Resumo não disponível.

O objetivo deste trabalho foi avaliar, in vitro, os efeitos de diferentes concentrações do fator de crescimento transformador beta 1 (TGF-β1) em células-tronco derivadas da polpa de dentes decíduos esfoliados humanos (SHED), com relação à viabilidade, proliferação, migração e diferenciação celular. As SHED foram mantidas em meio de cultura MEMα + soro fetal bovino (FBS) 10% + penicilina e estreptomicina 1% e tratadas com TGF-β1 na concentração de 1,0; 5,0 e 10,0 ng/mL. Após 1, 3, 5 e 7 dias, foram avaliadas a viabilidade celular pelo método MTT e a proliferação pelo método SRB. Após 24 h de tratamento com TGF-β1, foi realizado um ensaio de migração celular por meio de insertos com poros de 8 μm. Para a avaliação da diferenciação celular de SHED em odontoblastos foram analisados por meio da RT-PCR os marcadores DSPP e DMP-1, após tratamento com TGF-β1 nas diferentes concentrações por 14 dias. Os resultados foram submetidos à ANOVA seguido do teste de Tukey. Em relação à viabilidade celular, as diferentes concentrações de TGF-β1 não tiveram efeito citotóxico sobre SHED. As células tratadas com diferentes concentrações de TGF-β1 apresentaram maiores taxas de proliferação que as do controle negativo (MEMα + 10% de FBS) a partir do 3o dia (p=0,000). Observou-se maiores taxas de migração em direção aos meios contendo TGF-β1, mas sem diferença estatisticamente significativa entre as diferentes concentrações utilizadas, entretanto, houve diferença estatisticamente significativa entre as diferentes concentrações de TGF-β1 com o controle positivo (p=0,000), controle negativo (p=0,000) e entre o controle positivo e negativo (p=0,002). A expressão de DMP-1 foi observada de forma crescente nas doses de 1,0 e 5,0 ng/mL de TGF-β1 ao longo do período (1, 7 e 14 dias) e na dose de 10,0 ng/mL a marcação foi mais intensa desde o primeiro dia do estímulo. Em relação à expressão de DSPP, o grupo tratado com 10,0 ng/mL apresentou marcação após 14 dias de tratamento. Sendo assim, este estudo permite concluir que as diferentes concentrações de TGF-β1 estimularam a proliferação e migração celular, sem efeito citotóxico sobre as células ao longo do período do estudo. Em relação à diferenciação celular a concentração 10,0 ng/mL de TGF-β1 estimulou à expressão de DMP-1 e DSPP. / The aim of this study was to evaluate, in vitro, the effect of transforming growth factor beta 1 (TGF-β1) in stem cells derived from the pulp of human exfoliated deciduous teeth (SHED) regarding to cell viability, proliferation, migration and differentiation. SHED were maintained in MEMα culture medium + 10% fetal bovine serum (FBS) + 1% penicillin and streptomycin, and treated with TGF-β1 at the following concentrations of 1.0; 5.0 and 10.0 ng/mL. After 1, 3, 5 and 7 days, cell viability was assessed by MTT assay and proliferation by the SRB method. After 24h of TGF-β1 treatment, cell migration assay was carried out using inserts of 8 μm pore size. To evaluate SHED differentiation into odontoblasts, DMP-1 and DSPP markers were analyzed by RT-PCR, after treatment at different concentrations of TGF-β1 for 14 days. The results were submitted by ANOVA and Tukey test. With respect to cell viability, the different TGF-β1 concentrations did not have cytotoxic effect on SHED. The cells treated by different TGF-β1 concentrations showed higher proliferation rates than those of the negative control (MEMα + 10% FBS) after the third day (p = 0.000). Higher rates of migration towards the media containing TGF-β1 were observed, but there were no statistically significant differences among the concentrations. All different TGF-β1 concentrations showed statistically significant differences with the positive control (p=0.000) and negative control (p=0.000). Statistically significant differences were observed between positive and negative control (p=0.002). DMP-1 expression was observed incrementally at TGF-β1 concentrations of 1.0 and 5.0 ng/mL at 1, 7, and 14 days and the concentration of 10.0 ng/mL was more intense from day one of the stimulus. DSPP expression was more intense after 14 days of treatment with the concentration of 10.0 ng/mL. Thus, this study concluded that different TGF-β1 concentrations stimulated cell proliferation and migration, without cytotoxic effect on the cells throughout the study period. From the perspective of cell differentiation, TGF-β1 concentration of 10.0 ng/mL was capable of stimulating DMP-1 and DSPP expression.

O Tranforming Growth Factor-d (TGF-^) é uma citocina cuja principal ação é a de estimular a síntese de matriz extra-celular por diversos tipos celulares. A nefropatia diabética caracteriza-se pelo acúmulo de matriz extra-celular no glomérulo, especialmente ao nível da região mesangial. Estudos recentes têm demonstrado que o TGF-fy é produzido no glomérulo de modelos experimentais de ratos com diabete mélito de início recente, mas o seu papel na patogênese e na evolução da glomerulosclerose diabética não está totalmente estabelecido. O objetivo do presente trabalho foi o de investigar a produção e a distribuição do polipeptídio do TGF-fc-, no rim de ratos durante a evolução da nefropatia diabética experimental e as possíveis correlações entre a produção deste polipeptídio e a glomerulosclerose diabética. Foi avaliada a distribuição intra-renal do polipeptídio do TGF-^ através de imunohistoquímica e a sua produção renal através dos níveis de mRNA-TGF-li-, no córtex e no glomérulo de ratos Wistar com diabete mélito induzido pela estreptozotocina antes e após o início da nefropatia diabética. Estudou-se ainda, seriadamente, a excreção urinária de albumina, a taxa de filtração glomerular, a medida do volume glomerular, lrnunohistoquímica para colágeno tipo I e a histologia renal com coloração para colágeno total. Os resultados mostraram a presença de marcada reação 'rnunohistoquímica para TGF-G^, sendo que esta foi progressivamente ^ais intensa nos glomérulos de ratos com 24 e 40 semanas de diabetes a qual se correlacionou com a albuminúria (r=0.905, p<0.01). e associou-se temporalmente à presença de colágeno total e tipo I nos glomérulos. O conteúdo glomerular de mRNA-TGF-^ foi maior em ratos diabéticos 20 semanas após o início da hiperglicemia, enquanto que o 'TiRNA-TGF-(i1 no córtex foi 30% menor nestes ratos, quando comparado a seus respectivos controles de 1 semana (p<0.01), 8 e 40 semanas (p<0.05). Estes dados sugerem que o polipeptídio TGF-R., Possa ter um papel importante na patogênese da glomerulosclerose diabética. / TGF-U-, (Transforming Growth Factor-íli) is a citokine which has been demonstrated to increase extra-cellular matrix synthesis by many cells. Diabetic nephropathy is essentially characterized by extra-cellular matrix deposition in mesangial region. Recent studies have shown that the polypeptide TGF-li1 is produced in glomeruli of experimental models of rats with untreated diabetes mellitus of recent onset, but its role in the genesis of diabetic glomerulosclerosis has not been stablished. The aim of the present study was to investigate the production and distribution of TGF-ft., peptide in the kidney of rats during the evolution of experimental diabetic nephropathy and to evaluate the possible relationship of TGF-&, peptide and diabetic glomerulosclerosis. We evaluated the intrarenal distribution of TGF-fy polypeptide and the mRNA-TGF-Rilevels 'n glomeruli and renal cortex in Wistar rats with streptozotocin-induced diabetes before and after the onset of diabetic nephropathy. Serial urinary albumin excretion, glomerular filtration rate, glomerular volume, renal histology with total collagen staining and immunohistochemical reaction for type I collagen were also studied. The results showed progressively higher glomerular immunohistochemical reaction for TGF-G.-, staining in the rats with diabetes of 24 and 40 weeks duration. It was correlated with albuminuria (r=0.905, p<0,01) and was temporally associated with the appearance of glomerular deposition of total and type I collagen. Glomerular content of 10 TGF-fc-, mRNA was increased in diabetic rats 20 weeks after injection, while cortical TGF-I^ mRNA levei was about 30% lower in diabetic rats when compared with time-paired controis at 1 week (p<0.01)I 8 and 40 weeks (p<0.05). These data suggest that TGF-&, is an important mediator of diabetic glomerulosclerosis.

O objetivo deste trabalho foi avaliar, in vitro, os efeitos de diferentes concentrações do fator de crescimento transformador beta 1 (TGF-&#x3B2;1) em células-tronco derivadas da polpa de dentes decíduos esfoliados humanos (SHED), com relação à viabilidade, proliferação, migração e diferenciação celular. As SHED foram mantidas em meio de cultura MEM&#x3B1; + soro fetal bovino (FBS) 10% + penicilina e estreptomicina 1% e tratadas com TGF-&#x3B2;1 na concentração de 1,0; 5,0 e 10,0 ng/mL. Após 1, 3, 5 e 7 dias, foram avaliadas a viabilidade celular pelo método MTT e a proliferação pelo método SRB. Após 24 h de tratamento com TGF-&#x3B2;1, foi realizado um ensaio de migração celular por meio de insertos com poros de 8 &#x3BC;m. Para a avaliação da diferenciação celular de SHED em odontoblastos foram analisados por meio da RT-PCR os marcadores DSPP e DMP-1, após tratamento com TGF-&#x3B2;1 nas diferentes concentrações por 14 dias. Os resultados foram submetidos à ANOVA seguido do teste de Tukey. Em relação à viabilidade celular, as diferentes concentrações de TGF-&#x3B2;1 não tiveram efeito citotóxico sobre SHED. As células tratadas com diferentes concentrações de TGF-&#x3B2;1 apresentaram maiores taxas de proliferação que as do controle negativo (MEM&#x3B1; + 10% de FBS) a partir do 3o dia (p=0,000). Observou-se maiores taxas de migração em direção aos meios contendo TGF-&#x3B2;1, mas sem diferença estatisticamente significativa entre as diferentes concentrações utilizadas, entretanto, houve diferença estatisticamente significativa entre as diferentes concentrações de TGF-&#x3B2;1 com o controle positivo (p=0,000), controle negativo (p=0,000) e entre o controle positivo e negativo (p=0,002). A expressão de DMP-1 foi observada de forma crescente nas doses de 1,0 e 5,0 ng/mL de TGF-&#x3B2;1 ao longo do período (1, 7 e 14 dias) e na dose de 10,0 ng/mL a marcação foi mais intensa desde o primeiro dia do estímulo. Em relação à expressão de DSPP, o grupo tratado com 10,0 ng/mL apresentou marcação após 14 dias de tratamento. Sendo assim, este estudo permite concluir que as diferentes concentrações de TGF-&#x3B2;1 estimularam a proliferação e migração celular, sem efeito citotóxico sobre as células ao longo do período do estudo. Em relação à diferenciação celular a concentração 10,0 ng/mL de TGF-&#x3B2;1 estimulou à expressão de DMP-1 e DSPP. / The aim of this study was to evaluate, in vitro, the effect of transforming growth factor beta 1 (TGF-&#x3B2;1) in stem cells derived from the pulp of human exfoliated deciduous teeth (SHED) regarding to cell viability, proliferation, migration and differentiation. SHED were maintained in MEM&#x3B1; culture medium + 10% fetal bovine serum (FBS) + 1% penicillin and streptomycin, and treated with TGF-&#x3B2;1 at the following concentrations of 1.0; 5.0 and 10.0 ng/mL. After 1, 3, 5 and 7 days, cell viability was assessed by MTT assay and proliferation by the SRB method. After 24h of TGF-&#x3B2;1 treatment, cell migration assay was carried out using inserts of 8 &#x3BC;m pore size. To evaluate SHED differentiation into odontoblasts, DMP-1 and DSPP markers were analyzed by RT-PCR, after treatment at different concentrations of TGF-&#x3B2;1 for 14 days. The results were submitted by ANOVA and Tukey test. With respect to cell viability, the different TGF-&#x3B2;1 concentrations did not have cytotoxic effect on SHED. The cells treated by different TGF-&#x3B2;1 concentrations showed higher proliferation rates than those of the negative control (MEM&#x3B1; + 10% FBS) after the third day (p = 0.000). Higher rates of migration towards the media containing TGF-&#x3B2;1 were observed, but there were no statistically significant differences among the concentrations. All different TGF-&#x3B2;1 concentrations showed statistically significant differences with the positive control (p=0.000) and negative control (p=0.000). Statistically significant differences were observed between positive and negative control (p=0.002). DMP-1 expression was observed incrementally at TGF-&#x3B2;1 concentrations of 1.0 and 5.0 ng/mL at 1, 7, and 14 days and the concentration of 10.0 ng/mL was more intense from day one of the stimulus. DSPP expression was more intense after 14 days of treatment with the concentration of 10.0 ng/mL. Thus, this study concluded that different TGF-&#x3B2;1 concentrations stimulated cell proliferation and migration, without cytotoxic effect on the cells throughout the study period. From the perspective of cell differentiation, TGF-&#x3B2;1 concentration of 10.0 ng/mL was capable of stimulating DMP-1 and DSPP expression.

Resumo:As ativinas são citocinas membros da superfamília do fator de crescimento transformador-β (TGFβ) que podem ser sintetizadas por quase todos os tipos celulares no organismo e assim a maioria dos tecidos têm a capacidade de ser fonte de ativina A na circulação. Desta forma, os objetivos desse estudo foram determinar se as concentrações plasmáticas e peritoneais da ativina A sofrem alterações em bezerros portadores ou não de hérnia umbilical (HU) antes e após a correção cirúrgica e em qual compartimento o seu aumento refletiria melhor e mais rapidamente as alterações inflamatórias, seu papel como indicador da inflamação na cavidade abdominal e sua correlação entre concentrações plasmáticas e peritoneais e ainda estabelecer intervalos de referência para a variável em cada grupo. Foram utilizados vinte bezerros holandeses com (n=10) ou sem HU (n=10), bezerros com HU foram submetidos à herniorrafia. Sangue total e líquido peritoneal foram coletados dos 20 animais para a quantificação da ativina A pelo teste ELISA nos dias 0 (antes da cirurgia) 1, 3, 5, 7 e 15. Dados dos dois grupos foram comparados. As concentrações plasmáticas e peritoneais de ativina A no grupo controle não tiveram alterações ao longo do tempo, porém no grupo experimental houve um aumento da concentração plasmática 15 dias após a herniorrafia em relação ao momento basal. Quando comparados os grupos, as concentrações plasmáticas de ativina A do grupo experimental estavam diminuídas no 3º dia e aumentadas no 15º dia após a cirurgia em relação aos animais do grupo controle, enquanto a concentração peritoneal apresentou-se aumentada 5 dias após a herniorrafia no grupo experimental em relação ao grupo controle / Abstract:Activins are members of the transforming growth factor β (TGF-β) superfamily and can be synthesized by almost all cell types in the body and most tissues has the ability to be a source of activin A in circulation. Thus, the objectives of this study were to determine if plasma and peritoneal concentrations of activin A change in calves with or without umbilical hernia (UH) before and after surgery and in which compartment its increase would reflect better and faster inflammatory changes. Its role as an inflammatory biomarker in the abdominal cavity and the correlation between plasma and peritoneal concentrations, and establish reference intervals for the variable in each group. Twenty Holstein calves were used with (n = 10) or without HU (n = 10), calves with HU underwent herniorrhaphy. Whole blood and peritoneal fluid were collected from 20 animals for quantification of activin A by ELISA on days 0 (before surgery) 1, 3, 5, 7 and 15. Data were compared between the two groups. Plasma and peritoneal concentrations of activin A in the control group did not change over time, but in the experimental group there was an increase in the plasma concentration 15 days after herniorrhaphy compared to baseline. When comparing the groups, the plasma concentrations of activin A in the experimental group were decreased on day 3 and increased on the 15th day after surgery compared to the control group animals, while the peritoneal concentration had increased 5 days after herniorrhaphy repair in the experimental group compared to the control group / Orientador:Juliana Regina Peiró / Banca:José Paes de Oliveira Filho / Banca:Alexandre Secorun Borges / Mestre

Orientador: Debora Aparecida Pires de Campos Zuccari / Banca: Ana Elizabete Silva / Banca: Heidge Fukumasu / Banca: Alessandra Vidotto / Banca: Heloísa Cristina Caldas / Resumo:A transição epitélio-mesenquimal (EMT) é o processo pelo qual as células cancerosas a partir de tumores primários passam por uma conversão fenotípica para invadir e migrar, gerar metástases em tecidos ou órgãos distantes. Este processo pode ser induzido por fatores de crescimento, tais como Fator de Crescimento Transformante beta (TGF-β) e sua alta expressão tem sido implicada na angiogênese tumoral, na migração e invasão celular em muitos tipos de tumores. A expressão de ROCK-1 está associada com a malignidade dos tumores, enquanto a inibição desta molécula resulta em uma supressão significativa de metástases tumorais. A metformina, um fármaco utilizado no tratamento da diabetes, demonstrou inicialmente inibir a EMT e impedir o fenótipo mesenquimal pela repressão transcricional de pontos chave da regulação da EMT (ZEB1, TWIST1, SNAIL2, TGF-β) em células de câncer de mama. Os objetivos foram avaliar a expressão gênica e proteica de marcadores relacionados a metástase, em um estudo in vitro e in vivo, em linhagens de câncer de mama, após o tratamento com metformina, além do silenciamento gênico do TGF-β1 para inibição da transição epitéliomesenquimal. Foi realizado a transfecção da linhagem celular metastática de tumor mamário canino CF41 de forma estável após a construção de um pequeno RNA de interferência para desenvolver derivados clonais que expressam níveis reduzidos de TGF-β1 (células TGF-β1sh). Este foi subsequentemente combinado com o tratamento com metformina, para analisar os efeitos sobre a migração de células, assim como a expressão dos marcadores de EMT E-caderina e N-caderina, quantificados através de imunofluorescência e do qRT-PCR. As linhagens mamárias humanas MCF-7 (nãometastática) e MDA-MB-231 (metastática) foram tratadas com metformina e inibidor Y27632, após a indução da EMT por TGF-β1 para... / Abstract: Epithelial mesenchymal transition (EMT) is the process by which cancer cells from primary tumors pass through a phenotypic conversion to invade and migrate, generating metastases in organs or tissues distant. This process can be induced by growth factors such as transforming growth factor beta (TGF-β) and its overexpression has been implicated in tumor angiogenesis, cell migration and invasion in many cancers. ROCK- 1 expression is associated with the malignant character of tumors, while inhibiting this molecule results in a significant suppression of tumor metastasis. Metformin, a drug use for the treatment of diabetes, was previously shown to inhibit EMT by suppressing expression of key transcription factors in breast cancer cells. The aims were to evaluate the gene expression and protein expression of related markers metastasis, in a study in vitro and in vivo in breast cancer cell lines after treatment with metformin in addition to the gene silencing of TGF-β1 for inhibiting epithelial-mesenquimal transition. These aims were contemplated performing transfected of canine metastatic mammary tumor cell line CF41 with small interfering RNA constructs to develop clonal derivatives expressing reduced levels of TGF-β1 (TGF-β1sh cells). This was subsequently combined with metformin treatment, to look at effects on cell migration, as well as the expression of the EMT markers E-cadherin and N-cadherin, which were quantified by immunofluorescence and qRT-PCR. MCF-7 and MDA-MB-231 cell lines were treated with metformin and Y27632, after induction of EMT by TGF-β1, to examine the effects on cell migration as well as the protein expression of the ROCK-1 markers, vimentin, Ecadherin, CD44 and CD24 by immunocitochemistry. In an in vivo study, unmodified or TGF-β1 shRNA-expressing CF41 cells were injected in the inguinal region of nude athymic female mice that were treated with ... / Doutor

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Made available in DSpace on 2014-12-05T18:41:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) victor_silva_ioc_dout_2009.pdf: 22194333 bytes, checksum: 32cf0b37f0ab6f7e74531335d04fecbe (MD5) Previous issue date: 2014-11-18 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Protozoários parasitos aparecem como co-patógenos em infecções pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV)-1, resultando em um aumento mútuo na replicação viral e parasitária, e facilitando a progressão clínica de ambas as doenças. Os mecanismos pelos quais o HIV-1 induz um aumento na replicação do protozoário são desconhecidos. Neste trabalho, nós investigamos o papel do HIV-1 e da proteína trans-ativadora (Tat) do HIV-1 no aumento da replicação parasitária em macrófagos humanos primários co-infectados ou não com HIV-1 e Leishmania amazonensis ou com HIV-1 e Blastocrithidia culicis. Em alguns experimentos, macrófagos foram infectados somente com L. amazonensis ou B. culicis e expostos à proteína Tat recombinante do HIV-1. As replicações dos protozoários e do HIV-1 foram analisadas por índice endocítico ou ensaio imunoadsorvente ligado a enzima (ELISA) para p24, respectivamente. A infecção pelo HIV-1 dobrou a replicação da Leishmania em macrófagos, e soro contra o Tat do HIV-1 reduziu significativamente a replicação exacerbada do protozoário, indicando uma importante função desta proteína, a qual é liberada pelas células infectadas com HIV-1, neste processo. Corroborando estes resultados, a exposição de macrófagos infectados somente por Leishmania ao Tat recombinante (100 ng/mL) mimetizou a infecção pelo HIV-1. A multiplicação do protozoário diminuiu quando células infectadas por Leishmania foram tratadas com Tat na presença de anticorpos neutralizantes contra o Fator de Crescimento e Transformação (TGF)-b1, demonstrando a participação desta citocina no aumento da replicação da L. amazonensis em macrófagos. O tratamento com Tat induziu a expressão da enzima Ciclo-oxigenase (COX)-2 e a secreção de Prostaglandina E2 (PGE2), e o bloqueio da produção de PGE2 aboliu o aumento da replicação da Leishmania induzida por Tat Adição exógena de PGE2 estimulou o crescimento da Leishmania em macrófagos, e a neutralização imune de TGF-b1 abrandou este efeito. Analisados em conjunto, nós concluímos que Tat estimula a replicação da Leishmania via indução da síntese de PGE2 e conseqüentemente secreção de TGF-b1. Para avaliar se a infecção pelo HIV-1 desativa a atividade microbicida do macrófago, células infectadas com HIV-1 foram co-infectadas com um protozoário não patogênico (Blastocrithidia culicis), e nós observamos que a infecção pelo HIV-1 favoreceu a sobrevivência deste tripanossomatídeo. Por microscopia eletrônica, nós verificamos que tanto o HIV-1 quanto a B. culicis co-habitavam um mesmo macrófago, e que formas em divisão do protozoário podiam ser observadas no interior de macrófagos. De forma similar aos encontrados nos experimentos com Leishmania, o Tat ou o TGF-b1 dobraram o crescimento do protozoário em macrófagos infectados somente por Blastocrithidia. Em conclusão, nós identificamos, pela primeira vez, uma molécula do HIV-1 que promove a multiplicação de um protozoário patogênico (Leishmania), e permite a sobrevivência/crescimento em macrófagos humanos primários de um protozoário habitualmente não patogênico. Uma vez que a neutralização imune do Tat tem sido estudada como uma estratégia de vacinação contra o HIV-1, nossos resultados sugerem que a neutralização desta proteína também pode ser salutar no combate ao protozoário em casos de co-infecção / Protozoan parasites appear as human immunodeficiency virus (HIV)-1 co-pathogens, resulting in a mutuall enhancement of viral and parasite replication, and facilitating the clinical progression of both diseases. The mechanisms by which HIV-1 induces up-modulation of protozoan replication are unknown. In this work, we investigated the role of HIV-1 and HIV-1 transcriptional transactivator (Tat) protein in the enhancement of parasite replication in primary human macrophages co-infected or not with HIV-1. Human macrophages were co-infected with HIV-1 and either with Leishmania amazonensis or Blastocrithidia culicis. In selected assays, macrophages were infected only with L. amazonensis or B. culicis and exposed to recombinant HIV-1 Tat protein. Protozoan and HIV-1 replication were analyzed by endocytic index or p24 Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay (ELISA), respectively. HIV-1 infection doubled the Leishmania replication in macrophages, and Tat antiserum significantly reduced the exacerbated parasite replication, pointing to a direct role of Tat protein released from HIV-1-infected cells in this process. Corroborating this finding, exposure of Leishmania-infected macrophages to recombinant Tat (100 ng/mL) mimicked HIV-1 infection. Protozoan replication diminished when Leishmania-infected cells were treated with Tat in the presence of neutralizing anti-Transforming Growth Factor (TGF)-b1 antibodies, showing a participation of this cytokine in the augmentation of L. amazonensis multiplication in macrophages. Interestingly, Tat induced the expression of the enzyme Cyclooxygenase (COX-2) and Prostaglandin E2 (PGE2) secretion, and blockage of PGE2 production abrogated the increased Leishmania replication induced by Tat. Exogenous addition of PGE2 elicited Leishmania replication in macrophages, and immunoneutralization of TGF-b1 blunted this effect. Taken together, we deciphered that Tat stimulates Leishmania replication via induction of PGE2 synthesis and consequently TGF-b1 secretion. To evaluate whether HIV-1 infection deactivates the microbicidal activity of macrophages, HIV- 1-infected cells were co-infected with a non-pathogenic protozoan (Blastocrithidia culicis), and we found that HIV-1 infection favors the survival of this trypanosomatid. By electron microscopy, we verify that both HIV-1 and B. culicis co-habited the same macrophage, and that dividing forms of the protozoan can be observed inside the macrophage. Similarly, Tat or TGF-b1 doubled the protozoan growth in Blastocrithidia-infected macrophages. In conclusion, we identified, for the first time, an HIV-1 molecule that promotes multiplication of a pathogenic protozoan (Leishmania) and permit survival of an otherwise non-pathogenic protozoan in primary human macrophages. Because immunoneutralization of HIV-1 Tat has been studied as a vaccination strategy against HIV-1, our results suggest that neutralization of this protein could be salutary in the combat against the protozoan in the cases of co-infection

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:40:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-01-21. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:13Z : No. of bitstreams: 1 000870622.pdf: 409692 bytes, checksum: e09e8f69dfbc508854b5fc39b85dc96c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Activins are members of the transforming growth factor β (TGF-β) superfamily and can be synthesized by almost all cell types in the body and most tissues has the ability to be a source of activin A in circulation. Thus, the objectives of this study were to determine if plasma and peritoneal concentrations of activin A change in calves with or without umbilical hernia (UH) before and after surgery and in which compartment its increase would reflect better and faster inflammatory changes. Its role as an inflammatory biomarker in the abdominal cavity and the correlation between plasma and peritoneal concentrations, and establish reference intervals for the variable in each group. Twenty Holstein calves were used with (n = 10) or without HU (n = 10), calves with HU underwent herniorrhaphy. Whole blood and peritoneal fluid were collected from 20 animals for quantification of activin A by ELISA on days 0 (before surgery) 1, 3, 5, 7 and 15. Data were compared between the two groups. Plasma and peritoneal concentrations of activin A in the control group did not change over time, but in the experimental group there was an increase in the plasma concentration 15 days after herniorrhaphy compared to baseline. When comparing the groups, the plasma concentrations of activin A in the experimental group were decreased on day 3 and increased on the 15th day after surgery compared to the control group animals, while the peritoneal concentration had increased 5 days after herniorrhaphy repair in the experimental group compared to the control group