Os nucleotídeos da adenina são moléculas sinalizadoras no meio extracelular e estão envolvidas em importantes condições fisiológicas e patológicas. O papel do ATP como um mediador extracelular e neurotransmissor têm sido descrito em vários sistemas, inclusive na glândula salivar. Nas glândulas salivares, o ATP é liberado juntamente com acetilcolina e noradrenalina a partir do sistema de inervação da glândula. Esse ATP atua sobre os receptores P2X4, P2X7, P2Y1 e P2Y2, regulando importantes processos secretórios. Os eventos induzidos pelos nucleotídeos extracelulares são controlados pelas ectonucleotidases, que incluem membros da família das ecto-nucleosídeo trifosfato difosfoidrolases (E-NTPDases), ecto-nucleotídeo pirofosfatase/fosfodiesterases (E-NPPs) e ecto-5’-nucleotidase (ecto-5’N). Assim, no presente estudo nós investigamos a presença dessas ectonucleotidases nas células acinares da glândula submandibular. A presença de uma E-NTPDase e uma ecto-5'-nucleotidase foi identificada com as seguintes propriedades bioquímicas para a hidrólise de ATP, ADP e AMP: pH ótimo entre 6,5-8,0, requerimento de cátions divalentes (Ca2+ e Mg2+) e valores de Kmapp na faixa de micromolar. As células acinares das glândulas salivares também foram capazes de hidrolisar o p-Nph-5´-TMP, sugerindo a presença de uma E-NPP. A enzima descrita nesse estudo é dependente de cátions metálicos divalentes (Ca+2 e Mg+2), sendo que a hidrólise do p-Nph-5´-TMP foi máxima na presença de níveis basais de cátions e em pH entre 8,5 e 9,0. Também se analisou o efeito de vários compostos sobre a hidrólise do ATP, ADP e p-Nph-5´-TMP e verificou-se que aazida sódica, inibidor de várias NTPDases, inibiu a hidrólise do ATP e do ADP, e não teve efeito sobre o p-Nph-5´-TMP.A ouabaína e o NEM, inibidores clássicos de ATPases, não afetaram significativamente a hidrólise de ATP, ADP e p-Nph-5´- TMP, já o AMP, inibiu a hidrólise do p-Nph-5´-TMP. Esses resultados sugerem a co-existência de diferentes ectonucleotidases nas células acinares, que estão relacionadas com a hidrólise dos nucleotídeos e que podem atuar em diferentes situações. Também avaliamos o efeito de fármacos antidepressivos na atividade e expressão das enzimas envolvidas na hidrólise dos nucleotídeos. Em relação à atividade enzimática, observamos que a fluoxetina induziu um aumento na hidrólise de ATP e ADP e o moclobemide e a imipramina induziram um aumento significativo na hidrólise de todos os nucleotídeos (ATP, ADP e AMP). A expressão relativa da NTPDase1-3 aumentou e da ecto-5´-nucleotidase diminuiu com a imipramina. A fluoxetina aumentou a expressão relativa da NTPDase3 e ecto-5´-nucleotidase e inibiu a expressão relativa da NTPDase2. O moclobemide aumentou a expressão relativa de todas as enzimas. Em relação à atividade enzimática da NPP, os tratamentos com imipramina, fluoxetina e moclobemide levaram a um aumento significativo dessa atividade, enquanto as expressões relativas das NPP-1, NPP-2 e NPP-3 não apresentaram alteração. A presença de ectonucleotidases modulando os níveis dos nucleotídeos nas células acinares é importante tendo em vista o papel do ATP nos mecanismos de secreção salivar. / Adenine nucleotides are extracellular signaling molecules and are involved in important physiological and pathological conditions. The role of adenosine triphosphate (ATP) as an extracellular mediator and neurotransmitter has been described in various systems, including salivary glands. In salivary glands, extracellular ATP is co-released with acetylcholine and noradrenaline from glands nerve system. ATP acts on P2X4, P2X7, P2Y1 e P2Y2 receptors and may regulate important secretory processes in salivary gland cells. The events induced by extracellular nucleotides are controlled by ectonucleotidases, that include family members of ecto-nucleoside triphosphate diphosphohydrolase (E-NTPDase), ectopyrophosphatases/ phosphodiesterases (E-NPP) and ecto-5’-nucleotidase. The presence of an E-NTPDase and ecto-5'-nucleotidase was identified with the following biochemical characteristics for ATP, ADP, and AMP hydrolysis: optimum pH between 6.5-8.0, dependence of divalent cations (Ca2+ e Mg2+) and Kmapp values in micromolar range. Acinar cells from salivary glands were capable to hydrolyze p-Nph-5´-TMP, suggesting the presence of an E-NPP. The enzyme described in this study is divalent cations-dependent (Ca+2 e Mg+2), and the p-Nph- 5´-TMP hydrolysis was maximal with basal levels of cations in pH between 8,5 and 9,0. The effect of different compounds in ATP, ADP e p-Nph-5´-TMP hydrolysis was evaluated and sodium azide, an inhibitor of several NTPDases, inhibited ATP and ADP hydrolysis, but have no effect in p-Nph-5´-TMP hydrolysis. Ouabain, NEM, classical ATPases inhibitors did not affect ATP, ADP e p-Nph-5´-TMPhydrolysis; however, AMP inhibited the p-Nph-5´-TMP hydrolysis. These results suggest the co-existence of different ectonucleotidases in acinar cells that are related with nucleotide hydrolysis and can act under different situations. The effect of antidepressants in activity and expression of enzymes involved in nucleotide hydrolysis was also evaluated. In relation to enzymatic activity, fluoxetine induced an increase only in ATP and ADP hydrolysis, whereas moclobemide and imipramine induced a significant increase in hydrolysis of all nucleotides (ATP, ADP and AMP). The relative expression of NTPDase1-3 was enhanced and for ecto-5´-nucleotidase was diminished with imipramine. Fluoxetine enhanced relative expression of NTPDase3 and ecto-5´-nucleotidase and inhibited the relative expression of NTPDase2. Moclobemide enhanced the relative expression of all enzymes. In relation to E-NPPs activities, imipramine, fluoxetine e moclobemide treatmens lead to a significant increase in this activity whereas the relative expression of NPP-1, NPP-2, and NPP-3 did not show modifications. The presence of ectonucleotidases modulating the levels of nucleotides in acinar cells is important considering the ATP role in the mechanisms of salivary secretion.

Orientador: Luiz Paulo Kowalski / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-21T05:36:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lopes_MarcioAjudarte_D.pdf: 5088985 bytes, checksum: 8f7b89a490611aabd206501d8bb6e4a3 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: F oram analisados 196 tumores de glândulas salivares menores intra-orais dos arquivos do Hospital A. C. Camargo, referentes ao período de 1954 a 1993. 128 (65,3%) eram malignos e 68 (34,7%) benignos. O palato foi o principal local de ocorrência, correspondendo a 65% dos casos. Adenoma pleomórfico foi o tumor benigno predominante, e o carcinoma mucoepidermóide o maligno mais comum. A principal modal.idade terapêutica foi a cirurgia. Recorrência local foi observada em 2 pacientes com adenoma pleomórfico e em 8 pacientes com tumor maligno. Observou-se 9 casos de metástase, sendo 4 linfonodal e 5 à distância. Quarenta e seis (76,7%) pacientes com tumor benigno e 47 (44,3%) com tumor maligno estavam vivos sem evidência de doença após o 5 anos de seguimento. As variáveis idade, estádio T, está~io N, comprometimento de linfonodos, comprometimento de pele, comprometimento ósseo e tipo de tratamento modificaram a sobrevida global. Para sobrevida livre de doença as variáveis mais importantes foram estádio N, tipo histológico, comprometimento de linfonodos e comprometimento ósseo. A análise multivariada mostrou que os fatores mais importantes para risco de óbito foram estádio N, tipo histológico, sexo e tipo de cirurgia. Para o risco de recorrência os fatores mais importantes, através da análise multivariada, foram estádio N, tipo histológico e comprometimento ósseo / Abstract: One hundred and ninety six cases of intraoral sali.vary gland tumors ftom the files of the A. C. Camargo Hospital, between 1954 and 1993, were studied. 128 (65,3%) were malignant and 68 (34,7%) benign tumors. 65% of the cases occured in the palate. Pleomorphic adenoma was the most cmmnon benign tumor, whereas mucoepidennoid carcinoma was the most common malignant tumor. Surgery was the main treatqlent. Local recurrence was observed in 2 patients with pleomorphic adenoma and in 8 with malignant tumors. Nodal and distant metastasis occured in 4 and 5 cases respectively. FoFty six (76,7%) patients with benign tumors and 47 (44,3%) patients with, malignant tumors were alive without disease .after follow-up of 5 years. Age, stages T. and N, nodal, skin. and bone involvements and type of treatment modified the overall survival. For ftee disease survival the most importants variables were stage N, histological type, nodal involvement and bone involvement. The multivariate analysis showed that the most importants factors to death risk were stage N, histological type, gender and type of surgery. For recurrence risk the most importants factors were stage N, histological type and bone involvement / Doutorado / Doutor em Odontologia

Orientador: Oswaldo Di Hipolito Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-22T13:42:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Flores_MateusEricson_M.pdf: 4335823 bytes, checksum: b6034643eadc8a2c7ebe319d4998f0b1 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: O presente teve por finalidade comparar duas substâncias de contraste utilizadas em exames sialográficos, sendo uma lipossolúvel Lipiodol UF -, e outra hidrossolúvel - Telebrix 38. Esta comparação foi realizada por meio de modelos experimentais e da densitometria óptica, com os quais se pôde simular uma glândula salivar num exame sialográfico. Os meios de contraste foram avaliados quanto a sua radiopacidade nos estados puros e quando aplicados contra uma coluna de saliva artificial, observando-se a presença de solubilidade nos tempos imediatamente após a aplicação do contraste, 30 segundos, 1 minuto e 1 minuto e 30 segundos. O Lipiodol UF e o Telebrix 38 não apresentaram diferença de radiopacidade no estado puro. Quanto à solubilidade, o Lipiodol UF não apresentou diluição na presença da saliva artificial, ficando com níveis de densidade óptica semelhante estatisticamente aos do Lipiodol UF puro em todos os tempos estudados. Já o Telebrix 38 apresentou' diluição imediatamente após a aplicação contra a saliva artificial. No tempo imediatamente após a aplicação do contraste, o Telebrix 38 apresentou diluição da ordem de 50 %; nos tempos 30 segundos e 1 minuto, entre 50% a 75% e, no tempo 1 minuto e 30 segundos acima de 75% / Abstract: An in vitro study was developed to compare two contrast media used in sialography, an oil-soluble - Lipiodol UF -, and a water-soluble Telebrix 38. This comparison was developed through an experimental model and densitometer readings, that can to simulate the salivary glands in a sialographic visualization. The radiopacity of contrast media were evaluated as to clear and when injected against the artificial saliva column, observing a solubility as time goes by - O seconds, 30 seconds, 1 minute and 1 minute and 30 seconds. There was not have radiopacity. difference between Lipiodol UF and Telebrix 38 in clear order. The Lipiodol UF did not show dilution in artificial saliva, taken densitometer readings closely with the clear Lipiodol UF, during the whole period of experience study. In another hand, the Telebrix 38 showed immediate dilution after your injection. To measure this dilution through the times, was made dilution in order by 25%, 50% and 75%. Immediately after its injection the Telebrix 38 showed a dilution in order by 500/0; after 30 seconds and 1 minute, the dilution increase between 50% and 750/0; and after 1 minute and 30 seconds, the dilution became above 75% / Mestrado / Radiologia / Mestre em Ciências

Orientador: Carlos Eduardo Pinheiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-23T03:07:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Poletto_MariaInezFernandes_M.pdf: 2067785 bytes, checksum: f3d25a2f0bb30e3c816874732eb7aba8 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Este trabalho foi realizado com o objetivo de isolar e carac terizar quimicamente uma proteína tóxica das glândulas submandibulares de camundongos machos, e observar histológica e macroscopicamente seu efeito biológico. Foram utilizadas 34 g de glândulas submandibulares de camundongos machos, de 3 meses de idade, para a obtenção do extrato glandular cru. Este extrato foi aplicado a uma coluna de DEAE Celulose equilibrada com tampão Tris HCI 0,05 M pH 7,6. A coluna foi lavada com 800 ml do mesmo tampão. O eluente obtido constitui a Fração I. Após a lavagem a coluna foi eluída seqüencialmente, com tampão Tris - NaCI 0,1 M (Fração, II) e tampão Tris - NaCI 0,3 M (Fração III). As frações protéicas foram concentradas por ultrafiltração e avaliada sua atividade tóxica e enzimática (Hidrólise do éster sintético BAPNA). A fração mais ativa (lI), foi dialisada contra tampão Tris - HCI pH 7,6 e aplicada a uma coluna de DEAE-Sephadex equilibrada com o mesmo tampão. As proteínas da coluna foram eluídas seqüencialmente por diferença de pH com os tampões Fosfato 0,1 M pH 7,0; 6,0 e 5,0. A fração mais ativa foi a obtida com tampão Fosfato 0,1 M pH 7,0 ('F IND. 2' 'P IND. 1'). Esta fração foi aplicada a uma coluna de Sephadex G-100 e as frações protéicas foram eluídas com o Tampão Tris HCI 0,05 M pH 7,0. A fração mais ativa, determinada pelos ensaios de toxicidade foi a 'F IND. 2' 'P IND. 1' -1. Eletroforese em gel de poliacrilamida desta fração apresentou uma banda de proteína e a determinação do peso molecular foi realizada utilizando-se da técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida a 10% contendo SDS. Os resultados obtidos da cromatografia em DEAE Celulose apresentaram três picos de proteínas, eluídas seqüencialmente por força iônica com soluções de NaCI; a eluição da Fração II da coluna de DEAE Sephadex por diferença de pH apresentou dois picos de proteínas. A fração ativa corresponde ao Pico I, eluído com Tampão Fosfato 0,1 M pH 7,0. Todas as frações apresentaram atividade esterásica, utilizando o BAPNA como substrato. As alterações dos órgãos dos ratos injetados com a fração ativa, mostrou pulmão hemorrágico, pâncreas' com inflamação aguda e degeneração, fígado hemorrágico e estômago engurgitado, repleto de suco gástrico de baixa acidez. A caracterização química e a atividade biológica desta proteína nos leva a concluir que ela é uma esterase com características tóxicas especiais que diferem das outras esterases tóxicas isoladas das glândulas submandibulares de camundongos, o que vem certificar que as glândulas submandibulares de camundongos machos são ricas em proteínas tóxicas e que a maioria delas apresenta atividade esteroproteolítica / Abstract: The purpose of this study was to isolate and to characterize a toxic protein from male mice submaxillary glands. The crude extract was obtained from 34 gr. of male adult mice. The extract was applied to a column of DEAE Cellulose. Initially the column was washed with 800 ml of Tris-HCL buffer. Then the column was sucessively eluted with Tris-NaCl 0.1M (fraction II), Tris-NaCl .3 M (fraction III). All these fractions were concentrated by ultracentifugation and the biological activity was testes by subcutaneous injection into adult female rats (toxic activity) and enzymatic activity was carried out using BAPNA as substrate. The highest toxic fraction, the fraction II, was dialyzed against Tis-HCL and further fractionated wit DEAE Sephadex A-50 and eluted with a Phosphate 0.1 pH gradient (pH range from 5.0 to 7.0). ... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Fisiologia e Biofisica do Sistema Estomatognatico / Mestre em Odontologia

Orientadores: Maria Leticia Cintra, Maria Elvira Pizzigatti Correa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T18:34:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Soares_TaniaCristinaBenetti_M.pdf: 14432539 bytes, checksum: c0ee9e9bfd4554afbcf1633cfa93fc09 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O estabelecimento de critérios mínimos para o diagnóstico da doença do enxerto contra o hospedeiro crônica (DECHc), identificando aqueles com significância prognostica, bem como a padronização deste achados, pode adicionar subsídios para a conduta terapêutica, facilitar o trabalho de pesquisadores e aperfeiçoar a comunicação entre eles. O objetivo deste trabalho foi estudar dois sistemas de classificação histológica para DECHc em glândulas salivares menores (GSM), um proposto por Horn et al. em 1995 que tem sido empregado no Departamento de Anatomia Patológica, UNICAMP, e outro proposto por Shulman et al. em 2006. Este foi um trabalho retrospectivo que avaliou biópsias de GSM coletadas no momento do diagnóstico clínico de DECHc oral. As amostras de GSM foram obtidas de pacientes tratados por transplante de medula óssea (TMO) convencional, com enxerto HLA- idêntico de doadores aparentados entre 1994 e 2006. Do total de 154 pacientes com DECHc oral, 65 amostras de GSM de 65 pacientes foram selecionadas. A mediana de idade dos pacientes foi de 36 (12 - 59 anos), sendo 39 homens e 26 mulheres. As doenças de base foram LMC (n = 37), LMA (n = 11) LLA (n = 8), AA (n = 6), HPN (n = 1) e SMD (n = 2). As fontes de células tronco para os TMOs foram sangue periférico (n = 28) e medula óssea (n = 37). As biópsias foram avaliadas segundo os sistemas de classificação de Horn et al. e Shulman et al. de forma cega e independente por duas observadoras, e o resultado de consenso foi considerado para análise estatística. Foi encontrada uma significante correlação entre os diagnósticos histológicos propostos por Horn et al. e Shulman et al. (R = 87%, p = 0,0001). O critério "linfócitos periductais com exocitose nos ductos", da classificação de Shulman et al., mostrou correlação com a sobrevida global do paciente (p = 0,007). Assim, a migração de linfócitos através do epitélio ductal pode exercer influência negativa na evolução clínica dos pacientes. "Infiltrado linfocítico periductal" no sistema de graduação de Horn et al. Mostrou correlação significante com a forma clínica (localizada ou extensa) da DECHc (p = 0,04). Os resultados deste estudo apontam para a importância prognostica adversa dos critérios "infiltrado linfocítico periductal" e "linfócitos periductais com exocitose nos ductos" e podem auxiliar no entendimento da DECHc oral. / Abstract: Establishing minimum criteria for cGVHD diagnosis, identifying those with prognostic significance, as well as standardizing these features, may add subsidies to conduct therapy, to facilitate the work of researchers and to improve communication between them. The goal of this work was to study two systems for cGVHD histological classification in minor salivary glands (MSG), one proposed by Horn in 1995 that has been used at the Pathology Department, UNICAMP, and another one proposed by Shulman et al., in 2006. It was a retrospective study including MSG biopsies collected at the diagnosis of oral cGVHD. The MSG samples were obtained from patients treated by conventional HSCT, from HLA matched- sibling donors between 1994 - 2006. Among 154 patients with oral cGVHD, 65 samples were selected from 65 patients. Patients median age was 36 (12 - 59 years), 39 males and 26 females. The underlying diseases were CML (n = 37), AML (n = 11), ALL (n = 8), SAA (n = 6), PNH (n = 1) and MDS (n = 2). The sources of HSCT used were bone marrow (n = 37) and peripheral blood (n = 28). The histopathological specimens were blindly and independently examined by two observers and consensus results were considered for statistical processing. A significant correlation was found between the histological grades proposed by Horn and Shulman (R = 87%, p = 0.0001). The criterium "Periductal lymphocytic infiltrate with exocytosis into duct", in Shulman's classification, was correlated with global survival (p = 0,007). "Peri-ductal lymphocyte infiltrate" in Horn's system showed significant correlation with the clinical cGVHD form (localized or extensive) of cGVHD (p = 0.04). The results suggested similarity between final diagnoses obtained either by Horn or Shulman's classification. The periductal lymphocytic infiltrate was the most important histological criterium for clinical form of cGVHD. The lymphocytes migration through ductal epithelium might exert negative influence in patient outcome. The findings point to the adverse prognostic significance of the following criteria: "periductal lymphocytic infiltrate" and "peri-ductal lymphocytic infiltrate with exocytosis into duct" and may improve the understanding of oral cGVHD. / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Na presente investigação estudamos a possível influência da falta da insulina sobre a atividade de duas enzimas importantes para a via glicolítica: a hexoquinase (HK) e a fosfofrutoquinase-1 (PFK-1), nas glândulas submandibular (GLSM) e parótida (GLPA) de ratos. Para isso, em ratos mantidos em jejum durante aproximadamente 15 horas foi injetado, via intraperitonial, estreptozotocin dissolvido em tampão citrato 0,1M pH 4,5 (60 mg/Kg de peso corporal). 48 horas após a indução, o sangue dos animais foi coletado e a glicemia determinada. Somente aqueles ratos que apresentaram glicemia igual ou acima de 350mg de glicose/100 ml de sangue foram utilizados. Os animais foram sacrificados 30 dias após a indução do estado diabético, por traumatismo craniano. As GLSM e GLPA foram removidas e analisadas para atividade e distribuição das enzimas HK e PFK-1. A enzima HK foi determinada no citosol (fração solúvel) e ligada a mitocôndria (fração ligada). A enzima PFK-1 foi determinada no citosol (fração solúvel) e ligada ao citoesqueleto (fração ligada) em dois pHs: pH 6,9, sujeito a regulação alostérica e pH 8,2, em que mostra atividade máxima. Na GLPA observamos aumento da atividade da HK tanto na fração solúvel (aproximadamente 33%) quanto na fração ligada a mitocôndria (aproximadamente 85%). Relativamente a isoenzimas de HK, não verificamos alteração no estado diabético. A atividade da enzima PFK-1 na GLPA não apresentou alterações quer considerando a forma sujeita a regulação alostérica, quer a forma com atividade máxima e portanto, não sujeita a regulação. Na GLSM constatamos uma redução da enzima HK ligada a mitocôndria de aproximadamente 74%, não havendo alteração da forma determinada no citosol (forma solúvel). Relativamente às formas isoenzimáticas, verificamos a perda de uma forma isoenzimática tanto na fração solúvel quanto na fração ligada. Por outro lado, observamos um aumento da atividade da PFK-1 da fração solúvel de aproximadamente 50% quando determinada em pH 6,9, que reflete a forma regulada alostericamente, e de aproximadamente 84% quando determinada em pH 8,2 e, portanto, não sujeito a regulação. Contrariando ao esperado, o conteúdo de Fru-2,6-P2 nas GLSM de ratos diabéticos apresentou redução de aproximadamente 42% enquanto a atividade da PFK-2 também apresentou redução. / We have studied in the present investigation a possible influence of the diabetic state of the rats on the activity of two important enzymes of the glycolitic pathway, namely, the HK and PFK-1 of the submandibular and parotid gland. The diabetic state was induced by an injection of streptozotocin (60mg/Kg body weight) dissolved in 0,1M citrate buffer pH 4,5 in rats overnight fasted. Forty-eight hours after the injection, blood was collected and the glucose determined. Only those animals presenting a blood glucose equal or above 350mg glucose/100ml blood we used in this experiment. The animals were sacrificed by cranial traumatism, thirty days after the induction of the diabetes, the submandibular and parotid glands were removed and analyzed for activity and distribution of the enzymes HK and PFK-1. The activity of the enzyme HK was determined in the cytosol (soluble fraction) and bound to mitochondria (solubilized fraction). The activity of the enzyme PFK-1 was determined in the cytosol (soluble fraction) and bounded to cytoscheletal (bound fraction)at two pHs, pH 6,9 that respond to allosteric regulation and pH 8,2 in which it show maximum activity. In the parotid gland it was observed an increase in the HK activity in both fractions, soluble and bond to mitochondria, of about 33% and 85% respectively. It was not possible to observe alterations in the isoenzymes profile. The activity of PFK-1 in the parotid gland showed no variation either considering the soluble fraction on the bound form, at both pHs in which it was determined. In the submandibular gland, it was verified a reduction of the bound HK of about 74%, but no variation in the soluble form. Concerning the isoenzymes, it was observed the disappearance of an isoenzyme in both fraction. On the other hand, we observed an increase in the activity of PFK-1 of the soluble fraction of about 50%, when determined at pH 6,9, pH in which it respond to allosteric control, and about 84% when determined at pH 8,2. Contrary to what it was expected, the content of Fru-2,6-P2 were reduced in the submandibular gland of diabetic rats.

Orientador: Oslei Paes de Almeida / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-25T05:50:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vargas_PabloAgustin_D.pdf: 5064283 bytes, checksum: add315c10cfa15f730cbc610342d412c (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar as alterações anatomopatológicas das glândulas parótidas de 100 pacientes aidéticos autopsiados e de 13 que morreram por outras causas. As autópsias foram realizadas no SVOC (Serviço de Verificação de Óbitos da Capital) ¿ FMUSP (Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo) em 1996 e 1997, seguindo os preceitos éticos e técnicos do local. As glândulas parótidas foram dissecadas, cortadas em seis fragmentos e os cortes histológicos corados em H/E, Grocott e Zieh-Nielsen. No grupo HIV negativo observou-se em três casos sialadenite discreta crônica. Nas parótidas do grupo aidético observou-se dez casos de micobacteriose, três de criptococose, dois de histoplasmose e nove de citomegalovirose. Sialadenite esteve presente em 34 casos. Foram encontradas seis cistos linfoepiteliais, um tumor de Wasthin e um linfoma não-Hodgkin difuso de grandes células B. Os linfonodos intraparotídeos do grupo aidético apresentaram: depleção de linfócitos em 32 casos; granulomas com bacilos álcool-ácido resistentes e 10 de inclusão de tecido glandular nos linfonodos em 36 casos. Em 90% dos casos o nível de linfócitos CD4 no sangue dos indivíduos aidéticos esteve abaixo de 200 cels/ 'mu'l. A etiologia da sialadenite crônica em pacientes aidéticos ainda precisa ser melhor determinada. Micobacteriose e citomegalovirose foram mais freqüentes do que criptococose e histoplasmose. Estas doenças não estavam localizadas na parótida exclusivamente, envolvendo também outros órgãos. Lesões infecciosas, císticas e neoplásicas acometeram as glândulas parótidas de pacientes aidéticos mesmo sem alterações clínicas evidentes. Estudos imunohistoquimicos, hibridização ¿in situ¿ e PCR para detecção de agentes infecciosos bacterianos, fúngicos e virais tornam-se necessários para melhor determinar o envolvimento das glândulas na AIDS / Abstract: This study describes the alterations found in the parotid glands of 100 patients who died of AIDS and of 15 who died for other reasons. Sialadenitis occurred in the parotid of 13,34% cases of the control group, and in 35% cases of the AIDS group. Ten cases of mycobacteriosis, three of cryptococosis, two of histoplasmosis, nine of citomegalovirusis, six lymphoepithelial cysts, one Warthin¿s tumor and one non-Hodgkin lymphoma were found in the parotid of the HIV positive patients. Intraparotid Iymph nodes showed depletion of Iymphocytes in 31 cases and inclusion of glandular tissue in 37 cases of immunodeficient patients. Mycobacteriosis, cryptococosis and histoplasmosis in the parotid glands are well documented in the literature, but in HIV positive it is rarely described. It is also important to consider that the alterations of the parotid here described had not been diagnosed clinically. This results indicate that infectious and others lesions in the parotid gland and probably in the other major salivary glands are more frequent than here to fore described in the literature in AIDS patients / Doutorado / Biologia e Patologia Buco-Dental / Doutor em Odontologia

Orientador: Francisco Carlos Groppo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-22T06:46:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alencar_PhillipeNogueiraBarbosa_M.pdf: 1861524 bytes, checksum: 99b4aeb86d33c5851061af86242547cb (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: O presente trabalho teve como proposta avaliar o efeito radioprotetor de uma solução homeopática sobre a função salivar e a morfologia de glândulas parótidas de ratos irradiados. A amostra foi composta por 150 animais que foram divididos, aleatoriamente, em 6 grupos de 25 animais: G1 ( grupo controle) - recebeu solução salina v.o., mas não foi irradiado; G2 (controle Irradiado) - tratamento idêntico ao G1 e recebeu dose única de irradiação de 15 Gy; G3 (álcool) - recebeu solução hidroalcoólica dinamizada em 15 CH v.o.; G4 (álcool irradiado) - tratamento idêntico ao G3 e recebeu irradiação; G5 (homeopatia) - recebeu 0,25 ml (aproximadamente 1ml/kg) da solução hidroalcoólica irradiada com 15 Gy e dinamizada em 15 CH v.o.; G6 (homeopatia irradiado) tratamento idêntico ao G5 e foi submetido à irradiação. Decorridos os tempos de 12 horas, 3, 10, 17 e 24 dias após a administração dos fármacos, todos os animais foram induzidos à salivação. Analisando a função salivar, foram observadas diferenças estatisticamente significantes somente para o período de 17 dias, no qual os animais irradiados e tratados com a formulação homeopática mostraram maior salivação dos que os demais grupos na mesma condição. Na análise morfométrica foi medido o número de ácinos em função do tempo, considerando cada grupo separadamente. A análise dos resultados mostrou que houve diferença estatisticamente significante somente para o grupo de animais que recebeu álcool e foi irradiado. Esses animais apresentaram uma tendência de diminuição do número de ácinos ao longo do tempo. Já os animais que receberam homeopatia ou o controle e foram irradiados, não mostraram diferenças estatisticamente significantes ao longo do tempo, sugerindo que o tratamento homeopático pode ter diminuído o efeito do álcool sobre o número de ácinos. Concluiu-se, por meio da função salivar, que houve um efeito radioprotetor tardio da solução homeopática. Pode-se concluir também, por meio da análise da morfologia da glândula parótida, que houve um efeito radioprotetor da solução homeopática / Abstract: The aim of the present study was to evaluate the radioprotective effect of a homeopathic solution in the salivary function and in the parotid gland morphology in irradiated rats. The sample size was 150 rats randomly divided in 6 groups with 25 animals each. The groups were named based on the medication: G1 (Control) - animals received saline solution, p.o., but they were not irradiated; G2 (Irradiated Control) - received the same treatment on G1 and a single dose of 15 Gy of irradiation; G3 (Alcohol) - received a hydroalcoholic solution dynamized at 15 CH, p.o.; G4 (Irradiated Alcohol) - received the same treatment on G3 and a single dose of irradiation; G5 (Homeopathy) - received 0.25 ml (~1mL/kg) of the hydroalcoholic solution irradiated at 15 Gy and dynamized at 15 CH, p.o.; G6 (irradiated homeopathy) - received the same treatment on G5 and a single dose of irradiation. Each group was subdivided in 5 different groups, based on the time point of the euthanasia: 12 hours, 3, 10, 17, and 24 days. The medication was applied for 7 days before and 7 days after the radiation treatment. The irradiated groups received only one dose of 15Gy and after the determined times salivation were induced. The salivary function analysis showed that only the G6 group that was euthanized on the day 17 had a statistical significant difference when compared to the others irradiated groups showing a higher salivation flow rate. In the morphometric analysis, the number of acini present over the time in the parotid gland was observed. The only group that showed a statistical significant difference was the Alcohol Irradiated. This group showed a tendency of reduction in the number of acini over the time. Data from the irradiated homeopathy and irradiated control group were not statistical significant. This suggests that the homeopathic treatment might have reduced the alcohol effect on the number of acini. The homeopathy had a late radioprotective effect of the homeopathic solution based on the salivary function. In addition, it also had a radioprotective effect of the homeopathic solution based on the morphology analysis of the parotid gland / Mestrado / Radiologia Odontologica / Mestre em Radiologia Odontológica

Orientador: Ricardo de Lima Zollner / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-31T17:05:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Boechat_LuisHenriqueBarbosa_D.pdf: 2592935 bytes, checksum: cb27a12bf515a7b021e28e8ccb0cc6b1 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Os camundongos NOD (non obese diabetic) representam modelo experimental estabelecido para o estudo de diabetes mellttus tipo 1, onde permitem o acompanhamento detalhado da evolução dos processos imunológicos que antecedem a expressão clínica da doença. Entretanto, estes animais desenvolvem outras manifestações auto-imunes como adenosialite, anemia hemolítica, paratiroidite e tiroidite espontâneas. Resultados publicados a partir da década de 1990 demonstraram que os camundongos NOD, quando submetidos a excesso de iodo após período de baixa oferta dietética deste elemento em associação com drogas antitíroidianas, desenvolvem forma de tiroidite auto-imune similar à tiroidite de Hashimoto em humanos. Este processo, dependente da oferta excessiva de iodo, é acompanhado do aumento dos níveis séricos de auto-anticorpos antitiroidianos e se mantém indefinidamente, ao contrário do que se observa nos modelos clássicos de tiroidite experimental induzida em outras linhagens. Há várias décadas, o iodo tem sido correlacionado com o aumento da expressão de tiroidite de Hashimoto em regiões com programa de suplementação deste mineral. Paralelamente, resultados oriundos de diversos grupos de pesquisa apontam este elemento como um possível indutor de morte celular programada (apoptose), embora o mecanismo envolvido ainda esteja em discussão. Neste trabalho, submetemos camundongos NOD machos à sobrecarga de iodo (20 fxg/animal/dia) após tratamento com metimazole. A expressão dos genes responsáveis pela síntese de Fas, Fas-ligante, BCL-w, TNF-a, INF-y, IL-2, IL-4, IL-10 e IL-12 (cadeias p35 e p40), 24h após a retirada do iodo e na 32a semana de vida foi avaliada por abordagem semi-quantitativa. Adicionalmente, realizamos a observação morfológica e marcação das subpopulações de linfócitos T envolvidas no infiltrado linfo-plasmocitário. Observamos que todos os animais submetidos a este protocolo apresentavam na 32ª semana de vida infiltrado inflamatório englobando folículos tiroidianos em desestruturação. Entretanto, a extensão do infiltrado variava entre os animais deste grupo, sendo mais intenso em 2/5 dos animais estudados. A avaliação semi-quantitativa da expressão de RNA mensageiro de Fas-ligante, BCL-w e TNF-a evidenciou aumento da sinalização destes componentes de apoptose nos animais submetidos à sobrecarga de iodo 24 horas após a administração da última dose. A expressão de IL-12p40 e p35 foi detectada em todos os grupos experimentais e, embora não houvesse diferenças estatísticas, apresentou tendência à elevação nos animais com 32 semanas. IFN-y estava presente de forma isolada em 2/5 dos animais do grupo controle com 32 semanas e em 1/5 do grupo controle com metimazole em 10 semanas. O produto do gene para lL-2 expressou-se em 3/5 dos animais do grupo controle com 32 semanas. Por outro lado, não observamos expressão do RNA mensageiro para iL-4, enquanto a presença de IL-10 foi constatada em baixa intensidade apenas em animais com 32 semanas. Estes dados, tomados em conjunto, sugerem a predominância de resposta com fenótipo Th1 nas tiróides destes animais. A análise das respostas individuais dos camundongos NOD estudados evidencia níveis distintos de resposta para sinalização de Fas-L, BCL-w, TNF-a e IL-12 no grupo de animais submetidos à sobrecarga de iodo e sacrificados após 24 horas (grupo MI44D). O mesmo padrão de resposta foi observado no grupo controle de 32 semanas (grupo C32) tardio em relação à expressão de IL-12. Concluímos que o iodeto de potássio, nas condições experimentais aqui utilizadas, é capaz de promover a intensificação da tiroidite auto-imune nos camundongos NOD, favorecendo o surgimento de processo inflamatório que resulta em destruição folicular. Este padrão, é precedido por aumento na sinalização de Fas-L e BCL-w e tendência de elevação na expressão de TNF-a. nos animais sacrificados imediatamente após a retirada do iodo. A IL-12, citocina característica da resposta Th1, esteve presente em todos os grupos experimentais, com tendência à elevação nos animais mais velhos que apresentam processo inflamatório organizado. Nossos resultados sugerem que os camundongos NOD de nossa colônia têm dois padrões de resposta a este modelo experimental, havendo maior sinalização da expressão de componentes de apoptose (Fas-L, BCL-w e TNF-a) e IL-12 em alguns indivíduos. Desta forma, estes padrões permitirão iniciar processo de detecção de subgrupo de camundongos NOD capaz de responder à sobrecarga de iodo com apoptose e desencadeamento de tiroidite análoga à tiroidite de Hashimoto. / Abstract: NOD (non obese diabetic) mice is an established experimental model for diabetes, allowing detailed observation of immune processes that are developed before the onset of clinical expression of the disease. However, these animals also present other spontaneous autoimmune manifestations such as sialitis, hemolytic anemia, parathyroiditis and thyroiditis. Studies published during the last decade showed that NOD mice, when submitted to iodine excess after a goitrogenic period induced by low iodine diet in association with anti-thyroid drugs, develop autoimmune thyroiditis that resembles human Hashimoto's thyroiditis. This process is dependent on the excessive offer of iodine, is accompanied by the rise of serum levels of anti-thyroid antibodies and is maintained indefinitely, in contrary with what is observed in classic models of experimental thyroiditis induced in other mice strains. Iodine has been correlated for many decades with the rise in prevalence of Hashimoto's thyroiditis in regions where its supplementation has been introduced. By the other side, results presented by many research groups have pointed to this element as a possible inducer of apoptosis. In this study we have evaluated thyroid response in male NOD mice to iodine overload after treatment with methimazole during 6 weeks, focusing the expression of Fas, Fas-ligand, BCL-w, TNF, y-IFN, IL-2, \L-A, IL-10 and p35 and p40 chains of IL- 12 24h after iodine overload and at 32nd week of life. We have also observed the subpopulations of T helper lymphocytes present in inflammatory infiltrate. We have observed that all animals submitted to the protocol above have presented organized inflammatory infiltrate in week 32 with thyroid follicles being destroyed. Nevertheless, the extension of infiltrate varied among animals in this group, being more intense in 2/5 animals. Semi-quantitative analysis of expression of messenger RNA for Fas-ligand, BCL-w and TNF have shown the rise in signalization in NOD mice that received iodine overload (24 hours after), suggesting that this element is involved apoptosis induction. Expression of IL12p40 and IL12p35 was detect in all experimental groups and, although we have not observed statistical differences, this expression presented a tendency of elevation in animals with 32 weeks of life. y-IFN was present in only 2/5 in controls at 32nd week and 1/5 in controls receiving methimazole at 10th week. The product of the gene for IL-2 was expressed in 3/5 animals in control group with 32 weeks. By the other side, messenger RNA for IL-4 was not observed in animals studied herein, while IL-10 have been expressed with low intensity in animals with 32 weeks of life. These data suggest the predominance of Th1 response in these animals. Analysis of individual responses in NOD mice studied have evidenced distinct levels of signalization for Fas-ligand, BCL-w, TNF and IL-12 in those submitted to iodine overload and sacrificed after 24 hours (group M144D). The same pattern of response was detected in control group with 32 weeks of life (group C32) in relation to the expression of IL-12. We suggest that potassium iodide, used in the conditions detailed above, can intensify thyroiditis in NOD mice, favoring the inflammatory process that leads to follicular destruction. This is preceded by the rise in expression of Fas-ligand and BCL-w and probably by TNF. IL-12, a cytokine characteristic of Th1 response, was present in all thyroid specimens studied, with tendency to elevation in older animals, that also present organized inflammatory infiltrate. NOD mice in our colony have two different patterns of response in this experimental model, with higher levels of signalization of apoptosis and IL-12 in some animals. These results will allow the detection of this subgroup of NOD mice that can respond more appropriately to iodine overload and are, probably, more prone to the development of autoimmune thyroiditis. / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Rita Maria Pereira Avancini / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-20T18:49:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tirone_Guido_M.pdf: 6327150 bytes, checksum: 5406c9fdd94f8faba18b7589ded3524a (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: Chrysomya putoria é uma mosca varejeira normalmente associada a locais com precárias condições de higiene. Na natureza ela cria-se em carcaças e no esterco que acumula-se sob as gaiolas de galinhas poedeiras. Esta mosca está no Brasil a cerca de duas décadas mas na Áftica, seu local de origem, ela é descrita como díptero causador facultativo de miíase. As glândulas sexuais acessórias de temeas tem um importante papel em diferentes etapas da fertilização do ovo e sua ausência experimental diminui a taxa de fertilização quase a zero. Neste estudo o desenvolvimento das glândulas sexuais acessórias de remeas de C. putoria foi avaliado medindo seu tamanho, contando o número de células e examinando suas alterações histológicas durante o primeiro ciclo gonotrófico. Em remeas sob dieta proteica as glândulas aumentaram suas dimensões de 1,8 a 3,5 vezes, de acordo com a porção medida, até o fim da ovogênese. Após a oviposição não houve redução significante de tamanho das glândulas. Fêmeas sob dieta aproteica não desenvolveram ovos nem aumentaram o tamanho de suas glândulas. O número médio de células em cada glândula é 561,2 :i: 77,54 e não se altera durante a ovogênese. Duas regiões podem ser observadas nas glândulas acessórias, uma secretora e uma ductal, esta última muito estreita e muito próxima à vagina. Células grandes com citoplasma basófilo, núcleo grande e basal, e uma vesícula na região apical constituem a região secretora. O conteúdo desta vesícula é liberado ao lúmen da glândula através de um aparelho terminal. O lúmen é revestido com um material semelhante a cutícula e entre esta camada e as células grandes estão células descritas como quitinogênicas. A região ductal, também internamente revestida com material semelhante a cutícula, apresenta células muito menores doque aquelas da região secretora, cilíndricas e dispostas em uma monocamada. o citoplasma das células secretoras cora-se fortemente pelo método de "fast green" e ftacamente pelo método de PAS. A coloração com azul de toluidina pH 4.0 precedida por RNAse mostrou que o citoplasma é rico em RNA. O conteúdo da vesícula mostrou uma forte reação ao método de P AS apenas no estágio VI. O conteúdo do lúmen das glândulas tem uma aparência granulada e resultou positivo para a coloração com "fast green". As células grandes tem três ou quatro nucléolos identificados através do método de impregnação por prata. Os dados, para os quais encontrou-se dados relacionados, foram discutidos comparativamente. Para alguns dos resultados, entretanto, como mÚffiero de células e nucléolos, nenhum dado disponível foi encontrado na literatura sobre Dípteros / Abstract: Chrysomya putoria is a blowfly usually assoeiated to filthy ptaces. In nature it breeds on carcasses and on manuce sueh as in that aeeumulated under the eages of egg-Iayer hens. This tly has been in Brazil for only about two deeades but in Aftiea, its plaee of origin, it is described as faeultative myiases-producing diptera. Sexual accessory glands of female tlies have a very important role in different steps of egg fertilization and its experimental absenee deereases the fertilization rate to almost zero. In this study the development of the sexual aecessory glands of C. putoria females was assessed by measuring their size, eounting their eell number and examining their histologieal ehanges throughout the first gonotrophie cycle. In females under proteie diet the glands increased their dimensions by 1,8 to 3,5 times, aeeording to the portion measured, up to the end of oogenesis. Afier oviposition there was no signifieant size reduetion ofthe glands. Females under non-proteie diet neither develop eggs nor inereased the size of their glands. The average number of eells in eaeh gland is 561,2 :f: 77,54 and does not ehange along the oogenesis. Two regions can be observed in the aeeessory glands, a secretory and a ductal, this latter narrower and elo ser to the vagina. Large eells with basophil cytoplasm, a large basal nucleus, and a vesiele in the apieal region eonstitute the seeretory region. The eontent of this vesiele is released to the lumen of the gIand through an end apparatus. The lumen is lined with a eutielelike material and between this tayer and the large eells there are small eells deseribed as ehitinogenie. The ductal region, also intemally lined with the eutiele-like material, presents eells much smaller than those of secretory region, eylindrie in shape and arranged in a monolayer. The cytoplasm of the large secretory eells stains strongly by the fast green method and weakly by PAS. Treatment with toluidine blue pH 4.0 preeeded by RNAse showed the cytoplasm richness in RNA. The vesicle content showed a strong reaction to P AS method only in stage VI. Lumen content of the glands has a granulated appearance and resulted positive for fast-green treatment. The large ceUs have three or four nucleoli identified through silver impregnation method. The data for which correlated data could be found were discussed comparatively. For some of the results, however, like number of ceUs and nucleoli, no available data was found in the Diptera literature / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Ciências Biológicas