Orientador: Alexandre Ninhaus Silveira / Banca: Danilo Pedro Streit Júnior / Banca: José Augusto Senhorini / Resumo: O pintado Pseudoplatystoma corruscans é uma espécie com ampla distribuição na América do Sul e de grande valor comercial. P. corruscans necessita migrar para reproduzir e, atualmente, apresenta seus estoques comprometidos devido às alterações dos rios, construção de barragens e pela sobre-pesca. Os objetivos são analisar as características espermáticas e desenvolver um método de congelamento para o sêmen de P. corruscans. Para isso, catorze machos maduros de pintado foram selecionados e induzidos hormonalmente à espermiação. Foram avaliadas as características seminais do sêmen fresco (cor, concentração espermática, motilidade subjetiva). Para o sêmen descongelado foi utilizado o sistema CASA (Computer Assisted Sperm Analisis), onde se fez a verificação da motilidade seminal. Para o desenvolvimento dos protocolos de criopreservação, utilizou-se uma solução diluidora composta de glucose (5,0g), gema de ovo (10%), crioprotetor (DMSO e DMA a 8% e 10%) e água destilada (a.d.q.s). O material espermático foi coletado em dois locais, na Estação de Hidrobiologia e Aquicultura da Usina Hidroelétrica de Jupiá, Castilho, SP, onde as análises do sêmen fresco apresentaram sêmen de cor branco, muito diluído com pouca viscosidade e um volume seminal 4,6±1,5 (mL); a motilidade total espermática média foi de 92,3±9,7%; a concentração espermática média de 85,7 x 10 6 ± 35,49 sptz/mL; e um tempo de ativação de 35 segundos. O material espermático coletado no CEPTA-ICMBIO apresentou uma cor branca com alta viscosidade e um volume seminal de 7±2,3 (mL); foi encontrada uma concentração espermática média de 111,458 x 10 6 ±6,71 espermatozoides/mL; uma motilidade total espermática média de 92,4±5,2%; e um tempo médio de ativação de 32,33±4,0 segundos. As análises da motilidade... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: he pintado Pseudoplatystoma corruscans is a species with wide distribution in South America and of great commercial value. P. corruscans need to migrate to reproduce, and currently has compromised their inventories due to changes in rivers, dams and overfishing. The goal, analyze the sperm characteristics and develop a method for freezing semen of P. corruscans. For this, fourteen of mature males were selected and painted to hormonally induced spermiation. We evaluated the seminal characteristics of fresh semen (color, sperm concentration, motility subjective). The thawed semen was used CASA system (Computer Assisted Sperm Analysis), where he made the seminal verification motility. For the development of cryopreservation protocols, we used a diluting solution consisting of glucose (5.0 g), egg yolk (10%), cryoprotectant (DMSO and DMA 8% and 10%) and distilled water (adqs). Spermatic material was collected at two sites in Hydrobiology and Aquaculture Station Hydroeletric Jupiá, Castilho, BC, where the fresh semen analysis showed semen color white, diluted with very little viscosity and a seminal volume 4.6 ± 1.5 (ml), sperm motility overall average was 92.3 ± 9.7%, the average sperm concentration of 85.7 ± 35.49 x 106 SPTZ / mL, and an activation time of 35 seconds. The material collected in the spermatic CEPTA-ICMBIO had a white color and light brown with high viscosity and a seminal volume of 7 ± 2.3 (ml), sperm concentration was found an average of 111.458 ± 6.71 x 106 sperm / mL; one sperm motility overall average of 92.4 ± 5.2%, and an average time of activation of 32.33 ± 4.0 seconds. Analysis of the motility after thawing showed a decrease in sperm motility by prior activation due to high level of urine in fish. And when you compare the two treatments with cryoprotectants DMSO and DMA were no... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-08-29T17:19:00Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1088221 bytes, checksum: cabd7a961d215c6f03f377bf7135674e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-29T17:19:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1088221 bytes, checksum: cabd7a961d215c6f03f377bf7135674e (MD5) Previous issue date: 2016-07-19 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Os roedores constituem a maior ordem de mamíferos do mundo, representando no Brasil, 36% da mastofauna. São animais encontrados em todos os habitat, apresentando grande importância na manutenção e dinâmica das florestas que habitam. Nosso conhecimento sobre a biologia e fisiologia da reprodução desses mamíferos silvestres é ainda muito limitado. A descrição de parâmetros espermatogênicos é de grande importância para a elaboração de políticas de conservação que previnam a extinção ou melhore o manejo das mesmas. Assim, objetivou-se descrever histomorfometricamente o compartimento tubular e intertubular dos testículos de Kannabateomys amblyonyx, enfatizando também a dinâmica da espermatogênese. Este é o primeiro estudo que avaliou a morfometria testicular deste representante da família Echimyidae, sendo esta a única espécie representante do gênero encontrada no Brasil. Foram utilizado sete animais capturados em regiões de Mata Atlântica, na Zona da Mata, em Minas Gerais, através de esforço ativo de captura por arma de pressão, sendo as capturas autorizadas previamente pelo IBAMA (Licença 37986-2). Um dos testículos foi incluído rotineiramente em historesina, seccionado e corado sendo obtidas imagens em microscopia de luz para realização de análises morfométricas. O outro testículo teve sua túnica albugínea retirada e pesada para obtenção do peso do parênquima testicular. O peso corporal foi de 418,43g, dos quais 0,41% estão alocados em gônada (IGS) e destes 0,38% em túbulo seminífero (ITS). Em torno de 93% do parênquima testicular são ocupados por túbulo seminífero, sendo 84% de epitélio, 2,5% de túnica própria, e 6,5% de lúmen. Os túbulos seminíferos apresentaram diâmetro de 214,23μm, e 72,68μm de altura de epitélio. Esses roedores possuem 21,62m de túbulo seminífero por testículo, e 12,92m por grama de testículo. Foram identificados 8 estádios do ciclo do epitélio seminífero, com associações celulares bem definidas, sendo o estádio Ι o mais frequente ao contrário do estádio IV. Foram contabilizadas, 0,47 espermatogônias A, 11,78 espermatócitos em preleptóteno, 3,81 em zigóteno, e 14,31 em paquíteno, além de 32,19 espermátides arredondadas, e 6,23 células de Sertoli. Os índices mitóticos e meióticos mostraram perdas de 60% e 43%, respectivamente, e o rendimento geral da espermatogênese foi de 69,73 células germinativas. A capacidade total suporte das células de Sertoli foi de 10,03 células sendo de 5,17 para espermátides arredondadas. O número de célula de Sertoli, por testículo e por grama de testículo, foi de 44,98x10 6 e 53,32x10 6 , respectivamente. A reserva espermática testicular foi de 274,40. O intertúbulo, que constitui em torno de 7% do parênquima, é ocupado em sua maior parte por células de Leydig, possibilitando um índice Leydigossomático de 0,02%. O intertúbulo foi ocupado por 79,88% células de Leydig, 3,28% de espaço linfático, 6,26% de vasos sanguíneos, 1,56% de macrófagos, 0,53% de mastócitos e 8,48% de tecido conjuntivo. Esses percentuais equivalem a 5,10; 0,22; 0,43; 0,10; 0,005 e 0,54% do parênquima testicular, respectivamente. Existem em média 33,46x10 6 células de Leydig por testículo e 40,32x10 6 por grama de testículo. Essas células possuem um volume de 1.280,99μm3, sendo 213,19μm3 nucleares e 1.067,80μm3 citoplasmáticos. A organização dos componentes do compartimento intertubular, corresponde ao padrão tipo III descrito por Fawcett. / Rodents are the largest order of world's mammals, representing in Brazil, 36% of mammalian fauna. They are found in all habitats, with great importance in the maintenance and dynamics of the forests they inhabit. Our knowledge of the biology and physiology of reproduction of these wild mammals is still very limited. The description of spermatogenic parameters is of great importance for the development of conservation policies to prevent the extinction or improve the management of the species. This study aimed to describe histomorphometrically the tubular and intertubular compartments of the testes of Kannabateomys amblyonyx, also emphasizing the dynamics of spermatogenesis. This is the first study to evaluate the testicular morphometry this representative Echimyidae family, being the only species found in Brazil. Seven animals were caught in Atlantic Forest in the state of Minas Gerais, through active effort capture. One testis was included in historesin routinely, sectioned and stained to yield light microscopy images to carry out morphometric analysis. The other testis had its albuginea removed and weighed to obtain the weight of the testicular parenchyma. Body weight was 418.43g, of which 0.41% is allocated in gonad (IGS) and 0.38% in seminiferous tubule (ITS). Approximately 93% of testicular parenchyma is occupied by seminiferous tubule, being 84% of epithelium, 2.5% tunica propria, and 6.5% lumen. The seminiferous tubules have a diameter of 214.23μm and 72.68μm of epithelium height. These rodents have 21.62m of seminiferous tubule per testis, and 12.92m per gram of testis. Eight stages of the epithelium seminiferous cycle were identified with well-defined cell associations, being the most frequent stage Ι unlike the less frequent stage IV. They were recorded, 0.47 spermatogonia A, 11.78 spermatocytes in preleptotene, 3.81 in zygotene, 14.31 in pachytene, 32.19 round spermatids, and 6.23 Sertoli cells. The meiotic and mitotic indexes showed losses of 60% and 43%, respectively, and the spermatogenesis yield was 69.73 cells. The total support capacity of Sertoli cells was 10.03 cells being 5.17 to round spermatids. The number of Sertoli cell per testis and per gram of testis was 44.98x106 and 53.32x10 6 , respectively. Testicular sperm reserve was 274.40. The intertubule, which is around 7% of the parenchyma, is occupied mostly by Leydig cells, enabling Leydigsomatic index of 0.02%. Thus, we observe in intertubule 79.88% of Leydig cells, 3.28% of lymphatic space, 6.26% of blood vessels, 1.56% of macrophages, 0.53% of mast cells and 8.48% connective tissue. These percentages are equivalent to 5.10, 0.22, 0.43, 0.10, 0.005 and 0.54% of the testicular parenchyma, respectively. There are on average of 33.46x10 6 Leydig cells per testis and 40.32x10 6 per gram of testis. These cells have a volume 1.280.99μm3 being 213.19μm3 and 1.067.80μm3 to the nucleus and cytoplasm, respectively. The organization of the components the intertubular compartment corresponds to type III described by Fawcett.

SOUSA, Solange Damasceno. Proteômica do fluido da Rete Testis de carneiros Morada Nova. 2015. 133 f. : Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal do Ceará, Centro de Ciências, Departamento de Zootecnia, Programa de Pós-Graduação em Zootecnia. Fortaleza-CE, 2015. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-08-10T12:26:45Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_sdsousa.pdf: 3355993 bytes, checksum: 3f9c9ea989725756a91c3d6679b0614a (MD5) / Approved for entry into archive by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-08-10T15:18:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_sdsousa.pdf: 3355993 bytes, checksum: 3f9c9ea989725756a91c3d6679b0614a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-10T15:18:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_sdsousa.pdf: 3355993 bytes, checksum: 3f9c9ea989725756a91c3d6679b0614a (MD5) Previous issue date: 2015 / The aim of the study was to identify and characterize the proteins of the rete testis fluid from Morada Nova rams. The testicles, obtained from six slaughtered Morada Nova rams, were immediately dissected. The head of the epididymis was separated to gain access to the efferent ducts. The fluid from the efferent ducts was obtained by testis massage. Thereafter, the fluid was centrifuged to remove cell debris and sperm. Proteins were precipitated with acetone at -20°C and quantified by the Bradford assay. Each sample (400 µg) was focused in strips of 13 cm (pH 4-7) and the second dimension was conducted on SDS-PAGE 15%. The gels were scanned with an ImageScanner II (GE Lifesciences, USA) and analyzed using the PDQuest® version 8.0.1 (Bio-Rad Laboratories, USA). Spots detected after PDQuest analysis of 2-D maps were cut from gels and submitted to trypsin digestion. Proteins were identified using tandem mass spectrometry. Protein information obtained by MASCOT was analyzed using the software tool for searching annotations of proteins (STRAP). Protein-protein interaction networks were obtained from STRING version 9.0 database. In the gels were detected 227 ± 32.1 spots (mean ± SD), where 51% of the proteins were found above 40 kDa, corresponding to 65% of the intensity of all spots detected. Based on gene ontology analysis, the most common biological processes associated with proteins from rete testis fluid were regulation (24.28%) and cellular process (23.27%). Binding (27.42%) and catalytic activity (19.30%) corresponded to the most frequent molecular functions for those proteins. The most intensely expressed proteins were: albumin, clusterin, serotransferrin, immunoglobulin gamma-1 chain and alpha-2-HS-glycoprotein. The rete testis fluid has a large quantity of proteins related to the spermatogenesis. This feature is important in view of the fact that these molecules contribute to the development of the germ cells, as a result of the transport and conversion of substances required to the production of male gametes. / O objetivo do estudo foi identificar e caracterizar as proteínas do fluido da rete testis de carneiros Morada Nova. Os testículos, obtidos de seis carneiros Morada Nova abatidos, foram imediatamente dissecados. A cabeça do epidídimo foi separada para ter acesso aos ductos eferentes. O fluido oriundo dos ductos eferentes foi obtido por massagem do testículo. Posteriormente, o fluido foi centrifugado para remoção dos debris celulares e espermatozoides. As proteínas foram precipitadas com acetona a -20°C e quantificadas pelo método de Bradford. Cada amostra (400 μg) foi focalizada em tiras de 13 cm (pH 4-7) e a segunda dimensão foi realizada em SDS-PAGE a 15%. Os géis obtidos foram escaneados com um ImageScanner II (GE Lifesciences, EUA) e analisados utilizando o aplicativo PDQuest® versão 8.0.1 (Bio-Rad Laboratories, EUA). Os spots detectados após a análise dos mapas 2-D no PDQuest foram cortados dos géis e submetidos a digestão com tripsina. As proteínas foram identificadas por espectrometria de massa em tandem. A informação sobre a proteína adquirida pela busca no MASCOT foi analisada através da utilização do programa para anotações de proteínas (STRAP). Redes de interação proteína-proteína foram obtidas a partir do banco de dados STRING versão 9.0. Nos géis foram detectados em média 227 ± 32,1 spots, onde 51% das proteínas se encontraram acima de 40 kDa representando 65% da intensidade de todos os spots detectados nos géis. Com base na análise da ontologia gênica, os processos biológicos mais comuns associados às proteínas do fluido rete testis foram regulação (24,28%) e processos celulares (23,27%). Ligação (27,42%) e a atividade catalítica (19,30%) corresponderam às funções moleculares mais frequentes. As proteínas mais intensamente expressas foram: albumina, clusterina, serotransferrina, imunoglobulina gama-1 e alfa-2-HS-glicoproteína. A maioria das proteínas identificadas desempenha importantes papéis nos processos de espermatogênese, proteção espermática, motilidade, capacitação e reação acrossômica. O fluido da rete testis possui várias proteínas envolvidas na espermatogênese, o que representa um importante fator, uma vez que estas moléculas contribuem para o desenvolvimento das células germinativas, participando no transporte e conversão de substâncias requeridas para a produção dos gametas masculinos.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2018-05-24T13:16:05Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1295210 bytes, checksum: 4ce6920b272a35167656916056179c03 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-24T13:16:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1295210 bytes, checksum: 4ce6920b272a35167656916056179c03 (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Plantas medicinais dominam a farmacologia por proverem várias fontes de remédios e assim, a mesma espécie de planta pode ter compostos que melhoram e compostos que prejudicam a espermatogênese. Dianthus caryophyllus apresenta ação antibiótica, antifúngica, antiviral, antioxidativa, sedativa e tranquilizante. Teve ação no controle da pressão arterial em ratos e possível efeito antiurolítico, porém nenhum estudo foi feito para avaliar seus efeitos na reprodução. Assim, esse estudo visou avaliar o efeito do extrato aquoso da flor de Dianthus caryophyllus (EADC) nos testículos de camundongos Balb/c, além da resposta de enzimas antioxidante à planta. Quarenta e oito animais foram distribuídos aleatoriamente em seis grupos experimentais (n=8): G1 (Controle), G2 (Viagra), G3, G4, G5 receberam diariamente 10, 20, 40 mg/kg de EADC, respectivamente, e o G6 recebeu EADC 40mg/kg em dias alternados. Foram realizadas análises morfométricas e estereológicas do parênquima testicular, avaliação de alterações estruturais do tecido, atividade das enzimas catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD) e glutationa S-transferase (GST), além da concentração de malondialdeido (MDA) e de óxido nítrico (ON) nos testículos. Houve redução do diâmetro, proporção, volume e área do lúmem tubular, aumento da proporção e área de epitélio seminífero em todos os grupos tratados com a planta, sendo que o diâmetro tubular reduziu apenas em G5. Houve redução da proporção de túbulos seminíferos normais e aumento de vacúolos em todos os grupos. No intertúbulo houve aumento de tecido conjuntivo em G5. A proporção de células de Leydig aumentou apenas em G6, assim como o volume das células de Leydig por grama de testículo no mesmo grupo. O número de células de Leydig por testículo aumentou apenas em G6, enquanto por grama de testículo houve aumento em G5 e G6. Quanto à volumetria dos componentes, houve aumento do volume de tecido conjuntivo em G4, G5 e G6. Houve aumento de CAT em G5 e G6 e de MDA em todos os grupos tratados. Pode-se inferir que houve aumento da produção espermática em todos os grupos, no intertúbulo nota-se mais efeitos em Leydig e tecido conjuntivo principalmente nos grupos G5 e G6 e que a planta gera estresse oxidativo. / Medicinal plants dominate pharmacology by providing various sources of medicines and thus, the same plant species may have components that improve and impair spermatogenesis. Dianthus caryophyllus has antibiotic, antifungal, antiviral, antioxidative, sedative and tranquilizing actions. It had action in controlling blood pressure in rats and possible antiurolithic effects, but no study was done to evaluate its effects on reproduction. The aim of this study was evaluate the effect of the aqueous extract of the Dianthus caryophyllus flowers (AEDC) on the testis of Balb/c mice and the antioxidant enzyme response to the plant. 48 animals were randomly distributed in six experimental groups (n = 8): G1 (Control), G2 (Viagra), G3, G4, G5 received daily 10, 20, 40 mg / kg AEDC respectively and G6 40 G / AEDC 40mg / kg every other day. Morphometric and stereological analyzes of the testicular parenchyma, evaluation of tissue structural alterations, activity of catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD) and glutathione S-transferase (GST), and malondialdehyde (MDA) and oxide nitric oxide (ON) in the testicles. There was a reduction in the diameter, proportion, volume and area of the tubular lumen, increase in the proportion and area of seminiferous epithelium in all groups treated with the plant, and reduction of tubular diameter only in G5. There was a reduction in the proportion of normal seminiferous tubules and increase of vacuoles in all groups. In the intertubular compartment there was reduction in the proportion of lymphatic space as well as increase of connective tissue in all the treated groups. The proportion of Leydig cells increased only in G6, as did the volume of Leydig cells per gram of testis in the same group. The number of Leydig cells per testis increased only in G5, while per gram of testis there was increase in G5 and G6. In the volumetry of the components, there was an increase of only connective tissue in G4, G5 and G6. There was an increase in CAT in G5 and G6 and in MDA in all treated groups. It can be concluded that there was an increase in sperm production in all groups, in the intertubular compartment there were more effects in Leydig and connective tissue, especially in the G5 and G6 groups, and that the plant generates oxidative stress.

Orientador: Lilian Madi-Ravazzi / Coorientador: Maria Tercília Vilela de Azeredo-Oliveira / Banca: Blanche Christine Pires de Bitner-Mathé Leal / Banca: Maria Izabel Camargo Mathias / Banca: Hermione Elly Melara de Campos Bicudo / Banca: Patrícia Vilamaior / Resumo: Zaprionus indianus é um drosofilídeo nativo da região Afrotropical que colonizou o continente Sul Americano, apresentando uma ampla distribuição geográfica enquanto Z. sepsoides é restrita a algumas regiões africanas. As duas espécies diferem em relação ao tamanho dos testículos e dos espermatozoides que é maior em Z. indianus do que em Z. sepsoides. Com o intuito de conhecer aspectos da biologia e o grau de diferenciação destas espécies, o presente estudo avaliou a espermatogênese de machos de diferentes idades (1, 3, 5 e 8 dias) de ambas as espécies por meio de técnicas de coloração convencional e de ultraestrutura. A espermatogênese e ultraestrutura dos espermatozoides foram semelhantes nas espécies em que foi confirmado o número diploide de cromossomos com 2n = 12. Entretanto, foi observada uma quantidade maior de espermatozoides em machos jovens (1 a 3 dias de idade) em Z. indianus do que em Z. sepsoides, o qual apresentou maior frequência de estágios iniciais da espermatogênese nestas idades. A porção da cabeça dos espermatozoides foi fortemente marcada nas duas espécies pela coloração por prata (AgNOR), orceína lacto-acética e pela reação de Feulgen. Quando submetidos à reação de P.A.S., os testículos de Z. sepsoides e Z. indianus apresentaram grânulos de glicogênio. As espécies possuem a mesma ultraestrutura flagelar, em que o axonema mostra um arranjo de 9+9+2 microtúbulos, com a presença de dois derivados mitocondriais de diferentes tamanhos e o número de 64 espermatozoides por feixe, em ambas as espécies. A grande semelhança observada no padrão do arranjo de microtúbulos do axonema e nos derivados mitocondriais com diferentes tamanhos nas espécies de Zaprionus, comparadas com outras espécies de Drosophila, é indicativa da conservação destas estruturas na família Drosophilidae... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Zaprionus indianus is a drosophilid native to the Afrotropical region that has colonized South America. Z. indianus exhibits a wide geographical distribution, whereas Z. sepsoides is restricted to certain African regions. The two species differ in the size of their testes, which are larger in Z. indianus than in Z. sepsoides. To better understand the biology and the degree of differentiation of these species, the current study evaluated spermatogenesis in males of different ages (1, 3, 5 and 8 days old) from both species by conventional staining techniques and ultrastructural analysis. Spermatogenesis and the ultrastructure of spermatozoa were similar in the two species, for which the diploid number was confirmed to be 2n = 12 chromosomes. However, a greater number of spermatozoa were observed in young Z. indianus males (1-3 days old) than in young Z. sepsoides males, which showed a higher frequency of cells at the early stages of spermatogenesis at this age. A portion of the head of the sperm was strongly marked in both species by silver staining (AgNOR), lacto-acetic orcein and the Feulgen reaction. Additionally, when submitted to P.A.S. reaction, the testes of both Z. sepsoides and Z. indianus exhibited glycogen granules. The two species also presented the same flagellar ultrastructure, in which the axoneme includes a 9+9+2 arrangement of microtubules, two mitochondrial derivatives of different sizes are present and the number of spermatozoa per bundle is 64. The great similarity in the pattern of microtubule arrangement in the axoneme and in the mitochondrial derivatives of the species Zaprionus, as compared with other species of Drosophila, indicates that these structures are preserved in the family Drosophilidae. The differences observed between the young males of Z. indianus and Z. sepsoides, including the number and frequency of sperm... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Maria Tercília Vilela Azeredo Oliveira / Coorientador: Patrícia Simone Leite Vilamaior / Banca: Alba Regina de Abreu Lima / Banca: Silvana Gisele Pegorin de Campos / Resumo: Os triatomíneos são insetos hematófagos de grande importância para a saúde pública, uma vez que são considerados como a principal forma de transmissão do protozoário Trypanosoma cruzi, agente etiológico da doença de Chagas. Além da importância epidemiológica, esses insetos se destacam em estudos celulares, pois apresentam algumas peculiaridades, como cromossomos holocêntricos, meiose invertida para os cromossomos sexuais e persistência nucleolar durante a meiose. O fenômeno de persistência nucleolar é definido pela presença do nucléolo ou corpúsculos nucleolares durante todas as fases da meiose. Esse fenômeno foi descrito, até o momento, para 24 espécies de triatomíneos, dos gêneros Triatoma, Rhodnius e Panstrongylus. No entanto, somente a presença dessa estrutura nuclear em todas as fases da meiose não garante a sua atividade transcricional. Diante disso, o presente estudo teve como objetivo descrever a nucleologênese em novas espécies de, pelo menos, sete novos gêneros (Cavernicola, Psammolestes, Dipetalogaster, Eratyrus, Meccus, Mepraia, Nesotriatoma), com o intuito de analisar se a persistência nucleolar é uma sinapomorfia da subfamília Triatominae. Além disso, esse trabalho também teve como finalidade avaliar a atividade nucleolar durante a meiose das espécies Triatoma infestans, Rhodnius montenegrensis e Panstrongylus megistus, por meio da técnica citoquímica Acridine Orange, com o objetivo de caracterizar, com base na presença de RNA, se existe atividade transcricional... / Abstract: Triatomines are hematophagous insects of great importance for public health, since they are considered as the main form of transmission of the protozoan Trypanosoma cruzi, etiologic agent of Chagas disease. Besides the epidemiological importance, these insects stand out in cellular studies, as they present some peculiarities, such as holocentric chromosomes, inverted meiosis for sex chromosomes and nucleolar persistence during meiosis. The phenomenon of nucleolar persistence is defined by the presence of the nucleolus or nucleolar corpuscles during all phases of meiosis. So far, this phenomenon has been described for 24 triatomine species of the genus Triatoma, Rhodnius and Panstrongylus. However, only the presence of this nuclear structure in all phases of meiosis does not guarantee its transcriptional activity. So, the objective of the present study was to describe the nucleologenesis in new species of at least seven new genera (Cavernicola, Psammolestes, Dipetalogaster, Eratyrus, Meccus, Mepraia, Nesotriatoma), in order to analyze if nucleolar persistence is a synapomorphy of the subfamily Triatominae. Besides that, this work had the purpose to evaluate the nucleolar activity during the meiosis of the species Triatoma infestans, Rhodnius montenegrensis and Panstrongylus megistus, by means of the cytochemical technique Acridine Orange, with the objective of characterizing, based on the presence of RNA, if there is transcriptional activity in the persistent nucleolar material. All 59 species analyzed, distributed in seven genera, presented nucleolar persistence during meiosis, thus corroborating that this phenomenon is a synapomorphy of the subfamily Triatominae. By means of the fluorochrome Acridine Orange, the persistent nucleolus has been found to be transcriptionally active. Thus, it was evident, for the first time, that the nucleolus is present in the spermatogenesis of ... / Mestre

Orientador: Selma Maria Almeida-Santos / Banca: Otavio Augusto Vuolo Marques / Resumo: Dados sobre a biologia reprodutiva (e.g. ciclos reprodutivos, maturação e dimorfismo sexual, padrões de estocagem de esperma e padrões de atividade) de três espécies de serpentes da Família Viperidae da região neotropical, Crotalus durissus (N = 228), Bothrops leucurus (N = 320) e Bothrops erythromelas (N = 239), são apresentados neste estudo. Os machos atingem a maturidade sexual com comprimento rostro-cloacal (CRC) menor que as fêmeas em B. erythromelas e B. leucurus. Nas populações de C. durissus da região Nordeste do Brasil, machos e fêmeas atingem a maturidade sexual com comprimentos semelhantes, porém há relatos de padrões diferentes para outras populações. Não há diferença quanto ao CRC de machos e fêmeas sexualmente maduros de C. durissus e B. leucurus, espécies paras as quais há relato de combate entre os machos. Fêmeas de B. erythromelas são maiores que os machos, característica esperada para uma espécie em que não há a ocorrência de combate. Os ciclos reprodutivos de machos e fêmeas das três espécies, descritos com base em análises morfológicas e histológicas das gônadas e vias genitais, são sazonais e influenciados tanto pelas condições climáticas quanto pelas relações filogenéticas. O período de vitelogênese ocorre ao longo de grande parte do ano em B. leucurus e B. erythromelas e em um período mais restrito em C. durissus, durante o outono e a primavera. Relatos de acasalamento durante o outono estão disponíveis para as três espécies, embora para B. leucurus o acasalamento também possa ocorrer durante o inverno. Em B. leucurus e C. durissus, após a cópula, os espermatozóides permanecem estocados no trato reprodutivo da fêmea, no interior da contração muscular uterina, até o momento da ovulação e fertilização (final do inverno - início do verão). É provável que as fêmeas de B. erythromelas também... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: New data about reproductive biology (e.g. reproductive cycles, sexual maturation and dimorphism, sperm storage and activity patterns) of three species of Viperidae snakes from the Neotropical region, Crotalus durissus (N = 228), Bothrops leucurus (N = 320) and Bothrops erythromelas (N = 239), are presented. B. erythromelas and B. leucurus males attain sexual maturity at smaller sizes (snout-vent length - SVL) than conspecific females. C. durissus males and females from northeastern Brazil attain sexual maturity at similar sizes. However, other sexual maturity patterns have already been described for other populations. No significant difference was observed on SVL between mature males and females of C. durissus and B. leucurus. Male-male combat behavior has been previously described for these species. B. erythromelas females are larger than males and male-male combat has never been reported for this species. Reproductive cycles are described considering morphological and histological analysis of the gonads and genital ducts. Reproductive cycles of the three species considered herein are seasonal and influenced by climatic conditions and phylogenetic relationships. Secondary vitellogenic follicles may be found in every season in B. leucurus and B. erythromelas, and only during autumn and spring in C. durissus. Records of mating during the autumn are available for the three studied species, but it may also occur during winter in B. leucurus. After mating, spermatozoa are stored in the female reproductive tract by means of an uterine muscular twisting (UMT) until ovulation and fertilization occur (end of winter - beginning of summer) in C. durissus and B. leucurus. It is probable that it also occurs in B. erythromelas because mating and ovulation are not synchronous in this species either. However, we did not find evidences for the occurrence of the UMT to confirm... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Carlos Alberto Vicentini / Banca: Classius de Oliveira / Banca: Sérgio Ricardo Batlouni / Resumo: O Cichla kelberi, espécie recentemente classificada e popularmente conhecida como tucunaré amarelo, é endêmico dos rios Araguaia e baixo Tocantins, sendo, entretanto, encontrado em muitas outras bacias, onde apresenta grande importância para a pesca profissional por seu alto valor econômico, devido a qualidade e sabor de sua carne, e pela pesca esportiva, como pode ser observado pelos campeonatos anuais de pesca ao tucunaré nos rios em que se encontra. Para entender esse rápido processo de ocupação e adaptação a novos ambientes, 78 exemplares de Cichla kelberi foram mensalmente coletados entre os meses de março de 2009 a fevereiro de 2010, com o auxílio de vara de pesca e anzol na Lagoa do Pernilongo (20º 29' 11,93"S, 51º 25' 33,27"O) e Ilha da Ferradura (20º 28' 27,11" S, 51º 25' 54,53"O), no Reservatório de Jupiá, rio Paraná, Ilha Solteira, São Paulo, Brasil, onde foi introduzido. Foram definidas quatro classes de maturação gonadal para o ciclo reprodutivo anual do tucunaré amarelo C. kelberi. A definição das classes de Maturação Inicial, Maturação Intermediária, Maturação Final e Regressão, tiveram como base as alterações do epitélio germinativo testicular associado aos estágios das células germinativas presentes. A Classe de Maturação Inicial é caracterizada pela presença de um epitélio germinativo totalmente contínuo, cistos com células germinativas em todos os estágios de desenvolvimento, intensa atividade espermatogênica por todo o testículo e raros "clusters" periféricos, formados por espermatogônias primárias. A Classe de Maturação Intermediária inicia com o surgimento de um epitélio germinativo descontínuo na região anastomosada, com diminuição da espermatogênese e estocagem de espermatozóides nesta região. Os agrupamentos periféricos de espermatogônias ou "clusters" estão ausentes... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Cichla kelberi, a recently classified specie and popularly known as yellow peacock bass, is endemic from the Araguaia an low Tocantins river, being, however, found in many other basins, where has great importance for the professional fishing for its high economic value due to the quality and flavor of their meat and fishing, as can be observed by annual championships of peacock in the rivers where it is. To understand this fast process of occupation and adaptation to new environments, 78 specimens of C. kelberi were caught monthly between the months of March 2009 to February 2010 with the aid of fishing pole and hook, from the Lagoa do Pernilongo (20º 29' 11,93"S, 51º 25' 33,27"O) and Ilha da Ferradura (20º 28' 27,11" S, 51º 25' 54,53"O), in the Jupiá Reservoir, Parana River, Ilha Solteira, São Paulo, Brazil, where it was introduced. It was defined four gonadal maturation class to the annual reproductive cycle of the yellow peacock bass C. kelberi. The definition of the Early Maturation, Mid Maturation, Final Maturation and Regression Classes, were based on the changes of the testicular germinal epithelium associated with the germ cell stages present. The Class of Early Maturation is characterized by the presence of a fully continuous germinal epithelium, cysts with germ cells at all stages of development, intense spermatogenic activity throughout the testis and rare "clusters" peripherals, consisting of primary spermatogonia. The Mid maturation Class starts with the appearance of a discontinuous germinal epithelium in the anastomosed region with spermatogenesis decrease and sperm storage in this region. The peripheral groups of spermatogonia or "clusters" are missing at the end of this class of maturation. In the Final Maturation Class the germinal epithelium discontinuity reaches the periphery of lobules... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Selma Maria de Almeida-Santos / Resumo: O conjunto de características manifestadas por uma espécie que levam ao sucesso reprodutivo pode ser chamado de estratégias reprodutivas. Isto inclui, por exemplo, o período reprodutivo, o modo reprodutivo, a sincronia reprodutiva entre machos e fêmeas, o tempo de fertilização e a frequência reprodutiva. O gênero Lachesis é composto de quatro espécies ovíparas restritas às florestas úmidas da América Central e América do Sul. Popularmente conhecidas como surucucu, são um grupo de importância médica, tal como Bothrops e Crotalus. Lachesis muta é a espécie com a maior distribuição, e ocorre na América no Sul, na Mata Atlântica e na Floresta Amazônica. Ao contrário de Bothrops e Crotalus, estudos sobre biologia reprodutiva para o gênero Lachesis são, em sua maioria, desenvolvidos em cativeiro e com foco no comportamento reprodutivo. Propomos, então, descrever em dois capítulos aspectos da biologia reprodutiva da espécie Lachesis muta investigados a partir da anatomia e morfologia de seus órgãos reprodutivos ao longo das estações do ano. No Capítulo 1, investigamos a biologia reprodutiva de L. muta da Floresta Amazônica e da Mata Atlântica brasileira a partir de dados de biometria e histologia de animais preservados em coleções biológicas e provenientes da natureza. No Capítulo 2, descrevemos o oviduto feminino em diferentes estágios do ciclo reprodutivo. Comparando tanto as duas populações quanto a espécie com outros crotalíneos neotropicais, nosso objetivo foi investigar possív... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The set of characteristics manifested by a species leading to reproductive success can be called reproductive strategies. These include, for example, the reproductive period, the reproductive mode, the reproductive synchrony between males and females, the time of fertilization, and the reproductive frequency. The genus Lachesis comprises four oviparous species restricted to Central and South American rainforests and popularly known as bushmasters, and is a group of medical importance, as are Bothrops and Crotalus. Lachesis muta is the most widely distributed and occurs in South America, at the Atlantic Forest and the Amazon Rainforest.Unlike Bothrops and Crotalus, reproductive biology studies for the genus Lachesis weremostly developed in captivity, focusing mainly on reproductive behavior. We propose to describe in two chapters aspects of the reproductive biology of the Lachesis muta species investigated from the anatomy and morphology of its reproductive organs over the seasons of the year. In Chapter 1, we investigate the reproductive biology of L. muta by biometric and histology data from biological collections, focusing on individuals collected in the wild. In Chapter 2, we describe the female oviduct at different stages of the reproductive cycle. Comparing both populations and species with the other neotropical crotalines, we aim to investigate possibles patterns for the Viperidae group, as well as the hypothesis of the influence of abiotic factors on the snake reproduc... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Resumo: Os triatomíneos são insetos hematófagos de grande importância para a parasitologia humana, pois são transmissores do Trypanosoma cruzi, protozoário causador da doença de Chagas. Além de sua importância médico-sanitária, os triatomíneos destacam-se pela sua citogenética, pois possuem cromossomos holocêntricos e um modelo de meiose incomum, com meiose invertida para os cromossomos sexuais. Recentes pesquisas com marcadores moleculares em triatomíneos tentam compreender a ancestralidade do grupo. Uma das formas de se compreender a evolução entre espécies é a partir da análise de seqüências do DNA ribossômico (DNAr). Por pertencer a famílias multigênicas, cópias individuais do DNAr não acumulam mutações independentemente, resultando em pequena variação intra-específica e relevante diferenciação interespecífica. No presente trabalho foi realizado um estudo comparativo entre as espécies Triatoma maculata e Triatoma pseudomaculata, com base no uso das técnicas citogenéticas convencionais de orceína lacto-acética, impregnação por íons prata, bandamento-C, reação de Feulgen; da técnica de citogenética molecular de bandamento- C CMA/DAPI; e também por meio da análise da região ITS-1 do DNAr, com base no sequenciamento, com o objetivo de avaliar o grau de homologia entre as espécies estudadas. Os cariogramas das duas espécies indicaram dez pares de autossomos (um deles de tamanho maior) e um par de cromossomos sexuais (2n = 22). No ciclo meiótico foi possível observar a fragmentação da região nucleolar no final do estágio difuso. Corpúsculos nucleolares foram observados em alguns dos núcleos em metáfases meióticas de T. pseudomaculata, evidenciando a persistência nucleolar. A técnica de bandamento-C revelou que o cromossomo Y é heterocromático em ambas as espécies. O sequencimento da região ITS-1, indicou que as espécies apresenta... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The triatomines are hematophagous insects of great concern in public health because they are vectors of Trypanosoma cruzi, a protozoan that causes Chagas disease. Triatomines are also of great genetic interest, because that they present holocentric chromosomes and an unusual form of meiosis with post-reductional segregation of sex chromosomes. Recent studies based on molecular markers try to understand the evolutionary history of triatomines. To understand the evolution of a given species, ribosomal DNA (rDNA) analyses are frequently used, which can help to infer evolutionary relationships among species. Individual copies of rDNA do not accumulate mutations independently because they belong to multigene families, resulting in slight intraspecific and important interspecific variation. In this study, a comparative analysis was performed between the species Triatoma maculata and Triatoma pseudomaculata, based on the cytogenetic techniques of lacto-acetic orcein, silver ion impregnation, Cbanding, Feulgen reaction; and CMA/DAPI C-banding. We also compared the species by sequencing the ITS-1 rDNA internal transcribed region in order to evaluate the degree of homology among the studied species. The cariograms of the two species revealed ten autosomes and one pair of sexual chromosomes (2n= 22). In the meiotic cycle, nucleolar fragmentation during the final stages of meiotic prophase I was found. Nucleolar corpuscles were found in some meiotic metaphases of T. pseudomaculata, which is evidence of nucleolar persistence. The C-banding technique revealed that the Y chromosome is heterochromatic in both species. The ITS-1 rDNA sequences showed that the species presented a discharge proximity to each other, and had a high degree of homology (98.5%). The knowledge obtained in this study contributes to the understanding of the interrelation and distribution of those species, and offers... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Maria Tercília Vilela de Azeredo Oliveira / Coorientador: Lilian Castiglioni / Banca: João Aristeu da Rosa / Banca: Carlos Roberto Ceron / Mestre