com a quantidade de co-solvente adicionada ao sistema. As imagens de microscopia de luz polarizada e espalhamento de raios-X a baixo ?ngulo confirmaram a forma??o de sistemas isotr?picos quando o co-solvente est? em concentra??o superior a 5%. A libera??o de BNZ nos sistemas contendo ?cido si?lico em diferentes concentra??es, foi at? 3 (tr?s) vezes mais r?pida que os sistemas sem a subst?ncia. Os sistemas apresentaram biocompatibilidade em diferentes linhagens celulares (Vero, SiHa e LLC-MK2). Nanoemuls?es apresentaram capacidade de veicular o BNZ em sistemas biocompat?veis e com excelente atividade tripanocida, representando assim um futuro promissor no tratamento da doen?a de Chagas, considerando que at? o presente n?o existem formas farmac?uticas l?quidas de administra??o, o que impossibilita o ajuste da dose e a redu??o de efeitos colaterais. / Neglected diseases, including Chagas disease, represent a global health problem due to the industry's lack of interest in research for new drugs. Benznidazole (BNZ), a drug available in Brazil for the treatment of Chagas disease, and distributed by the Health Ministery, presents some limitations regarding its use, especially in the chronic phase of the disease. Pharmaceutical technology provides the development of systems that increase drug solubility or increase its concentration in infected cells / tissues which directly reflects the increased bioavailability and therapeutic efficacy of BNZ. Thus, liquid systems such as lipid colloidal systems (LCS), such as emulsions, microemulsions, nanoemulsions are an interesting alternative for increasing oral and parenteral bioavailability of BNZ. This work aims to develop biocompatible nanoemulsions containing medium chain triglycerides (Miglyol?812) stabilized by a suitable mixture of surfactants (soybean phosphatidylcholine and sodium oleate), and to evaluate the trypanocidal effect. The ideal conditions for obtaining the systems of interest were evaluated by the study of phase inversion temperature (PIT) and the addition of a new component. Nanoemulsions were formed with addition of 2-methylpyrrolidone (NMP) with uniform droplet size and less than 162.66 nm. The systems remained stable for up to 60 days when stored at 25 ? C. The rheological properties showed a behavior dependent on the amount of co-solvent added to the system. The polarized light microscopy and low angle X-ray scattering images confirmed the formation of isotropic systems when the cosolvent is in a concentration greater than 5%. The release of BNZ in systems containing sialic acid at different concentrations was up to 3 (three) times faster than systems without the substance. The systems showed biocompatibility in different cell lines (Vero, SiHa and LLCMK2). Nanoemulsions were able to transport BNZ in biocompatible systems with excellent trypanocidal activity, thus representing a promising future in the treatment of Chagas' disease, considering that to date there are no liquid dosage forms of administration, which makes it impossible to adjust the dose and decrease of side effects.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / In this work was determined, for the first time, the volatile composition from fresh and dried leaves of six accessions (named PM-2, PM-7, PM-10, PM-11, PM-12 e PM-14) and a cultivar (EPAMIG, named here EMB) of Jatropha curcas L. The volatile compounds was extracted by hydrodistillation and then analyzed by GCMS. Thus, it was possible to observe that the (Z)-3-hexen-1-ol was the major compound in the fresh leaves (>70% in all accessions). Alcohols also predominated in the dried leaves, mainly (Z)-2-penten-1-ol and (Z)-3-hexen-1-ol, but others constituents were identified in significant proportions included benzenoid compounds such as benzaldehyde. The influence of drying on volatile composition from leaves of J. curcas was evaluated on the PM-2 accession. Besides, this work also describes the development of a High Performance Liquid Chromatograpy (HPLC) method for differentiation of six accessions and a cultivar (EPAMIG) from fresh and dried leaves of J. curcas. The methanol extracts of the leaves were analyzed by HPLC-DAD and after stages of optimizations, we obtained the fingerprint chromatograms. For a comparative analysis of the accessions and a cultivar, were applied chemometric tools of Principal Component Analysis (PCA) and Hierarchical Cluster Analysis (HCA), which it was possible to discriminate the samples from dried leaves according to their origins. The methanol extracts of the leaves were submitted to cytotoxicity assay against four tumor cell lines (HCT-8, HL-60, SF-295 and MDA-MB435), presenting IC50 values of 25.13 μg/ml, against HL-60 cell line for EMB sample considered promising by National Institute of Cancer, USA (NCI). The biological activity of this extracts was evaluated on the development of Spodoptera frugiperda, considered as a primary pest in corn crop. It was observed 60% larval mortality. / No presente trabalho foi determinado, pela primeira vez, os compostos voláteis das folhas frescas e secas de Jatropha curcas L. pela técnica de hidrodestilação, para seis diferentes acessos (denominados de PM-2, PM-7, PM-10, PM-11, PM- 12 e PM-14) e uma cultivar (EPAMIG, denominada de EMB). As análises foram realizadas através de CG/EM, obtendo-se o (Z)-3-hexen-1-ol (75,7±18,2%) como composto majoritário nas folhas frescas, com percentuais superiores a 70% entre os acessos. Nas folhas secas obteve-se como compostos majoritários o (Z)-2- penten-1-ol (14,9±11,3%), (Z)-3-hexen-1-ol (9,6±9,1%) e o benzaldeído (3,9±2,7%). Um experimento de secagem foi realizado para o acesso PM-2 com intuito de verificar o efeito da secagem na composição dos voláteis das folhas de J. curcas. Neste trabalho também foi desenvolvido um método por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) para diferenciação dos seis acessos e da cultivar (EPAMIG) para folhas frescas e secas de J. curcas. Os extratos metanólicos das folhas foram analisados por CLAE-DAD e após etapas de otimizações, foram obtidos os cromatogramas fingerprints. Para uma análise comparativa entre os acessos e a cultivar, aplicaram-se ferramentas quimiométricas de Análise dos Componentes Principais (PCA) e Análise de Agrupamentos Hierárquicos (HCA), pelas quais foi possível diferenciar as amostras das folhas secas de acordo com suas procedências. Os extratos metanólicos também foram submetidos a ensaios de citotoxicidade in vitro para 04 linhagens de células tumorais humanas (HCT-8, HL-60, SF-295 e MDA-MB- 435), obtendo-se CI50 25,13 μg/mL, na linhagem HL-60 para a amostra da cultivar (EPAMIG). Este resultado está dentro do intervalo proposto pelo National Institute of Cancer, USA (NCI) para considerar extratos como promissores. A atividade biológica destes extratos também foi avaliada sobre o desenvolvimento de Spodoptera frugiperda, principal praga do milho, apresentando 60% de mortalidade larval.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Polymeric nanocapsules have been studied extensively for drug delivery by various routes of administration. Currently, the nanoencapsulation of drugs is considered the most efficient means of ensuring controlled release, specific targeting and reduction of adverse effects. In this context, the aim of this work was to develop polymeric nanocapsules for pulmonary delivery of beclomethasone dipropionate (BD). Nanocapsules have been prepared from 2 polymers, poly(-caprolactone) (PCL) and ethyl cellulose (EC). To quantify the drug in the nanostructures, the analytical method was developed and validated. This method showed to be specific, linear, precise, accurate and robust. Nanocapsules were prepared by interfacial deposition of preformed polymers and were evaluated as to pH, particle diameter, polydispersity index, drug content, encapsulation efficiency and zeta potential. All samples showed encapsulation efficiency greater than 98%, negative zeta potential, pH value in the range of neutrality and drug contents close to their theoretical values. The size distribution was nanometric (158-270 nm) with polydispersity index lower than 0.2. The results of the photodegradation study showed that polymeric nanocapsules were able to protect BD from UVC radiation when compared to the free drug solution. In vitro release experiments were performed using the dialysis bag technique, which showed, for all formulations, a prolonged drug release mediated by anomalous transport and first order kinetics. Free drug in solution took between 24 and 36 h to reach 100% of release, whereas nanocapsules were able to control the drug release for up to 108 h, depending on the polymer employed. Nanocapsules of EC and PCL were evaluated for in vitro and in vivo toxicity and the results suggest that the proposed formulations are safe. In the final stage of the work, pullulan was proposed as stabilizer agent for PCL nanocapsules and the results obtained for the zeta potential and the drug content suggested that these formulations have become more stable. Thus, the nanocapsules developed in this work represent a promising alternative for the pulmonary delivery of BD in the treatment of asthma and other respiratory disorders. / Nanocápsulas poliméricas vem sendo estudadas extensivamente para liberação de fármacos por diversas vias de administração. Atualmente a nanoencapsulação de fármacos é considerada o meio mais eficiente de assegurar liberação controlada, direcionamento específico e redução dos efeitos adversos. Neste contexto, o objetivo do presente trabalho foi desenvolver nanocápsulas poliméricas para a liberação pulmonar do dipropionato de beclometasona (DB). Nanocápsulas foram preparadas a partir de 2 polímeros, a poli(-caprolactona) (PCL) e a etilcelulose (EC). Para a quantificação do fármaco nas nanoestruturas, o método analítico foi desenvolvido e validado. Este mostrou ser específico, linear, preciso, exato e robusto. As nanocápsulas foram preparadas por deposição interfacial do polímero pré-formado e avaliadas quanto ao pH, diâmetro de partícula, índice de polidispersão, teor, eficiência de encapsulamento e potencial zeta. Todas as amostras apresentaram eficiência de encapsulamento maior que 98%, valor de potencial zeta negativo, valor de pH na faixa da neutralidade e teores próximos aos teóricos. A distribuição de tamanho foi nanométrica (158-270 nm) com índice de polidispersão menor que 0,2. Os resultados do estudo de fotodegradação mostraram que as nanocápsulas poliméricas foram capazes de proteger o DB da radiação UVC quando comparadas com uma solução do fármaco. Os experimentos de liberação in vitro foram realizados empregando a técnica de sacos de diálise, a qual mostrou, para todas as formulações, uma liberação prolongada do DB, mediada por transporte anômalo e cinética de primeira ordem. A solução etanólica de DB levou entre 24 e 36 h para alcançar 100% de liberação, enquanto que as nanocápsulas foram capazes de controlar a liberação do fármaco por até 108 h, dependendo do polímero empregado. Nanocápsulas de EC e PCL foram avaliadas quanto à toxicidade in vitro e in vivo e os resultados obtidos sugerem que as formulações propostas são seguras. Na etapa final do trabalho, o pullulan foi proposto como agente estabilizador de nanocápsulas de PCL e os resultados obtidos para o potencial zeta e o teor de fármaco sugerem que estas formulações tornaram-se mais estáveis. Desta forma, as nanocápsulas desenvolvidas neste trabalho representam uma alternativa promissora para a liberação pulmonar do DB no tratamento da asma e de outras desordens do trato respiratório.

Made available in DSpace on 2016-05-02T13:55:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Milene Bueno Marques-Dissertacao.pdf: 825475 bytes, checksum: cd33a50c8ba95cbc3e9504abcf1d976c (MD5) Previous issue date: 2015-02-25 / Sedum praealtum DC. (Crassulaceae) is one of 350 species pharmacologically active from the genus Sedum, whose actions in treatment of eyes (pain and swelling) and ulcer, inflammatory problems, as contraception and anti-fertilization, antinociceptive and anti-inflammatory have been reported. The objective was to evaluate the hydroethanolic extract of S. praealtum regarding their potential antimicrobial in vitro (some bacteria, yeasts and micobactéria strains), cytotoxic in vitro and genotoxic in vivo. A fast phytochemical screening of this extract was also performed. The antimicrobial activities were carried out by microdilution in broth and agar diffusion methods (CLSI). The genotoxic effects and systemic toxic and cytotoxicity were evaluated by micronucleus assay in mice bone marrow and cell cultures of Aedes albopictus, respectively. The selectivity index was also established (SI = CI50/MIC). Dosages of flavonoids and phenolic compounds were done by colorimetric and precipitation techniques. A high amount of phenolic compounds were identified in S. praealtum root. The S. praealtum leaves showed broad spectrum of action and variables MICs: Gram-negative bacteria (E. aerogenes, E. coli, P. aeruginosa, P. mirabilis, S. marcescens and S. typhimurium), gram-positive (B. cereus, B. subtilis, E. faecalis, M. luteus and S. aureus) and yeast (S. cerevisiae). The stem and root were restricted to gram-positive bacteria and S. cerevisiae, other than E. coli (stem) and P. mirabilis (root) microbicidal action microorganism- and anatomical part-dependent (leaf, stem or root). S. praealtum showed no inhibition against C. albicans, M. tuberculosis and M. bovis. The root showed acceptable SI (SI &#61502; 1) for P. mirabilis; B. subtilis; B. cereus; M. luteus; E. faecalis; S. aureus and S. cerevisiae, whereas the sheet only for S. cerevisiae. The hydroalcoholic extract of S. praealtum leaves revealed no genotoxic effects (no clastogeny and/or aneugeny) and toxicity in bone marrow of mice, dose (0.5-2 g.Kg-1) and time-independent (24-48 hours), but sex-dependent (male and female). This was the first scientific study of this nature involving S. praealtum and partially the results provide a theoretical basis for comprehensive development and utilization of plant resources. However, advanced phytochemical characterization together with the various pharmacological and pharmacogenomic studies should be conducted in order to characterize their effects and, importantly, for the establishment of limits for human consumption, the delineation of potential risks to human health, and for rational strategies for implementing chemo-preventive measures. / Sedum praealtum DC. (Crassulaceae) é uma das 350 espécies farmacologicamente ativas do gênero Sedum, cujas ações no tratamento dos olhos (dores e inchaços) e úlcera, de problemas inflamatórios, como contraceptivo e antifertilização, antinociceptiva e anti-inflamatória foram relatadas. O objetivo foi avaliar o extrato hidroetanólico de S. praealtum quanto aos seus prováveis potenciais antimicrobiano in vitro de algumas cepas de bactérias, de leveduras e de micobactérias, citotóxico in vitro e genotóxico in vivo. Uma rápida triagem fitoquímica desse extrato também foi realizada. As atividades antimicrobianas foram realizadas empregando-se os métodos de microdiluição em caldo e em difusão em agar (CLSI). Os efeitos genotóxicos e tóxicos sistêmicos e a citotoxicidade foram avaliados pelo ensaio do micronúcleo na medula óssea de camundongos e pelas culturas celulares de Aedes albopictus, respectivamente. O índice de seletividade também foi estabelecido (IS = CI50/CIM). Dosagens de flavonoides e compostos fenólicos foram feitas usando técnicas colorimétricas e de precipitação. Uma elevada quantia de compostos fenólicos foi identificada na raiz de S. praealtum. As folhas de S. praealtum mostraram ação de amplo espectro e CIM variáveis: bactérias gram-negativas (E. aerogenes, E. coli, P. aeruginosa, P. mirabilis, S. marcescens e S. typhimurium), gram-positivas (B. cereus, B. subtilis, E. faecalis, M. luteus e S. aureus) e levedura (S. cerevisiae). O caule e a raiz foram restritos às bactérias gram-positivas e S. cerevisiae, exceto E. coli (caule) e P. mirabilis (raiz) ação microbicida micro-organismo-dependente e parte anatômica-dependente (folha, caule ou raiz). S. praealtum não apresentou ação contra C. albicans, M. tuberculosis e M. bovis. A raiz mostrou IS aceitável (IS &#61502; 1) para P. mirabilis; B. subtilis; B. cereus; M. luteus; E. faecalis; S. aureus e S. cerevisae, enquanto que a folha apenas para S. cerevisae. O extrato hidroalcoólico das folhas de S. praealtum revelou efeitos não genotóxicos (ausência de clastogenia e/ou aneugênia) e efeitos tóxicos na medula óssea de camundongos, dose- (0,5-2 g.Kg-1) e tempo-independente (24-48h), porém sexo-dependente (macho e fêmea). Este foi o primeiro estudo científico dessa natureza envolvendo S. praealtum e, parcialmente, os resultados fornecem uma base para a utilização e para o desenvolvimento compreensivo de recursos vegetais. Todavia, a caracterização fitoquímica avançada aliada aos diversos estudos farmacológicos e farmacogenômicos deveriam ser conduzidos a fim de caracterizar os seus efeitos e, mais importante, estabelecer limites para o consumo popular, delinear os riscos potenciais à saúde humana, e implementar estratégias racionais e medidas quimio-preventivas.