Submitted by LÍGIA MARIA MICAI GOMIDE null (gomide.ligia@gmail.com) on 2016-02-16T19:11:33Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_FINAL.pdf: 3243363 bytes, checksum: 69306080cac10ea142bf77efef6a03a6 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-02-17T16:35:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 gomide_lmm_me_bot.pdf: 3243363 bytes, checksum: 69306080cac10ea142bf77efef6a03a6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-17T16:35:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 gomide_lmm_me_bot.pdf: 3243363 bytes, checksum: 69306080cac10ea142bf77efef6a03a6 (MD5) Previous issue date: 2016-01-27 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Criptorquidia, ou não descida testicular, é uma das anormalidades urogenitais mais comum em meninos recém-nascidos e um dos principais fatores de risco para a infertilidade e câncer testicular. Tem sido proposto que o criptorquidismo, baixa qualidade espermática, hipospádia e tumor testicular de células germinativas (TTCG) compreendem a síndrome de disgenesia testicular (SDT), que tem origem comum durante a vida fetal. A criptorquidia induz degeneração do epitélio seminífero com depleção de células germinativas, distúrbios em células de Leydig e de Sertoli e diminuição do diâmetro dos túbulos seminíferos. A correcção cirúrgica da criptorquidia (orquidopexia) tem sido utilizada a fim de diminuir o risco de infertilidade e câncer testicular. No entanto, o melhor tempo para realizar esta cirurgia, a fim de obter os melhores resultados tem sido uma preocupação. Além disso, não existe um modelo experimental disponível na literatura que explore alterações morfológicas testiculares associadas à criptorquidia e orquidopexia. Neste estudo, criptorquidismo foi induzido em ratos Sprague-Dawley com 3 semanas de vida; orquidopexia foi realizada em três momentos diferentes (3, 5 e 9 semanas após a cirurgia de criptorquidia), e os animais de cada grupo foram sacrificados após 3 e 8 semanas de recuperação. As análises histológicas e estimativas quantitativas como a média do diâmetro do túbulo seminífero (MSTD), incidência de vacúolos no epitélio, e o número de células de Sertoli por túbulo, alepm da imunoistoquímica para citoqueratina 18 foram realizados para avaliar alterações testiculares após as cirurgias de criptorquidia e orquidopexia. A criptorquidia provocou degeneração e esfoliação de células germinativas, aumento da incidência de vacúolos intra-epiteliais e diminuição da MSTD e dos pesos dos testículos. No grupo de recuperação de 3 semanas, muitas das alterações constatadas na criptorquidia ainda estavam presentes, a gravidade destas alterações foi proporcional ao período em que os testículos permaneceram na cavidade abdominal até orquidopexia. Após o período de recuperação de 8 semanas, a orquidopexia reverteu quase todas as alterações, independentemente do momento cirúrgico em que foi realizada. Em conclusão, a intensidade dos danos no testículo foi maior nos animais que permaneceram criptorquídicos por mais tempo, sem alterações no número de células de Sertoli, mas com uma provável perturbação da sua função. O modelo adotado pode ser útil para estudar alterações testiculares induzidas pelo criptorquidismo e a recuperação potencial do testículo de ratos após orquidopexia. / Cryptorchidism, or undescended testis, is one of the most common urogenital abnormalities in newborn boys and one of the main risk factors for infertility and testicular cancer. It has been proposed that cryptorchidism, low sperm quality, hypospadia and testicular germ cell tumor (TGCT) comprise the testicular dysgenesis syndrome (TDS) and that they have a common origin during the fetal life. Cryptorchidism induces seminiferous epithelium degeneration with germ cell depletion, Leydig and Sertoli cell disorders and decreased tubule diameter. The surgical correction of cryptorchidism (orchidopexy) has been applied in order to decrease the risk for infertility and testicular cancer. However, the best moment to perform this surgery in order to obtain successful results has been a concern. Moreover, there is no experimental model available in the literature that explores comprehensively testicular morphological alterations associated to cryptorchidism and orchidopexy. In this study, cryptorchidism was induced in 3-week old Sprague-Dawley rats; orchidopexy was performed at three different moments (3, 5 and 9 weeks after cryptorchidism surgery), and the animals of each group were sacrificed after 3 and 8 weeks of recovery. Histological analyses, and quantitative estimates such as seminiferous tubule diameter (MSTD), incidence of vacuoles in the tubules, and number of Sertoli cells per tubule, and immunohistochemistry for cytokeratin 18 were performed to evaluate testicular alterations after cryptorchidism and orchidopexy surgeries. Cryptorchidism induced germ cell degeneration and exfoliation, increased incidence of intraepithelial vacuoles and decreased MSTD and testes weights. In the 3-week recovery group, many of the alterations seen in cryptorchidism were still present, the severity of these alterations being proportional to the period the testes remained in abdominal cavity until orchidopexy. After the 8-week recovery period, orchidopexy reversed almost all of the alterations irrespective the surgical moment it was performed. In conclusion, the intensity of the damages in the testis was greater in those animals that remained cryptorchid for a longer time, with no alterations in the number of Sertoli cells but with a probable disruption of its function. The adopted model can be useful to study testicular alterations induced by cryptorchidism and the potential recovery of rat testis after orchidopexy. / FAPESP: 2012/09873-4

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-12-04Bitstream added on 2014-06-13T20:53:15Z : No. of bitstreams: 1 leonelli_c_me_botib.pdf: 283209 bytes, checksum: 9b71aa425f7d2d585c8c3cd59ad66440 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A aromatização da testosterona a estradiol é essencial para a diferenciação sexual do cérebro, o qual está organizado intrinsecamente no tipo feminino, organizando-o então no tipo masculino. Trabalhos em nosso laboratório, no entanto, apontam para existência de vias metabólicas adicionais para os androgênios neste processo, sugerindo a atuação do hormônio masculino per se. Dessa forma, no presente estudo investigou-se o papel da testosterona, durante a fase crítica de diferenciação sexual hipotalâmica, em ratos machos. Para isso, ratas Wistar prenhes receberam 15mg/kg/dia do anti-androgênico flutamida (grupo Flutamida) ou óleo de amendoim (grupo Controle), s.c., no 19º e no 22º dias de gestação, bem como durante os cinco primeiros dias após o parto. Foram avaliados efeitos imediatos e, principalmente, tardios do bloqueio androgênico sobre parâmetros reprodutivos, sexuais e de desenvolvimento físico da prole masculina. Assim, a exposição perinatal a flutamida levou à redução do peso corporal ao desmame, aumento do peso corporal ao atingir a puberdade, redução da distância anogenital (DAG) ao nascimento, retardo para a instalação da puberdade, diminuição dos pesos úmidos dos testículos e da próstata ventral, aumento do peso úmido do epidídimo e menor índice gônado-somático na vida adulta. Fêmeas não tratadas acasaladas com os machos do grupo Flutamida apresentaram reduzidas taxas de implantação, maiores taxas de perdas pré-implantação e baixa taxa de fertilidade, resultando em reduzido número de descendentes. Frente a uma fêmea receptiva normal, os animais do grupo Flutamida apresentaram maior latência para o início da cópula, realizaram maior número de montas sem intromissão peniana, maior número de intromissões até a 1ª ejaculação, com maior latência para a 1ª ejaculação, além de não ejacularem ou ejacularem uma... / Studies in our laboratory indicate the existence of additional pathways for androgens in THE process of sexual differentiation, suggesting the importance of the male hormone per se. Thus, the present study investigated the role of testosterone during the critical phase of sexual differentiation of hypothalamus in male rats. Therefore, pregnant Wistar rats received 15mg/kg/day of flutamide (Flutamide group) or peanut oil (Control group), s.c. at day 19 of pregnancy and for the first five postnatal days. The perinatal exposure to flutamide led to a reduction in body weight at weaning, aN augmentation in body weight at puberty, reduction in anogenital distance at birth, delay in the puberty installation, decrease in wet weight of testes and ventral prostate, increase in wet weight of epididymis and decrease in gonadosomatic index. Normal females mated with treated males presented more pre-implantation losses, reduced implantation rates, and consequently reduced offspring size. Flutamide group showed increases in latency to copulatory behavior, number of mounts without penis intromission, number of intromissions until ejaculation, latency to ejaculation, and reduced number of ejaculations. after Castration followed by estrogenization, 45.5% of the animals took lying down the mounts of a non-experimental male. Flutamide treated rats presented reductions in percentage of normal spermatozoa, spermatozoa concentration, and daily testicular sperm production. The height of the epithelium of the ventral prostate was not altered by treatment, although there was a 10% reduction in cell nuclei prostatic epithelial marked positively for androgen receptor (AR) and a 60% reduction in plasma testosterone during the adulthood. Thus, the present results indicated that perinatal androgen blockage damaged differentiation process of the brain and peripheral reproductive structures. Thus, the binding ... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-09-03Bitstream added on 2014-06-13T20:53:16Z : No. of bitstreams: 1 simoncini_vs_me_botib.pdf: 667182 bytes, checksum: 02774471f02be04fbff31c82acb30112 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / A Doença Inflamatória Intestinal (DII) engloba uma série de doenças que afetam o trato intestinal, especialmente o cólon, sendo as principais a retocolite ulcerativa e a doença de Crohn, ambas com alta taxa de morbidade e mortalidade, além de representarem um dos mais importantes fatores de risco para o câncer colorretal, que no Brasil é o quarto tipo de tumor com maior incidência de mortes. Inúmeros medicamentos são usados no controle e no tratamento destas doenças (aminosalicilatos, glicocorticóides, imunomoduladores e antibióticos), no entanto, todos apresentam sérios efeitos colaterais e são de custo extremamente elevado. Além da busca por novas drogas para o tratamento destas doenças ainda sem cura, uma importante estratégia preventiva e curativa se baseia no uso de prebióticos na dieta, os quais poderiam tanto melhorar as condições de vida do paciente como permitir por efeito sinérgico a redução das doses dos fármacos comumente utilizados nestas doenças e conseqüentemente de seus efeitos adversos e tóxicos. Com base nestas informações, o presente trabalho visou 1. Avaliar os efeitos preventivos da dieta enriquecida com banana verde (Banana „Nanica‟ Musa sp AAA) na colite ulcerativa experimental induzida por ácido trinitrobenzenosulfônico em ratos; 2. Avaliar a influência do uso da dieta enriquecida com banana verde sobre a atividade antiinflamatória da prednisolona; 3. Comprovar se a dieta enriquecida com banana verde pode ser considerada um prebiótico. Através da realização deste estudo foi possível concluir que a administração da dieta enriquecida com a banana verde nas concentrações de 10% e 20% protege o cólon de ratos da colite experimental através de mecanismo que envolve a diminuição do estresse oxidativo evidenciado com a manutenção dos níveis de glutationa; além disso, a dieta enriquecida não aumenta a atividade... / The inflammatory bowel disease (IBD) consists in two major diseases that affect the gastrointestinal tract, specially the colon, ulcerative colitis and Crohn‟s disease, both with high mortality and morbity. These diseases represent a major risk for the development of colorectal cancer, which, in Brazil is correlated with a high mortality. Many drugs are used to control these illnesses but most of them present serious side effects and/or are very expensive. The search of new drugs is still a viable method to discovery different treatments for IBD however a new preventive and curative method can be the use of prebiotics. These prebiotics can improve the patients‟ life conditions and possibly permit the decrease of the drugs doses that are used and consequently side and toxics effects. In light of this, the aims of the present study was to evaluate the preventive effects of dietary supplementation with green banana (Banana „Nanica‟ Musa sp AAA) in experimental models of rat colitis induced by trinitrobenzenesulphonic acid (TNBS), evaluate the influence of the dietary supplementation in the dose of a corticoid (prednisolone) and then be able to analyze if the dietary supplementation can be considerate a prebiotic. Our results revealed that the ingestion of the dietary supplementation with green banana in 10% and 20% showed significant anti-inflammatory activities in the experimental model of rat colitis induced by TNBS. This activity was related with the reduction of the oxidative stress indicated with the maintenance of glutathione levels; besides, the anti-inflammatory activity of prednisolone was not altered with the dietary supplementation and the anti inflammatory preventive effects of the dietary supplementation was not correlated with a prebiotic activity

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-26Bitstream added on 2014-06-13T18:29:05Z : No. of bitstreams: 1 silva_tk_me_botib.pdf: 128314 bytes, checksum: 1b4e72c73dae51b7029d1c4b2bcb861b (MD5) / O alumínio é um metal pesado que causa problemas em 30-40% das terras cultiváveis do planeta, mais comumente nos trópicos, onde os solos são ácidos, e possui efeito tóxico direto sobre o metabolismo vegetal. Estudos recentes demonstram a atividade citoprotetora do radical livre óxido nítrico (NO) em plantas sob estresse de alumínio. O objetivo deste trabalho foi verificar a ação citoprotetora do NO em condições de estresse de alumínio durante a germinação de sementes de arroz. Para os tratamentos, foram utilizadas soluções de diferentes concentrações de nitroprussiato de sódio (SNP), como doadora de NO e para a simulação de estresse de alumínio foram utilizadas soluções de diferentes concentrações de sulfato de alumínio. O experimento foi conduzido em duas etapas. Para os tratamentos da primeira etapa do experimento foi utilizado solução de SNP nas concentrações 50, 100, 250, 500, 1000 e 1500 mmol.L-1 e soluções de sulfato de alumínio nas concentrações 10, 20, 30, 40, e 50 mmol.L-1 . Para o controle foi utilizado água destilada. Na segunda etapa do experimento foram utilizadas soluções de SNP 50 mmol.L-1 e de sulfato de alumínio 30 mmol.L-1 . As sementes foram submetidas a uma incubação por 18 h em água destilada (Grupo I) ou em solução de SNP (Grupo II) e em seguida foram transferidas para água destilada, solução de SNP ou solução de sulfato de alumínio. Foram realizadas avaliações de germinação diariamente, por 4 dias. Pode ser concluído que o NO causa estímulo da germinação de arroz nas fases iniciais deste processo, sendo mais evidente no período de 48 h de embebição. O maior incremento da germinação foi observado na concentração de 50 μmol.L-1 de SNP, ao passo que as concentrações de SNP acima de 500 μmol.L-1 causaram redução da germinação. Também foi possível detectar... / Aluminum is a heavy metal that causes problems in 30-40% of the planet’s arable land areas, more commonly in the tropics, where soils are acid, and has a direct toxic effect on plant metabolism. Recent studies have demonstrated the cytoprotective activity of free radical nitric oxide (NO) in plants under aluminum stress. The objective of this study was to verify NO cytoprotective action under aluminum stress conditions during germination of rice seeds. Sodium nitroprussiate solutions (SNP) at different concentrations were used in the treatments as NO donors, and aluminum sulfate solutions at different concentrations were used to simulate aluminum stress. The experiment was conducted in two steps. SNP solutions at concentrations of 50, 100, 250, 500, 1000, and 1500 mmol.L-1, and aluminum sulfate solutions at concentrations of 10, 20, 30, 40, and 50 mmol.L-1 were used in the treatments of the first step of the experiment. Distilled water was used as a control. In the second step of the experiment, we used a SNP solution at 50 mmol.L-1 and an aluminum sulfate solution at 30 mmol.L-1. The seeds were submitted to incubation for 18 h in distilled water (Group I) or in SNP solution (Group II) and were then transferred to distilled water, SNP solution, or aluminum sulfate solution. Germination evaluations were carried out daily, for 4 days. It can be concluded that NO stimulates rice germination at the initial stages of the germination process, which is more evident in the 48 h imbibition period. The greatest increase in germination was observed at the SNP concentration of 50 μmol.L-1, while SNP concentrations above 500 μmol.L-1 reduced germination. It was also able to detect that NO was capable to reduce soybean germination inhibition resulting from the aluminum stress effect... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-25Bitstream added on 2014-06-13T18:29:08Z : No. of bitstreams: 1 campos_dhs_me_botfm.pdf: 422363 bytes, checksum: bae65b82d6904fbc334f730756695826 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Obesidade é uma doença metabólica crônica definida pelo acúmulo excessivo do tecido adiposo em relação à massa magra tecidual. Estudos clínicos mostram que a obesidade está associada à disfunção ventricular diastólica e não consistente comprometimento do desempenho sistólico. Os modelos experimentais que induzem obesidade por dietas têm sido utilizados como alternativa para se estudar as conseqüências das anormalidades cardíacas decorrentes do acúmulo de gordura. Pesquisas mostram que a função cardíaca em animais obesos pode estar preservada, diminuída ou aumentada. Alterações nos substratos energéticos, inibição da via glicolítica pelos ácidos graxos e redução na atividade da enzima piruvato desidrogenase (PDH) podem contribuir para a disfunção cardíaca induzida pela obesidade. Em razão da ausência de pesquisas que avaliaram a relação entre função cardíaca e metabolismo energético na obesidade, o objetivo deste estudo foi testar a hipótese que o desequilíbrio energético miocárdico, entre ácidos graxos e glicose, ocasionado pela obesidade, acarreta disfunção cardíaca. O prejuízo funcional nos animais obesos é decorrente de déficit de adenosina trifosfato (ATP), via glicolítica, para a bomba de cálcio (Ca2+) do retículo sarcoplasmático (SERCA2). Com a finalidade de testar esta hipótese, foi inibida a via glicolítica miocárdica pela administração do iodoacetato. Além disso, o metabolismo energético também foi avaliado pela estimulação da PDH pelo dicloroacetato. Ratos Wistar machos, com 30 dias, foram distribuídos em dois grupos: controle (C; n=30) e obeso (Ob; n=30). Os ratos C receberam ração padrão para roedores e os Ob um ciclo de quatro rações hiperlipídicas por um período de 30 semanas. A gordura corporal total foi realizada pela somatória dos depósitos epididimal, retroperitoneal... / Obesity is a chronic metabolic disorder defined by excessive accumulation of body fat relative to lean tissue. Clinical studies show that obesity is associated with ventricular dysfunction and not consistent impairment of systolic performance. Experimental models that induce obesity by diet have been used as an alternative to study the consequences of cardiac abnormalities resulting from accumulation of fat. Researchs show that cardiac function in obese animals may be preserved, diminished or increased. Alterations in energy substrates, inhibition of the glycolytic pathway by fatty acids and reduced activity of the enzyme pyruvate dehydrogenase (PDH) may contribute to cardiac dysfunction induced by obesity. Due to the lack of research evaluating the relationship between cardiac function and energy metabolism in obesity, the objective of this study was to test the hypothesis that the myocardial energy imbalance between fatty acids and glucose, caused by obesity, leads to cardiac dysfunction. The functional impairment in the obese animals is due to deficit of adenosine triphosphate (ATP), glycolytic pathway for calcium (Ca2+) pump of sarcoplasmic reticulum (SERCA2). For this purpose, was inhibited the myocardial glycolytic pathway by administration of iodoacetate. Moreover, energy metabolism was also assessed by stimulation of PDH by dichloroacetate. Thirty-day-old male Wistar rats were assigned to one of two groups (n=30 each): control (C) and obese (Ob). The C group was fed a standard diet and Ob group was fed cycles of four highfat diets for 30 weeks. The total body fat was measured from the sum of the individual fat pad weights (epididymal, retroperitoneal and visceral) and the obesity defined by adiposity index. The nutritional and metabolic profiles of these animals were also evaluated. The cardiac remodeling process was assessed by structural and functional analysis... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-01-28Bitstream added on 2014-06-13T20:33:36Z : No. of bitstreams: 1 souza_ee_me_botib.pdf: 569987 bytes, checksum: b569ab2fb324c266610cd1b08603f4a3 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A RNase L inhibitor (RLI) é uma proteína altamente conservada em Eukatyota e Archaea e foi primeiramente identificada em humanos, onde se mostrou reguladora da via 2'-5' - oligoadenilato sintetase/ribonuclease L (OAS/RNase L), principal via induzida por interferon. Novas funções têm sido descritas para RLI em diferentes organismos, dentre elas o controle do silenciamento por RNA e resistência a vírus. Visando futuros estudos estruturais foi possível subclonar a sequência que codifica para o domínio NBDs (Nucleotide Binding Domain) de AtRLI2 de Arabidopsis thaliana em vetor de expressão pET-28a(+) capaz de expressar a proteína NBDs ligada a um His6 tag. A proteína NBDs foi expressa e purificada por cromatografia de afinidade por níquel em condição nativa utilizando detergente N-lauril-sarcosil, com um rendimento da ordem de 8 mg/L e em condição desnaturante utilizando uréia, com um rendimento da ordem de 10 mg/L. Para renaturação da proteína utilizou-se dATP e cloreto de magnésio com posterior diálise obtendo-se uma diminuição significativa dos corpúsculos de inclusão e o aumento da solubilidade da proteína produzida em condição desnaturante. Para confirmar a presença dos resíduos His6 tag em fusão com a proteína NBDs, testes de Western blot foram realizados utilizando extrato total das células induzi das, a proteína purificada e a proteína originada da diálise. Foi possível concluir que houve o reconhecimento do anticorpo monoclonal anti-HiS6 tag à proteína confirmando o sucesso da obtenção e purificação da proteína fusionada à uma sequência de 6 histidinas. Etapas posteriores de purificação, a partir da proteína NBDs obtida, necessitam ser realizadas a fim de obter a proteína com grau de pureza significativo e em quantidades suficientes para a realização dos ensaios biofisicos e cristalográficos / The RNase L inhibitor (RLI) is a protein highly conserved in Eukaryota and Archaea and it was first identified in humans acting as a regulator of Oligoadenylate SynthetaselRNase L system (OASlRNase L), the main pathway induced by interferon. New functions have been described for RLI in different organisms, among them the control of RNA silencing and virus resistance. In order to further structural studies could subcIoned the coding sequence for the domain NBDs (nucIeotide-binding domain) AtRLI2 of Arabidopsis thaliana in expression vector pET-28a (+) capable of expressing the protein NBDs linked to a His6 tag. NBDs protein was expressed and purified by affinity chromatography on nickel in native condition using detergent Nlaurylsarcosine with a yield of about 8 mgIL and denaturing conditions using urea with a yield of about 10 mgIL. For renaturation of the protein was used dATP and magnesium chloride with subsequent dialysis resulting in a significant reduction in inclusion bodies and increasing the solubility of the protein produced in denaturant condition. To confirm the presence of residues HiS(; tag fusion protein with the NBDs, Western hlot tests were conducted using total extract of induced cells, the purified protein and protein originated from dialysis. It was concIuded that there was recognition of the monocIonal anti-His6 tag protein confirming the success of obtaining and purification of protein fused to a sequence of 6 histidines. Later stages of purification from the protein obtained NBDs are being conducted to obtain the pure protein 10 sufficient quantities for the testing biophysical and crystallographic

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-12-11Bitstream added on 2014-06-13T18:55:13Z : No. of bitstreams: 1 leonardi_ep_me_botfm.pdf: 971917 bytes, checksum: 8fbf40d647edcd4650da900b87dfcbb2 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Cirurgias renais como nefrectomias parciais, transplante renal e cirurgia renovascular são situações clínicas que freqüentemente exigem a interrupção transitória do fluxo sanguíneo renal. A hipotermia renal é um dos métodos de preservação da função renal mais eficiente para se proteger as células renais das lesões de isquemia e reperfusão. O objetivo deste estudo foi comparar a técnica de hipotermia renal com gelo e a técnica de resfriamento renal retrógrado de solução salina à 4°C na via excretora. Foram utilizados 24 porcos machos entre 15 e 20 Kg, divididos em 4 grupos. Foram coletadas amostras de sangue e urina no dia anterior ao experimento e no 1° e 5° dia pósoperatório (PO), a fim de se medir creatinina e uréia, e se obter cultura de urina e débito urinário. Todos os animais foram submetidos à nefrectomia direita e, no rim esquerdo, foram aferidas as temperaturas do córtex e medula renal durante 60 minutos. Grupo 1(8): hipotermia retrógrada com solução salina à 4°C por meio de cateter ureteral duplo lúmen com obstrução do pedículo renal; grupo 2 (8): hipotermia com gelo e isquemia renal; grupo 3 (4): apenas isquemia quente e grupo 4 (8): controle. Os animais foram sacrificados no 5° dia e os espécimes cirúrgicos submetidos à análise histológica de microscopia óptica (MO). Todas as culturas de urina foram negativas. No grupo 1, em média, as temperaturas mínimas das camadas medular e cortical foram respectivamente 24,9 e 25,4°C e no grupo 2, foram 6,38 e 5°C. Para as variáveis uréia e creatinina, foi aplicada análise de variância e para a histologia, o teste exato de Fisher. Tanto na comparação entre os grupos 1 e 2, quanto na comparação isolada de cada um deles com o grupo controle, não se encontraram diferenças funcionais e histológicas estatisticamente significativas... / Renal surgeries such as partial nephrectomy, renal transplant and renovascular surgeries are clinical situations which often require the transitory interruption of renal blood flow. The renal hypothermia is one of the methods of renal function preservation which is the most efficient one in order to protect renal cells from lesions of ischemia and reperfusion. In 1975, Ward suggested that 15ºC would be the ideal temperature to cause regional renal hypothermia.(1) Albeit there are several methods of renal hypothermia, it is traditionally obtained by renal cooling involving the kidney with ice slush after the obstruction of the renal artery.(2-4) Nowadays, laparoscopic renal surgeries have developed a lot, which turned it to be an alternative to partial nephrectomy (LPN).(5) The technique of ice slush was reproduced to the laparoscopy, but presents technical difficulties in order to put the bag and to the introduction of the ice, which makes the method difficult to handle. Perfusion of cold solution in the renal artery is not widely used due to the risks of lesions in renal vessels.(6,7) Landman et al proposed a model of retrograde endoscopic intracavitary cold saline perfusion.(8) It is an easy applicable technique and it allows getting a resection area clear free from ice and it avoids the cooling of anatomic structures which involve the surgical area. However, this technique brings doubts about its capacity to produce the ideal temperature in the proximal convoluted tubule, once it cools the renal medulla better than the cortex.(9,10) Manuscript 2 73 This study intends to compare the Landman’s technique with the traditional method of cooling with ice slush and to evaluate the functional alterations of the kidney and the histological alterations of cell brush borders of the proximal convoluted tubules of pigs kidneys.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005Bitstream added on 2014-06-13T20:41:28Z : No. of bitstreams: 1 dornbusch_pt_dr_botfmvz.pdf: 1000026 bytes, checksum: 9d7db83dca777b01eccbd74b45e0a741 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A trombose de jugular é problema freqüente na medicina eqüina, implicando muitas vezes em conseqüências fatais. O diagnóstico é relativamente simples, baseado nos achados físicos, nas imagens angiográficas e ultra-sonográficas. A terapêutica conservativa empregada em grande parte dos casos é insatisfatória. O objetivo deste trabalho foi avaliar em eqüinos a aplicabilidade da trombectomia com cateter de fogarty, técnica esta rotineiramente empregada pela medicina humana, no restabelecimento da perviedade vascular. Foram utilizados 10 eqüinos divididos em 2 grupos, com cinco animais cada, em que se induziu a trombose de jugular unilateral direita, através do acesso cirúrgico à veia e aplicação de sutura estenosante e injeção de glicose a 50%. No grupo controle avaliou-se a evolução da tromboflebite sem qualquer tipo de intervenção terapêutica. Os animais do grupo tratado foram submetidos a trombectomia com cateter de Fogarty. Foram avaliados os parâmetros físicos gerais, regionais, ultra-sonográficos e angiográficos contrastados, nos momentos pré-indução (MPRÉ), indução da trombose (MTI) e dez dias de evolução da trombose (M13). A técnica empregada induziu a tromboflebite, que obstruiu completamente um segmento da veia jugular de todos os animais. Os animais do grupo controle mantiveram os trombos obstruindo totalmente o lume vascular até o final do período de avaliação, sendo que avaliações regionais mostraram principalmente o edema parotídeo e o ingurgitamento vascular, cranial a tromboflebite de jugular. Nos exames ultra-sonográficos e angiográficos, o grupo tratado apresentou todas as veias pérvias ao final do experimento, com remissão total dos sinais clínicos. Concluiu-se que a técnica da trombectomia com cateter de Fogarty foi eficiente na desobstrução da veia jugular submetida à trombose experimental. / Thrombosis of jugular vein is a frequent problem in the equine medicine, implying many times in fatal consequences. The diagnosis is relatively simple, based in the clinical findings, angiographics images and ultrasonographycs. The therapeutic employed to a large extent of the cases is unsatisfactory. The objective of this work was to evaluate in horses the applicability of the thrombectomy with Fogarty catheter, technique routinely used in medicine, in the reestablishment of the perviousness vascular. 10 horse divided in 2 groups had been used, with five animals each, and induced thrombosis of right unilateral jugular vein, through the surgical access to the vein and application of stenotic suture and glucose 50% injection. In the controlled group it was evaluated evolution of the thrombophlebitis without any type of therapeutical intervention. The animals of the treatead group had been submitted to the thrombectomy with Fogarty catheter. General clinical parameters were analysed at the moment of the preinduction (MPRÉ), induction of thrombosis (MTI), and ten days of evolution of thrombosis (M10). The employed technique induced the thrombophlebitis that completely obstructed a segment of the jugular vein in all the animals. The animals of the control group had kept the thrombus totally obstructing the vascular lumen until the end of the period of evaluation, being that regional evaluations had mainly shown parotid edema and the vascular dilated, cranial the thrombophlebitis of jugular vein. The treated group presented all the pervious veins to the end of the experiment, confirmed by angiographics and ultrasonographics examinations, with total remission of the clinical sign. So far, it was concluded that the technique of the thrombectomy with catheter of Fogarty was efficient in eliminating the obstruction of the jugular vein submitted to experimental thrombosis.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-10-10Bitstream added on 2014-06-13T18:42:10Z : No. of bitstreams: 1 haanwinckel_mcs_dr_botfm.pdf: 802672 bytes, checksum: a4afa50479234eb44a86f031c75134e1 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O presente estudo teve por objetivo principal avaliar a atividade de macrófagos e produção de anticorpos frente à infecção experimental pela Leptospira pomona em camundongos selecionados geneticamente para boa (H) ou má (L) resposta imune humoral. Para avaliar a atividade macrofágica foram utilizados ensaios para determinação de produtos intermediários do oxigênio e nitrogênio. Também foram investigados a produção de fator de necrose tumoral (TNF- ), anticorpos específicos, recuperação da leptospira nos rins e fígado, lesões histológicas através da técnica de hematoxilina-eosina e determinação de antígenos leptospiricos nos tecidos através da técnica de imunoistoquímica. Os resultados mostram que a linhagem LIV-A apresentou menor recuperação do microrganismo nos compartimentos analisados. Entretanto, a linhagem HIV-A a partir do 14 dia de infecção apresentou total contenção , embora a LIV-A ainda tenha recuperado bactérias no fígado no 21 dia. A resposta imune contra o sorovar pomona nessas linhagens se caracterizou com produção elevada de anticorpos principalmente em períodos mais tardios do processo infeccioso. A produção de intermediários reativos do oxigênio e nitrogênio também auxiliou na eliminação da L. pomona nas duas linhagens, sendo a produção de H2O2 importante fator nas linhagens HIV-A e NO nas linhagens LIV-A, principalmente nos períodos mais tardios pós-inoculação, o mesmo ocorrendo em relação ao TNF- . Lesões renais mais intensas ocorreram em períodos em que houve maior numero de leptospiras isoladas em meio de cultivo. Entretanto, na linhagem LIV-A houve persistência de alterações teciduais mesmo em períodos em que não houve recuperação de leptospiras. A técnica de imunoistoquímica apresentou-se um pouco mais sensível em relação ao cultivo na detecção das leptospiras. Entretanto, ambas... / The aim of the present study was to evaluate the role of the macrophage activity and antibody production on experimental infection of Leptospira pomona in mice, selected genetically for high (H) or low (L) humoral immune response. To evaluate the macrophage activity, assays were used to determine oxygen and nitrogen intermediate reactives. Also was investigated the production of tumor necrosis factor (TNF- .), specific antibodies, recovery of leptospires in the kidneys and liver, histological lesions by hematoxilin-eosin technique and determination of leptospires antigens in tissues by immunohistochemistry. The results showed a smaller recovery of microorganism from the analyzed compartments to the LIV-A lineage. However, the HIV-A lineage showed total contention from the 14th day post-infection, although LIV-A had still bacteria in the liver at 21th day post-infection. The immune response against pomona serovar in those lineages, was characterized as high production of antibodies, mainly in later periods of infectious process. The production of oxygen and nitrogen intermediate reactives, also contributed to L. pomona elimination for two lineages, being the H2O2 production an important factor in the HIV-A lineage and NO in the LIV-A lineage, mainly at the latest post-inoculation periods, the same occurring in relation to TNF- . Intense renal lesions occurred at periods that were larger number of isolated leptospires by culture technique. Meantime, it had persistence of tissue alterations in the LIV-A lineage, even at no leptospires recovery periods. The imunohistochemistry technique showed more sensitive in relation to the cultivation technique. However, both were good techniques to agent identification on those lineages. The results suggest those lineages could represent an important model to investigation of animal pathogenesis and immune response against the varied serovares of leptospires.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003Bitstream added on 2014-06-13T18:42:11Z : No. of bitstreams: 1 silva_av_dr_botfm_prot.pdf: 636648 bytes, checksum: 53bbd69b49e6f85da36a6c425cb8447c (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Com relação ao desenvolvimento do quadro clínico e a transmissão transplacentária, a toxoplasmose em humanos e ratos é similar, e a infecção em ratos pode servir como um modelo para a enfermidade humana. Foram inoculados, pela via oral, sete grupos de ratos com 105 (Grupo 1), 104 (Grupo 2) e 103 (Grupo 3) bradizoítos de Toxoplasma gondii cepa BTU-2 (altamente virulenta para camundongos), 105 (Grupo 4), 104 (Grupo 5) e 103 (Grupo 6) bradizoítos de T.gondii cepa ME-49 (pouco virulenta para camundongos) e solução salina estéril (Grupo 7 – Controle). Os animais foram observados durante 84 dias, com colheita semanal de sangue para obtenção de soro e realização das provas sorológicas pelos métodos de aglutinação direta (MAD) e imunofluorescência indireta (RIFI) para anticorpos das classes IgG e IgM. Ao final do período os animais foram sacrificados e fragmentos de tecidos colhidos para reisolamento do parasita em camundongos e para detecção de DNA do T.gondii pela reação em cadeia pela polimerase (PCR), utilizando-se oligonucleotídeos dirigidos para a detecção dos genes SAG- 1, B1, rDNA e para uma seqüência repetida não codificadora (REP). Foi realizada a tipagem da cepa BTU-2 pela avaliação do polimorfismo do gene SAG-2. Todos os ratos desenvolveram títulos de anticorpos detectáveis pelas diferentes técnicas, havendo, independente da cepa inoculada, diferenças mais frequentes entre os grupos que receberam 105 e 103 bradizoítos. Para IgM a partir do 35o DPI e para a RIFI-IgG e o MAD, a cepa BTU-2 induziu títulos mais elevados que a cepa ME-49. A cepa BTU-2 foi isolada de todas as amostras de cérebro e musculatura estudadas, independente da dose utilizada na infecção dos animais, enquanto que para a cepa ME-49, o parasita foi isolado mais frequentemente do cérebro do que da musculatura, com influência da dose infectante... / Referring to the symptoms and transplacentary transmission, toxoplasmosis in humans and rats is similar and rats can be used as a model for the disease in humans. 7 groups of rats were inoculated, by oral administration, using 105 (Group 1), 104 (Group 2) and 103 (Group 3) Toxoplasma gondii bradyzoits from strain BTU-2, which is highly infective to mice and with 105 (Group 4), 104 (group 5) and 103 (Group 6) T.gondii bradyzoits of strain ME-49, which is less infective to mice and, finally, sterile saline solution (Group 7) as a control one. The animals were observed during 84 days, with weekly blood samples, in order to obtain serum and then submitted to serological tests by modified agglutination test (MAT) and imunofluorecent antibody test (IFAT) to antibodies from subtypes IgG and IgM. At the end of time of observation, the animals were killed and samples of their tissues were obtained in order to reisolate the parasite and to detect the T.gondii DNA by polymerase chain reaction (PCR), using specific oligonucleotids to detect the genes SAG-1, B1, rDNA and to no coding repetitive sequence (REP). The BTU-2 strain was classified by the SAG-2 gene polymorphism. All the rats developed detectable antibodies titers, no matter which strain was used between the techniques. The most frequent differences in the serological results were among the groups that received 105 and those who received 103 bradizoits, no matter the strain used. The BTU-2 strain induced higher titles to IgM since 35 DPI and to IFAT-IgG and MAT than the ME-49 strain. The BTU-2 strain also was isolated from all the brain and muscles samples, no matter the dosage used to infect the animals. When the ME- 49 strain was used, the parasite was isolated more frequently... (Complete abstract, click electronic access below)