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Desenvolvimento de um sistema de expressão em Metarhizium anisopliae baseado no promotor homólogo do gene tef-1 α

Nakazato, Luciano January 2005 (has links)
Vetores de expressão são ferramentas moleculares úteis para investigar a função de genes tanto em sistemas procarióticos quanto eucarióticos. O fungo Metarhizium anisopliae, utilizado no controle biológico de artrópodes, é bem caracterizado em nível molecular. Genes candidatos a participar do processo de infecção de hospedeiros tem sido isolados utilizando estratégias em que o gene candidato é predefinido (enzimas hidrolíticas, por exemplo) ou estratégias mais globais como projetos de ESTs e a análise de bibliotecas de subtração. A superexpressão tem sido o método adotado para verificar a participação de genes isolados no processo de infecção. Esta estratégia tem sido baseada no promoter heterólogo PgpdA de Aspergillus nidulans. Neste trabalho, o gene que codifica o fator de alongamento de tradução tef-1 α de Metarhizium anisopliae foi clonado e a sua região promotora foi localizada e utilizada na construção de um vetor de expressão. Somente uma cópia do gene tef-1α está presente no genoma de M. anisopliae e o seu perfil de expressão foi analisado. Uma árvore filogenética foi construída baseada nos ortógos de tef-1 α e mostrou uma alta correlação com o fungo Cordyceps taii. A região de 639 pb à montante do codon de iniciação (ATG) foi utilizada com sucesso para a expressão do gene repórter sGFP e do gene bar, que confere resistência ao glifosinato de amônio, em M. anisopliae. Os transformantes construídos não apresentaram alteração na sua virulência em bioensaios com carrapatos, em relação a linhagem receptora. Além disso, demonstramos que o nível de expressão permite a detecção óptica da fluorescência de sGFP durante a infecção dos carrapatos. Desta forma, o vetor desenvolvido será uma ferramenta útil para a superexpressão em Metarhizium.
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Linguagem, intersubjetividade e movimento humano

Araújo, Lísia Costa Gonçalves de January 2005 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Desportos. Programa de Pós-Graduação em Educação Física. / Made available in DSpace on 2013-07-16T01:56:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Este estudo trata da intersubjetividade na temática do movimento humano, num contexto interdisciplinar, com base na ontologia da linguagem em M. Merleau-Ponty e na teoria do agir comunicativo em J. Habermas. O movimento é o transito entre os sujeitos e o mundo, é a experiência primordial, que através da linguagem vamos retomando e criando sentidos e significados. A linguagem é indissociável do corpo, e é este que possibilita fazê-la existir. O corpo é eminentemente expressivo. Existe um sentido de unidade que emerge da própria experiência, traduzindo-se num preenchimento ou completude, que experimento pelo movimento. Um exemplo especial é a própria fala que não só retoma sentidos e significações, mas também os cria, a partir de sua própria experiência. A experiência perceptiva ganha lugar de destaque junto as nossas experiências simbólicas num contexto de comunicação. Desta forma, procuramos pensar o movimento humano a partir do conceito de fundação em M. Merleau-Ponty, apontando uma relação espontânea entre as partes que formam um todo único e indivisível. Da crítica a abordagem funcional e biomecânica em direção a concepção dialógica do movimento humano (Kunz, 1991), em que o movimento encontra-se num contexto de relação e de expressão, buscamos esta parceria movimento e intersubjetividade, com a intenção de abrirmos novos caminhos que complementem um trabalho de educação através do movimento, onde a linguagem seria o ponto fundamental do processo, no sentido de abrir horizontes simbólicos e ampliar possibilidades de comunicação resgatando a importância das nossas experiências tanto perceptivas quanto simbólicas em direção a uma reflexão crítica.
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A problemática da linguagem em Merleau-Ponty: a fala falada e a fala falante

Francisco, Liamar January 2015 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Filosofia e Ciências Humanas, Programa de Pós-Graduação em Filosofia, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-10-13T04:08:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334852.pdf: 847999 bytes, checksum: 60d5d36772129b98950261bfeb0f7efa (MD5) Previous issue date: 2015 / A presente dissertação sobre o tema  A problemática da linguagem em Merleau-Ponty: a fala falada e a fala falante apresenta um itinerário da problemática da linguagem nos três períodos contemplados nas obras Fenomenologia da percepção (1945), A prosa do mundo (1950) e O visível e o invisível (1960) do filósofo francês Merleau-Ponty. Primeiramente, a análise da obra de 1945 tem como objetivo apresentar os argumentos sobre a função da fala na apropriação do pensamento. Trata-se de mostrar que a linguagem é o modo de ligação entre o mundo da percepção, do mundo humano e da fundação da cultura, enquanto meio de interação entre as intersubjetividades. Mas, posteriormente, o filósofo reconhece que nesta obra ainda permanece alguns problemas, principalmente ao que chamou de má ambiguidade. Seja, a linguagem é ao mesmo tempo modo de produção do pensamento, mas supõe um Cogito tácito. Em A prosa do mundo, Merleau-Ponty amplia a forma de ver a linguagem, enquanto diferenciação dos gestos, que se encontram em toda parte, inclusive para além do mundo cultural e da intercorporiedade e que o mundo da percepção já é, ele mesmo linguagem. E, em 1960, na obra inacabada O visível o invisível, reconhece que é necessário escrever uma nova ontologia, não mais preocupada com o Em Si e o Para Si e sim de mostrar que a linguagem assim como a visão, o olfato, o tato é, primeiramente, uma idealidade de horizonte que se exprime na diferenciação dos corpos, até o ponto de sedimentar idealidades puras ou pensamento. Merleau-Ponty retoma a teoria da fala falada e fala falante chamando agora de linguagem falada e linguagem falante, efeitos da própria diferenciação do corpo sensível, ou seja, quiasma. Então em 1945, na Fenomenologia da percepção, Merleau-Ponty dizia que a linguagem é o corpo. E, em 1950, afirmava que o corpo é linguagem e agora vai dizer que a linguagem é efeito do quiasma entre os corpos.<br> / Abstract : This dissertation on "The issue of language in Merleau-Ponty: spoken speech and speech speaker presents an itinerary of the language problem in the three periods covered in the works Phenomenology of perception (1945), The prose of the world (1950) and The visible and the invisible (1960) the French philosopher Merleau-Ponty. First analysis of the work of 1945 aims to present the arguments about the role of speech in the appropriation of thought. This is to show that language is the connection mode between the world of perception, the human world and the foundation of culture as a means of exchange between intersubjectivities. However, later, the philosopher recognizes that this work still remains some problems, mainly to what he called bad ambiguity. Is, language is both mode of production of thought, but implies a tacit cogito. In The prose of the world, Merleau-Ponty extends the way to see the language, while differentiation of gestures, which are in all part, even beyond the cultural world and intercorporiedade, and the world of perception already is itself language. And in 1960, the unfinished work The Visible and Invisible, recognizes the need to write a new ontology not more concerned with itself and for itself, but to show that language as well as vision, smell, touch is primarily a ideality horizon which is expressed in the differentiation of bodies, to the point of sedimentary idealities or pure thought. Merleau-Ponty takes the theory of speech and spoken speech speaker calling now spoken language and language speaker, effects of the very sensitive differentiation of the body, ie, chiasm. Then in 1945, in the Phenomenology of perception, Merleau-Ponty said that language is the body. And in 1950 stated that the body is language and will now say that language is the effect of chiasmus between the bodies.
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Desenvolvimento de um sistema de expressão em Metarhizium anisopliae baseado no promotor homólogo do gene tef-1 α

Nakazato, Luciano January 2005 (has links)
Vetores de expressão são ferramentas moleculares úteis para investigar a função de genes tanto em sistemas procarióticos quanto eucarióticos. O fungo Metarhizium anisopliae, utilizado no controle biológico de artrópodes, é bem caracterizado em nível molecular. Genes candidatos a participar do processo de infecção de hospedeiros tem sido isolados utilizando estratégias em que o gene candidato é predefinido (enzimas hidrolíticas, por exemplo) ou estratégias mais globais como projetos de ESTs e a análise de bibliotecas de subtração. A superexpressão tem sido o método adotado para verificar a participação de genes isolados no processo de infecção. Esta estratégia tem sido baseada no promoter heterólogo PgpdA de Aspergillus nidulans. Neste trabalho, o gene que codifica o fator de alongamento de tradução tef-1 α de Metarhizium anisopliae foi clonado e a sua região promotora foi localizada e utilizada na construção de um vetor de expressão. Somente uma cópia do gene tef-1α está presente no genoma de M. anisopliae e o seu perfil de expressão foi analisado. Uma árvore filogenética foi construída baseada nos ortógos de tef-1 α e mostrou uma alta correlação com o fungo Cordyceps taii. A região de 639 pb à montante do codon de iniciação (ATG) foi utilizada com sucesso para a expressão do gene repórter sGFP e do gene bar, que confere resistência ao glifosinato de amônio, em M. anisopliae. Os transformantes construídos não apresentaram alteração na sua virulência em bioensaios com carrapatos, em relação a linhagem receptora. Além disso, demonstramos que o nível de expressão permite a detecção óptica da fluorescência de sGFP durante a infecção dos carrapatos. Desta forma, o vetor desenvolvido será uma ferramenta útil para a superexpressão em Metarhizium.
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Desenvolvimento de um sistema de expressão em Metarhizium anisopliae baseado no promotor homólogo do gene tef-1 α

Nakazato, Luciano January 2005 (has links)
Vetores de expressão são ferramentas moleculares úteis para investigar a função de genes tanto em sistemas procarióticos quanto eucarióticos. O fungo Metarhizium anisopliae, utilizado no controle biológico de artrópodes, é bem caracterizado em nível molecular. Genes candidatos a participar do processo de infecção de hospedeiros tem sido isolados utilizando estratégias em que o gene candidato é predefinido (enzimas hidrolíticas, por exemplo) ou estratégias mais globais como projetos de ESTs e a análise de bibliotecas de subtração. A superexpressão tem sido o método adotado para verificar a participação de genes isolados no processo de infecção. Esta estratégia tem sido baseada no promoter heterólogo PgpdA de Aspergillus nidulans. Neste trabalho, o gene que codifica o fator de alongamento de tradução tef-1 α de Metarhizium anisopliae foi clonado e a sua região promotora foi localizada e utilizada na construção de um vetor de expressão. Somente uma cópia do gene tef-1α está presente no genoma de M. anisopliae e o seu perfil de expressão foi analisado. Uma árvore filogenética foi construída baseada nos ortógos de tef-1 α e mostrou uma alta correlação com o fungo Cordyceps taii. A região de 639 pb à montante do codon de iniciação (ATG) foi utilizada com sucesso para a expressão do gene repórter sGFP e do gene bar, que confere resistência ao glifosinato de amônio, em M. anisopliae. Os transformantes construídos não apresentaram alteração na sua virulência em bioensaios com carrapatos, em relação a linhagem receptora. Além disso, demonstramos que o nível de expressão permite a detecção óptica da fluorescência de sGFP durante a infecção dos carrapatos. Desta forma, o vetor desenvolvido será uma ferramenta útil para a superexpressão em Metarhizium.
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Die Reflexionen Ulrichs in Robert Musils Roman Der Mann ohne Eigenschaften Ihr Zusammenhang mit dem zeitgenössischen Denken.

Heydebrand, Renate von. January 1900 (has links)
Revision of the author's Diss.--Münster, 1962 with title: Der gedankliche Gehalt in Robert Musils Roman Der Mann ohne Eigenschaften im Zusammenhang mit dem zeitgenössischen Denken. / Bibliography: p. 253-256.
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Clonagem, caracterização e expressão de cDNAs similares a calreticulina e paramiosina isolados de glândula salivar do carrapato Boophilus microplus (Canestrini, 1887)

Ferreira, Carlos Alexandre Sanchez January 2002 (has links)
O carrapato Boophilus microplus é um dos mais importantes ectoparasitas dos rebanhos bovinos, estando em todas as áreas tropicais e subtropicais entre o paralelo 32 °N e 32 °S, abrangendo regiões que se dedicam à pecuária na América, África, Ásia e Oceania. O controle do carrapato B. microplus é realizado principalmente com o uso de acaricidas, entretanto devido a crescente preocupação com os problemas criados pela poluição química do ambiente, ao alto custo e toxicidade das drogas e ao aparecimento de carrapatos resistentes aos acaricidas, alternativas para o controle do B. microplus devem ser encontradas. A sobrevivência dos carrapatos depende grandemente da sua capacidade de evadir o sistema imunológico dos hospedeiros, portanto antígenos da glândula salivar poderiam ser alvos para intervenção imunoprofilática. Neste trabalho foram isolados cDNAs não previamente descritos correspondentes a antígenos presentes na glândula salivar. cDNAs que codificam para proteínas similares a paramiosina e calreticulina foram seqüenciados, expressos em Escherichia coli e as proteínas recombinantes purificadas, tendo sido produzidos soros policlonais contra as proteínas recombinantes em coelhos. As seqüências foram caracterizadas e alinhamentos múltiplos com outras seqüências foram determinados. O gene da calreticulina mostrou ser expresso em todos os estágios e tecidos testados, tanto em experimentos de RT-PCR quanto de Western blot, tendo sido demonstrado também a sua secreção pela saliva. Análise filogenética indica o agrupamento do gene de B. microplus com seqüências de outros artrópodos. Soros de bovinos infestados não reconhecem a calreticulina recombinante, apesar dela ser reconhecida pelo soro de cães infestados pelo carrapato Rhippicephalus sanguineus. A paramiosina mostrou-se, em ensaios de Western blot, também estar presente em todos os estágios testados, porém não na saliva. A paramiosina recombinante foi capaz de ligar colágeno e IgGs. Ambas as proteínas correspondem a proteínas multi-funcionais possivelmente envolvidas na imunomodulação do hospedeiro, tendo sido sugeridas como imunógenos protetores contra outros parasitas.
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Clonagem, caracterização e expressão de cDNAs similares a calreticulina e paramiosina isolados de glândula salivar do carrapato Boophilus microplus (Canestrini, 1887)

Ferreira, Carlos Alexandre Sanchez January 2002 (has links)
O carrapato Boophilus microplus é um dos mais importantes ectoparasitas dos rebanhos bovinos, estando em todas as áreas tropicais e subtropicais entre o paralelo 32 °N e 32 °S, abrangendo regiões que se dedicam à pecuária na América, África, Ásia e Oceania. O controle do carrapato B. microplus é realizado principalmente com o uso de acaricidas, entretanto devido a crescente preocupação com os problemas criados pela poluição química do ambiente, ao alto custo e toxicidade das drogas e ao aparecimento de carrapatos resistentes aos acaricidas, alternativas para o controle do B. microplus devem ser encontradas. A sobrevivência dos carrapatos depende grandemente da sua capacidade de evadir o sistema imunológico dos hospedeiros, portanto antígenos da glândula salivar poderiam ser alvos para intervenção imunoprofilática. Neste trabalho foram isolados cDNAs não previamente descritos correspondentes a antígenos presentes na glândula salivar. cDNAs que codificam para proteínas similares a paramiosina e calreticulina foram seqüenciados, expressos em Escherichia coli e as proteínas recombinantes purificadas, tendo sido produzidos soros policlonais contra as proteínas recombinantes em coelhos. As seqüências foram caracterizadas e alinhamentos múltiplos com outras seqüências foram determinados. O gene da calreticulina mostrou ser expresso em todos os estágios e tecidos testados, tanto em experimentos de RT-PCR quanto de Western blot, tendo sido demonstrado também a sua secreção pela saliva. Análise filogenética indica o agrupamento do gene de B. microplus com seqüências de outros artrópodos. Soros de bovinos infestados não reconhecem a calreticulina recombinante, apesar dela ser reconhecida pelo soro de cães infestados pelo carrapato Rhippicephalus sanguineus. A paramiosina mostrou-se, em ensaios de Western blot, também estar presente em todos os estágios testados, porém não na saliva. A paramiosina recombinante foi capaz de ligar colágeno e IgGs. Ambas as proteínas correspondem a proteínas multi-funcionais possivelmente envolvidas na imunomodulação do hospedeiro, tendo sido sugeridas como imunógenos protetores contra outros parasitas.
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O grafite e a pichação

Baasch, Mariani Santos January 2014 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Educação, Programa de Pós-Graduação em Educação, Florianópolis, 2014 / Made available in DSpace on 2015-02-05T21:09:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 332117.pdf: 40907065 bytes, checksum: f8741c03b696a40f909c128487873127 (MD5) Previous issue date: 2014 / Esta pesquisa ilustra uma investigação teórica e prática em torno das manifestações do grafite e da pichação em uma Escola Estadual da área urbana do município de Florianópolis/SC. Tem como base metodológica os estudos pós-críticos em educação e se estruturou utilizando como recurso metodológico a fotografia dos muros, dos espaços internos e externos da referida escola, além de entrevistas individuais e em grupo com os sujeitos que transitam e habitam a escola tanto do lado de dentro quanto do lado de fora . O objetivo dessa pesquisa visa compreender o lugar dos grafites e das pichações por entre os muros da escola, perspectivando interpretações em torno destas expressões-manifestações, de como ganham vida no cotidiano, do lado de dentro e do lado de fora da escola. A partir da análise dos dados e da experiência em campo, verificou-se que os grafites e pichações serviram de trampolim para uma discussão maior que estava impressa nos discursos e nas formas de habitar/transitar/existir na escola, afinal, todos queriam falar desse lugar.<br> / Abstract: This research illustrates a theoretical and practical investigation around graffiti manifestations in a Public School in urban area of the city of Florianópolis, SC, Brazil. The research methodology is based on postcritical studies on education, and the research was structured using photos of the school walls, and internal and external spaces as methodological resource, as well as individual and group interviews. Field trips were conducted to take photos of the graffiti in the school surroundings, and to interview members of the school community and teachers. The objective of such interviews, and of the research as a whole, was to understand the role played by the graffiti in the school walls, putting into perspective the interpretations of such expressionsmanifestations, understanding how they come to life inside and outside of the school walls. Based on the data analysis and the field experience it was verified that the graffiti served to leverage a broader discussion that was present in the discourses and the ways to inhabit/transit/exist at school: all of them wanted to talk about this place!
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Clonagem, caracterização e expressão de cDNAs similares a calreticulina e paramiosina isolados de glândula salivar do carrapato Boophilus microplus (Canestrini, 1887)

Ferreira, Carlos Alexandre Sanchez January 2002 (has links)
O carrapato Boophilus microplus é um dos mais importantes ectoparasitas dos rebanhos bovinos, estando em todas as áreas tropicais e subtropicais entre o paralelo 32 °N e 32 °S, abrangendo regiões que se dedicam à pecuária na América, África, Ásia e Oceania. O controle do carrapato B. microplus é realizado principalmente com o uso de acaricidas, entretanto devido a crescente preocupação com os problemas criados pela poluição química do ambiente, ao alto custo e toxicidade das drogas e ao aparecimento de carrapatos resistentes aos acaricidas, alternativas para o controle do B. microplus devem ser encontradas. A sobrevivência dos carrapatos depende grandemente da sua capacidade de evadir o sistema imunológico dos hospedeiros, portanto antígenos da glândula salivar poderiam ser alvos para intervenção imunoprofilática. Neste trabalho foram isolados cDNAs não previamente descritos correspondentes a antígenos presentes na glândula salivar. cDNAs que codificam para proteínas similares a paramiosina e calreticulina foram seqüenciados, expressos em Escherichia coli e as proteínas recombinantes purificadas, tendo sido produzidos soros policlonais contra as proteínas recombinantes em coelhos. As seqüências foram caracterizadas e alinhamentos múltiplos com outras seqüências foram determinados. O gene da calreticulina mostrou ser expresso em todos os estágios e tecidos testados, tanto em experimentos de RT-PCR quanto de Western blot, tendo sido demonstrado também a sua secreção pela saliva. Análise filogenética indica o agrupamento do gene de B. microplus com seqüências de outros artrópodos. Soros de bovinos infestados não reconhecem a calreticulina recombinante, apesar dela ser reconhecida pelo soro de cães infestados pelo carrapato Rhippicephalus sanguineus. A paramiosina mostrou-se, em ensaios de Western blot, também estar presente em todos os estágios testados, porém não na saliva. A paramiosina recombinante foi capaz de ligar colágeno e IgGs. Ambas as proteínas correspondem a proteínas multi-funcionais possivelmente envolvidas na imunomodulação do hospedeiro, tendo sido sugeridas como imunógenos protetores contra outros parasitas.

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