Orientador: Rogério Peres Soratto / Banca: Carlos Alexandre Costa Crusciol / Banca: Gessi Ceccon / Banca: Marcelo de Almeda Silva / Banca: Antonio Aecio Carvalho Bezerra / Resumo: O feijão-caupi [Vigna unguiculata L. Walp.] está se tornando uma opção para os produtores de diferentes regiões do Brasil, pela maior tolerância ao estresse hídrico, ciclo rápido, adaptação a solos de menor fertilidade e menor custo de produção. A cultura apresenta crescente expansão, em especial para o cultivo na segunda safra (safrinha), nas regiões Centro-Oeste e Sudeste do país, e aumento da demanda pelos mercados interno e externo. Porém, são praticamente inexistentes informações sobre esta cultura no estado de São Paulo. Objetivou-se com este trabalho avaliar o desempenho produtivo de cultivares de feijão-caupi, de porte semiereto e semiprostrado, em diferentes épocas de semeadura e populações de plantas, no período de outono-inverno, na região central do estado de São Paulo. Foram conduzidos dois experimentos, durante os anos de 2011, 2012 e 2013, em um Latossolo Vermelho distroférrico, em Botucatu-SP. No Experimento I, o delineamento foi o de blocos casualizados, em esquema de parcela subdivididas e quatro repetições. Em 2011, as parcelas foram compostas por quatro épocas de semeadura: 1a quinzena de março; 2a quinzena de março; 1a quinzena de abril e 2a quinzena de abril. Em 2012, por seis épocas: 1a quinzena de fevereiro; 2a quinzena de fevereiro; 1a quinzena de março; 2a quinzena de março; 1a quinzena de abril e 2a quinzena de abril. E no ano de 2013, por cinco épocas: 1a quinzena de fevereiro; 2a quinzena de fevereiro; 1a quinzena de março; 2a quinzena de março e 1a quinzena de abril. Em 2011, as subparcelas foram compostas pelas cultivares: BRS Cauamé, BRS Guariba, BRS Itaim, BRS Novaera e BRS Tumucumaque. Em 2012, por BRS Cauamé, BRS Guariba, BRS Novaera, BRS Potengi e BRS Xiquexique. Em 2013, utilizou-se a BRS Cauamé, BRS Guariba, BRS Novaera, BRS Potengi e BRS Tumucumaque. Foi utilizada a população ... / Abstract: The cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp.] is becoming an option for farmers in different regions of the Brazil, for greater tolerance to water stress, short cycle, adaptation to soils with lower fertility and lower production cost. The cowpea crop has increased expansion, especially for growth the in second cropping season (out-ofseason) in the Midwest and Southeast regions of the country, and demand increase for domestic and foreign markets. However, there are not information and research on cowpea crop for the São Paulo state. The objective of this study was to evaluate the agronomic performance of semi-erect and semi-prostrate cowpea cultivars, at different sowing dates and plant populations, during the fall-winter, in the central region of the São Paulo state, Brazil. Two experiments were carried during the years 2011, 2012, and 2013, grown in a Typic Haplorthox (dystroferric Red Latosol) in Botucatu, São Paulo state. In the Experiment I, the randomized complete block design was used, in a split-plot arrangement, with four replications. In 2011, the plots consisted of four sowing dates: first half of and second half of March, and April. In 2012, of six sowing dates: first half of and second half of February, March, and April. And in 2013, of five sowing dates: first half of and second half of February, March, and first half of April. In the 2011, the subplots were composed by cowpea cultivars: BRS Cauamé, BRS Guariba, BRS Itaim, BRS Novaera, and BRS Tumucumaque. In 2012, by BRS Cauamé, BRS Guariba, BRS Novaera, BRS Potengi, and BRS Xiquexique. In 2013, has used the BRS Cauamé, BRS Guariba, BRS Novaera, BRS Potengi, and BRS Tumucumaque. The initial plant densities were 200.000 plants ha-1. In the Experiment II, the experimental design was a randomized complete blocks in a 2 x 5 factorial scheme, with four replications. The treatments of the factorial consisted of the ... / Doutor

Orientador: Leandro Borges Lemos / Coorientador: Marcio José de Santana / Banca: Rogério Peres Soratto / Banca: Tiago Roque Benetoli da Silva / Resumo: Mesmo estando em franca expansão para outras regiões do país, a maioria das cultivares de feijão-caupi foram desenvolvidas para as condições das regiões norte e nordeste do Brasil. Assim, existe a necessidade da seleção de cultivares mais adaptadas às condições edafoclimáticas do cerrado, mas também as melhores épocas de semeadura em termos de produtividade e qualidade tecnológica dos grãos da espécie. O objetivo do trabalho foi avaliar o desempenho agronômico e a qualidade tecnológica de cultivares de feijão-caupi de porte ereto e semiereto em função da época de semeadura em condições de sequeiro em Uberaba-MG. O delineamento experimental foi de blocos casualizados, com parcelas subdivididas e quatro repetições. As parcelas foram representadas por três épocas de semeadura (14/12/2012, 14/01/2013 e 14/02/2013). As subparcelas foram constituídas por seis cultivares (BRS Guariba, BRS Potengi, BRS Cauamé, BRS Novaera, BRS Itaim e BRS Tumucumaque). A subparcela experimental foi formada por quatro fileiras de cinco metros de comprimento espaçadas em 0,40 metros, sendo considerada como área útil as duas fileiras centrais. O desempenho agronômico e a qualidade tecnológica dos grãos das cultivares de feijão-caupi foram influenciados pelas condições edafoclimáticas das épocas de semeadura. Na semeadura em dezembro ocorreu um desenvolvimento vegetativo expressivo das cultivares de feijão-caupi acarretando uma menor produtividade de grãos. A cultivar BRS Tumucumaque foi a mais produtiva na semeadura realizada em janeiro. Na semeadura realizada em fevereiro, todas as cultivares obtiveram maiores produtividades de grãos, com destaque para a BRS Itaim e BRS Novaera, com produtividade de 3.439 e 3.435 kg ha-1 respectivamente / Abstract: Even in expanding to other regions of the country, most of cowpea cultivars were developed for the conditions of the northern and northeastern regions of Brazil. Thus, it is necessary to select cultivars which are more adapted to the environmental conditions of the cerrado, and also the best sowing dates in terms of productivity and technological quality of grain crops. The aim of this study was to evaluate the agronomic performance and technological quality of erect and semi-erect cowpea cultivars depending on sowing under rainfed conditions in Uberaba-MG. The experimental design was randomized blocks, in split plots with four replications. The plots were represented by three sowing dates (12/14/2012, 01/14/2013 and 02/14/2013). The subplots consisted on six cultivars (BRS Guariba Potengi BRS, BRS Cauamé, Novaera BRS, BRS Itaim Tumucumaque and BRS). The experimental subplot consisted on four five feet rows in length, spaced 0.40 meters, and the considered floor area was the two central rows. The agronomic performance and technologic quality of cowpea grain cultivars were influenced by environmental conditions of sowing dates. At sowing in December there was a significant vegetative growth of cowpea cultivars resulting in a lower yield. BRS Tumucumaque was the most productive in sowing done in January. In February, all cultivars had higher grain yields, especially for BRS and BRS Novaera Itaim, with productivity of 3,439 and 3,435 kg ha-1 respectively / Mestre

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O feijÃo-de-corda [Vigna unguiculata (L.) Walp.] pertence à famÃlia Fabaceae e à bastante utilizado na alimentaÃÃo humana como fonte de proteÃnas, carboidratos, vitaminas e minerais. Dentre as principais caracterÃsticas do feijÃo-de-corda, seu elevado conteÃdo proteico e a boa tolerÃncia Ãs condiÃÃes de baixa disponibilidade de Ãgua nos solos, altas temperaturas e relativa tolerÃncia à salinidade, condiÃÃes tÃpicas das regiÃes semi-Ãridas do nordeste do Brasil, sÃo algumas das que podem ser citadas. Entretanto, apesar da considerÃvel capacidade de tolerÃncia Ãs diferentes condiÃÃes de estresses, parte da produtividade do feijÃo-de-corda à ameaÃada pela aÃÃo de diversos fitopatÃgenos, dentre os quais se destacam os fungos como maiores causadores de patologias desta cultura, a exemplo da Antracnose, resultado da infecÃÃo por C. gloeosporioides, caracterizada por manchas marrom-avermelhadas nas nervuras foliares que podem se prolongar por todos os ÃrgÃos da planta hospedeira. Felizmente, o feijÃo-de-corda possui cultivares que apresentam caracterÃsticas diferenciadas de resistÃncia, frente ao C. gloeosporioides, no que concerne à ativaÃÃo das defesas da planta em interaÃÃes ditas incompatÃveis, haja vista que o patÃgeno nÃo consegue deliberar a infecÃÃo. Partindo dessa premissa, à vÃlido mencionar que grande parte dos mecanismos de resistÃncia de plantas aos patÃgenos està relacionada com a expressÃo gÃnica diferencial de proteÃnas que funcionariam como marcadores de defesa em resposta à infecÃÃo. Nesse sentido, esse estudo propÃe a anÃlise proteÃmica diferencial da interaÃÃo incompatÃvel (resistÃncia) entre plantas de feijÃo-de-corda, genÃtipo BR3, e o isolado LPVD-1, do fungo C. gloeosporioides a fim de identificar possÃveis marcadores proteicos determinantes da resistÃncia para esse patossistema. Por meio da utilizaÃÃo da abordagem Eletroforese Bidimensional em combinaÃÃo com Espectrometria de Massas ESI-Q-TOF MS/MS, foram identificadas 118 proteÃnas diferencialmente expressas, considerando proteÃnas superexpressas (102) e subexpressas (16), envolvidas em diversos processos celulares, tais como: Metabolismo energÃtico, fotossÃntese, metabolismo de proteÃnas e Ãcidos nucleicos, resposta ao estresse, transporte celular, homeostase redox, sinalizaÃÃo e defesa, com destaque para expressÃo das proteÃnas PR-10 (relacionada à patogÃnese), Remorina e Ascorbato peroxidase que apresentaram alteraÃÃes significativas em todos os tempos experimentais testados. Esses achados demonstram a complexidade dos mecanismos envolvidos durante a resistÃncia vegetal e auxiliam no direcionamento dos programas de melhoramento genÃtico dessa cultura frente ao ataque de fungos. AlÃm de favorecerem o entendimento das interconexÃes bioquÃmicas e fisiolÃgicas que decorrem da interaÃÃo incompatÃvel planta-fungo. / Cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp.] belongs to the family Fabaceae and is widely used in food as a source of protein, carbohydrates, vitamins and minerals. Among the main features of cowpea, its high protein content and good tolerance to conditions of low water availability in soils, high temperatures and relative tolerance to salinity conditions typical of semi-arid regions of northeastern Brazil, are some of which can be cited. However, despite the considerable capacity of tolerance to different stress conditions, the productivity of cowpea is threatened by the action of various pathogens, among which stand out as major causes of fungal diseases of this crop, the example of Anthracnose as a result of infection by C. gloeosporioides, characterized by reddish-brown spots on the leaf veins that can be extended by all organs of the host plant. Fortunately, the cowpea has cultivars that have different characteristics of resistance against C. gloeosporioides, regarding the activation of plant defenses in incompatible interactions said, given that the pathogen is unable to resolve the infection. From this premise, it is worth mentioning that most of the mechanisms of plant resistance to pathogens is related to the differential gene expression of proteins that act as markers of defense in response to infection. Thus, this study proposes a differential proteomic analysis of the incompatible interaction (resistance) between plants of cowpea genotype BR3, and isolated LPVD-1, the fungus C. gloeosporioides in order to identify potential protein markers for the determinants of this resistance pathossystem. By using the approach 2D-PAGE in addition with mass spectrometry ESI-Q-TOF MS / MS, we have identified 118 differentially expressed proteins, whereas proteins overexpressed (102) and down-expressed (16), involved in various cellular processes, such as : energy metabolism, photosynthesis, protein and nucleic acids metabolism, stress response, cellular transport, redox homeostasis, signaling and defense, with emphasis on expression of PR-10 proteins (pathogenesis-related), remorina and ascorbate peroxidase that had significant alterations at all time points tested. These findings demonstrate the complexity of the mechanisms involved in plant resistance and assist in directing the programs of genetic improvement of this crop against fungal attack. Furthermore, itâs promoting the understanding of the biochemical and physiological interconnections arising from incompatible plant-fungus interaction.

SILVA, J. F. Resistência genética e induzida de Vigna unguiculata (L.) Walp. à Aphis craccivora Koch e sua amostragem. 2001. 122 f. Tese (Doutorado em Agronomia/Fitotecnia) - Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2011. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2014-07-16T21:25:16Z No. of bitstreams: 1 2011_tese_jfsilva.pdf: 4457531 bytes, checksum: 4fbe9f0496227d02f6b0661f7fb85941 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2014-07-17T16:58:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_tese_jfsilva.pdf: 4457531 bytes, checksum: 4fbe9f0496227d02f6b0661f7fb85941 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-07-17T16:58:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_tese_jfsilva.pdf: 4457531 bytes, checksum: 4fbe9f0496227d02f6b0661f7fb85941 (MD5) Previous issue date: 2011 / The objective of this work were: to evaluate resistance of cowpea genotypes [Vigna unguiculata (L.) Walp.] to the black aphid [Aphis craccivora Koch, 1854] and to study the genetic variability of these genotypes for this feature; to evaluate the possible inducible action of cis-jasmone to resistance to this pest; to study the spatial dispersion of the aphid in cowpea culture, and to establish the number of samples required to estimate the population of the pest to use in integrated pest management programs. To evaluate the resistance preference, an experiment was conducted in a greenhouse at the Universidade Federal do Ceará (UFC) in Fortaleza, Ceará. The experimental design was randomized blocks with 51 treatments, represented by genotypes and four replications. We estimated the generalized Mahalanobis distances and grouping of genotypes was performed using the Tocher optimization method. For the evaluation of cis-jasmone three experiments were conducted, the first in Quixadá, Ceará, in the design of randomized blocks with five replications and five treatments as follow: untreated control; application of the insecticide endosulfan and deltamethrin, and the application of cis-jasmone a single dose of 60 g.ha-1, three applications of 20 g ha-1 and six of 10 g ha-1 on the cultivar Vita 7. In the second, in the same place, the seeds of the TVu 408 P2, BRS Gurguéia and Vita 7 were soaked in a solution of cis-jasmone with 60 g ha-1 or in water for 24 hours. The design was factorial 3x2 in blocks. In the third experiment, conducted in the UFC, we used a randomized block design with four replications and four treatments consisting of an untreated control, and applications of cis-jasmone at doses of 50 g ha-1, 100 g ha-1 and 200 g ha-1. The cultivar was Vita 7. For the evaluations, the number of colonies of aphids present in every plant was counted. To evaluate the spatial distribution of aphid were grown in two field trials in the UFC. The first field had an area of 216 m² and second 576 m². The fields were divided into 15 and 25 plots, respectively. The cultivar used was Vita 7 spaced in 0.25 m x 0.8 m. On those fields were performed six collections of data in each field where they were evaluated ten plants per plot. It was count the number of colonies of aphids present throughout the plant. The results show that the genotypes BRS Guariba, TVu 410, BRS Paraguaçu TVu 36, Sempre Verde, TVu 408 P2, Setentão e Epace 10 have greater resistance to the aphid than the others. The largest differences were found between BRS Guariba and Sete Semanas and between Tvu 410 and Sete Semanas, while the BRS Guariba and TVu 410 were the most similar. We observed the division of the genotypes in eight groups and the character that contributes to the most divergence was the number of nymphs. The crosses among the genotype Setentão and the genotypes BRS Guariba ,TVu 410, BRS Paraguaçu, TVu 36, TVu 408 P2 and between Epace 10 and Sempre Verde, BRS Guariba and TVu 410 may result in new genetic combinations intended to improve resistance to aphid. In all experiments, cis-jasmone did not reduce the infestation of A. craccivora and so concluding that this product, under field conditions, does not induce resistance. The dispersion indices indicate that aggregate was the case in this study, which was confirmed by data fitting the frequency distribution of the Negative Binomial. Forty five is the appropriate number of samples to estimate the population of A. craccivora in the fields of V. unguiculata to be used in Integrated Pest Management programs. / Objetivaram-se neste trabalho: avaliar a resistência de genótipos de feijão de corda [Vigna unguiculata (L.) Walp.] ao pulgão preto [Aphis craccivora Koch 1854] e estudar a variabilidade genética desses genótipos para esta característica; avaliar a ação indutora da cis-jasmona para a resistência a esta praga; estudar a dispersão espacial do pulgão na cultura de feijão de corda; e estabelecer o número de amostras necessárias para a estimativa da população da praga para o uso em programas de Manejo Integrado de Pragas. Para a avaliação da resistência foi conduzido um experimento de preferência em casa de vegetação na Universidade Federal do Ceará (UFC), em Fortaleza, Ceará. O delineamento utilizado foi o de blocos casualizados com 51 tratamentos, representados pelos genótipos, e quatro repetições. Foram estimadas as distâncias generalizadas de Mahalanobis e o agrupamento dos genótipos foi realizado utilizando o método de otimização de Tocher. Para a avaliação da cis-jasmona foram conduzidos três experimentos, sendo o primeiro em Quixadá, Ceará, no delineamento de blocos casualizados com cinco repetições e cinco tratamentos sendo: uma testemunha; aplicação dos inseticidas endosulfan e deltamethrin; e a aplicação da cis-jasmona em dose única de 60 g.i.a. ha-1, em três aplicações de 20 g.i.a. ha-1 e seis de 10 g.i.a. ha-1 sobre a cultivar Vita 7. No segundo, no mesmo local, as sementes das cultivares TVu 408 P2, BRS Gurguéia e Vita 7 foram embebidas em uma solução de cis-jasmona na concentração de 60 g.i.a. ha-1 ou em água por 24 horas. O delineamento utilizado foi em blocos casualizados no arranjo fatorial 3x2. No terceiro experimento, conduzido na UFC, utilizou-se o delineamento de blocos casualizados com quatro repetições e quatro tratamentos que consistiam de uma testemunha; e aplicações de cis-jasmona nas doses de 50 g.i.a. ha-1, 100 g.i.a. ha-1 e 200 g.i.a. ha-1. A cultivar utilizada foi a Vita 7. Para as avaliações foi contado o número de colônias de pulgão presentes em toda planta. Para estudo da dispersão do pulgão foram cultivados dois campos experimentais na UFC. O primeiro campo tinha uma área de 216 m² e o segundo 576 m². Os campos foram divididos em 15 e 25 parcelas, respectivamente. A cultivar utilizada foi a Vita 7 no espaçamento de 0,25 m x 0,8 m. Foram realizadas seis coletas de dados em cada campo onde foram avaliadas dez plantas por parcelas. Foi contado o número de colônias de pulgão presentes em toda a planta. Os resultados demonstram que os genótipos BRS Guariba, TVu 410, BRS Paraguaçu, TVu 36, Sempre Verde, TVu 408 P2, Setentão e Epace 10 apresentam maior resistência ao pulgão. As maiores divergências encontradas foram entre o BRS Guariba e Sete Semanas e entre TVu 410 e Sete Semanas, enquanto o BRS Guariba e TVu 410 foram os mais similares. Foi observada a divisão dos genótipos em oito grupos e o caractere que mais contribui para a divergência é o número de ninfas. O cruzamento entre o genótipo Setentão e os genótipos BRS Guariba,TVu 410, BRS Paraguaçu, TVu 36, TVu 408 P2 e entre o Epace 10 e o Sempre Verde, BRS Guariba e TVu 410 podem resultar em novas combinações genéticas visando o melhoramento da resistência ao pulgão. Em todos os experimentos a cis-jasmona não reduziu a infestação de A. craccivora concluindo-se que essa substância, em condições de campo, não induz a resistência. Quanto a dispersão os índices de agregação utilizados indicam que do tipo agregada o que foi confirmado pelo ajuste dos dados a distribuição de frequência Binomial Negativa. Quarenta e cinco é o número de amostras adequado para a estimativa da população de A. craccivora em campos de V. unguiculata para aplicação em programas de Manejo Integrado de Pragas.

MONTEIRO JUNIOR, José Edvar. Detecção de inibidores de proteinases cisteínicas em raízes de feijão-de-corda [Vigna unguiculata (L.) Walp.] e avaliação de sua atividade sobre o nematóide das galhas Meloidogyne javanica. 2007. xx, 107 f. : Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2007. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-05-30T13:05:54Z No. of bitstreams: 1 2007_dis_jemonteirojunior.pdf: 3368722 bytes, checksum: 6db6741733e59f2f818b4ae00227e385 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-07-11T23:30:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_dis_jemonteirojunior.pdf: 3368722 bytes, checksum: 6db6741733e59f2f818b4ae00227e385 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-11T23:30:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_dis_jemonteirojunior.pdf: 3368722 bytes, checksum: 6db6741733e59f2f818b4ae00227e385 (MD5) Previous issue date: 2007 / Detection of cysteine proteinase inhibitors in cowpea[Vigna unguiculata(L.) Walpers] roots as well as the accumulation of inhibitors enriched fractions throughammonium sulfate precipitation followed by reversed-phase liquid chromatography were in this present work accomplished. Fractions containing higher levels of cysteine proteinase inhibitor activity were selected and subjected to evaluation of its ability of to suppress the mobility of second stage juveniles (J2) of the root-knot nematode Meloidogyne javanica, race 1. In addition, the nematicidal effect of these fractions was also tested. When the mobility parameter was analyzed the ammonium sulfate precipitated F 30/60 fraction, at a dose of 40 μg of proteins, it shown to be the most potent of all tested samples at 24 h after incubation. However, regarding to mortality the both picks, PIHPLC and PIIHPLC, obtained from the HPLC step were the more actives causing a percentage of killing nematodes of 95.0 % and 94.2 %, respectively when the most potent doses of these picks were compared. Moreover, FITC-coupled F 30/60 fraction was used in light-flu orescence microscopy experiments in order to answer the following basic questions: 1) the observed effects on mobility and mortality will be related to the binding of the proteins in the nematode? And 2) If yes, this interaction is performed with the gut or surface nematode, or yet in the both structures? F 30/60 fraction appears to be incorporated by juveniles and specifically bind to the region corresponding to the gut of nematodes at 6 h after incubation, while at 24 h after incubation the fluorescent complex appears to be widespread along the whole body of the nematode, as observed by light-fluorescence microscopy. These results, all together, suggest the possible use of the inhibitors present in cowpea roots as a potential biological tool in the control of the root-knot nematode, M. javanica. / A detecção de inibidores de proteinases cisteínicas em raízes de feijão-de-corda [Vigna unguiculata (L.) Walpers] bem como o acúmulo de frações ricas nestes inibidores por meio de precipitação com sulfato de amônio seguida de cromatografia líquida de fase reversa foram realizados no presente trabalho. Frações contendo os maiores níveis de atividade de inibidores de proteinases cisteínicas foram selecionadas e sujeitas à avaliação de sua habilidade em suprimir a mobilidade de juvenis de segundo estágio (J2) do nematóide das galhas Meloidogyne javanica, raça 1. Em adição o efeito nematicida destas também foi avaliado. Quanto ao parâmetro mobilidade, a fração F 30/60 precipitada com sulfato de amônio, numa dose de 40 µg de proteínas, mostrou ser a mais potente de todas as amostras testadas, às 24 h de incubação. No entanto, com relação à mortalidade ambos os picos PIHPLC e PIIHPLC, obtidos dos passos de HPLC, foram os mais ativos causando um percentual de mortes de nematóides de 95,0 e 94,7 %, respectivamente, quando as doses mais potentes destes picos foram comparadas. Além disso, a fração F 30/60 acoplada a FITC foi usada em experimentos de microscopia de luz-fluorescência para responder as seguintes questões: 1) Estariam os efeitos observados sobre a mobilidade e mortalidade relacionados à ligação das proteínas no nematóide? e 2) Se sim, esta interação é realizada com a superfície do nematóide ou seu intestino, ou com ambas estruturas? A fração F 30/60 parece ser incorporada pelos juvenis e ligar-se especificamente à região correspondente ao intestino dos nematóides às 6 h após incubação, enquanto que às 24 h após incubação o complexo fluorescente parece se dispersar ao longo de todo o corpo do nematóide, como observado pela microscopia de luz-fluorescência. Estes resultados, somados, sugerem o possível uso dos inibidores presentes em raízes de feijão-de-corda como ferramentas biológicas potenciais no controle do nematóide das galhas, M. javanica.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / EmbriogÃnese SomÃtica à o processo pelo qual, tecidos somÃticos vegetais dÃo origem a embriÃes de plantas sob condiÃÃes indutivas. A embriogÃnese somÃtica à atualmente a ferramenta mais empregada para a propagaÃÃo de plantas em escala comercial. Recentemente foram identificados alguns genes envolvidos no processo. Alguns desses genes estÃo envolvidos com a manutenÃÃo do meristema, outros estÃo envolvidos com a formaÃÃo de padrÃo. Existem genes que quando expressos ectopicamente podem induzir a formaÃÃo de embriÃes somÃticos. Existem poucos trabalhos na literatura sobre a embriogÃnese somÃtica em feijÃo-de-corda. AlÃm disso, esses trabalhos apresentam uma freqÃÃncia de regeneraÃÃo pequena e um complicado sistema de regeneraÃÃo que envolve muitas etapas. O objetivo deste trabalho foi isolar linhagens de calos embriogÃnicos de feijÃo-de-corda e estabelecer as condiÃÃes de cultivo ideais para estes calos. AnÃlises histolÃgicas foram utilizadas para a caracterizaÃÃo anatÃmica das linhagens de calos isolados. Das 4 linhagens de calos isolados trÃs apresentam cÃlulas com caracterÃsticas de cÃlulas embriogÃnicas, sendo que apenas a linhagem 2 deu origem a estruturas embriogÃnicas em suspensÃo celular. Essas linhagens de calos foram subcultivadas por mais de um ano sem perder as suas caracterÃsticas. Os experimentos de crescimento das suspensÃes celulares mostraram que as suspensÃes devem ser subcultivados em perÃodos de 5 dias. Os prÃximos trabalhos que envolvam a regeneraÃÃo em feijÃo-de-corda devem trabalhar com essa linhagem de calo facilmente isolÃvel e altamente estÃvel em cultura. / Somatic embryogenesis is the process by which somatic plant tissues gives rise to plant embryos under inductors conditions. Somatic embryogenesis represents the most commonly employed tool in commercial propagation of plants. In recent times, genes involved in the process have been identified, partucularly those involved in the maintenance of meristems and pattern formation. There are genes which, when ectopically expressed, can induce the formation of somatic embryos. In cowpea, there are few reports on somatic embryogenesis. In addition, the reports on the process recorded a very low frequency and a complicated system of regeneration involving several steps. This work attempted to isolate callus lines of cowpea and establish an ideal culture condition necessary for their maintenance. Histological analysis was conducted to characterize the isolated lines of callus anatomically. From the four lines obtained, 3 presented cells exhibiting the charactersitc embryogenic potential and of this, Line 2 actually gave rise to embryogenic structures when cultured in liquid media. The lines of callus were maintained in cultured condition for over a year without loss of their characteristics. Experiments that monitored the growth of cell suspension from the callus revealed that five days is the best period for subculture of the cells. Regeneration experiments in cowpea will find the different callus lines isolated in this work useful in the attempt to optimize the different strategies of regeneration of the crop in vitro.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-29Bitstream added on 2014-06-13T19:16:43Z : No. of bitstreams: 1 cruz_pl_me_botfca.pdf: 370611 bytes, checksum: c967531537c8ec8ab5ddf5f8592a5a08 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O feijão-caupi (Vigna unguiculata L. Walp.) apresenta grande importância econômica e social nas regiões Norte e Nordeste do Brasil e tem conquistado mercado na região Centro-Oeste. Dentre as pragas dessa cultura, destaca-se a mosca-branca Bemisia tabaci (Gennadius 1889) biótipo B (Hemiptera: Aleyrodidae), com grande importância econômica. O inseto causa danos diretos, através da sucção de seiva, e indiretos, devido à transmissão de vírus. Diante da importância desse inseto como praga na cultura do feijão-caupi e da necessidade de se estabelecer métodos alternativos de controle em relação ao método químico convencional, a presente pesquisa teve como objetivo avaliar o comportamento de genótipos de feijão-caupi frente ao ataque de B. tabaci biótipo B, visando identificar possíveis tipos de resistência. Inicialmente, foram realizados testes preliminares com 51 genótipos, divididos aleatoriamente em dois grupos, avaliando-se a atratividade e a preferência para oviposição com chance de escolha. Dentre estes, foram selecionados TE93-244-23 F-1, Patativa, BRS- Marataoã, MNC99-541-F-21, TE 94-309-G-9, TVU-36, BR 17 - Gurguéia, TE97-304-G-4, BRS – Urubuquara e BRS – Rouxinol (promissores quanto à resistência), Pingo-de-ouro-1-1, TVU-1593 e IT81 D-1045 Enramador (suscetíveis), além do genótipo Canapu (testemunha), para as etapas subsequentes. Com esses 14 genótipos selecionados foram realizados ensaios de atratividade, preferência para oviposição e preferência para alimentação e/ou antibiose com B. tabaci biótipo B. Na primeira etapa, em casa de vegetação, verificou-se que para o Grupo 1, os genótipos TE93-244-23 F-1, Epace 10, MNC99-541-F-21, MNC04-786-B87-2, BRS – Marataoã, Patativa, TE94 309 G-9, IT86 D-716-1 e Corujinha foram menos atrativos aos adultos... / Cowpea (Vigna unguiculata L. Walp.) has social and economic importance to several regions in Brazil, including North, Northeast and the Midwest. The silverleaf whitefly Bemisia tabaci (Gennadius 1889) biotype B (Hemiptera: Aleyrodidae) has caused considerable damage and yield loss to the cowpea crops. Damage caused by this insect is related to its feeding and also through the virus transmission. Due the importance of this insect pest to cowpea cultivation and the need to establish alternative control methods compared to conventional chemical method, the present study evaluated the performance of cowpea genotypes against B. tabaci biotype B, in order to identify possible types of resistance. Initially, preliminary free choice tests were conducted with 51 genotypes, evaluating attractiveness and oviposition preference. In the second phase, it was selected TE93-244-23 F-1, Patativa, BRS-Marataoã, MNC99-541 F-21, TE94-309 G-9, TVU-36, BR17 - Gurguéia, TE97-304-G-4, BRS – Urubuquara and BRS – Rouxinol (promising as resistance); Pingo-de-ouro-1-1, TVU- 1593 and IT81 D-1045 Enramador (susceptible), as well Canapu genotypes (control), for subsequent steps. With 14 selected genotypes tests for attractiveness, oviposition preference and antibiosis and/or feeding preference to B. tabaci biotype B were performed. In greenhouse (Group 1), the genotypes TE93-244-23 F-1, Epace 10, MNC99-541-F-21, MNC04-786-B87-2, BRS – Marataoã, Patativa, TE94-309 G-9, IT86 D-716-1 and Corujinha were less attractive to adults of B. tabaci biotype B; TE93-244-23 F-1, Patativa, BRS - Marataoã, MNC99-541 F-21 and TE94-309 G-9 expressed oviposition non-preference. IntoGroup 2, the genotypes BRS - Urubuquara, TVU-36, TE97-304 G-4, BRS-Potengi, IT82 D-889, BR 17 – Gurguéia and BRS – Rouxinol were... (Complete abstract click electronic access below)

PAIVA, Ana Luiza Sobral. Respostas bioquímicas do feijão-de-corda [Vigna unguiculata L. (Walp.)] ao estresse salino e infecção pelo vírus do mosaico severo do caupi (CPSMV) reveladas pela proteômica quantitativa livre de marcação. 2015. 200 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2015. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-07-08T12:56:09Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_alspaiva.pdf: 4225070 bytes, checksum: 0559261a4c594b2649cdb60e4563c1fc (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-08-02T20:16:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_alspaiva.pdf: 4225070 bytes, checksum: 0559261a4c594b2649cdb60e4563c1fc (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T20:16:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_alspaiva.pdf: 4225070 bytes, checksum: 0559261a4c594b2649cdb60e4563c1fc (MD5) Previous issue date: 2015 / As sessile organisms, plants are exposed to a plethora of environmental stresses to which they must respond to maintain efficient growth and survival. Therefore, in order to improve our understanding on the complex mechanisms involved in the cowpea response to salt stress and to a compatible interaction with the cowpea severe mosaic virus (CPSMV), we used a label-free quantitative proteomic approach to identify the salt and virus responsive proteins in the leaves of the Pitiuba (CE-31) cultivar. The proteins extracted from the leaves (control and treated) 2 and 6 days post-treatment only with salt (DPS), only infected with CPSMV (DPV) or both of them (DPSV) were analyzed using mass spectrometry. At 2 DPS, 350 proteins with at least two-fold differences in abundance, in comparison with controls, were differentially accumulated in the leaves of the salt-treated (80% up and 20% down-accumulated), 281 at 2DPV (25% up and 75% down-accumulated) and 321 at 2 DPSV (45% up and 55% down-accumulated) plants. At 6 DPS, 350 proteins were differentially accumulated in the leaves of the salt-treated (90% up and 10% down-accumulated), 225 at 6 DPV (80% up and 20% down-accumulated) and 315 at 6 DPSV (94% up and 6% down-accumulated) plants. The qualitative analysis showed biochemical differences when the cowpea plants were challenged concurrently with both stresses. To cope with salinity, cowpea increased the abundance of proteins directly involved with the salt tolerance mechanisms. The results indicated that the CPSMV induce the down-accumulating of several proteins to invade and spread in host at early infection period (2 DPV), but at 6 DPV plant can induce accumulation of diverse proteins related with defense, although these strategies can’t avoid the negatives effects of disease. When exposed simultaneously to salt/CPSMV stresses, a balance in protein accumulation involved in many biological process. This is the first work employing this approach in cowpea and providing evidences of the plant biochemical mechanisms involved in the responses of cowpea to these stresses. / Como organismos sésseis, as plantas são expostas a uma variedade de estresses ambientais aos quais devem responder para sobreviverem e se desenvolverem. A fim de melhorar a nossa compreensão sobre os mecanismos complexos envolvidos na resposta do feijão-de-corda ao estresse salino e na interação compatível com o vírus do mosaico severo do caupi (CPSMV), foi utilizada uma abordagem proteômica quantitativa, livre de marcação, para identificar proteínas, responsivas a essess estresses em folhas de feijão-de-corda, cv. CE-31. As proteínas extraídas a partir de folhas primárias, 2 e 6 dias após o tratamento só com o sal (DPS), somente infectadas (DPV), ou sob ação combinada dos dois (DPSV) foram analisadas, usando espectrometria de massas e comparadas com grupo controle. No 2° DPS, foram identificadas 350 proteínas diferencialmente acumuladas (80% aumentaram em abundância e 20% diminuíram), no 2° DPV 281 (25% aumentaram em abundância e 75% diminuíram) e no 2° DPSV 321 (45% aumentaram em abundância e 55% diminuíram). Já no 6° DPS, foram identificadas 350 proteínas diferencialmente acumuladas (90% mostraram aumento em abundância e 10% diminuição), no 6° DPV 225 (80% aumentaram em abundância e 20% diminuíram) e no 6° DPSV 315 proteínas(94% aumentaram em abundância e 6% diminuíram). Para lidar com a salinidade, o cv. CE-31 aumentou a abundância de proteínas envolvidas diretamente com os mecanismos de tolerância ao sal. Em relação à infecção da planta pelo CPSMV, os resultados obtidos indicaram que o vírus induz redução na abundância de várias proteínas nos tempos iniciais de infecção, provavelmente favorecendo a invasão e propagação na planta, mas, no 6° DPSV, a planta recupera sua capacidade de acionar mecanismos de defesa, embora esses já não sejam mais efetivos para evitar o estabelecimento da doença viral. Durante exposição simultânea da planta ao sal e ao vírus, ocorreu um equilíbrio entre o aumento e diminuição em abundância de proteínas envolvidas em diversos processos metabólicos. Esse trabalho é pioneiro nessa abordagem em feijão-de-corda e fornece evidências dos mecanismos bioquímicos envolvidos nas resposta da planta a esses estresses.

VARELA, Anna Lídia Nunes. Ação de galactomanana sulfatada isolada de Adenanthera pavonina na resposta bioquímica de defesa do feijão-de-corda [Vigna unguiculata (L.) Walp.] desafiado pelo fungo Colletotrichum gloeosporioides. 2012. 96 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2012. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-07-08T13:35:57Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_alnvarela.pdf: 2177919 bytes, checksum: b7898740c28944706d715c2b6f0eb897 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-08-02T20:17:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_alnvarela.pdf: 2177919 bytes, checksum: b7898740c28944706d715c2b6f0eb897 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T20:17:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_alnvarela.pdf: 2177919 bytes, checksum: b7898740c28944706d715c2b6f0eb897 (MD5) Previous issue date: 2012 / Cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp.] is a food of great commercial importance, being the main food source in some regions such as northeastern Brazil. Unfortunately, cowpea is subject to attack by various pathogens and pests, causing considerable losses in productivity. To reduce these losses, there are several chemical methods that are widely used, but the indiscriminate use of fungicides has caused damage to the environment and living beings. In search of alternative environmentally friendly, a promising option would be the induction of defense mechanisms of the plant itself through elicitor molecules. Given the above, this study aimed to elicit defense responses in cowpea through the use of galactomannan isolated from Adenanthera pavonina and induce resistance to Colletotrichum gloeosporioides. Twelve days after germination, cowpea plants (Vigna unguiculata) were treated with A. pavonina galactomannan (at concentrations of 100 mg/L and 200 mg/L) in the absence or presence of the fungus C. gloeosporioides (inoculated 6 hours after treatment with carbohydrate) for 6, 12, 24 and 48 h were carried out on biochemical analysis of protein extracts obtained from primary leaves. For enzymes POX and APX a significant increase occurred after 12 h of treatment with the galactomannan. With respect to antifungal activity of the enzymes and βGLU CHI, the plants treated with the galactomannan in general, showed an increase above 50% compared to control. Macroscopic analysis revealed that the leaves treated with 200 mg/L of galactomannan and infected with C. gloeosporioides showed necrotic lesions visibly reduced compared to control. Furthermore, the galactomannan was unable to inhibit the germination of spores and vegetative growth of the fungus C. gloeosporioides in vitro. The results of the present study indicate that galactomannan isolated from A. pavonina can increase crop tolerance of cowpea (V. unguiculata) against the fungus C. gloeosporioides. / O feijão caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp.] é um alimento de grande importância comercial, sendo a principal fonte alimentícia em algumas regiões, como no Nordeste brasileiro. Infelizmente, o feijão-de-corda está sujeito ao ataque de vários patógenos e pestes, acarretando perdas consideráveis em sua produtividade. Para diminuir essas perdas, existem diversos métodos químicos que são largamente utilizados, porém o uso indiscriminado de fungicidas tem causado danos ao meio ambiente e aos seres vivos. Na busca de alternativas ecologicamente saudáveis, uma opção promissora seria a indução de mecanismos de defesa da própria planta através de moléculas elicitoras. Diante do exposto, o presente trabalho teve como objetivo elicitar respostas de defesa em feijão-de-corda através do uso de galactomanana sulfatada isolada de Adenanthera pavonina e induzir a resistência ao fungo Colletotrichum gloeosporioides. Doze dias após germinação, plantas de feijão-de-corda (Vigna unguiculata) foram tratadas com galactomana de A. pavonina (nas concentrações de 100 mg/L e 200 mg/L), na ausência ou presença do fungo C. gloeosporioides (inoculado após 6 h do tratamento com carboidrato) por 6, 12, 24 e 48 h, tendo sido realizadas as análises bioquímicas nos extratos protéicos obtidos das folhas primárias. Para as enzimas POX e APX ocorreu um significativo aumento a partir de 12 h do tratamento com a galactomanana. Em relação a atividade das enzimas antifungicas βGLU e CHI, as plantas tratadas com a galactomanana, no geral, apresentaram um aumento acima de 50% em relação ao controle. Análises macroscópicas revelaram que as folhas tratadas com 200 mg/L da galactomanana e infectadas com o C. gloeosporioides apresentaram lesões necróticas visivelmente reduzidas em relação ao controle. Ademais, a galactomana não foi capaz de inibir a germinação de esporos e crescimento vegetativo do fungo C. gloeosporioides in vitro. A partir dos resultados obtidos neste trabalho, conclui-se que, a galactomanana isolada de A. pavonina é capaz de aumentar a tolerância da cultura de feijão-de-corda (V. unguiculata) contra o fungo C. gloeosporioides.

CORREIA, Tuana Oliveira. Quitinase de Classe I de feijão-de-corda (Vigna unguiculata): Estudo preliminar da expressão do gene, clonagem, expressão e purificação em Escherichia coli BL21(λ)DE3 e determinação da estrutura através da modelagem por homologia. 2007. 90 f.Dissertação (Mestrado em Bioquímica)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2007. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-07-13T14:28:51Z No. of bitstreams: 1 2007_dis_tocorreia.pdf: 4501880 bytes, checksum: 7e0762a6def00c394cbdb56fc9fe2389 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-07-13T23:35:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_dis_tocorreia.pdf: 4501880 bytes, checksum: 7e0762a6def00c394cbdb56fc9fe2389 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T23:35:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_dis_tocorreia.pdf: 4501880 bytes, checksum: 7e0762a6def00c394cbdb56fc9fe2389 (MD5) Previous issue date: 2007 / In this work we have made a preliminary study on the expression of a class I chitinase gene from cowpea (Vigna unguiculata L.Walp), cloning and expression of this gene in Escherichia coli BL21(λ)DE3 cells and, through homology modeling, we determined the three­ dimensional structure of this protein. The expression of the class I quitinase gene from cowpea was performed by RT­PCR from the total RNA, with specific primers, from seeds and pods in distinct stages of development (2, 4, 6, 8 , 10, 12, 14, 16 and 18 days), belonging to two contrasting genotypes regarding to infection by Callosobruchus maculatus, IT81D­1053 (resistant) e TE97­419­07F (susceptible). The gene expression in leaves, roots, epicotyls and hipocotyls from two contrasting genotypes considering the infection by the nematoid Meloidogyne incongnita, CE­31(resistant) e TE97­411­1F (susceptible). The VuChiI gene cloning was accomplished from the amplified product on RT­PCR with IT81D­1053 seeds, and the amplified product from the genomic DNA of MONTEIRO. Eleven clones were obtained, from which nine were sequenced. The cloning of R7 clone was accomplished in pET15b vector and the expression of the recombinant protein was induced in the presence of IPTG 1mM. The protein, with 30 kDa, was visualized through a SDS­PAGE. The protein purified through an affinity chromatography in Sepharose column with immobilized Nickel did not had a significative hydrolytic activity. The models generated for the clones and for the native chitinase, have indicated that mutations that occurred did not changed the molecule's active sites. Thus, the class I chitinase gene from feijão­ de­ corda seems to present constitutive expression in all parts of the plant. The recombinant chitinase obtained was inactive. The specific mutations in the resulting clones suggests the occurrence of isoforms of this protein, what should be elucidated in the future. / No presente trabalho, foi realizado um estudo preliminar sobre a expressão de um gene de quitinase de classe I de feijão-de-corda (Vigna unguiculata L.Walp), a clonagem e expressão desse gene em células de Escherichia coli BL21(λ)DE3 e a determinação via modelagem por homologia da estrutura tridimensional dessa proteína. A expressão do gene da quitinase de classe I de feijão-de-corda foi obtida a partir de RT-PCR com oligonucleotídeos iniciadores específicos. Nessas reações, foram usadas amostras de RNA total de sementes e vagens em diferentes estágios de crescimento (2, 4, 6, 8 , 10, 12, 14, 16 e 18 dias), pertencentes a dois genótipos contrastantes quanto a infecção pelo Callosobruchus maculatus, IT81D-1053 (resistente) e TE97-419-07F (suscetível). A expressão foi avaliada também em folhas, raízes, epicótilo e hipocótilo de dois genótipos contrastantes quanto a infecção pelo nematóide das galhas Meloidogyne incongnita, CE-31 (resistente) e TE97-411-1F (suscetível). A clonagem do gene VuChiI foi realizada a partir do produto amplificado da RT-PCR de sementes de IT81D-1053, e do produto amplificado a partir do DNA genômico de MONTEIRO. Foram obtidos 11 clones confirmados, dos quais 9 foram seqüenciados. A subclonagem do clone R7 foi realizada em pET15b e a expressão da proteína recombinante foi induzida na presença de IPTG 1mM. A proteína recombinante, com aproximadamente 30 kDa, foi visualizada através de um SDS-PAGE. A proteína purificada através de uma cromatografia de afinidade em coluna de Sepharose com Níquel imobilizado não apresentou atividade quitinásica significativa. Os modelos gerados para os clones obtidos e para a quitinase nativa, indicam que as mutações ocorridas não alteram os sítios ativos das moléculas. Dessa forma, a quitinase de classe I do feijão-de-corda parece apresentar expressão constitutiva em todas as partes da planta. A quitinase recombinante obtida foi pouco ativa. As mutações pontuais nos clones obtidos sugerem a ocorrência de isoformas dessa proteína, o que ainda deve ser elucidado no futuro.