Submitted by Socorro Pontes (socorrop@ufersa.edu.br) on 2017-04-19T15:31:40Z No. of bitstreams: 1 ZulieteAASF_TESE.pdf: 1241282 bytes, checksum: 77075ec3ef268d08c1bb2fd92bab3dba (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Christiane (referencia@ufersa.edu.br) on 2017-04-26T12:15:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ZulieteAASF_TESE.pdf: 1241282 bytes, checksum: 77075ec3ef268d08c1bb2fd92bab3dba (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Christiane (referencia@ufersa.edu.br) on 2017-04-26T12:17:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ZulieteAASF_TESE.pdf: 1241282 bytes, checksum: 77075ec3ef268d08c1bb2fd92bab3dba (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-26T12:17:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ZulieteAASF_TESE.pdf: 1241282 bytes, checksum: 77075ec3ef268d08c1bb2fd92bab3dba (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / Gastrointestinal nematodes of small ruminants cause severe pathology and are a major cause of economic losses in sheep and goat farming, particularly in tropical and subtropical areas worldwide. Therefore, the development of sustainable, environmentally acceptable methods of nematode control has become a necessity. To evaluate the anthelmintic action of hydroalcoholic extract of Momordica charantia (EHMC) in the control of gastrointestinal nematodes of sheep, the egg hatch test (EHT), larval development test (LDT), and toxicity test using mices Balb/c and reduced eggs count in the feces (FECRT), were conducted. To evaluate the anthelmintic efficacy in vitro, TEO and TDL tests were conducted using EHMC at concentrations of 0.05; 0.1; 0.3; 0.7; 1.5 mg ml-1 on eggs and larvae of Haemonchus contortus. For the toxicity tests, Balb/c mice were randomly divided in groups (n = 12), based on the following treatments: 4.000 (G1), 6.000 (G2), 8.000 (G3), 10.000 mg.kg-1 (G4) and control group (G5), administered by gavage and observed for 14 days. To evaluate the anthelmintic action in vivo, 50 sheep naturally infected were randomly divided into five groups (n=10 per group) where: G1 was the control group, G2 was treated with 350 mg kg-1 EHMC, G3 with 7.5 mg kg-1 of Levamisole, G4 with 0.2 mg.kg-1 of Ivermectina and G5 with 10 mg.kg-1 of Albendazol. The efficacy on the control of gastrointestinal nematodes was valued 7, 14 and 21 days after treatment for the calculation of the fecal egg count reduction test (FECRT). In the in vitro tests, the EHMC turned out to be very effective by reducing 98.81% of the hatching eggs and the development 99.61% of H. contortus larvae in the dose of 1.5 mg.ml-1. In the acute toxicity test, the EHMC produced no signs of toxicity or death at a concentration of 4.000 mg kg-1, showing that doses below that value are considered safe for use in sheep naturally infected. In the FECRT, the reduction in OPG in sheep was 57% and 56% for EHMC, 93% and 74% for levamisole on days 7 and 14 after treatment, respectively. On day 14 after treatment, there was no significant difference between EHMC and levamisole (p<0.05), there was a reduction of 54% and 69% of excretion of eggs of Haemonchus and Trichostrongylus respectively in the group treated with EHMC in the same period. We conclude that the hydroalcoholic extract of M. charantia showed significant anthelmintic effect in vitro and in vivo, providing an alternative for the control of gastrointestinal nematodes in sheep / Nematóides gastrintestinais de pequenos ruminantes causam patologias graves e são uma das principais causas de perdas econômicas para criação de ovinos e caprinos, principalmente em áreas tropicais e subtropicais em todo o mundo. No entanto, o desenvolvimento de métodos sustentáveis, ambientalmente aceitáveis de controle de nematóides tornou-se um estudo necessário. Objetivando avaliar a ação anti-helmíntica do extrato hidroalcoólico de Momordica charantia (EHMC) no controle de nematóides gastrintestinais de ovinos foi realizado teste de eclosão de ovos (TEO), teste de desenvolvimento larvar (TDL), assim como testes de toxicidade e teste de redução de contagem de ovos nas fezes (FECRT). Para avaliação da eficácia anti-helmíntica in vitro os testes TEO e TDL foram realizados utilizando EHMC nas concentrações de 0,05; 0,1; 0,3; 0,7 e 1,5 mg ml-1 sobre ovos e larvas de Haemonchus contortus, já para o teste de toxicidade foram utilizados camundongos Balb/c agrupados aleatoriamente (n=12), com base nos tratamentos: 4000 (G1), 6000 (G2), 8000 (G3), 10.000 mg kg-1 (G4) e grupo controle (G5), administrados por gavagem e mantidos em observação durante 14 dias. Para avaliar a ação anti-helmíntica in vivo, 50 ovinos infectados naturalmente foram divididos aleatoriamente em cinco grupos (n=10 por grupo): G1 (grupo controle), G2 tratado com 350 mg kg-1 EHMC, G3 com 5 mg kg-1 de Levamisol, G4 com 0,2 mg kg-1 de Ivermectina, G5 com 10 mg kg-1 de Albendazol. A eficácia no controle de nematóides gastrintestinais foi avaliada 7, 14 e 21 dias pós-tratamento para o cálculo do teste de redução da contagem de ovos nas fezes (FECRT). Nos testes in vitro o EHMC mostrou eficácia elevada reduzindo 98,81% a eclosão de ovos e 99,61% o desenvolvimento de larvas de H. contortus na dose de 1,5 mg ml-1. Para o teste de toxicidade aguda, o EHMC não produziu sinais de toxicidade ou morte na concentração de 4000 mg kg-1, mostrando que doses abaixo do valor referido são consideradas seguras para utilização em ovinos infectados naturalmente. A redução no OPG observada no FECRT em ovinos foi de 57% e 56% para EHMC, 93% e 74% para Levamisol nos dias 7 e 14 póstratamento, respectivamente. No dia 14 pós-tratamento, não houve diferença significativa entre EHMC e Levamisol (p<0,05), ocorrendo redução de 54% e 69% da excreção de ovos do gênero Haemonchus e Trichostrongylus respectivamente no grupo tratado com EHMC no mesmo período. Concluímos que o EHMC mostrou efeito anti-helmíntico significativo in vitro e in vivo, constituindo uma alternativa para o controle de nematóides gastrintestinais em ovinos / 2017-04-19

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-12-18Bitstream added on 2014-06-13T21:06:07Z : No. of bitstreams: 1 borges_fa_dr_jabo.pdf: 465595 bytes, checksum: 54f3defcb12b86c4f559cfac83cd1c2f (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A presente pesquisa teve como objetivo caracterizar e isolar uma estirpe de campo de Haemonchus contortus resistente à ivermectina, avaliar a ação reversora do verapamil, por meio de testes in vitro (migração de larvas em gel de ágar) e in vivo (redução de OPG e necropsias parasitológicas), e realizar a análise de genes relacionados à glicoproteína-P e canais de cloro ativados por glutamato (GP-P e HcGluCL). A estirpe de H. conctortus isolada apresentou elevada resistência à ivermectina, sendo observada eficácia ínfima de 6,59%. O verapamil isoladamente não apresentou efeito nematodicida, porém, em concentrações crescentes, associado à ivermectina (DL50-4,317μmol) proporcionou aumento de eficácia contra a cepa resistente de H. contortus, alcançando o percentual de 94,3% (verapamil 100 mmol). Os resultados do teste anti-helmíntico controlado, em que foram utilizados 42 ovinos experimentalmente infectados com H. contortus resistente à ivermectina, revelaram que o verapamil apresentou uma atividade de reversão parcial significativa (P<0,05) da resistência. Pela análise genotípica efetuada nas sete amostras desta população de H. contortus, submetidas aos diferentes tratamentos com ivermectina, verapamil ou associação entre estas drogas, verificou-se similaridade em relação à glicoproteína-P e pouca semalhança em relação aos canais de cloro ativados por glutamato. / The present work aimed to identify and isolate a field ivermectin-resistant Haemonchus contortus strain, evaluate the effect of verapamil as a P-GP modulator agent by in vitro (agar gel larval migration assay) and in vivo (FECRT and controlled test), and analyze the genes related to the P-glycoprotein (P-GP) and H. contortus glutamate chloride (HcCluCl) chanel expression. The H. contortus field strain isolated was highly resistant to ivermectin, showing only 6.59% of efficacy. Verapamil alone didn’t show any in vitro anthelmintic action but increasing concentrations of this drug associated to ivermectin (LD50-4.317μmol) resulted in higher efficacy, when compared to ivermectin alone, with 94.3% efficacy in the 100 mmol concentration. The results of the anthelmintic controlled test, in wich it was used 42 sheep experimentally infected with the field ivermectin-resistant H. contortus strain, showed a significant (P<0,05) parcial ivermectin resistance reversion by verapamil. The genomic analysis of the seven samples from this H. contortus resistant population submited to diferent treatment with ivermctin, verapamil and the association between theese two drugs, showed similarity in the genes related to the expression of P-GP and high polimorfism related to HcGluCL.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-07-15Bitstream added on 2014-06-13T19:23:36Z : No. of bitstreams: 1 buzzulini_c_dr_jabo.pdf: 822369 bytes, checksum: bd1f32667ac4aa03e1ed97621b621a55 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Este trabalho objetivou avaliar o efeito do genótipo e da dieta protéica na resistência e no desempenho de cordeiros experimentalmente infectados por Haemonchus contortus. Foram utilizados 24 cordeiros provenientes do cruzamento das raças Dorper x Santa Inês (DSI) e 24 Santa Inês (SI), isentos de nematódeos gastrintestinais, distribuídos em quatro grupos de seis animais. De acordo com o genótipo, os cordeiros foram subdivididos em dois grupos infectados e dois mantidos como controle, recebendo dieta com menor teor (12%) e maior teor de proteína bruta (20%), respectivamente. Os cordeiros infectados artificialmente receberam um inóculo contendo 1.000 larvas infectantes (L3) de H. contortus por dose, duas vezes por semana, durante todo o experimento. Os cordeiros foram mantidos em baias individuais, com controle diário do alimento fornecido e de sobras. Semanalmente, foram realizadas contagens de ovos de nematódeos por grama de fezes (OPG), hemograma, dosagens bioquímicas, além de pesagens individuais. Ao atingirem 35 kg de peso corporal, os cordeiros foram abatidos e necropsiados, objetivando mensurar a carga parasitária, avaliar as características quantitativas das carcaças e qualitativas da carne. O desempenho (consumo de matéria seca, ganho de peso diário, conversão alimentar e eficiência alimentar) foi superior (P<0,05) para o genótipo DSI, para a dieta com teor mais elevado de proteína e para os cordeiros mantidos sem infecção por H. contortus. O efeito do genótipo, da suplementação protéica e da hemoncose também influenciou as principais variáveis hematológicas e bioquímicas, cujos valores foram menores em cordeiros infectados e mantidos com alimentação menos protéica. Contagens médias superiores (P<0,05) de OPG (520,06) e H. contortus (200,38) foram observadas no genótipo DSI. Observou-se influência do genótipo DSI (P<0,05) nos pesos médios... / This work aimed to evaluate the effect of genotype and dietary protein on the resistance and performance of lambs to experimentally infected by Haemonchus contortus. Twenty-four Dorper x Santa Inês (DSI) crossbreed lambs and 24 pure Santa Inês (SI), without gastrointestinal nematodes, were distributed into four groups of six lambs. Within each genotype, the lambs were subdivided into two infected and two control groups, which received a low protein (12%) or high protein diet (20%), respectively. The experimentally infected lambs received inoculate containing 1,000 infecting larvae (L3) of H. contortus per dose, twice weekly, throughout the entire experimental period. The lambs were maintained in individual stalls, with daily control of feed provided and remaining. Weekly, nematode egg per gram of feces (EPG) counts were performed, together with hemograms, biochemical concentrations and individual weighing. Once they achieved 35 kg, the lambs were slaughtered and necropsied to determine the parasite load and evaluate the quantitative characteristics of the carcass and the qualitative characteristics of the meat. For the DSI genotype, the performance (dry material consumption, daily weight gain, feed conversion and feed efficiency) was greater (P<0.05) for the diet containing higher protein content and for lambs not infected by H. contortus. The effect of genotype, dietary protein content and parasitic condition also influenced the principal hematological and biochemical variables, showing lower values in infected lambs and those fed with low protein feed. The highest mean EPG (520.06) and H. contortus (200.38) counts were observed in the DSI genotype (P<0.05). Observation verified the influence of the DSI genotype (P<0.05) on the mean warm and (17.03 kg) cold (16.48 kg) carcass weights and of H. contortus infection on weight-loss due to cooling (6.2%) ...(Complete abstract click electronic access below)

Resumo: A presente pesquisa teve como objetivo caracterizar e isolar uma estirpe de campo de Haemonchus contortus resistente à ivermectina, avaliar a ação reversora do verapamil, por meio de testes in vitro (migração de larvas em gel de ágar) e in vivo (redução de OPG e necropsias parasitológicas), e realizar a análise de genes relacionados à glicoproteína-P e canais de cloro ativados por glutamato (GP-P e HcGluCL). A estirpe de H. conctortus isolada apresentou elevada resistência à ivermectina, sendo observada eficácia ínfima de 6,59%. O verapamil isoladamente não apresentou efeito nematodicida, porém, em concentrações crescentes, associado à ivermectina (DL50-4,317μmol) proporcionou aumento de eficácia contra a cepa resistente de H. contortus, alcançando o percentual de 94,3% (verapamil 100 mmol). Os resultados do teste anti-helmíntico controlado, em que foram utilizados 42 ovinos experimentalmente infectados com H. contortus resistente à ivermectina, revelaram que o verapamil apresentou uma atividade de reversão parcial significativa (P<0,05) da resistência. Pela análise genotípica efetuada nas sete amostras desta população de H. contortus, submetidas aos diferentes tratamentos com ivermectina, verapamil ou associação entre estas drogas, verificou-se similaridade em relação à glicoproteína-P e pouca semalhança em relação aos canais de cloro ativados por glutamato. / Abstract: The present work aimed to identify and isolate a field ivermectin-resistant Haemonchus contortus strain, evaluate the effect of verapamil as a P-GP modulator agent by in vitro (agar gel larval migration assay) and in vivo (FECRT and controlled test), and analyze the genes related to the P-glycoprotein (P-GP) and H. contortus glutamate chloride (HcCluCl) chanel expression. The H. contortus field strain isolated was highly resistant to ivermectin, showing only 6.59% of efficacy. Verapamil alone didn't show any in vitro anthelmintic action but increasing concentrations of this drug associated to ivermectin (LD50-4.317μmol) resulted in higher efficacy, when compared to ivermectin alone, with 94.3% efficacy in the 100 mmol concentration. The results of the anthelmintic controlled test, in wich it was used 42 sheep experimentally infected with the field ivermectin-resistant H. contortus strain, showed a significant (P<0,05) parcial ivermectin resistance reversion by verapamil. The genomic analysis of the seven samples from this H. contortus resistant population submited to diferent treatment with ivermctin, verapamil and the association between theese two drugs, showed similarity in the genes related to the expression of P-GP and high polimorfism related to HcGluCL. / Orientador: Alvimar José da Costa / Coorientador: Marcelo Beltrão Molento / Banca: Giane Serafim da Silva / Banca: Alessandro Francisco Talamini do Amarante / Banca: Gilson Pereira de Oliveira / Banca: Adjair Antonio do Nascimento / Doutor

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_marina_cunha_sinott.pdf: 651389 bytes, checksum: a3911bf52b78e4b6458a51e537e40ea0 (MD5) Previous issue date: 2012-05-14 / Parasitic infections are the major cause of losses in livestock, particularly those involving sheep. Multidrug resistance makes the problem even more worrying because in addition to pathogens, parasites do not appear more susceptible to the active principles. Currently, for the progress to occur in sheep farming, there must be a need to seek alternatives that reduce the dependence on the success of the activity to the emergence of a molecule that makes a lack reduced, selective toxicity, and high degree of effectiveness in combating infestation. This context has led to studies in order to investigate the behavior of strains Bacillusspp, when in contact with eggs and young larvae of the forms tricostrongilídeo Haemonchuscontortus, which is undoubtedly the most pathogenic for sheep that are raised in the field. It was verified through in vitro tests, which B. circulans showed an 80.9% reduction in the number of larvae when compared to control groups. This reduction was also observed in the tests made in vivo, as well as the residual capacity of the agent through tests performed with Bacillus transformed and expressing the GFP gene. / As parasitoses que acometem ovinos são a maior fonte de prejuízos na pecuária. Devido aos tratamentos inadequados dessa enfermidade, os parasitos não se mostram mais suscetíveis aos princípios ativos químicos atuais. Para que ocorram progressos na pecuária ovina, há a necessidade de buscar alternativas que visem reduzir a dependência do sucesso da atividade ao surgimento de uma molécula que apresente carência reduzida, toxicidade seletiva com alto grau de eficácia no combate à infestação parasitária. O presente estudo avaliou a toxicidade de cepas de Bacillus spp. para ovos e formas jovens de larvas do tricostrongilídeo Haemonchus contortus. Através de testes in vitro utilizando uma suspensão esporotoxina contendo 2 x 108 UFC/mL foi possível verificar que os Bacillus thuringiensis var osvaldocruzi, Bacillus circulans, B. thuringiensis var israelensis, B. thuringiensis var kurstaki demonstraram ação larvicida com uma redução de 81; 80; 79 e 76% respectivamente no número de larvas. Nos testes in vivo, realizados com B. circulans em ovinos, observou-se atividade larvicida similar (80%) ao in vitro e esta atividade permaneceu por até sete dias após sua administração. Estes resultados sugerem que os Bacillus estudados são uma alternativa promissora no controle de helmintos em ovinos.

There is a pressing need to develop strategies to reduce the emergence of macrocyclic lactone anthelmintic resistance in sheep flocks. Management practices aimed at maintaining anthelmintic susceptible nematodes in refugia while achieving a satisfactory level of production may prove to be useful. However, sensitive molecular tests are required to monitor the subtle effects of these practices on the frequency of resistance alleles within nematode populations. To-date, conventional studies of candidate genes coding for the known methods of action of macrocyclic lactone anthelmintics have produced a complex picture, highlighting the relevance of different approaches to the identification of resistance markers. This thesis describes the development of a single nematode parent genetic crossing method and discusses its application to identify molecular markers for anthelmintic resistance. Parasitological and molecular verification of successful inbreeding of the MHco3 strain of H. contortus derived from the progeny of a genetic cross between single nematode parents is described. The single parent genetic crossing method has enabled the production of diverse inbred lines of the MHco3 H. contortus and may prove useful for genome assembly, or for the development of a genetic map. The study has afforded insights to the biology of H. contortus and effects of host immunity on nematode parasites. New information is presented concerning the period during which adult female nematodes continue to shed fertilised eggs after removal of males, the development of unfertilised H. contortus eggs, and the population genetics of mixed infections of two different strains of H. contortus. Novel backcrossing experiments initially between a macrocyclic lactone resistant (MHco4 or MHco10) and a susceptible (MHco3) strain of H. contortus and then between ivermectin treated backcross generations and the parental susceptible strain are described. The resources provided by these experiments should enable comparative genomic analysis and conventional molecular biology to identify resistance genes derived from the parental resistant strains in fourth backcross generations that are the same as a parent ivermectin susceptible population, apart from the presence of alleles linked to anthelmintic resistance, derived from parent resistant strains.

Orientador: Alvimar José da Costa / Coorientador: Carolina Buzzulini / Banca: Fernando de Almeida Borges / Banca: Carlos Noriyuki Kaneto / Resumo: O sistema de criação conjunta ovinos/bovinos, visando melhor aproveitamento da pastagem, provendo diversificação lucrativa, pode deparar com problemas graves nas propriedades rurais, tais como as parasitoses. Dentre as mais importantes, destaca-se a hemoncose. As espécies Haemonchus placei e Haemonchus contortus são comumente encontradas parasitando bovinos e ovinos, respectivamente. A infecção de bovinos por H. contortus constitui, ainda, uma incógnita na literatura, sobretudo a brasileira. Este helminto tem sido descrito parasitando principalmente ovinos e caprinos. As espécies mais citadas parasitando bovinos são H. placei e H. similis. Portanto, objetivou-se no presente estudo avaliar a infectividade de H. contortus para bovinos e comparar sua patogenicidade à de H. placei. Para tal, foram utilizados 10 bezerros, criados e mantidos sem contato com helmintos, assim distribuídos: GI - dois bezerros não inoculados (controle), GII - quatro bezerros inoculados com larvas infectantes (L3) de H. contortus e GIII - quatro bezerros infectados com larvas (L3) de H. placei. Cada bovino recebeu 10.000 L3, de acordo com o grupo experimental, em dose única. Exames coproparasitológicos (McMaster e coproculturas) foram realizados diariamente após o 60 dia da inoculação, objetivando estabelecer o período pré-patente. Foram colhidas, semanalmente, amostras de sangue para hemogramas e dosagens bioquímicas. Decorridos 42 dias pós-infecção, os 10 bovinos foram eutanasiados e necropsiados, sendo colhido "in totum" todos os exemplares de Haemonchus. Nos abomasos foram realizados estudos anátomo-histopatológicos. O período pré patente para H. contortus foi de 20 dias e para H. placei foi de 27 dias. Dentre os parâmetros hematológicos, apenas as quantificações de hemácias apresentaram diferenças significativas (P<0,05), entre os grupos. As concentrações séricas médias de proteínas totais, albumina, ureia ... / Abstract: The ovine/bovine joint breeding system, which aims for a better use of pastures, providing profitable diversification, can face severe problems in rural properties, such as parasites, amongst which Haemonchus infections stand out. H. placei and H. contortus species are commonly found parasitizing cattle and sheep, respectively. Bovine infections by H. contortus still persist as an unknown possibility in literature, especially in Brazil. Such helminth has been described parasitizing sheep and goats, while the main species cited as parasites of bovines are H. placei and H. similis. Therefore, the present study aimed to evaluate infectivity of H. contortus for bovines and compare its pathogenicity to that of H. placei. To achieve this goal, 10 calves were utilized, all created and maintained free of any contact with helminths, distributed as follows: GI - two non-inoculated calves (control group); GII - four animals inoculated with infecting larvae (L3) of H. contortus; and GIII - four bovines infected with larvae (L3) of H. placei. Each inoculated calf received 10,000 L3, according to its experimental group, in a single dose. Coproparasitological exams (McMaster and coprocultures) were performed daily, starting at the 6th post-inoculation day, seeking to establish prepatent periods. Blood samples, for cell counts and biochemical dosages, were collected on a weekly basis. 42 days after infection of experimental animals, all 10 calves were euthanized and necropsied, for subsequent "in totum" collection of all Haemonchus specimens. Anatomical and histopathological examinations were performed on all abomasums. Prepatent period for H. contortus was 20 days, and 27 days for H. placei. Amongst hematological parameters, only erythrocyte counts presented significant differences (P < 0.05) between experimental groups. Average serum concentrations of total proteins, albumin, urea, creatinin, AST and GGT presented significant ... / Mestre

Orientador: Ana Carolina de Souza Chagas / Coorientador: Cintia Hiromi Okino / Banca: Maria Cristina de Sena Oliveira / Banca: Alessandro Francisco Talamini do Amarante / Resumo: Tendo em vista o impacto da infecção por Haemonchus contortus na ovinocultura, é crescente o número de estudos acerca da resistência a esse parasita, sendo essencial a compreensão dos mecanismos imunes diretamente relacionados. A resposta a infecções por helmintos é predominantemente de perfil Th2, embora o conjunto de mecanismos imunes que conferem resistência aos ovinos não sejam completamente elucidado. O presente estudo objetivou avaliar as respostas imunes locais (abomaso) associados à resistência à infecção por H. contortus em cordeiros Morada Nova, raça considerada resistente. Um rebanho composto por 287 ovinos foi fenotipado, por meio de contagens de ovos nas fezes, volume globular e peso corporal, após dois desafios parasitários com 4000 L3. Os 20 extremos de infecção (10 mais resistentes e 10 mais susceptíveis) foram submetidos a um terceiro desafio e abatidos sete dias após. Foram quantificados, por RT-qPCR, os níveis de expressão de 22 genes associados às respostas imunes, em abomaso e linfonodos abomasais. Além disso, eosinófilos e mastócitos foram quantificados, e os níveis de IgG e IgA no muco abomasal mensurados. Genes relacionados à resposta inata (TLR2 e CFI) foram superiormente expressos na região pilórica dos animais resistentes. Esses animais também apresentaram, na região fúndica, IL33 (promotor da polarização Th2) e MS4A2 (receptor de IgE) em níveis superiores aos verificados nos susceptíveis. Marcadores pró-infl... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Considering the impact of Haemonchus contortus infection on sheep breeding, there is an increasing number of studies addressing host resistance against to this parasite, and the understanding of directly related immune mechanisms is essential. The response to helminth infections is predominantly Th2- polarized, although the immune mechanisms that confer resistance to sheep are not fully elucidated. The present study aimed to evaluate the local immune responses (abomasum) associated with resistance to H. contortus infection in Morada Nova lambs, a breed considered resistant. A 287 sheep flock was phenotyped, by means of fecal egg counts, packed cell volume and body weight, after two parasitic challenges with 4000 L3. The 20 extremes of infection (10 most resistant and 10 most susceptible) were submitted to a third challenge and slaughtered seven days later. 22 immune-related genes were quantified (RT-qPCR) in abomasum and abomasal lymph nodes. In addition, abomasal eosinophils and mast cells were quantified, and IgG and IgA levels were measured (ELISA) in abomasal mucus. Genes related to innate response (TLR2 and CFI) were superiorly expressed in the pyloric region of the resistant animals. IL33 (Th2 polarization promoter) and MS4A2 (IgE receptor) were also at higher levels in this group. Proinflammatory cytokines (TNFα and IL1β) were superiorly expressed in the fundic region of the susceptible group, which also had IL4 (Th2 response) superiorly expressed in their abomasal lym... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

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Haemonchus contortus is a parasitic nematode that is controlled in large part by nematocidal drugs that target receptors of the parasitic nervous system. Hco-UNC-49 is a nematode GABA receptor that has a relatively low overall sequence homology to mammalian GABA receptors but is very similar to the UNC-49 receptor found in the free living nematode Caenorhabditis elegans. However, the nematode receptors do exhibit different sensitivities to GABA which may be linked to differences in the putative GABA binding domains. Mutational analysis conducted in this study identified at least one amino acid, positioned near the GABA binding domain, which may partially account for differences in nematode GABA sensitivity. In addition, positions reported to be crucial for GABA sensitivity in mammalian receptors also affect GABA sensitivity in Hco- UNC-49 suggesting that the GABA binding domains of the mammalian and nematode GABA receptors share some pharmacological similarities. However, there were some differences observed. For example, in mammalian GABAA receptors amino acids from both  and  subunits appear to be important for GABA sensitivity. For residues examined in this study, only those on the UNC-49B subunit, and not UNC-49C, appear important for GABA sensitivity. / UOIT