O presente estudo avaliou ex vivo a capacidade de descoloração do hipoclorito de sódio em diferentes concentrações, utilizando diferentes protocolos de irrigação, em dentes previamente corados. 40 incisivos centrais superiores tiveram suas coroas seccionadas. Após a remoção da coroa, os espécimes tiveram inicialmente os canais irrigados, e explorados por todo seu comprimento, com remoção do conteúdo pulpar, seguida de uma irrigação com 5 ml de cada concentração proposta (2,5% e 5,25%). Os espécimes foram secos externamente com toalha de papel e internamente por meio de cones de papel absorvente. Após isso, as amostras permaneceram no dessecador a vácuo por 120 minutos e imersos em uma solução de sulfato de cobre, durante 15 minutos sob vácuo com o objetivo de remover o ar do interior do canal radicular, e consequentemente permitir maior penetração da solução citada e mantida por mais 75 minutos à pressão ambiente. Posteriormente os espécimes foram removidos da solução, secas com papel toalha e cones de papel absorvente. Foram então imersos na solução de ácido rubeânico sob vácuo por 15 minutos e mantido por mais 225 minutos à pressão ambiente.Com isso, os espécimes foram aleatoriamente divididos em 4 grupos, de acordo com a solução irrigante a ser utilizada e com o protocolo de irrigação: GRUPO 1 (n=10) - Hipoclorito de Sódio 2,5% sem PUI; GRUPO 2 (n=10) - Hipoclorito de Sódio 5,25% sem PUI; GRUPO 3 (n=10) - Hipoclorito de Sódio 2,5% com PUI; GRUPO 4(n=10) - Hipoclorito de Sódio 5,25% com PUI. Após a divisão, o preparo biomecânico pela técnica crown down foi realizado, porém, nos grupos 3 e 4, a irrigação final foi realizada com PUI (Irrigação Ultrassônica Passiva) no comprimento de trabalho, durante 30 segundos com uma potência de 20kHz. Os espécimes foram secos externamente com toalha de papel absorvente e internamente por meio de cones de papel absorvente. Após o preparo e a irrigação com suas devidas particularidades para cada grupo, foram obtidos slices de 1,0 mm de espessura por meio da máquina de corte de tecido duro IsoMet® 1000. As amostras foram polidas e por meio de microscópio digital ligado a um computador obteve-se as imagens dos slices, que foram mensuradas por um software AxioVision 4.8. Em seguida, calculou-se as áreas de dentina da região descolorida pela solução irrigante. Os resultados mostraram que para o terço apical, a Irrigação Ultrassônica Passiva (PUI) apresentou um comportamento superior comparado à irrigação sem PUI na descoloração da dentina pelo hipoclorito de sódio. Na análise entre os grupos evidencia o pior resultado para o grupo 1 (Hipoclorito de sódio 2,5% sem PUI) quando comparado aos demais grupos com comportamentos semelhantes entre si. / The present study evaluated ex vivo the ability of discoloration of sodium hypochlorite in different concentrations, using different protocols of irrigation, in previously stained teeth. 40 upper central incisors were stripped of their crowns sectioned. After removing the crown, the specimens had initially irrigated canals, and explored throughout its length, with removal of the pulp content, followed by an irrigation with 5 ml of each proposed concentration (2,5% e 5,25%). The specimens were dried with externally paper towel and internally through absorbent paper cones. After that, the samples remained in vacuum desiccator for 120 minutes and immersed in a solution of copper sulphate, during 15 minutes under vacuum in order to remove the air from inside the root canal, and consequently allow greater penetration of the solution cited and maintained for another 75 minutes at ambient pressure. Later specimens were removed from the solution, dried with paper towels and absorbent paper cones. Then, were immersed in the solution of rubeanic acid under vacuum for 15 minutes and maintained for over 225 minutes at ambient pressure. With that, the specimens were randomly divided into 4 groups according to the irrigant solution to be used and with the irrigation protocol: GROUP 1 (n = 10) - 2,5% sodium hypochlorite without PUI; GROUP 2 (n = 10) - 5,25% sodium hypochlorite without PUI; GROUP 3 (n = 10) - 2.5% sodium hypochlorite with PUI; GROUP 4 (n = 10) - 5,25% sodium hypochlorite with PUI. After the split, the biomechanical preparation by the crown down technique was conducted, however, in groups 3 and 4, the final irrigation was performed with PUI (Passive Ultrasonic Irrigation) in working length, during 30 seconds with a power of 20%. The specimens were dried with absorbent paper towel externally and internally through absorbent paper cones. After the preparation and irrigation with their due particularities for each group, were obtained from 1.0 mm thick slices through the hard tissue cutting machine IsoMet ® 1000. The samples were polished and through digital microscope connected to a computer were obtained images of the slices, which were measured by software AxioVision 4.8. Then, it has been calculated the areas of discolored dentin by irrigant solution. The results showed that for the apical third, Passive Ultrasonic Irrigation (PUI) presented a superior behavior compared to the irrigation without PUI on discoloration of dentin by sodium hypochlorite. The analysis between the groups shows the worst result for the Group 1 (2.5% sodium hypochlorite without PUI) when compared to other groups with behaviors similar to each other.

The efficacy of the sodium hypochlorite and chlorhexidine over the Enterococcus faecalis present in endodontic infections was evaluated in longitudinal studies through a systematic review. Bibliographic catalogue sources, electronically identified as MEDLINE (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed), from 1966 until January 1st, and Cochrane Library on the same period, were used. On the searching strategy, the following combination of keywords were used faecalis and sodium hypochlorite or faecalis and chlorhexidine or faecalis and root canal infections or faecalis and endodontics infections or faecalis and root canal irrigants or faecalis and irrigant solution or faecalis and endodontics irrigants or faecalis and intracanal irrigant. The studies were selected by two independent reviewers that determined the inclusion and exclusion criteria. The search presented 229 related articles, with 6 of these as literature review articles, 39 articles were related with in vivo studies (humans or animals), and 189 included in vitro studies. From the 39 in vivo studies, 5 studies satisfied the inclusion criteria. The methodological structure of the included studies prohibited the combination of results. The efficacy of the sodium hypochlorite and chlorhexidine over the E. faecalis was demonstrated in vitro by direct contact test. On the studies involving contaminated dentin, either the sodium hypochlorite or the chlorhexidine were inefficient. On the 5 studies included, from the total of 159 teeth with endodontic infections primary or secundary, the E. faecalis was detected initially in 16 teeth by PCR and 42 by culture, and after the sanitization process in 11 teeth by PCR and 12 by culture. It was observed the absence of longitudinal studies in humans about the efficacy of chlorhexidine over the E. faecalis. The sanitization process with the emptying, enlargement and action of the sodium hypochlorite reduces the remaining endodontic microbiota, what certainly potentiates the action of the intracanal dressing and favors a higher level of success of the endodontic treatment. / Avaliou-se em estudos longitudinais a eficácia do hipoclorito de sódio e da clorexidina sobre o Enterococcus faecalis presente em infecções endodônticas, através de revisão sistemática. Fontes de catalogação bibliográfica identificadas eletronicamente por MEDLINE (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed), a partir de 1966 até 01 de janeiro de 2007 e Cochrane Library no mesmo período. Na estratégia de busca empregou-se a combinação dos unitermos faecalis and sodium hypochlorite ou faecalis and chlorhexidine ou faecalis and root canal infections ou faecalis and endodontics infections ou faecalis and root canal irrigants ou faecalis and irrigant solution ou faecalis and endodontics irrigants ou faecalis and intracanal irrigant. Os estudos foram selecionados por dois revisores, independentes, que, determinaram os critérios de inclusão e exclusão. A busca apresentou 229 artigos relacionados, sendo que destes 6 artigos eram de revisão de literatura, 39 artigos relacionavam-se com estudos in vivo (humanos ou animais), e 189 incluíam estudos in vitro. Dos 39 estudos in vivo 5 estudos satisfizeram os critérios de inclusão. A estruturação metodológica dos estudos incluídos inviabilizou a combinação de resultados. A eficácia do hipoclorito de sódio e da clorexidina sobre o E. faecalis foi demonstrada in vitro por teste de contato direto. Nos estudos envolvendo dentina contaminada, tanto o hipoclorito de sódio quanto a clorexidina mostram-se ineficazes. Nos 5 estudos icluídos, do total de 159 dentes com infecções endodônticas primárias ou secundárias, detectou-se o E. faecalis no início do tratamento em 16 dentes por PCR e 42 por cultura; e após o processo de sanificação em 11 por PCR e 12 por cultura. Observou-se ausência de estudos longitudinais em humanos da eficácia da clorexidina sobre o E. faecalis. O processo de sanificação coadjuvado pelo esvaziamento, alargamento e ação do hipoclorito de sódio reduz a microbiota endodôntica remanescente, o que certamente potencializa a ação da medicação intracanal e favorece um maior nível de sucesso do tratamento endodôntico. / Mestre em Odontologia

O Brasil é hoje o segundo maior produtor de carne de frango do mundo e o primeiro país exportador, o que faz com que as criações avícolas necessitem de um criterioso programa de biosseguridade a fim de impedir o surgimento de patógenos que possam causar danos aos plantéis e ao produto final. Neste cenário, tem fundamental importância a Salmonella e, mais recentemente, a Salmonella Heidelberg por sua alta prevalência e importância frente a casos de saúde pública, principalmente no que diz respeito à resistência a sanitizantes e antimicrobianos. A dificuldade no combate e eliminação desse patógeno em toda a cadeia avícola, seu potencial zoonótico e aumento de resistência a antimicrobianos motivou a realização deste trabalho. Portanto, os objetivos foram comparar 20 isolados de S. Heidelberg do ano de 2006 e 20 isolados do ano de 2016, testando-os quanto à eficácia de dois sanitizantes, hipoclorito de sódio (concentrações 0,5% e 1,0%) e cloreto de benzalcônio (concentrações 100 ppm e 200 ppm), em temperatura de 25°C e 12°C e tempos de contato de 5 e 15 minutos. Ainda, foi determinada a Concentração Inibitória Mínima (MIC) dos antimicrobianos ácido nalidíxico, ciprofloxacina, cloranfenicol, enrofloxacina, gentamicina e tetraciclina, além de verificar a presença de isolados multirresistentes. O teste de suspensão por diluição dos sanitizantes revelou que, nas duas concentrações utilizadas, independentemente do ano de isolamento, o hipoclorito de sódio se mostrou mais eficiente do que o cloreto de benzalcônio, eliminando 100% dos isolados com tempo de contato de 15 minutos. Por outro lado, o cloreto de benzalcônio, mesmo na maior concentração e tempo de contato, não foi totalmente eficiente para os isolados de 2006 e 2016. O cloreto de benzalcônio foi mais eficiente a 25°C do que a 12°C, em ambos os períodos e, quando comparados os anos, os isolados de 2016 foram mais resistentes ao cloreto de benzalcônio a 200 ppm, 25°C e tempo de contato de 5 minutos. Nos teste de MIC, quando comparados os dois períodos, 2006 e 2016, houve aumento significativo de isolados categorizados como nWT à tetraciclina, passando de 5% em 2006 para 75% em 2016. Nos dois períodos foi observada uma alta taxa de isolados nWT para ácido nalidíxico (50% e 65%), porém, todos os isolados foram categorizados como WT ao cloranfenicol e à enrofloxacina. Dentre os isolados de 2016, 5 (25%) apresentaram fenótipo de multirresistência. Os isolados sensíveis a todos os antimicrobianos totalizaram 40% para 2006 e 20% para 2016. Os resultados encontrados demonstram que há progressão da resistência de S. Heidelberg aos antimicrobianos com o passar do tempo, o que implica no aparecimento de isolados multirresistentes. Ações devem ser tomadas com o intuito de incentivar o uso prudente desses fármacos na medicina humana e, principalmente, em qualquer que seja a área de produção animal. / Brazil is now the second largest producer of chicken meat in the world and the first exporting country, which means that poultry farms need a careful biosecurity program to prevent the emergence of pathogens that can cause damage to the farms and to the final product. In this scenario, Salmonella Heidelberg plays a fundamental role because of its high prevalence and significance in public health cases, especially with regard to resistance to sanitizers and antimicrobials. Motivated by the difficulty in eliminating this pathogen throughout the poultry chain, its zoonotic potential and increased antimicrobial resistance, this study aimed to compare 20 isolates of S. Heidelberg from the year 2006 and 20 isolates from the year 2016. The isolates were tested against the efficacy of two sanitizers, sodium hypochlorite (0.5% and 1.0% concentrations) and benzalkonium chloride (concentrations of 100 ppm and 200 ppm), at 25°C and 12°C, and contact times of 5 and 15 minutes. In addition, the Minimal Inhibitory Concentration (MIC) of the antimicrobials nalidixic acid, ciprofloxacin, chloramphenicol, enrofloxacin, gentamicin and tetracycline were determined, as well as the presence of multiresistant isolates. The dilution suspension test of the sanitizers revealed that in the two concentrations used, sodium hypochlorite was more efficient than benzalkonium chloride, eliminating 100% of the isolates with a contact time of 15 minutes, regardless of the year of isolation. On the other hand, benzalkonium chloride, even at the highest concentration and contact time, was not fully efficient for the isolates of 2006 and 2016. Benzalkonium chloride was more efficient at 25°C than at 12°C in both periods. When the years were compared, the isolates from 2016 were more resistant to benzalkonium chloride at 200 ppm, 25°C and contact time of 5 minutes. In the MIC tests, when comparing the two periods of 2006 and 2016, there was a significant increase of isolates categorized as nWT to tetracycline, from 5% to 75%. In both periods, a high rate of nWT isolates for nalidixic acid (50% and 65%) was observed. All isolates were categorized as WT to chloramphenicol and 5nrofloxacina. Among the isolates from 2016, five (25%) had a multidrug resistance phenotype. Forty percent of isolates from 2006 and 20% from 2016 were sensitive to all antimicrobials tested. The results show that there is progression of resistance of S. Heidelberg to antimicrobials over time, which implies the appearance of multiresistant isolates. Actions should be taken in order to encourage the prudent use of these drugs in human medicine and veterinary.

O uso de irrigação com solução de hipoclorito de sódio a 1% (NaOCl) seguida de irrigação final com solução de clorexidina a 2%(CHX) pode promover uma melhor antissepsia do sistema de canais radiculares do que as abordagens tradicionais. Já foi relatado que estas substâncias quando entram em contato dentro do sistema de canais radiculares produzem subprodutos a partir de sua mistura, que apresentam uma fase líquida e uma fase sólida precipitada que permanece nas paredes do canal radicular. Sua ação citotóxica em cultura de células ainda não foi estudada. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito desta mistura e seus subprodutos in vitro sobre a viabilidade celular. Para avaliar se o grau de diferenciação pode afetar a sobrevivência celular foram escolhidas para o experimento fibroblastos de gengiva humana (FMM1) que são células mais diferenciadas e células-tronco de polpa dentária humana (PDH3) menos diferenciadas. Métodos: partes iguais de soluções de hipoclorito 1% (NaOCl) e digluconato de clorexidina 2% (CHX) foram misturadas e os subprodutos obtidos. Os grupos experimentais testados foram: G1- CHX, G2- NaOCl + CHX(fase líquida), G3- NaOCl + CHX(fase sólida). Quatro(4) diferentes concentrações (100%, 1%, 0,5% e 0,25%) das substâncias de G1 e G2 e do meio de cultivo condicionado pelo G3, foram aplicadas às culturas de células. A viabilidade celular foi mensurada pelo teste de redução do MTT (n=24/concentração/substância/células) e a genotoxicidade através de contagem de micronúcleos apenas para as concentrações das substâncias de 0,5% e 0,25% (número de micronúcleos/1000 células em cada contagem, 2 contagens), ambos em 24 horas após o contato de 15 minutos com as substâncias testadas. Os dados foram analisados por ANOVA complementado por teste de Tukey(p<0,05) para o MTT e qui-quadrado para genotoxicidade. Como resultados da viabilidade celular a dose letal de 50%(DL50) ocorreu apenas nas concentrações menores que 5% no G1, e ao redor de 1% para G2 e G3. Como resultados do teste de genotoxicidade os mesmos números de micronúcleos foram encontrados para todos os grupos em duas contagens de 1000 células. As células PDH3 apresentaram maior viabilidade que a FMM1 com maior número de células em concentrações maiores das substâncias testadas, demonstrando maior resistência de células menos diferenciadas. Como não houve diferença estatística no número de micronúcleos entre os grupos do teste de genotoxicidade inferimos que não houve aumento do número de micronúcleos entre os grupos de teste e o controle. Portanto, a solução de CHX a 2% quando aplicada sobre as células em cultura in vitro não foi biocompatível em concentrações de diluição acima de 0,5%; não foi genotóxica, pois não houve aumento na formação de micronúcleos nem com o grupo da clorexidina nem com a fase líquida da mistura ou com o precipitado. / New antimicrobial therapies have been introduced in Endodontics for periapical lesions and treatment-resistant infections. Alternating irrigating solutions such as 1% sodium hypochlorite (NaOCl) solution and 2% chlorhexidine (CHX) solution has shown promising results. However, inside the root canal system the NaOCl and CHX interact producing byproducts (Bps) represented by a liquid (Liq) and a solid precipitated (Sol) that remain on the canal walls. Objectives: To study the cytotoxicity of such Bps and CHX using cultured fibroblasts (FMM1) and stem cells(PDH3). Two cell lines were chosen to test if different differentiated cell types would present different survival results. Methods: Equal parts of 1% NaOCL and 2% CHX solutions were mixed and the Bps were obtained. Three drug solutions were tested: cell culture medium dilution of CHX, cell culture medium dilution of Liq and cell culture medium conditioned by the Sol byproduct. They were prepared in fresh medium in 4 different concentrations (100%, 1%, 0,5%, 0,25%) and applied to the cells for 15 minutes. In the control wells the cells grew on fresh medium. Cytotoxicity was measured by using the MTT reduction assay in 24 replicates per concentration per solution. Twenty-four hours later cell viability was analyzed. Micronucleus counting was used to check genotoxicity (number of micronucleus/ 1000 cell, 2 counting). Data was evaluated through ANOVA test with post hoc Tukey(p<0,05) for MTT assay and qui-square for genotoxicity. Lethal dose concentration 50%(LD50) was obtained in concentrations less than 0,5% with CHX and around 1% for Liq and Sol. there were obtained same number of micronucleous for all the substances tested. PDH3 cells presented higher survival rate to higher concentrations, so they were more resistant than FMM1. There was no statistical difference between control and tested groups for genotoxicity. 2% CHX solution when applied to cell cultures was not biocompatible in concentrations above 0,5%; there is no increase in micronucleous number with tested substances.

A associação dos irrigantes endodônticos hipoclorito de sódio e clorexidina forma um precipitado amarronzado e subprodutos que podem ser tóxicos aos tecidos periodontais apicais. O objetivo deste trabalho foi de avaliar qualitativamente e quantitativamente a resposta inflamatória destes irrigantes e suas associações em tecido conjuntivo no dorso do rato. Foram utilizados 24 ratos machos Wistar, 220 gr, cuja região dorsal foram confeccionadas quatro feridas cirúrgicas por punch de 08mm que receberam 20 mL dos irrigantes endodônticos, sendo divididos em: soro fisiológico, solução de digluconato de clorexidina a 2%, hipoclorito de sódio a 1% e a 2,5%, mistura de 10mL de hipoclorito de sódio a 1% mais 10mL de clorexidina a 2% e mistura de 10mL de hipoclorito de sódio a 2,5% mais 10mL de clorexidina a 2%. O experimento foi realizado em triplicata e os animais foram sacrificados nos tempos experimentais de 0 (imediato), 24h, 72h e 168h. Os fragmentos foram fixados e corados com hematoxilina e eosina para análise histomorfológica. Para a quantificação celular, cortes histológicos dos grupos de 24, 72 e 168h foram tratados para serem imunomarcados pelos anticorpos para linfócitos CD4 e CD8, e Anti pan-macrófago para marcação de macrófagos. Foram tomadas três fotografias num aumento de 400x de cada lâmina, para serem quantificadas através do software ImageJ. Os dados foram tabulados e submetidos ao teste estatístico ANOVA (dois critérios), com pós-teste de Bonferroni (=0,05), comparando os grupos em função dos marcadores, tempos experimentais e grupos testados. Os resultados obtidos na análise microscópica puderam identificar variações significativas entre os grupos estudados e o controle. Enquanto que no controle não foi verificado um grau de inflamação elevado, nos grupos testados foram observados destruição tecidual, aumento de número e tamanho de vasos, infiltrado inflamatório intenso, edema e início de epitelização até 168h. Na análise quantitativa, foi observado um pico celular em 72h para todos os marcadores (p<0,001). Todos os grupos testados apresentaram níveis celulares maiores que o grupo do soro fisiológico (p<0,001), exceto para o marcador de macrófagos (p>0,05). As associações das substâncias em comparação com as substâncias isoladas não apresentaram diferenças significantes (p>0,05), exceto em 72h no marcador CD4 e com hipoclorito de sódio a 2,5% (p<0,001). Estes resultados foram similares tanto para os grupos individuais bem como nas associações. Pode-se concluir, do ponto de vista biológico, que a associação entre o hipoclorito de sódio e a clorexidina mostraram resposta inflamatória semelhante as substâncias isoladas e que podem ser empregados na terapia endodôntica. / The association of endodontic irrigants sodium hypochlorite and chlorhexidine results in the formation of a brownish precipitate and its byproducts can be toxic to the periodontal tissue. The aim of this study was to evaluate qualitatively and quantitatively the inflammatory response of these drugs and their associations in the connective tissue on the back of the mouse. Four dorsal surgical wounds made by 08mm punch in twenty four male Wistar rats of 220 gr received 20 mL of each endodontic irrigants and were divided into grupos: saline solution, 2% chlorhexidine digluconate, 1% and 2,5% sodium hypochlorite, mixture of 10 ml of 1% sodium hypochlorite plus 10 ml of 2% chlorhexidine and mixture of 10 ml of 2,5% sodium hypochlorite plus 10 ml of 2% chlorhexidine. The test was performed in triplicate, the animals sacrificed at 0h (immediately), 24h, 72h and 168h and the fragments fixed, stained with hematoxylin and eosin for histomorphological analysis. To quantify cells, histological sections from 24, 72 and 168h groups were treated and immunostained by CD4, CD8 lymphocytes and Anti-pan macrophage antibodies. Three pictures were taken in a 400x magnification of each slide and quantified using the ImageJ software. Data was tabulated and submitted to ANOVA (two-way) with Bonferroni post-test (=0.05) comparing the markers, times and experimental groups. The results obtained in the microscopic analysis identified significant differences among the experimental and control groups. In control group there was not high degree of inflammation; in the experimental groups there were tissue destruction, number and size of vessels increased, intense inflammatory infiltration, edema and early epithelialization at 168h. In the quantitative analysis a peak of all cell markers was observed at 72h (p<0.001). All experimental groups showed higher cellular levels than the saline group (p<0.001) except for the macrophages marker groups (p>0.05). The associated or isolated use of the substances showed no significant differences (p> 0.05) except for 72h CD4 marker and with 2.5% sodium hypochlorite group (p<0.001). The results were similar for both individuals and associated groups. In conclusion the association between sodium hypochlorite and chlorhexidine showed inflammatory process similar to isolated substances and therefore it can be utilized in endodontic therapy.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a capacidade da solução de nanopartículas de prata, utilizada como irrigante e medicação intracanal, em controlar os microrganismos e neutralizar endotoxinas no canal radicular. Para isso, foram utilizadas 48 raízes de dentes humanos padronizadas em 16 mm e com diâmetro apical correspondente a uma lima tipo Kerr no. 30. Os canais foram contaminados por 28 dias com E. coli e por 21 dias com E. faecalis e C. albicans. Os espécimes foram divididos em quatro grupos (n=12), de acordo com a substância utilizada (solução irrigadora e medicação intracanal): G1) solução salina e solução salina (grupo controle); G2) hipoclorito de sódio 1% associado ao creme Endo-PTC e hidróxido de cálcio - protocolo tradicional da FOUSP; G3) solução de nanopartículas de prata 50 ppm e hidróxido de cálcio associado à solução de nanopartículas de prata; e G4) solução de nanopartículas de prata 50 ppm e solução de nanopartículas de prata 50 ppm. Foram realizadas cinco coletas do conteúdo do canal radicular para avaliar a atividade antimicrobiana: coleta de confirmação, imediatamente após a instrumentação (1ª. coleta) e outra após sete dias (2ª. coleta); imediatamente após a remoção da medicação (3ª. coleta) e outra após sete dias (4ª. coleta). A neutralização da endotoxina foi avaliada apenas nas quatro últimas coletas. Os resultados obtidos foram submetidos a análise estatística (Kruskall-Wallis e Dunn). Todas as soluções irrigadoras promoveram redução significativa dos microrganismos após a instrumentação (1ª. coleta) (p<0,05). Após 7 dias houve aumento do número de microrganismos em todos os grupos, voltando ao número inicial nos grupos instrumentados com solução salina e hipoclorito de sódio. Entretanto, apesar de ter ocorrido recolonização dos microrganismos no canal radicular dos espécimes instrumentados com solução de nanopartículas de prata, manteve-se redução estatisticamente significantemente do número de UFC/mL quando comparada à coleta de confirmação (p<0,05), demonstrando efeito residual. A medicação de hidróxido de cálcio eliminou 100% dos microrganismos e manteve os resultados após 7 dias (4ª. coleta) no grupo 2. No grupo quatro houve recolonização de E. faecalis e C. albicans após 7 dias de incubação. O hidróxido de cálcio foi a única substância avaliada que promoveu redução significativa (p<0,05) das endotoxinas. Assim, pôde-se concluir que o hipoclorito de sódio e a solução de NP-Ag reduziram significativamente a microbiota do canal, no entanto somente com a associação ao hidróxido de cálcio houve eliminação dos microrganismos em profundidade nos túbulos dentinários e redução das endotoxinas presentes no canal radicular. / The objective of this study was to evaluate the antimicrobial effect and endotoxin detoxified of solution of silver nanoparticles used as irrigating and dressing in root canals. Forty-eigth single-root human teeth were used. All root canals sized 16 mm and were enlarged to a Kerr file number .30. Root canals were infected for 28 days with E. coli and for 21 days with E. faecalis and C. albicans. The specimens were divided into four groups (n=12), according to the substance used (irrigating solution and dressing): G1) saline and saline (control), G2) sodium hypochlorite 1% with Endo-PTC cream and calcium hydroxide; G3) solution of Ag-NP 50 ppm and calcium hydroxide with Ag-NP; and G4) solution of Ag-NP 50 ppm and solution of Ag-NP 50 ppm. Five samplings of root canal were accomplished to evaluate the antimicrobial activity: confirmation sample, immediately after instrumentation (1st. Sample), and other after 7 days (2 nd. Sample), immediately after dressing removed (3 rd. Sample) and other after 7 days (4 th. Sample). The endotoxina detoxified was evaluated only in the last four samples by Limulus assay. Results were analysed by Kruskal-Wallis and Dunn. All irrigation solutions caused significant reduction of microorganisms after instrumentation (1 st. Collection) (p <0.05). After 7 days there was increase of the number of bacteria in all groups, returning to the initial number of microorganisms in the groups prepared with saline and sodium hypochlorite, however, the recolonization of microorganisms in root canals of groups of solution silver nanoparticles was smaller than the number of confirmation sample (p <0.05), showing residual effect. The calcium hydroxide eliminated 100% of the microorganisms and the results remained after 7 days (4 th. Collection) for group 2. In group 4 there was recolonization of E. faecalis and C. albicans after 7 days. Calcium hydroxide was the only substance that measured a significant reduction of endotoxin (p <0.05). Thus, we concluded that the sodium hypochlorite and the NP-Ag significantly reduced the microorganisms of the root canal, but it is necessary the combination of calcium hydroxide to eliminated all microorganisms into dentinal tubules and detoxified endotoxins in the root canal.

O objetivo deste estudo foi avaliar o comportamento da dentina radicular bovina frente a duas condições experimentais: a aplicação de soluções de hipoclorito de sódio nas concentrações de 0,5% e 2,5% sobre a superfície da luz radicular e a aplicação das mesmas substâncias seguida do cimento de fosfato de zinco, comparando a microdureza dentinária em duas distâncias em relação à luz do canal, nos terços radiculares. Foram utilizadas 30 raízes de incisivos superiores bovinos. Cada raiz foi seccionada em três posições: terço cervical (C), médio (M) e apical (A). Estas foram submetidas ao teste de microdureza Knoop ( KHN a 100g/15 seg) em duas distâncias, 100 ?m e 300 ?m em relação à luz radicular (momento I). Em seguida receberam um tipo de tratamento formando seis Grupos experimentais: 1A - hipoclorito de sódio a 0,5% , 1B – hipoclorito de sódio a 2,5%,1C – solução fisiológico, 2A – hipoclorito de sódio a 0,5% + fosfato de zinco, 2B – hipoclorito de sódio a 2,5% + fosfato de zinco e 2C – solução fisiológico + fosfato de zinco. Nos Grupos 1A, 1B e 1C após a aplicação das substâncias, as superfícies foram vedadas e decorrida uma semana um novo teste de microdureza Knoop (momento II) foi realizado. Os corpos-de-prova dos Grupos 2A, 2B e 2C receberam as soluções testadas por 60 segundos e em seguida a aplicação do cimento de fosfato de zinco, quando foram vedadas e após uma semana foram submetidos a novo teste de microdureza (momento II). Os corpos-de-prova do Grupo 2A, 2B e 2C foram observados ao MEV na região da interface cimento/dentina. Os resultados foram submetidos à análise de variância com medidas repetidas, pois cada dente foi avaliado em seis combinações entre posição (C, M e A) e distância (100 ?m e 300 ?m) e não apresentaram diferença estatisticamente significante (?=0,05) entre as combinações de posição, distância. Somente houve diferença significante (p=0,0000) quando os valores de KHN foram comparados em relação às distâncias 100 ?m e 300 ?m, sendo que a 300 ?m os valores foram maiores. Assim, os valores referentes aos 3 terços foram agrupados formando uma única média para cada distância. Pelo Teste-t pareado, as médias foram comparadas nos momentos I e II em cada distância e observou-se diferença estatisticamente significante (?=0,05) entre os grupos 1C e 2A (p=0,012 à 100 ?m, p=0,006 à 300 ?m; p=0,024 à 100 ?m e p=0,047 à 300 ?m, respectivamente). Para comparação do comportamento da dentina antes e depois dos tratamentos após uma semana, todas as médias do momento I foram juntadas num único grupo (grupo momento I). A análise de variância o grupo 1C apresentou diferença estatisticamente significante em relação ao grupo formado pelas médias de microdureza no momento I a 100 ?m e 300 ?m; 1B e 2B a 100 ?m e 1B, 2B e 2C a 300 ?m. Com isso, podemos concluir que a dentina radicular sem qualquer tratamento anti-séptico após uma semana apresenta seus valores de microdureza diminuídos de maneira significante em relação às medidas iniciais (I) e aos demais grupos experimentais. / The aim of this study was to evaluate the behavior of the bovine root-dentin under two experimental conditions: the application over the lumen surface with sodium hypochlorite solutions in concentrations of 0,5% and 2,5%, and the application of the same solutions after zinc phosphate cement was applied. The dentin microhardness was compared at two distances from the lumen, in the radicular thirds. In this study, 30 roots of bovine upper incisor were used. Each root was sectioned in the thirds: cervical (C), medium (M) and apical (A), and submitted to the Knoop microhardness test (KHN at 100g/15s) at two distances: 100 ?m and 300 ?m from lumen (I). After that, the species received one type of treatment determining six experimental groups: 1A – sodium hypochlorite 0,5%, 1B - sodium hypochlorite 2,5%, 2C – physiologic solution, 2A - sodium hypochlorite 0,5% + zinc phosphate, 2B - sodium hypochlorite 2,5% + zinc phosphate e 2C - physiologic solution+ zinc phosphate. In the Groups 1A, 1B and 1C after these solutions were applied, surfaces were sealed and one week later a new measure of microhardness (KHN) was taken (II). The Groups 2A, 2B and 2C received the tested solutions for 60 seconds following application of zinc phosphate cement, them they were sealed and after seven days a new measure was taken (II). The samples of Group 2A, 2B and 2C were observed on MEV micrographs in the cement/dentin interface. Analysis of variance with repeated measures, as each tooth was evaluated in six combinations of positions (C, M, A) and distances (100 ?m and 300 ?m), showed that there were no statistical (?=0,05) differences between combinations of position and distance. There was only significant difference (P=0,000) when KHN values were compared in relation to distances (100 and 300?m), and at 300 ?m higher values was found. The values from the thirds were grouped resulting in sole mean for each distance. Pared test-t was run to compare values I and II, in each distance significant difference was found in Group 1C and 2A (P=0,012 at 100, P=0,006 at 300; P=0,024 at 100 e P=0,047 at 300, respectively). To compare dentin behavior pre and post treatments after a week, all averages of values I were joined in a single group (group moment I). Under the Analysis of variance group 1C showed a significant difference in relation to the group formed by averages of microhardness in value I at 100 ?m and 300 ?m; 1B and 2B at 100 ?m and 1B, 2B and 2C at 300 ?m. Therefore, it can be concluded that root dentin with no anti-septic treatment after one week significantly shows decreased values of microhardness in relation to the initial measures (I) and to the others experimental groups.

O presente estudo in vitro objetivou avaliar a longo prazo o potencial antimicrobiano residual e a citotoxicidade de soluções químicas de limpeza de prótese quando incorporadas à resina acrílica termopolimerizável após sucessivos ciclos de imersão noturna diária. Discos (10mm x 1mm) de resina acrílica termopolimerizável para base de prótese (Lucitone 550) foram submetidos a três ciclos diários de desinfecção (8h/cada) em hipoclorito de sódio a 1% (NaClO), digluconato de clorexidina a 2% (CLX) ou água destilada (controle) durante 91 (T91) ou 183 dias (T183), simulando o período de 9 meses ou 1,5 ano de imersão noturna diária realizada pelo paciente. Inicialmente, foi utilizado o método de concentração inibitória mínima em caldo para determinar o possível efeito residual (incorporação) das soluções à resina acrílica. Metade dos discos imersos em cada agente de limpeza em um dos tempos de imersão (n=5) foi inoculada (1x107cels/mL) com um dos patógenos associados à estomatite protética: Candida albicans (Ca) e Staphylococcus aureus (Sa). Os discos foram incubados a 37oC para análise em espectrofotômetro após 24h, 7 e 14 dias. Os valores de absorbância foram convertidos em porcentagens de inibição microbiana. Confirmada a ação antimicrobiana residual dos agentes de limpeza incorporados à resina acrílica, foi então analisada sua citotoxicidade in vitro sobre fibroblastos gengivais humanos (L929). Os efeitos citotóxicos foram avaliados por meio do ensaio colorimétrico MTT [brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazólio] para a determinação da viabilidade celular, após as células serem expostas por 24h às amostras de cada condição experimentais (n=18) previamente imersas em uma das soluções por um dos períodos avaliados (T91 ou T183). A citotoxicidade foi determinada com base na atividade mitocondrial em relação a corpos de prova não submetidos à imersão nas soluções testadas. Os resultados do ensaio do MTT foram analisados estatisticamente por ANOVA-1 fator seguida pelo teste post-hoc de Tukey HSD (a=0,05). Para os períodos T91 e T183, não houve inibição microbiana com a imersão em água (controle) em até 14 dias de incubação. A CLX inibiu progressivamente o crescimento microbiano ao longo dos 14 dias para ambos os períodos de imersão (Ca: 19 a 73,58%; Sa: 0 a 87,08%), sendo observada maior ação antimicrobiana em T183. O NaClO apresentou discreta inibição microbiana apenas no período de 14 dias tanto em T91 (Ca: 0%; Sa: 2,70%) quanto em T183 (Ca: 8,50%; Sa: 15,08%). De acordo com os resultados do teste de MTT, as soluções químicas de limpeza testadas apresentaram uma redução significativa da viabilidade celular quando comparado às células controles propagadas apenas em meio de cultura (p<0,002). A CLX resultou na menor viabilidade celular em ambos os períodos de imersão (p<0,018). As amostras de resina acrílica imersas em água ou NaClO em T91 e T183 apresentaram viabilidade celular estatisticamente similar às amostras não imersas (p>0,05). Pode-se concluir que a CLX incorporada à resina acrílica para base de prótese apresentou um efeito antimicrobiano residual em ambos os períodos de imersão noturna, o que não foi observado com o NaClO. Por outro lado, a CLX residual resultou em efeito intensamente citotóxico aos fibroblastos gengivais humanos quando comparada ao NaClO e à agua destilada, que se apresentaram discretamente citotóxicos. Esses resultados sugerem precaução na seleção de agentes de limpeza para prótese como meio de prevenção e tratamento adjunto da estomatite protética, pois mesmo em concentrações baixas, recomendadas para imersão noturna, podem apresentar algum grau de toxicidade às mucosas de suporte protético. / This in vitro study aimed to evaluate the long-term residual antimicrobial activity and cytotoxicity of chemical denture cleansers incorporated into a heat-polymerized acrylic resin after successive cycles of daily overnight soaking. Discs (10mm x 1mm) were prepared from heat-polymerized acrylic resin (Lucitone 550) and submitted to three daily immersion (8h/each) in 1% sodium hypochlorite (NaClO), chlorhexidine digluconate 2% (CHX) or distilled water (control) for 91 days (T91) or 183 days (T183), simulating the period of 9 months or 1.5 year of nocturnal immersion performed by the patient. Initially, the method of minimum inhibitory concentration in broth was used to determine the possible residual effect (incorporation) of the acrylic resin solution. Half of the disks immersed in each cleaning agent for one of the period immersion (n=5) was inoculated (1x107cells/mL) with pathogens associated with denture stomatitis: Candida albicans (Ca) or Staphylococcys aureus (Sa). The disks were incubated at 37oC for analysis in a spectrophotometer after 24h, 7 and 14 days. The absorbance values were expressed as percentages of microbial inhibition. Confirmed the residual antimicrobial action of cleaning agents incorporated into the acrylic resin, its cytotoxicity was analyzed in vitro on human gingival fibroblasts (L929). Cytotoxic effects were evaluated by the colorimetric assay MTT [3- (4,5- dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl tetrazolium bromide] to determine cellular viability after the cells were exposed for 24h to the samples of each experimental condition (n=18) previously immersed in one of the solutions for the evaluation periods (T91 or T183). Cytotoxicity was determined based on mitochondrial activity compared to the specimens not subjected to immersion in the solutions. The MTT assay results were 1-way ANOVA followed by Tukey\'s HSD post-hoc test (a=0.05). For the periods T91 and T183, no microbial inhibition was observed with immersion in water (control) for up to 14 days of incubation. The CHX progressively inhibited microbial growth over the 14 days for both immersion times (Ca: 19 to 73.58%, Sa: 0 to 87.08%); with greater antimicrobial activity in T183. The NaClO showed a slight microbial inhibition only in the 14-day period in both T91 (Ca: 0%; Sa: 2.70%) and T183 (Ca: 8.50%; Sa: 15.08%). According to the results of the MTT assay, the chemical cleaning solutions tested showed a significant reduction in cell viability when compared to the control cells propagated in normal culture medium (p<0.002). The CHX resulted in the lowest cell viability in both immersion periods (p<0.018). The acrylic samples immersed in water or NaClO in T91 and T183 showed cell viability statistically similar to nonimmersed samples (p>0.05). CHX incorporated into the acrylic resin denture base had a residual antimicrobial effect on both immersion periods, which was not observed with NaClO. On the other hand, the residual CHX were severely cytotoxic to human gingival fibroblasts compared to NaClO and distilled water which were slightly cytotoxic. These results suggest caution in selecting denture cleaning agents as a method of prevention and adjunct treatment of denture stomatitis because even at low concentrations recommended for overnight immersion, they may exhibit some degree of toxicity to the denture bearing mucosa.

Orientador: Regina Maria Puppin-Rontani / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campina, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-12T09:08:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pascon_FernandaMiori_D.pdf: 20418378 bytes, checksum: 123cef34dc5e16d51cd9c6553ae586c5 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A utilização de substâncias químicas auxiliares, durante o tratamento endodôntico, pode alterar a composição química e as propriedades físicas da estrutura dentinária corono-radicular. Além disso, pode interferir no processo de união do material restaurador às estruturas dentinárias da câmara pulpar. Dessa maneira, pesquisas devem ser realizadas possibilitando a indicação de uma substância, que apresente o mínimo efeito nas propriedades mecânicas dentinárias, enquanto exerce o efeito de debridamento desejado. No intuito de facilitar a apresentação desta Tese, a mesma foi dividida em três capítulos, como descrito nas proposições seguintes. Capítulo 1: revisar sistematicamente a literatura a respeito dos efeitos da solução de hipoclorito de sódio nas propriedades mecânicas da dentina do canal radicular quando a mesma é utilizada durante o tratamento endodôntico. Capítulo 2: verificar os efeitos de diferentes substâncias químicas auxiliares (soro fisiológico, hipoclorito de sódio, clorexidina gel, peróxido de uréia - Endo-PTC® e EDTA) na microdureza (realizada por meio do teste de microdureza Vickers) e morfologia (realizada por meio de análise em Microscopia Eletrônica de Varredura) da dentina da câmara pulpar de dentes anteriores decíduos e permanentes. Capítulo 3: avaliar o efeito de substâncias químicas auxiliares (soro fisiológico, hipoclorito de sódio, clorexidina gel, peróxido de uréia - Endo-PTC® e EDTA) na rugosidade superficial da dentina da câmara pulpar de dentes decíduos e permanentes. Baseando-se na revisão de literatura pôde-se concluir que há forte evidência de que o hipoclorito de sódio altera as propriedades mecânicas da dentina radicular, quando o mesmo é utilizado como solução irrigadora durante o tratamento endodôntico. O uso de substâncias químicas auxiliares diminuiu os valores de microdureza dentinária Vickers tanto para dentes decíduos quanto para os permanentes. Observaram-se resultados não conclusivos com o uso do EDTA 17% na dentina da câmara pulpar dos dentes decíduos e permanentes uma vez que a microdureza superficial não pôde ser mensurada. A solução de hipoclorito de sódio 1% e 5,25% produziu os menores valores de microdureza Vickers para dentes decíduos e permanentes, comparados à clorexidina gel 2% e grupo controle (soro fisiológico). Alterações morfológicas foram observadas quando a dentina da câmara pulpar foi irrigada com solução de hipoclorito de sódio 1% ou 5,25% associados ao EDTA 17%, EDTA 17% utilizado isoladamente e clorexidina gel 2% associada ou não ao EDTA 17%. Em relação à rugosidade superficial pôde-se concluir que a irrigação da dentina da câmara pulpar aumentou a rugosidade superficial dos dentes permanentes e decíduos tratados com hipoclorito de sódio 1% e 5,25% associados ao EDTA 17%. / Abstract: Irrigation solutions, endodontic auxiliary chemical substance, and chelating agents used on root canal treatment might yield changes in the chemical composition and physical properties of dentin surface, and affect its interaction with materials used for coronal sealing. Thus, studies are required to select a suitable chemical agent, which has minimal effects on the mechanical properties of the tooth whilst achieving the desired debridement effect. In order to facilitate the accomplishment of this Thesis, it was divided into three chapters, as described on the following descriptions. Chapter 1: to present a systematic review on the effect of sodium hypochlorite on the mechanical properties of root canal dentin, considering its use as an irrigation solution. Chapter 2: to verify the effects of endodontic irrigants, auxiliaries chemicals substances and chelating agent on the microhardness (Vickers Hardness test) and morphology (Scanning Electron Microscopy) of the pulp chamber dentin in primary and permanent teeth. Chapter 3: to evaluate the effect of endodontic irrigants, auxiliaries chemicals substances and chelating agent on the roughness of the pulp chamber dentin of primary and permanent teeth. Based on literature review it could be concluded that there is strong evidence showing that sodium hypochlorite alters the mechanical properties of root canal dentin, when used as an endodontic irrigant. The use of irrigation solutions decreased the Vickers Hardness Number values for both permanent and primary teeth. Inconclusive results were observed when 17% EDTA was used, since it could not be measured. Sodium hypochlorite provides lower Vickers Hardness Number for primary and permanent teeth, compared with 2% chlorhexidine and control group (saline solution). Morphological alterations were observed when pulp chamber irrigation was performed by 1% or 5.25% sodium hypochlorite associated with 17% EDTA, 17% EDTA, and 2% chlorhexidine gel associated or no with 17% EDTA. Regarding surface roughness, it was concluded that pulp chamber irrigation with 1% and 5.25% sodium hypochlorite associated with 17% EDTA increases pulp chamber roughness of primary and permanent teeth. / Doutorado / Odontopediatria / Doutor em Odontologia

Submitted by Geandra Rodrigues (geandrar@gmail.com) on 2018-03-27T12:22:55Z No. of bitstreams: 0 / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2018-03-27T13:44:47Z (GMT) No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2018-03-27T13:44:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2018-01-09 / O hipoclorito de sódio (NaOCl) é a solução irrigadora mais comumente utilizada durante a terapia endodôntica. A atividade antimicrobiana e a capacidade de dissolver a matéria orgânica são características bem conhecidas desta solução. No entanto, pouco se conhece sobre os efeitos do NaOCl nas células-tronco mesenquimais humanas. As células-tronco de dentes decíduos humanos esfoliados (SHED) foram cultivadas e expostas a 0,04% de NaOCl durante 30, 60 e 300 segundos. A proliferação e viabilidade celular foram investigadas pelos ensaios de brometo de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazólio (MTT) e Trypan blue, respectivamente. O potencial de diferenciação foi investigado através da diferenciação osteogênica. A expressão dos marcadores de células-tronco foi avaliada por reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa (RT-PCR). Todos os ensaios foram realizados no 1º dia após o tratamento. Todos os testes mostraram uma redução no número de células viáveis com aumento do tempo de exposição ao NaOCl. Entretanto, não houve diferença entre os grupos em relação a mineralização. Quanto à RT-PCR, a expressão dos genes testados, β-actina, Nestin e CD105 foi significativamente menor. Os resultados mostraram que o longo período de exposição ao NaOCl tem efeitos prejudiciais na sobrevivência de SHEDs. / Sodium Hypochlorite (NaOCl) is the most common irrigation solution and widely used during root canal procedures. The antimicrobial activity and capacity to dissolve organic matter are well known features of this solution. However, there is little knowledge about the effects of NaOCl on human mesenchymal stem cells. Briefly, stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHED) were cultured and exposed to 0.04% NaOCl for 30, 60 and 300 seconds. We investigated cell proliferation and viability by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay and trypan blue dye, respectively. Differentiation potential was investigated through osteogenic differentiation. Stem cells markers expression was evaluated by reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). All the assays were performed at 1 day following treatment. All tests showed a reduction in the number of viable cells with increased exposure time to NaOCl. Interestingly, there was no difference between the groups in relation to mineralization. As for RT-PCR, the expression of the genes tested, β-actin, Nestin and CD105 was significantly lower. The data showed that long exposure period to NaOCl has detrimental effects on the survival of SHEDs.