A ambrisentana é um novo fármaco utilizado para o combate aos sintomas da hipertensão arterial pulmonar e comercializado na forma de comprimidos revestidos. Em 201 O, sua comercialização foi aprovada pela ANVISA, sob nome comercial de Volibris®. O controle de qualidade de medicamentos é parte fundamental para o desenvolvimento e liberação de fármacos para o consumo, no entanto, há poucos estudos relacionados à proposição de métodos analíticos e estudo da estabilidade deste fárrnaco. Assim, foi proposto o desenvolvimento e validação de método de doseamento e análise de produtos de degradação, juntamente com a identificação da molécula proveniente da degradação do insumo ativo em condição de estresse térmico. Um método crornatográfico, com utilização de equipamento de cromatografia UPLC ®, acoplado a detector de arranjo de fotodiodos (PDA), foi desenvolvido. Testes com diferentes solventes e diferentes colunas cromatográficas foram executados, alcançando-se a urna condição ideal, com excelente qualidade crornatográfica (pratos teóricos, sensibilidade e resolução entre picos) e um reduzido tempo de análise (6 minutos). Este método foi validado de acordo com os guias de validação internacionais e após a finalização dos ensaios e interpretação dos resultados, verificou-se que o método apresenta especWicidade adequada, tanto para análise de doseamento da substância ativa como para identificação e quantWicação de produtos de degradação. Também apresentou exatidão e precisão dentro do esperado para utilização em controle da qual idade de produtos farmacêuticos, tendo também limites de quantificação e detecção em magnitude adequada para se avaliar a possível degradação do fármaco. O método se apresentou linear no intervalo pretendido e com robustez satisfatória. Com o estresse da molécula estabelecido no desenvolvimento e va lidação da metodologia analítica, o principal produto de degradação foi identificado por detecção em espectrometria de massas após separação cromatográfica em sistema composto de UPLC®- EM/EM. A molécula proveniente da degradação do fármaco foi identificada, e teve o seu mecanismo de degradação proposto, concluindo-se que a presença da ambrisentana em ambientes ácidos pode desencadear a degradação da molécula, facilitada ainda por temperatura. / The ambrisentana is a new drug used to combat the symptoms of pulmonary arterial hypertension and marketed in the form of coated tablets. In 2010, its commercialization was approved by ANVISA, under trade name Volibris®. The quality control of medicines is a fundamental part for the development and release of drugs for consumption, however, there are few studies related to the proposition of analytical methods and study the stability of the drug. Thus, we propose the development and validation of appropriate method to assay the drug and degradation products, and the identification of degradation product obtained in stress conditions. A chromatographic method using UPLC ® chromatography equipment coupled to photodiode array detector (PDA) have been developed. Tests with different solvents and different chromatographic columns were performed, reaching up to an optimal chromatographic condition (theoretical plates, sensitivity, and resolution between peaks) and reduced chromatographic run time (6 minutes). This method was validated in accordance with international guidelines and va lidation after the completion of the tests and interpret the results, it was found that the method has adequate specificity for both analysis, assay of the active principie for identification and quantification of degradation products. Also presented accuracy and precision as expected for use in quality control of pharmaceuticals, and limits of quantification and detection at adequate leveis to assess the possible degradation of the drug. The method was linear in the target range and with satisfactory robustness. With the stress of established molecule in the development and validation of analytical methodology, was identified the main degradation product by mass spectrometry detection after chromatographic separation of compound UPLC® system. The molecule from the drug degradation was identified, and had its proposed degradation mechanism, concluding that the presence of ambrisentana in acidic can trigger the degradation of the molecule, ais o facilitated by temperature.

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-05-19T18:08:47Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO Severino Borba de Andrade.pdf: 2077312 bytes, checksum: 10c839aeb65d104edc63132383e12c5a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-19T18:08:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO Severino Borba de Andrade.pdf: 2077312 bytes, checksum: 10c839aeb65d104edc63132383e12c5a (MD5) Previous issue date: 2013-07-12 / O plasma humano é a parte líquida remanescente do sangue total após separação das frações celulares sanguíneas, e é utilizado na produção de hemoderivados. A presente pesquisa objetivou demostrar a estabilidade das proteínas do plasma estocado, em temperaturas diferentes daquelas das regulamentadas. Analisaram-se amostras estocadas a -10ºC, -17ºC, -20ºC e -30ºC. Aleatoriamente foram escolhidas cinco bolsas de plasma dos grupos sanguíneos O, A e B, formando um pool, divididas em quatro subgrupos, congeladas e armazenadas. No período de outubro/2012 a abril/2013, foram analisadas as dosagens das proteínas plasmáticas. Observou-se que não houve perdas no teor Albumina, da Imunoglobulina nem da atividade do Fator de Coagulação IX. O Fator de Coagulação VIII (FVIII) apresentou perda de atividade estaticamente significante quando estocado a -10C, e a -17°C as perdas foram mínimas. Concluiu-se que o plasma estocado a -17° pode ser utilizado para produção de hemoderivados, e a -10ºC poderá ser utilizado, reduzindo o prazo de estocagem. É possível que a influência do polimorfismo do gene ABO sobre níveis do Fator VIII, de forma indireta, seja um fator redutor no tempo de estocagem do plasma. Propõe-se uma revisão nas legislações atuais, no que tange à liberação do plasma para produção de hemoderivados. / Human plasma is the liquid part remaining of whole blood after separation of blood cell fractions, and is used in the production of blood products. This study aimed to demonstrate the stability of plasma proteins stored at temperatures different from those of the regulated. Samples were analyzed stored at -10°C, -17°C, -20°C and -30°C. Five plasma bags were randomly chosen from the blood groups O, A and B forming a pool divided into four subgroups, frozen and stored. In the period from October/2012 to April/2013, were analyzed the strengths of plasma proteins. It was observed that there was no loss in content Albumin, Immunoglobulin or activity of coagulation factor IX. Coagulation Factor VIII (FVIII) showed statistically significant loss of activity when stored at -10C, and -17°C the losses were minimal. It was concluded that the stored plasma at -17° can be used for the production of blood products and -10°C can be used, reducing the storage term. It is possible that the influence of the ABO gene polymorphism on levels of Factor VIII, indirectly, be a reducer factor in the plasma storage time. We propose a revision in the current legislation, regarding the plasma release for production of blood products.

O aciclovir é um anti-viral usado mundialmente para o tratamento de herpes (do tipo HSV-1 e HSV-2). Acredita-se que o vírus da herpes está presente em cerca de 90% das pessoas em estado de latência. O tratamento principal em casos onde a doença se manifesta, lesões nos lábios e mucosas, é o aciclovir. No Brasil, para renovar ou fazer um novo registro de medicamento, a Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA) exige testes que expõem o fármaco a ambientes extremos (ácido, base, luz, calor, umidade, oxidação) para gerar produtos de degradação que dependendo da concentração no produto acabado, devem ser submetidos a ensaios toxicológicos. O estudo de degradação forçada também permite elucidar a estabilidade intrínseca do fármaco, contribuindo para o entendimento do mecanismo de degradação da substância, o que, posteriormente, ajuda a compreender quais fatores físicos e químicos devem ser controlados para manutenção da estabilidade. Este trabalho tem objetivo de validar um método de análise para quantificação do aciclovir e seus produtos de degradação por cromatografia líquida de interação hidrofílica (Hydrophilic interaction chromatography - HILIC) com detecção por arranjo de diodos (DAD) como também degradar a amostra em diferentes ambientes. / Acyclovir is an anti-viral used worlwide for herpes treatment (HSV-1 and HSV-2 types). It is estimated that herpes virus is present in almost 90% of people in his latent state. Acylcovir is the main treatment in cases where virus expresses itself. In Brazil, to renew or to make a new registration of medicines, National Agency of Sanitary Surveillance (ANVISA) demands tests to expose the medicine to extreme conditions (acid, basic, light, heat, humidity, oxidation) in order to generate degradation products that, depending on the concentration of the row product, will undergoes toxicological assays. The forced degradation study also allow to elucidate the intrinsic stability of medicine, contributing to understand the degradation mechanism of the substance leading to help the understanding of which physical and chemical factors must be controlled to keep stability. The main objective of this work is to validate a method of analysis to quantify acyclovir and his degradation products using Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography (HILIC) based on Diode Array detection as well as to degraded the sample in different conditions.

O aciclovir é um anti-viral usado mundialmente para o tratamento de herpes (do tipo HSV-1 e HSV-2). Acredita-se que o vírus da herpes está presente em cerca de 90% das pessoas em estado de latência. O tratamento principal em casos onde a doença se manifesta, lesões nos lábios e mucosas, é o aciclovir. No Brasil, para renovar ou fazer um novo registro de medicamento, a Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA) exige testes que expõem o fármaco a ambientes extremos (ácido, base, luz, calor, umidade, oxidação) para gerar produtos de degradação que dependendo da concentração no produto acabado, devem ser submetidos a ensaios toxicológicos. O estudo de degradação forçada também permite elucidar a estabilidade intrínseca do fármaco, contribuindo para o entendimento do mecanismo de degradação da substância, o que, posteriormente, ajuda a compreender quais fatores físicos e químicos devem ser controlados para manutenção da estabilidade. Este trabalho tem objetivo de validar um método de análise para quantificação do aciclovir e seus produtos de degradação por cromatografia líquida de interação hidrofílica (Hydrophilic interaction chromatography - HILIC) com detecção por arranjo de diodos (DAD) como também degradar a amostra em diferentes ambientes. / Acyclovir is an anti-viral used worlwide for herpes treatment (HSV-1 and HSV-2 types). It is estimated that herpes virus is present in almost 90% of people in his latent state. Acylcovir is the main treatment in cases where virus expresses itself. In Brazil, to renew or to make a new registration of medicines, National Agency of Sanitary Surveillance (ANVISA) demands tests to expose the medicine to extreme conditions (acid, basic, light, heat, humidity, oxidation) in order to generate degradation products that, depending on the concentration of the row product, will undergoes toxicological assays. The forced degradation study also allow to elucidate the intrinsic stability of medicine, contributing to understand the degradation mechanism of the substance leading to help the understanding of which physical and chemical factors must be controlled to keep stability. The main objective of this work is to validate a method of analysis to quantify acyclovir and his degradation products using Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography (HILIC) based on Diode Array detection as well as to degraded the sample in different conditions.

Submitted by Rafael Santana (rafael.silvasantana@ufpe.br) on 2017-05-05T18:20:36Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) karla Monik Alves da Silva - versão digital.pdf: 4930148 bytes, checksum: 8821e28c2f1a90a910f41b58930deb89 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-05T18:20:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) karla Monik Alves da Silva - versão digital.pdf: 4930148 bytes, checksum: 8821e28c2f1a90a910f41b58930deb89 (MD5) Previous issue date: 2016-02-16 / CNPQ / Um dos grandes desafios para o desenvolvimento de medicamentos contendo Insumos Farmacêuticos Ativos (IFAs) com baixa solubilidade é agregar tecnologias ao processo de desenvolvimento no sentido de aumentar a biodisponibilidade ao mesmo tempo em que possa garantir a estabilidade. Assim, objetivou-se desenvolver metodologias analíticas para serem aplicadas na caracterização e estabilidade de dispersões sólidas de atorvastatina cálcica (ATV). Inicialmente foi realizada a triagem por meio do incremento de solubilidade das dispersões sólidas da ATV com carbopois®, hidroximetilpropilcelulose (HPMC), polietilenoglicol (PEG) 6000 e Lauril sulfato de sódio (LSS). As dispersões com maiores desempenhos de dissolução (dispersão usando PEG e LSS) foram reproduzidas usando lotes diferentes de ATV, sendo estes caracterizados. A caracterização das dispersões e dos lotes foi obtida por meio da calorimetria exploratória diferencial (DSC), calorimetria exploratória diferencial acoplada ao sistema fotovisual (DSC-fotovisual), termogravimetria (TG) e espectroscopia do infravermelho com transformada de Fourier (FTIR), a fim de investigar possíveis interações físicas e/ou químicas entre a ATV e os carreadores. Para avaliação da estabilidade térmica, os produtos foram submetidos à degradação térmica em estufa durante 24h e avaliadas por meio da análise de produtos de degradação detectados pela cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Sendo essa metodologia desenvolvida e valida previamente ao estudo de estabilidade. Os dados obtidos indicam que as dispersões de atorvastatina foram capazes de incrementar a solubilidade da ATV, apresentando reprodutibilidade e estabilidade nas condições testadas. Dessa forma foi possível concluir que as ferramentas analíticas utilizadas foram elucidativas, rápidas e de grande importância na pesquisa da ATV e adjuvantes tecnológicos. / A major challenge for the development of medicinal products containing Active Pharmaceutical Ingredients (APIs) with low solubility is to aggregate technologies to the development process in order to increase the bioavailability while ensuring stability. Thus, the main goal is to develop analytical methods to be applied in the characterization and stability of solid dispersions of atorvastatin calcium (ATV). Initially, the screening was performed by increasing the solubility of solid dispersions of the ATV with carbopois®, hydroxymethylpropylcellulose (HPMC), polyethylene glycol (PEG) 6000 and Sodium lauryl sulfate (SLS). Dispersions with higher performances of dissolution (dispersion using PEG and LSS) were produced using different ATV batches, which were characterized. The characterization of the dispersions and batches was obtained by differential scanning calorimetry (DSC), differential scanning calorimetry coupled to fotovisual system (DSCfotovisual), thermogravimetry (TG), and Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR), in order to investigate possible physical and/or chemical interactions between the ATV and the carriers. To evaluate the thermal stability, products were subjected to thermal decomposition in an oven for 24 hours, and evaluated by the analysis of degradation products detected by high-performance liquid chromatography (HPLC). This methodology was developed and validated previously to the stability study. The data obtained show that atorvastatin dispersions were able to increase the ATV solubility, presenting reproducibility and stability under the tested conditions. Therefore, we conclude that analytical tools used were enlightening, fast and of great importance in the research of ATV and pharmaceutical carriers.

Orientadores: Nelci Fenalti Hoehr, Marcos Nogueira Eberlin / Dissertação (mestrado) - universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-20T03:55:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Amaral_PhellipeHonorio_M.pdf: 2853850 bytes, checksum: 1cdd86d86ade920d343377315ac2d392 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Utilizou-se o maleato de enalapril para identificação dos produtos de degradação através da espectrometria de massas utilizando a técnica de ionização EASI (easy ambient sonic-spray ionization). Essa técnica de ionização ambiente torna a espectrometria de massas uma ferramenta mais simples, pois para esse trabalho não houve preparo de amostra, os ensaios foram realizados diretamente da superfície do comprimido. Para conhecermos melhor a rota de degradação do maleato de enalapril na formulação, comparou-se dois processos de fabricação dos comprimidos, a granulação via úmida e a compressão direta. Indicando grandes diferenças no perfil de degradação. A avaliação dos produtos de degradação foi feita em paralelo utilizando a técnica de separação por cromatografia líquida de alta eficiência com detector de ultra violeta, mostrando o comparativo das respostas da técnica EASI-MS e da CLAE -UV. Realizou-se os estudos de acordo com os estudos de estabilidade de longa duração, simulando assim a estabilidade do maleato de enalapril em comprimidos e um estudo de degradação forçada com o ataque ácido e térmico, demonstrando a capacidade da técnica em avaliar os estudos de degradação forçada / Abstract: We used the enalapril maleate to identify the degradation products by mass spectrometry using the technique of ionization EASI (easy ambient sonic-spray ionization). This technique makes the environment ionization mass spectrometry a more simple tool, as for this study there was no sample preparation, tests were performed directly from the tablet surface. To know the best route of degradation of enalapril maleate formulation, we compared two methods of manufacture of tablets, wet granulation and direct compression. Indicating large differences in degradation profile. The evaluation of the degradation products was performed in parallel using the technique of separation by high performance liquid chromatography with UV detector, showing the comparison of responses of the art EASI-MS and HPLC-UV. Studies were performed according to the studies of the long term stability, thus simulating the stability of enalapril maleate in a compressed and forced degradation study with heat and acid attack, demonstrating the ability of the technique of evaluating the degradation studies forced / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Diante da extensa utilização de fármacos associados às soluções parenterais de grande volume (SPGV) e muitas vezes da impossibilidade da administração dos mesmos em diferentes veículos de infusão, sejam pela perda da estabilidade ou por insolubilidade destes, a utilização de copolímeros como carreadores de fármacos vêm a favorecer a associação destes às SPGV. Este trabalho visa avaliar a estabilidade dos fármacos ceftazidima e aminofilina nas SPGV carreados pelo copolímero Pluronic® F68 e o estudo da GFP como potencial biossensor da estabilidade de fármacos nas SPGV. A estabilidade dos fármacos ceftazidima (320ug/mL) e aminofilina (160ug/mL) em SPGV foi avaliada, na presença e na ausência de Pluronic® F68, através da utilização de HPLC logo após preparo e após período de 24hs, usando sistema Schimadzu LC10, LC-solution software, Schimadzu C18, fluxo 0,5mL/min, detecção em λ=255nm (ceftazidima) e λ=275nm (aminofilina), volume de injeção 20uL, 25ºC. A determinação da concentração mínima inibitória (CMI) foi realizada em amostras de ceftazidima (240ug/mL) na presença e na ausência de Pluronic® em SPGV de 5% glicose usando E. coli ATCC 25922 e P.eruginosa ATCC 9721 na concentração de 106UFC/mL . Pluronic® F68 foi utilizado nas amostras para avaliação da estabilidade dos fármacos ceftazidima e aminofilina na concentração 10% m/m. Resultados mostraram uma incompatibilidade entre a associação dos fármacos em SPGV de 5% glicose, com perda de concentração de 25% do fármaco ceftazidima na ausência de Pluronic®. Nos ensaios de CMI realizados com fármaco ceftazidima em SPGV de 5% glicose observou-se uma melhora dos valores de CMI quando o fármaco foi associado ao copolímero Pluronic® para ambos os microrganismos estudados. O estudo da GFP mostrou que fatores como (i) as propriedades físico-químicas dos fármacos, (ii) valores de pH das soluções e (iii) interações entre a proteína e as SPGV, podem favorecer mudanças de intensidade de fluorescência da GFP (determinada em espectrofluorímetro λex=394nm, λem=509nm), favorecendo seu potencial emprego como biossensor da estabilidade de fármacos. / Drug association administered through parenteral solutions is a common hospital practice. Copolymers as carriers in parenteral solutions may allow originally unstable or insoluble drug combinations, or even improve their action. The aim of this work was to evaluate the stability of ceftazidime and aminophylline in parenteral solutions carried by Pluronic® F68, besides the application of the green fluorescent protein as a biossensor of drug stability. To evaluate the stability of ceftazidime (320 µg/mL) and aminophylline (160 µg/mL) carried by Pluronic® F68 (10%) in parenteral solutions, HPLC measurements were made immediately after the drug mixture preparation and after 24 hours, detected at λ=255nm (ceftazidime) and λ=275nm (aminophylline). In addition, minimal inhibitory concentration test (MIC) was used to determine the biological activity of ceftazidime (240 µg/mL) in 5% glucose parenteral solution, with or without Pluronic® F68 (10%). The strains tested by MIC were E. coli ATCC 25922 and P.aeruginosa ATCC 9721 (106UFC/mL). The HPLC experiments showed incompatibility of ceftazidime and aminophylline associated in 5% glucose parenteral solution, with 25% loss for ceftazidime without Pluronic® F68. MIC analysis for ceftazidime, with or without aminophylline, showed that lower antibiotic concentration values were required to inhibit E. coli and P.aeruginosa growth, when the copolymer Pluronic® F68 was present in the samples. It was also showed that physical chemical drugs alterations, pH values and protein-parenteral solution interactions can change GFP fluorescence intensity (detected by espectrofluorimeter λex=394nm, λem=509nm). These data endorse the potential of this protein as a biosensor of drug stability in parenteral solutions.

A telitromicina é o primeiro representante de uma nova família de antibióticos os cetolídeos. Os cetolídeos são derivados semi-sintéticos dos macrolídeos. No Brasil encontra-se disponível na forma de comprimidos revestidos com o nome comercial de Ketek®. Este trabalho objetivou o desenvolvimento e validação de métodos analíticos para determinação da telitromicina em comprimidos revestidos, desenvolvimento e validação do ensaio de dissolução e estudo da estabilidade do fármaco. A determinação da faixa de fusão e a espectrofotometria no infravermelho permitiram identificar a telitromicina substância química de referência. Os métodos por cromatografia em camada delgada (CCD), espectrofotometria no ultravioleta (UV), cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), foram utilizados para análise qualitativa do fármaco na forma farmacêutica. A determinação quantitativa foi realizada através da validação dos métodos por UV, CLAE e ensaio microbiológico. Os métodos propostos não apresentaram diferença estatística para um nível de significância de 1%. O teste de dissolução foi desenvolvido e validado na condição mais discriminatória obtida. Após seleção, a condição escolhida foi tampão fosfato de sódio pH 7,5, como meio de dissolução e pás a 50 rpm. Estudo preliminar da estabilidade de telitromicina frente à degradação ácida, alcalina, oxidativa , térmica e fotolítica mostrou a oxidação e a luz como fatores importantes de degradação. A cinética de fotodegradação e oxidativa demonstrou cinética de primeira ordem de reação. A estabilidade acelerada da telitromicina foi realizada pela oxidação em peróxido de hidrogênio havendo formação de um produto majoritário denominado PD10 o qual foi isolado por CLAE em coluna semi-preparativa. O produto foi identificado por ressonância magnética nuclear como derivado N-óxido da telitromicina. / Telithromycin is the first member of a new antibiotic class named ketolides. The ketolides are derived from macrolides class. In Brazil it is available in coated tablets with the commercial name of ketek®. The aim of this study was the development and validation of analytical methods to the determination of telithromycin in coated tablets, the development and validation of dissolution test and the stability study of the drug. The melting range determination and infrared spectrophotometric allowed telithromycin standard reference identification. Methods of thin-layer chromatography (TLC), ultraviolet spectrophotometry (UV), high performance liquid chromatography (HPLC) were employed to the qualitative analysis of the drug in pharmaceutical formulations. The quantitative determination was performed through the validation of UV, HPLC and microbiological assay, evaluating the guidances validation parameters. The proposed methods were not statically different to a 1% significance level. The dissolution test was developed and validated using the most discriminatory condition obtained, sodium phosphate buffer pH 7.5 as dissolution medium and paddle at 50 rpm. Preliminary stability study of telithromycin through acid, alkaline, oxidative, thermal and photolytic degradation shows sensibility to oxidation and light. The kinetics of photo degradation and oxidative degradation of telithromycin showed first order kinetics of reactions. The accelerated stability of telithromycin was evaluated through the oxidation by hydrogen peroxide giving one majority degradation product, assigned PD10. The separation was carried out by HPLC. The product was isolated by semi preparative column chromatographic. The majority degradation product of telithromycin was identified by nuclear magnetic resonance as an N-oxide derivative.

Made available in DSpace on 2016-04-04T12:25:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 12.pdf: 4572506 bytes, checksum: 7e5fdf7b0ca0370249e1dda4df35b8bb (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Fármacos/Farmanguinhos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / A infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV), comumente conhecida como AIDS, constitui-se em uma das mais sérias doenças infecciosas, sendo um grande desafio para a saúde pública. Apesar de não existir nenhum tratamento para erradicar a infecção, o uso de antirretrovirais é a melhor opção para a supressão viral. O efavirenz é um inibidor não nucleosídico da transcriptase reversa e o terceiro mais utilizado no tratamento antirretroviral, devido às suas propriedades farmacológicas e alta potência in vivo. De acordo com a Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA), padrões de referência oficiais devem ser usados sempre que existirem, e na sua ausência padrões de referência devidamente caracterizados (padrões secundários) deverão ser utilizados. Não existe uma forma segura de se determinar previamente a validade dos padrões de referência, por isso a avaliação da estabilidade dos padrões durante o período de sua utilização é fundamental para garantir a confiabilidade dos resultados. Sendo assim, é importante um estudo mais aprofundado frente às condições de armazenamento para posterior determinação do prazo de validade desses padrões. O estudo teve como objetivo avaliar a estabilidade de nove lotes das matérias-primas candidatas a padrão secundário avaliando três fabricantes diferentes frente a duas condições de armazenamento (dessecador e geladeira), através do monitoramento de seus teores de ativo e substâncias relacionadas ao longo de um ano. Para a caracterização da matéria-prima foram utilizadas técnicas termoanalíticas, espectroscópicas e difração de raios X de pó. As análises de teor e substâncias relacionadas foram realizadas utilizando HPLC. Com a caracterização confirmou-se que as amostras apresentavam o polimorfo mais estável (polimorfo I) na forma anidra. As análises cromatográficas apresentaram resultados dentro das especificações da matéria-prima, exceto duas amostras que apresentaram resultado de teor fora do especificado no último mês do estudo. Em relação ao teste de teor, catorze amostras devem ser repadronizadas antes de um ano, pois apresentaram uma variação máxima de DPR (desvio padrão relativo) de 0,5% para teores acima de 98%. No teste de substâncias relacionadas, todas as amostras apresentaram um total de impurezas de aproximadamente 0,1% ao longo do estudo de estabilidade, exceto três amostras cujo esse total foi de aproximadamente 0,3%. Em relação ao acondicionamento da matéria-prima candidata a padrão foram poucas as variações observadas nos testes de perda por secagem e titulação de Karl Fischer. Além disso, não houve grande diferença nos testes de teor e de substâncias relacionadas quando comparadas as duas condições de armazenamento. Portanto, a melhor condição de armazenamento do IFA de efavirenz é em dessecador (18 a 25ºC e UR < 75%) e o fabricante B é o melhor candidato a padrão secundário, pois foi o que apresentou menor teor de impurezas totais e individuais, e menores variações no teor e na perda por secagem. / Infection with human immunodeficiency virus (HIV) commonly known as AIDS, is one of the most serious infectious diseases in the world and a major challenge to public health. Although there is no treatment to eradicate the infection, the use of antiretrovirals is the best option for viral suppression.Efavirenz is a non-nucleoside reverse transcriptase inhibitor and the third most used in antiretroviral treatment due to its pharmacological properties and high potency in vivo. According to the Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA), official reference standards must be used whenever they exist, and in the absence of these, reference standards properly characterized (secondary standards) should be used. There is no sure way to determine, previously, in advance the validity of reference standards. Thus, the evaluation of the stability of these reference standards during the period of use is critical to ensure the reliability of results. Therefore, it is important to conduct further studies exploring the storage conditions for later determination of validity of these standards.The study aims to evaluate the stability of nine batches of raw materials candidates for secondary standard evaluating three different manufacturers under two storage conditions (desiccant and refrigerator), by monitoring their assay and related substances over a year.For the characterization of the raw material thermoanalytical techniques, spectroscopic techniques and powder diffraction X-ray were used. The assayand related substances analysis were performed using HPLC.With the characterization analysis confirmed that the samples had the most stable polymorph (polymorph I) in the anhydrous form. The chromatographic analysis showed results within the specifications of the raw material, except two samples that presented results outside the specified in the assay at the last month of study. In this test, fourteen samples should undergo a new round of characterization before a year because has had a maximum variation of DPR (standard deviation) of 0.5% for contents above 98%. In related substances test, all samples exhibited results of total impurities of approximately 0.1% throughout the study of stability, except for three samples: the total amount was approximately 0.3%.Regarding the storage conditions of the standard few variations were observed in tests of loss on drying and Karl Fischer titration. Furthermore, there are no great difference in assay and related substances tests when compared to the two storage conditions.So, the best storage condition of efavirenz standard is in desiccant (18 to 25°C and RH <75%) and the manufacturer B is the best candidate for secondary standard because it showed the lowest results of total and individual impurities with minor variations in assay and loss on drying.

Made available in DSpace on 2016-06-23T12:15:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 13.pdf: 3290087 bytes, checksum: c2534f744ed7289fbdbed582eaabac44 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2014 / Made available in DSpace on 2016-07-05T22:38:02Z (GMT). No. of bitstreams: 3 13.pdf.txt: 358391 bytes, checksum: 4a43403217e6829dc1ae5000589499cf (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 13.pdf: 3290087 bytes, checksum: c2534f744ed7289fbdbed582eaabac44 (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Fármacos/Farmanguinhos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / A leflunomida (LF) é um pró-fármaco antireumático pertencente ao grupo de fármacos modificadores do curso da doença, sendo empregada no tratamento da artrite reumatóide. Encontram-se disponíveis no mercado e medicamentos referência ARAVA produzido pela empresa Sanofi Aventis e as versões genéricas fabricadas pelas indústrias farmacêuticas Aché, Biosintética, Cristália, Marinha do Brasil e Zodiac. Para registro de um produto farmacêutico no Brasil, deve-se seguir as exigências da Agência Nacional de Vigilância Sanitária, que requer, dentre vários documentos, o estudo de estabilidade do medicamento e questão. Este estudo deve incluir diversos testes, sendo que a determinação do teor do fármaco e suas substâncias relacionadas são fundamentais para se compreender e determinar o prazo de validade de um produto. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e validar uma metodologia analítica de teor e substâncias que permitisse avaliar a estabilidade dos comprimidos de L.F. Foram realizados estudos de degradação forçada no insumo farmacêutico ativo e no protótipo de comprimidos de L.F. proposto pela Fundação Ezequiel Dias (FUNED), empregando a hidrólise ácida, hidrólise alcalina, oxidação, degradação térmica e fotolítica. As amostras degradadas deram subsídio para o desenvolvimento e validação de um método, por cromatografia a líquido de alta eficiência, para determinação do teor e suas substâncias relacionadas. Uma coluna C18 (125x4,0mm, 5µm, a 25° graus Celcius), uma fase móvel em eluição, gradiente de acetato de amônio 10mM:acetonitrila (0 min-70:30; 15min-20:80; 16min-70:30 e 20 min-70:30) e um detector no ultravioleta (261nm) foram empregados para se atingir uma resolução adequada na separação da L.F. e suas substâncias relacionadas. Foram realizados os testes de degradação forçada, sendo que a hidrólise básica gerou apenas um produto de degradação (r=0,33), enquanto a ácida proporcionou o surgimento de dois(r=0,33 e 0,77); onze substâncias surgiram após a oxidação (r=0,16; 0,21; 0,41; 0,48; 0,58; 0,64; 0,67; 0,73; 0,78; 0,82 e 0,86). O método em eluição gradiente foi então validado de acordo com as diretrizes da RE n° 899 de 05/2003 da ANVISA e do DOQ-CGCRE-008 do INMETRO. A linearidade, na faixa de 10-60 µg/mL, foi demonstrada utilizando ANOVA (Fcalculado < Fcrítico). Comprovou-se as precisões intra-corrida (DPR≤3,3%) e intra-corrida (DPR≤5,0%) nas concentrações de 20; 40 e 60 µg/mL aplicando ANOVA. A exatidão variou de 98, 30% a 102,36% e a robustez foi satisfatória em todas as condições avaliadas. Aestabilidade dos comprimidos de LF, nas embalagens blíster de cloreto de polivinilideno e frasco de polietileno, foi então avaliada utilizando o método validado, sendo que em ambas foram quantificados os produtos da hidrólise alcalina (r=0,33) e da hidrólise ácida (r=0,77). Os resultados do estudo de estabilidade da formulação foram insatisfatórios para a LF devido à queda no seu teor superior a 5% no estudo acelerado e de longa duração em ambas embalagens. Pode-se concluir que o método indicativo de estabilidade foi desenvolvido e validado com sucesso para a quantificação do teor e substâncias relacionadas. Portanto, este método pode ser empregado na indústria farmacêutica tanto para o controle de qualidade quanto para avaliação dos estudos de estabilidade de comprimidos de LF. / Leflunomide (LF) is a prodrug of the disease-modifying antirheumatic drug (DMARD) used in rheumatoid arthritis. It is commercially available in tablet presentations of 10, 20 and 100 mg. The reference drug ARAVA reference manufactured by Sanofi Aventis and generic versions manufactured by pharmaceutical companies Aché, Biosintética, Cristália, Brazil's Navy and Zodiac are available in the market. For registration of a pharmaceutical product in Brazil it must follow the requirements of Agência Nacional de Vigilância Sanitária, which demands, among many documents, the stability study of the product concerned. This study should include several tests, and the determination of drug content and its related substances are fundamental to determine the shelf life of a product. The aim of this study was to develop and validate an assay and related substances analytical methodology that allow to evaluating the stability of the LF tablets. Forced degradation were perfomed on active pharmaceutical ingredient and LF tablets prototype proposed by FUNED, employing acid hydrolysis, alkaline hydrolysis, oxidation, photolytic and thermal degradation. The degraded samples allowed the development and validation of a liquid chromatography high efficiency method to determine the drug and its related substances. A C18 column (125x4,0mm, 5μm, 25 ° Celcius), a gradiente mobile phase of 10mM ammonium acetate: acetonitrile (0 min-70: 30; 15 min, 20: 80; 16min-70: 30 and 20 min-70: 30), and a ultraviolet detector (261nm) were used to achieve adequate resolution in the separation of LF and its related substances. Forced degradation test waere performed, which generated only one basic hydrolysis degradation product (r = 0.33), while the acidic gave the rise of two (r = 0.33 and 0.77); eleven substances arose after oxidation (r = 0.16; 0.21; 0.41; 0.48; 0.58; 0.64; 0.67; 0.73; 0.78; 0.82 and 0 , 86). The gradient method was then validated accordance to ANVISA RE No. 899 05/2003 and INMETRO DOQ-CGCRE-008 guidelines. The linearity in the range of 10-60 mg / mL was demonstrated using ANOVA (Fcalculado <Fcrítico). Intra-run precisions (DPR≤3,3%) and intra-run (DPR≤5,0%) at concentrations of 20; 40 and 60 ug / ml were satisfatory by applying ANOVA. The accuracy ranged from 98, 30% to 102.36% and robustness was satisfactory in all conditions evaluated. The stability of LF tablets polyvinylidene chloride blister and polyethylene vial packaging was then assessed using the validated method. Degradation products were found from alkaline hydrolysis (r = 0.33) and acidic hydrolysis (r = 0.77). The stability results of the formulation were unsatisfactory for LF due to its content drop exceeding 5% in both packages on accelerated and long term studies. It can be concluded that stability indicating method has been successfully developed and validated for assay and related substances measurement. Therefore, this method can be used for both quality control and stability studies evaluation of LF tablets in the pharmaceutical industry.