Made available in DSpace on 2015-03-03T11:52:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-17Bitstream added on 2015-03-03T12:06:58Z : No. of bitstreams: 1 000807238.pdf: 1014789 bytes, checksum: 130b475d54b3130a40fc2df43bd56a57 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A paracoccidioidomicose é uma micose sistêmica causada pelo fungo dimófico Paracoccidioides brasiliensis, que é endêmico na América Latina. As células fagocitárias desempenham um papel importante durante a resposta imune inata contra o Pb, e se tornaram alvo de estudos neste sentido. Em especial, os neutrófilos são capazes de destruir microrganismos através de três mecanismos: fagocitose, seguida pela morte em fagolisossoma, secreção de agentes microbicidas e através do mais recente mecanismo descoberto, a netose, que consiste na liberação de redes extracelulares a partir dos neutrófilos (NETs), constituídas por proteínas granulares associadas a cromatina. Neste estudo demonstramos pela primeira vez que leveduras de P. brasiliensis induzem NETs in vitro principalmente através da ligação pelo receptor dectina-1 presente nos neutrófilos. Estas estruturas foram demonstrados através de microscopia eletrônica de varredura, e os componentes específicos das NETs: histona, elastase e DNA foram evidenciados a partir da microscopia eletrônica de imunofluorescência confocal. As leveduras foram capturadas pelas NETs, o que revelou um importante papel destas esrtruturas: impedir a disseminação do fungo. Além disso, o tratamento das co-culturas com DNAse, que degradou as NETs evidenciou aumento da sobrevivência do fungo, o que denota sua capacidade microbicida / Paracoccidiodomycosis is a systemic mycosis caused by the dimorphic fungus Paracoccidioides brasiliensis, which is endemic in Latin America. Since phagocytic cells play an important role during innate immune response against this fungus, we have studied the relationship between human neutrophils (PMNs) and P. brasiliensis, focusing on the effector mechanisms of these cells. Neutrophils can destroy microrganisms using at least 3 distint mechanisms: phagocytosis followed by destruction in a phagolysossome, secretion of antimicrobial molecules, and the more recently identified netosis, involving the release of neutrophil extracellular traps ( NETs) that are constituted by chromatin associated with different granule proteins with antimicrobial activities. Here, we showed for the first time, that yeast cells from P. brasiliensis strain 18 are able to induce the release of NETs in vitro, by binding to dectin-1 receptor on human neutrophils. These structures were evidenced by scanning electron microscopy, and specific NETs compounds such as histone and elastase were shown by confocal microscopy. Fungi were ensnared by NETs, denotting the role of these structures in confining infection, avoiding dissemination. In addition, disruption of NETs by treatment of cocultures with DNAse increased the fungi survival, evidencing their killing capacity / FAPESP: 2010/17405-5

Resumo: Este trabalho teve como objetivos determinar o efeito da idade da lesão de mancha marrom de Alternária (MMA) na produção conidial em folhas, ramos e frutos, a produção conidial sob diferentes condições de umidade relativa, a influência da aplicação de fungicidas na supressão da produção de conídios, o efeito da idade de maturação de folhas na suscetibilidade ao patógeno e a influência do tamanho de frutos na suscetibilidade à Alternaria alternata. A reação de espécies cítricas à MMA também foi avaliada. A esporulação em folhas teve início cerca de 10 dias depois do aparecimento de lesões de mancha marrom de Alternária, sendo que a maior produção de conídios ocorreu a partir de 20 dias, estendendo-se até 40 dias de idade. A produção de conídios foi superior em folhas do que em ramos ou frutos. A esporulação por unidade de área de lesão em folhas foi maior nos tangelos ‘Minneola’ e ‘Orlando’, em relação ao tangor ‘Murcott’. A produção conidial em lesões de folhas foi mais abundante a partir de 85, 92,5, 96 e 100% de umidade relativa. A aplicação de fungicidas do grupo das estrobilurinas e dos cúpricos suprimiu a esporulação em lesões nas folhas por cerca de 14 a 21 dias após a aplicação. Folhas de tangelo ‘Minneola’ apresentaram maior quantidade e maiores tamanhos de lesões até 20 dias de idade. O híbrido ‘Nova’ foi o mais resistente entre os materiais genéticos estudados, sendo que folhas a partir de 16 dias de idade... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objectives of this study were to evaluate: i) the effect of age of Alternaria brown spot (ABS) lesions on conidial production on leaves, twigs and fruit, ii) conidial production under different relative humidities, iii) influence of fungicide application on conidial production and iv) effect of leaf age on susceptibility to the disease and the influence of fruit size on the severity of brown spot. The reaction of the different citrus species to ABS was also studied. Sporulation on leaves began about 10 days after symptoms developed, was abundant from 20 to 40 days, and declined thereafter. Conidial production was far greater on leaf than fruit or twig lesions. Spore production per unit area of leaf lesion was greater on the more susceptible hybrids, Minneola and Orlando tangelos than on the less susceptible Murcott tangor. Conidial production on leaf lesions was more abundant at 85, 92.5, 96 and 100% relative humidity (RH) and almost nil at lower RH. Application of pyraclostrobin, trifloxyztrobin, azoxystrobin and copper fungicides suppressed the sporulation on leaf lesions for about 14 to 21 days after application. Minneola tangelo leaves had the greatest number and the largest lesions by 20 days or later. The Nova and Murcott hybrids were the most resistant of the cultivars and leaves showed few lesions when they were 16-days-old or older at inoculation. Leaves of Dancy tangerine were more susceptible than on leaves of Orlando tangelo and the Sunburst mandarin. For disease severity, there was a significant... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Antonio de Goes / Coorientador: Lavern Wayne Timmer / Banca: Eduardo Sanches Stuchi / Banca: Nelson Sidnei Massola Junior / Banca: Modesto Barreto / Banca: Antonio Baldo Geraldo Martins / Doutor

Orientador: Hélio Grassi Filho / Banca: Antonio Evaldo Klar / Banca: Edson Luiz Furtado / Resumo: O presente trabalho objetivou estudar os efeitos de uma nova técnica de aplicação de fungicida , através da água de irrigação pelo sistema localizado (gotejamento), na cultura do tomate híbrido "Debora Plus" em ambiente protegido, no controle da doença causada pelo fungo Septoria lycopersici Sepg., comparado com a aplicação convencional (pulverização). Essa nova técnica se chama "Fungigação". Além de estudar a comparação dos tipos de aplicação, foi estudado também 6 (seis) doses do fungicida benomyl na fungigação. As doses utilizadas foram: 75% a menos que a dose recomendada (59,5 mg/vaso), 50% a menos que a dose recomendada (119,0 mg/vaso), 25% a menos que a dose recomendada (178,5 mg/vaso), 100% da dose recomendada (238,0 mg/vaso), 25% a mais que a dose recomendada (297,5 mg/vaso) e 50% a mais que a dose recomendada (357,0 mg/vaso). As doses utilizadas nas aplicações por pulverização, foram de 100% da dose recomendada pelo fabricante (238,0 mg/vaso). Também foram avaliados os números de frutos colhidos, a massa fresca e seca dos mesmos e a altura das plantas comparando-os pelos tipos de tratamentos recebidos. A fungigação foi feita semanalmente, dando um total de 17 (dezessete) aplicações, as pesagens dos frutos foi feita semanalmente, dando um total de 10 (dez) pesagens e as medições da altura da planta do tomateiro quinzenalmente, dando um total de 5 (cinco) medições. Foi adotado o delineamento em blocos casualizados com oito tratamentos e cinco repetições. Pode-se observar que pelos resultados obtidos no presente trabalho que a aplicação convencional do benomyl para controle da septoriose do tomateiro mostrou-se superior à fungigação; não houve também diferença significativa nas diferentes dosagens do produto na fungigação, mas houve um controle da doença; a altura da planta foi praticamente igual para todos os tratamentos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: The aim of this study was to verify the efects of a new technic of fungicides aplication, through water from irrigation by the localized system (leaking), in hybrid tomatoes cultivation "Debora Plus" in protected environment, to control the diseased tomatoes caused by the fungal Septoria lycopersici Sepg, comparing with the convencional aplication (spraying). This new technic is called fungigation. Above the study the comparison from kinds of aplication, was also studyed 6 (six) doses of fungicide in fungigation. The used doses were: 75% less than the recommended (59,5 mg/vase), 50% less than the recommended dose (119,0 mg/vase), 25% less than the recommended dose (178,5 mg/vase), 100% of recommended dose (238,0 mg/vase), 25% more than the recommended dose (297,5 mg/vase) and 50% more than the recommended dose (357,0 mg/vase). The used doses in aplication by spraying, were 100% of recommended dose by the industry (238,0 mg/vase). It was also avaliables the collected fruits numbers, the fresh mass, dry matter and the height plants comparing by the kind received of treatment. The fungigation was make weekly, givining in the total 17 (seventeen) aplications, the fruits weigh was make weekly, givining a total 10 (ten) weigh, and the measures of tomatoes plants height was in 15 (fifteen) days, givining a total of 5 (five) measures. It was adopted to delineate in blocks casualializated with 8 (eight) treatments and 5 (five) repetitions. It can observe by the found results in this present research that the convencional aplication of benomyl, to control the tomatoes septoriose, showing higher than fungigation; did not have significant difference in differents doses of product in fungigation, but had a tendence of desease control; the plant height was almost as equal as all the treatments, showing that as much as fungigation like in convencional spraying, did not have interference in plants growing... (Complete abstract, click electronic address below). / Mestre

Memoria para optar al título profesional de: Ingeniero Agrónomo / Botrytis cinerea Pers., hongo fitopatógeno de más de doscientas especies vegetales, es el causante de la “Pudrición Gris” que es la enfermedad más importante que afecta a la uva de mesa en Chile. El control de esta enfermedad, se basa principalmente en el uso de fungicidas botryticidas. Sin embargo, año a año, se incrementan las poblaciones resistentes a estos productos logrando infectar las estructuras florales, para luego permanecer en estado latente hasta la madurez de la baya, desarrollando, finalmente, pudriciones durante el periodo de pre y poscosecha. Con objeto de llevar a cabo estudios epidemiológicos en uva de mesa, se marcaron nueve aislados de Botrytis cinerea (Wild-type-WT), de los cuales tres eran resistentes a fenhexamid (HydR3+, CE 50 9,64 µg/ml) y dos sensibles (HydS, CE 50 0,09 µg/ml), siendo uno de estos últimos del tipo multidroga MDR1; y otros dos eran resistentes a iprodione (Ip+, CE 50 5,48 µg/ml) y dos sensibles a esta molécula (Ip-, CE 50 0,71 µg/ml). Mediante la estandarización del protocolo para la transformación genética con la bacteria Rhizobium radiobacter (=Agrobacterium tumefaciens) cepa GV3101 con el vector pCAMgfp se logró la transformación de todos los aislados analizados. Los aislados transformados (mutantes) expresaron el gen de la proteína fluorescente verde (Green Fluorescent Protein, GFP-sgfp) y el de resistencia a higromicina (hph) incluso tras pruebas de estabilidad mitótica. Una vez transformados se evaluó el comportamiento morfofisiológico de los aislados mutantes. Para ello, se analizaron los aspectos de conidiogénesis, desarrollo miceliar, formación de esclerocios, nivel de agresividad/virulencia, expresión de la fluorescencia y mantención de las características de resistencia y/o sensibilidad a las moléculas fungicidas evaluadas. El análisis microscópico de la fluorescencia reveló la expresión constitutiva de la proteína y mediante PCR, con partidores específicos, se determinó la presencia del gen sgfp en todos los aislados analizados. Se mantuvo la correspondencia genotípica en todos los aislados y hubo escasas variaciones en los aspectos morfológicos y fenotípicos de los mutantes respecto sus WT. Finalmente, ocho aislados mantuvieron las mismas características morfofisiológicas que sus WT por lo que podrían ser empleados en estudios de interacción hongo-hospedero así como epidemiológicos, fundamentalmente en relación al estado de latencia. / Botrytis cinerea Pers., plant pathogen fungus over two hundred plant species, is the causal agent of the "gray mold", which is the most important disease that affects the table grapes in Chile. The control of this disease on grapevine, is mainly based on the use of fungicides botryticidas. Nevertheless, year after year, the resistant populations increase to this products, this will achieve the infection of floral structures, in order to remain in latent status until grape berry ripening, finally developing rots during pre and postharvest. To accomplish epidemiological studies in grapevines, were marked nine isolates of Botrytis cinerea (Wild type-WT), three of them were fenhexamid resistant (HydR3+, EC 50 9,64 µg/ml), two sensitive (HydS, EC 50 0,09 µg/ml), being one of those who was multidrug type MDR1; others two were resistant to iprodione (Ip+, EC 50 5,48 µg/ml) and two sensitive (Ip- EC 50 0,71 µg/ml). By standardizing of the protocol for genetic transformation with the bacterium Rhizobium radiobacter (=Agrobacterium tumefaciens) strain GV3101 with vector pCAMgfp the transformation of all isolates tested were achieved. The transformed isolates (mutants) expressed the gene for green fluorescent protein (Green Fluorescent Protein, GFP-sgfp) and hygromycin resistance (hph) even after mitotic stability test. Once transformed the morphophysiological behavior of mutant isolates were evaluated. For this, the aspects of conidiogenesis, mycelial growth, the formation of sclerotia, aggressiveness level/virulence, expression and maintenance characteristics of the fluorescence, of resistance and/or sensitivity to molecules fungicides tested were evaluated. Microscopic analysis of fluorescence revealed the constitutive expression of the protein and by PCR with specific primers, the presence of the sgfp gene in all isolates tested were determined. Genotypic correspondence in all isolates were maintained and there were few variations in morphological and phenotypic aspects of the mutants compared with their WT. Finally, eight isolates maintained the same morphophysiological characteristics, that their WT, consequently they could be used in studies of fungus-host interaction as well as epidemiological, mainly in relation to latency.

Tesis presentada como parte de los requisitos para optar al Grado de Magíster en Ciencias Agropecuarias con Mención Sanidad Vegetal / Botrytis cinerea Pers. es uno de los patógenos fúngicos más interesante por sus características particulares, puede vivir como patógeno; pero también saprofíticamente, se puede encontrar en todo el mundo y puede infectar un gran número de especies de plantas y sus diferentes partes. B. cinerea pertenece al phylum Ascomycota, clase Leotiomycetes, orden Helotiales (Hibbett et al., 2007). B. cinerea es el nombre de la fase asexual y en su fase teleomórfica corresponde a Botryotinia fuckeliana (de Bary) Whetzel (Groves and Loveland, 1953), presenta un micelio con hifas septadas, con poros simples, su crecimiento hifal es en ramificaciones con abundante producción de conidias heterocarióticas hialinas a levemente coloreadas formadas sobre conidióforos (Agrios, 1997). En un comienzo el micelio es hialino y luego se torna gris, debido a ello es que se ha denominado a la enfermedad con el nombre de “pudrición gris” (Harvey, 1955).

Orientador: Carlos José Leopoldo Constantino / Coorientador: Gustavo Fernandes Souza Andrade / Banca: Paola Corio / Banca: Clarissa de Almeida Olivati / Banca: Sérgio Antonio Marques de Lima / Resumo: Nesta tese filmes de Langmuir foram empregados para estudar a interação entre lipídios e um fungincida denominado carbendazim (MBC) e espectroscopia de impedância e espalhamento amplificado em superfície (SERS, do inglês, surface-enhanced Raman scattering) empregados na detecção deste fungicida. Os lipídios utilizados para formar os filmes de Langmuir forma brometo de dioctadecildimetilamônio (DODAB), brometo de didodecilmetilamônio (DDAB), 1,2-diplamitoil-sn-3-glicero-fosfatidilcolina (DPPC) e 1,2-dipalmitoil-sn-3-glicero-[fosfo-rac-(1-glicerol)] (DPPG) e o estudo da interação foi realizado com e sem MBC na subfase aquosa. Os resultados mostraram que o MBC interage fortemente com o DODAB e DDAB, moderadamente com o DPPC e fracamente com o DPPG, indicando que a interação é de origem eletrostática. Unidades sensoriais compostas por eletrodos interdigitalizados recobertos com filmes LbL de DODAB/NiTsPc e perileno/DPPG compuseram uma língua eletrônica capaz de distinguir diferentes concentrações de MBC em solução via espectroscopia de impedância. Analisamos individualmente cada unidade sensorial, a composta pelo filme LbL de DODAB/NiTsPc foi a que apresentou melhor desempenho frente ao MBC. Os estudos SERS foram realizados em três etapas. Na primeira, várias morfologias de nanopartículas foram sintetizadas e avaliadas quais apresentam melhor sinal SERS do MBC. Deste estudo ficou determinado que as nanopartículas esféricas de prata apresentaram o melhor sinal SERS do MBC. A interação do MBC com a superfície destas nanopartículas foi realizada a partir de espectros SERS do MBC em vários pHs. Cálculos teóricos foram utilizados para atribuição dos modos vibracionais do MBC e assim na interpretação dos resultados experimentais. De principal relevância, das espécies de MBC as formas neutra (MBC0) e desprotocolada (MBC) apresentam afinidade pela superfície de prata, originando assim sinal SERS. Por fim, o limite... / Abstract: This work Langmuir films were employed to study the interactions between lipids and a fungicide called carbendazin (MBC), impedance spectroscopy and surface-enhanced Raman scaterring (SERS) were used in the detection of this fungincide. The lipids employed to Langmuir films were dioctadecyldimethylammonium bromide (DODAB), didodecyldimethylammonium bromide (DDAB), 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DPPC) and 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phospho-(1'-rac-glycerol) (DPPG) with and without MBC in the subphase. The results show that the MBC interacts strongly with DODAB, moderately with DPPC and weakly to DPPG, indicating that it is electrostatic interaction. Sensor units composed of interdigitated electrodes coated with LbL films DODAB/NiTsPc and perilene/DPPG composed and electronic tonque able to distinguish different MBC concentrations in solution, via impedance spectroscopy. Analyzing each sensory unit, the composed with LbL film DODAB/NiTsPc showed the best performance. The SERS studies were performed in three stages. The first one, several morphologies of nanoparticles were synthesized and evaluated which lave better SERS signal of MBC. From this study it was concluded that the sherical nanoparticles of silver have better SERS signal of MBC and the subsequent results were obtained only with this nanoparticle. The interaction between MBC and surface of these nanoparticles was carried out by SERS spectra of MBC at several pHs. Here, theoretical calculations were used for assignment of vibrational modes of the MBC and thus help in the interpretation of experimental results. According to experimental and theoretical results neutrally (MBC0) and deprotonated (MBC) species have affinity for the silver surface and then show SERS signal. Finally, the MBC limit of detection was determined via SERS using a procedure which ensures that the reproducibility of the measurements, since SERS technique is not, yet, a routine analytical technique / Doutor

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-03-03T12:56:03Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 5845481 bytes, checksum: 6bb15f43de64fa556a23dc1cc0ba1fd9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-03T12:56:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 5845481 bytes, checksum: 6bb15f43de64fa556a23dc1cc0ba1fd9 (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / O primeiro capítulo desta dissertação descreve a síntese de 21 alilditiocarbimatos, sendo 15 deles inéditos. A primeira etapa consistiu na reação de Morita-Baylis-Hillman, catalisada por 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO), entre acrilato de metila e 2- nitrobenzaldeído, 3-nitrobenzaldeído ou 4-nitrobenzadeído. Os três adutos obtidos foram tratados com brometo de lítio e ácido sulfúrico em acetonitrila, fornecendo os intermediários chaves (Z)-2-(bromometil)-3-(X-nitrofenil)acrilato de metila, onde X = 2, 3 e 4. Cada um desses brometos reagiu com sete N-R-sulfonilditiocarbimatos de potássio onde R = fenil, 4-fluorofenil, 4-clorofenil, 4-bromofenil, 4-iodofenil, 4- metilfenil e 2-metilfenil. Os alilditiocarbimatos assim obtidos foram isolados na forma de sais de tetrafenilfosfônio. Os N-R-sulfonilditiocarbimatos de potássio utilizados foram preparados a partir das respectivas sulfonamidas em reação com CS 2 e KOH. Os compostos já descritos tiveram as suas estruturas confirmadas por comparação de seus espectros no infravermelho e temperaturas de fusão com dados da literatura. Os compostos inéditos foram caracterizados por temperaturas de fusão, espectrometria de massas de alta resolução, espectroscopias no infravermelho e de RMN de 1 H e 13 C. Foram realizados experimentos NOESY, COSY e HSQC para confirmação da estereoquímica e de algumas atribuições de sinais de RMN. O Capítulo 2 apresenta estudos de atividade dos alilditiocarbimatos contra Botrytis cinerea e Colletotrichum acutatum. Estes fungos causam as doenças conhecidas como Mofo Cinzento e Antracnose, respectivamente, gerando perdas em diversas culturas. Os alilditiocarbimatos foram mais ativos frente a B. cinerea que contra C. acutatum. O Capítulo 3 apresenta uma avaliação da atividade dos alilditiocarbimatos como aceleradores da vulcanização da borracha natural. Os alilditiocarbimatos foram ativos. Embora um pouco mais lentos que os aceleradores comerciais N-terc-butilbenzotiazol- 2-sulfenamida (TBBS), dissulfeto de tetrametiltiuram (TMTD), dietilditiocarbamato de zinco (ZDEC) e dissulfeto de mercaptobenzotiazol (MBTS), os novos aceleradores apresentam boa segurança de scorch e, na maioria dos casos, produzem uma borracha com maior densidade de ligações cruzadas que os aceleradores comerciais testados. / The first chapter describes the syntheses of 21 allyldithiocarbimates, 15 of them being new substances. The first step consisted on Morita-Baylis-Hillman reactions, catalyzed by 1,4-diazabicyclo[2.2.2]octane (DABCO), between methyl acrylate and 2- nitrobenzaldehyde, 3-nitrobenzaldehyde or 4-nitrobenzaldehyde. The three adducts thus obtained were treated with lithium bromide and sulfuric acid in acetonitrile, yielding the key intermediates methyl (Z)-2-(bromomethyl)-3-(X-nitrophenyl)acrylate, where X = 2, 3 and 4. Each of these bromides reacted with seven potassium N-R- sulfonildithiocarbimates where R = phenyl, 4-fluorophenyl, 4-chlorophenyl, 4- bromophenyl, 4-iodophenyl, 4-methylphenyl and 2-methylphenyl. The allyldithiocarbimates thus obtained were isolated as tetraphenylphosphonium salts. The potassium N-R-sulfonildithiocarbimates were previously prepared from the respective sulfonamides in reaction with CS 2 and KOH. The already described compounds had their structures confirmed by comparison of their infrared spectra and melting points with reported data. The new compounds were characterized by melting points, high- resolution mass spectrometry, infrared and 1 H and 13 C NMR spectroscopies. NOESY, COSY and HSQC experiments were performed in order to confirm the stereochemistry and some NMR signals assignments. Chapter 2 presents studies on the activity of the allyldithiocarbimates against Botrytis cinerea and Colletotrichum acutatum. These fungi cause plant diseases known as grey mold and anthracnosis, respectively, generating losses in several cultures. The allyldithiocarbimates were more active against B. cinerea than against C. acutatum. Chapter 3 presents the evaluation of the allyldithiocarbimates as vulcanization accelerators for the natural rubber. The allyldithiocarbimates were active. Although slower benzothiazolesulfenamide than the commercial (TBBS), tetramethylthiuram accelerators disulfide N-tert-butyl-2- (TMTD), zinc diethyldithiocarbamate (ZDEC) and mercaptobenzothiazole disulfide (MBTS), the new accelerators presented good scorch safety and, in most cases, produced higher cross linking density rubbers than the tested commercial accelerators.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-05-04T17:34:36Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 672908 bytes, checksum: 52e2041013a80459525bc8ac9386c087 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-04T17:34:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 672908 bytes, checksum: 52e2041013a80459525bc8ac9386c087 (MD5) Previous issue date: 2005-03-31 / A ramulose é uma das principais doenças do algodoeiro no cerrado brasileiro, maior região produtora. Conduziram-se dois ensaios em campo visando selecionar plantas com resistência à ramulose em linhagens e em acessos sem características comerciais. As mesmas linhagens também foram avaliadas para resistência à mancha de ramulária, mancha angular, mosaico das nervuras e ao complexo Fusarium e nematóide. Foi possível distinguir entre resistência e suscetibilidade à ramulose em ambos os ensaios de campo (P< 0,0001 e P=0,002, ensaio de linhagens e acessos do banco de germoplasma, respectivamente). Para avaliar possível série diferenciadora de raças de Colletotrichum gossypii var. cephalosporioides (Cgc), seis isolados do patógeno foram inoculados em 30 acessos de algodoeiro. Destes acessos, dois desenvolveram ou não sintomas dependendo do isolado usado. Esses acessos, em conjunto a outros dois resistentes e dois suscetíveis aos isolados empregados, foram selecionados para compor uma série diferenciadora para distinguir raças de Cgc. Com base em 133 isolados estudou-se a estrutura genética de populações de Cgc em três regiões com diferentes idades de cultivo. Foram analisados 23 locos AFLP e detectou-se baixa diversidade genética total (H t =0,139) e baixa diversidade genética dentro de subpopulações (H s =0,133). O número médio de migrantes foi estimado em 11,9 indivíduos a cada geração entre as três subpopulações. Não foi observada formação de estrutura sexuada (peritécio) in vitro após pareamento de 17 isolados em todas as combinações possíveis. Apenas um grupo de compatibilidade vegetativa foi identificado com base em testes de complementação usando 76 mutantes auxotróficos na rota de metabolismo do nitrato. Inferiu-se que a população brasileira de Cgc tem estrutura clonal, com ausência de grupos de compatibilidade vegetativa e sem aparente reprodução sexuada. Ocorre grande fluxo gênico e sementes infectadas desempenham importante papel nessa dispersão, principalmente para áreas novas. Isolados de Cgc foram também caracterizados quanto à sensibilidade aos fungicidas carbendazim, tebuconazole e azoxystrobin. Não houve evidências de resistência de Cgc aos fungicidas avaliados. Os valores de ED 50 para os fungicidas carbendazim, tebuconazole e azoxystrobin variaram, respectivamente, de 0,037 a 1,474, de 0,020 a 0,191 e de 0,019 a 0,068 μg i.a./mL. O controle químico em condições de campo reduziu o progresso da doença, todavia não evitou perdas significativas em produtividade. / “Ramulose” or “Witches’ broom” is caused by Colletotrichum gossypii var. cephalosporioides (Cgc) and is one of the main cotton diseases in the savannah region of Brazil, the major producing area. Two field assays were conducted with breeding lines and active germplasm bank (AGB) accessions to select cotton resistant genotypes. The breeding lines were also evaluated to ramularia leaf spot, bacterial blight, mosaic vein virus, and nematode - fusarium complex resistance at field conditions. Resistant and susceptible genotypes were differentiated in both assays (P< 0.0001 and P=0.002 for breeding lines and AGB accessions assays, respectively). In order to establish a set of cotton differential series to detect Cgc pathotypes, six Cgc isolates were inoculated in 30 cotton genotypes. Reaction of two cotton accessions varied according to Cgc isolate. These two in addition to two resistant and two susceptible accessions were selected to form a cotton differential set to determine Cgc pathotypes.Pathogen population structure was investigated by analyzing 133 isolates collected from three major cotton producing areas. A total of 23 AFLP loci were analyzed. The total and within subpopulation genetic diversity were low, H t = 0.139 and 0.133, respectively. The estimated average number of migrants among the subpopulations, per generation, was 11.9. No sexual structure (perithecium) was formed in crosses established in vitro for 17 isolates in all possible combinations. A single vegetative compatibility group (VCG) was identified based on complementation tests using 76 auxotrophic mutants in nitrate metabolic pathway. One mutant did not form heterokarion and was self-incompatible. Genotypic diversity varied among subpopulations and one haplotype was found in high frequency in all subpopulations. There was no correlation between genetic and geographic distances. There is strong evidence that the population of Cgc has a clonal structure, with no VCG, and sexual reproduction does not seem to play an important role. Gene flow among subpopulations was high and infected seeds are important to pathogen introduction/dispersal into new areas. Sensitivity of Cgc isolates to carbendazim, tebuconazole, and azoxystrobin was assessed. Baseline population sensitivity was established with isolates collected where no fungicide was used. For in vitro assays, the ED 50 values of carbendazim (n=88 isolates) ranged from 0.037 to 1.474 μg a.i./mL, a 40-fold sensitivity factor. No resistance to carbendazim (ED 50 > 10 μg a.i./mL) was detected. Similarly, ED 50 values for tebuconazole (n=91) and azoxystrobin (n=82) were low and ranged from 0.020 to 0.191 and from 0.019 to 0.068 μg a.i./mL, respectively. In a field assay, disease progress was followed on the susceptible cultivar BRS Ipê. Plots artificially inoculated were treated twice with fungicides in several combinations. Fungicides were not effective in controlling ramulose, although differences (P=0.007) regarding area under the disease progress curve among treatments were detected. Lack of disease control was attributed to heavy rain during the season as well as a delay in the first fungicide application. / Tese importada do Alexandria

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-04-19T10:26:46Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 347393 bytes, checksum: fc58ddd1620fea443ab644f380046b6f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-19T10:26:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 347393 bytes, checksum: fc58ddd1620fea443ab644f380046b6f (MD5) Previous issue date: 2015-07-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A ferrugem asiática da soja, causada pelo fungo Phakopsora pachyrhizi, desde que foi relatada pela primeira vez no Brasil, tem sido alvo de estudos quanto ao emprego de fungicidas para seu controle. Entretanto, devido ao uso indiscriminado destes produtos, em especial provenientes do grupo DMI (“Demethylation inhibitor”) e QoI (“Quinone outside inhibitor”), também conhecidos respectivamente como triazóis e estrubirulinas, relatos de resistência estão cada vez mais comuns atualmente. Com intuito de estudar novas estratégias para o controle químico da ferrugem, experimentos foram conduzidos a nível de laboratório, casa-de-vegetação e campo para avaliar o efeito da associação de fungicidas pertencentes ao grupos dos DMIs e QoIs com fungicidas de múlti-sítios. Os experimentos realizados a nível de laboratório e casa-de-vegetação estudaram o efeito sistêmico e translaminar de diferentes fungicidas comerciais à base de triazóis (Epoxiconazol, Ciproconazol, Protioconazol, Flutriafol e Tebuconazol) e estrubirulinas (Piraclostrobina e Trifloxistrobina), sendo que para o experimento em casa-vegetação foi adicionado diferentes fungicidas multi-sítios (Mancozebe e Chlorothalonil), Com base nos resultados obtidos em laboratório e em casa-de-vegetação, foram realizados experimentos a nível de campo para avaliar o efeito de fungicidas à base dos triazóis; Epoxiconazol e Ciproconazol, e das estrubirulinas Piraclostrobina e Azoxistrobina, em associação com Mancozebe, Metiram e Chlorothalonil. A ferrugem asiática foi avaliada por médio da severidade com auxílio de escala diagramática e os dados obtidos foram integrados para calcular a área abaixo da curva de progresso da doença (AACPD). Além da avaliação de doença, foi determinado rendimento de grãos (kg/ha) de cada parcela. O bioensaio realizado no laboratório e estufa mostraram que os tratamentos fungicidas utilizados obtiveram uma eficiência mínima de controle da ferrugem asiática da soja de 92 %, comparado com a testemunha. Ensaios de campo, demonstraram que todas as combinações fungicidas empregadas foram eficazes para controlar a ferrugem asiática e consequentemente favorecer um maior ganho de produtividade em comparação com a testemunha. Ao analisar a eficácia de controle da ferrugem asiática nos terços inferior, médio e superior, mostrou que a aplicação de Expoxiconazole com piraclostrobina e Ciproconazol com azoxistrobina reduz ASR (inferior, médio e superior) a queda de folha (%), e aumento no rendimento (kg/ha). Observou-se que a incidência do ASR diferiu entre as partes de dossel. A gravidade aumentou de inferior para a parte superior Ficou evidenciado nesse trabalho, que a aplicação das misturas entre DMI, QoI e multi- sítios promoveu de forma eficaz a redução da doença, propiciou ganho de produtividade e evitou a desfolha das plantas. O emprego de misturas que combinam fungicidas com alto risco de resistência (DMI e QoI) com fungicidas de baixo risco (multi-sítios) podem ser uma nova estratégia para o manejo da ferrugem a curto e a longo prazo. Além disso, em função do efeito residual e protetor de fungicidas multi-sítios promover maior longevidade de moléculas e redução do número de aplicação de fungicidas sistêmicos do grupo dos DMI e QoI. / Asian soybean rust (ASR), caused by the fungus Phakopsora pachyrhizi, since it was first reported in Brazil, has been the subject of studies regarding the use of fungicides to its control. However, due to the indiscriminate use of this products, especially from the DMIs ("demethylation inhibitors") and QoIs ("Quinone outside inhibitor") groups, also known respectively as triazoles and strobilurins, resistance reports are increasingly common nowadays. In order to study new strategies for chemical control of ASR, experiments were conducted in laboratory, greenhouse and field to evaluate the effect of fungicides belonging to the DMIs and QoIs groups associated with multi-site fungicides. Experiments were carried out at laboratory and greenhouse in order to study the systemic and translaminar effect of triazoles (Epoxiconazole, Cyproconazole, Prothioconazole, Flutriafol and Tebuconazole) and Strobilurins (Pyraclostrobin and Trifloxystrobin), and for the experiment in greenhouse were mixed these lasts with multi-site fungicides like (Mancozeb and Chlorothalonil). Based on the results obtained in the laboratory and greenhouse, field trial experiments were conducted to evaluate the effect of fungicides compounded with triazole like Epoxiconazole and Cyproconazole, and strobilurins like Pyraclostrobin and Azoxystrobin with Mancozeb, Metiram and Chlorothalonil. ASR was assessed by the severity using a diagrammatic scale and the data were integrated to calculate the area under the disease progress curve (AUDPC). Besides the evaluation of disease, it was determined grain yield (kg/ha) for each plot. The bioassay conducted in the laboratory and greenhouse showed that the fungicide treatments obtained a minimum efficacy of 92 % against ASR, compared to the control. The field trials showed that all combinations of fungicides used were effective to control ASR and promoted greater yield gain compared to the control. Analyzing the effectiveness to control ASR in the lower, medium and upper part of the canopy, showed that application of Expoxiconazole with Pyraclostrobin, and Cyproconazole with Azoxystrobin reduced ASR (lower, medium and upper) and leaf fall (%), and increased yield gain (kg/ha). It was observed that the incidence of the ASR differed between the canopy parts. The severity increased from lower to the upper part. It was evidenced in this work, that the application of DMI, QoI and multi-site fungicides in association promoted effectively the disease reduction, increased yield and avoided the leaf fall. The use of commercial formulation fungicides with high risk of resistance (DMI and QoI) combined to low risk ones (multi-site) could be a new strategy for the management of the ASR at short and long term. Furthermore, due to the residual effect and protective of multi-site fungicides like Mancozeb, Chlorothalonil and Metiram, can promote higher longevity of DMI and QoI molecules and reduce the number of application of systemic fungicides. / Sem lattes

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-05-05T16:29:28Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 4245207 bytes, checksum: d7d8836dbb1bd7880bb3431e91f199db (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-05T16:29:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 4245207 bytes, checksum: d7d8836dbb1bd7880bb3431e91f199db (MD5) Previous issue date: 2014-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superio / Os derivados do ácido cinâmico assim como as isobenzofuranonas são classes de compostos que apresentam um amplo espectro de bioatividades e devido a isso, vêm atraindo a atenção de vários grupos de pesquisa. O presente trabalho teve por objetivo sintetizar uma série de isobenzofuranonas e de derivados do ácido cinâmico visando a avaliação de suas atividades fungicida e citotóxica. A metodologia empregada para a obtenção desses compostos consistiu em reações de orto-alquilação, processos de adição à ligação dupla e reações de acoplamento. Os compostos sintetizados foram caracterizados via espectroscopia no IV e espectroscopia de RMN de 1H e de 13 C. As substâncias sintetizadas 1-7, 9 e 10 foram avaliadas em relação às suas habilidades em interferirem na germinação do esporângio do oomiceto Phytophthora infestans. Os resultados obtidos mostraram que todos os compostos avaliados apresentaram efeitos inibitórios contra o crescimento do esporângio em todas as concentrações testadas. Considerando-se exemplos descritos na literatura de isobenzofuranonas e de derivados do ácido cinâmico que apresentam efeitos citotóxicos contra diferentes linhagens de células tumorais, realizou-se também uma avaliação da atividade citotóxica desses mesmos compostos contra a linhagem de célula tumoral melanoma (B16). Dentre os compostos avaliados, dois derivados do ácido cinâmico reduziram a viabilidade celular da linhagem melanoma (B16), tendo se destacado o composto 4, o qual foi capaz de inibir em mais de 90% a viabilidade celular. Devido à sua atividade, pode-se dizer que as substâncias sintetizadas e avaliadas neste trabalho são potencialmente ativas e podem ser explorados como estruturas-modelo na busca por novos fármacos e agroquímicos. / Isobenzofuranones and cinnamic acid derivatives are groups of structurally diverse compounds presenting various bioactivities. These compounds have attracted the attention of several research groups due to in part to their biological active profiles. The present investigation was aimed to synthesize a set of isobenzofuranones and cinnamic acid derivatives and evaluate their cytotoxic and fungicide activities. To prepare the compounds, orto-alkylation, additions to double bonds and coupling reactions were utilized. The identity of the synthesized compounds was confirmed upon IR and one-dimensional NMR (1H and 13C) analyses. The compounds 1-7, 9 e 10 were evaluated as the ability to interfere with germination of oomycete Phytophthora infestans. It was found that all of the evaluated compounds are capable of significantly interfering with germination at all of the concentrations used in the bioassays. Considering previous reports in the literature about cytotoxicity of either isobenzofuranones and cinnamic acid derivatives, the chemicals 1-7, 9 e 10 had also their citotoxicity evaluated against melanoma (B16) cancer cell line. Two cinnamic acid derivatives were capable of significantly interfering with cell viability, being compound 4 the most active one. In view of the results, it is suggested that the compounds synthesized and biologically evaluated in this work can be considered attractive as models for further development of new agrochemicals and pharmaceuticals.