A aterosclerose consiste na formação de placas que reduzem o diâmetro dos vasos sanguíneos e é a principal causa das doenças cardiovasculares. O estresse oxidativo tem sido apontado como um importante mecanismo no processo de aterogênese induzido pela hipercolesterolemia. A astaxantina (ASX) é um carotenóide presente em algas e frutos-domar, amplamente estudado por suas propriedades antioxidantes. No presente trabalho, avaliou-se a ocorrência de estresse oxidativo em diferentes estágios de hipercolesterolemia em humanos e a relação entre o estresse oxidativo e o processo inflamatório nesses indivíduos. Adicionalmente, o potencial antiaterogênico da ASX foi avaliado em coelhos hipercolesterolêmicos. No primeiro capítulo demonstramos que a peroxidação lipídica e oxidação de proteínas aumentou em indivíduos com níveis de LDL considerados de alto risco para doenças cardiovasculares (>160mg/dL), enquanto os níveis de LDLox, LDLoxAB, do marcador de processo inflamatório hs-CRP e a atividade das enzimas TrxR-1 e SOD aumentaram em indivíduos com níveis de colesterol considerados altos, mas clinicamente aceitáveis (130-160mg/dL), persistindo este aumento nos sujeitos com LDL > 160mg/dL. A enzima PON1 não teve sua atividade modificada em nenhum dos estágios de hipercolesterolemia estudados. Os resultados apresentados no capítulo I permitem concluir que o estresse oxidativo ocorre concomitantemente ao processo inflamatório durante a hipercolesterolemia. Além disso, a utilização da atividade da enzima PON1 sérica como fator de risco independente para doenças cardiovasculares necessita maiores esclarecimentos. No segundo e terceiro capítulos, observamos que a adição de colesterol (1%) na dieta de coelhos (60 dias) induziu hiperlipidemia sérica, estresse oxidativo no soro e tecido aórtico e formação de ateroma no tecido aórtico. A suplementação de ASX (50-100mg%) concomitante com o colesterol atenuou o estresse oxidativo de maneira mais acentuada no tecido aórtico do que no soro, mas não preveniu o aumento dos lipídios séricos nem a formação de ateroma nos coelhos. Estes resultados indicam que apesar da ausência de efeito hipolipidêmico e antiaterogênico da ASX, esse carotenóide exerce efeitos antioxidantes no soro e tecido aórtico de coelhos hipercolesterolêmicos. Em conjunto, os dados desta Tese indicam a ocorrência de estresse oxidativo durante a hipercolesterolemia em humanos e a ocorrência de aterosclerose e estresse oxidativo em coelhos hipercolesterolêmicos. Apesar da ASX não ter apresentado efeito antiaterogênico neste trabalho, mais estudos são necessários antes de uma conclusão definitiva sobre o potencial deste carotenóide como adjunto na prevenção e tratamento de doenças cardiovasculares. / Atherosclerosis consists in the formation of plaques that reduces blood vassels diameter and it is the major cause of cardiovascular diseases. Oxidative stress has been pointed as an important mechanism in atherogenesis process induced by hypercholesterolemia. Astaxanthin (ASX) is a carotenoid present in algaes and seafoods, widely studied by its antioxidant properties. In the present study it was evaluated the ocurrence of oxidative stress at different stages of hypercholesterolemia in humans and the relathionship between oxidative stress and inflamatary process in these subjects. Additionally, the antiatherogenic potential of ASX was evaluated in hypercholesterolemic rabbits. In the first chapter, we demonstrated that lipid peroxidation and protein oxidation increased in subjects with LDL levels considered of high risk for cardiovascular diseases (>160mg/dL), while the levels of LDLox, LDLoxAB, the marker of inflamatory process hs-CRP and the activity of the enzymes TrxR-1 and SOD increased in subjects with LDL levels considered high, but clinically acceptable (130- 160mg/dL), persisting this increase in subjects with LDL > 160mg/dL. The enzyme PON1 did not have its activity modified in none of the studied stages of hypercholesterolemia. The results presented in chapter I allow to conclude that oxidative stress ocurrs concomitantly to the inflamatory process during hipercholesterolemy. Besides, the use of enzyme PON1 activity in serum as an independent risk factor for cardiovascular diseases needs more clarification. In the second and third chapters, we observed that the addition of cholesterol (1%) in the diet of rabbits (60 days) induced serum hyperlipidemia, oxidative stress in serum and aortic tissue and atheroma formation in aortic tissue. ASX supplementation (50-100mg%) concomitant with cholesterol atenuated oxidative stress in a more pronounced way in aortic tissue than in serum, but did not prevent the increase in serum lipids nor atheroma formation in rabbits. These results indicate that despite the absence of hypolipidemic and antiatherogenic effect of ASX, this carotenoid exerts antioxidant effects in serum and aortic tissue of hypercholesterolemic rabbits. Taken together, the data of this thesis indicate the ocurrence of oxidative stress during hypercholesterolemia in humans and the ocurrence of atherosclerosis and oxidative stress in hypercholesterolemic rabbits. Despite ASX not having presented antiatherogenic effect in this work, more studies are necessary before a final conclusion about the potential of this carotenoid as an adjunct in prevention and therapy of cardiovascular diseases.

Orientador: Valdir Augusto Neves / Banca: Valdir Augusto Neves / Banca: Aureluce Demonte / Banca: Carmen Guilherme de Matos Vinagre / Resumo: Um grande interesse tem sido reportado às proteínas vegetais, em particular as da soja, cujo consumo tem indicado alternativa promissora para prevenção da dislipidemia e aterosclerose. Este estudo investigou o efeito da proteína - conglicinina isolada da soja, frente à resposta de um fármaco hipolipemiante (fenofibrato), em animais submetidos a uma dieta hipercolesterolêmica. Cinquenta e quatro ratos machos Wistar foram divididos em 6 grupos (n=9). O grupo controle (STD) recebeu uma dieta de caseína, e os demais hipercolesterolêmicos (HC), - conglicinina de 200mg/kg (HC+7S1), e 300mg/kg (HC+7S2), fenofibrato de 30mg/kg (HC+FF) e -conglicinina 300mg/kg associada com fenofibrato 30mg/kg (HC+7S2+FF) receberam dieta de caseína suplementada com 1% de colesterol e 0,5% de ácido cólico. Não foram observadas, nos tratamentos, alterações no crescimento, tecido adiposo, consumo e eficiência alimentar. O fenofibrato provocou aumento do peso e da concentração de triglicerídeo hepático. A proteína - conglicinina mostrou reduzir significativamente os efeitos dislipidêmicos séricos e hepáticos provocados pela dieta hipercolesterolêmica; no entanto, não foi observada adição destes efeitos quando associada ao fenofibrato. Os resultados reportados neste estudo sugerem que esta proteína tenha importante ação na regulação do metabolismo lipídico. Tais efeitos podem estar associados a peptídeos desta proteína, muito embora os mecanismos envolvidos não permaneçam completamente esclarecidos. / Abstract: A great interest has been reported about plant proteins, particularly those of soybean whose consumption has shown potential alternatives to dyslipidemia and atherosclerosis prevention. This study investigated the effect of -conglycinin protein isolated from soybean and its response to hypolipemiant drug (fenofibrate) in animals submitted to a hipercolesterolemic diet. Fifty four male Wistar rats were divided into 6 groups (n = 9). The control group (STD) had received casein diet and the others hypercholesterolemic (HC), -conglycinin of 200mg/kg (HC+7S1) and 300mg/kg (HC+7S2), fenofibrate 30mg/kg (HC+FF) and -conglycinin of 300mg/kg associated to fenofibrate of 30mg/kg (HC+7S2+FF) received casein diet supplemented with 1% of cholesterol and 0.5% of cholic acid. There was no change in growth, adipose tissue, consumption and efficiency food for all treatments. The fenofibrate showed increase in weight and hepatic triglycerides. The -conglycinin protein had showed significantly reduce the effects in dyslipidemic serum and liver caused by hypercholesterolemic diet, however; it was not observed some additional effects when associated with fenofibrate. The results reported in this study suggest that the protein has an important action in the regulation of lipid metabolism. These ones may be associated with their peptides although the mechanisms involved are not already completely understood. / Mestre

Introdução: o controle parcial das ações da angiotensina II (Ang-II) pode ser realizado pelo uso de bloqueadores do receptor da angiotensina II (BRA). Seus efeitos pró-aterogênico e prótrombótico têm sido alvo de estudos clínicos e experimentais na literatura científica internacional. Objetivos: avaliar os efeitos antiateroscleróticos e antitrombóticos de bloqueador do receptor da angiotensina II, a irbesartana, em modelo experimental de trombose arterial em coelhos submetidos à desendotelização aórtica e dieta rica em colesterol. Material e Métodos: foram analisados cinqüenta e dois coelhos Nova Zelândia, machos, brancos e pesando, em média, 2,96kg. Todos os animais foram submetidos à desendotelização aórtica por cateter Fogarty 3F e, a seguir, divididos em dois grupos. Ao grupo de tratamento ativo foi administrado irbesartana, na dose de 37,5mg⁄dia, via oral, e, ao grupo controle, placebo. Ambos os grupos receberam, durante vinte e oito dias, dieta rica em colesterol 0.33%. Ao final deste período, os animais foram mortos, após receberem tratamento indutor de trombose à base de veneno da víbora Russelis e adrenalina. Resultados: no grupo irbesartana, oito dos vinte e sete animais (29.6%) desenvolveram trombose arterial, comparativamente a quatorze dos vinte e cinco (56%) no grupo controle (p=0.064). A extensão média de trombose arterial, avaliada por vídeoplanimetria, foi de 78,3±111,4 mm2 no grupo controle, e 10,7±24,5 mm2, no grupo irbesartana (p=0.010). Ocorreu uma redução significativa das lesões ateroscleróticas caracterizadas por fibrose da íntima, fibrose da média e no escore global de lesão vascular nos animais que receberam irbesartana. No grupo irbesartana, a média do colesterol total foi 419.9 ± 377 mg/dl e, no grupo controle, 702.6 ± 279 mg/dl (P=0.004), LDL 340,6 ± 338 mg/dl e 561,7 ± 247 mg/dl (P=0.013), triglicérides 57,8± 28 mg/dl e 107,8± 19 mg/dl (P<0,001) e HDL 163,9 ± 115 mg/dl e 117,5 ± 184 mg⁄dl (P=NS) respectivamente. Conclusões: a irbesartana melhorou o perfil lipídico, reduziu a extensão da trombose arterial e o escore de resposta à lesão vascular, neste modelo experimental de lesão endotelial química e mecânica associados à hipercolesterolemia e vasoconstricção.

Introdução: o controle parcial das ações da angiotensina II (Ang-II) pode ser realizado pelo uso de bloqueadores do receptor da angiotensina II (BRA). Seus efeitos pró-aterogênico e prótrombótico têm sido alvo de estudos clínicos e experimentais na literatura científica internacional. Objetivos: avaliar os efeitos antiateroscleróticos e antitrombóticos de bloqueador do receptor da angiotensina II, a irbesartana, em modelo experimental de trombose arterial em coelhos submetidos à desendotelização aórtica e dieta rica em colesterol. Material e Métodos: foram analisados cinqüenta e dois coelhos Nova Zelândia, machos, brancos e pesando, em média, 2,96kg. Todos os animais foram submetidos à desendotelização aórtica por cateter Fogarty 3F e, a seguir, divididos em dois grupos. Ao grupo de tratamento ativo foi administrado irbesartana, na dose de 37,5mg⁄dia, via oral, e, ao grupo controle, placebo. Ambos os grupos receberam, durante vinte e oito dias, dieta rica em colesterol 0.33%. Ao final deste período, os animais foram mortos, após receberem tratamento indutor de trombose à base de veneno da víbora Russelis e adrenalina. Resultados: no grupo irbesartana, oito dos vinte e sete animais (29.6%) desenvolveram trombose arterial, comparativamente a quatorze dos vinte e cinco (56%) no grupo controle (p=0.064). A extensão média de trombose arterial, avaliada por vídeoplanimetria, foi de 78,3±111,4 mm2 no grupo controle, e 10,7±24,5 mm2, no grupo irbesartana (p=0.010). Ocorreu uma redução significativa das lesões ateroscleróticas caracterizadas por fibrose da íntima, fibrose da média e no escore global de lesão vascular nos animais que receberam irbesartana. No grupo irbesartana, a média do colesterol total foi 419.9 ± 377 mg/dl e, no grupo controle, 702.6 ± 279 mg/dl (P=0.004), LDL 340,6 ± 338 mg/dl e 561,7 ± 247 mg/dl (P=0.013), triglicérides 57,8± 28 mg/dl e 107,8± 19 mg/dl (P<0,001) e HDL 163,9 ± 115 mg/dl e 117,5 ± 184 mg⁄dl (P=NS) respectivamente. Conclusões: a irbesartana melhorou o perfil lipídico, reduziu a extensão da trombose arterial e o escore de resposta à lesão vascular, neste modelo experimental de lesão endotelial química e mecânica associados à hipercolesterolemia e vasoconstricção.

Orientador: Anibal Eugenio Vercesi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T13:52:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paim_BrunoAlves_D.pdf: 3170914 bytes, checksum: d4f5cbbb9bfc262aef0879eaf9d377d6 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Neste trabalho, o estresse oxidativo em mitocôndrias isoladas de fígados de camundongos knockout para o receptor de LDL (LDLr-/-) foi caracterizado por apresentar um menor conteúdo de isocitrato mitocondrial, uma reduçãoda razão GSH/GSSG e um maior conteúdo de proteínas oxidadas quando comparados a camundongos controles. A maior produção de EROs pelas mitocôndrias de camundongos LDLr-/- foi prevenida quando as mesmas foram incubadas na presença de isocitrato exógeno, o qual é capaz de manter NADPH completamente reduzido. Resultados semelhantes foram obtidos quando os animais foram tratados com solução de citrato solução de citrato de sódio 55 mM/ ácido cítrico 67 mM durante duas semanas, onde houve uma redução na produção de EROs pelas mitocôndrias isoladas de fígado assim como uma recuperação parcial no consumo de oxigênio mantido por substratos endógenos bem como no perfil de oxidação dos nucleotídeos de piridina. Os linfócitos de camundongos LDLr-/- também apresentaram elevação na produção de EROs, celular e mitocondrial bem como uma elevação nos níveis de Ca2+, citosólico e mitocondrial, quando comparados a camundongos controles. Uma vez que [Ca2+] intracelular tem demonstrado participar na modulação da resposta Th1 e Th2 e no processo de ativação linfocitária, decidimos estudar algumas citocinas em camundongos LDLr-/-. As citocinas Th1 (IL-2 e TNF- a) e Th2 (IL-4 e IL-10) se mostraram elevadas quando comparadas a camundongos controles. A elevação das citocinas Th1 e Th2, a geração de EROs e as elevações das concentrações de Ca2+ foram parcialmente inibidas após tratamento dos camundongos com verapamil, um antagonista de canal de cálcio tipo L. Os resultados nos levam a concluir que o estresse oxidativo observado em mitocôndrias isoladas de fígados de camundongos LDLr-/- ocorre em resposta a uma redução no conteúdo de substratos endógenos redutores de NADPH e que pode, ao menos em parte, ser corrigido após suplementação oral com solução de citrato. Além do mais, foi demonstrado que o Ca2+, em linfócitos isolados de baços de camundongos LDLr-/-, possui papel fundamental modulando a geração de EROs e a produção de citocinas. Estas alterações são provavelmente relacionadas com o processo de ativação linfocitária, em razão das lesões ateroscleróticas observadas no arco aórtico dos camundongos LDLr-/-, formadas espontaneamente / Abstract: In this work, oxidative stress in liver mitochondria isolated from LDLr-/- mice was further characterized by showing a lower mitochondrial isocitrate content, lower matochondrial GSH/GSSG ratio and a higher liver content of protein carbonyls as compared to control mice. The higher rate of ROS production in LDLr -/- mitochondria was also prevented by the presence of exogenous isocitrate which maintains NADP+ fully reduced. Similar results were obtained when the annimals were treated with drinking water containing 55 mM sodium citrate/67 mM citric acid during two weeks, when was observed lower levels of ROS production, an improve in the rate of oxygen consumption supported by NADP-linked substrates as well as a higher capacity to sustain reduced NAD(P)H in liver mitochondria. The spleen lymphocytes isolated from k/o mice also showed higher ROS generation by lymphocyte mitochondria and whole cell, and higher levels of cytosolic and mitochondrial Ca2+ compared to control mice. As intracellular Ca2+ has been shown to affect Th1 and Th2 priming and lymphocyte activation we evaluated some cytokines in LDL receptor k/o mice compared to controls. Th1 cytokines (interleukin-2 and TNF-a), as well as Th2 cytokines (interleukin-10 and interleukin-4) were higher in k/o mice than in control. The increase of Th1 and Th2 cytokines, ROS generation, and Ca2+ concentration were partially inhibited by treatment of the k/o mice with verapamil, an L-type Ca2+ channel antagonist. In conclusion, the data demonstrate that the liver mitochondrial oxidative stress in hypercholesterolemic LDL receptor knockout mice is the result of a low content of mitochondrial NADPH-linked substrates in the intact animal that can be, at least in part, replenished by oral administration of citrate. Also, we demonstrate that Ca2+ presents a central role in spleen mononuclear cell from hypercholesterolemic LDL receptor knockout mice modulating ROS generation and cytokines production. These alterations are probably related to lymphocyte activation due the expontaneous atherosclerotic lesion observed in aortic arch of k/o mice / Doutorado / Medicina Experimental / Doutor em Fisiopatologia Medica

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Neurociências, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-05-24T17:57:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 339612.pdf: 10990546 bytes, checksum: 38d1cd11d359ba3d6cfcfa3abf9c86b4 (MD5) Previous issue date: 2016 / Evidências clínicas e epidemiológicas apontam a hipercolesterolemia, particularmente a hipercolesterolemia familiar, como um fator de risco para o desenvolvimento de comprometimento cognitivo leve, um estágio de transição entre o envelhecimento saudável e os primeiros sintomas da doença de Alzheimer. A hipercolesterolemia familiar é uma doença genética do metabolismo das lipoproteínas, caracterizada por níveis muito elevados de colesterol plasmático que levam à aterosclerose prematura, em consequência do prejuízo da função do receptor de lipoproteína de baixa densidade (LDL). Nesse contexto, nosso grupo de pesquisa demonstrou que camundongos nocautes para o receptor de LDL (LDLr-/-), modelo de hipercolesterolemia familiar, exibem prejuízos de memória e aprendizado, associados à disfunção colinérgica e ao estresse oxidativo no córtex préfrontal e hipocampo. Desde a atribuição do Paradoxo Francês, os polifenóis presentes no vinho tinto têm sido indicados como agentes protetores de doenças cardiovasculares. Além disso, estudos recentes demonstram o papel protetor dessas moléculas antioxidantes em doenças neurodegenerativas, com particular ênfase na doença de Alzheimer. Dessa forma, hipotetizamos que o consumo regular moderado de vinho tinto é capaz de mitigar o desenvolvimento de comprometimento cognitivo e alterações neuroquímicas nos camundongos LDLr-/-. Assim, avaliamos por testes comportamentais o efeito do consumo moderado de vinho tinto na locomoção, atividade motora e nos parâmetros cognitivos de aprendizado e memória dos animais LDLr-/- submetidos à dieta padrão ou dieta hipercolesterolêmica. Além disso, determinamos a atividade da enzima acetilcolinesterase (AChE) e parâmetros antioxidantes nos tecidos cerebrais desses camundongos. Primeiramente, nós certificamos que a concentração alcoólica de 6% é segura para o consumo dos camundongos C57BL/6. Em seguida, nós observamos que a dieta hipercolesterolêmica causa um aumento nos níveis de colesterol total plasmáticos e dano hepático nos camundongos LDLr-/-, o que não foi atenuado pelo consumo de vinho tinto. Os prejuízos de memória de curto e longo prazo observados nos camundongos LDLr-/- tratados com dieta padrão e rica em colesterol foram revertidos pelo consumo de vinho. No entanto, os efeitos benéficos da bebida foram mais efetivos quando estes camundongos são expostos a uma dieta padrão. A atividade da AChE não foi modificada pela dieta hipercolesterolêmica ou pelo consumo moderado de vinho tinto. Além disso, não foram observadas alterações no sistema antioxidante vinculado à glutationa e nos níveis de peroxidação lipídica nas estruturas cerebrais estudadas após os tratamentos. Nosso conjunto de dados demonstrou que o consumo diário e moderado de vinho tinto é capaz de melhorar o prejuízo cognitivo induzido pela hipercolesterolemia em camundongos, todavia, os mecanismos de ação pelos quais essa bebida possa estar atuando ainda não estão bem elucidados.<br> / Abstract : Clinical and epidemiological evidence have been reported that hypercholesterolemia, particularly familial hypercholesterolemia, as a risk factor for the development of mild cognitive impairment, a transitional stage between healthy aging and the earlier Alzheimer's disease. Familial hypercholesterolemia is a lipoprotein metabolism genetic disorder, characterized by high plasma cholesterol levels leading to premature atherosclerosis as a result of the loss of the low density lipoprotein (LDL) receptor function. In this regard, our research group has demonstrated that LDL receptor knockout (LDLr-/-) mice, a useful animal model of familial hypercholesterolemia, exhibit learning and memory impairments, which is associated with cholinergic dysfunction and antioxidant imbalance in prefrontal cortex and hippocampus. Since French Paradox attribution, red wine polyphenols and flavonoids are indicated as cardiovascular diseases protectors. In addition, it has been shown the protective effect of these antioxidant molecules in neurodegenerative diseases, with particular emphasis in Alzheimer s disease. In this way, we hypothesized that the regular red wine moderate consumption is be able to mitigate the development of cognitive impairments and neurochemical alterations in LDLr-/- mice. Thus, we evaluated using behavioral tests the effect of red wine moderate consumption in locomotion, motor activity and learning and memory cognitive parameters of LDLr-/- animals submitted to standard or hypercholesterolemic diet. Additionally, we determined the activity of the acetylcholinesterase (AChE) enzyme, as well as antioxidant and oxidative stress parameters in the brain tissue of these mice. Firstly, we noticed that the 6% alcohol concentration is safe for C57BL/6 mice consumption. After that, we found that hypercholesterolemic diet causes an increase in the total plasma cholesterol levels and liver damage in LDLr-/- mice, which were not prevented by the consumption of red wine. The short and long term memory loss observed in LDLr-/- mice treated with standard and high cholesterol diet were ameliorated by wine consumption. Notable, beneficial effects of the beverage were most effective when these mice were exposed to a standard diet. The AChE activity was not modified by hypercholesterolemic diet or red wine moderate consumption. In addition, no changes were observed in the glutathione system and levels of lipid peroxidation in both brain structures studied after treatments. Our data set shows that red wine daily and moderate consumption can improve the hypercholesterolemia cognitive impairment induced in mice, however, the mechanisms by which this drink may be acting are still unclear. Clinical and epidemiological evidence have been reported that hypercholesterolemia, particularly familial hypercholesterolemia, as a risk factor for the development of mild cognitive impairment, a transitional stage between healthy aging and the earlier Alzheimer's disease. Familial hypercholesterolemia is a lipoprotein metabolism genetic disorder, characterized by high plasma cholesterol levels leading to premature atherosclerosis as a result of the loss of the low density lipoprotein (LDL) receptor function. In this regard, our research group has demonstrated that LDL receptor knockout (LDLr-/-) mice, a useful animal model of familial hypercholesterolemia, exhibit learning and memory impairments, which is associated with cholinergic dysfunction and antioxidant imbalance in prefrontal cortex and hippocampus. Since French Paradox attribution, red wine polyphenols and flavonoids are indicated as cardiovascular diseases protectors. In addition, it has been shown the protective effect of these antioxidant molecules in neurodegenerative diseases, with particular emphasis in Alzheimer s disease. In this way, we hypothesized that the regular red wine moderate consumption is be able to mitigate the development of cognitive impairments and neurochemical alterations in LDLr-/- mice. Thus, we evaluated using behavioral tests the effect of red wine moderate consumption in locomotion, motor activity and learning and memory cognitive parameters of LDLr-/- animals submitted to standard or hypercholesterolemic diet. Additionally, we determined the activity of the acetylcholinesterase (AChE) enzyme, as well as antioxidant and oxidative stress parameters in the brain tissue of these mice. Firstly, we noticed that the 6% alcohol concentration is safe for C57BL/6 mice consumption. After that, we found that hypercholesterolemic diet causes an increase in the total plasma cholesterol levels and liver damage in LDLr-/- mice, which were not prevented by the consumption of red wine. The short and long term memory loss observed in LDLr-/- mice treated with standard and high cholesterol diet were ameliorated by wine consumption. Notable, beneficial effects of the beverage were most effective when these mice were exposed to a standard diet. The AChE activity was not modified by hypercholesterolemic diet or red wine moderate consumption. In addition, no changes were observed in the glutathione system and levels of lipid peroxidation in both brain structures studied after treatments. Our data set shows that red wine daily and moderate consumption can improve the hypercholesterolemia cognitive impairment induced in mice, however, the mechanisms by which this drink may be acting are still unclear.

Introdução: Hábitos alimentares (HAs) inadequados têm importante relação com hipercolesterolemia, que constitui fator de risco para doenças cardiovasculares. Objetivo: Analisar HAs de idosos hipercolesterolêmicos, atendidos em ambulatório da cidade de São Paulo. Métodos: Participaram do estudo idosos ( 60 anos), de ambos os sexos, voluntários, com prontuários ativos no Centro de Referência do Idoso José Ermírio de Moraes (CRIJEM), com diagnóstico de hipercolesterolemia ou prescrição de medicamento hipolipemiante. O método de inquérito utilizado foi história alimentar. As variáveis de estudo foram: número de refeições diárias, ingestão habitual de alimentos, incluindo água e bebidas alcoólicas, necessidade de ajuda para se alimentar, companhia às refeições e local (fora e dentro da residência) das mesmas. O critério adotado, para considerar hábito alimentar do grupo, foi a frequência de ingestão 50 por cento . Resultados: Foram analisados os HAs de 106 idosos, com idade entre 60 e 84a (média de 69,3 anos - DP=5,9), 86 por cento do sexo feminino, 58 por cento moravam com familiares, e 93 por cento apresentaram prescrição de medicamento hipolipemiante. O número médio de refeições diárias foi 5,0 (DP=1,2), um terço dos idosos referiu ingestão diária 6 a 8 copos de água, e a maioria (78 por cento ) negou ingestão de bebidas alcoólicas. Quanto às respostas com múltiplas alternativas, 71 por cento das citações mostraram não haver necessidade de ajuda, 89 por cento indicaram realizar as refeições na própria residência, e cerca da metade (49 por cento ) informaram não ter companhia. Foram considerados como HAs os seguintes alimentos e preparações: café, leite, pão francês, arroz, feijão, carne bovina e de frango, alface crua, banana, óleos de oliva e de soja. Conclusões: Nesse grupo, constatou-se pequena variedade de alimentos, especialmente em relação a hortaliças e frutas, e ausência de hábito alimentar para ingestão de água / Introduction: Inadequate eating habits are strongly related to hypercholesterolaemia, a risk factor for cardiovascular diseases. Objective: This study aims the analysis of food habits of hypercholesterolaemic elderly patients attending to an ambulatory unit in São Paulo city. Methods: Among the patients who were attending to Centro de Referência do Idoso José Ermírio de Moraes (CRIJEM), 106 elders ( 60y) volunteered to be interviewed about their eating habits; all of them were hypercholesterolaemic or were on hypolipaemic drugs. It was used an inquiry on dietetic history. Data was collected on the number of daily meals, their habitual ingestion of food (water and alcoholic beverages included), the need for help for feeding themselves, if they eat accompanied by anyone, and where do they have their meals. Any food was included as part of their customary diet only if it was mentioned by at least 50 per cent of the group. Results: The eating habits of 106 elders were evaluated. Their age ranged from 60 to 84 years old, mean age was 69,3 years (±5,9), 86 per cent of them were female, 58 per cent were living with family members, and 93 per cent were prescribed hypolipaemic drugs. The average frequency of meals was 5,0 (±1,2), one third drank 6 to 8 glasses of water a day, and 78 per cent denied alcohol consumption. Besides, 71 per cent of the answers indicated no need for any help in feeding themselves, 89 per cent had their meals at their own house, and almost half of them ate alone. The following foods were part of the dietary habits of this group: coffee, milk, white bread, rice, beans, red meat and poultry, lettuce, banana, olive and soy oils. Conclusions: This group demonstrated a small variety of foods, specially fruit and vegetables, and absence of water

Introdução: Doenças cardiovasculares constituem importante causa de morte em todo mundo e a hipercolesterolemia está diretamente relacionada como fator agravante desta morbidade. A dieta desempenha papel importante neste processo e alguns alimentos como o amaranto, especialmente sua proteína, tem mostrado capacidade de redução do colesterol plasmático. Estudos sugerem que este efeito está relacionado a peptídeos formados durante a digestão da sua proteína, os quais desempenham um papel importante na regulação e modulação do metabolismo lipídico. Os efeitos hipocolesterolêmicos, já observados, indicam o uso da proteína do amaranto como um composto bioativo direcionado para a promoção da saúde. Considerando que os efeitos hipocolesterolêmicos destes peptídeos são complexos e há diversas hipóteses formuladas, torna-se importante a realização de estudos visando avaliar a interação dos peptídeos na absorção intestinal do colesterol e da sua modulação genética. Objetivos: Verificar os efeitos do hidrolisado da farinha do grão de amaranto na absorção de colesterol e modulação de genes ABCA1, ABCG1, NPC1L1, AMPK, HMGR e SREBP-2em células Caco-2, e modulação dos genes ABCG8, HMGR, SREBP-2 e AMPKem enterócitos de hamsters. Metodologia: O amaranto foi triturado, sua farinha desengordurada e sua proteína isolada, com posterior digestão in vitro e filtração dos peptídeos. Três experimentos in vitro foram conduzidos com as células: permeação de hidrolisado, permeação de colesterol e de efeito sob a expressão gênica. No primeiro, o hidrolisado proteico de amaranto foi permeado em culturas celulares de Caco-2 no tempo de 2 horas. O permeato foi coletado e analisado por LC/MS/MS. No segundo, o hidrolisado de amaranto foi incorporado a micelas de colesterol e incubados em culturas celulares, nas concentrações de 1,0 mg/ml, e 3,0 mg/ml em tempos de 2h. Também em concentrações de 3,0 mg/ml foi adicionado albumina e caseína para efeito comparativo. O conteúdo de colesterol na porção apical e basolateral foi analisado em HPLC. O terceiro experimento foi avaliaçãoda exposição do hidrolisado, em concentrações de 0,5 mg/ml, 1,0 mg/ml e 3,0 mg/ml, em tempos de 2h e 12h. Após este período, foi realizada a extração de RNA total, avaliação de rendimento e integridade do material; medida quantitativa de expressão de RNAm por RT-PCR e quantificação relativa da expressão por ?CT dos genes ABCA1, ABCG1, ABCG8, NPC1L1, AMP1, HMGR e SREBP-2das células Caco-2 e tecido intestinal de hamsters, coletados em ensaios anteriores. Resultados: Na permeação de colesterol não houve diferença entre as concentrações dos hidrolisados proteicos e controle, porém o hidrolisado de amaranto em 1,0 mg/ml demonstrou uma tendência em diminuir a absorção de colesterol (p = 0,05). Na exposição das células Caco-2 aos peptídeos por 2h, houve uma diminuição nas concentrações de RNAm dos genes ABCA1, NPC1L1, AMPK, HMGR e SREBP-2 nas concentrações de 3,0 mg/ml. O tempo de exposição de 12h apresentou resultados semelhantes ao tempo de 2h. Somente a expressão gênica de ABCG8foi influenciada pelo isolado proteico de amaranto no experimento in vivo. Conclusão: A partir do exposto, podemos concluir que os peptídeos do grão de amaranto influenciam o metabolismo de colesterol por mecanismos genéticos. Portanto, torna-se uma alternativa a ser introduzida na dieta de indivíduos saudáveis e em pacientes com hipercolesterolemia, visando a prevenção de agravos e como estratégia de terapia adicional no controle dos níveis de LDL-c plasmático. Contudo, mais experimentos in vivo e em humanos são necessários para estabelecer a dose efetiva para consumo. / Introduction: Cardiovascular diseases are an important cause of death worldwide and hypercholesterolemia is directly related as an aggravating factor of this morbidity. Diet plays an important role in this process and some foods such as amaranth, especially its protein, have shown ability to lower plasma cholesterol. Studies suggest that this effect is related to peptides formed during the digestion of their protein, which play an important role in the regulation and modulation of lipid metabolism. The hypocholesterolemic effects, already observed, indicate the use of amaranth protein as a bioactive compound aimed to promoting health. Considering that the hypocholesterolemic effects of these peptides are complex and there are several hypotheses formulated, it is important to carry out studies to evaluate the interaction of peptides in the intestinal absorption of cholesterol and its genetic modulation. Objectives: To verify the effects of amaranth grain flour hydrolyzate on cholesterol uptake and ABCA1, ABCG1, NPC1L1, AMPK, HMGR and SREBP-2 genes modulation in Caco-2 intestinal cells, and modulation of ABCG8, HMGR, SREBP-2 genes and AMPK in hamster intestinal cells. Methodology: Amaranth was crushed, the created flour was defatted and its protein isolated, with subsequent in vitro digestion and filtration of the peptides. Three in vitro experiments were conducted with the cells: hydrolyzate permeation, cholesterol permeation and genetic expression. In the first, the amaranth protein hydrolyzate was permeated in Caco-2 cell cultures in the time of 2 hours. The permeate was collected and analyzed by LC/MS/MS. In the second, the amaranth hydrolyzate was incorporated into cholesterol micelles and incubated in cell cultures at concentrations of 1.0 mg/ml and 3.0 mg/ml in times of 2 h. Also, at concentrations of 3.0 mg/ml albumin and casein were added for comparison. Cholesterol content in the apical and basolateral portion was analyzed by HPLC. The third experiment was to evaluate the exposure of the hydrolyzate at concentrations of 0.5 mg/ml, 1.0 mg/ml and 3.0 mg/ml, in times of 2 h and 12 h. After this period, the extraction of total RNA, evaluation of yield and integrity of the material was performed; quantitative measurement of mRNA expression by RT-PCR and relative quantification of ?CT expression of the ABCA1, ABCG1, ABCG8, NPC111, AMPK, HMGR and SREBP-2 genes from Caco-2 cells and hamster intestinal tissue, collected in previous assays, were finalized. Results: In cholesterol permeation there was no difference between the concentrations of the protein hydrolysates and control, but the amaranth hydrolyzate at 1.0 mg/ml showed a tendency to decrease the cholesterol absorption (p = 0.05). Exposure of Caco-2 cells to peptides for 2 h resulted in a decrease in ABCA1, NPC111, AMPK, HMGR and SREBP-2 mRNA levels at concentrations of 3.0 mg/ml. The exposure time of 12h presented results similar to the time of 2h. Only the gene expression of ABCG8 was influenced by the amaranth protein isolate in the in vivo experiment. Conclusion: From the above, we can conclude that amaranth peptides influence the metabolism of cholesterol by genetic mechanisms. Therefore, it becomes an alternative to be introduced in the diet of healthy individuals and in patients with hypercholesterolemia, aiming at the prevention of aggravations and as a strategy of additional therapy in the control of plasma LDL-c levels. However, more studies should bedone with animals and humans to define the dose-efficiency for diet.

Introdução: Hábitos alimentares (HAs) inadequados têm importante relação com hipercolesterolemia, que constitui fator de risco para doenças cardiovasculares. Objetivo: Analisar HAs de idosos hipercolesterolêmicos, atendidos em ambulatório da cidade de São Paulo. Métodos: Participaram do estudo idosos ( 60 anos), de ambos os sexos, voluntários, com prontuários ativos no Centro de Referência do Idoso José Ermírio de Moraes (CRIJEM), com diagnóstico de hipercolesterolemia ou prescrição de medicamento hipolipemiante. O método de inquérito utilizado foi história alimentar. As variáveis de estudo foram: número de refeições diárias, ingestão habitual de alimentos, incluindo água e bebidas alcoólicas, necessidade de ajuda para se alimentar, companhia às refeições e local (fora e dentro da residência) das mesmas. O critério adotado, para considerar hábito alimentar do grupo, foi a frequência de ingestão 50 por cento . Resultados: Foram analisados os HAs de 106 idosos, com idade entre 60 e 84a (média de 69,3 anos - DP=5,9), 86 por cento do sexo feminino, 58 por cento moravam com familiares, e 93 por cento apresentaram prescrição de medicamento hipolipemiante. O número médio de refeições diárias foi 5,0 (DP=1,2), um terço dos idosos referiu ingestão diária 6 a 8 copos de água, e a maioria (78 por cento ) negou ingestão de bebidas alcoólicas. Quanto às respostas com múltiplas alternativas, 71 por cento das citações mostraram não haver necessidade de ajuda, 89 por cento indicaram realizar as refeições na própria residência, e cerca da metade (49 por cento ) informaram não ter companhia. Foram considerados como HAs os seguintes alimentos e preparações: café, leite, pão francês, arroz, feijão, carne bovina e de frango, alface crua, banana, óleos de oliva e de soja. Conclusões: Nesse grupo, constatou-se pequena variedade de alimentos, especialmente em relação a hortaliças e frutas, e ausência de hábito alimentar para ingestão de água / Introduction: Inadequate eating habits are strongly related to hypercholesterolaemia, a risk factor for cardiovascular diseases. Objective: This study aims the analysis of food habits of hypercholesterolaemic elderly patients attending to an ambulatory unit in São Paulo city. Methods: Among the patients who were attending to Centro de Referência do Idoso José Ermírio de Moraes (CRIJEM), 106 elders ( 60y) volunteered to be interviewed about their eating habits; all of them were hypercholesterolaemic or were on hypolipaemic drugs. It was used an inquiry on dietetic history. Data was collected on the number of daily meals, their habitual ingestion of food (water and alcoholic beverages included), the need for help for feeding themselves, if they eat accompanied by anyone, and where do they have their meals. Any food was included as part of their customary diet only if it was mentioned by at least 50 per cent of the group. Results: The eating habits of 106 elders were evaluated. Their age ranged from 60 to 84 years old, mean age was 69,3 years (±5,9), 86 per cent of them were female, 58 per cent were living with family members, and 93 per cent were prescribed hypolipaemic drugs. The average frequency of meals was 5,0 (±1,2), one third drank 6 to 8 glasses of water a day, and 78 per cent denied alcohol consumption. Besides, 71 per cent of the answers indicated no need for any help in feeding themselves, 89 per cent had their meals at their own house, and almost half of them ate alone. The following foods were part of the dietary habits of this group: coffee, milk, white bread, rice, beans, red meat and poultry, lettuce, banana, olive and soy oils. Conclusions: This group demonstrated a small variety of foods, specially fruit and vegetables, and absence of water

Orientador: Aureluce Demonte / Banca: Valdir Augusto Neves / Banca: Eduardo Maffud Cilli / Resumo: Vários estudos têm demonstrado que proteínas de leguminosas como soja, grão de bico, lentilhas e alguns feijões possuem propriedades hipocolesterolêmicas e hipotrigliceridêmicas, embora o mais comum seja a utilização de fármacos nestes quadros. Em função da composição proteica do grão de bico e da possível homologia funcional com as demais proteínas de leguminosas, esse estudo teve por objetivo verificar a ação da proteína do tipo legumina (11S) do grão de bico administrada oralmente como suplemento em animais hipercolesterolêmicos induzidos pela dieta. Foram analisados crescimento ponderal, consumo alimentar, excreção fecal, concentração sérica e hepática de colesterol total, triglicerídeos, fração HDL e não-HDL além da excreção de lipídeos totais e colesterol. Houve diferença entre o aspecto dos fígados dos grupos estudados decorrente do consumo da dieta hipercolesterolêmica e ação do fármaco. A administração diária de 300 mg/kg de peso corpóreo da fração 11S do grão de bico apesar de não apresentar efeito sobre os níveis séricos de colesterol total provocou uma diminuição de 28,77% nos níveis de triglicerídeos e de 51,48% e 82,70% nas concentrações hepáticas de colesterol total e triglicerídeos, respectivamente. Esses resultados mostram que a fração 11S do grão de bico possui efeito hipotrigliceridêmico e que as globulinas 11S de leguminosas podem apresentar ações fisiológicas diferentes sobre o metabolismo lipídico / Abstract: Several studies have shown that proteins of legumes like soybeans, chickpeas, lentils and beans have some hypocholesterolemic properties and hypotriglyceridemic, although the most common is the use of drugs in these situations. Devide to the protein composition of chickpea and possible functional homology with other legume proteins, this study aimed to verify the effect of protein type legumin (11S) of chickpeas administered orally as a supplement in animals induced hypercholesterolemic diet. We analyzed weight growth, food consumption, fecal excretion, serum and hepatic total cholesterol, triglycerides, HDL and non-HDL beyond the excretion of total lipids and cholesterol. There was a difference between the appearance of the livers of groups arising from the consumption of hypercholesterolemic diet and drug action. The daily administration of 300 mg / kg body weight fraction of 11S chickpea although not have an effect on serum total cholesterol caused a decrease of 28.77% in the levels of triglycerides and 82% to 51.48 70% liver concentrations of total cholesterol and triglycerides, respectively. These results show that the fraction of 11S chickpeas has effect hypotriglyceridemic and 11S globulins of legumes may have different physiological actions on lipid metabolism / Mestre