Nesta dissertação, foram avaliados diferentes materiais adsorventes na remoção de compostos orgânicos presentes em soluções metanólica empregadas em cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Os adsorventes estudados foram carvão ativo, argila Betonita K-10, resinas comerciais da Rohm and Haas: Amberlyst A26OH (resina com grupo quaternário de amônio) e Amberlyst 15WET (resina com grupo sulfônico) e três resinas sintéticas: RP03 (à base de acrilonitrila e divinilbenzeno), RP09 (à base de metacrilamida, estireno e divinilbenzeno) e RP12 (à base de ácido acrílico, estireno e divinilbenzeno). Essas três últimas resinas foram sintetizadas por meio da copolimerização em suspensão glicérica dos comonômeros envolvidos empregando a iniciação via radical livre. As pérolas de copolímeros foram obtidas na presença de um sistema de diluentes objetivando a produção de estruturas porosas. Os copolímeros sintetizados foram caracterizados por meio de densidade aparente, área específica, diâmetro e volume médio de poros, microscopia ótica (MO) e eletrônica de varredura (MEV) e análise elementar (CHN). Esses materiais foram avaliados na remoção de cloridratos de sibutramina e biperideno dissolvidos em metanol em diferentes tempos de extração. As extrações foram realizadas em bateladas a temperatura ambiente. As concentrações iniciais e finais após as extrações foram determinadas por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). De uma maneira geral, os copolímeros sintéticos obtidos no laboratório da UERJ e as resinas comerciais da Rohm and Haas apresentaram as melhores capacidades de remoção dos cloridratos. Em especial, a resina Amberlyst 15WET apresentou o melhor desempenho de sorção dos dois cloridratos quando comparada aos outros adsorventes. / In this dissertation, different absorbent materials were evaluated for extraction of organic compounds from methanolic solution used for high efficiency liquid chromatography (CLAE). The active coal, Betonite K-10 clay, commercial resins from Rohm and Haas: Amberlyst A26OH (resin containing quaternary ammonium group) and Amberlyst 15WET (resin containing sulfonic group) and three synthetic resins: RP03 (based on acrylonitrile and divinylbenzene), RP09 (based on methacrylamide, styrene and divinylbenzene) and RP12 (based on acrylic acid, styrene and divinylbenzene) were evaluated. These resins had been prepared by means of the copolymerization in glyceric suspension of the involved comonomers using the free radical initiation. The copolymer pearls had been produced in the presence of a diluent system aiming the production of porous structures. The copolymers had been characterized by means of apparent density, specific area, average diameter and volume of pores, optical (OM) and scanning electron microscopies (SEM) and elemental analysis (CHN). These materials had been evaluated in the removal of sibutramine and biperidene chlorhydrates dissolved in methanol in different extraction times. The extractions had been carried out in batch at ambient temperature. The initial and final concentrations had been determined by high efficiency liquid chromatography (CLAE). In a general way, the synthetic and commercial copolymers had presented the best extraction capacities of the chlorhydrates. In special, the Amberlyst 15WET resin has presented the more efficient sorption of the two chlorhydrates compared to the other absorbent.

Submitted by ANTONIO FERNANDEZ BOBEY null (antoniofernandezbobey86@yahoo.es) on 2016-04-12T19:44:51Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Versão Final_ Repositorio Unesp.pdf: 2495633 bytes, checksum: f7ff8d9ec49134a24d9a1082b09926dc (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-04-15T17:37:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 fernandezbobey_a_me_araiq_par.pdf: 909965 bytes, checksum: 12ae7f0b3b5f6a97678bcbd7f2a70506 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-15T17:37:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 fernandezbobey_a_me_araiq_par.pdf: 909965 bytes, checksum: 12ae7f0b3b5f6a97678bcbd7f2a70506 (MD5) Previous issue date: 2016-02-24 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Os ciclotídeos são produtos naturais de estrutura polipeptídica, contendo de 28 a 37 resíduos de aminoácidos, sendo seis deles resíduos de cisteína, altamente conservados e formados por ligações dissulfeto as quais exibem ciclização tipo "cabeça-cauda". Esse arranjo estrutural característico confere aos ciclotídeos uma estabilidade excepcional e resistência à proteólise. Devido a estas peculiaridades moleculares os ciclotídeos são substâncias com importantes funções biológicas, entre elas, destacam-se as de defesa e adaptação dos organismos que as acumulam. São de grande interesse para agricultura, agindo como inseticidas e, no uso medicinal por apresentarem atividades anti-HIV, anti-helmíntica, antimicrobiana e efeitos uterotônicos. A presente dissertação trata do estudo de ciclotídeos isolados da planta Noisettia orchidiflora (Rudge) Gingins, pertencente à família Violaceae, um táxon de ocorrência frequente na Mata Atlântica. Já existem dados na literatura sobre o estudo de ciclotídeos das raízes e o presente estudo é importante na medida que registra a ocorrência desta classe de substâncias e a sua caracterização nas folhas e galhos desta espécie, levando a informações mais completas sobre a ocorrência de ciclotídeos em Violaceae. A extração de ciclotídeos do material vegetal (galhos e folhas secos e moídos) foi feita mediante maceração hidrometanólica até esgotamento do material vegetal, seguida de partição líquido-líquido com diclorometano. A fase polar foi concentrada e submetida à cromatografia em coluna, empregando octadecilsilano (C18) como fase estacionária, obtendo-se frações ricas em peptídeos. O processo de purificação foi realizado por HPLC preparativo e/ou analítico com eluição gradiente, empregando-se acetonitrila e água como fase móvel, o que permitiu a obtenção das substâncias. A sequência de aminoácidos (estrutura primária) dos ciclotídeos isolados foi estabelecida por Espectrometria de Massas MALDI-TOF/TOF com o auxílio das reações de redução, alquilação e digestão enzimática empregando as enzimas: endoproteinase de ácido glutâmico (endoGlu-C), tripsina e quimiotripsina. Também, foi realizada a análise de aminoácidos das substâncias, permitindo a quantificação de cada aminoácido presente. A presente pesquisa resultou no isolamento de seis compostos de galhos e três oriundos de folhas, totalizando sete diferentes possíveis ciclotídeos, visto que dois deles foram comuns para ambos os tecidos. Até o momento foi possível determinar a estrutura primária de quatro deles: Os ciclotídeos Nor B (substância F20-2), massa molecular 3180,416 Da, Nor C (substância F20-3), massa molecular 3282,472 Da, Nor D (substância F17-1), massa molecular 3249,474 Da e Nor E (substância F21-1), massa molecular 3170,472 Da. Todos eles reportados pela primeira vez no presente estudo. As demais substâncias isoladas se encontram em processo caracterização estrutural. / Cyclotides are polypeptide structures, comprise 28-37 amino acid residues, six of them, are cysteine residues, highly conserved and formed by disulfide bonds, which exhibit "head-tail" cyclization type. This structural feature gives to cyclotides remarkable stability and resistance to proteolysis. Due to these singularities, such compounds have disclosed important biological functions. Among them; the literature has highlighted important ecological properties as defense and adaptation of the organisms, which accumulate these natural products. Accordingly, they are of great interest to agriculture, acting as insecticide, and to medicine, since some compounds have displayed anti-HIV activity, anthelmintic, antimicrobial and uterotonic properties. This research deals with the study of cyclotides isolated Noisettia orchidiflora (Rudge) Gingins, belonging to the taxon Violaceae, which frequently occurs in the Atlantic Forest. There are several studies in the literature on the occurrence of this class of compounds and their characterization in the leaves and branches of Violaceae plant species, leading to more complete information on the occurrence of cyclotides, and their biological significance for these plants. The cyclotides extraction of plant material (dried and ground branches and leaves) was carried out by maceration with methanol/water, followed by a liquid-liquid partition with dichloromethane. The polar phase was concentrated and subjected to chromatographic column using octadecylsilane (C18) as stationary phase, achieving several fractions rich in peptides. The purification process was performed by analytical and/or preparative HPLC, in gradient of acetonitrile and water as mobile phase, which led to the isolation of the cyclotides. The amino acid sequence (primary structure) of the isolated compounds was established by MALDI-TOF/TOF by reduction and alkylation reactions as well as enzymatic digestion using the enzymes: endoproteinase glutamic acid (endoGlu-C), trypsin and chymotrypsin. Also, the quantification of each amino acid present in the cyclotide structures was performed, and this amino acid analysis was fundamental for the characterization of these substances. Therefore, this research resulted in the isolation of the six compounds accumulated in the branches, and 3 of them were also found in the leaves. A complete analysis of all peptides suggested that seven are cyclotides, while two of them were common for both twigs and leaves tissues. Until now it was possible to determine the primary structure of four cyclotides, which is being described in plants for the first time: The cyclotides Nor B (F20-2 substance), molecular weight 3180.416 Da, Nor C (F20-3 substance), molecular weight 3282.472 Da, Nor D (substance F17-1), molecular mass 3249.474 Da Nor E (F21-1 substance), molecular weight 3170.472 Da. All these cyclotides are being reported for the first time in this study, however, 3 of these are currently under further analytical studies aimed at the complete structural characterization. / CNPq: 133418/2014-6

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-12-02Bitstream added on 2014-06-13T20:37:35Z : No. of bitstreams: 1 paz_ta_me_araiq.pdf: 1193700 bytes, checksum: 6489d53c5b06afd24ac5bdf2e56d9611 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este trabalho teve como objetivo estabelecer metodologia de cultivo e produção de células e/ou órgãos in vitro da espécie Salacia campestris com vista à obtenção de triterpenos quinonametídeos. Para isso, aplicando-se técnicas biotecnológicas, diversas tentativas de inserir a espécie in vitro foram realizadas utilizando explantes de folhas (limbo foliar e pecíolo), endosperma e sementes. Raízes obtidas in vitro foram cultivadas por 105 dias, sendo a presença e o teor de triterpenos quinonametídeos avaliados no decorrer deste período. Sistemas radiculares de plantas jovens (1 ano) cultivadas em casa de vegetação e sistemas radiculares de plantas adultas foram também analisadas quanto à presença e teor de triterpenos quinonametídeos. Foram utilizadas técnicas cromatográficas e de espetrometria de massas (EM) para a detecção e identificação de 22β-hidroximaitenina, maitenina e netzahualcoieno. Os ensaios citotóxicos in vitro foram realizados, como os dois últimos quinonametídeos, frente à linhagem de células normais 3T3 (fibroblasto) e de células tumorais HeLa (cólon de útero) e B16-F10 (melanoma murino). A partir de explantes de endosperma inoculados em meio de cultura WPM, suplementado com 20 g/L de sacarose, acrescido com 4,0 mg/L de AIB (ácido indolbutírico) e 100 mg/L de PVP (polivinilpirrolidona), foram obtidas raízes in vitro. A partir dos estudos fitoquímicos foram detectados e identificados, nas raízes in vitro e em sistemas radiculares de plantas cultivadas em casa de vegetação, os triterpenos quinonametídeos maitenina e 22β-hidroximaitenina, enquanto que nos sistemas radiculares coletados em campo foram identificados os triterpenos maitenina e netzahualcoieno. O isolamento dos três triterpenos citados também foi realizado. Para as raízes cultivadas... / This work aimed to establish a methodology of cultivation and production of in vitro cells and /or organs of Salacia campestris, trying to obtain the quinone-methide triterpenes. Based on this and applying biotechnological techniques, several attempts to insert this species in an in vitro system were performed using leaf explants (leaf and petiole), endosperm and seeds. The in vitro roots obtained were cultured for 105 days, and the presence and content of quinone-methide triterpenes were evaluated during this period. The roots of young plants (1 year) grown in a greenhouse as well roots of adult plants were also analyzed for the presence and content of the quinone-methides. The analysis of the quinone-methides were performed using chromatographic techniques and mass spectrometrometry (MS) led to the identification of 22β-hydroxymaytenin, maytenin and netzahualcoyene. The in vitro cytotoxic assays were performed using the quinone-methides maytenin and netzahualcoyene, comparing with the normal cell line 3T3 (fibroblast) as well the HeLa tumor cells (uterus carcinoma) and B16-F10 (murine melanoma). The in vitro roots were obtained from endosperm explants, inoculated in WPM medium supplemented with 20 g/L sucrose, 4.0 mg/L IBA (indole-butyric acid) and 100 mg/L PVP (polyvinylpyrrolidone). The phytochemical studies of the in vitro roots and roots of plants grown in a greenhouse resulted in the identification of the quinone-methide triterpenes maytenin and 22β-hydroxymaytenin, while from the natural roots were identified the quinone-methides maytenin and netzahualcoyene. All of the triterpenes were also isolated. The results obtained for in vitro roots indicated that the greatest accumulation of biomass occurred on the 60th day of culture and the highest levels of maytenin (972.11 mg/g) and ... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:42:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:03:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Tese (Doutoramento) / IPEN/T / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:27:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:04:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:35:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:08:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Dissertação (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Made available in DSpace on 2016-06-07T17:11:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-12. Added 1 bitstream(s) on 2016-06-07T17:16:30Z : No. of bitstreams: 1 000865789.pdf: 2921479 bytes, checksum: ecf5e55db0c7c0922cb7c414afe853c8 (MD5) / As tiazolidinodionas (TZDs) são fármacos agonistas do receptor PPAR-γ (peroxisome proliferator activated receptor) cuja ativação leva a modulação de cerca de 100 genes, o que confere a esta classe de fármacos diversas ações no organismo como o controle de glicemia, do colesterol e atividade antiinflamatória. Entre as TZDs que foram lançadas no mercado apenas a pioglitazona permanece disponível uma vez que suas antecessoras rosiglitazona e troglitazona - apresentaram alta toxicidade. Considerando o vasto potencial terapêutico das TZDs, pesquisadores do Laboratório de Planejamento e Síntese de Fármacos da Universidade Federal de Pernambuco sintetizaram a LYSO-07 ((5-(5-bromo-1H-indol-3-metieleno)-3-(4-cloro-benzil)tiazolidina-2,4-diona), um derivado tiazolidino-2,4-diona cujos ensaios de atividade biológica demonstraram que a nova TZD possui atividade antiinflamatória promissora. No desenvolvimento de novos fármacos é impreterível a avaliação precoce do seu perfil farmacocinético e de sua toxicidade com o intuito de obter informações relevantes à avaliação de risco e ao avanço dos estudos com a nova molécula. No presente trabalho foram avaliados aspectos físico-químicos e o perfil farmacocinético em dose única da nova molécula administrada em ratos Wistar por via intravenosa e por gavagem. Ainda, foram determinados alguns parâmetros bioquímicos para avaliar os efeitos da exposição de ratos Wistar a doses múltiplas de LYSO-07 por 28 dias administrado por gavagem. A LYSO-07 apresentou instabilidade em ambiente aquoso em pH 1,2 e 7,4 e logP acima de 6,5. Os parâmetros farmacocinéticos determinados após administração via intravenosa foram: meia vida de eliminação (t1/2) de 2,3 horas; clearance (Cl) de 33,18 mL/min/Kg e volume de distribuição (Vd) de 6.648,71 mL/kg. A LYSO-07 não foi detectada no plasma dos animais que receberam... / Thiazolidinediones (TZDs) are agonists of PPAR-γ (peroxisome proliferator-activated receptor) receptor whose activation modulates the expression of about 100 genes, which gives this class of drugs several actions in the body as the control of blood glucose, cholesterol and anti - inflammatory activity. Among the TZDs that were released on the market, only pioglitazone remains available once their predecessors - rosiglitazone and troglitazone - showed high toxicity. Considering the vast therapeutic potential of TZDs, researchers from the Laboratory of Drug Synthesis and Planning from the Federal University of Pernambuco synthesized the LYSO-07, a thiazolidine- 2,4-dione derivate whose biological activity assays demonstrated that the new TZD has a promising anti-inflammatory effect. In the development of new drugs the early assessment of their pharmacokinetic profile and toxicity is unavoidable in order to obtain relevant information of the risks of the molecule and contribute to the advancement of the studies of the new molecule. The present study assessed the physicochemical properties and the single dose pharmacokinetic profile of the new molecule in rats administered intravenously and by gavage. Further, some biochemical parameters were measured to assess the effects of the exposure of LYSO-07 ((5-(5-bromo-1H-indol-3-methylene)-3-(4-chlorobenzyl)-thiazolidine-2,4-dione) to rats in multiple doses for 28 days administered by gavage. The LYSO-07 showed instability in an aqueous environment at pH 7.4 and 1.2 and log P above 6.5. Pharmacokinetic parameters determined after IV administration were: elimination half-life (t1/2) of 2.3 hours, clearance (Cl) 33.18 mL/min/kg and volume of distribution (Vd) of 6,648.71 mL/kg. The LYSO 07 could not be detected in the plasma of animals given the compound by gavage (LOQ=78.125 ng/mL). The 28 days of exposure of animals at a dose of ...

Submitted by Renato Miani Goncalves null (renatomiani@gmail.com) on 2016-08-05T18:39:41Z No. of bitstreams: 1 Tese - Renato Goncalves.pdf: 4535061 bytes, checksum: ea8e64f761cc44656f8a8018ef7c2d85 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-08-10T16:44:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 goncalves_rm_dr_araiq.pdf: 4535061 bytes, checksum: ea8e64f761cc44656f8a8018ef7c2d85 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-10T16:44:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 goncalves_rm_dr_araiq.pdf: 4535061 bytes, checksum: ea8e64f761cc44656f8a8018ef7c2d85 (MD5) Previous issue date: 2016-07-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O sudeste brasileiro é a região mais populosa do país, estando nele o estuário de Santos-São Vicente, com aproximadamente 1,5 milhões de habitantes. Localizado nesse complexo estuarino, está o Porto marítimo mais movimentado da América Latina e um dos mais importantes pólos petroquímicos do país. Nessa região o tratamento de esgoto sanitário é praticamente inexistente (cobrindo aproximadamente 20% de toda população), não havendo estudos sobre a ocorrência ambiental e a dinâmica de estrógenos ou outros alteradores endócrinos no local. Por outro lado, frequentemente os estudos ambientais existentes sobre a ocorrência de contaminantes, negligenciam a confiabilidade analítica. Frente à esse cenário, o presente estudo apresenta a determinação de estrógenos (17α–etinilestradiol (EE2), 17β-estradiol (E2) e estriol (E3)) em água do mar com alta confiabilidade, utilizando método baseado em extração em fase sólida (SPE) e análise por HPLC-FLD, com o uso de ferramentas estatísticas para a modelagem da curva analítica, avaliação do efeito matriz e estudo de conservação dos cartuchos SPE após a eluição da amostra. O processo de validação analítica mostrou valores adequados de recuperação (76-94%, para diferentes concentrações de EE2, E2 e E3), precisão (coeficiente de variação menor que 20%) e seletividade. Os limites de deteção do método para o EE2, E2 e E3 foram respectivamente de 9,7, 2,3 e 4,3 ng L-1. Cinco curvas analíticas para cada composto foram utilizadas para avaliar o efeito matriz, sendo as soluções padrões preparadas em solvente (acetonitrila), água marinha artificial (S=30) e agua marinha, sendo para essas últimas, os padrões adicionados hora antes da extração, hora após a eluição da amostra no cartucho. Para o preparo de cada curva analítica foram utilizados seis concentrações diferentes dos padrões, sendo as curvas analíticas refeitas para cada amostragem realizada. O modelo teve por base a regressão linear, utilizando ajuste por mínimos quadrados, sendo o mesmo avaliado por análise de variância (ANOVA). Os resultados mostraram efeito matriz para todos os analitos. A conservação dos analitos nos cartuchos SPE foram avaliados para 6; 22; 29; 55 e 80 dias, e os resultados evidenciaram que não houve diferença significativa entre eles. Foram realizadas três amostragens no estuário de Santos-São Vicente, em março de 2014 (12 pontos amostrais de superfície), e fevereiro e junho de 2015 (com 15 pontos amostrais de superfície e 6 pontos amostrais de águas de fundo, na baía de Santos). Os valores de concentração para o estriol (mais frequentemente encontrado) variaram entre ND-354 ng L-1, para o 17β-estradiol de nd-18 ng L-1 enquanto o 17α–etinilestradiol não foi quantificado em nenhuma das amostras. Não foram observadas diferenças entre as amostragens nas diferentes estações do ano, sendo as maiores variações de concentrações observadas no âmbito de diferentes comportamentos de maré (sizígia e quadratura). No geral, os valores de concentrações encontrados para o estriol e estradiol podem acarretar riscos aos organismos aquáticos quando os mesmos são expostos à esses alteradores por longos períodos. / Southeast is the Brazilian most populated region. Santos-São Vicente estuary, located there, includes c.a. 1.5 million inhabitants, one of the most important Brazilian petrochemical sites and the bigger harbor from Latin America. In this region, the sewage treatment is almost inexistent (covers c.a. 20% of all population), nevertheless there are not studies about the occurrence and environmental dynamics of estrogens or others endocrine disruptors there. On the other hand, the analytical reliability in environmental studies have been frequently neglected. Thus, this work presents a reliability evaluation for estrogens (EE2, E2 and E3) determination in marine water, using a method based in solid phase extraction (SPE) and HPLC-FLD analysis, statistical tools were used to accomplish the calibration curve, storage time of SPE cartridges after sample elution and matrix effects. The analytical validation process showed adequate selectivity, recovery (76-94%, for different concentrations of EE2, E2 and E3) and precision (RSD below 20%). The method detection limit for EE2, E2 and E3 was 10, 2 and 4 ng L-1, respectively. Five analytical curves for each compound were used to evaluate the matrix effect wherein the standard solutions were prepared in solvent (acetonitrile, or on the SPE extract from artificial seawater (S=30) or in natural seawater). Additionally, for artificial and natural seawater, the standards were spiked to matrix before the SPE. All standard solution contained all the studied estrogens, at the same concentration, for each curve it was used six standards concentrations. Model fitting was done by linear regression models, using ANOVA to evaluate the fittings. The results showed matrix effects for all analytes, thus matrix-matched (natural seawater) analytical curves were used at the following method validation steps. SPE cartridges storage time (after sample loading) was studied for 6, 22, 29, 55 and 80 storage days, data demonstrated no significant differences for these storage times. Three sampling was made at Santos estuary, in march 2014, february 2015 and june 2015, with 15 samples collected each. Estriol (E3) concentrations ranging ND-354 ng L-1, estradiol (E2) ND-18 ng L-1 while 17α–ethynylestradiol (EE2) were not detectable in any samples (below method LOQ). Overall, estriol concentration are above no-observed-effect concentrations from long-term exposition, which can lead to risk for aquatic organisms.

Orientador: Maysa Furlan / Coorientador: Ana Maria Soares Pereira / Banca: Paulo Sérgio Pereira / Banca: Renato Paiva / Resumo: Este trabalho teve como objetivo estabelecer metodologia de cultivo e produção de células e/ou órgãos in vitro da espécie Salacia campestris com vista à obtenção de triterpenos quinonametídeos. Para isso, aplicando-se técnicas biotecnológicas, diversas tentativas de inserir a espécie in vitro foram realizadas utilizando explantes de folhas (limbo foliar e pecíolo), endosperma e sementes. Raízes obtidas in vitro foram cultivadas por 105 dias, sendo a presença e o teor de triterpenos quinonametídeos avaliados no decorrer deste período. Sistemas radiculares de plantas jovens (1 ano) cultivadas em casa de vegetação e sistemas radiculares de plantas adultas foram também analisadas quanto à presença e teor de triterpenos quinonametídeos. Foram utilizadas técnicas cromatográficas e de espetrometria de massas (EM) para a detecção e identificação de 22β-hidroximaitenina, maitenina e netzahualcoieno. Os ensaios citotóxicos in vitro foram realizados, como os dois últimos quinonametídeos, frente à linhagem de células normais 3T3 (fibroblasto) e de células tumorais HeLa (cólon de útero) e B16-F10 (melanoma murino). A partir de explantes de endosperma inoculados em meio de cultura WPM, suplementado com 20 g/L de sacarose, acrescido com 4,0 mg/L de AIB (ácido indolbutírico) e 100 mg/L de PVP (polivinilpirrolidona), foram obtidas raízes in vitro. A partir dos estudos fitoquímicos foram detectados e identificados, nas raízes in vitro e em sistemas radiculares de plantas cultivadas em casa de vegetação, os triterpenos quinonametídeos maitenina e 22β-hidroximaitenina, enquanto que nos sistemas radiculares coletados em campo foram identificados os triterpenos maitenina e netzahualcoieno. O isolamento dos três triterpenos citados também foi realizado. Para as raízes cultivadas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This work aimed to establish a methodology of cultivation and production of in vitro cells and /or organs of Salacia campestris, trying to obtain the quinone-methide triterpenes. Based on this and applying biotechnological techniques, several attempts to insert this species in an in vitro system were performed using leaf explants (leaf and petiole), endosperm and seeds. The in vitro roots obtained were cultured for 105 days, and the presence and content of quinone-methide triterpenes were evaluated during this period. The roots of young plants (1 year) grown in a greenhouse as well roots of adult plants were also analyzed for the presence and content of the quinone-methides. The analysis of the quinone-methides were performed using chromatographic techniques and mass spectrometrometry (MS) led to the identification of 22β-hydroxymaytenin, maytenin and netzahualcoyene. The in vitro cytotoxic assays were performed using the quinone-methides maytenin and netzahualcoyene, comparing with the normal cell line 3T3 (fibroblast) as well the HeLa tumor cells (uterus carcinoma) and B16-F10 (murine melanoma). The in vitro roots were obtained from endosperm explants, inoculated in WPM medium supplemented with 20 g/L sucrose, 4.0 mg/L IBA (indole-butyric acid) and 100 mg/L PVP (polyvinylpyrrolidone). The phytochemical studies of the in vitro roots and roots of plants grown in a greenhouse resulted in the identification of the quinone-methide triterpenes maytenin and 22β-hydroxymaytenin, while from the natural roots were identified the quinone-methides maytenin and netzahualcoyene. All of the triterpenes were also isolated. The results obtained for in vitro roots indicated that the greatest accumulation of biomass occurred on the 60th day of culture and the highest levels of maytenin (972.11 mg/g) and ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Rosângela Gonçalves Peccinini / Banca: Ivan da Rocha Pitta / Banca: Jean Leandro dos Santos / Resumo: As tiazolidinodionas (TZDs) são fármacos agonistas do receptor PPAR-γ (peroxisome proliferator activated receptor) cuja ativação leva a modulação de cerca de 100 genes, o que confere a esta classe de fármacos diversas ações no organismo como o controle de glicemia, do colesterol e atividade antiinflamatória. Entre as TZDs que foram lançadas no mercado apenas a pioglitazona permanece disponível uma vez que suas antecessoras rosiglitazona e troglitazona - apresentaram alta toxicidade. Considerando o vasto potencial terapêutico das TZDs, pesquisadores do Laboratório de Planejamento e Síntese de Fármacos da Universidade Federal de Pernambuco sintetizaram a LYSO-07 ((5-(5-bromo-1H-indol-3-metieleno)-3-(4-cloro-benzil)tiazolidina-2,4-diona), um derivado tiazolidino-2,4-diona cujos ensaios de atividade biológica demonstraram que a nova TZD possui atividade antiinflamatória promissora. No desenvolvimento de novos fármacos é impreterível a avaliação precoce do seu perfil farmacocinético e de sua toxicidade com o intuito de obter informações relevantes à avaliação de risco e ao avanço dos estudos com a nova molécula. No presente trabalho foram avaliados aspectos físico-químicos e o perfil farmacocinético em dose única da nova molécula administrada em ratos Wistar por via intravenosa e por gavagem. Ainda, foram determinados alguns parâmetros bioquímicos para avaliar os efeitos da exposição de ratos Wistar a doses múltiplas de LYSO-07 por 28 dias administrado por gavagem. A LYSO-07 apresentou instabilidade em ambiente aquoso em pH 1,2 e 7,4 e logP acima de 6,5. Os parâmetros farmacocinéticos determinados após administração via intravenosa foram: meia vida de eliminação (t1/2) de 2,3 horas; clearance (Cl) de 33,18 mL/min/Kg e volume de distribuição (Vd) de 6.648,71 mL/kg. A LYSO-07 não foi detectada no plasma dos animais que receberam... / Abstract: Thiazolidinediones (TZDs) are agonists of PPAR-γ (peroxisome proliferator-activated receptor) receptor whose activation modulates the expression of about 100 genes, which gives this class of drugs several actions in the body as the control of blood glucose, cholesterol and anti - inflammatory activity. Among the TZDs that were released on the market, only pioglitazone remains available once their predecessors - rosiglitazone and troglitazone - showed high toxicity. Considering the vast therapeutic potential of TZDs, researchers from the Laboratory of Drug Synthesis and Planning from the Federal University of Pernambuco synthesized the LYSO-07, a thiazolidine- 2,4-dione derivate whose biological activity assays demonstrated that the new TZD has a promising anti-inflammatory effect. In the development of new drugs the early assessment of their pharmacokinetic profile and toxicity is unavoidable in order to obtain relevant information of the risks of the molecule and contribute to the advancement of the studies of the new molecule. The present study assessed the physicochemical properties and the single dose pharmacokinetic profile of the new molecule in rats administered intravenously and by gavage. Further, some biochemical parameters were measured to assess the effects of the exposure of LYSO-07 ((5-(5-bromo-1H-indol-3-methylene)-3-(4-chlorobenzyl)-thiazolidine-2,4-dione) to rats in multiple doses for 28 days administered by gavage. The LYSO-07 showed instability in an aqueous environment at pH 7.4 and 1.2 and log P above 6.5. Pharmacokinetic parameters determined after IV administration were: elimination half-life (t1/2) of 2.3 hours, clearance (Cl) 33.18 mL/min/kg and volume of distribution (Vd) of 6,648.71 mL/kg. The LYSO 07 could not be detected in the plasma of animals given the compound by gavage (LOQ=78.125 ng/mL). The 28 days of exposure of animals at a dose of ... / Mestre