Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-24Bitstream added on 2014-06-13T19:30:55Z : No. of bitstreams: 1 david_eb_me_botfm.pdf: 680578 bytes, checksum: 9ccd08f14d2896ddd592fa21e3bcaaba (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O presente estudo foi realizado para investigar a prevalência de enteroparasitas em crianças e funcionários da creche do município de Pratânia, Estado de São Paulo, e caracterizar geneticamente os isolados de Giardia duodenalis obtidos dos indivíduos desse grupo empregando gdh e tpi como genes-alvo. Para isso, amostras de fezes de 141 crianças com idade de zero a seis anos e de 18 colaboradores foram colhidas e processadas pelo método de centrífugo-flutuação e pelo kit TF-test®. Nas 141 crianças, parasitas e/ou comensais intestinais foram diagnosticados em 64 (45,4%), das amostras, sendo Giardia (22%) e Cryptosporidium (22%) os parasitas mais freqüentes. Nos funcionários, Giardia foi diagnosticada em apenas uma amostra (5,5%) e o protozoário comensal Entamoeba coli (22,2%) foi o mais prevalente. Empregando técnicas baseadas em PCR, o DNA extraído de 86 (31 amostras positivas e 55 negativas para Giardia no exame microscópico) foi amplificado e os produtos obtidos foram seqüenciados. A análise de 35 seqüências revelou a ocorrência de infecção pelos genótipos A (28,6%) e B (71,4%), subtipos AI, AII, BIII/BSI e BIV, no entanto, associações entre os genótipos e fatores de risco para a infecção não foram observadas. O alinhamento das seqüências de gdh e tpi, revelou a presença de um a 12 SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) em isolados dos genótipos A e B, sendo que em alguns deles, as mutações foram responsáveis por alterações nas seqüências de aminoácidos. A infecção de seis crianças de um mesmo grupo e de uma funcionária por isolados classificados como genótipo B e apresentando seqüências nucleotídicas 100% idênticas entre si sugere a ocorrência de transmissão antroponótica na população estudada. Além disso, a maior prevalência do genótipo B, grupo predominante nas infecções humanas, reforça o fato de que a transmissão... / The present study was conducted to investigate the prevalence of intestinal parasites in children and employees of a daycare center of Pratania, São Paulo State, and to evaluate the genotypes Giardia duodenalis isolates obtained from individuals in this group by using gdh and tpi genes as targets. Fecal samples of 141 children aged zero to six years and 18 employees were processed by a flotation method and the TF-Test® kit. Of the 141 children samples, parasites and/or commensal organisms were diagnosed in 64 (45.4%) samples, and Giardia (22%) and Cryptosporidium (22%) were the most frequent parasites. In employees, Giardia was diagnosed in only one sample (5.5%) and the commensal protozoan Entamoeba coli (22.2%) was the most prevalent. DNA extracted from 86 samples (31 samples positive and 55 negative for Giardia by microscopic examination) was amplified by PCR and the products were sequenced. The analysis of 35 sequences revealed the occurrence of infection with genotypes A (28.6%) and B (71.4%) subtypes AI, AII, BIII / BIV and BSI, however, associations between genotypes and risk factors for infection were not observed. The alignment of the sequences revealed SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) in both genotypes A and B, altering the amino acid sequence of some isolates. Among isolates identified as genotype B, six obtained from children of the same group and one from the only one employee infected with Giardia showed gdh and tpi sequences different from reference ones, but 100% identical to each other. This data is suggestive of anthroponotic transmission in the studied population. In addition this finding, the higher prevalence of genotype B, the main group associated to human infections, reinforces the fact that anthroponotic transmission has importance in collective environments that meet children at an age that they still have not practice the basic precepts of hygiene.

Resumo: Formas evolutivas parasitárias são eliminadas nas fezes dos animais, propiciando a contaminação ambiental. O objetivo deste estudo foi verificar a ocorrência de parasitos causadores de zoonoses em gatos entregues ao Centro de Controle de Zoonoses (CCZ) do Município de Andradina, SP, no período de março a novembro de 2007. Amostras de sangue, medula óssea, linfonodos e fezes foram submetidas a análises laboratoriais. Para o diagnóstico coproparasitológico associou-se as técnicas de Willis e Faust, observando-se uma ocorrência de 96,1% dos animais para Ancylostoma spp., 43,1% para Toxocara spp., 43,1% para Cystoisospora spp., 21,6% para Dipylidium caninum e 5,9% para Giardia spp. Oocistos de Cryptosporidium spp. foram detectados em 3,9% das amostras pela técnica de verde malaquita. Por meio do ELISA direto, constatou-se uma ocorrência de 5,8% para Cryptosporidium spp. e 13,7% para Giardia spp. Dos animais, 3,9% foram reagentes para anticorpos anti-Leishmania spp. pela técnica de ELISA indireto. Foi observada presença de forma amastigota de Leishmania spp. em "imprint"de linfonodo de um único animal. Não foi verificada associação significativa entre a ocorrência de endoparasitos e a raça, sexo e idade dos animais analisados. Os resultados obtidos confirmam que os felinos de Andradina, SP, são importantes hospedeiros de parasitos, alguns destes com elevado potencial zoonótico. / Abstract: Forms evolving parasitic are eliminated in the feces of animals, promoting the environmental contamination. The purpose of this study was to verify the occurrence of the parasites that cause zoonoses in cats delivered to the Center for Zoonoses Control (CCZ) of the Andradina City, SP, in the period from March to November 2007. Samples of blood, bone marrow, lymph nodes and feces were subjected to laboratory tests. For the diagnosis coproparasitológics was associated with the techniques of Willis and Faust, observing the occurence of 96.1% of the animals to Ancylostoma spp., 43.1% for Toxocara spp., 43.1% for Cystoisospora spp. , 21.6% to Dipylidium caninum and 5.9% for Giardia spp. Oocysts of Cryptosporidium spp. were detected in 3.9% of the samples by the technique of malachite green. By the technique of direct ELISA, it is 5.8% of positive for Cryptosporidium spp. and 13.7% for Giardia spp. Of the animals, were reagents in 3.9% for antibodies anti- Leishmania spp. the technique of indirect ELISA. It was observed presence of amastigote form of Leishmania spp. in lymph nodes. There was no significant association between the occurrence of endoparasite and breed, gender and age of animals tested. The results confirm that the feline from Andradina City, SP, are important hosts of parasites, some of those with high potential zoonotic. / Orientador: Katia Denise Saraiva Bresciani / Coorientador: Ricardo Velludo Gomes de Soutello / Banca: Alessandro Francisco Talamini do Amarante / Banca: Marcelo Vasconcelos Meireles / Mestre

Orientador: Semíramis Guimarães Ferraz Viana / Coorientador: Teresa Cristina Goulart de Oliveira-Sequeira / Banca: Silvana Torossian Coradi / Banca: Clélia Akiko Hiruma Lima / Banca: Sérgio de Albuquerque / Banca: Ary Fernandes Junior / Resumo: Entre os alvos mais promissores para o desenvolvimento de novos agentes antiparasitários, destacam-se as proteases que nos protozoários participam de processos metabólicos e fisiológicos, atuando como importantes fatores de virulência. Como a atividade dessas moléculas pode ser controlada por inibidores específicos, essas substâncias têm sido avaliadas quanto ao potencial terapêutico em diferentes infecções parasitárias, inclusive por Giardia. O presente estudo foi desenvolvido com o objetivo de avaliar o efeito in vitro dos inibidores de cisteína (IAA e E-64) e serina-proteases (antipaina, leupeptina e TLCK) sobre o crescimento, aderência, viabilidade e ultraestrutura de trofozoítos de cepa de Giardia isolada e axenizada em Botucatu. Para isso, trofozoítos foram incubados em meio contendo os inibidores a diferentes concentrações durante 24, 48 e 72 horas. Nos ensaios de crescimento e aderência, o número de trofozoítos foi estimado a partir de contagens em hemocitômetro, enquanto que a viabilidade celular e as alterações ultraestruturais foram avaliadas, respectivamente, pelo método de redução do MTT e por microscopia eletrônica de transmissão. De acordo com as observações feitas no presente estudo, todos os inibidores de proteases apresentaram efeito sobre o crescimento, aderência e viabilidade dos trofozoítos. Entretanto, melhor desempenho quanto à capacidade de reduzir os parâmetros avaliados foi demonstrado nos ensaios com os inibidores de cisteína-proteases, especialmente a IAA. As maiores porcentagens de inibição do crescimento e aderência e as menores taxas de viabilidade foram observadas após o tratamento com IAA. Da mesma forma, as alterações ultraestruturais mais marcantes ficaram a cargo deste inibidor, principalmente após exposição a 100 μM, quando foi possível... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The quest for new antiparasitic alternatives has led researchers to base their studies on insights into biology, host-parasite interactions and pathogenesis. In light of this, the proteolytic enzymes or proteases have excited the researcher's interest, once they have been identified as important virulence factors as well as potential chemotherapeutic targets in parasites. Considering that proteases are naturally regulated by specific inhibitors, these substances have been evaluated for their therapeutic potential in parasitic infections including Giardia. In this way, we proposed to evaluate the in vitro effect of inhibitors of cysteine (IAA and E-64) and serine proteases (antipain, leupeptin and TLCK) on growth, adherence, viability and ultrastructure of Giardia trophozoites of a strain isolated and axenized in Botucatu. For this, trophozoites were incubated in medium containing the inhibitors at various concentrations for 24, 48 and 72 hours. In growth and adherence assays, the number of trophozoites was estimated microscopically in a haemocytometer, whereas cell viability and ultrastructural changes were evaluated, respectively, by the method of MTT and transmission electron microscopy. In this study, all protease inhibitors showed effect on growth, adherence and viability of trophozoites. However, better performance in their ability to reduce the parameters assessed was demonstrated in experiments with cysteine proteases inhibitors, especially IAA. The highest rates of growth and adhesion inhibition and the lowest rates of viability were detected in the IAA-treated cultures. Likewise, ultrastructural changes were most marked with this inhibitor, especially after exposure to 100 μM, when it was possible to demonstrate strong nuclear and cytoplasmic disorganization and drastic changes in... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

O estudo teve por objetivo determinar a eficácia do teste de ELISA para Giardia duodenalis e identificar os genótipos do protozoário em amostras fecais de crianças e cães na cidade de Lages, Santa Catarina. Foram avaliadas 1085 amostras fecais distribuídas em quatro grupos: crianças (Grupo I) matriculadas no ensino fundamental das Escolas Municipais de Ensino Básico (EMEB); amostras fecais de crianças obtidas em um laboratório particular da cidade (Grupo II); cães em ambientes domiciliados (Grupo III) e cães provenientes do Centro de Controle de Zoonoses (Grupo IV). Todas as amostras foram processadas pelos métodos coproparasitológicos de flutuação e sedimentação para determinar a presença de cistos de G. duodenalis. As amostras processadas pelos exames coproparasitológicos foram posteriormente analisadas pelo teste de ELISA e as amostras positivas genotipadas. A prevalência de amostras positivas para o parasito foi de 7,19% (78/1085). Das 430 amostras fecais de crianças e cães analisadas pelo teste de ELISA; 19,07% (82) foram positivas para G. duodenalis. A sensibilidade do teste de ELISA foi de 66%, 100% de especificidade, valor preditivo positivo (VPP) e negativo (VPN) de 100%, valor de Kappa = 0,93 e acurácia de 93%. Em relação às populações, o teste de ELISA para o diagnóstico de Giardia em amostras fecais de crianças apresentou sensibilidade de 60% e especificidade de 100%; para cães a sensibilidade foi de 73% e especificidade também de 100%. Conclui-se que o teste de ELISA apresentou alta especificidade, porém não apresentou boa sensibilidade em relação ao exame parasitológico, que aliado ao alto custo faz com que os exames de rotina laboratoriais na área humana e animais baseados na microscopia ainda são a opção mais eficaz para o diagnóstico de G. duodenalis. Em relação à identificação genotípica de isolados de G. duodenalis, através da PCR-RFLP usando o gene gdh, o genótipo (assemblage) A foi identificado nos Grupos I e II em 59,41% (22/39) das amostras com pequena prevalência para o subgenótipo AI (54,55%); o genótipo B foi diagnosticado em 43,59% (17/39) com maior prevalência para o subgenótipo BIV (58,82%). Nos grupos caninos III e IV o genótipo com características zoonóticas (A e B) foi diagnosticado em 64,10% (25/39), sendo diagnosticado AI com 53,85% e 10,26% de BIV. Em relação aos genótipos específicos de carnívoros (C e D) a prevalência foi de 35,90% (14/39) com predominância do genótipo C (71,43%) e 28,57% para o genótipo D. O estudo identificou uma variedade de genótipos em crianças e cães, com elevada prevalência de genótipos de características zoonóticas nos cães. / The study aimed to determine the efficacy of the ELISA test for G. duodenalis and identify the genotypes of the parasite in stool samples from children and dogs in the city of Lages, Santa Catarina. We evaluated 1085 faecal samples divided into four groups: Children (Group I) enrolled in basic public education; faecal samples obtained from children in a private laboratory in the city (Group II ) domiciled dogs ( Group III) and dogs from the Center for Zoonosis Control (Group IV). All samples were processed by the methods of faecal flotation and sedimentation to determine the presence of cysts of G. duodenalis. The samples processed by fecal examinations were subsequently analyzed by ELISA and positive samples genotyped. The prevalence of samples positive for the parasite was 7.19% (78/1085). Of the 430 stool samples from children and dogs analyzed by ELISA; 19.07% (82) were positive for G. duodenalis. The test sensitivity was 66%, specificity 100%, positive predictive value (PPV) and negative (NPV) of 100%, Kappa value = 0.93 and 93% accuracy. In relation to the population, the ELISA test showed sensitivity of 60% and specificity of 100%, for children and sensitivity was 73% and specificity of 100% for dogs. We conclude that the ELISA test is highly specific but less sensitivity to parasitological examination, so the routine tests in laboratory animals and human area-based microscopy are still the most efficient option for the diagnosis of G. duodenalis. Regarding the identification of G. duodenalis genotypes, by PCR-RFLP using the gdh gene, genotype (assemblage) A was identified in Groups I and II in 59.41% (22/39) samples with low prevalence to subgenotype Al (54.55%) , genotype B was diagnosed in 43.59% (17/39) with higher prevalence in subgenotype BIV (58.82%). Canine groups III and IV genotype with zoonotic characteristics (A and B) was diagnosed in 64.10% (25/39) was diagnosed with AI 53.85% and 10.26% of BIV. In specific genotypes of carnivorous (C and D) the prevalence was 35.90% (14/39) with predominant genotype C (71.43%) and 28.57% for genotype D. The study identified a variety of genotypes in children and dogs, with a high prevalence of genotypes characteristics zoonotic in dogs.

On two farms in a two-year period (spring 2005,autumn 2005, spring 2006, autumn 2006) calves faecal samples from the rectum or from the floor were obtained for parasitologic examination. A total of 560 samples from 209 calves were examined using the floatation method in Sheather's sugar solution. In positive samples the presence of Giardia intestinalis cysts, Cryptosporidium parvum, C. andersoni and Eimeria spp. oocysts was found. The infection by C. parvum was the highest from the 1st to the 3rd week and the infection by C. andersoni was the highest from the 7th to the 8th week of the calves age. In both breedings Coccidia Eimeria spp. was the most diagnosed, followed by G. intestinalis. With calves bred in stables by two a higher probability of parasitic infection was detected (46,9 %) compared to breeding of calves in outer individual boxes (17,6). The excrements of the calves were mainly of pasty or even of mushy consistence and the prevalence of the parasites was in most cases diagnosed in single infections.

O estudo teve por objetivo determinar a eficácia do teste de ELISA para Giardia duodenalis e identificar os genótipos do protozoário em amostras fecais de crianças e cães na cidade de Lages, Santa Catarina. Foram avaliadas 1085 amostras fecais distribuídas em quatro grupos: crianças (Grupo I) matriculadas no ensino fundamental das Escolas Municipais de Ensino Básico (EMEB); amostras fecais de crianças obtidas em um laboratório particular da cidade (Grupo II); cães em ambientes domiciliados (Grupo III) e cães provenientes do Centro de Controle de Zoonoses (Grupo IV). Todas as amostras foram processadas pelos métodos coproparasitológicos de flutuação e sedimentação para determinar a presença de cistos de G. duodenalis. As amostras processadas pelos exames coproparasitológicos foram posteriormente analisadas pelo teste de ELISA e as amostras positivas genotipadas. A prevalência de amostras positivas para o parasito foi de 7,19% (78/1085). Das 430 amostras fecais de crianças e cães analisadas pelo teste de ELISA; 19,07% (82) foram positivas para G. duodenalis. A sensibilidade do teste de ELISA foi de 66%, 100% de especificidade, valor preditivo positivo (VPP) e negativo (VPN) de 100%, valor de Kappa = 0,93 e acurácia de 93%. Em relação às populações, o teste de ELISA para o diagnóstico de Giardia em amostras fecais de crianças apresentou sensibilidade de 60% e especificidade de 100%; para cães a sensibilidade foi de 73% e especificidade também de 100%. Conclui-se que o teste de ELISA apresentou alta especificidade, porém não apresentou boa sensibilidade em relação ao exame parasitológico, que aliado ao alto custo faz com que os exames de rotina laboratoriais na área humana e animais baseados na microscopia ainda são a opção mais eficaz para o diagnóstico de G. duodenalis. Em relação à identificação genotípica de isolados de G. duodenalis, através da PCR-RFLP usando o gene gdh, o genótipo (assemblage) A foi identificado nos Grupos I e II em 59,41% (22/39) das amostras com pequena prevalência para o subgenótipo AI (54,55%); o genótipo B foi diagnosticado em 43,59% (17/39) com maior prevalência para o subgenótipo BIV (58,82%). Nos grupos caninos III e IV o genótipo com características zoonóticas (A e B) foi diagnosticado em 64,10% (25/39), sendo diagnosticado AI com 53,85% e 10,26% de BIV. Em relação aos genótipos específicos de carnívoros (C e D) a prevalência foi de 35,90% (14/39) com predominância do genótipo C (71,43%) e 28,57% para o genótipo D. O estudo identificou uma variedade de genótipos em crianças e cães, com elevada prevalência de genótipos de características zoonóticas nos cães. / The study aimed to determine the efficacy of the ELISA test for G. duodenalis and identify the genotypes of the parasite in stool samples from children and dogs in the city of Lages, Santa Catarina. We evaluated 1085 faecal samples divided into four groups: Children (Group I) enrolled in basic public education; faecal samples obtained from children in a private laboratory in the city (Group II ) domiciled dogs ( Group III) and dogs from the Center for Zoonosis Control (Group IV). All samples were processed by the methods of faecal flotation and sedimentation to determine the presence of cysts of G. duodenalis. The samples processed by fecal examinations were subsequently analyzed by ELISA and positive samples genotyped. The prevalence of samples positive for the parasite was 7.19% (78/1085). Of the 430 stool samples from children and dogs analyzed by ELISA; 19.07% (82) were positive for G. duodenalis. The test sensitivity was 66%, specificity 100%, positive predictive value (PPV) and negative (NPV) of 100%, Kappa value = 0.93 and 93% accuracy. In relation to the population, the ELISA test showed sensitivity of 60% and specificity of 100%, for children and sensitivity was 73% and specificity of 100% for dogs. We conclude that the ELISA test is highly specific but less sensitivity to parasitological examination, so the routine tests in laboratory animals and human area-based microscopy are still the most efficient option for the diagnosis of G. duodenalis. Regarding the identification of G. duodenalis genotypes, by PCR-RFLP using the gdh gene, genotype (assemblage) A was identified in Groups I and II in 59.41% (22/39) samples with low prevalence to subgenotype Al (54.55%) , genotype B was diagnosed in 43.59% (17/39) with higher prevalence in subgenotype BIV (58.82%). Canine groups III and IV genotype with zoonotic characteristics (A and B) was diagnosed in 64.10% (25/39) was diagnosed with AI 53.85% and 10.26% of BIV. In specific genotypes of carnivorous (C and D) the prevalence was 35.90% (14/39) with predominant genotype C (71.43%) and 28.57% for genotype D. The study identified a variety of genotypes in children and dogs, with a high prevalence of genotypes characteristics zoonotic in dogs.

Orientador: Nelson da S. Cordeiro / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T23:16:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Franco_ReginaMauraBueno_D.pdf: 4951890 bytes, checksum: c694867410e7efcdfef4c8baefeb75f1 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Protozoários intestinais têm distribuição cosmopolita. São importantes agentes patogênicos principalmente entre crianças que fteqientam creches. No caso das crianças brasileiras, os fatores de risco relacionados com a ocorrência das infecções por protozoários intestinais no âmbito das creches, não foram ainda estudados. Para tanto, realizou-se um levantamento parasito lógico e epidemiológico em 13 creches urbanas no município de Campinas, SP, Brasil, com o objetivo de determinar a prevalência de protozooses intestinais entre as crianças e os funcionários. Fatores de risco que possibilitam a aquisição de Giardia duodena/is e Cryptosporidium parvum foram estudados. Os fatores de risco investigados foram as variáveis relacionadas às características das creches, ao histórico familiar e condições sócio-econômicas das crianças. Numa análise inicial, o Risco Relativo (=Razão de Prevalência) e os limites de confiança de cada variável foram primeiramente estimados. Ajustamento por meio de Análise de Regressão Logística foi utilizado para detectar quais variáveis permaneceram estatísticamente associadas com protozoários entéricos. Foram realizados exames de fezes (colhidas 3 amostras fecais por indivíduo) em 307 crianças (com idade entre 2-42 meses) que fteqiientaram creches e em 134 funcionários. Os exames fecais revelaram 55 crianças (17,91%) com os seguintes protozoários: 31 (10,09%) com G. duodena/is; 17 (5,53%) com C. parvum e 5 (1,62%) com outros protozoários intestinais, comensais ou patogênicos. Infecção concomitante envolvendo G. duodena/is e C. parvum foi observada em 2 crianças (0,65%). Teste estatístico não revelou significância estatística entre infecção por G. duodena/is e sexo da criança (z= -0,573) ou ocorrência de diarréia (z= 1,47). Casos de giardiose foram mais fteqientes após 24 meses de vida (z= -2,703; p=O,0032). Não houve significância estatística entre criptosporidiose e sexo (z= - 0,078) ou idade das crianças (z= 1,21). Entretanto, diarréia foi indicativa de parasitismo por C. parvum (z= 5,919). A proporção de creches com uma ou mais crianças infectadas foi de 46,15% (n=6) para C. parvum e 69,23% (n=9) para G. duodena/is. Entre os funcionários, 22 (16,41 %) mostraram positividade para protozoários parasitos e comensais. Somente 8 variáveis permaneceram estatísticamente associadas com parasitos entéricos, após a aplicação do modelo de Regressão Logística. Tempo de freqüência à creche há mais de 6 meses, histórico de giardiose familiar, contato com animais de fazenda, foram as variáveis significativamente associadas à infecção por G. duodena/is. Para C. parvum, os seguintes fatores de risco foram identificados: tipo da creche, proftssão dos pais ligada à área de saúde, doença concomitante excetuando-se diarréia, ingestão de leite não pasteurizado e número de movimentos intestinais por dia durante episódio de diarréia / Abstract: Enteric protozoa have a worldwide distn1mtion. These organisrns are important pathogens in child day-care centres. For brazilian children, risk factors for the occurrence of protozoa infections in day-care settings were not yet studied. A parasitological and epidemiological survey was realized in 13 day-care centres (=DCCs) in a urban area at the municipality of Campinas, São Paulo State, Southeast Brazil to determine the prevalence of enteric protozoa in the children and staff members. Risk factors for G. duodenalis and C. parvum infections among these children were studied. These investigated risk factors wer_ some variables related to the DCCs characteristic and to the child 's history. By initial analysis the relative risk (= ratio of prevalence) and its confidence limits of each variable were first estimated. Adjustment by means of logistic regression analysis was utilized for detect which variables were associated with these protozooses. Stool examinations (3 faecal samples) of 307 children (2-42 months aged) enrolled in DCCs and 134 staff members were carried out. Faecal analysis showed 55 children (17,91 %) with the following parasites: 31 (10,09%) with G. duodenalis, 17 (5,53%) with C. parvum and 5 (1,62%) with other intestinal protozoal parasites. Mixed infection with 2 parasites (G. duodena/is and C. parvum) was observed in 0,65% of the children. There was no significative difference on sex of the child (z= -0,573) or diarrhoea and G. duodena/is infection (z= 1,47). Giardiosis were more frequently in children older than 24 months (z= -2,703; p=0,0032). Also there was no difference between rates of infections by C. parvum and sex (z= -0,078) or age of the children (z=1,21), although diarrhoea showed significance (z=5,919). The proportion of DCC facilities with one or more infected children was 46,15% (n=6) for C. parvum and 69,23% (n=9) for G. duodenalis. Among day-care staff, 22 (16,41%) showed positivity for parasites and commensal protozoa. After aplication of the 10gistic regression mode}, only 8 variables remained statistically associated with enteric parasites. Familiar history of G. duodenalis infections, attendance of DCC for more than 6 months, contact with farm animals were significantly related to G. duodena/is infections. For C. parvum, the following risk factors were identified: type of DCC, profissional status of parents, concomitant disease exceptually diarrhoea, ingestion of unpasteurized cow milk and number of intestinal movements per day during the diarrhoeal disease / Doutorado / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador: Regina Maura Bueno Franco / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas. Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-08T06:40:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bonatti_TaisRondello_M.pdf: 4637532 bytes, checksum: 36d95c3a6f82800797960173c01f67b1 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: A presença dos protozoários patogênicos Giardia e Cryptosporidium tem sido comumente relatada em amostras de águas superficiais e esgoto que incluem os afluentes, efluentes e resíduos gerados do tratamento, como o lodo de esgoto. Tais parasitos são reconhecidos mundialmente como importantes agentes causadores de diarréia em humanos e animais e destacam-se pelo grande potencial de veiculação hídrica. Ascaris lumbricoides é um dos helmintos entéricos mais resistentes e geralmente usado como indicador parasitológico devido à sua grande capacidade de resistência ambiental. O lodo de esgoto (LE), resíduo originado do tratamento de esgoto pelo sistema de lodos ativados , tem gerado muitas discussões em relação à sua disposição final. No Brasil, atualmente, a quase totalidade do lodo produzido em estações de tratamento de esgoto (E.T.E.s) é destinada a aterros sanitários competindo por espaço com o lixo urbano. Outras alternativas são propostas, como o despejo em oceanos, rios e lagos e a incineração. A aplicação do LE em solos com a finalidade de fertilização representa a melhor alternativa de uso, pois tal resíduo apresenta elevado teor de matéria orgânica, vários nutrientes de interesse agrícola e age como corretivo da acidez do solo. O presente trabalho teve por objetivos: (1) vermcar a ocorrência de cistos de Giardia, oocistos de Cryptosporidium e ovos de Ascaris sp. em amostras de LE, provenientes da ETE. Samambaia, (2) investigar a aplicabilidade de duas metodologias de concentração de cistos e oocistos a este tipo de amostra, (3) , verificar os danos morfológicos de cistos mediante o emprego de microscopia eletrônica de varredura (M.EV) e (4) efetuar a investigação da viabilidade dos ovos de Ascads sp. eventualmente presentes nas amostras, mediante o uso do corante vital Azul Trypan. Cistos estiveram presentes em 50,0% das amostras e oocistos, em 8,3%, considerando-se os dois procedimentos empregados. A concentração de cistos variou de O a 4800 cistos/g e de oocistos, de O a 600 oocistos/g, o que representa risco potencial à contaminação do solo onde o LE será aplicado e, possivelmente, para lençóis freáticos ou outros corpos d'água. Para as amostras brutas, a melhor técnica para cistos foi a Homogeneização em Solução de Eluição e para as amostras artificialmente contaminadas, Centrífugo-concentração seguida de clarificação em éter. Os resultados discrepantes mostram a dificuldade de trabalhar oom esse tipo de amostra e a grande variabilidade de resultados. Fatores como temperatura, forças iônicas e, principalmente, o pH influenciaram na recuperação de cistos, oocistas e ovos. Foram verificadas alterações morfológícas mínimas nas paredes dos cistos mediante emprego da M.EV após 45 dias de exposição à luz sotar. Em relação aos helmintos, foram encontrados ovos de Toxocara sp, Ascaris sp e similares a Trichuris sp mediante emprego da técnica padronizada pela Norma Oficial Mexicana. O lodo de esgoto pode, portanto, conter grande quantidade e variedade de patógenos, o que ressalta a importância de um tratamento adequado, assim como a necessidade do desenvolvimento de técnicas apropriadas para a pesquisa de Giardia, Cryptosporidium e Ascaris neste tipo de amostra e a revisão da legislação em vigência que não contempla os protozoários em questão / Abstract: The presence of the pathogenic protozoan Giardia and Cryptosporidium has been commonly reported in superficial water and sewage samples, including affluent, effluent and residues generated trom the treatment, as the sewage sludge. Such parasites are recognized worldwide as important agents of diarrhea in humans and animais and have great potential of water transmission. Ascaris lumbricoides is one of the most resistant enteric pathogens and generally is used as a parasitological indicator due to its great environmental resistance. The sewage sludge (SS), residue originated from the activated sludge treatment system, has generated many discussions regarding its final disposat. In Brazil, nowadays, almost the total amount of sewage sludge produced in sewage treatment plants (S.T.P.s) is destined to sanitary landfitts competing forspace with the urban trash. Other alternatives are proposed, as the oceanic disposal as in rivers or lakes and incineration. The SS applicatron in soils with the purpose of fertilization presents the best altemative, therefore such residue contains elevated tenor of several organic matter nutrients of agricultural interest and acts like acidity corrective of the soil. The present work had for objectives: (1) verify the occurrence of Giardia cysts, Cryptosponalum oocysts and Ascarls sp. eggs in SS samples from Samambaia S.T.P., (2) investigate the applicability of two methodologies of cysts and oocysts concentration to this kind of sample, (3) verify the morphological injuries of cysts by means of the electronic scanning microcopy (ESM) and (4) verify the viability of the Ascarls sp. eggs occasionalty present in samples by means of Trypan Blue vital dye. Cysts were detected in 50,0% of the samples and oocysts, in 8,3%, considering both the procedures employed. The cysts concentration varied from O to 4800 cysts/g and of oocysts, from O to 600 oocysts/g, what represent the potential risk of contamination of the soil where the CSS will be applied and, possibly, for subterranean water supplies or others water bodies. For the raw samples, the best method for cysts detection was Homogenization in Elution Solution and for the artificially contaminated samples, Centrifuge-concentration foltowed by ether clarification. The discrepant results show the difficulty to work with this kind of sample and the great variability of results. Factors as temperature, ionic forces and, mainly, the pH, influenced on the cysts, oocysts and eggs recovery. Lower morphological alterations were verified on the cyst wall by means of ESM after 45 days of expositíon to the solar light. Regarding the helminths, Toxocara sp, Ascaris sp and similar to Trichuris sp eggs were found by means of the technique standardized by the Mexican Official Norm. The sewage sludge contains a great amount and variability of pathogens, what stands out the importance of an adequate treatment, as well as the need of development of suitable methods for the research of Giardia, Cryptosporidium and Ascaris ín this kind of sample and the law revísion that does not contemplates such protozoan / Mestrado / Mestre em Parasitologia

Orientador: Regina Maura Bueno Franco / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:53:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CantusioNeto_Romeu_M.pdf: 1625548 bytes, checksum: e91f470bbd9fce0e7bb535b92359fbac (MD5) Previous issue date: 2004 / Mestrado

Orientador: Regina Maura Bueno Franco / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas. Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T03:37:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_PaulaVilmade_M.pdf: 3163607 bytes, checksum: cf552ae60ce22ed636ee5cbfa344ebd8 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Giardia spp. e Cryptosporidium spp. estão amplamente dispersos no ambiente aquático e foram responsáveis por diversos surtos de giardiose e criptosporidiose por veiculação hídrica em vários países. A presença destes patógenos em água utilizada para consumo humano é um fator de risco para aquisição destas parasitoses porque cistos e oocistos são resistentes aos processos de tratamento e às condições ambientais. Deste modo, a preocupação em relação à contaminação das fontes de água para uso humano por estes protozoários é crescente. No Brasil, há registros da ocorrência de ambos organismos em água superficial e subterrânea e em esgoto bruto e tratado. Atualmente, há uma recomendação oficial para a implantação da pesquisa de cistos e oocistos em água tratada. Assim, é necessário ter conhecimento sobre a freqüência e a distribuição destes parasitos nos mananciais. Os objetivos do presente estudo foram: i) verificar a ocorrência de cistos de Giardia e oocistos de Cryptosporidium em amostras de água bruta superficial do Rio Atibaia (Campinas, São Paulo) utilizando a técnica de filtração em membrana (47 mm diâmetro; 3 ?m de porosidade nominal); ii) avaliar a influência do desaguamento do Ribeirão Pinheiros na qualidade da água do Rio Atibaia mediante a comparação e a correlação entre parâmetros microbiológicos, físicos, pluviométricos e concentração de cistos e oocistos em dois pontos: à montante (A1) e à jusante (A2) do desaguamento do Ribeirão Pinheiros; e iii) verificar a ocorrência de variação sazonal destes protozoários na água superficial do Rio Atibaia. De março de 2002 a abril de 2003, 50 amostras de água foram analisadas. No ponto A1, cistos de Giardia foram detectados em 52,0% das amostras (concentração = 25,12 cistos/l), enquanto no ponto A2, a positividade foi de 76,0% (64,16 cistos/l). Oocistos de Cryptosporidium foram detectados somente no ponto A2, em 0,04% das amostras (0,8 oocistos/l). Houve diferença significativa na concentração de cistos entre os pontos A1 e A2 (p = 0,011) e correlação entre a pluviosidade e os parâmetros: concentração de cistos de Giardia (r = 0,611); coliformes totais (r = 0,467) e fecais (r = 0,467) no ponto A2. Em ambos os pontos, não foi encontrada correlação entre concentração de cistos de Giardia e as variáveis: coliformes totais (A1: r = -0,276; A2; r = -0,201), fecais (A1: r = -0,187; A2: r = -0,201) e turbidez (A1: r = -0,252; A2: r = -0,055). Dentre estes parâmetros, apenas a turbidez teve variação entre verão/inverno e verão/outono (p = 0,06). A técnica de filtração em membrana apresentou uma eficiência de recuperação de 72,2% para cistos de Giardia e de 65,1% para oocistos de Cryptosporidium. Os resultados obtidos neste estudo são relevantes porque o Rio Atibaia é o manancial que abastece a cidade de Campinas e outros municípios da região e o conhecimento da epidemiologia ambiental destes protozoários é importante do ponto de vista da Saúde Pública e também das companhias de tratamento de água / Abstract: Giardia spp. and Cryptosporidium spp. are widely dispersed in the aquatic environment and are responsible for several waterborne outbreaks of giardiosis and cryptosporidiosis in many countries. The occurrence of these pathogens in drinking water is a risk factor for human infection because of the resistance of cyst and oocyst to water treatment processes and to the environment. Nowadays, there is an increasing concern about drinking water contamination by these protozoans. In Brazil, the presence of both organisms was registered in groundwater and superficial water and in raw and treated sewage. Currently, there is an official recommendation for monitoring the presence of Giardia and Cryptosporidium in drinking water samples; thus a federal decree aims to establish researches for (oo)cysts detection in treated water. The knowledge about the frequency and distribution of these protozoan parasites in water sources is necessary to establish policies on public health. The aims of the present study are: i) to verify the occurrence of Giardia cysts and Cryptosporidium oocysts in Atibaia River¿s (Campinas City, São Paulo State) superficial raw water samples using a membrane filtration method (47 mm diameter; 3 ?m of nominal porosity; ii) to evaluate the influence of the discharge of Pinheiros Stream on the water quality of the Atibaia River by the correlationship among microbiological and physical parameters, rainfall and oocysts levels in two points: upstream (A1) and downstream (A2) of Pinheiros Stream; and iii) to verify the seasonal variation of these protozoa occurrence in the superficial water of Atibaia River. From March 2002 to April 2003, 50 water samples were collected. In point A1, Giardia cysts were detected in 52,0% of the samples (concentration = 25,12 cysts/l) while in point A2 the positivity for this parasite was 76,0% (concentration = 64,16 cysts/l). Cryptosporidium oocysts were detected only in A2 point, in 0,04% of the samples (concentration = 0,8 oocysts/l). There was a significant difference for cysts concentration between A1 and A2 points (p = 0,011) and among rainfall and the parameters: cyst concentration (r = 0,611); total (r = 0,467) and fecal coliforms (r = 0,467) in A2 point. In both points, it was not found a correlationship among cyst concentration and the following parameters: total coliforms (A1: r = -0,276; A2; r = -0,201), fecal coliforms (A1: r = -0,187; A2: r = -0,201) and turbidity (A1: r = -0,252; A2: r = -0,055). The turbidity showed a variation between summer and winter periods as well as summer and fall periods (p = 0,06). The membrane filtration technique attained recovery efficiency rates of 72,2% for Giardia cysts and 65,1% for Cryptosporidium oocysts. The data obtained in this study are relevant because the Atibaia River is the major water source found in Campinas and other cities in the region. Thus, the knowledge about the environmental epidemiology of these protozoa is of very important to policies on to the Public Health and to the drinking water industry / Mestrado / Parasitologia / Mestre em Parasitologia