Orientador : Oswaldo Di Hipolito Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-01T02:16:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_ClaudioMaranhao_M.pdf: 765395 bytes, checksum: b5645fdbc43b028fd13c326460906042 (MD5) Previous issue date: 2002 / Mestrado

MONTE, M. F. L. Perfil clínico e epidemiológico de pacientes hemofílicos atendidos no centro de hematologia e hemoterapia do Piauí-HEMOPI. 2016. 68 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-06-09T12:52:01Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_mflmonte.pdf: 1685122 bytes, checksum: 0c43d2f5838c00399b2adbd040942824 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-06-09T12:52:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_mflmonte.pdf: 1685122 bytes, checksum: 0c43d2f5838c00399b2adbd040942824 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-09T12:52:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_mflmonte.pdf: 1685122 bytes, checksum: 0c43d2f5838c00399b2adbd040942824 (MD5) Previous issue date: 2016-01-27 / Hemophilia A or B is a recessive disease linked to the X chromosome that results from deficiency of blood coagulation factors VIII or IX, respectively, resulting of acquired or hereditary factors. This disease is characterized by causing spontaneous mucocutaneous bleeding, as well as the joints, we muscles, system gastrointestinal and central nervous system, leading to high morbidity and mortality. Like other chronic diseases, the treatment of hemophilia is costly, especially when patients are treated prophylactically. Because it is a disease whose treatment is very expensive, in addition to adverse effects and related complications, especially when patients develop inhibitors against factors which they are administered. In view of its many complications and the clinical significance of the disease, tis thought to classify hemophiliacs about the disease type (A or B) get social demographics of this population in terms of race, age, sex and region of origin. For this, the medical records of 180 patients treated at Hemopi were analyzed, the period from January 2011 to July 2014. The results of this study show that most of the patients studied were mulatto (42%), distributed in hemophilia A (161) and B (19). The degree of severity prevalent in each group were mild (53%) and severe (53%) for hemophilia A and B, respectively. The patients are mostly resided of the Mid-North macro-region of Piauí State (56%). Among the studied hemophiliacs, only 17 had some type of joint involvement, with blood type O + as found (29%). The positivity for the inhibitor against factor VIII (23 patients) showed up mostly in severe hemophilia A. The viral coinfection appeared in 3 of the 13 positive individuals’ viral infections, namely HBV and HCV (15%) and HCV and HIV (8%). Thus, it is concluded that hemophiliacs treated at HEMOPI system are characterized (in dominance by category) by individuals of mixed ethnicity, pardos blood type O +, with the disease classification mild hemophilia A, aged between 20 and 30 years, living mostly in the macro-region Mid-North State. / A hemofilia A ou B é uma doença recessiva ligada ao cromossomo X que resulta da deficiência dos fatores de coagulação de sangue VIII ou IX, respectivamente, podendo decorrer de fatores adquiridos ou hereditários. Esta doença se caracteriza por provocar sangramentos mucocutâneos espontâneos, bem como nas articulações, os músculos, sistema gastrintestinal e no sistema nervoso central, levando a grande morbidade e mortalidade. Assim como outras doenças de caráter crônico, o tratamento da hemofilia é de alto custo, especialmente quando os pacientes são tratados de forma profilática. Por tratar-se de uma doença com tratamento muito dispendioso, além dos efeitos adversos e complicações relacionadas, principalmente quando os pacientes desenvolvem inibidores contra os fatores que lhes são administrados. Em vista das suas inúmeras complicações e pela importância clínica da doença, tem-se como objetivo classificar os hemofílicos quanto ao tipo da doença (A ou B), obter dados sócio demográficos desta população quanto à raça, idade, sexo e região de origem. Para isso, foram analisados os prontuários de 180 pacientes atendidos no Hemopi, no período de janeiro de 2011 a julho de 2014. Os resultados deste estudo mostram que a maioria dos pacientes estudados eram de cor parda (42%), distribuídos em hemofílicos A (161) e B (19). O grau de severidade prevalente em cada grupo foi de leve (53%) e grave (53%) para hemofilia A e B, respectivamente. A maioria residia na macrorregião Meio-Norte do Estado do Piauí (56%). Dentre os hemofílicos estudados, apenas 17 apresentaram algum tipo de comprometimento articular, sendo o tipo sanguíneo O+ o mais encontrado (29%). A positividade para o inibidor contra o fator VIII (23 indivíduos) apresentou-se em sua maioria, nos hemofílicos A graves. A co-infecção viral apresentou-se em 3 dos 13 indivíduos positivos para infecções virais, sendo eles HBV e HCV (15%) e HCV e HIV (8%). Desta forma, conclui-se que os hemofílicos atendidos no sistema ambulatorial do HEMOPI se caracterizam (em predomínio por categoria) por indivíduos de cor parda, tipo sanguíneo O+, com classificação da doença hemofilia A leve e idade entre 20 e 30 anos, residentes em sua maioria na macro-região Meio-Norte do Estado.

A deficiência parcial ou total ou defeitos funcionais no fator VIII (FVIII) resultam na doença hereditária hemofilia A (HA), geralmente causada por mutações heterogêneas no gene do FVIII (F8). Embora mais de 1200 mutações no gene do F8 tenham sido descritas, dados sobre o espectro dessas mutações na população do Sul do Brasil são insuficientes e o estudo das mesmas possibilita uma melhor compreensão da genética molecular da doença nessa população. Além disso, ao estimar o efeito que uma mutação exerce em uma proteína, obtem-se subsídios para uma melhor avaliação de sua função, bem como das interações entre ela e estruturas afins. Os objetivos desse estudo foram identificar as mutações gênicas em pacientes com HA leve ou moderada do Rio Grande do Sul e posterior análise do papel dessas mutações na determinação da doença e presença de inibidores. Um total de 76 pacientes não-relacionados do sexo masculino, com HA leve (n=55) ou moderada (n=21) foram incluídos no estudo. Todos os 26 éxons do F8, as regiões 5’não-traduzida e 3’não-traduzida, as junções éxon-intron e a região promotora foram amplificadas por PCR e analisadas por sequenciamento direto. Foram examinados também 100 cromossomos normais de doadores de banco de sangue para excluir mudanças polimórficas como causadoras da doença. Todas as sequências do F8 dos pacientes foram comparadas com a sequência referência (NCBI: NG_005114.1), utilizando o software CodonCode Aligner implementado no Mega 5.04. As mutações encontradas foram comparadas com as do banco de dados The Haemophilia A Mutation, Structure, Test and Resource Site (HAMSTeRS) e a conservação dos aminoácidos mutados também foi verificada. A detecção de mutações em sítios de processamento foi realizada pelo programa de predição de sítios de processamento (Berkeley Drosophila Genome Project) e para a análise do efeito das mutações de sentido trocado foram utilizados três preditores: PolyPhen-2 (Polymorphism Phenotyping), Site Direct Mutator (SDM) e Have yOur Protein Explained (HOPE). A localização das mutações na estrutura do FVIII foi realizada no programa PyMol e para a visualização da superfície eletrostática dos domínios A foi utilizado o programa GRASP2. Quando nenhuma mutação foi encontrada, foi executada a análise de Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MLPA). Quanto às mutações recorrentes, a análise de haplótipos foi feita a fim de investigar se elas surgiram nessa população através de vários eventos mutacionais distintos ou através de efeito fundador. Foi identificada a mutação causadora da doença em 69 (91%) pacientes, que apresentaram 33 mutações diferentes: 27 de sentido trocado, uma pequena deleção, duas pequenas duplicações e três mudanças em sítios de processamento. Sete mutações de sentido trocado e duas em sítios de processamento não tinham sido previamente descritas no HAMSTeRS e não foram identificadas na literatura. Todas as últimas foram consideradas patogênicas; a mutação p.Val266Met, muito próxima a um sítio de ligação ao cobre, pode diminuir a interação entre os domínios A2 e A3 do FVIII; a mutação p. Met567Lys pode afetar um sítio de ligação ao fator IX; as mutações p.Arg1764Gly, p.Tyr1786Phe e p.Tyr1792Cys podem afetar a ligação ao fator IX e ao Fator von Willebrand. Nove mutações recorrentes foram encontradas, uma delas nunca descrita anteriormente (p.Tyr1786Phe). A análise de haplótipos sugere que essa mutação tenha se originado na população brasileira como um único evento em um ancestral comum. Um dos indivíduos desenvolveu inibidores. Foi feita, também, uma avaliação geral sobre o papel das mutações no F8 na formação de inibidores em pacientes graves estudados em investigação anterior, verificando-se associações significativas tanto no que se refere aos domínios em que as mutações ocorreram, quanto aos tipos de mutações encontrados. Os dados desses estudos são úteis no diagnóstico e prevenção precoce de inibidores na hemofilia A, bem como na detecção de mulheres heterozigotas na população do sul do Brasil. Espera-se oferecer um melhor manejo aos pacientes, fornecer aconselhamento genético e suporte psicológico/emocional para as famílias dos afetados. / Factor VIII (FVIII) partial or total deficiency, or functional defects, result in the hereditary disease haemophilia A (HA), generally caused by heterogeneous mutations in the FVIII gene (F8). Although more than 1200 F8 mutations have been reported, data regarding these mutations are insufficient in southern Brazilian populations and their study provides a better understanding of the molecular genetics of the disease in this population. Furthermore, after evaluating the effect that a mutation has on a protein, we can do a better assessment of its function, as well as of the interactions between the mutated protein and related structures. The objectives of this study were to identify gene mutations in patients with mild and moderate HA living in the southern Brazilian state of Rio Grande do Sul and to analyze the role of these mutations in disease determination and presence of inhibitors. A total of 76 unrelated male patients with mild (n = 55) or moderate (n = 21) HA were included in the study. All F8 26 exons, the 5 'UTR and 3' UTR, intron-exon junctions and the promoter region were amplified by PCR and analyzed by direct sequencing. We also examined 100 blood bank donors’ normal chromosomes to exlude polymorphic changes as causal to the disease. F8 patients’ sequences were compared with the reference sequence (NCBI: NG_005114.1) using the CodonCode Aligner software implemented in Mega 5.04. The mutations found were compared with those present in The Haemophilia A Mutation, Structure, Test and Resource Site (HAMSTeRS) database and the conservation of the mutated amino acids was also verified. Splice site mutations were detected using the Berkeley Drosophila Genome Project splice site prediction program, and for the analysis of missense mutation effects three predictors were used: PolyPhen-2 (Polymorphism Phenotyping), Site Direct Mutator (SDM) and Have yOur Protein Explained (HOPE). The mutations were localized in the FVIII structure by PyMOL and the FVIII A domains eletrostatic surface was visualized using GRASP2. When no mutation was found, the Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MLPA) analysis was performed. As for the recurrent mutations, haplotype analyses were conducted to investigate whether they emerged in this population through several distinct mutational events or from a founder effect. We identified the disease causing mutation in 69 (91%) patients, who showed 33 different mutations: 27 missense, one small deletion, two small duplications and three splice site changes. Seven missense and two splice site mutations had not been previously reported in HAMSTeRS and were not identified in any literature search. The latter were all considered pathogenic; p.Val266Met is located near a copper binding site and may decrease the interaction between the FVIII A2 and A3 domains; p. Met567Lys can affect a factor IX binding site; p.Arg1764Gly, p.Tyr1786Phe and p.Tyr1792Cys can affect factor IX and von Willebrand Factor binding sites. Nine recurrent mutations were found, one of them (p.Tyr1786Phe) never described before. Haplotype analysis suggests that this mutation originated in the Brazilian population as a single event in a common ancestor. One of the subjects developed inhibitors. A general evaluation was also made about the role of F8 mutations in the development of inhibitors in severe patients studied in a previous investigation, and significant associations were found both in relation to the domains where the mutations occurred, as well as in the mutations found. The data of these studies will be useful in the diagnosis and early prevention of inhibitors in haemophilia A, and in the detection of female carriers in the southern Brazilian population. We hope to offer a better monitoring to the patients, to give genetic counseling, and psychological/emotional support to the families of affected persons.

A deficiência parcial ou total ou defeitos funcionais no fator VIII (FVIII) resultam na doença hereditária hemofilia A (HA), geralmente causada por mutações heterogêneas no gene do FVIII (F8). Embora mais de 1200 mutações no gene do F8 tenham sido descritas, dados sobre o espectro dessas mutações na população do Sul do Brasil são insuficientes e o estudo das mesmas possibilita uma melhor compreensão da genética molecular da doença nessa população. Além disso, ao estimar o efeito que uma mutação exerce em uma proteína, obtem-se subsídios para uma melhor avaliação de sua função, bem como das interações entre ela e estruturas afins. Os objetivos desse estudo foram identificar as mutações gênicas em pacientes com HA leve ou moderada do Rio Grande do Sul e posterior análise do papel dessas mutações na determinação da doença e presença de inibidores. Um total de 76 pacientes não-relacionados do sexo masculino, com HA leve (n=55) ou moderada (n=21) foram incluídos no estudo. Todos os 26 éxons do F8, as regiões 5’não-traduzida e 3’não-traduzida, as junções éxon-intron e a região promotora foram amplificadas por PCR e analisadas por sequenciamento direto. Foram examinados também 100 cromossomos normais de doadores de banco de sangue para excluir mudanças polimórficas como causadoras da doença. Todas as sequências do F8 dos pacientes foram comparadas com a sequência referência (NCBI: NG_005114.1), utilizando o software CodonCode Aligner implementado no Mega 5.04. As mutações encontradas foram comparadas com as do banco de dados The Haemophilia A Mutation, Structure, Test and Resource Site (HAMSTeRS) e a conservação dos aminoácidos mutados também foi verificada. A detecção de mutações em sítios de processamento foi realizada pelo programa de predição de sítios de processamento (Berkeley Drosophila Genome Project) e para a análise do efeito das mutações de sentido trocado foram utilizados três preditores: PolyPhen-2 (Polymorphism Phenotyping), Site Direct Mutator (SDM) e Have yOur Protein Explained (HOPE). A localização das mutações na estrutura do FVIII foi realizada no programa PyMol e para a visualização da superfície eletrostática dos domínios A foi utilizado o programa GRASP2. Quando nenhuma mutação foi encontrada, foi executada a análise de Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MLPA). Quanto às mutações recorrentes, a análise de haplótipos foi feita a fim de investigar se elas surgiram nessa população através de vários eventos mutacionais distintos ou através de efeito fundador. Foi identificada a mutação causadora da doença em 69 (91%) pacientes, que apresentaram 33 mutações diferentes: 27 de sentido trocado, uma pequena deleção, duas pequenas duplicações e três mudanças em sítios de processamento. Sete mutações de sentido trocado e duas em sítios de processamento não tinham sido previamente descritas no HAMSTeRS e não foram identificadas na literatura. Todas as últimas foram consideradas patogênicas; a mutação p.Val266Met, muito próxima a um sítio de ligação ao cobre, pode diminuir a interação entre os domínios A2 e A3 do FVIII; a mutação p. Met567Lys pode afetar um sítio de ligação ao fator IX; as mutações p.Arg1764Gly, p.Tyr1786Phe e p.Tyr1792Cys podem afetar a ligação ao fator IX e ao Fator von Willebrand. Nove mutações recorrentes foram encontradas, uma delas nunca descrita anteriormente (p.Tyr1786Phe). A análise de haplótipos sugere que essa mutação tenha se originado na população brasileira como um único evento em um ancestral comum. Um dos indivíduos desenvolveu inibidores. Foi feita, também, uma avaliação geral sobre o papel das mutações no F8 na formação de inibidores em pacientes graves estudados em investigação anterior, verificando-se associações significativas tanto no que se refere aos domínios em que as mutações ocorreram, quanto aos tipos de mutações encontrados. Os dados desses estudos são úteis no diagnóstico e prevenção precoce de inibidores na hemofilia A, bem como na detecção de mulheres heterozigotas na população do sul do Brasil. Espera-se oferecer um melhor manejo aos pacientes, fornecer aconselhamento genético e suporte psicológico/emocional para as famílias dos afetados. / Factor VIII (FVIII) partial or total deficiency, or functional defects, result in the hereditary disease haemophilia A (HA), generally caused by heterogeneous mutations in the FVIII gene (F8). Although more than 1200 F8 mutations have been reported, data regarding these mutations are insufficient in southern Brazilian populations and their study provides a better understanding of the molecular genetics of the disease in this population. Furthermore, after evaluating the effect that a mutation has on a protein, we can do a better assessment of its function, as well as of the interactions between the mutated protein and related structures. The objectives of this study were to identify gene mutations in patients with mild and moderate HA living in the southern Brazilian state of Rio Grande do Sul and to analyze the role of these mutations in disease determination and presence of inhibitors. A total of 76 unrelated male patients with mild (n = 55) or moderate (n = 21) HA were included in the study. All F8 26 exons, the 5 'UTR and 3' UTR, intron-exon junctions and the promoter region were amplified by PCR and analyzed by direct sequencing. We also examined 100 blood bank donors’ normal chromosomes to exlude polymorphic changes as causal to the disease. F8 patients’ sequences were compared with the reference sequence (NCBI: NG_005114.1) using the CodonCode Aligner software implemented in Mega 5.04. The mutations found were compared with those present in The Haemophilia A Mutation, Structure, Test and Resource Site (HAMSTeRS) database and the conservation of the mutated amino acids was also verified. Splice site mutations were detected using the Berkeley Drosophila Genome Project splice site prediction program, and for the analysis of missense mutation effects three predictors were used: PolyPhen-2 (Polymorphism Phenotyping), Site Direct Mutator (SDM) and Have yOur Protein Explained (HOPE). The mutations were localized in the FVIII structure by PyMOL and the FVIII A domains eletrostatic surface was visualized using GRASP2. When no mutation was found, the Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MLPA) analysis was performed. As for the recurrent mutations, haplotype analyses were conducted to investigate whether they emerged in this population through several distinct mutational events or from a founder effect. We identified the disease causing mutation in 69 (91%) patients, who showed 33 different mutations: 27 missense, one small deletion, two small duplications and three splice site changes. Seven missense and two splice site mutations had not been previously reported in HAMSTeRS and were not identified in any literature search. The latter were all considered pathogenic; p.Val266Met is located near a copper binding site and may decrease the interaction between the FVIII A2 and A3 domains; p. Met567Lys can affect a factor IX binding site; p.Arg1764Gly, p.Tyr1786Phe and p.Tyr1792Cys can affect factor IX and von Willebrand Factor binding sites. Nine recurrent mutations were found, one of them (p.Tyr1786Phe) never described before. Haplotype analysis suggests that this mutation originated in the Brazilian population as a single event in a common ancestor. One of the subjects developed inhibitors. A general evaluation was also made about the role of F8 mutations in the development of inhibitors in severe patients studied in a previous investigation, and significant associations were found both in relation to the domains where the mutations occurred, as well as in the mutations found. The data of these studies will be useful in the diagnosis and early prevention of inhibitors in haemophilia A, and in the detection of female carriers in the southern Brazilian population. We hope to offer a better monitoring to the patients, to give genetic counseling, and psychological/emotional support to the families of affected persons.

A deficiência parcial ou total ou defeitos funcionais no fator VIII (FVIII) resultam na doença hereditária hemofilia A (HA), geralmente causada por mutações heterogêneas no gene do FVIII (F8). Embora mais de 1200 mutações no gene do F8 tenham sido descritas, dados sobre o espectro dessas mutações na população do Sul do Brasil são insuficientes e o estudo das mesmas possibilita uma melhor compreensão da genética molecular da doença nessa população. Além disso, ao estimar o efeito que uma mutação exerce em uma proteína, obtem-se subsídios para uma melhor avaliação de sua função, bem como das interações entre ela e estruturas afins. Os objetivos desse estudo foram identificar as mutações gênicas em pacientes com HA leve ou moderada do Rio Grande do Sul e posterior análise do papel dessas mutações na determinação da doença e presença de inibidores. Um total de 76 pacientes não-relacionados do sexo masculino, com HA leve (n=55) ou moderada (n=21) foram incluídos no estudo. Todos os 26 éxons do F8, as regiões 5’não-traduzida e 3’não-traduzida, as junções éxon-intron e a região promotora foram amplificadas por PCR e analisadas por sequenciamento direto. Foram examinados também 100 cromossomos normais de doadores de banco de sangue para excluir mudanças polimórficas como causadoras da doença. Todas as sequências do F8 dos pacientes foram comparadas com a sequência referência (NCBI: NG_005114.1), utilizando o software CodonCode Aligner implementado no Mega 5.04. As mutações encontradas foram comparadas com as do banco de dados The Haemophilia A Mutation, Structure, Test and Resource Site (HAMSTeRS) e a conservação dos aminoácidos mutados também foi verificada. A detecção de mutações em sítios de processamento foi realizada pelo programa de predição de sítios de processamento (Berkeley Drosophila Genome Project) e para a análise do efeito das mutações de sentido trocado foram utilizados três preditores: PolyPhen-2 (Polymorphism Phenotyping), Site Direct Mutator (SDM) e Have yOur Protein Explained (HOPE). A localização das mutações na estrutura do FVIII foi realizada no programa PyMol e para a visualização da superfície eletrostática dos domínios A foi utilizado o programa GRASP2. Quando nenhuma mutação foi encontrada, foi executada a análise de Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MLPA). Quanto às mutações recorrentes, a análise de haplótipos foi feita a fim de investigar se elas surgiram nessa população através de vários eventos mutacionais distintos ou através de efeito fundador. Foi identificada a mutação causadora da doença em 69 (91%) pacientes, que apresentaram 33 mutações diferentes: 27 de sentido trocado, uma pequena deleção, duas pequenas duplicações e três mudanças em sítios de processamento. Sete mutações de sentido trocado e duas em sítios de processamento não tinham sido previamente descritas no HAMSTeRS e não foram identificadas na literatura. Todas as últimas foram consideradas patogênicas; a mutação p.Val266Met, muito próxima a um sítio de ligação ao cobre, pode diminuir a interação entre os domínios A2 e A3 do FVIII; a mutação p. Met567Lys pode afetar um sítio de ligação ao fator IX; as mutações p.Arg1764Gly, p.Tyr1786Phe e p.Tyr1792Cys podem afetar a ligação ao fator IX e ao Fator von Willebrand. Nove mutações recorrentes foram encontradas, uma delas nunca descrita anteriormente (p.Tyr1786Phe). A análise de haplótipos sugere que essa mutação tenha se originado na população brasileira como um único evento em um ancestral comum. Um dos indivíduos desenvolveu inibidores. Foi feita, também, uma avaliação geral sobre o papel das mutações no F8 na formação de inibidores em pacientes graves estudados em investigação anterior, verificando-se associações significativas tanto no que se refere aos domínios em que as mutações ocorreram, quanto aos tipos de mutações encontrados. Os dados desses estudos são úteis no diagnóstico e prevenção precoce de inibidores na hemofilia A, bem como na detecção de mulheres heterozigotas na população do sul do Brasil. Espera-se oferecer um melhor manejo aos pacientes, fornecer aconselhamento genético e suporte psicológico/emocional para as famílias dos afetados. / Factor VIII (FVIII) partial or total deficiency, or functional defects, result in the hereditary disease haemophilia A (HA), generally caused by heterogeneous mutations in the FVIII gene (F8). Although more than 1200 F8 mutations have been reported, data regarding these mutations are insufficient in southern Brazilian populations and their study provides a better understanding of the molecular genetics of the disease in this population. Furthermore, after evaluating the effect that a mutation has on a protein, we can do a better assessment of its function, as well as of the interactions between the mutated protein and related structures. The objectives of this study were to identify gene mutations in patients with mild and moderate HA living in the southern Brazilian state of Rio Grande do Sul and to analyze the role of these mutations in disease determination and presence of inhibitors. A total of 76 unrelated male patients with mild (n = 55) or moderate (n = 21) HA were included in the study. All F8 26 exons, the 5 'UTR and 3' UTR, intron-exon junctions and the promoter region were amplified by PCR and analyzed by direct sequencing. We also examined 100 blood bank donors’ normal chromosomes to exlude polymorphic changes as causal to the disease. F8 patients’ sequences were compared with the reference sequence (NCBI: NG_005114.1) using the CodonCode Aligner software implemented in Mega 5.04. The mutations found were compared with those present in The Haemophilia A Mutation, Structure, Test and Resource Site (HAMSTeRS) database and the conservation of the mutated amino acids was also verified. Splice site mutations were detected using the Berkeley Drosophila Genome Project splice site prediction program, and for the analysis of missense mutation effects three predictors were used: PolyPhen-2 (Polymorphism Phenotyping), Site Direct Mutator (SDM) and Have yOur Protein Explained (HOPE). The mutations were localized in the FVIII structure by PyMOL and the FVIII A domains eletrostatic surface was visualized using GRASP2. When no mutation was found, the Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MLPA) analysis was performed. As for the recurrent mutations, haplotype analyses were conducted to investigate whether they emerged in this population through several distinct mutational events or from a founder effect. We identified the disease causing mutation in 69 (91%) patients, who showed 33 different mutations: 27 missense, one small deletion, two small duplications and three splice site changes. Seven missense and two splice site mutations had not been previously reported in HAMSTeRS and were not identified in any literature search. The latter were all considered pathogenic; p.Val266Met is located near a copper binding site and may decrease the interaction between the FVIII A2 and A3 domains; p. Met567Lys can affect a factor IX binding site; p.Arg1764Gly, p.Tyr1786Phe and p.Tyr1792Cys can affect factor IX and von Willebrand Factor binding sites. Nine recurrent mutations were found, one of them (p.Tyr1786Phe) never described before. Haplotype analysis suggests that this mutation originated in the Brazilian population as a single event in a common ancestor. One of the subjects developed inhibitors. A general evaluation was also made about the role of F8 mutations in the development of inhibitors in severe patients studied in a previous investigation, and significant associations were found both in relation to the domains where the mutations occurred, as well as in the mutations found. The data of these studies will be useful in the diagnosis and early prevention of inhibitors in haemophilia A, and in the detection of female carriers in the southern Brazilian population. We hope to offer a better monitoring to the patients, to give genetic counseling, and psychological/emotional support to the families of affected persons.

Orientador: Fernando F. Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-22T05:43:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Szajner_Patricia_M.pdf: 8780724 bytes, checksum: aa9936632c1e0298e53db8392b37b06a (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: A hemofilia B é uma doença hemorrágica hereditária caracterizada pela deficiência ou anormalidade da atividade coagulante do fator IX (FIX:C). O gene que controla a produção do fator IX está localizado no cromossomo X, na posição Xq27.1. É constituído por oito exons e sete íntrons abrangendo uma região de aproximadamente 33,5 kb que origina um mRNA de 2,2 kb. A análise do gene do fator IX de hemofílicos indica que cerca de 95% das alterações moleculares são identificadas nas seqüências correspondentes à região promotora, regiões codificadoras e sítios de excisão de íntrons. A maioria das mutações apresenta origem independente. As mutações de ponto são as alterações moleculares descritas em aproximadamente 85% dos casos de hemofilia 8, sendo o restante devido a perdas ou inserções gênicas. A análise do polimorfismo de conformação de hélices simples de DNA (SSCP) possibilita o rastreamento rápido e eficaz de mutações. A identificação das mutações pelo seqüenciamento direto do DNA permite a determinação precisa da portadora, diagnóstico pré-natal e viabiliza o aconselhamento genético. A comparação das mutações e quadros clínicos dos pacientes estudados neste trabalho com aqueles descritos em publicações anteriores também permitem a avaliação do efeito destas alterações na atividade do fator IX. Neste estudo foi realizada a análise das alterações moleculares no gene do fator IX de 29 pacientes portadores de hemofilia 8. A metodologia consistiu na amplificação das regiões codificadoras e promotora do gene do fator IX pela reação em cadeia da polimerase (PCR) e posterior análise do SSCP radioativo e não-radioativo, este último em um sistema automático de eletroforese (Phastsystem® Pharmacia), corado com nitrato de prata. A identificação das mutações foi realizada pelo seqüenciamento direto do fragmento do DNA com padrão anormal no SSCP. Com o emprego destas técnicas foi possível o reconhecimento de alterações moleculares em todos os pacientes analisados. Cinco mutações de ponto foram detectadas apenas na análise de SSCP radioativo. O seqüenciamento dos fragmentos com padrão de migração anormal permitiu a detecção de 31 mutações de ponto no gene do fator IX. Destas alterações, 22 representavam mutações diferentes, das quais 6 ainda não descritas na literatura. Em um paciente foram encontradas três alterações nucleotídicas, uma delas uma mutação silenciosa na posição 31.093. A análise dos haplótipos indica que 24 mutações identificadas neste estudo apresentam origem independente. Quatro pacientes originários do Estado do Pará apresentam mesma mutação e haplótipo idêntico evidenciando a ocorrência de um possível efeito do fundador. O estudo das mutações no gene do fator IX apresenta-se como um modelo para a determinação do padrão das alterações moleculares em linhagens de células germinativas. O padrão de mutações identificado no gene do fator IX é semelhante entre Caucasóides, Asiáticos, e pequenos grupos de Hispânicos e Negróides. A população brasileira apresenta origem étnica bastante heterogênea e é representada por imigrantes provenientes da Europa, África, Ásia e pelas populações indígenas residentes mostrando-se, desta forma, distinta das demais populações previamente analisadas. O padrão de mutação verificado neste estudo é semelhante àquele observado em outras populações o que sugere a predominância dos processos endógenos na determinação das mutações espontâneas em células germinativas / Abstract: Hemophilia B is a common hereditary bleeding disorder resulting from a deficiency of functional factor IX. The gene of factor IX spans about 33,5 kilobases and is situated on the distal portion of the long arm of X-chromosome at band Xq27.1. The gene is composed of eight exons and seven introns. Around 95% of mutations leading to hemophilia B occur in the 2,2 kilobases of the factor IX gene that included the promotor region, coding sequences, and splice junctions. Most are independent mutations. Point mutations account for about 85% of independent mutations. Deletions, insertions, and more complex gene rearrangements account for the remainder of the molecular mechanisms responsible for hemophilia B. The Single Strand Conformation Polymorphism (SSCP) analysis is a rapid and sensitive technique that can be used to detect single base substituions. Direct Sequencing of amplified genomic DNA defines the location and nature of any mutation and is a necessary final step of any detection method. The SSCP analysis followed by DNA sequencing allows accurated carrier detection and prenatal diagnosis, eliminating the need for informative segregetion of markers. Hemophilia B is a good model for deducing the underlying pattern of spontaneous germ-line mutation in humans. In addition, the study of naturally occurring mutations, combined with the study of genetically engineered mutant recombinant proteins, has yielded a wealth of information regarding structure-function relationships of factor IX. The pattern of mutation is similar among .Caucasians, Asians, and small groups of Blacks and Hispanics. The ethnic origin of Brazilian population is highly. heterogeneous (imigrants from Europe, Africa, Asia and, also, Indigenous) and different from previous populations studied. In order to elucidate the genetic basis of a distinct population and to perform a precise carrier detection, we carried out a study of 29 patients with hemophilia B of Brazilian origino The screening protocol consisted of amplification of coding and promoter regions of factor IX gene by PCR, followed by a radioactive and non-radiactive analysis of single-strand conformation polymorphisms (SSCP) on the PhastSystem Df Pharmacia®. The confirmation of the molecular defect was done by sequencing of the exon with abnormal electrophoretic mobility on SSCP. The results of SSCP revealed abnormal mobility in ali 29 patients and 31 point mutations were determined by direct sequencing of DNA. Twenty-two diferent single base pairs were identified: fifteen in exon 8, three in exon 6, and two in exon 4. Six non previously described point mutation were identified. Three point mutations were found in patient HB31, one of them silent. Haplotype analysis determined that at least twenty-four point mutations could be considered of indenpendent origino Our results shown that this methodology has the potential of detecting ali genetic defects in patients of Brazilian origin with hemophilia B. A large number of recurrent mutations described here is in accordance with data from distinct patients from around world and suggest that the mutation in the factor IX gene is likely the result of endogenous process rather than enviromental mutagens / Mestrado / Genetica / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Joyce Maria Annichino-Bizzacchi, Valder Roberval Arruda / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-12T11:25:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fabri_DanielaRamos_D.pdf: 28613634 bytes, checksum: 506450d54c214e02520051f098953569 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: As complicacoes associadas a aterosclerose sao as causas mais comum de morte na populacao ocidental. O entendimento da aterosclerose como uma doenca inflamatoria e a associacao da coagulacao com fenomenos inflamatorios e complicacoes da doenca arterial oferecem novas oportunidades de prevencao e tratamento.Estudos populacionais demonstraram que o risco de infarto agudo do miocardio esta reduzido em 80% em homens hemofilicos A (HA) se comparados com controles pareados em idade e sexo. No entanto, lesoes ateroscleroticas iniciais foram identificadas em pequenos grupos de pacientes com coagulopatias por estudo ultrassonografico de arterias carotida e femural de forma semelhante aos controles pareados.O objetivo deste estudo e determinar o papel dos fatores VIII e IX dacoagulacao no desenvolvimento da doenca aterosclerotica em dois diferentesmodelos animais de dilipidemia. Comparamos grupos de animais deficientes deFVIII (HA) ou animais deficientes de FIX (HB) deficientes apoliproteina E (APOE-/-) ou deficientes de receptores de lipoproteina de baixa densidade (LDLR-/-) comanimais hemostaticamente normais deficientes apenas de apoE (APOE-/-) ou deLDLR (LDLR-/-). Todos animais da linhagem C57Bl/6, pareados em sexo e idade.Nossos resultados sugerem que o FVIII tem um papel protetor e tempodependente no desenvolvimento da aterosclerose nos animais deficientes de apoE, independente dos seus elevados niveis de colesterol. No entanto, essaprotecao nao foi evidente nos animais LDLR-/-.A deficiencia severa do FIX (<1%) nao protegeu contra o desenvolvimento da aterosclerose. Surpreendentemente, estes animais apresentaram significantemente mais lesoes nos periodos mais tardios nos dois modelos de doenca aterosclerotica utilizados. Os animais HB/APOE-/- apresentaram altos indices de mortalidade a partir de 20 semanas do periodo de dieta. Os elevados niveis de FIX nao influenciou o desenvolvimento da doenca arterial nos modelos apoE, mas mostrou-se como fator de risco para trombose venosa.Este estudo demonstra que o FVIII e o FIX tem papeis heterogeneos na evolução da aterosclerose, sugerindo participacao em mecanismos independentes ao da coagulacao no desenvolvimento da doenca arterial, e novos estudos devem ser realizados visando novas possibilidades terapeuticas tambem para os pacientes hemofilicos de idade mais avancada com risco de doenca cardiovasculares. / Abstract: Complications of atherosclerosis are the most common causes of death in Western societies. The knowledge that atherosclerosis is an inflammatory disease and coagulation affects the disease's complications offers new opportunities for prevention and treatment. Population studies demonstrated that the risk for myocardial infarction is reduced by 80% among hemophilia A (HA) men compared to age and gender-matched controls. However, early atherosclerotic lesions were readily identified in small cohorts of adults HA and hemophilia B (HB) by ultrasonography of carotid and femoral arteries in a similar fashion to an agecontrol male group. Here we sought to determine the role of FVIII and FIX on the development of atherosclerosis in two different mouse models. We compared a group of FVIII (HA) or FIX deficient mice (HB) lacking the low-density lipoprotein receptor (LDLR- /-) or apolipoprotein E (APOE-/-) with hemostatically normal littermate controls lacking either LDLR (LDLR-/-) or apoE (APOE-/-). All mice were on C57Bl/6 background and all groups were matched for gender and age. Our results suggest that FVIII has a protective and time dependent effect on development of atherosclerosis in apoE deficient mice, independently of higher cholesterol levels. Notably, FVIII deficiency did not influence the vascular disease of LDLR-/- mice. Severe FIX deficiency (<1% of normal) did not protect against the development of atherosclerosis. Unexpectedly, the rates of lesions were higher at late time points in the APOE-/- model. In addition, high levels of FIX was did not influence the vascular disease in APOE-/- whereas venous thrombosis was documented in 3/6 mice. Moreover, in the HB/APOE-/- model, the rates of atherosclerosis were higher at week 22 and beyond this age these mice presented high rates of mortality than controls. These data demonstrate that FVIII and FIX play a rather heterogeneous role in the development of atherosclerosis which suggest that there are coagulation independent mechanisms in the development of vascular diseases. Further studies in hemophilia B subjects and carriers are warranted to define the FIX effect on the onset and progression of occlusive vascular disease which may raises concerns on the onset cardiovascular risks on an aging hemophilia population. / Doutorado / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Margareth Castro Ozelo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-26T23:10:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pinto_GlendaFeldbergAndrade_M.pdf: 9864752 bytes, checksum: 5d43b3d80ecd27b3c366ad3012943bbc (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: A hemofilia é uma doença hemorrágica hereditária ligada ao cromossomo X caracterizada pela deficiência do fator VIII (hemofilia A) ou fator IX (hemofilia B). As principais manifestações clínicas da hemofilia são as hemorragias articulares (hemartroses) e musculares (hematomas). Os sangramentos recorrentes frequentemente provocam comprometimentos musculoesqueléticos que desencadeiam a artropatia hemofílica e causam limitações na capacidade funcional desses pacientes. O presente estudo tem como objetivo avaliar o efeito das atividades aquáticas visando melhorar a capacidade funcional dos pacientes com hemofilia. Este estudo foi do tipo intervenção, com pacientes com hemofilia do Hemocentro da UNICAMP, maiores de 6 anos e que apresentassem pelo menos um dos joelhos afetados. Os pacientes selecionados foram avaliados pré- e pós-intervenção através dos instrumentos de avaliação clínica desenvolvidos e validados para hemofilia, incluindo o escore funcional de hemofilia (Functional Independence Score, FISH), o escore de saúde articular na hemofilia (Haemophilia Joint Health Score - HJHS), o questionário de atividades funcionais para pacientes hemofílicos (Haemophilia Activities List, HAL), ou questionário de atividades funcionais para pacientes com menos de 18 anos (Pediatric Haemophilia Activities List, PedHAL). Foi utilizado a eletromiografia de superfície (EMGs) dos músculos da coxa bilateralmente (vasto lateral, vasto medial e bíceps femoral), avaliação da força muscular através da célula de carga dos músculos extensores e flexores e avaliação eletromiográfica da atividade funcional de levantar e sentar. A atividade aquática consistiu na realização de pelo menos 24 sessões do protocolo de hidroterapia desenvolvido e realizado no serviço de fisioterapia do Hemocentro da UNICAMP, ou como alternativa os pacientes foram encaminhados para frequentar pelo menos 24 aulas regulares de natação. O período médio da atividade aquática foi de 12 semanas. Trinta e dois pacientes entre 6 e 40 anos (mediana: 12 anos), com diagnóstico de hemofilia (22 A grave, 9 B grave e 1 A moderada), sem atividades físicas regulares, foram incluídos. Trinta pacientes haviam iniciado a profilaxia secundária ou terciária, por diferentes razões, durante o ano anterior à intervenção aquática. Do total, 11 pacientes realizaram hidroterapia e 21 natação. A comparação de variáveis numéricas pré- e pós-intervenção no grupo de hidroterapia ou natação mostrou diferença estatisticamente significativa para as variáveis: escore de saúde articular (HJHS), para hidroterapia (p=0,006) e natação (p=0,001); escore funcional (FISH) somente para a hidroterapia (p=0,021); PedHAL para hidroterapia (p=0,022) e natação (p=0,001); HAL para hidroterapia (p=0,038) e natação (p=0,024). Em relação aos resultados obtidos através da eletromiografia, primeiramente da força muscular obtido através da célula de carga, é importante notar a ausência de melhora significativa da força muscular no grupo de pacientes que realizou a hidroterapia, principalmente ao compararmos com os dados observados no grupo da natação, onde houve melhora significativa em todos os músculos analisados. Em seguida, em relação à amplitude do sinal eletromiográfico, observamos a melhora do sinal de todos os músculos avaliados após a intervenção hidroterápica e natação, exceto para o músculo vasto medial D no grupo da hidroterapia. Na avaliação da atividade funcional foi observada diferença significativa somente para natação e forte tendência para hidroterapia. Podemos concluir nesse estudo, que um programa de atividade aquática funcional (hidroterapia ou natação), com frequência de 24 sessões, mesmo quando realizado em pacientes com hemofilia que apresentavam comprometimento em membros inferiores, foi eficaz com melhora significativa na saúde articular, além de melhora na funcionalidade, com aumento da força muscular analisada em membros inferiores / Abstract: Haemophilia is an inherited bleeding disorder X-linked, characterized by a decreased activity or lack of clotting factors VIII (haemophilia A) or IX (haemophilia B). The main clinical manifestations of haemophilia are bleeding into the joints (haemarthroses) and in the muscles (haematomas). The current bleeding often causes musculoskeletal impairments that trigger haemophilic arthropathy and promoting functional capacity limitations in these patients. The purpose of this study was to evaluate the effect of the functional aquatic activities in order to improve the functional capacities of patients with haemophilia. It was used the surface electromyography assessment to evaluate the responses of muscle function before and after functional aquatic activities. This study was the intervention type with patients selected from the haemophilia sector of Hemocentro UNICAMP diagnosed with haemophilia, within the predetermined criteria, over the aged of 6 years. After the selection, the assessment tools consisted of: Functional Independence Score (FISH), Haemophilia Joint Health Score (HJHS), the Haemophilia Activities List (HAL), PedHAL which is a version for children and adolescents aged 8 to 17 years and evaluation by surface electromyography of the thigh muscles (vastus lateralis, vastus medialis and femoral biceps), muscular strength assessment by surface electromyography of the extensor and flexor muscles and functional activity by surface electromyography to get up and sit down. We included in this study the institution of an aquatic protocol to reproduce functional improvements in patients with haemophilia. Thirty-two PWH (23 sHA, 8 sHB and 1mHA), aged 6 to 40 years (12(6-40y)), without previous regular physical activity, were enrolled in this evaluation. 30/32 patients started secondary or tertiary prophylaxis for different reasons, during the year before taking off the aquatic intervention. Later the initial evaluation, the patients underwent functional aquatics activities in our service (hydrotherapy) and as an alternative for patients who were unable to attend our service, these were referred to swimming, an aggregate of 24 sessions around 3 months. Later on the intervention, patients were reassessed for comparison of pre and post-intervention. For statistical analysis, we used the paired Wilcoxon test and unpaired for comparison of mathematical variables and Fisher's exact test for categorical variables. The comparison of numerical variables between hydrotherapy and pre and post-intervention, swimming showed statistically significant deviations in the variables, health joint score (p = 0.006 and p = 0.001) respectively, running score (FISH) (p = 0.021) solely for the hydrotherapy, PedHAL (Sum score) (p = 0.022 and p = 0.001) for hydrotherapy and swimming. In relation to the results obtained through the electromyography, firstly to muscle strength obtained through the load cell, it is important to note the lack of significant improvement in muscle strength in the group of patients who performed hydrotherapy, especially when compared with the data observed in the swimming group, where there has been significant improvement in all muscles tested. Then, in relation to the electromyographic signal amplitude, significant signal improvement was observed in all muscles evaluated after hydrotherapy and swimming intervention except for the vastus medialis (right) in the hydrotherapy group. To sum up, we conclude that a functional aquatic activity program (hydrotherapy or swimming), with frequency of 24 sessions, even when performed in patients with haemophilia who presented commitment in lower limbs, was effective with significant improvement in joint health, and addition to improvement in functionality, with increased muscle strength assessed in lower limbs / Mestrado / Clinica Medica / Mestra em Clínica Médica

Pacientes com hemofilia apresentam predisposição a sangramentos, tanto póstraumáticos como espontâneos, que ocorrem, principalmente nas articulações (hemartroses) e quando recorrentes podem contribuir para o estabelecimento de artropatia hemofílica, o que torna a doença potencialmente incapacitante e dolorosa, e afeta consideravelmente a qualidade de vida (QV) dos portadores. Avaliar a QV desses pacientes dá-nos subsídio para propor medidas visando a melhoria da assistência prestada e o seu bem-estar. Nesse sentido, uma importante ferramenta é o diário de infusão. O objetivo do estudo foi avaliar a QV dos portadores de hemofilia acompanhados pelo ambulatório da Fundação HEMOMINAS no Hemonúcleo Manhuaçu, utilizando ferramentas específicas e implementar o uso do Diário de Infusão como estratégia para incrementar a assistência. Trata-se de um estudo quantitativo descritivo. Para a avaliação da QV, optou-se, por utilizar o modelo de classificação de saúde, denominado CIF proposto pela OMS. Os instrumentos utilizados incluem: questionário sociodemográfico; Haem-A-Qol; Haemo-Qol; HAL, PedHAL; HJHS e FISH. Participaram da pesquisa 30 pacientes, do sexo masculino, portadores de Hemofilia, o que representou 90,9% da amostra elegível. Nos pacientes maiores de 18 anos (n=24), a média de pontuação do Haem-A-Qol foi de 53,39. No HAL, a média foi de 67,26. Já no HJHS, a média foi de 37,33. No FISH, a média foi de 25,96. Nos menores de 18 anos, (n=06), o Haemo-Qol foi respondido por pacientes e seus pais. No questionário respondido pelo paciente o escore médio foi de 50,36, já dos pais, foi de 55,16. No PedHAL, o escore médio dos pacientes foi 88,59 e dos pais 83,15. A pontuação média no HJHS foi de 5,67. Com relação ao FISH, todos atingiram nota máxima. O Diário de Infusão foi construído e implantado como ferramenta para incrementar a assistência com vistas a estimular a melhora progressiva da QV. A QV dos pacientes acompanhados obteve resultados diferentes nas faixas etárias avaliadas, sendo que pacientes mais jovens alcançaram escores melhores. A realidade do manejo da hemofilia é desafiadora. É necessário reorientar o cuidado, o foco não deve ser a doença, é preciso olhar para o indivíduo, que deve ser assistido integralmente e de maneira holística. / Patients with hemophilia are predisposed to bleeding, both post-traumatic as spontaneous, occurring mainly in the joints (hemarthrosis) and, when recurrent, they may contribute to the establishment of hemophilic arthropathy, which makes the disease potentially disabling and painful, and considerably affects the quality of life (QoL) of patients with the disease. Evaluate the QoL of these patients gives us the subsidy to provide measures that aim to improve the assistance provided and the patients well-being. In this regard, through an important edition of the infusion journal it is possible to follow the care provided. The aim of the study was to evaluate the quality of life of hemophilia patients followed by the HEMOMINAS Foundation clinic in Manhuaçu, using specific tools and implement the use of an Infusion Diary as a strategy to increase assistance. This is a descriptive quantitative study. For the evaluation of QoL, it was used the ICF (International Classification of Functioning, Disability and Health) proposed by the WHO. The tools include: a sociodemographic questionnaire; Haem-A-Qol; Haemo-Qol; HAL, pedHAL; HJHS e FISH. 30 male patients with hemophilia joined the study, which represented 90.9% of the eligible sample. In patients older than 18 years (n = 24), the Haem-A-Qol average score was 53.39. In the HAL, the average was 67.26. In the HJHS, the average score was 37.33. In the FISH, the average score was 25.96. In patients under 18 (n = 06), the Haemo-Qol was answered by patients and their parents. In the questionnaire answered by the patient the average score was 50.36, and in the parents\' score was 55.16. In PedHAL, the average score of the patients was 88.59 and their parents 83.15. The average score in the HJHS was 5.67. Regarding FISH, all patients under 18 years of age (n = 06) reached a maximum score and performed all activities without assistance. The journal of infusion was built and implemented as a tool to enhance the assistance, aiming to stimulate the progressive improvement of the quality of life. The quality of life of patients followed was different, younger ones with better results. The reality of hemophilia management is challenging. It is necessary to reorient care, the focus should not be in the disease, it is necessary to look for the individual, who should be fully assisted in the holistic way.

Rehabilita la salud oral de un niños con Hemofilia A, empleando el Electrocauterio como una alternativa en la terapia pulpar, específicamente en la pulpotomía, para lo cual se realiza un minucioso examen clínico y anamnesis, que respaldados con exámenes complementarios, permite determinar el plan de tratamiento. La rehabilitación integral se llevó a cabo, previo consentimiento informado del padre, en sala de operaciones bajo anestesia general, debido a la condición sistémica del niño. Incluye tratamientos pulpares, restauradores y preventivos. Se logra realizar la terapia pulpar (pulpotomía) empleando el Electrocauterio, el mismo que sirvió para obtener un resultado de hemostasia más pronta, efectiva y sin efectos posteriores de hemorragia en el paciente. / Trabajo académico