Orientador: Vanderlan da Silva Bolzani / Banca: Marcia Nasser Lopes / Banca: José Angelo Slveira Zuanazzi / Banca: Horácio Adolfo Heinzen Gozález / Resumo: Os testes biológicos realizados por pesquisadores colaboradores do NuBBE para as espécies selecionadas para este estudo Brosimum glaziovii e Kielmeyera variabilis indicaram K. variabilis como uma importante fonte de metabólitos especiais bioativos. O fracionamento bioguiado da fração AcOEt dos galhos de K. variabilis para isolamento de substâncias com potencial antimalárico foi realizado via teste químico com -hematina e in vitro com Plasmodium falciparum, levando a identificação das xantonas oxigenadas 3,6-diidroxi-1,4,8-trimetoxixantona, 3,5-diidroxi-4-metoxixantona, 3,4-diidroxi-6,8-dimetoxixantona, 3,4-diidroxi-2-metoxixantona, 5-hidroxi-1,3- dimetoxixantona, 2,3-dimetoxi-4-hidroxixantona, 3-hidroxi-2-metoxixantona e 2-hidroxi- 1-metoxi-xantona e o xantonolignóide kielcorina. Dentre as substâncias isoladas, o xatonolignóide kielcorina foi considerado ativo quando comparado ao padrão cloroquina. A avaliação do potencial tripanocida também foi realizada para as xantonas isoladas e dentre estas, a 3,4-diidroxi-2-metoxixantona foi a mais ativa, principalmente para a cepa resistente ao benzonidazol (cepa Bolívia). Na fração EHFB das folhas de B. glaziovii foi observado o potencial antichagásico desta espécie. Os resultados observados para os ensaios antioxidantes levaram ao isolamento dos flavonóides quercitrina, podocarpusflavona A e da mistura de quercetina-3-Oglicosídeo e quercetina-3-O-galactosídeo, evidenciando a importância dos grupos catecólicos na potencialização da ação antioxidante. O estudo bioguiado pela atividade antimicrobiana com seis cepas de Staphylococcus aureus resistentes à meticilina culminou no isolamento de um derivado prenilado do floroglucinol (HGK-1) o qual demonstrou ser responsável pela potente atividade demonstrada pela fração hexânica dos galhos de K. variabilis. As xantonas isoladas tiveram seu potencial antimicrobiano... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Several biological activities have been carried out by NuBBE's collaborators aiming the identification of active extracts from plant species, and Brosimum glaziovii and Kielmeyera variables showed to be important sources of bioactive secondary metabolites. Bio-guided fractionation of the EtOAc bioactive fraction of the branches of K. variabilis by using of the chemical test -hematin, and in vitro by using of Plasmodium falciparum, led to the isolation and identification of oxygenated xanthones 3,6-dihydroxy-1,4,8-trimethoxyxanthone, 3,5-dihydroxy-4-methoxyxanthone, 3,4- dihydroxy-6,8-dimethoxyxanthone, 3,4-dihydroxy-2-methoxyxanthone, 1,3-dimethoxy- 5-hydroxyxanthone, 2,3-dimethoxy-4-hydroxyxantona, 3-hydroxy-2-methoxyxanthone and 2-hydroxy-1-methoxyxanthone and xantonolignoid kielcorin. Among the compounds isolated, the xatonolignoid keilcorine indicated activity when compared to the standard chloroquine. The assessment of potential trypanocidal was also a part of this work and among the isolated xanthones, 3,4-dihydroxy-2-methoxyxanthone showed to be the most active, especially against the resistant strain to benzonidazole (Bolivia strain). In hexane fraction of leaves from B. glaziovii was noted antichagasic potencial for this specie. The antioxidant test used in this study led to the isolation of several flavonoids with antioxidant activity: quercitrin, podocarpusflavone A and the mixture of quercetin-3-O-glucoside and quercetin-3-O-galactoside, showing the importance of catechol group for the potentiating of antioxidant activity. The bio-guided antimicrobial activity using six strains of methicillin-resistant Staphylococcus aureus resulted in the isolation of the prenylated phloroglucinol derivative (HGK-1), which proved to be responsible for the potent activity exhibited by the hexane extract of the branches of K. variabilis. The xanthones isolated were evaluated... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Wagner Vilegas / Banca: Wagner Vilegas / Banca: Jairo Kenupp Bastos / Banca: Luiz Claudio Di Stasi / Resumo: Esse trabalho é parte do projeto temático BIOTA-FAPESP: "Uso Sustentável da Biodiversidade Brasileira: Prospecção Químico-Farmacológica de Plantas Superiores" e visa contribuir com a caracterização do Bioma-Cerrado do estado de São Paulo, investigando espécies brasileiras de interesse químico-medicinal. Dentre as espécies com particular interesse estão as do gênero Guapira (Nyctaginaceae), com informações etnofarmacológicas de uso para problemas estomacais. G. noxia é conhecida popularmente como "Maria-mole" ou "Capa-rosa" e tem ocorrência no cerrado brasileiro. Essa espécie é utilizada na medicina popular como antiúlcera. Apesar do uso popular, ainda não há informações sobre a composição química e ensaios farmacológicos desta espécie e que cuja caracterização está sendo descrita pela primeira vez. O extrato metanólico das folhas de G. noxia foi fracionado por técnicas cromatográficas convencionais (Permeação em gel, HPLC) e a as substâncias resultantes foram identificadas através de métodos espectroscópicos (RMN, IV, UV e EM). Esse trabalho levou à identificação de oito heterosídeos de flanovóides (com três e duas unidades de açúcares) derivados da quercetina, da isorhamnetina e do kaempferol, além da alantoína e de um ciclitol. Além disso, foi estabelecido o perfil cromatográfico do extrato metanólico, juntamente com a quantificação do teor de compostos fenólicos e de flavonóides totais, com vistas à sua completa caracterização química. O estudo farmacológico do extrato metanólico evidenciou principalmente as atividades antiúlcera, antimicrobiana e imunomodulatória. A presença dos flavonóides e demais compostos fenólicos pode justificar os efeitos biológicos atribuídos à espécie. Como conclusão, este estudo contribuiu para aprofundar o conhecimento químicofarmacológico sobre Guapira noxia, que ocorre no cerrado brasileiro. / Abstract: This work is part of the BIOTA-FAPESP project "Sustaintable use of the Brazilian Biodiversity: Chemical and Pharmacological Prospection on Higher Plants", which intents to contribute to improve the knowledge of the biome Cerrado of the State São Paulo, Brazil. Species from the Guapira (Nyctaginaceae) genus have special interest, since they are used in folk medicine as antiulcerogenic agent. G. noxia is known in folk medicine as "Maria-mole" or "Capa-rosa" and occurs naturally in the Brazilian cerrado, being used due to its antiulcerogenic propertie. Although the folk use, there is no data about chemical and pharmacological studies on this species. We describe here the first chemical and pharmacological characterization. The methanolic extract of G. noxia leaves was fractionated by chromatography techniques (GPC, HPLC) and the substances were identified by spectrometric methods (NMR, MS, IR, UV). This approach led to identification of eight heterosides (two and three glycosides) of flavonoids derived from quercetin, isorhamnetin and kaempferol, besides one allantoin and one cyclitol. Moreover, we have established the HPLC/UV/DAD chromatographic profile of this extract, as well as the spectrophotometric quantification of phenolic compounds and flavonoids. Pharmacological investigations showed antiulcerogenic, antimicrobial and immunomodulatory properties of the methanolic extract. The presence of flavonoids and phenolic compounds may probably explain the pharmacologicals effects of the polar extract of G. noxia and their use in folk medicine. In conclusion, this study contributed to improve the knowledge of the chemistry and pharmacological activities of Guapira noxia, an species that occurs in the Brazilian cerrado. / Mestre

Resumo: 0 objetivo deste trabalho foi verificar a eficiência da técnica de milcropropagação para a espécie Piper hispidinervium, utilizando reguladores vegetais e poliaminas e verificar a influência destes sobre o desenvolvimento dos explantes (número de raízes, número de brotações, formação de calo e altura), bem como verificar influência da época de avaliação das plântulas sobre os teores de flavonóides totais, atividade antioxidante, atividade da peroxidase e teores endógenos de poliaminas livres. Microestacas obtidas da germinação in vitro foram inoculadas nos devidos tratamentos, os quais foram divididos em dois experimentos, o primeiro, utilizando concentrações de benzilaminopurina (BAP) isoladas e combinadas com ácido indolilbutírico (IBA) e o segundo, utilizando poliaminas (espermina- Spm e espermidina-Spd) adicionadas ao meio de cultura, isoladas, combinadas entre si e com BAP. Desta forma, no primeiro experimento os tratamentos foram: BAP (0,25; 0,50; 0,75 e 1,0 mg L-1), isoladas ou combinadas com IBA (0,25 mg L-1 ), o qual também foi utilizado isolado, totalizando 10 tratamentos, 3 repetições com 6 microestacas por repetição. No segundo experimento os tratamentos foram: T1: MS (testemunha); T2: 1mg L-1 BAP; T3:1mM Spd; T4: 1mM pd + 1mg L-1 BAP; T5: 1mM Spm; T6: 1mM Spm + 1mg L-1 BAP e T7: 1mM Spd + 1mM Spm. Aos 30 e 60 dias após a inoculação (DAI) foram realizadas as análises biométricas (formação de calo, número de raízes, número de brotações e altura das plântulas). No momento da inoculação (tempo 0), aos 30 e 60 DAI foram coletadas amostras para a realização das análises bioquímicas do teor de flavonóides totais, atividade antioxidante, atividade da peroxidase e teor endógeno de poliaminas livres (experimento 2). Nas condições realizadas no primeiro experimento, o IBA propiciou o maior crescimento das plântulas e induziu maior... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The purpose of this paper was to evaluate the efficiency of the technique of micropropagation for the Piper hispidinervium species, using plant growth regulators and polyamines and also evaluate their influence on formation of callus, number of roots, number of shootings and height of explants and the influence of cutting time on the tenors of contents of totals flavonoids, antioxidant activity, activity of the peroxidase and endogenous contents of free polyamines. Microcuttings obtained of the germination in vitro were inoculated in the proper treatments, they were divided into two experiments, the first experiment, using benzilaminopurine (BAP) isolated and combined with indolilbutiric acid (IBA), and the second one, using polyamines (Espermine- Spm and Espermidine- Spd) added to the culture medium, isolated, combined among them and with BAP. Thus, in the first experiment, the treatments were: BAP (0.25; 0.50; 0.75 and 1.0 mg L-1), isolated or combined with IBA (0.25 mg L-1), and it was also used isolated, totalizing 10 treatments, 3 repetitions with 6 microcuttings for repetition. In the second experiment the treatments were: T1: MS (control); T2: 1 mg L-1 BAP; T3:1 mM Spd; T4: 1 m M Spd + 1 mg L-1 BAP; T5: 1 mM Spm; T6: 1 mM Spm + 1mg L-1 BAP and T7: 1 mM Spd + 1 mM Spm. After 30 and 60 days of the inoculation (DAI) analysis were carried out (formation of callus, number of roots, number of shootings and height of explants). At the moment of the inoculation (time 0), at 30 and 60 DAI, samples were collected for the realization of biochemical analyses of contents totals of flavonoids, antioxidant activity, activity of the peroxidase and endogenous contents of free polyamines (only in the experiment 2). In the realized conditions, in the first experiment, the IBA favored the highest growth of the seedlings and induced a higher number of roots, as well as a higher content... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Elizabeth Orika Ono / Coorientador: Giuseppina Pace Pereira Lima / Banca: Carmem Silvia Fernandes Boaro / Banca: Maria de Lourdes Lúcio Ferrarese / Banca: Vandeir Francisco Gumarães / Banca: João Domingos Rodrigues / Doutor

Orientador: Marinônio Lopes Cornélio / Banca: Hamilton Cabral / Banca: Marcelo Andrés Fossey / Resumo: Os flavonóides são uma grande classe de polifenóis ocorrendo de forma natural amplamente distribuídos nas plantas, essas moléculas exibem algumas atividades farmacológicas importantes como anti-inflamatória, antioxidante, anticancerígena e antibacteriana. A interação entre os flavonóides Rutina (Ru) e Guaijaverina (Gua) e a Albumina do Soro Humano (HSA) em pH 7,0 fisiológico foi investigado usando a técnica de espectroscopia de fluorescência de estado estacionário, cálculo ab initio e de modelagem molecular. A partir da supressão de fluorescência da HSA pelos flavonóides, a constante de supressão de Stern-Volmer ( SVK ) e sua forma modificada ( aK ) foram calculadas em 298, 303 e 308 K, como também os parâmetros termodinâmicos correspondentes H, G e S, para cada flavonóide. A análise do equilíbrio de ligação foi utilizada para determinar os valores do número de sítios de ligação ( n ) e a constante de ligação ( bK ) para a Rutina e a Guaijaverina em 298, 303 e 308 K. A distância média entre o doador (HSA-214Trp ) e o aceitador (Ru e Gua) foi estimada de acordo com a teoria de transferência de energia ressonante fluorescente. A otimização geométrica dos flavonóides Rutina e Guaijaverina foi realizada nos seus estados fundamentais usando o funcional DFT/B3LYP ab initio com um conjunto de bases 6-31G(d,p) utilizado nos cálculos. O cálculo de modelagem molecular indica que os flavonóides se localizam no sítio I da HSA, dentro do bolso hidrofóbico do subdomínio IIA. Os resultados teóricos obtidos pela modelagem molecular corroboram com os dados de espectroscopia de fluorescência / Abstract: Flavonoids are a large class of naturally occurring polyphenols widely distributed in plants, these molecules exhibit some important pharmacological activities like anti-inflammatory, antioxidant, anticancer, and antibacterial. The interaction between Rutina and Guaijaverin flavonoids and Human Serum Albumin (HSA) at physiological pH 7.0 was investigated by using the technique of fluorescence spectroscopy, ab initio and molecular modeling calculation. From the fluorescence quenching of the HSA by flavonoids, the Stern-Volmer quenching constant ( SVK ) and its modified form ( aK ) were calculated at 298, 303 and K308, as well as the corresponding thermodynamic parameters H, G and S, for each flavonoid. Analysis of binding equilibria was utilized to determine the number of binding sites ( n ) and binding constants ( bK ) values for Rutin and Guaijaverin at 298, 303 and K308 . The average distance between donor (HSA-214Trp ) e acceptor (Ru and Gua) was estimated according to the theory of fluorescence resonance energy transfer. The geometry optimization of Rutin and Guaijaverin flavonoids was performed in its ground state by using ab initio DFT/B3LYP functional with a 6-31G(d,p) basis set applied in calculations. Molecular modeling calculation indicated that the flavonoids are located in site I of HSA, within the hydrophobic pocket of the subdomain IIA. The theoretical results obtained by molecular modeling are corroborated by the fluorescence spectroscopy data / Mestre

Resumo: A etiologia da colite ulcerativa ainda permanece desconhecida, porém atinge uma grande parcela da população mundial. A maioria das terapias disponiveis tem eficácia limitada e geram significativos clínicos efeitos adversos. A especie medicinal Mouriri pusa Gardn. (Melastomataceae) foi citada diversas vezes pela população local do Tocantins como útil no tratamento de distúrbios do trato digestório. Os estudos preliminares com essa planta tem apresentado efeitos gastroprotetores e cicatrizantes intensos. Estudos fitoquimicos de seu extrato metanólico revelaram presença de (-)- epicatequina, além de outros flavonóides, e taninos. Nesse projeto, induziu-se colite ulcerativa em ratos per injeção local de acido trinitrobenzenosulfonico (TNBS). Foram analisados parametros morfológicos, inflamatórios, imunohistoquimicos e Western Blot. 0 efeito da (-)-epicatequina foi avaliado em modele agudo nas doses de 5,10,25 e 50 mg/kg (p.o). Os animais receberam os tratamentos uma vez por dia durante 3 dias antes da indução de colite, 2 h e 24 h após a mesma. Observou-se macroscopicamente que as doses de 10 e 50 mg/kg (EC10 e ECSO)de epicatequina foram efetivas em reduzir 0 grau de seriedade da lesão, sendo confirmado pela análise microscópica para EC10. Nas quantificações do tecido intestinal, observou-se que a concentração de glutationa em EC10 foi maior que no controle, mostrando um possivel mecanismo de ação, já que a manutenção da glutationa no tecido inflamado pode indicar potencial antioxidante da substância. Observou-se diminuição de COX-2, um parametro inflamatório, e um aumento de PCNA, antigeno de proliferação celular, em EC10, dicando ação antiinflamatória e estimuladora de proliferação celular. EC10 e EC50 foram usadas então para o modelo crônico de colite, no qual os diferentes grupos de animais receberam, após indução de colite no primeiro dia ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Ulcerative colitis etiology is still not completely known, however, it is present among great portion of world's population. The majority of available therapies has limited efficacy and provides significant adverse effects. The medicinal species Mouriri pusa Gardn. (Melastomataceae) has been often mentioned by local population from Tocantins as useful in the treatment of gastrointestinal disorders. Previous studies with this plant have presented intense gastroprotective and cicatrizing effects. Phyochemical studies of its methanolic extract revealed presence of (-)-epicatechin, besides other flavonoids, and tannins, In this work, ulcerative colitis was induced in rats by local injection of TNBS (Trinitrobenzenesulphonic acid). We analyzed morphological, inflammatory, immunohistochemical and Western Blot parameters. (-)- Epicatechin effect was evaluated in acute model in 5, 10, 25 e 5Omg/kg doses (p.o). The animals received treatments once a day for 3 days before colitis induction, and 2 h and 24 h after it. The doses of 10 and 5Omg/kg (EC10 and EC5O) were macroscopically observed to be effective in reducing lesion seriousness, what was confirmed by microscopical analysis for EC10. By quantifications in the colon tissue, it was observed that glutathion concentration in EC10 was greater than in control, showing a possible echanism of action, since glutathione maintenance in the inflamed tissue may . dicate antioxidant potential from the compound. It was observed COX-2 reduction, an inflammatory parameter, and an increase in PCNA, proliferating cell antigen, in EClO, indicating anti-inflammatory and proliferation stimulating action. EC10 and EC were then used for chronic colitis model, in which the groups, after colitis induction in the first Day, treatments for 21 days. At the end of each week, some of the rats from each group were killed for accompaniment, and after the second week ... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Cláudia Helena Pellizzon / Coorientador: Clélia Akiko Hiruma-Lima / Banca: Luís Cláudio Di Stasi / Banca: João Carlos Palazzo de Mello / Mestre

Orientador: Wagner Vilegas / Coorientador: Miriam Sannomiya / Banca: Alba Regina Monteiro Souza Brito / Banca: Elfriede Marianne Bacchi / Resumo: O uso de fitoterápicos padronizados com assegurada comprovação de eficácia e segurança tem apresentado resultados terapêuticos surpreendentes em diversos países. Contudo, no Brasil, onde há grande potencial de produção de fitoterápicos devido a sua enorme biodiversidade, há deficiências na correta caracterização química das matérias-primas e escassez de ensaios farmacológicos e toxicológicos desses materiais, etapas essenciais para assegurar eficácia e segurança dos fitoterápicos. Machaerium hirtum (Fabaceae) é utilizada popularmente para o tratamento de diarréia, tosse e câncer. Um estudo químico que identifique as substâncias presentes nesta espécie e as quantifique pode fornecer subsídios para o entendimento destas atividades. A primeira etapa consistiu no isolamento das substâncias do extrato EtOH 70% das partes aéreas de M. hirtum por meio de cromatografia de permeação em gel seguida de purificação das substâncias por HPLC-RI. A identificação das substâncias foi feita por Ressonância Magnética Nuclear e por Espectrometria de Massas. O perfil químico do extrato foi estabelecido por HPLC-PDA e a quantificação das substâncias foi feita com base em suas agliconas, pelo método da calibração externa. Foi possível identificar as flavonas saponarina (8,69 ± 0,46 mg/g de extrato), isovitexina (6,44 ± 0,45 mg/g de extrato), isoorientina, que se apresentou abaixo do limite de quantificação (LOQ) e swertisina, presente no perfil cromatográfico em co-eluição com outra substância. Tais resultados são fundamentais para a padronização do extrato EtOH 70% das folhas de Machaerium hirtum / Abstract: The use of standardized phytomedicines with proven efficacy and safety has shown surprising therapeutic results in various countries. Brazil has great potential for production of herbal medicine due to its enormous biodiversity. However, there are deficiencies in the correct characterization of chemical raw materials and few reliable pharmacological and toxicological tests of these materials, essential steps to ensure efficacy and safety of herbal medicines. Machaerium hirtum (Fabaceae) is popularly used to treat diarrhea, cough and cancer. A chemical study to identify the substances present in this species may provide and quantify contributions to the understanding of these activities. The first step was the isolation of substances of 70% EtOH extract of aerial parts of M. hirtum by gel permeation chromatography followed by purification of substances by HPLC-RI. The identification of substances was performed by Nuclear Magnetic Resonance and Mass Spectrometry. The chemical profile of the extract was established by HPLC-PDA and quantification of the substances was based on their aglycones by the method of external calibration. It was possible to identify the flavones saponarin (8,69 ± 0,46 mg/g of extract), isovitexin (6,44 ± 0,45 mg/g of extract), isoorientin, which was below the limit of quantification (LOQ) and swertisin, present in the chromatographic profile in co-elution with another substance. These results are fundamental to the standardization of the crude 70% EtOH extract from the leaves of Machaerium hirtum / Mestre

Orientador: Wagner Vilegas / Coorientador: Lourdes Campaner dos Santos / Banca: Isabele Rodrigues Nascimento / Banca: Vera Lucia Garcia Rehder / Banca: João Carlos Palazzo de Mello / Banca: José Arimatéia Dantas Lopes / Resumo: O objetivo desse trabalho foi a investigação da composição química de plantas do Cerrado, aplicando técnicas que permitam uma análise quali e quantitativa rápida e eficaz. As espécies estudadas neste projeto foram Miconia rubiginosa e Miconia stenostachya, pertencentes à família Melastomataceae. As espécies foram coletadas no Estado de São Paulo e os infusos foram preparados e particionados com acetato de etila e água. A fração acetato de etila da M. rubiginosa foi fracionada por Cromatografia em Contracorrente de Alta Velocidade (HSCCC), sendo isolados os compostos (-)-(2R,3R)-epicatequina (Mr1), casuarictina (Mr2), canferol-3-O-β-galactopiranosídeo (Mr3) e schizandrisídeo (Mr4). A fração acetato de etila da M. stenostachya foi fracionada por cromatografia de permeação em gel utilizando Sephadex LH-20, que possibilitou o isolamento da (+)-(2R,3S)-4'-O-metilgalocatequina (Ms1), (-)-(2R,3R)-4'-O-metilepigalocatequina (Ms2), miricetina-3-O-α-rhamnopiranosídeo (Ms3) e (-)-(2R,3R)-epicatequina (Ms4). Foram desenvolvidos métodos de separação dos enantiômeros da naringenina e catequinas por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência acoplada a detectores de Dicroísmo Circular e Arranjo de Diodos (HPLC-CD-DAD). Os métodos desenvolvidos forneceram separação adequada com boa resolução. Foram obtidos os espectros de dicroísmo circular (CD) de todas as substâncias isoladas, permitindo a identificação dos enantiômeros. Uma metodologia de clean-up foi desenvolvida para a preparação de amostras para análise por cromatografia quiral. O método que utiliza cartucho de C18 (STRATA Phenomenex®) foi o que apresentou melhor seletividade. O método desenvolvido no HPLC-CD-DAD permitiu identificar a (-)-(2R,3R)-epicatequina no infuso de M. rubiginosa. O mesmo método foi aplicado para investigar a espécie Maytenus obtusifolia... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective of this project was to investigate the chemical composition of Cerrado plants, using techniques that allow a quick and efficient qualitative and quantitative analysis. In this project we studied the species Miconia rubiginosa and Miconia stenostachya which belong to the Melastomataceae family. Miconia species were collected at São Paulo State and water infusions were prepared and partitioned with EtOAc and water. The ethyl acetate fraction of M. rubiginosa was fractioned by High Speed Countercurrent Chromatography (HSCCC), and afforded (-)-(2R,3R)-epicatechin (Mr1), casuarictin (Mr2), kaempferol-3-O-β-galactopyranoside (Mr3), and schizandriside (Mr4). The ethyl acetate fraction of M. stenostachya was submitted to gel permeation chromatography over Sephadex LH-20, that led to the isolation of (+)-(2R,3S)-4'-O-methylgallocatechin (Ms1), (-)-(2R,3R)-4'-O-methylepigallocatechin (Ms2), myricetin-3-O-α-rhamnopyranoside (Ms3), and (-)-(2R,3R)-epicatechin (Ms4). Methods were developed for the enantiomeric separation of naringenin and catechins by High Performance Liquid Chromatography with Circular Dichroism and Diode Array Detectors (HPLC-CD-DAD). The developed methods provided good separation and resolution. CD spectra of all these substances were obtained, allowing the identification of the enantiomers. A clean-up methodology was developed for the preparation of plant samples previous to the chiral HPLC analysis. The method using C18-cartridge (Phenomenex STRATA®) showed the best selectivity. The method developed using HPLC-CD-DAD allowed to identify (-)-(2R,3R)-epicatechin in the infusion of M. rubiginosa. The same method was applied to investigate the commonly used... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Eliana Aparecida Varanda / Banca: Eliana Aparecida Varanda / Banca: Marcelo Aparecido da Silva / Banca: Luís Vitor Silva do Sacramento / Resumo: A família Eriocaulaceae possui cerca de 1200 espécies divididas em 10 gêneros e suas espécies de plantas são conhecidas como sempre-vivas, por sua grande durabilidade e coloração paleácea. Neste trabalho foram estudadas as espécies: Eriocaulon ligulatum, Leiothrix flavescens e Leiothrix spiralis, as quais foram avaliadas quanto à mutagenicidade e estrogenicidade e algumas substâncias isoladas foram utilizadas para um estudo de relação estrutura-atividade mutagênica e estrogênica. Para avaliação da mutagenicidade, utilizou-se o teste de Ames, e o teste RYA (Recombinant Yeast Assay) foi o empregado para avaliação da estrogenicidade. Os resultados da atividade mutagênica demonstraram que apenas E. ligulatum foi considerado mutagênico e isso foi atribuído às isocumarinas e flavonóides agliconas. Os estudos de relação estrutura-atividade mutagênica mostraram que esta ação foi devida à presença de hidroxilas em posições estratégicas e à ausência de glicosilações, metoxilações, ou qualquer outro tipo de substituição. Para complementar os estudos de relação estrutura-atividade mutagênica com as isocumarinas, utilizou-se resultados já publicados de mutagenicidade de moléculas semelhantes à isocumarina eriocaulina, isolada de E. ligulatum. Verificou-se que os dímeros de isocumarinas têm a sua mutagenicidade influenciada pela conformação espacial, pela presença de grupos hidroxilas mais afastados de grupos volumosos, e pelo tipo de ligação que une os seus monômeros. Quando o potencial estrogênico foi avaliado, apenas a L. flavescens apresentou resultados positivos e que esses são devidos à presença de flavonas agliconas, como a luteolina e a metoxiluteolina. As mesmas isocumarinas, pertencentes a outras espécies da família Eriocaulaceae, avaliadas no teste de Ames, foram avaliadas no teste RYA... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Eriocaulaceae family comprises around 1200 species, divided into 10 genera, and their plant species are known as "sempre-vivas" (everlasting flowers) for its durability and color. In this work the species Eriocaulon ligulatum, Leiothrix flavescens and Leiothrix spiralis were studied. These species were evaluated for the mutagenic and the estrogenic potential and some of their isolated compounds were used for a study of structuremutagenic and estrogenic activities. To assess mutagenicity we used Ames test and the Recombinant Yeast Assay (RYA test) was used for evaluation of estrogenicity. The results of mutagenic activity showed that only E. ligulatum presented mutagenicity and that these results were due to its naphthopyranones and flavonoid aglicons. The structuremutagenic activity studies shown that this action were due to the presence of hydroxyl groups in strategic positions and no glycosylations, methoxylation or any type of substitutions. To complement the studies of structure-mutagenic activity with the naphthopyranones, we use results already published of the mutagenicity of similar compounds to the naphthopyranone eriocaulina, isolated from E. ligulatum, and compare them with the data from ericauline. It was found that the dimers of naphthopyranones have their mutagenicity influenced by its spatial conformation, for the presence of hydroxyl groups furthest away from large groups, and the type of connection that join their monomers. When the estrogenic potential was assessed, we found that only L. flavescens showed positive results and that these results are due to the presence of flavones in the form of aglycones, such as luteolin and methoxyluteolin. The same naphthopyranones belonging to other species of Eriocaulaceae family, evaluated in the Ames test, were assessed in the RYA test. Their results were crucial for the establishment of structureestrogenic activity... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Resumo: Tem sido evidenciado que o consumo do suco de laranja amarela melhora a sensibilidade insulínica, o perfil lipídico, a pressão arterial, o estresse oxidativo e a inflamação, condições fisiopatológicas relacionadas às doenças crônicas como cardiovasculares, síndrome metabólica, diabetes tipo II, obesidade e câncer. Tais efeitos se devem à presença de nutrientes (vitamina C e potássio) e compostos bioativos (flavonóides cítricos e carotenóides), que atuam de forma sinérgica protegendo o organismo. O suco de laranja de polpa vermelha apresenta além destes componentes, o licopeno que atua como um potente antioxidante celular. O objetivo desta pesquisa foi avaliar o efeito do consumo regular do suco de laranja vermelha sobre os fatores de risco da síndrome metabólica, incluindo circunferência da cintura aumentada, hipertrigliceridemia, baixo HDL-C, hipertensão arterial e intolerância à glicose. Os resultados obtidos foram analisados em dois diferentes estudos os quais foram escritos na forma de artigo científico, sendo que no primeiro foi dado ênfase nos parâmetros antropométricos e no segundo os parâmetros bioquímicos e hemodinâmicos. Homens e mulheres saudáveis consumiram diariamente 750mL de suco de laranja vermelha durante oito semanas consecutivas. No início e no final do tratamento foram realizadas avaliações antropométrica (peso corporal, estatura, dobras cutâneas e circunferências) bioquímica (glicose, insulina, hemoglobina glicada, colesterol total, LDL-C, HDL-C, Apo A e B, proteína C reativa, atividade antioxidante por DPPH, resistência insulínica pelo índice HOMA), hemodinâmica (pressão arterial sistólica e diastólica). O tratamento com o suco de laranja vermelha não alterou a circunferência da cintura, diminuiu o colesterol total, LDL-C, proteína C reativa e pressão arterial, além de aumentar a atividade antioxidante no soro... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: It has been shown that the consumption of blond orange juice improves insulin sensitivity, lipid profile, blood pressure, oxidative stress and inflammation, pathophysiological conditions related to chronic diseases such as cardiovascular, metabolic syndrome, diabetes type II, obesity and cancer. These effects are due to the presence of nutrients (vitamin C and potassium) and bioactive compounds (citrus flavonoids and carotenoids), which act synergistically protects the body. Besides these components the red orange juice has lycopene that acts as a potent antioxidant. The aim of this study was to evaluate the effect of regular consumption of red orange juice on the risk factors of metabolic syndrome, including increased waist circumference, hypertriglyceridemia, low HDL-C, hypertension and glucose intolerance. The results were analyzed in two different studies which were written in the form of a scientific paper, the first one emphasizes the anthropometric parameters and in the second one biochemical and hemodynamics parameters. Healthy men and women consumed daily 750mL of red orange juice for eight consecutive weeks. At the beginning and end of treatment were evaluated anthropometric (body weight, height, skinfolds and circumferences) biochemical (glucose, insulin, glycated hemoglobin, total cholesterol, LDL-C, HDL-C, Apo A and B, C-reactive protein antioxidant activity by DPPH, insulin resistance by HOMA index), hemodynamic (systolic and diastolic). Treatment with red orange juice did not alter the waist circumference, decreased total cholesterol, LDL-C, C-reactive protein and blood pressure, besides increasing the antioxidant activity in serum of volunteers. We suggest that the orange juice does not influence the increase in body weight and other measures and has properties like hypolipidemic, anti-inflammatory and antioxidant... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Thaís Borges César / Coorientador: João Bosco Faria / Banca: Maria Rita Marques de Oliveira / Banca: Ellen Cristini Freitas Araújo / Mestre

Orientador: Dulce Helena Siqueira Silva / Banca: Ana Marisa Fusco Almeida / Banca: Wilson Roberto da Cunha / Banca: Niege Araçari Jacometti Cardoso Furtado / Banca: Ana Luisa Lacava Lordello / Resumo: A família Fabaceae é subdividida em 3 subfamílias: Faboideae, Caesalpinoideae e Mimosoideae, que englobam mais de 700 gêneros e 18000 espécies, bem distribuídas nas regiões tropicais e subtropicais. Inclui espécies de alta relevância econômica, como a soja, feijão, cerejeira, angelim e sucupira, além do pau-brasil, de importância histórica para o Brasil. Neste trabalho, os extratos etanólicos das folhas de Sclerolobium aureum, S. denudatum e S. paniculatum mostraram forte potencial antioxidante, sendo selecionados para investigação fitoquímica detalhada. O fracionamento cromatográfico destes extratos evidenciou sua composição química, destacando-se a presença de esqualeno, tocoferóis e lupenona, identificados por CG-EM, predominantes nas frações de baixa polaridade. O extrato hidroalcoólico de S. aureum foi submetido a etapas de purificação, incluindo o uso de CLAE-UV-DAD, evidenciando a presença majoritária de ácido gálico, flavonoides monoglicosilados e catequina, identificados por RMN, EM e UV. Os extratos hidroalcoólicos de S. denudatum e S. paniculatum foram submetidos a partição líquido-líquido e as frações resultantes foram analisadas por CLAE-UV-DAD e CLAE-EM-EM para identificação dos seus constituintes por desreplicação, ou seja, evitando-se procedimentos de purificação de substâncias conhecidas. Esta estratégia permitiu conhecer os metabólitos secundários das três espécies, que apresentaram perfis químicos semelhantes com a predominância de flavonoides monoglicosilados. As frações semipurificadas e substâncias isoladas mostraram elevado potencial de sequestro de radicais livres frente ao DPPH, destacando-se a presença de antioxidantes lipofílicos e hidrofílicos, atrativa para aplicações em cosméticos. Adicionalmente, foi observado potencial imunomodulador... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Fabaceae family comprises 3 subfamilies: Faboideae, Caesalpinoideae and Mimosoideae, with more than 700 genera and 18000 species, widespread in tropical and subtropical regions. It includes economically important species as soybean, beans, angelim, sucupira, in addition to pau-brasil (Caesalpinea echinata), which has historical importance in Brazil for its wood pigments. In this work, ethanol extracts of Sclerolobium aureum, S. denudatum and S. paniculatum leaves were investigated and showed strong antioxidant potential, and were selected for further investigation. Their chromatographic fractionation evidenced the presence of squalene, tocopherols and lupenone as major compounds in low polarity fractions, by GC-MS analysis. The hydroalcoholic extract of S. aureum was submitted to purification procedures, including the use of HPLC-UV-DAD, which evidenced gallic acid, flavonoid monoglucosides and catechin as major compounds, identified mainly by NMR, MS and UV techniques. HPLC-UV-DAD and LC-MS-MS analysis were further carried out on the hydroalcoholic extract of S. denudatum and S. paniculatum, leading to the identification of their major constituents by dereplication, avoiding the purification of known compounds. Such strategy evidenced a similar chemical profile for the three Sclerolobium species, with flavonoid monoglucosides as major compounds. Strong free radical scavenging potential was observed for the fractions and isolated compounds towards DPPH, evidencing the presence of lipophilic and hydrophilic antioxidants, which might be important for cosmetics development. In addition, the immunomodulatory potential of the hexane and ethyl acetate fractions from S. denudatum were evidenced through the dose-dependent inhibition of nitrite release by pre-treated macrophages, which might... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor