NOGUEIRA, Rita Maria Dantas. Status epilepticus induzido por marinobufogenina, uma substância isolada das glândulas parotóides do Bufo paracnemis Lutz 1925. 2000. 171 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2000. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-10-01T14:06:26Z No. of bitstreams: 1 2000_tese_rmdnogueira.pdf: 4290931 bytes, checksum: 08f1ec167d281339a5606e481226f48a (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-10-01T16:29:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2000_tese_rmdnogueira.pdf: 4290931 bytes, checksum: 08f1ec167d281339a5606e481226f48a (MD5) / Made available in DSpace on 2012-10-01T16:29:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2000_tese_rmdnogueira.pdf: 4290931 bytes, checksum: 08f1ec167d281339a5606e481226f48a (MD5) Previous issue date: 2000 / The main focus of this research was the isolation of a substance with a strong convulsant action from the secretions of the toad Bufo paracnemis, Lutz, parotid glands, determination of its chemical structure and its behavioral and electrographic effects on central nervous system. This substance was purified in large amounts using a reverse-phase high-performance liquid chromatography (HPLC), with a C-18 preparative column (shim-pack prep. ODS 2,5 x 30 cm). Its chemical structure was elucidated using high resolution Nuclear Magnetic Resonance analysis, allowing its identification as a steroid of the bufodienolide type, already known in the literature as Marinobufagin (14beta-15beta-epoxy-3beta,5beta-dihidroxy-20,22-bufadienolide). Our results based on behavioral and electrographic analysis showed central effects induced by systemic administration of Marinobufagin in rats and mice. The animals presented severe neurotoxic effects as circle-like movements, tachypnea, mild tremor of the head , a whole body tremor , myoclonic movements of the fore or hindlimbs, tonic-clonic seizures and death. Marinobufagin DL50 was 10.5 ± l.5 mg/kg for mice and 25.0 ± 2.0 mg/kg for rats, both through intraperitoneal injection. This strong convulsant activity is dose-dependent and 5.0 mg/kg doses for mice and 20.0 mg/kg for rats, both intraperitoneal (IP), already showed behavioral changes that evolved to generalized tonic-clonic seizures. Marinobufagin induced seizures that ended up in status epilepticus that lasted more than an hour. Seizures decreased in almost 80% of the animals treated with Diazepan (10.0 and 12.5 mg/kg, IP) even though some of these animals continued to show seizures in the electrographic recordings. Phenobarbital didn’t block seizures induced by Marinobufagin. Phenitoin was able to block generalized tonic-clonic seizures in all animals of the group, suggesting an action involving changes in monovalent cations. Our results suggest that Marinobufagin could represent a pharmacological tool for the development of an epilepsy experimental model, since it had fulfilled the following requirements: i) showed epileptiform activity in electrographic recordings; ii) seizures were blocked by anticonvulsant drugs such as Diazepan and Phenitoin, an essential requirement for the evaluation of the effects of new drugs to be used in epilepsy treatment. / O principal enfoque desta pesquisa direcionou-se no sentido de isolar uma substância com forte poder convulsivante, presente nas secreções obtidas das glândulas parotóides do sapo Bufo paracnemis, Lutz, determinar sua estrutura química e realizar estudos farmacológicos centrais deste composto. Através de processos de fracionamento, utilizando o sistema de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), acoplado a uma coluna preparativa C-18 de fase reversa (shim-pack prep. ODS 2,5 x 30 cm), obtivemos essa substância pura em grandes quantidades. Sua estrutura química foi elucidada através da técnica de Ressonância Magnética Nuclear. Trata-se de um esteróide cardiotônico, um Bufadienolídeo, contendo um anel esteróide clássico, acoplado a um grupo lactônico, denominado Marinobufogenina (14beta -15beta - epoxi - 3beta - 5beta-dihidroxi - 20, 22 - bufadienolídeo). Nossos resultados, baseados em análise comportamental e eletrográfica, mostraram efeitos centrais induzidos pela administração sistêmica de Marinobufogenina em ratos e em camundongos. Os animais apresentaram severos efeitos neutóxicos, tais como movimentos circulares, automatismos gustatórios, taquipnéia, clonias de cabeça e de patas, tremores, convulsões tônico-clônicas generalizadas, status epilepticus e morte. A DL50 de Marinobufogenina foi de 10,5 ±1,5 mg/kg para camundongos e de 25,0 ± 2,0 mg/kg para ratos, ambos por via intraperitoneal. A administração de Marinobufogenina também foi efetiva através de outras vias (subcutânea, oral, endovenosa, intramuscular). A forte atividade convulsivante dessa substância é dose-dependente e doses de 5,0 mg/kg para camundongos e de 20,0 mg/kg para ratos , ambos por via intraperitoneal, já evidenciam alterações comportamentais que evoluem para convulsões tônico-clônicas generalizadas, acompanhadas do registro eletroencefalográfico que apresenta descargas epilépticas no córtex e hipocampo. Marinobufogenina induziu o aparecimento de crises convulsivas culminando em status epilepticus que persistiu por mais de uma hora. Observou-se uma redução das convulsões em aproximadamente 80% dos animais tratados com Diazepam (10,0 e 12,5 mg/kg, i.p.), enquanto no registro eletroencefalográfico as crises epilépticas permaneceram em alguns dos animais submetidos a esse tratamento. O Fenobarbital (50 mg/kg, i.p.) não bloqueou as crises comportamentais induzidas por Marinobufogenina . A Fenitoína foi capaz de reverter as convulsões tônico-clônicas generalizadas em todos os animais do grupo, sugerindo uma ação através de envolvimento na alteração de cátions monovalentes. Estudos bioquímicos e eletrofisiológicos mais aprofundados deverão ser realizados para confirmar essa hipótese. Nossos resultados sugerem que a Marinobufogenina pode constituir-se numa ferramenta farmacológica para o desenvolvimento de um modelo experimental de epilepsia, uma vez que preencheu requisitos importantes, tais como : i) demonstrou a presença de atividade epileptiforme nos registros eletroencefalográficos; ii) as crises convulsivas foram bloqueadas por anticonvulsivantes como o Diazepam e Fenitoína, requisito essencial para a avaliação do efeito de novas drogas a serem utilizadas no tratamento da epilepsia.

This thesis is focused on polymorphism of MDR1 gene c.-6-180T>G, which causes phenobarbital resistance. Phenobarbital is one of the most commonly used drug against epilepsy, which is one of the most common neurological disease in dogs with frequency between 0,5-5 % according to breed. This mutation has so far been detected only in the border collie breed, which manifests up to 30 percent resistance to the treatment of epilepsy. In the text is subscribed border collie breed, dog epilepsy and gene MDR1. Methodical part is focused on detection of the polymorphism in model population of 82 dogs. The results agree with previous studies and confirm frequency of mutant alleles 32 % within the population.

Bakgrund: I Sverige förekommer epilepsi hos 1-2 % av alla hundar. De första anfallen visar sig oftast när hunden är mellan ett och sex år gammal. Det nuvarande förstahands­preparatet är fenobarbital, en substans som ökar tröskeln för elektrisk stimulering av motorcortex samt minskar monosynaptisk transmission som leder till minskad neuronal retbarhet. I februari 2013 registrerades ett nytt antiepileptikum med det verksamma äm­net imepitoin. Imepitoin är en partiell agonist som binder till bensodiazepinsätet på GABAA-receptorn. Det förstärker de GABAA-receptormedierade effekterna på neuro­nen samt har en svag kalciumblockerande verkan. Syfte: Arbetets syfte var att undersöka om imepitoin har förutsättningar att bli det nya förstahandspreparatet vid behandling av idiopatisk epilepsi. Vidare var syftet att under­söka i vilken utsträckning imepitoin fungerar som antiepileptikum samt vilken biverk­ningsprofil det har. Resultat: Behandling med imepitoin gav en sänkning av antalet epileptiska anfall per månad (MSF), liknande den som erhölls vid fenobarbitalbehandling. Imepitoin sänkte MSF både som monoterapi och i kombination med fenobarbital eller kaliumbromid. Biverkningsprofilen var överlag skonsammare för imepitoin jämfört med fenobarbital. Fenobarbital visade en leverpåverkan medan imepitoin påverkade kolesterolvärdet. Slutsats: Imepitoin har en antiepileptisk effekt, liknande den som fås vid behandling med fenobarbital. Behandling med imepitoin kan ske både som mono- samt kombina­tionsterapi. Den mildare biverkningsprofilen talar för användning av imepitoin. Samti­digt har fenobarbital använts under en längre tid så biverkningar vid långtids­användning är mer välkända än de vid imepitoinanvändning. / Background: In Sweden, approximately 1-2 % of all dogs suffer from epilepsy. The first seizures often occur when the dog is between one and six years old. In Sweden the first-line drug is phenobarbital, a substance which increases the threshold of electrical stimulation in the motor cortex. It also decreases synaptic transmission which leads to decreased neuronal excitability. In February 2013 a new antiepileptic drug was regis­tered with imepitoin as active substance. Imepitoin is a partial agonist which binds to the benzodiazepine binding site at the GABAA receptor and amplifies the effects medi­ated by GABAA receptors at the neurons. Additionally, imepitoin has a weak calcium channel blocking effect. Objective: The main aim of the study was to examine if imepitoin should be the first-line drug instead of phenobarbital when treating dogs diagnosed with idiopathic epi­lepsy. A further aim was to look into which effect imepitoin had in controlling the epilepsy and which adverse effects were experienced when dogs are treated with imepitoin. Results: Treatment with imepitoin resulted in a decrease in monthly seizure frequency (MSF), similar to the decrease seen upon treatment with phenobarbital. Imepitoin was decreasing MSF both when used as monotherapy and in combination with phenobarbital or potassium bromide. The adverse effects were in general less severe with imepitoin than with phenobarbital. Treatment with phenobarbital affected the liver while treatment with imepitoin affected the cholesterol levels. Conclusion: Imepitoin has a good antiepileptic effect, similar to that of phenobarbital. Treatment with imepitoin can be used both as monotherapy and in combination with other antiepileptic drugs. Less severe adverse effects makes imepitoin a possible choice for treating idiopathic epilepsy in dogs. On the other hand, phenobarbital has been used during a long period of time and adverse effects of long term use are therefore better known than for imepitoin.

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2016-09-29T13:44:49Z No. of bitstreams: 1 PDF - Palas Atenéia Dantas de Medeiros.pdf: 2158304 bytes, checksum: bf27754a7517b804bb7e707c432b84ad (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2016-10-05T16:59:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Palas Atenéia Dantas de Medeiros.pdf: 2158304 bytes, checksum: bf27754a7517b804bb7e707c432b84ad (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-05T16:59:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Palas Atenéia Dantas de Medeiros.pdf: 2158304 bytes, checksum: bf27754a7517b804bb7e707c432b84ad (MD5) Previous issue date: 2014-08-27 / Proeac/Proapex - UEPB / Introduction: This study characterized the profile of patients treated at the “Alcides Carneiro” University Hospital (HUAC), users of phenobarbital in order to support actions of therapeutic drug monitoring. Methods: Fifty patients were interviewed using a standardized questionnaire. Results: It was observed that 50% of patients have been using the drug for a long time (7.68 years on average). About 74% of respondents are under monotherapy and 59.5% of these have their seizures controlled. The patients under monotherapy have more chance of success in controlling seizures. The main anticonvulsant drug combination observed was phenobarbital with carbamazepine (66% of patients). Sedation and dizziness are among the main adverse effects, reported by 34% of patients. Monotherapy seems to be a protective factor only for adverse effect dizziness (OR=3.1). Conclusions: The analysis of these and other results presented in this paper may be useful in promoting rational use of anticonvulsants at the HUAC. / Este trabalho caracteriza o perfil clínico e epidemiológico dos pacientes atendidos no Hospital Universitário Alcides Carneiro (HUAC), que usam fenobarbital como anticonvulsivante, a fim de subsidiar ações de monitorização terapêutica. Entrevistou-se 50 pacientes, de 2011 a 2012, mediante um questionário padronizado. Observou-se que, 74% dos entrevistados estão sob monoterapia e 59,5% destes possuem suas crises controladas. Nos pacientes sob politerapia (26%) o índice de controle das crises é de 23,07%. É possível afirmar que pacientes sob monoterapia têm mais chance de sucesso no controle das crises convulsivas (Odds Ratio = 4,400). A principal associação anticonvulsivante observada foi do fenobarbital com a carbamazepina (66%). Entre os efeitos adversos relatados destacam-se a sedação e a tontura (34% dos pacientes). A monoterapia parece se constituir como fator de proteção apenas para o efeito adverso tontura (OR de 3,1). Esses resultados poderão ser úteis na promoção do uso racional de anticonvulsivantes no HUAC.

Orientador: Aricio Xavier Linhares / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-10T18:18:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Soto_DoraAmparoEstrada_D.pdf: 2535722 bytes, checksum: 550a33ae626a5a9a30ff32773e785904 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A Entomologia Forense utiliza dados de desenvolvimento e aspectos ecológicos de insetos necrófagos com o objetivo de auxiliar as investigações criminais, entre outros, no cálculo da estimativa do intervalo pós-morte (IPM). Igualmente, pode-se caracterizar a causa da morte quando essas drogas são detectadas em insetos imaturos que se alimentam dos corpos em decomposição. Além disso, os insetos podem servir como uma ferramenta alternativa para análises toxicológicas na ausência de tecidos e fluídos coletados habitualmente para este fim. Trabalhos recentes têm demonstrado que a presença de drogas ou toxinas em tecidos em decomposição pode alterar a taxa de desenvolvimento de insetos que usam este recurso como fonte alimentar. A ausência de conhecimentos dos possíveis interferentes no ciclo biológico pode gerar dados imprecisos sobre a idade do inseto, o que prejudicaria a estimativa do IPM. O ramo da Entomologia Forense que estuda os aspectos acima mencionados é denominado Entomotoxicologia. Rotineiramente, é necessário fazer testes preliminares em laboratório com dieta artificial e com certas substâncias para criar um banco de dados que possa ser útil como um padrão para investigar e quantificar as modificações que podem ocorrer com insetos coletados numa cena criminal. O objetivo principal deste estudo foi observar o efeito dos barbitúricos, fenobarbital (Gardenal®) e tiopental (Thiopentax®) em diferentes dosagens no desenvolvimento de imaturos de três espécies de califorídeos ¿ Chrysomya albiceps (Wiedemann), Chrysomya megacephala (Fabricius) e Chrysomya putoria (Wiedemann) (Diptera). Foi observado que os dois barbitúricos afetaram significativamente o desenvolvimento larval das três espécies, sendo que na maior dosagem a taxa de mortalidade foi elevada e na menor, o desenvolvimento retardou em até duas vezes, quando comparado ao grupo controle (sem adição de substância química). O conhecimento da ação destes barbitúricos no desenvolvimento dos imaturos dessas espécies de interesse forense pode contribuir para evitar erros no cálculo da estimativa do IPM. Também foi avaliada a taxa de desenvolvimento de Chrysomya albiceps (Wiedemann) e Chrysomya megacephala (Fabricius) (Diptera) criadas em diferentes dietas artificiais contendo tecidos de origem animal e comparadas a uma dieta já descrita em literatura, a qual não contém tecido animal, e a um grupo controle, onde foi usada somente a carne moída. A eficiência de cada dieta foi observada levando em conta o ganho de massa dos imaturos, o tempo de desenvolvimento larval, a taxa de sobrevivência de pupas e adultos, o intervalo de emergência e o tamanho dos adultos. Assim, foi proposta uma nova dieta artificial proporcionando uma melhor uniformidade para a adição de drogas e sobrevivência das espécies estudadas, tornando mais eficiente a criação e os testes biológicos com os dípteros necrófagos em laboratório / Abstract: The Forensic entomology utilizes developmental data and ecological aspects of necrophagic insects with the aim of helping criminal investigations, being able to, for instance, estimate the post mortem interval (PMI). Likewise, the death cause may be detected when these drugs are detected in immature insects from the same substrate. Besides, the insects can work as an alternative tool for toxicological analyses in the absence of tissues and fluids usually collected for this purpose. Recent investigations have been demonstrating that the presence of drugs or toxins in decomposing tissues may alter the development rate of insects that use such resource as a food substrate. The non-observance of this knowledge may lead to imprecise conclusions on the insect age, producing mistakes on the PMI estimative. This field of forensic entomology is named entomotoxicology. On routine basis, laboratory preliminary tests using artificial diet and certain substances are necessary to create a data bank that could be useful as a pattern to investigate and quantify the modifications that may occur with insects collected from death scenes. The present study aimed to verify the effect of the barbiturics phenobarbital (Gardenal®) and thiopental (Thiopentax®) in three concentrations, in the development of immatures of three Calliphoridae species ¿ Chrysomya albiceps (Wiedemann), Chrysomya megacephala (Fabricius) and Chrysomya putoria (Wiedemann) (Diptera). The barbiturics significantly affected the larval development of the three species, when the highest mortality rate occurred with the highest concentrations, and in the other concentrations the development retarded twice as much compared to the control group (without chemic substance). The knowledge on the action of these barbiturics in the immature development of these species of forensic interest can contribute to minimize the errors in the estimative of the PMI. A comparison of the developmental rate of the blowflies Chrysomya albiceps (Wiedemann), and Chrysomya megacephala (Fabricius) (Diptera) reared on: a) artificial diets containing animal tissues; b) artificial diet without animal tissue; and c) a control group (which contained only meat) was thus carried out. The efficiency of each diet was evaluated by observing the gain of immatures¿ weight, larvae developmental time, viability percentage obtained from pupae and adults, emergence interval and adult size. To make the rearing and biological tests with the necrophagic dipterans in laboratory more efficient, a new artificial diet was proposed, leading to a better uniformity and increased survivorship of the species studied. / Doutorado / Parasitologia / Doutor em Parasitologia

Orientadores: Lea Rodrigues Simioni, Yoko Oshima Franco / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-09T02:12:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barcelos_CarolineCoutinhode_M.pdf: 1481920 bytes, checksum: 51a5dae81283795439bd5ed51ac09f60 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Atracúrio (ATC) e rocurônio (ROC) são bloqueadores neuromusculares de ação intermediária. Neste estudo, seus efeitos neuromusculares foram investigados in vitro e in vivo em ratos pré-tratados, via gavagem (7d), com os anticonvulsivantes (AC) carbamazepina (CBZ, 40 mg/kg) e fenobarbital (FB, 20 mg/kg) e sacrificados no 8º dia, sob anestesia com uretana. Os resultados foram comparados com a condição-controle (ratos não tratados com AC). A exposição crônica a AC pode determinar a indução de enzimas microssomais responsáveis pela metabolização (oxidação) de fármacos. Para o controle desse fenômeno farmacológico foram determinadas as concentrações enzimáticas de citocromo P450 e b5 redutase, em microssomos hepáticos de ratos tratados com AC, e comparados aos controles. As preparações in vitro e in vivo foram montadas de acordo com as técnicas de Bulbring e de Leeuwin e Wolters, respectivamente. As concentrações utilizadas dos bloqueadores nas preparações in vitro e in vivo foram, respectivamente, 20 µg/mL e 0,5 mg/kg para atracúrio (ATC); 4 µg/mL e 0,6 mg/kg para rocurônio (ROC). Cada protocolo teve um n=5 e as respostas foram observadas por 60 min. Os resultados tanto in vitro quanto in vivo mostraram que o pré-tratamento com a carbamazepina reduziu a resposta contrátil em cerca de 30%. Sob sua vigência, não houve alteração do bloqueio produzido pelo atracúrio e pelo rocurônio, possivelmente porque o tempo de tratamento com a carbamazepina não foi suficiente para causar indução enzimática. Em relação ao fenobarbital, os resultados in vitro e in vivo mostraram nenhuma alteração significativa sob a resposta contrátil. Sob sua vigência, diminuiu a sensibilidade do ATC em produzir o bloqueio neuromuscular in vitro. Contudo, in vivo potencializou o bloqueio neuromuscular de ambos os bloqueadores estudados. Essas alterações observadas em ambos os modelos experimentais podem ser devidas à indução ocorrida com o fenobarbital, conforme comprovado pela concentração de citocromo P450 (0,69 nmol/mg proteína) e b5 redutase (0,62 nmol/mg proteína) / Abstract: Atracurium (ATC) and rocuronium (ROC) are neuromuscular blockers of intermediate action. In this study, the neuromuscular effects had been investigated in vitro and in vivo in treated rats, by gavage (7d), with the anticonvulsantes (AC) carbamazepine (CBZ, 40 mg/kg) and phenobarbital (FB, 20 mg/kg) and sacrificed on the eight day, under anesthesia with urethane. The results had been compared with the control-condition (rats not treated AC). The chronic exposition the AC can determine the induction of microsomes enzyme for the responsible metabolization (oxidation) of drugs. For the control of this pharmacologic phenomenon the enzymatic concentrations of P450 and b5 cytochromes had been determined, in livers microsomes of rats treated with AC, and compared with the controls. The preparations in vitro and in vivo had been followed the Bulbring and Leeuwin and Wolters techniques, respectively. The in vitro and in vivo concentrations were 20 µg/ml and 0.5 mg/kg, respectively, for atracurium (ATC); and 4 µg/ml and 0.6 mg/kg for rocuronium (ROC). Each protocol presented n=5 and the answers were calculated during 60 minutes. The in vitro and in vivo results showed that treatment with carbamazepine reduced the extent of muscle response in about 30%. Under its validity, did not alter the extent of the muscle response block produced by atracurium and rocuronium possibly because the period of time of carbamazepine treatment was not enough to cause enzymatic induction. Regarding phenobarbital, the in vitro and in vivo results did not alter significant the extent of the muscle response block produced. Under its validity, reduced the ATC sensitivity the block neuromuscular in vitro produced. However, in vivo increased the neuromuscular block of both the blockers studied. These alterations observed in both the experimental models can have occured induction with the phenobarbital, as proven P450 (0,69 nmol/mg protein) and b5 (0,62 nmol/mg protein) of cytochrome concentration / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Univerzita Karlova 1. lékařská fakulta Studijní program: Biomedicína Studijní obor: Preventivní medicína MUDr. Karolína Hronová Polymorfismus genů účastnících se v metabolismu léčiv jako potenciální cíl prevence závažných komplikací léčby u novorozenců a dětí Polymorphism of drug metabolizing enzymes as a potential target of prevention of serious treatment complications in neonates and infants Disertační práce- ABSTRAKT V ANGLICKÉM JAZYCE Školitel: prof. MUDr. Ondřej Slanař, Ph.D. Konzultant: MUDr. Pavla Pokorná, PhD. Praha, 2018 Abstract Background and aims: The safety of analgosedative drugs includes drug interactions, adverse effects, withdrawal syndrome and drug dependence are factors that significantly affect morbidity and mortality. Its prevention is critical for quality improvement of care in paediatric patients. The aim of the thesis was to evaluate the prediction of efficacy and safety of analgosedative drugs sufentanil, midazolam, tramadol and valproic acid in neonates and children based on the occurrence of selected pharmacogenetic biomarkers. The incidence of drug interactions of phenobarbital with other analgosedative drugs has also been evaluated. Methodology: The thesis is based on two studies conducted on Intensive and Resuscitation Care Unit of the Clinic of Paediatric and Adolescent...

O fígado desempenha um papel central na disposição metabólica de vários agentes químicos endógenos e exógenos, incluindo quase todos os fármacos. Neste processo de biotransformação pode ocorrer a formação de metabólitos intermediários altamente reativos que se não forem convenientemente eliminados podem interagir com macromoléculas celulares lesando o órgão. A hepatotoxicidade idiossincrática associada ao uso de antiepilépticos aromáticos (AEA) é bem conhecida e tem sido atribuída ao acúmulo de intermediários tóxicos (areno-óxidos) formados durante a bioativação hepática. Embora a participação de processos imunológicos no mecanismo de ação tóxica dos AEA tenha sido demonstrada, existe a possibilidade de mecanismos adjuvantes envolvendo a toxicidade mitocondrial, evento ainda não explorado na literatura científica. Neste estudo avaliou-se, in vitro, o efeito dos AEA: carbamazepina, fenitoína e fenobarbital, bem como dos seus respectivos metabólitos na função mitocondrial e na indução do estresse oxidativo em mitocôndrias de fígado de rato, como possível mecanismo de ação hepatotóxica desses fármacos. Sistema microssomal hepático de rato foi utilizado para bioativação dos fármacos e produção dos respectivos metabólitos in vitro. Sem a bioativação, somente o fenobarbital (em concentrações elevadas) apresentou efeitos inibidores sobre o estado 3 da respiração, síntese de ATP e potencial de membrana, sem, contudo induzir o estresse oxidativo. Quando bioativados, todos os fármacos apresentaram efeitos sobre a função mitocondrial através de processo mediado por estresse oxidativo. Todos os fármacos bioativados afetaram a respiração mitocondrial, causando diminuição do consumo de oxigênio no estado 3, diminuição do RCR e aumento do consumo de oxigênio no estado 4. Foram também evidenciadas alterações na captação/liberação de cálcio, inibição da síntese de ATP, diminuição do potencial de membrana e inibição do intumescimento mitocondrial induzido pelo cálcio. A oxidação de proteínas e lipídeos mitocondriais foi demonstrada pela formação de proteínas carboniladas, diminuição de proteínas com grupamentos sulfidrila, aumento de malondialdeído (MDA) e pela oxidação da cardiolipina. O sistema de defesa antioxidante mitocondrial também foi afetado, como evidenciado pela diminuição da relação GSH/GSSG (glutationa reduzida/glutationa oxidada). Os resultados sugerem fortemente a participação do dano mitocondrial, mediado pelo estresse oxidativo causado pelos metabólitos dos AEA, no desenvolvimento da hepatotoxicidade idiossincrática induzida por esses fármacos. / The liver plays a central role in the metabolic disposition of various endogenous and exogenous chemicals, including almost all drugs. During the biotransformation process, highly reactive metabolites can be produced, and if they are not detoxified, they can interact with cellular macromolecules and cause organ injury. Idiosyncratic hepatotoxicity is a well-known complication associated with aromatic antiepileptic drugs (AAED), and it has been suggested to occur due to the accumulation of toxic arene oxide metabolites. Although the participation of an immune process in the toxic action mechanism of AAED has been demonstrated, adjuvant mechanisms involving mitochondrial toxicity is also possible and such event has not been studied yet. Therefore, we investigated, in vitro, the effects of carbamazepine (CB), phenytoin (PT), phenobarbital (PB) and their respective metabolites on the hepatic mitochondrial function as well as their ability to induce oxidative stress in rat liver mitochondria, as a possible hepatotoxic action mechanism. The murine hepatic microsomal system was used to bioactivate the drugs and to produce the anticonvulsant metabolites in vitro. As an unaltered drug, only phenobarbital (in high concentrations) presented inhibitory effects on state 3 respiration, ATP synthesis, and membrane potential; however, it did not induce oxidative stress. All the bioactivated drugs affected mitochondrial function through an oxidative stress-mediated process. All the bioactivated drugs affected mitochondrial function causing decrease in state 3 respiration, decrease in RCR and increase in state 4 respiration. They also caused impairment of Ca+2 uptake /release, decrease in ATP synthesis, decrease in membrane potential and inhibition of calcium-induced swelling. Oxidation of proteins and lipids was evidenced by carbonil proteins formation, decrease in thiol proteins, increase in malonaldehyde (MDA) and cardiolipin oxidation. The mitochondrial antioxidant defense system was also affected, as evidenced by the decreased GSH/GSSG ratio (reduced glutathione/oxidized glutathione). Results strongly suggest the involvement of mitochondrial damage, which is mediated by the oxidative stress caused by the AAED metabolites, in the development of AAED-induced idiosyncratic hepatotoxicity.

O fígado desempenha um papel central na disposição metabólica de vários agentes químicos endógenos e exógenos, incluindo quase todos os fármacos. Neste processo de biotransformação pode ocorrer a formação de metabólitos intermediários altamente reativos que se não forem convenientemente eliminados podem interagir com macromoléculas celulares lesando o órgão. A hepatotoxicidade idiossincrática associada ao uso de antiepilépticos aromáticos (AEA) é bem conhecida e tem sido atribuída ao acúmulo de intermediários tóxicos (areno-óxidos) formados durante a bioativação hepática. Embora a participação de processos imunológicos no mecanismo de ação tóxica dos AEA tenha sido demonstrada, existe a possibilidade de mecanismos adjuvantes envolvendo a toxicidade mitocondrial, evento ainda não explorado na literatura científica. Neste estudo avaliou-se, in vitro, o efeito dos AEA: carbamazepina, fenitoína e fenobarbital, bem como dos seus respectivos metabólitos na função mitocondrial e na indução do estresse oxidativo em mitocôndrias de fígado de rato, como possível mecanismo de ação hepatotóxica desses fármacos. Sistema microssomal hepático de rato foi utilizado para bioativação dos fármacos e produção dos respectivos metabólitos in vitro. Sem a bioativação, somente o fenobarbital (em concentrações elevadas) apresentou efeitos inibidores sobre o estado 3 da respiração, síntese de ATP e potencial de membrana, sem, contudo induzir o estresse oxidativo. Quando bioativados, todos os fármacos apresentaram efeitos sobre a função mitocondrial através de processo mediado por estresse oxidativo. Todos os fármacos bioativados afetaram a respiração mitocondrial, causando diminuição do consumo de oxigênio no estado 3, diminuição do RCR e aumento do consumo de oxigênio no estado 4. Foram também evidenciadas alterações na captação/liberação de cálcio, inibição da síntese de ATP, diminuição do potencial de membrana e inibição do intumescimento mitocondrial induzido pelo cálcio. A oxidação de proteínas e lipídeos mitocondriais foi demonstrada pela formação de proteínas carboniladas, diminuição de proteínas com grupamentos sulfidrila, aumento de malondialdeído (MDA) e pela oxidação da cardiolipina. O sistema de defesa antioxidante mitocondrial também foi afetado, como evidenciado pela diminuição da relação GSH/GSSG (glutationa reduzida/glutationa oxidada). Os resultados sugerem fortemente a participação do dano mitocondrial, mediado pelo estresse oxidativo causado pelos metabólitos dos AEA, no desenvolvimento da hepatotoxicidade idiossincrática induzida por esses fármacos. / The liver plays a central role in the metabolic disposition of various endogenous and exogenous chemicals, including almost all drugs. During the biotransformation process, highly reactive metabolites can be produced, and if they are not detoxified, they can interact with cellular macromolecules and cause organ injury. Idiosyncratic hepatotoxicity is a well-known complication associated with aromatic antiepileptic drugs (AAED), and it has been suggested to occur due to the accumulation of toxic arene oxide metabolites. Although the participation of an immune process in the toxic action mechanism of AAED has been demonstrated, adjuvant mechanisms involving mitochondrial toxicity is also possible and such event has not been studied yet. Therefore, we investigated, in vitro, the effects of carbamazepine (CB), phenytoin (PT), phenobarbital (PB) and their respective metabolites on the hepatic mitochondrial function as well as their ability to induce oxidative stress in rat liver mitochondria, as a possible hepatotoxic action mechanism. The murine hepatic microsomal system was used to bioactivate the drugs and to produce the anticonvulsant metabolites in vitro. As an unaltered drug, only phenobarbital (in high concentrations) presented inhibitory effects on state 3 respiration, ATP synthesis, and membrane potential; however, it did not induce oxidative stress. All the bioactivated drugs affected mitochondrial function through an oxidative stress-mediated process. All the bioactivated drugs affected mitochondrial function causing decrease in state 3 respiration, decrease in RCR and increase in state 4 respiration. They also caused impairment of Ca+2 uptake /release, decrease in ATP synthesis, decrease in membrane potential and inhibition of calcium-induced swelling. Oxidation of proteins and lipids was evidenced by carbonil proteins formation, decrease in thiol proteins, increase in malonaldehyde (MDA) and cardiolipin oxidation. The mitochondrial antioxidant defense system was also affected, as evidenced by the decreased GSH/GSSG ratio (reduced glutathione/oxidized glutathione). Results strongly suggest the involvement of mitochondrial damage, which is mediated by the oxidative stress caused by the AAED metabolites, in the development of AAED-induced idiosyncratic hepatotoxicity.

Bakgrund: Det finns läkemedel som ger ökad risk för vitamin D-brist. En kartläggningsstudie av hur patientgrupper med olika riskläkemedel hanteras i Landstinget i Kalmar län har inte gjorts tidigare. En sådan studie är önskvärd, för att få en nulägesanalys och öka medvetenheten bland hälso-och sjukvårdspersonal om hur läkemedel påverkar D-vitaminstatus. Syfte: Syftet var att undersöka omfattningen av ordinerade riskläkemedel hos samtliga patienter, samt hos patientgruppen ≥75år och hur dessa handläggs avseende ordination av supplementering (samtidig behandling med läkemedel innehållande vitamin D3 / kalcium och vitamin D3,), provtagning och analysresultat avseende kalcidiol i serum. Metod: Riskläkemedel för vitamin D-brist identifierades. Inklusionskriterier för studien var patienter med de fördefinierade riskläkemedlen med ordinationer under 2012 och/eller 2013. Populationen som ingick i studien var patienter i Landstinget i Kalmar län. Data hämtades från patientdatasystemet Cambio Cosmic. Utifrån dessa data analyserades förekomst av supplementering, provtagning för S-25(OH)D kalcidiol och analyssvar. Materialet strukturerades efter respektive läkemedel avseende kön och ålder (≥75 år.) Resultat: 9118 individer ordinerades något av riskläkemedelen orlistat, sevelamer, kolestyramin, kolestipol, efavirenz, prednison, prednisolon, fenytoin, fenobarbital eller karbamazepin. 31% av patienterna som ordinerats riskläkemedel var ≥75 år. Totalt behandlades 22% med supplementationspreparat av de som ordinerats riskläkemedel. I åldersgruppen ≥75 år behandlades 43% med supplement. 61% av de supplementerade patienterna var ≥75 år. Totalt provtogs enbart 4,1% avseende kalcidiol av de som ordinerats riskläkemedel. Av dessa hade 37% av de provtagna en bristnivå av S-25(OH)D (≤50 nmol/L) vid första provtillfället. 57% av de som visade brist supplementerades. Endast 8,3% av de som hade en brist följdes upp med ytterligare en eller flera provtagningar. Av patienterna ≥75 år provtogs 4,1% av patienterna i åldersgruppen. Detta innebär att 31% av de som provtogs var ≥75år. 39% led brist. Av de patienter ≥75 år som hade led brist supplementerades 65% av individerna. Konklusion: Det finns förbättringsutrymme för implementering av kunskap kring riskläkemedel i Landstinget i Kalmar län. / Introduction: Some drugs increase the risk for vitamin D deficiency. To date, no survey has been performed in Kalmar County about how patients medicated with risk pharmaceuticals are handled. Such a survey would be desirable in order to increase knowledge among healthcare workers about how substances interfere with vitamin D status. Aim: The aim was to examine the extent to which risk pharmaceuticals are prescribed among all patients and among patients aged ≥75, and to investigate how these patients are treated with respect to supplementation (drugs containing vitamin D3 / Calcuim and vitamin D3), blood sampling and analysis of serum calcidiol levels. Method: Drugs interfering with vitamin D were identified. Inclusion criteria for the survey were patients that had been prescribed the pre-defined risk pharmaceuticals during 2012 and/ or 2013. The surveyed population was residents in Kalmar County. Data were collected from the patient database Cambio Cosmic. From these data analyzes were made about the occurrence of: supplementation, sampling of S-25(OH)D calcidiol and test results. The collected data were arranged by substance, gender and age (elderly aged ≥75). Results: 9118 patients were prescribed at least one of the risk pharmaceuticals; orlistat, sevelamer, cholestyramine, colestipol, efavirenz, prednisol, prednison, phenytoin, phenobarbital or carbamazepine. 31% of these were aged ≥75. Overall, 22% of the patients were prescribed supplements. Out of these, 61% were elderly. Among the patients that had been prescribed risk pharmaceuticals a minority, 4,1% of the patients were sampled for calcidiol. 37% of these had deficiency in S-25(OH)D (≤50 nmol/L). 8.3% of patients with a vitamin D deficiency were sampled more than once. Out of the patients with deficiency 57% were treated with supplements. Out of the elderly patients prescribed risk pharmaceuticals, 4.1% of the patients were tested for calcidiol. This means that 31% of the tested patients were aged ≥75 and 39% of these had a deficiency. Out of the elderly patients with deficiency, 65% were treated with supplements. Conclusion: In Kalmar County, much can be done in order to better implement the existing knowledge about drugs that increase the risk for vitamin D deficiency. / Betydelsen av bra D-vitaminstatus för äldres hälsa – Hur stor är förekomsten av D-vitaminbrist hos äldre i Kalmar län och hur påverkar läkemedel D-vitaminstatus