Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciencias Fisicas e Matematicas / Made available in DSpace on 2012-10-16T07:03:34Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-08T18:42:38Z : No. of bitstreams: 1 100191.pdf: 1645000 bytes, checksum: bbc59e2e4bc20fce90d1049da758c00c (MD5) / Neste trabalho, foi estudado o grau de impedimento imposto pelas barreiras difusionais de ésteres quando estes passam do meio reacional para o gel e vice-versa, através de medidas do coeficiente de difusão (D), segundo tratamento de crooks. Foram obtidos valores do coeficiente de difusão (D) dos benzoatos de etila, n-butila, n-octila, n-cetila e sec-butila, em organo-gel formado pela adição de gelatina a uma microemulsão água-óleo (w/o) de aerosol O-T em n-hexano (MBG). Como solvente externo, utilizou-se o n-hexano, ciclohexano, heptano, acetonitrila e 1,4-dioxano. Estudou-se, também, a atividade catalítica de lipase imobilizadas em MBG na reação de transesterificação do octanoato de p-nitrofenila com álcoois alifáticos (n-pentanol, n-hexanol, n-octanol e 2-butanol) em acetonitrila e 1,4-dioxano como solvente externo à 25oC. Parâmetros tais como o número de átomos de carbono e ramificações na cadeia do álcool bem como o tipo de lipase utilizada, foram discutidos em termos da eficiência catalítica das enzimas imobilizadas em MBG.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciencias Fisicas e Matematicas / Made available in DSpace on 2012-10-17T00:09:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-08T21:50:13Z : No. of bitstreams: 1 107023.pdf: 1768877 bytes, checksum: 6245831394870fc542d78c8a51b145ab (MD5) / As microemulsões água-em-óleo (água + óleo + surfactante) podem ser utilizadas para formar géis elásticos e termoreversíveis pela adição de gelatina. Este sistema é chamado de organo-gel ou MBG (do inglês, "microemulsion-based gels"). As mudanças que ocorrem no organo-gel, quanto a sua estabilidade, foram observadas fixando a concentração do surfactante AOT (di-2-etilhexil sulfosuccinato de sódio) em 0,15 mol/L e variando a quantidade de água, n-heptano e gelatina. A avaliação visual à temperatura ambiente de cada organo-gel possibilitou distinguir três regiões diferentes através do diagrama de fases, que foi obtido pelo gráfico da concentração de gelatina versus W0. As enzimas papaína e palatase M foram imobilizadas em organo-gel de n-heptano. Verificou-se que a papaína destrói o sistema e a palatase M não o altera. Usando palatase M imobilizada em organo-gel, uma série de ésteres alifáticos foi sintetizada sob condições suaves e com bons rendimentos. Parâmetros tais como tamanho da cadeia e ramificações próximas ao centro nucleofílico do álcool foram analisados e associados com a atividade catalítica desta enzima no sistema de MBG. O organo-gel com palatase M foi reutilizado, mostrando que depois de dez conversões a enzima mantém sua atividade catalítica e o sistema permanece inalterado. O gel de ágar também foi usado para imobilizar papaína e palatase M, sendo que o suporte permaneceu estável. Estas enzimas foram usadas em reações de esterificação e aminólise de éster. Com a palatase M imobili7nda em gel de ágar estudou-se o efeito do pH e da temperatura na síntese do laurato de n-pentila. O rendimento do éster não mostrou ser dependente do pH, mas dependente da temperatura.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Programa de Pós-Graduação em Química. / Made available in DSpace on 2012-10-17T10:32:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 189442.pdf: 2055776 bytes, checksum: f7388f516d8509a11b3463fb4a82864b (MD5)

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. / Made available in DSpace on 2012-10-17T11:28:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T19:30:09Z : No. of bitstreams: 1 50708.pdf: 10235909 bytes, checksum: 61d5ef27ac723fac8c79d8c90a237b87 (MD5) / Neste trabalho, estudou-se a transferência reversa de a-quimiotripsina (a-CT) em sistemas de micela reversa com diferentes surfactantes (AOT, lecitina de soja- SbPC, C12E4 e CTAB), para a fase aquosa receptora de NaOH contendo 2,5% de etanol O pH da solução aquosa de a-CT injetada na solução orgânica, influenciou no processo de transferência, em pH 7,7 obteve-se valores mais elevados. A determinação do teor protéico na fase aquosa após a transferência, foi realizada através do método de Lowry. A reação de hidrólise do n-glutaril-L-fenilalanina-p-nitroanilida - GPNA em meio de micela reversa de AOT catalisada pela a-CT obedece a cinética de Michaelis-Menten na faixa de [GPNA] = 0,056 ´ 10-5 - 1,110 ´ 10-5 M. O valor da KM e a Vmáx obtidas foram 6,83 ´ 10-5 M e 3,68 ´ 10-4 s-1, respectivamente. A desidratação da solução de micela reversa de AOT/heptano contendo a-CT, foi realizada através do equilíbrio da fase vapor da solução micelar com LiCl umedecido. A atividade catalítica da a-CT em pH 7,0; 7,7; 8,2 e 9,0, durante o processo de desidratação, diminuiu e aumentou após a re-hidratação do sistema, mostrando que a enzima não foi desnaturada, permanecendo em estado "dormente". Esta propriedade é extremamente importante para a indústria alimentícia e farmacêutica na obtenção de aroma instáveis.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. / Made available in DSpace on 2012-10-17T12:44:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T16:48:58Z : No. of bitstreams: 1 174636.pdf: 2462193 bytes, checksum: 4fa4689e88576335a1f0a6d099ad373f (MD5) / A hidrólise dos ácidos 2,8-carbóxi-N,N-dialquilnaftalâmicos, proposta como modelo não mimético de catálise enzimática por proteinases aspárticas, foi estudada determinando-se a constante de velocidade em função do pH, a uma temperatura de 35 °C. A análise do perfil de pH mostrou que a reação é predominantemente intramolecular na região entre pH = 2,00 e pH = 5,00, onde a decomposição dos ácidos2,8-carbóxi-N,N-dialquilnaftalâmicos ocorre com a participação dos dois grupamentos carboxílicos, um na sua forma ácida não dissociada e outro na forma dissociada (carboxilato), levando a formação do anidrido correspondente. O máximo de velocidade de reação é atingido quando estas duas espécies estão presentes. O efeito isotópico de solvente apresentou para o máximo de velocidade uma relação kH/kD = 1,04 o que, associado ao fato de não ocorrer variação na forma da curva, indica que nenhum próton esteja sendo transferido na etapa determinante da velocidade para esta reação. Parâmetros termodinâmicos calculados, mostraram que a reação apresenta uma dependência de fatores entrópicos e entálpicos.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T12:18:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 279001.pdf: 2201243 bytes, checksum: 0c04e5eedb8b0794d53182c1d683e4aa (MD5) / Neste trabalho foram desenvolvidos e aplicados novos biossensores para a determinação de adrenalina através da voltametria de onda quadrada. Foram construídos dois biossensores diferentes, sendo o primeiro, um biossensor de pasta de carbono contendo líquido iônico hexafluorfosfato de 1-butil-3-metilimidazólio (BMI.PF6) e peroxidase de milho (Zea mays L.) imobilizada em quitina quimicamente modificada com glioxal e carbodiimida, e o segundo, um biossensor contendo microcápsulas de lacase e nanopartículas de platina dispersas em líquido iônico (Pt-BMI.PF6). As enzimas peroxidase e lacase catalisam a oxidação da adrenalina a sua correspondente o-quinona, a qual é reduzida eletroquimicamente na superfície de cada eletrodo a um potencial de -0,23 V e -0,21 V vs. Ag/AgCl, respectivamente. Sob condições experimentais previamente otimizadas para cada um dos biossensores, foram construídas as curvas analíticas a partir da corrente resultante vs. concentração de adrenalina, apresentando linearidade em um intervalo de 9,89x10?7 a 1,22x10?4 mol L?1 e 9,99x10?7 a 2,13x10?4 mol L?1, com um limite de detecção de 2,27x10?7 e 2,93x10?7 mol L-1, respectivamente. A recuperação da adrenalina nas amostras de formulações injetáveis variou de 97,9 a 100,8% e 95,5 a 104,2%, respectivamente para os eletrodos desenvolvidos. Por fim, a quantificação da adrenalina usando esses biossensores apresentou concordância com o método oficial, confirmando que esses métodos propostos representam uma alternativa viável para determinação dessa catecolamina em formulações farmacêuticas.

Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-05T11:33:07Z No. of bitstreams: 2 diego_pereira_vaz.pdf: 503298 bytes, checksum: 2a066b7e12af1198d4017ca294e7033b (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-05T11:35:48Z (GMT) No. of bitstreams: 2 diego_pereira_vaz.pdf: 503298 bytes, checksum: 2a066b7e12af1198d4017ca294e7033b (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-05T11:36:58Z (GMT) No. of bitstreams: 2 diego_pereira_vaz.pdf: 503298 bytes, checksum: 2a066b7e12af1198d4017ca294e7033b (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-05T11:36:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 diego_pereira_vaz.pdf: 503298 bytes, checksum: 2a066b7e12af1198d4017ca294e7033b (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Previous issue date: 2013 / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do estado de Minas Gerais (FAPEMIG) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / A inclus?o de enzimas na alimenta??o de frangos de corte tem sido relatada como forma de melhorar a digestibilidade dos nutrientes da dieta e o desempenho das aves. Dois experimentos foram conduzidos com o objetivo de avaliar o efeito da inclus?o de diferentes n?veis de um complexo enzim?tico composto por fitase, protease, xilanase, ?-glucanase, celulase, amilase e pectinase, em dietas ? base de milho e farelo de soja, sobre os par?metros de produ??o de frangos de corte e metabolizabilidade dos nutrientes. Foram utilizados 800 aves, de um dia de idade, da linhagem cobb 500, distribu?das segundo um delineamento inteiramente casualizado, com cinco n?veis de inclus?o de complexo enzim?tico (0; 0,100; 0,200; 0,300 e 0,400 kg/ton), com seis repeti??es de 20 aves cada, no experimento de produ??o, e quatro repeti??es de 10 cada ave, no experimento de metabolismo. No experimento de produ??o, foram avaliados at? os 42 dias de idade das aves o ganho em peso, o consumo de ra??o, a convers?o alimentar, os pesos dos ?rg?os digestivos (proventr?culo, moela, p?ncreas e f?gado), o pH e comprimento intestinal (duodeno, jejuno, ?leo e ceco) e a umidade da cama aos 21 e 42 dias. N?o foram observados efeitos significativos (P>0,05) da inclus?o dos diferentes n?veis do complexo enzim?tico nos par?metros de desempenho, pH e comprimento intestinal, pesos dos ?rg?os digestivos e na umidade da cama. No experimento de metabolismo realizado de 15 a 25 dias, foram determinados o coeficientes de metabolizabilidade da mat?ria seca, da prote?na bruta, extrato et?reo, c?lcio e f?sforo, e foi calculada a reten??o de nitrog?nio, c?lcio e f?sforo. O coeficiente de metabolizabilidade do extrato ?tereo foi influenciado de forma quadr?tica e linear decrescente (P<0,01), a maior metabolizabilidade do extrato et?reo foi sem suplementa??o enzim?tica. O coeficiente de metabolizabilidade do c?lcio e do f?sforo foram influenciados de forma quadr?tica e linear crescente (P<0,01), resultando no aumento da reten??o de c?lcio em 21,39% e de f?sforo em 9,56%, reduzindo a excre??o de f?sforo para o ambiente pelas aves. A inclus?o de n?veis crescentes de complexo enzim?tico promove uma maior reten??o de c?lcio e f?sforo pelos frangos de corte, por?m, n?o suficientes para influenciar a produ??o das aves. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-Gradua??o em Zootecnia, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2013. / ABSTRACT The inclusion of enzymes in feed for broilers has been reported as a way to improve the digestibility of nutrients and performance birds. Two trials were conducted to evaluate the effect of different inclusion levels of an enzyme complex consisting of phytase, protease, xylanase, beta-glucanase, cellulase, amylase and pectinase in diets based on corn and soybean meal on production parameters of broilers and metabolization of nutrients. We used 800 birds a day old Cobb 500 lineage, distributed according to a completely randomized design with five levels of inclusion of enzyme complex (0, 0.100, 0.200, 0.300 and 0.400 kg/ton), with six replicates of 20 birds each experiment in production and four replicates of 10 birds in each experiment metabolism. In trial production were evaluated up to 42 days of age the birds weight gain, feed intake, feed conversion, weights of digestive organs (proventriculus, gizzard, liver and pancreas), pH and intestinal length (duodenum, jejunum, ileum and cecum) and litter humidity at 21 and 42 days. No significant effects were observed (P>0.05) the inclusion of different levels of the enzyme complex on performance parameters, pH and intestinal length, weight of digestive organs and litter moisture. In the metabolism experiment performed 15 to 25 days were determined coefficients metabolization of dry matter, crude protein, ether extract, calcium and phosphorus , and calculated the retention of nitrogen, calcium and phosphorus. The metabolization coefficient ethereal extract was quadratically affected and decreased linearly (P<0.01), the highest metabolizable ethereal extract was without enzyme supplementation. The coefficient of metabolizable calcium and phosphorus were affected quadratic and linear increase (P<0.01) resulting in increased retention of 21.39% calcium and 9.56% phosphorus, reducing the excretion of phosphorus to the environment by birds. The increased levels of the enzyme complex promotes greater retention of calcium and phosphorus for broilers, but not enough to influence the production of poultry.

Os linfócitos humanos apresentam na sua superfície a enzima NTPDase1 (ecto-apirase, ecto-difosfoidrolase; CD39; EC 3.6.1.5), responsável pela hidrólise do ATP e ADP extracelular e/ou outros nucleotídeos di ou tri fosfatados. A determinação da atividade da enzima foi padronizada através de método colorimétrico, o qual quantifica o fosfato livre liberado durante a reação. A NTPDase1 foi caracterizada através da demonstração de condições ótimas de incubação, como dependência de cálcio, pH, tempo de incubação e temperatura ótimos, além da obtenção de parâmetros cinéticos. Os resultados obtidos foram confirmados por uma baixa expressão de CD39 nos linfócitos humanos, verificada por análise citométrica, com utilização de anticorpo monoclonal correspondente. Este fato indica um baixo estado de ativação dos linfócitos, uma vez que o CD39 é considerado um marcador de ativação destas células. Posteriormente, foi determinada a atividade da NTPDase1 em linfócitos de pacientes imunodeprimidos pela infecção causada pelo HIV, os quais são acompanhados pelo monitoramento de sua carga viral no plasma e contagem de células T CD4+. A infecção pelo HIV resulta em alterações nas células imunes e na secreção de citocinas importantes na resposta patógenos. Nesta situação pode haver alterações bioquímicas na resposta imune, como por exemplo, alterações na hidrólise de nucleotídeos, ou seja, na atividade das enzimas que degradam nucleotídeos extracelulares. Os linfócitos encontram-se em estado de ativação crônica, o que faz com que até mesmo células não-infectadas pelo vírus, possam sofrer apoptose por ativação de caspases efetoras. Através da determinação da atividade da NTPDase nos linfócitos imunodeprimidos, verificou-se um aumento de sua atividade, acompanhado por uma maior expressão de CD39 na superfície destas células. Estes resultados sugerem que a NTPDase1 é importante para a manutenção da resposta imune, mantendo concentrações adequadas de ATP extracelular, o qual é essencial para certas funções imunes, mas também pode ser prejudicial no momento que induz apoptose nos linfócitos, o que poderia aumentar o estado de imunodepressão. Devido ao fato de que muitos dos pacientes HIV-positivos recebem terapia anti-retroviral, foi necessário verificar in vitro possíveis efeitos destas drogas sobre a atividade da NTPDase1. Neste caso, observou-se que as concentrações terapêuticas destas drogas não afetaram a atividade da enzima. Sendo assim, a atividade aumentada da NTPDase1 nestes pacientes, não é devida à interferência da terapia anti-retroviral.

A sepse é uma síndrome inflamatória sistêmica decorrente de uma infecção que pode causar sérios danos a todos os órgãos do paciente, podendo levá-lo à morte. Dados epidemiológicos norte americanos estimam que 750.000 pacientes são acometidos a cada ano por sepse. A taxa de mortalidade varia de 20 a 60%, dependendo da severidade, sendo semelhante para o Brasil. A terapia utilizada é o tratamento com antibióticos, manutenção de pressão sanguínea e ventilação mecânica, que apesar de extremamente caros ainda se mostram com baixa eficiência, tornando a morte por sepse em UTI mais relevante que mortes por câncer de mama ou AIDS, nos EUA. Tratamentos que demandam grande soma de recursos tendem a ser um grande problema para países como o Brasil, que através do Sistema Único de Saúde, supre o paciente com a terapêutica disponível. Por isso, a compreensão da doença e o desenvolvimento de terapias alternativas mais eficazes e mais barata são de extrema importância. Neste sentido, diversas terapias alternativas têm sido propostas (insulinoterapia, administração de proteína C ativada - Drotrecogina alfa®, antioxidantes ou anticorpos anti-citoquinas). Radicais livres são fisiologicamente produzidos pela mitocôndria e por outras enzimas, como a NADPH oxidase e xantina oxidase. Os organismos contam com defesas antioxidantes enzimáticas e não-enzimáticas para não sofrer danos causados pela própria produção de radicais livres e assim, manter a homeostase celular. Na sepse, a primeira linha de defesa do organismo é o seu sistema imunológico inato mediado por fagócitos que possuem sistemas bactericidas compostos por enzimas produtoras de radicais livres e espécies reativas de oxigênio. Quando a resposta inflamatória à infecção é exagerada e a homeostase é perdida, verificam-se danos a biomoléculas dos tecidos do hospedeiro devido à própria produção de radicais livres. Estes danos podem levar a um comprometimento celular que pode progredir para disfunção orgânica e colaborar para a morte do indivíduo. Devido à importância dos radicais livres no estabelecimento e na progressão da sepse, nós formulamos a hipótese de que o balanço entre as enzimas superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT), bem como os produtos de dano às biomoléculas (carbonilas e substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico - TBARS), podem ser importantes marcadores de severidade e de prognóstico da sepse. Nossos resultados demonstram que há um aumento na atividade da SOD sem um aumento compensatório da CAT em todos os órgãos analisados (pulmão, diafragma, coração, fígado, rim), retirados de ratos submetidos a sepse. Este desequilíbrio resulta em dano a biomoléculas (lipídeos e proteínas). Os dados sugerem que os níveis de proteínas carboniladas, mas não de TBARS, estão correlacionados com a severidade da sepse. A conseqüência do aumento de carbonilas na resposta imunológica é discutida. Apesar da importância das proteínas carboniladas na progressão da sepse, nós demonstramos uma forte correlação positiva entre a relação SOD/CAT (pulmão e rim) vs. marcadores de falência desses órgãos bem como entre TBARS vs. marcadores de falência, em ratos submetidos a CLP. Estas correlações foram revertidas com a associação de tratamento antioxidante nesses animais. Estes dados sugerem que o equilíbrio entre a SOD e a CAT é muito importante para a manutenção da homeostase redox e que a suplementação antioxidante reverte o desequilíbrio visto na sepse, os níveis de TBARS bem como protege dano renal e respiratório. / Sepsis is a systemic inflammatory syndrome secondary to an infectious process that can progress to multiple organic failure and death. Epidemiological studies estimate that 750,000 cases of severe sepsis occurs per year in United States with mortality rate ranging between 20 and 60%, and these rates reflect the Brazilian reality. Sepsis is classically treated with antibiotics, pressure support and mechanic ventilation. However these treatments have little impact on mortality rate, which is higher for sepsis than for breast cancer or HIV. Thus, a better understanding of sepsis and the development of new therapeutic approaches are extremely important and several researches have been developed in this way (e.g. insulin-therapy, activated-protein C - Drotrecogin alfa®, antioxidants and anti-cytokine antibodies). Free radicals are released normally in cell physiology. Organisms have enzymatic antioxidant defenses as well as non-enzymatic antioxidant defenses to counteract the harmful effects of free radicals and to maintain cellular homeostasis. In the onset of an infectious process like sepsis, the innate immune system is the first defense against pathogen and is carried out by macrophages and neutrophils. These cells are potent phagocytes and their bactericidal compounds include free radicals and reactive oxygen species. When the response to infection is exacerbated the homeostasis is lost and oxidative damage takes place. This damage could compromise cell function and lead the organ dysfunction and death. Considering the importance of free radicals in the onset and progression of sepsis we hypothesized that balance between superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT), as well as molecular damage (carbonyl and thiobarbituric acid reactive species - TBARS), could be important markers of severity and prognosis in sepsis. We show an increase in SOD activity without a compensatory increase in catalase in the lung, diaphragm, heart, kidney and liver from rat submitted to sepsis. This imbalance contributes to oxidative damage in lipids and proteins. The data suggests that carbonyl levels but not TBARS levels are linked to sepsis severity and the implication of carbonyl upon immune response is discussed. In spite of the relevance of carbonyl in sepsis progression we found a positive correlation between SOD/CAT ratio (in kidney and lung) and organ failure markers, as well as between TBARS and organ failure markers, in rats submitted to CLP. These are prevented treating animal with antioxidants. These data suggest the importance of a coupled enzymatic activity of SOD and CAT to maintain redox homeostasis. Moreover, the antioxidant treatment reversed the SOD/CAT imbalance, TBARS levels and organ impairment.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandar@gmail.com) on 2013-06-10T18:57:49Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_Ilvania Véras.pdf: 20955079 bytes, checksum: 3482afd7a16803731a50d17d9128209f (MD5) / Made available in DSpace on 2013-06-10T18:57:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_Ilvania Véras.pdf: 20955079 bytes, checksum: 3482afd7a16803731a50d17d9128209f (MD5) / CNPQ; FAPESB / O biodiesel é uma fonte de energia ambientalmente menos impactante do que os combustíveis fósseis. Sua fabricação heterogênea por via enzimática é ambientalmente atraente pois exige menos passos para a purificação do que a catálise química atualmente usada industrialmente e permite a recuperação da lipase, que é o catalisador. Lipases já produzidas industrialmente para outros fins têm sido utilizadas para produção de biodiesel com pouco sucesso, uma vez que a presença de alcoóis de cadeia curta diminui drasticamente sua atividade, aumentando o tempo reacional. Outro fator relacionado ao seu uso é o seu alto custo de produção. Para reduzir os custos, estratégias como a imobilização enzimática (permite reutilização) e o uso de matérias-primas de baixo valor agregado podem ser usadas. Todavia, empregar óleos e gorduras residuais (OGRs) no atual processo alcalino de produção é um desafio, uma vez que, a alta acidez destes, facilita a produção de sabão e dificulta a remoção do subproduto glicerina o que não ocorre quando o catalisador é a lipase. No presente estudo, foi feita uma prospecção para avaliar o crescimento desta tecnologia no mundo. Paralelamente, lipases B de Pseudozyma antarctica mutantes foram projetadas por meio de substituição da região da tampa (lid), que cobre o sítio catalítico, por resíduos do aminoácido glicina. Estes mutantes foram submetidos à simulações de Dinâmica Molecular (DM). Os mutantes com substituições de 1 a 8 resíduos de glicina possuíram baixo valor de energia potencial sendo bons candidatos para os testes de expressão e atividade. O mutante PantΔlidG3, que possui sua tampa substituída por 3 resíduos de glicina, foi escolhido para os testes de expressão juntamente com a lipase selvagem de Pseudozyma antarctica. Tanto a lipase selvagem quanto a mutante foram expressas. Um novo e rápido método para produzir biodiesel é aqui exposto, utilizando matérias-primas residuais brutas. Esterificação de ácidos graxos livres (AGL) e transesterificação de triacilglicerois (TAG) são simultaneamente conduzidos em um meio reacional onde AGL agem como surfactantes impedindo a inativação da enzima por alcoóis de cadeia curta e glicerol. Uma equação empírica foi deduzida para determinar o comportamento da cinética em toda produção de biodiesel em função do tempo. A partir dos dados obtidos nas condições experimentais utilizadas poderá então ser realizado um escalonamento para a viabilização do processo industrial de forma economicamente viável, ou seja, com uso de baixas temperaturas, menor quantidade de álcool e tempo reacional reduzido, que leva a um custeio baixo da produção do biodiesel pela lipase. Os estudos sobre os mecanismos da catálise enzimática requerem aprofundamento para permitir o desenvolvimento de lipases mais específicas para a síntese de biodiesel. / Salvador