Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The oxidative stress is an imbalance between reactive oxygen species and the antioxidants action capacity, which cause cellular injury, triggering and exacerbating some pathologies. Thus, researchs, seek to alternative to ease damaging effects of oxidative stress, improving the body's antioxidant capacity, which can be an alternative for the treatment and prevention of diseases and its complications. The polyphenols belong to a class of phytochemicals that show a strong antioxidant role. The barley is a cereal rich in polyphenols, can inhibit the oxidation of lipoproteins, reducing the damages of oxidative stress. This work aimed to study the effect of the extract of barley on lipid oxidation in rats subjected to high-fat diet. The experiment was conducted over a period of 67 days, where the animals were submitted to a diet rich in pork fat, one of the experimental groups supplemented with barley extract. We assessed the body weight gain and food consumption were performed biochemical analysis of serum and the malondialdehyde was quantified in liver tissue. There were no differences in weight gain and biochemical parameters of the animals. Experimentally, the barley extract reduced lipid peroxidation in the liver of mice, caused by high-fat diet, so barley is a cereal rich in polyphenols, and its extract is an effective antioxidant. / O estresse oxidativo é um desequilíbrio entre as espécies reativas de oxigênio e a capacidade de ação dos antioxidantes, o que causa injúria celular, desencadeando e agravando algumas patologias. Desta forma, pesquisas buscam alternativas para amenizar os efeitos prejudiciais do estresse oxidativo, melhorando a capacidade antioxidante do organismo, que pode ser uma alternativa no tratamento e na prevenção das enfermidades e de suas complicações. Os polifenóis pertencem a uma classe de fitoquímicos que se destacam pelo papel antioxidante. A cevada é um cereal rico em polifenóis, os quais podem inibir a oxidação das lipoproteínas, reduzindo os agravos do estresse oxidativo. Assim, objetivou-se estudar o efeito do extrato de grãos de cevada sobre a oxidação lipídica, em ratos submetidos à dieta hiperlipídica. O experimento foi conduzido por um período de 67 dias, durante os quais os animais foram submetidos à dieta rica em gordura suína, sendo um dos grupos experimentais suplementados com extrato de cevada. Foi avaliado o ganho de peso corporal e o consumo alimentar, foram feitas análises bioquímicas do soro e foi quantificado o malondialdeído no tecido hepático. Não houve diferenças no ganho de peso e nos parâmetros bioquímicos dos animais. Experimentalmente, o extrato de cevada reduziu a lipoperoxidação no fígado dos ratos, causada pela dieta hiperlipídica, portanto, a cevada é um cereal rico em polifenóis, sendo que seu extrato é um efetivo antioxidante.

Submitted by Simone Souza (simonecgsouza@hotmail.com) on 2017-09-22T14:51:20Z No. of bitstreams: 1 DISS_2014_Ruberlei Godinho de Oliveira.pdf: 1976037 bytes, checksum: 1bc4af52537ae6c49276a4a8287308cc (MD5) / Approved for entry into archive by Jordan (jordanbiblio@gmail.com) on 2017-09-26T14:23:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISS_2014_Ruberlei Godinho de Oliveira.pdf: 1976037 bytes, checksum: 1bc4af52537ae6c49276a4a8287308cc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-26T14:23:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISS_2014_Ruberlei Godinho de Oliveira.pdf: 1976037 bytes, checksum: 1bc4af52537ae6c49276a4a8287308cc (MD5) Previous issue date: 2014-02-27 / CAPES / Dilodendron bipinnatum Radlk. (Sapindaceae), conhecida popularmente como “mulher-pobre”, é uma árvore nativa do Pantanal de Mato Grosso, Brasil. A entrecasca do caule de Dilodendron bipinnatum é utilizada pela população, nas formas de decocto e macerado, para o tratamento de inflamações. Não há estudos na literatura que comprovem a atividade anti-inflamatória desta planta e o seu respectivo mecanismo de ação. Esse trabalho tem como objetivo avaliar a atividade e o mecanismo de ação anti-inflamatório do extrato hidroetanólico da entrecasca de Dilodendron bipinnatum (EHDb) em modelos experimentais in vivo e in vitro. A entrecasca foi macerada em solução hidroetanólica 70% (1:3, p/v) durante 7 dias, filtrada, concentrada em evaporador rotativo e o solvente residual eliminado em estufa a 40ºC, obtendo-se assim o EHDb. Os taninos condensados e hidrolisáveis foram identificados e quantificados por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). A citotoxicidade do EHDb em macrófagos murinos (células RAW 264.7) foi avaliada pelo método de azul de Alamar. A atividade anti-inflamatória in vivo do EHDb (20, 100 e 500 mg/kg v.o.) foi avaliada no modelo de peritonite induzida por lipopolissacarídeo (LPS), em camundongos Swiss cujo lavado peritoneal foi recolhido para determinações de TNF-α, IL-1β e IL-10, usando-se kits comerciais para ELISA. A atividade anti-inflamatória in vitro (1, 5 e 20 μg/mL) foi avaliada em células RAW 264.7 estimuladas com LPS e/ou INF-γ, coletando-se o sobrenadante para determinações das mesmas citocinas observadas in vivo, assim como de óxido nítrico pelo método de Griess. O efeito do EHDb sobre a expressão gênica de MAPK p38, ERK 1/2 e COX-2 foi avaliado em ensaio de western blotting em células RAW 264.7 estimuladas com LPS. O EHDb não alterou a viabilidade em células RAW 264.7, apresentando uma concentração inibitória mínima (CI50%) > 200 ± 0,38 μg/mL. No modelo de peritonite induzida por LPS, o EHDb reduziu a migração de leucócitos totais e neutrófilos, em todas as doses, atingindo o maior efeito (45% e 64%, p<0,001, respectivamente) com 20 mg/kg, em ambos os casos. A ação anti-inflamatória foi devida, pelo menos em parte, pela inibição da migração, citocinas do tipo Th1, expressão de MAPK p38 e COX-2, e estimulação de citocinas do tipo Th2, sem afetar a via do NO. Pode-se sugerir que os taninos respondem, pelo menos em parte, pela atividade anti-inflamatória do EHDb. / Dilodendron bipinnatum Radlk. (Sapindaceae), popularly known as “mulher-pobre”, is a native tree of the Pantanal of Mato Grosso, Brazil. The inner stem bark of Dilodendron bipinnatum is used by the population, in the forms of decoction and maceration in the treatment of inflammatory conditions. There is no information in the literature demonstrating the anti-inflammatory activity of Dilodendron bipinnatum and its respective mechanism of action. This study aimed to evaluate the anti-inflammatory activity and mechanism of action of the hydroethanolic extract of the stem bark of Dilodendron bipinnatum (HEDb) using in vivo and in vitro experimental models. The stem bark of Dilodendron bipinnatum was macerated in 70% hydroethanolic solution (1:3, w/v) for 7 days, filtered, concentrated on a rotary evaporator and the residual solvent removed in oven at 40 ° C, thus obtaining HEDb. The effect of HEDb on cell viability in murine macrophages (RAW 264.7 cells) was assessed by the Alamar blue assay. The in vivo anti-inflammatory activity and mechanism of action of HEDb (20, 100 and 500 mg/kg) was evaluated in lipopolysaccharide (LPS) -induced peritonitis model in Swiss mice. The peritoneal lavage was collected for the determination of TNF-α, IL-1β and IL-10, using commercial ELISA kits. The in vitro anti-inflammatory studies activity of HEDb (1, 5 and 20 μg/ml) was determined in RAW 264.7 cells stimulated with LPS and/or INF-γ. The supernatant of the stimulated cells was used for the determination of the aforementioned cytokines as well as oxide nitric (NO) by the Griess method. The effect of HEDb on the gene expression of p38 and ERK 1/2 MAPKs and COX-2 was assessed using Western blot assay in RAW 264.7 cells stimulated with LPS. Preliminary phytochemical analysis of HEDb was analyzed by high performance liquid chromatography (HPLC). HEDb showed very low cytotoxicity with IC50>200 ± 0.38 μg/mL. In LPS-induced peritonitis model, HEDb reduced total leukocytes and neutrophils migration, at all doses, reaching maximum effect (45% and 64%, p<0.001 respectively) at 20 mg/kg in both cases. HEDb also attenuated increase in the concentrations of the pro-inflammatory cytokines (IL-1β and TNF-α) and increased level of anti-inflammatory cytokine IL-10 in peritonitis. HEDb had no demonstrable effect on the increased concentrations of TNF-α, IL-10 and NO in activated RAW 264.7 cells. HEDb caused in vitro inhibition of gene expression of MAPK p38 and COX-2. HPLC analyses identified some condensed and hydrolysable tannins, with epigallocatechin gallate being the major compound. HEDb presented a novel multitargeted anti-inflammatory action and mechanism, and low in vitro cytotoxicity. Its anti-inflammatory action was due, at least in part, to the inhibition of cell migration, Th1 type cytokines, expressions of p38 MAPK and COX-2, and to the stimulation of Th2 type cytokine, without affecting NO pathway. It can be suggested that tannins account at least in part to the anti-inflammatory activity of HEDb.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-27Bitstream added on 2014-06-13T19:56:21Z : No. of bitstreams: 1 loureiro_cmb_me_jabo.pdf: 193126 bytes, checksum: 7871454a59e8dd164e24e73028d35ee6 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Avaliou-se o efeito do extrato de própolis na redução da verminose e sobre os parâmetros hematológicos e bioquímicos de 18 cordeiros Ile de France (nove machos não-castrados e nove fêmeas) dos 5 aos 15 kg de peso corporal, no desmame. Os animais foram distribuídos em três tratamentos, constituídos por dietas isoprotéicas e isoenergéticas, com adição ao concentrado de 0, 15 e 30 mg de extrato de própolis a 11%/kg de peso corporal . O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado em esquema de parcela subdividida no tempo. Observou -se que a contagem de ovos por grama de fezes foi influenciada pelos diferentes tratament os. Nos cordeiros estudados, a ad ição de 30 mg de extrato de própolis foi mais efetiva em reduzir o número de ovos tipo Stron gylida por grama de fezes, do que a de 15 mg e a que não continha o extrato, indicando uma possível redução na ovoposição dos endoparasitos. As contagens globais de hemácias, neutrófilos bastonetes e monócitos, taxa de hemoglobina e o percentual de hematócrito apresentaram efeito para interação entre os tratamentos e as datas de observação. Não houve diferenças para as contagens de leucócitos, neutrófilos segmentados e linfócitos, já os eosinófilos variaram dentro do período de coleta. Em relação aos parâmetros bioquímicos analisados, o extrato de própolis não afetou as concentrações séricas de uréia, creatinina, albumina, bilirrubina direta e indireta, e plasmática de glicose. Já os níveis séricos d e colesterol, proteínas totais e bilirrubina total diferiram entre os tratamentos. Com base nos resultados, concluí-se que a adição de extrato de própolis às rações dos cordeiros não provocou alterações importantes nos parâmetros hematológicos e bioquímicos, que indicassem reações adversas à sua administração, além de ser uma possível alternativa no controle da verminose em cordeiros. / The effect of the propolis extract was evaluated in the reduction of the nematodes and on the hematological and bioch emical parameters of 18 lambs Ile of France (nine no-castrated males and nine females) of the 5 to the 15 kg of corporal weight, in it weans them. The animals were distributed in three treatments, constituted by protein and energy concentration diets, with addition to the concentrate of 0, 15 and 30 mg of propolis extract to 11%/kg of corporal weight. The experimental delineation was entirely occurred in portion outline subdivided in the time. It was observed that the counting of eggs for gram of feces was influenced by the different treatments. In the studied lambs, the addition of 30 mg of extract of propolis was more effective in reducing the number of eggs type Strongylida for gram of feces, than the one of 15 mg and the one that didn't contain the extra ct, indicating a possible reduction in the eggs of the endoparasites. The global countings of the red cells, neutrophiles and monocytes, hemoglobin tax and the percentile of hematocrits presented effect for interaction among the treatments and the dates fo r observation. There were not differences for the leucocytes countings, segmented neutrophiles and lymphocytes, whereas the eosinophiles varied inside of the collection period. In relation to the analyzed biochemical parameters, the extract of propolis did n't affect the serum urea, creatinine, albumin, direct and indirect, and plasmatic bilirubin concentration of glucose. The serum levels of cholesterol, total proteins and total bilirubin differed among the treatments. On base in the results, I was ended th at the addition of extract of propolis to the rations of the lambs didn't provoke important alterations in the hematological and biochemical parameters, that they indicated adverse reactions to his/her administration, besides being a possible alternative in the control of the nematodes in lambs.

Submitted by JOÃO EMMANUEL RIBEIRO GUIMARÃES null (extensao@feituverava.com.br) on 2016-08-02T19:17:30Z No. of bitstreams: 1 TESE FINAL.docx: 2614804 bytes, checksum: a139a52a90fe92755ccac9e4b609eb0c (MD5) / Rejected by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: A versão final da dissertação/tese deve ser submetida no formato PDF (Portable Document Format). O arquivo PDF não deve estar protegido e a dissertação/tese deve estar em um único arquivo, inclusive os apêndices e anexos, se houver. Por favor, corrija o formato do arquivo e realize uma nova submissão. Agradecemos a compreensão. on 2016-08-02T19:33:29Z (GMT) / Submitted by JOÃO EMMANUEL RIBEIRO GUIMARÃES (jerguimaraes@uol.com.br) on 2016-08-02T19:38:17Z No. of bitstreams: 1 TESE FINAL.pdf: 2357812 bytes, checksum: aa12a27f8cac4f4de61f6f2ccb80c925 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-08-03T17:17:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 guimaraes_jer_dr_jabo.pdf: 2357812 bytes, checksum: aa12a27f8cac4f4de61f6f2ccb80c925 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-03T17:17:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 guimaraes_jer_dr_jabo.pdf: 2357812 bytes, checksum: aa12a27f8cac4f4de61f6f2ccb80c925 (MD5) Previous issue date: 2016-07-01 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo do trabalho foi avaliar produtos alternativos, considerados naturais, como o extrato de própolis verde e óleos essenciais, no controle pós-colheita da antracnose em mangas ‘Palmer’. Foram extraídos dez óleos essenciais de plantas e avaliados, inicialmente, quanto ao potencial antifúngico contra o Colletotrichum gloeosporioides in vitro. Dentre os óleos testados, os de Thymus vulgaris, Cymbopogon citratus e Eucalyptus globulus foram selecionados pelos seus destacados efeitos inibitórios. Na etapa in vitro foram realizados quatro experimentos, em que foram testadas concentrações de extrato de própolis verde e dos óleos, utilizando seis repetições por tratamento. Na etapa in vivo, foram realizados quatro experimentos em que mangas ‘Palmer, foram imersas em cera associada a diferentes concentrações de extrato de própolis verde e dos três óleos essenciais selecionados na etapa anterior. Após a secagem e formação dos revestimentos, os frutos tratados com própolis foram armazenados 12 ºC por 12 dias e mais 3 dias em temperatura de ambiente (22± 2 ºC e 65± 5% UR), e os tratados com óleos essenciais por 14 dias sob refrigeração, e por mais 3 dias a temperatura de ambiente. Os resultados foram submetidos à análise de variância e o efeito dos tratamentos, quando significativo, por meio do Teste F. As médias foram comparadas pelo teste de Tukey (P≤0,05). O própolis verde a partir de 2%, o óleo de capim-limão a partir de 250 ppm e o de tomilho a partir de 10 ppm, se mostraram eficientes em controlar o crescimento do C. gloeosporioides in vitro. O óleo de eucalipto comum retardou, mas não inibiu o crescimento do C. gloeosporioides in vitro. Todos os óleos se mostraram eficientes em inibir a germinação de esporos de C. gloeosporioides. Os tratamentos com cera e cera associada aos óleos ou extrato de própolis reduziram o crescimento da lesão in vivo, sendo que a maior inibição (70%) do patógeno foi conseguida com o extrato de própolis verde na concentração de 2,5%. Todos os produtos testados se mostraram eficientes na manutenção da qualidade de frutos de mangas ‘Palmer’ inoculadas com C. gloeosporioides. / The objective was to evaluate alternative products, considered natural such as green propolis extract and essential oils, in the post-harvest control of anthracnose in 'Palmer' mangos. Ten essential oils from plants were extracted and evaluated, initially, for their potential as antifungal agents against Colletotrichum gloeosporioides in vitro. Among the oils tested, the Thymus vulgaris, Cymbopogon citratus and Eucalyptus globulus were selected for their outstanding inhibitory effects. In the in vitro stage four experiments were conducted, in which green propolis extract and oil concentrations were tested using six replicates per treatment. In the in vivo phase, four experiments were performed in which ‘Palmer’ mangos were dipped in wax associated with different concentrations of green propolis extract and the three essential oils selected in the previous step. After the drying process and formation of coatings, the fruits treated with propolis were stored at 12°C for 12 days and then another 3 days at room temperature (22 ± 2°C and 65 ± 5% RH), and those treated with essential oils were stored for 14 days under refrigeration and for 3 days at room temperature. The results were subjected to variance analysis and a review of the effect of treatments, when significant, by test F. Means were compared by Tukey test (p ≤ 0.05). The green propolis from 2%, lemongrass oil from 250 ppm and thyme from 10 ppm were effective in controlling the growth of C. gloeosporioides in vitro. Common eucalyptus oil was inhibited, but it did not inhibit the growth in vitro of C. gloeosporioides. The procedures with wax and associated wax with oil or propolis extract reduced the growth in vivo of the injury, and the greater inhibition (70%) of the pathogen was achieved with green propolis extract at 2,5% concentration. All products tested have proven effective in maintaining fruit quality of 'Palmer' mangos inoculated with C. gloeosporioides. / FAPESP: 2013/10397-5

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:01:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JosefaABR_DISSERT.pdf: 824111 bytes, checksum: d30d54c9e635df7322649f582f4c2e81 (MD5) Previous issue date: 2010-09-17 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Cellulolytic enzymatic broth by Trichoderma reesei ATCC 2768 cultived in shaker using cashew apple bagasse and coconut shell bagasse, as substrate for fermentation, was used to investigate the enzymatic hydrolysis of these substrates after pre-treatment with 1 M NaOH, wet-oxidation as well as a combination of these treatments. Hydrolysis runs were carried at 125 rpm, 50?C and initial pH of 4.8 for 108 hours. Enzymatic broth produced using cashew apple bagasse treated with 1M NaOH (1.337 UI/mL CMCase and 0.074 UI/mL FPase), showed after the hydrolysis an initial of 0.094 g of reducing sugar/g of substrate.h with 96% yield of total reducing sugars while for the coconut shell bagasse treated using the alkaline process (0.640 UI/mL CMCase and 0.070 UI/mL FPase) exhibited an initial hydrolysis velocity of 0.025 g of reducing sugar/g of substrate.h with 48% yield of total reducing sugars. For the treatment with wet-oxidation using cashew apple bagasse as substrate enzymatic broth (0.547 UI/mL CMCase) exhibited an initial hydrolysis velocity of 0.014 g of reducing sugars/g of substrate.h with a lower yield about 89% of total reducing sugars compared to the alkaline treatment. Enzymatic broth produced using coconut shell treated by wet-oxidation showed an initial hydrolysis velocity of 0.029 g of reducing sugar/g of substrate.h with 91% yield. However, when the combination of these two treatments were used it was obtained an enzymatic broth of 1.154 UI/mL CMCase and 0.107 FPase for the cashew apple bagasse as well as 0.538 UI/mL CMCase and 0,013 UI/mL de FPase for the coconut shell bagasse. After hydrolysis, initial velocity was 0.029 g of reducing sugar/g of substrate.h. with 94% yield for the cashew apple bagasse and 0.018 g de reducing sugar/g of substrate.h with 69% yield for coconut shell bagasse. Preliminary treatment improves residues digestibility showing good yields after hydrolysis. In this case, cellulose from the residue can be converted into glucose by cellulolytic enzymes that can be used for ethanol production / Extrato enzim?tico celulol?tico produzido por Trichoderma reesei ATCC 2768 cultivado em incubador rotativo, utilizando-se baga?os de ped?nculo de caju e de casca de coco como substrato, foi utilizado para estudar o processo de hidr?lise enzim?tica dos mesmos res?duos, baga?o do ped?nculo de caju e baga?o de coco, quando esses materiais foram pr?-tratados alcalinamente (com NaOH 1M) e por oxida??o ?mida, e combinando-se esses dois pr?-tratamentos. Os ensaios de hidr?lise foram realizados em condi??es de 125 rpm, 50?C e pH inicial 4,8 durante 108 horas. O extrato produzido utilizando como substrato baga?o de caju tratado alcalinamente (1,337 UI/mL de CMCase e 0,074 UI/mL de FPase), quando utilizado nos ensaios de hidr?lise, apresentou uma velocidade inicial de hidr?lise de 0,094 g de AR/g de substrato.h e rendimento de hidr?lise de 96% de a??cares redutores totais (ART s), enquanto que para o extrato obtido utilizando-se baga?o de coco tratado com NaOH 1M (0,640 UI/mL de CMCase e 0,070 UI/mL de FPase) obteve-se uma velocidade inicial de hidr?lise de 0,025 g de AR/g de substrato.h e um rendimento de 48% de a??cares redutores totais (ART s). No caso dos baga?os tratados por oxida??o ?mida, verificou-se que o caldo enzim?tico obtido utilizando como substrato ped?nculo de caju (0,547 UI/mL de CMCase) apresentou uma velocidade inicial de hidr?lise de 0,014 g de AR/g de substrato.h e um menor rendimento 89% de ART s, quando comparado com o m?todo alcalino. O baga?o de coco tratado por oxida??o ?mida (1,147 UI/mL de CMCase e 0,071 de FPase) apresentou uma velocidade inicial de hidr?lise de 0,029 g de AR/g de substrato.h e um rendimento de hidr?lise de 91% de a??cares redutores totais (ART s). Entretanto, quando se utilizou os baga?os ped?nculo de caju e casca de coco, submetidos aos dois pr?-tratamentos combinados obteve-se um caldo enzim?tico para o ped?nculo de caju com atividades de (1,154 UI/mL de CMCase e 0,107 de FPase) e para a casca de coco um extrato enzim?tico com atividades de (0,538 UI/mL de CMCase e 0,013 UI/mL de FPase). Ao se utilizar estes extratos enzim?ticos nos processos de hidr?lise obteve-se para o ped?nculo de caju uma velocidade inicial de 0,029 g de AR/g de substrato.h. e um rendimento de 94% de a??cares redutores totais (ART s). Para o baga?o de casca de coco obteve-se uma velocidade de hidr?lise de 0,018 g de AR/g de substrato.h e um rendimento de 69% de a??cares redutores totais (ART s). Dessa forma, conclui-se que o tratamento preliminar melhora a digestibilidade dos res?duos onde a celulose presente no substrato converte-se em a??car fermentesc?vel com a a??o da enzima, sendo importante para uma posterior fermenta??o alco?lica

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Background: Seasonal allergic rhinoconjunctivitis or hay fever is caused due to the sensitization to pollen allergens, usually from grasses. Lolium multiflorum (Lm) is one of the most important grass pollen allergens in Southern Brazil. Objectives: To evaluate three different pollen extraction methods and to analyze IgE, IgG1 and IgG4 responses to Lm pollen antigens in pollinosis patients. Methods: Three different Lm pollen extracts were prepared (LmPBS extract, Lme-PBS extract and LmNH4HCO3 extract) and analyzed in 13.5% SDS-PAGE. Serum samples from 62 patients with seasonal allergic rhinoconjunctivitis and/or asthma (Lm+ group), 30 patients with perennial allergy rhinitis (Lm- group) and 30 non-atopic subjects (NA) were tested for IgE reactivity to three Lm extracts by ELISA. Lm-specific IgG1 and IgG4 antibodies were also evaluated by using LmPBS extract only in ELISA. Results: By SDS-PAGE, the three extracts were very similar, showing bands ranging from 20 to 100 kDa. By ELISA-IgE, the results revealed higher IgE levels in pollinosis patients when LmPBS extract was used. LmPBS extract was chosen to evaluate the IgE, IgG1 and IgG4 responses and their levels were higher in the Lm+ patients when compared to Lm and NA groups. In the Lm+ group, IgE (EI = 17.6) levels were higher than IgG1 (EI = 2.6) and IgG4 (EI = 3.6) levels, while in other groups there were not any differences in the antibody levels. Conclusions: LmPBS extract was effective in detecting IgE, IgG1 and IgG4 responses to Lolium multiflorum pollen antigens. These antibody classes are in a higher level in pollinosis patients when compared to non-sensitized subjects. Lm allergen extracts for in vivo and in vitro using should be standardized. / Introdução: A rinite alérgica estacional ou doença polínica se deve à sensibilização aos alérgenos de pólens, geralmente de gramíneas. Lolium multiflorum (Lm) é uma gramínea com pólens de elevado potencial alergênico, sendo a principal gramínea causadora de polinose na região Sul do Brasil. Objetivos: Analisar três diferentes métodos de extração antigênica pela reatividade IgE de cada extrato e as respostas anticórpicas IgE, IgG1 e IgG4 específicas aos antígenos de pólen de Lm. Material e Métodos: Três extratos de pólen de Lm foram preparados (extratos LmPBS, Lme- PBS e LmNH4HCO3) e analisados por SDS-PAGE a 13,5%. Amostras de soro de 62 pacientes com rinite alérgica sazonal e/ou asma brônquica (grupo Lm+), 30 pacientes com rinite alérgica perene (grupo Lm-) e 30 indivíduos não-atópicos (grupo NA) foram testadas para a reatividade IgE frente aos três extratos por ELISA. Anticorpos IgG1 e IgG4 específicos a Lm foram avaliados empregando-se somente o extrato LmPBS, por ELISA. Resultados: O perfil protéico dos extratos foi muito semelhante por SDS-PAGE, apresentando bandas protéicas de 20 a100 kDa. Níveis de IgE foram maiores em pacientes com polinose ao se utilizar o extrato LmPBS. O extrato LmPBS foi utilizado para avaliar os níveis de IgE, IgG1 e IgG4, que foram maiores nos pacientes com polinose que em pacientes Lm- e indivíduos NA. No grupo Lm+, os níveis médios de IgE (IE = 17,6) foram maiores que os níveis de IgG1 (IE = 2,6) e IgG4 (IE = 3,6) (p < 0,001). Conclusões: O extrato LmPBS foi eficiente em detectar as respostas IgE, IgG1 e IgG4 a antígenos de pólen de Lm. Essas classes de anticorpos estão em níveis maiores em pacientes com polinose. Extratos antigênicos de Lm para uso in vivo e in vitro devem ser padronizados. / Mestre em Imunologia e Parasitologia Aplicadas

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-12-02Bitstream added on 2014-06-13T21:00:09Z : No. of bitstreams: 1 silva_mf_me_ilha.pdf: 503783 bytes, checksum: bbb9bd24eb36123d7fea9c4f63053199 (MD5) / Plantas apresentam grande diversidade de compostos orgânicos que podem ter ação antifúngica. O objetivo deste estudo foi determinar a atividade antifúngica in vitro e in vivo de extratos de pacari e melão-de-são-caetano sobre o crescimento micelial e a germinação de esporos de Colletotrichum musae. Avaliou-se, também o efeito dos extratos no desenvolvimento de lesões de antracnose em bananas, da variedade Nanicão, sob condições de laboratório e a campo. Os extratos foram obtidos a partir de plantas secas ao sol e em estufa com circulação forçada de ar, moídas, utilizando-se como agente extrator a água ou álcool etílico. Somente o fungicida proporcionaram 100% de inibição do crescimento micelial e da germinação de esporos e o extrato de melão-de-são-caetano hidroetanólico, seco so sol, incorporado a 50% em BDA, proporcionaram 100% de inibição da germinação de esporos. Os extratos de pacari aquoso não diluído proporcionaram as menores percentagens de lesões de antracnose nos frutos. Os extratos hidroetanólicos de pacari retardaram a maturação dos frutos em quatro-cinco dias em relação a testemunha. As propriedades antifúngicas dos extratos de pacari e melão-de-são-caetano detectadas em nosso estudo evidenciaram o uso potencial dos mesmos como uma alternativa aos métodos adotados para o controle da antracnose em banana. / Plants present a high diversity of organic compounds that can have antifungal activity. The objective of this study was to determine the in vitro and in vivo antifungal activity of pacari and bitter melon extracts on the mycelial growth and spores germination of Colletotrichum musae. We also aimed to evaluate the effect of these two extracts in the development of anthracnose lesions on bananas variety Nanicão, under laboratory and field conditions. The extracts were obtained by grinding sun- or stews with forced circulation of air plant tissues, using water or ethylic alcohol as extractors. Only the fungicide check inhibited 100% of the mycelial growth and the spores germination, and of bitter melon hydro-ethanolic extracts incorporated at 50% in PDA inhibited 100% of the spores germination. The non-diluted aqueous extracts of pacari provided the lowest percentages of anthracnose lesions on banana fruits. The hydro-ethanolic extract of pacari delayed the maturation of the fruits in at least four to five days in relation to the non-treated checks. The antifungal properties of the pacari and bitter melon extracts detected in our study evidenced their potential use as alternative to the methods commonly adopted for controlling banana anthracnose.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A produÃÃo de enzimas por fermentaÃÃo semi-sÃlida (FSS) à influenciada por diversos fatores de cultivo que afetam o crescimento microbiano e a produÃÃo de metabÃlitos. O estudo de fatores como aeraÃÃo e umidade do ar torna-se indispensÃvel para a otimizaÃÃo deste bioprocesso. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a produÃÃo de protease pelo fungo Aspergillus oryzae CCBP001 por FSS em biorreator de colunas. A FSS para a produÃÃo de protease utilizando o fungo filamentoso A. oryzae CCBP 001 ocorreu em condiÃÃes dinÃmica e estÃtica, visando observar o mÃtodo que apresentou a maior produÃÃo. Para tanto foram testados os resÃduos agroindustriais: torta de canola, torta de girassol, farelo de trigo, pelÃcula da amÃndoa de caju e farelo de algodÃo como substrato, observando o perfil de produÃÃo em funÃÃo de diferentes atividades de Ãgua (Aw) iniciais obtidas pela adiÃÃo de distintos volumes de Ãgua para umidificaÃÃo. A produÃÃo de protease em reator de colunas nas condiÃÃes otimizadas foi comparada com a produÃÃo em Erlenmeyer, durante dez dias. Foram avaliados procedimentos para recuperar, identificar, concentrar, e estocar o extrato enzimÃtico produzido. Para a concentraÃÃo do extrato enzimÃtico produzido realizou-se estudo de secagem em âspray dryerâ e acompanhou-se o tempo de estocagem do extrato seco durante 90 dias. Com os resultados foi possÃvel selecionar a torta de canola como o substrato onde apresentou uma produÃÃo 33% superior aos demais substratos testados. No estudo das condiÃÃes operacionais em reator de colunas foi possÃvel avaliar a influÃncia da vazÃo do ar, umidade relativa do ar e umidade do substrato na produÃÃo de protease. A utilizaÃÃo de glicose, maltodextrina e carboximetilcelulose como adjuvantes se mostraram eficientes com relaÃÃo à manutenÃÃo da atividade de protease durante o processo de secagem utilizando âspray dryerâ, onde foi possÃvel obter um produto seco com baixos valores de umidade e Aw, importante para o processo de estocagem do extrato enzimÃtico. A secagem por atomizaÃÃo do extrato enzimÃtico possibilitou concentrar e estocar a enzima. / Enzyme production by solid state fermentation (SSF) is influenced by several factors that affect crop growth and production of microbial metabolites. The study of factors such as aeration and moisture in the air becomes indispensable for this bioprocess optimization. In this context, the present study aimed to assess the protease production by Aspergillus oryzae CCBP001 by FSS bioreactor columns. The FSS for the production of protease using the filamentous fungus A. oryzae CCBP 001 occurred in dynamic and static conditions in order to observe the method with the highest production. Therefore, tested the agroindustrial waste: canola cake, sunflower cake, wheat bran, almond cashew film and cottonseed meal as substrate, observing the production profile for different water activity (Aw) obtained by initial adding different volumes of water for humidification. Protease production in reactor columns in the optimized conditions was compared to production in flasks for 10 days. Evaluated procedures to recover, identify, focus and store the enzyme extract produced. For the concentration of the enzyme extract produced a study was conducted in dry "spray dryer" and followed up the storage time of the dry extract for 90 days. From the results it was possible to select the canola cake as the substrate where it presented a production 33% higher than the other substrates tested. In the study of operating conditions in reactor columns was possible to evaluate the influence of air flow, air humidity and substrate moisture in protease production. The use of glucose, maltodextrin and carboxymethylcellulose as adjuvants proved to be efficient with regard to maintenance of protease activity during the drying process using a "spray dryer", where it was possible to obtain a dry product with low values of humidity and Aw important for the storage process of enzyme extract. Spray drying of the enzyme extract and concentrate stockpile allowed the enzyme.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / As exigÃncias dos consumidores por uma alimentaÃÃo mais saudÃvel sÃo cada vez maiores, o que tem levado a indÃstria a investir de forma mais persistente no uso de produtos naturais. Um dos segmentos de investimento de destacada importÃncia, à o de substÃncias naturais que atuem como pigmentos, em substituiÃÃo aos corantes artificiais. Devido à alta instabilidade destas substÃncias, diversas pesquisas tÃm buscado determinar condiÃÃes favorÃveis para seu uso. Dentre as substÃncias estudadas tem-se a bixina, um pigmento natural, carotenoide, lipossolÃvel, extraÃdo da semente do urucuzeiro (Bixa orellana L.). A maioria dos carotenÃides à sensÃvel a fatores como alta temperatura, luz, oxigÃnio e baixo pH, o que restringe o seu emprego como pigmento em alguns produtos alimentÃcios. O uso da nanoencapsulaÃÃo tem sido uma alternativa para melhorar a estabilidade de pigmentos como a bixina, tornando possÃvel sua incorporaÃÃo em sistemas alimentÃcios sem a perda de suas propriedades. Considerando o exposto, o presente trabalho teve por objetivo obter, caracterizar e avaliar a estabilidade de nanocÃpsulas contendo extrato do urucum, empregando a goma do cajueiro como material de parede. Para a obtenÃÃo das nanocÃpsulas foram realizadas as etapas de preparo da emulsÃo e atomizaÃÃo. As nanocÃpsulas obtidas foram caracterizadas e apresentaram tamanho mÃdio de 24,17 nm + 3,71, com distribuiÃÃo por volume de 97,33% + 2,08, o que demonstrou considerado grau de homogeneidade de tamanho. A solubilidade das nanocÃpsulas foi de 74,13% + 3,68 e a eficiÃncia alcanÃada no processo de nanoencapsulaÃÃo foi de 44,74% + 4,38. Os testes de estabilidade das nanocÃpsulas foram feitos armazenando-as em condiÃÃes de ausÃncia e presenÃa de luz. A cada dez dias, durante quarenta dias, fez-se a determinaÃÃo das coordenadas colorimÃtricas a*, b*, L*, C* e Ãngulo Hue e as determinaÃÃes dos teores de bixina total e bixina superficial. A bixina total teve uma reduÃÃo de 78,48% para as nanocÃpsulas expostas à luz, enquanto que na condiÃÃo de ausÃncia de luz essa reduÃÃo foi de apenas 41,88%. Os valores de bixina superficial, ou nÃo encapsulada, oscilaram de 27,64 mg/100g a 8,65 mg/100g, para amostras submetidas à luz, e de 27,64 mg/100g + 2,13 a 16,45 mg/100g + 0,80 para amostras armazenadas na ausÃncia de luz. As nanocÃpsulas mostraram maior estabilidade quando armazenadas ao abrigo da luz, comprovando o efeito deletÃrio da luz ao extrato de urucum e, portanto, a nÃo total proteÃÃo da goma de cajueiro como material de parede. TambÃm foram verificadas nesta pesquisa as atividades antioxidante (utilizando-se o sistema &#946;-caroteno/Ãcido LinolÃico) e antimicrobiana (pelo mÃtodo de disco-difusÃo) das nanocÃpsulas contendo extrato do urucum. Em relaÃÃo à atividade antioxidante, obteve-se percentual mÃdio de inibiÃÃo da oxidaÃÃo do &#946;-caroteno correspondente a 61,90%, 54,576% e 51,73%, para os extratos contendo concentraÃÃes de nanocÃpsulas de 40 mg/L, 30 mg/L e 20 mg/L. Os resultados obtidos sugerem atividade antimicrobiana das nanocÃpsulas, com formaÃÃo de halo de inibiÃÃo frente ao Staphylococcus aureus utilizando-se as concentraÃÃes de 1 mg/L, 2 mg/L e 10 mg/L, porÃm nÃo foi observada a formaÃÃo de halos de inibiÃÃo para os microrganismos Escherichia coli e Salmonella choleraesuis. Neste estudo as nanocÃpsulas contendo o extrato do urucum foram aplicadas em sistema modelo (soluÃÃo-tampÃo) e em um sistema alimentÃcio (iogurte). A estabilidade desses sistemas foi medida atravÃs dos parÃmetros colorimÃtricos, a cada cinco dias, durante 40 dias. Observou-se que o sistema modelo pode ter promovido estabilidade Ãs nanocÃpsulas, conservando seus nÃcleos. Quando aplicadas em iogurte as nanocÃpsulas conferiram a este alimento uma coloraÃÃo amarelo/alaranjado e durante o perÃodo de armazenamento houve reduÃÃo dos valores de a* e aumento dos parÃmetros b* e C*. / Consumers demands for healthier eating are increasing, which has led the industry to invest more persistent in the use of natural products. One of more relevant segment is natural substances acting as pigments, replacing the artificial coloring. Due his high instability, several researches have been directed to determine favorable conditions of use of these substances. Among the compounds studied we have bixin, a natural pigment, carotenoid, lipid-soluble annatto seed extract (Bixa orellana L.). Most carotenoids are sensitive to factors such as high temperature, light, oxygen and low pH, which restricts its use as a pigment in some food products. The use of nanoencapsulation has been an alternative for improving the stability of pigments such as bixin, making possible its incorporation into food systems without loss of its qualities. Considering that, the present study aimed to obtain, characterize and assess the stability of nanocapsules containing annatto extract, employing the cashew gum as wall material. To obtain these nanocapsules were performed steps of preparation of the emulsion and spray drying. The nanocapsules were characterized and showed a average size of 24.17nm + 3.71 with distribution by volume of 97.33% + 2.08, demonstrating high degree of homogeneity in size. The solubility of the nanocapsules was 74.13% + 3.68 and the efficiency achieved in the process of nanoencapsulation was 44.74% + 4.38. Stability tests were made with nanocapsules storing them in conditions of absence and presence of light. During ten days, for forty days, was made the determination of colorimetric coordinates a*, b*, L*, C*, Hue angle and the determinations of the levels of total bixin and superficial bixin. The total bixin had a reduction of 78,48% for the nanocapsules exposed to light, while in condition of absence of light the reduction was only 41.88%. The values &#8203;&#8203;of surperficial bixin or unencapsulated, ranged from 27.64 mg/100g to 8.65 mg/100g, for samples subjected to light, and from 27,64 mg/100g + 2,13 a 16,45 mg/100g + 0,80 for samples stored in absense of light. The nanocapsules showed greater stability when stored away from light, confirming the deleterious light effect in annatto extract and therefore not full protection of cashew gum as wall material. Were also found in this study the antioxidant activities (using the system &#946;-caroteno/ acid linoleic) and antimicrobial (by disk diffusion) of nanocapsules containing annatto extract. In relation to the antioxidant activity (inhibition of the oxidation of &#946;-carotene) was obtained average perceptual corresponding to 61.90%, 54.576%, and 51.73% for containing extracts of nanocapsule concentration of 40 mg/L, 30 mg/L and 20 mg/L. The results suggests antimicrobial activity of the nanocapsules, making an inhibition zone against Staphylococcus aureus using concentrations of 1 mg/L, 2 mg/L and 10 mg/L, however there was observed the formation of inhibition zones for Escherichia coli and Salmonella choleraesuis. In this study, nanocapsules containing annatto extract were applied to the model system (buffer) and food system (yogurt). The stability of these systems was measured using the colorimetric parameters, during five days, for 40 days. It was observed that the system model may have promoted the nanocapsule stability, retaining their nucleus. When applied in yoghurt gave the nanocapsules to this food yellow / orange coloration and during the storage period was reduced values &#8203;&#8203;of a* and increased b* and C* parameters.

Este trabalho apresenta o desenvolvimento de uma metodologia experimental visando à produção de extrato seco padronizado de Bauhinia forficata Link. Um planejamento experimental de três fatores e três níveis tipo Box-Behnken e análise multi-resposta foram empregados na otimização do processo de extração. Dois processos distintos de secagem foram investigados: o processo leito de jorro e a secagem por nebulização (ou spray-drying). O objetivo foi avaliar a viabilidade e desempenho de ambos secadores para a produção de extrato seco. As variáveis estudadas foram a razão percentual entre a vazão mássica da solução extrativa alimentada ao sistema pela capacidade de evaporação, (Ws/Wmáx), a temperatura de entrada do gás de secagem, (Tge), a posição do sistema de atomização no leito de jorro (top spray e bottom spray) e a vazão do gás de secagem utilizada no spray-dryer, (Wg). O desempenho operacional dos secadores foi avaliado principalmente através da produtividade, da eficiência térmica do processo, da taxa de evaporação volumétrica, da razão entre a massa de ar usada/massa de água evaporada e da taxa de recuperação do produto. O produto seco foi caracterizado quanto a distribuição granulométrica, morfologia das partículas, teor de umidade residual, taxa de degradação dos flavonóides (marcadores químicos) e características farmacotécnicas. Os resultados reportados mostram que o leito de jorro apresentou significativa superioridade em todos os parâmetros estudados em relação ao processo spray-dryer, para as configurações e condições operacionais investigadas. Isso permite concluir que o secador de leito de jorro é uma alternativa tecnologicamente viável para a produção de extratos secos de plantas medicinais brasileiras apresentando maior eficiência e produtividade, fornecendo um produto de alta qualidade e valor comercial. / This work presents the development of an experimental methodology aiming to the production of standardized dried extracts of Bauhinia forficata Link. An experimental planning of three factors and three levels type Box-Behnken and multi-response analysis were used in the optimization of the extraction process. Two different drying processes were studied: the spouted bed and the spraydrying processes. The objective was the evaluation of the viability and of the performance of both dryers for the production of dry extract. The investigated parameters were the percentile ratio between the mass feed flow rate of extractive solution to the system by the evaporation capacity of the dryer, (Ws/Wmáx), the inlet temperature of the drying gas, (Tge), the position of the atomization system in the spouted bed (top spray and bottom spray) and the mass flow rate of the drying gas used in the spray-dryer, (Wg). The operational performance of the dryers was evaluated mainly by the productivity, thermal efficiency of the process, rate of volumetric evaporation, ratio between the mass of air used by the mass of evaporated water and by the product recovery rate. The dried product was characterized by the particle size distribution, particles morphology, moisture content, flavonoid degradation rate (chemical marker), and by evaluation of pharmacotechnical properties. The results reported show that the spouted bed process presented a significant superiority in all parameters evaluated relative to the spray-drying process, for the configurations and operational conditions investigated. These results lead to the conclusion that the spouted bed process is an alternative technologically viable for the production of dry extracts of medicinal Brazilian plants, presenting high thermal efficiency and productivity, yielding a product of high quality and commercial value.