A leucemia linfóide aguda de células T (LLA-T) é um tipo agressivo de câncer hematológico que surge a partir da transformação maligna de progenitores de células T. Apesar do progresso significativo no tratamento atual, os desafios concentram-se na morbidade após os regimes de quimioterapia convencionais e na sobrevida pós-recaída. Além disso, os pacientes com LLA-T apresentam pior prognóstico quando comparados àqueles com precursores de células B, consequentemente, novas abordagens terapêuticas ainda se fazem necessárias para aprimorar os resultados naquele subtipo. YM-155 é um derivado imidazólico originalmente classificado como supressor transcricional de survivina e tem demonstrado potente efeito antiproliferativo sobre uma grande variedade de tumores humanos, porém a atividade desse composto ainda é pouco explorada em linhagens de células T. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos de YM-155 no crescimento e morte celular em linhagens de LLA-T infantil. O presente estudo demonstrou que YM-155 exibiu atividade antiproliferativa e potente efeito indutor de apoptose nessas células, na qual a linhagem JURKAT mostrou ser mais sensível ao tratamento em relação a CCRF-CEM, apresentando o valor de CI50, respectivamente, 73,11 ± 7,65 nM e 2,17 ± 0,08 μM. Além disso, YM-155 diminuiu significativamente a capacidade de formação de colônias e induziu o bloqueio do ciclo celular da CCRF-CEM na fase S e, na linhagem JURKAT, diminuiu substancialmente a população em G2/M e aumentou a fração Sub-G1. No entanto, em ambas, não foi observada a inibição da expressão de survivina após tratamento com YM-155, assim como a inibição da expressão dos genes VEGF e Bcl-xL, o que sugere que esse composto, em linhagens LLA-T mutadas para TP53, esteja atuando de forma independe da inibição de survivina e do fator de transcrição SP-1. Conclui-se que YM-155 é eficaz na redução do crescimento e aumento de morte celular, portanto representa um agente antitumoral promissor em linhagens de leucemia linfóide aguda de células T. / T-cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL) is an aggressive hematological cancer that arises from the malignant transformation of T-cell progenitors. Despite the significant progress in current treatment, challenges remain the lifelong morbidity after present chemotherapy regimens and post-relapse survival. Additionally, patients with T-ALL have poor prognosis compared to those with B-cell precursor, consequently, novel therapeutic approaches are still needed to improve the outcome in this cohort. YM-155 is an imidazolium derivative originally discovered as supressant of survivin transcription and has potent antiproliferative effects on a variety of human cancer, but, YM-155 effect in T-ALL cell line is underexplored. Based on this information, the present study aimed to evaluate YM-155 effect on cell lines derived from pediatric T-ALL. The drug exhibited antiproliferative activity and induced apoptosis. JURKAT cells (IC50 value: was 73.11 ± 7.65 nM) was more sensitive to treatment than CCRF-CEM (IC50 value: 2.17 ± 0.08 uM). Moreover, YM- 155 decreased clonogenic capacity and affected cell cycle dynamic. In CCRF- CEM, the treatment induced S phase arrest and, in JURKAT cells, decreased G2/M population and increased sub-G1 fraction. However, in both cell line, inhibition of survivin expression was not observed after treatment with YM-155, as well as the inhibition of VEGF and Bcl-xL genes expression, suggesting that this compound, in p53-deficient T-ALL cell line, is acting independently of survivin and SP-1 transcription factor inhibition. This results reinforcing the likelihood of using YM-155 as a therapeutic approach to combat leukemia and increase knowledge about mechanisms in vitro.

Orientador: Adelino Vieira de Godoy Netto / Co-orientador: Antonio Eduardo Mauro / Banca: Isabele Rodrigues Nascimento / Banca: Victor Marcelo Deflon / Banca: Ana Maria da Costa Ferreira / Banca: Adriano Bof de Oliveira / Resumo: Nos últimos anos o interesse na obtenção de novos fármacos a base de metais vem aumentando consideravelmente. Desde a descoberta da atividade antitumoral da cisplatina na década de 60 inúmeros complexos de Pt(II) foram sintetizados, mas poucos chegaram aos testes clínicos. Por este motivo, o íon Pd(II) vem sendo usado sistematicamente no planejamento de novos compostos biologicamente ativos, pois apresenta a configuração eletrônica d8 e a mesma geometria quadrado planar dos compostos de platina, além de exibir outros modos de ação frente aos seus alvos biológicos. Neste trabalho foram sintetizados e caracterizados novos complexos de paládio(II) do tipo [PdX2(TAA)(PPh3)] e [PdX(L)(PPh3)]X [X = Cl-, Br-, I-, SCN-; TAA = tioacetamida; L = 4-metil-3-tiossemicarbazida (4-MeT) ou 4-fenil-3-tiossemicarbazida (4-PhT)]. Os complexos foram caracterizados pelas técnicas de IV, RMN, análise elementar e análise termogravimétrica. As estruturas moleculares dos complexos [PdI(4-MeT)(PPh3)]I (3), [Pd(SCN)(4-MeT)(PPh3)](SCN) (4) e [PdI(4-PhT)(PPh3)]I (7) foram determinadas via difração de raios X de monocristal, indicando um ambiente quadrático plano ao redor do metal, com seus sítios de coordenação ocupados pela trifenilfosfina, pela tiossemicarbazida coordenada de maneira bidentada e o I ou SCN. A citotoxicidade in vitro de todos os complexos foi avaliada pelo método do MTT, frente as culturas celulares de tumores murinos LM3 (adenocarcinoma mamário) e LP07 (adenocarcinoma pulmonar). Os compostos mais promissores tiveram sua capacidade de interação com o DNA investigada. Os resultados demostraram que o DNA não é o alvo principal, uma vez que os complexos só interagiram com a biomolécula em altas concentrações. Diante disto, outros possíveis alvos foram investigados. A capacidade dos complexos em inibir as enzimas topoisomerases foi avaliada pela técnica de eletroforese em gel de agarose e os dados mostraram que quase todos... / Abstract: In the last years the interest in obtaining new metal drugs has increased considerably. Since the discovery of the antitumor activity of cisplatin in the 60's, many Pt(II) complexes were synthesized, but only few reached the clinical trials. For this reason, the Pd(II) ion has been used systematically in the design of new biologically active compounds. Palladium complexes display the same electron configuration and square planar geometry of platinum compounds, furthermore these complexes can interact through different way towards pharmacological targets. In this work new palladium(II) complexes of the type [PdX2(TA)(PPh3)] and [PdX(L)(PPh3)]X [X = Cl-, Br-, I-, SCN-; TAA = thioacetamide , L = 4-methyl-3-thiosemicarbazide (4-MeT) or 4-phenyl-3-thiosemicarbazide (4-PhT)], were synthesized and characterized. All the compounds were characterized by infrared, nuclear magnetic resonance spectroscopy, elemental analysis and thermogravimetric analysis. The structures of three complexes [(PdI(4-MeT)(PPh3)]I, [Pd(SCN)(4-MeT)(PPh3)](SCN) and [(PdI(4-PhT)(PPh3)]I were determined by single crystal X-ray diffraction and was observerd a square planar environment around the metal center, with the coordination sites occupied by triphenylphosphine, the N,S-donors ligand and iodine atom or thiocyanate group. The in vitro cytotoxicity of the complexes were evaluated against the murine tumor cells LM3 (breast adenocarcinoma) and LP07 (lung adenocarcinoma). The most promising compounds were further evaluated by their ability to interact with a purine base and the DNA. The results showed that DNA is not the primary target of these compounds because they only interacted with this biomolecule at high concentrations. Thus, others potential targets were investigated . The capacity of the complexes to inhibit topoisomerase enzymes was evaluated by electrophoresis, and the data showed that almost all the compounds inhibit this enzyme at a concentration rage... / Doutor

Orientador: Reinaldo Marchetto / Banca: Saulo Santesso Garrido / Banca: Flávio Henrique da Silva / Banca: Clovis Ryuichi Nakaie / Banca: Hérida Regina Nunes Salgado / Resumo: YacG é uma pequena proteína membro da família dos zinc-fingers, descoberta em E. coli. Sua função biológica está ligada a inibição da atividade de DNA girase e ao metabolismo do stress em procariotos. YacG atua na inibição da atividade de DNA girase por um mecanismo bipartido, a região do domínio zinc-finger atua impedindo a ligação do DNA à subunidade B e a região c-terminal liga-se a subunidade A. Embora a literatura cite YacG como sendo um inibidor de DNA girase, nada foi observado a respeito da atividade de inibição de YacG de E.coli e de outras linhagens de micro-organismos frente a outras DNA topoisomerases e não foi realizado nenhum trabalho envolvendo fragmentos peptídicos desta proteína, e tampouco ensaios de inibição do crescimento celular por estes. Sendo assim YacG de Klebsiella pneumoniae foi obtida por expressão heteróloga e uma série de peptídeos derivados desta foram sintetizados pelo método de fase sólida. Os peptídeo sintéticos foram projetados de forma a manter a região zinc-finger nativa (YacGAG1), substituídos os resíduos de cisteína por serina (YacGAG4), alanina (YacGAG5), histidina (YacGAG6 e YacGAG8) e também sintetizada a sua região c-terminal (YacGAG7). Os ensaios de inibição da atividade de DNA girase pelos peptídeos sintéticos e proteína, mostraram que YacG, YacGAG4, YacGAG5 e YacGAG7 conseguem inibir a atividade desta enzima, ao contrario do fragmento nativo YacGAG1. Por outro lado YacGAG1 conseguiu inibir a atividade de Topoisomerase IIα humana juntamente com os demais peptídeos YacGAG4, YacGAG5 e YacGAG7 e proteína YacG. Os ensaios aqui apresentados corroboram com os dados apresentados na literatura onde a região c-terminal por si só é capaz de inibir a atividade de DNA girase. Os ensaios de anisotropia de fluorescência demonstraram que a interação dos peptídicos sintéticos com DNA girase se dá pela interação destes com... / Abstract: YacG belongs to zinc-finger's protein family discovered in E. coli. Its biological function is connected to the catalytic inhibition of DNA gyrase and stress metabolism in prokaryotes. This protein inhibits DNA gyrase (gyrase) through a bipartite mechanism where the zinc-finger domain prevents the DNA ligation to the B subunit (GyrB) and the C-terminal bindings to the A subunit (GyrA). Although it is classified as a gyrase inhibitor neither the inhibition activity of YacG from E. coli and other microorganisms against other DNA topoisomerases nor the biological activity of fragments in cellular assays has been evaluated until present. In this study, YacG from Klebsiella pneumoniae was obtained by heterologous expression and derivative peptides from this protein were synthesized by the solid-phase method. The synthetic peptides were designed to keep the native region of zinc-finger (YacGAG1), to substitute cysteines to serines (YacGAG4), to alanine (YacGAG5), to histidine (YacGAG6 and YacGAG8) and also having only the C-terminal region (YacGAG7). The inhibition assays of gyrase by the peptides and the native protein revealed that YacG, YacGAG4, YacGAG4 e YacGAG7 inhibited this enzyme and the human topoisomerase IIα (htopoIIα). However, the same was not observed for the native fragment YacGAG1, which inhibited only the htopoIIα. The results are in agreement with literature showing that solely the C-terminal region is able to inhibit the gyrase. The assays of fluorescence anisotropy indicated that these synthetic peptides interact with GyrA. Besides inhibiting the gyrase and the htopoIIα, these peptides also revealed bacteriostatic activity against gram-negative and gram-positive bacteria. A computational study by applying a molecular dynamics protocol highlighted the importance of residues I47, R46 and W40 from YacG in the process of molecular recognition and interaction with GyrB. The results... / Doutor

Orientador: Cleslei Fernando Zanelli / Co-orientador: Sandro Roberto Valentini / Banca: Alexandra Ivo de Medeiros / Banca: Valéria Valete / Banca: Rafael Victorio Carvalho Guido / Banca: Érico Tosoni Costa / Resumo: eIF5A é a única proteína conhecida que contém o resíduo do aminoácido incomum hipusina (hidroxiputrescina-lisina). Este resíduo de hipusina é essencial para a função de eIF5A e é formado pela modificação de um resíduo específico de lisina em uma reação póstraducional, dependente da poliamina espermidina. A modificação no resíduo de lisina para a formação da hipusina é chamada de hipusinação, que ocorre em duas etapas: primeiramente, a enzima desoxi-hipusina sintase (DHPS) transfere o radical 4-aminobutil proveniente da espermidina para um resíduo específico de lisina em eIF5A (posição 50 em mamíferos); em seguida, este é hidroxilado pela desoxi-hipusina hidroxilase (DOHH). Muitos autores têm demonstrado que a inibição da hipusinação pelo inibidor de DHPS GC7 ou o silenciamento de eIF5A leva à inibição da proliferação celular em vários tipos de células de mamíferos, incluindo linhagens tumorais, e também induzem um efeito anti-inflamatório, evidenciado em modelo murino de diabetes e sepse. Este trabalho buscou utilizar a linhagem transformada de macrófagos RAW 264.7 para entender melhor os mecanismos pelos quais GC7 possui sua atividade. De forma complementar, foi também testado o efeito de GC7 em macrófagos de cultura primária e também em ratos. Como esperado, demonstramos aqui que GC7 inibe de maneira importante a hipusinação em linhagem RAW 264.7 e que, no entanto, este tratamento com GC7 não compromete a viabilidade celular nem altera significativamente o proteoma de células RAW 264.7. Por outro lado, GC7 inibe a produção e liberação da citocina pró-inflamatória TNF-α sem alterar os níveis de mRNA desta citocina, indicando uma modulação pós-transcricional, mais provavelmente no nível traducional, dada a função de eIF5A no processo de síntese proteica. De forma bastante interessante, este efeito de inibição na liberação de TNF-α... / Abstract: eIF5A is the only known protein containing the unusual amino acid residue hypusine (hydroxiputrescine-lysine). This hypusine residue is essential for eIF5A function and it is formed by modifying a specific lysine residue in a posttranslational reaction dependent on the polyamine spermidine. The modification of the lysine residue for the formation of hypusine is called hypusination, which occurs in two steps: first, the enzyme deoxyhypusine-synthase (DHPS) transfers the 4-aminobutyl moiety from spermidine to a specific lysine residue in eIF5A (position 50 in mammals); then it is hydroxylated by deoxyhypusine-hydroxylase (DOHH). Many authors have demonstrated that inhibition of hypusination by the DHPS inhibitor GC7 or silencing eIF5A leads to inhibition of cell proliferation in several types of mammalian cells, including tumor cell lines, and also induce an anti-inflammatory effect, as evidenced in a murine model of diabetes and sepsis. This study aimed to use the macrophage cell line RAW 264.7 to better understand the mechanisms by which GC7 has its activity. Complementarily, its was also tested the effect of GC7 in primary culture of macrophages and in rats. As expected, we show here that GC7 inhibits hypusination in RAW 264.7 cells and, on the other hand, this treatment with GC7 does not compromise cell viability nor significantly alter the proteome of RAW 264.7 cells. Moreover, GC7 inhibits the production and release of TNF-α without affecting mRNA levels of this cytokine, indicating a posttranscriptional modulation, most probably at the translational level, given the eIF5A function in the process of protein synthesis. Interestingly, this inhibitory effect on TNF-α release was also observed in primary cultures of macrophages and in vivo in rats. It was also examined the GC7 ability to inhibit cell proliferation of RAW 264.7 cells, which occurs prior to the S phase of the cell cycle and does not... / Doutor

Orientador: Cleslei Fernando Zanelli / Coorientadora: Tatiana Maria de Souza Moreira / Banca: Alexandra Ivo de Mendeiros / Banca: Geisiany Maria de Queiroz-Fernandes / Resumo: O fator de tradução de eucariotos eIF5A é descrito como a única proteína que apresenta o aminoácido hipusina, o qual é gerado por uma modificação pós-traducional essencial para a proliferação celular em todos os eucariotos estudados até o momento, sendo que a enzima desoxi-hipusina sintase (DHPS) é responsável pela primeira etapa da formação desse aminoácido em eIF5A. Portanto, a inibição de DHPS também impede a modificação de eIF5A, tornando esta proteína não funcional, o que pode ter aplicação no tratamento dos tipos de câncer em que o fator está envolvido. Embora N1-guanil-1,7-diamino-heptano (GC7) seja potente inibidor da enzima DHPS, foram observados outros efeitos na célula devido à atuação do composto em alvos não específicos. Desta forma, o presente trabalho tem como objetivo a busca por novos inibidores de DHPS, com baixa citotoxicidade e que reduzam a proliferação celular ou que inibam o crescimento de micro-organismos eucarióticos patogênicos, como algumas espécies de fungos. Primeiramente, foi avaliada a citotoxicidade de diferentes compostos com núcleo guanidínico frente a macrófagos murinos. Entre os compostos testados, aqueles que apresentaram menor citotoxicidade foram o composto GC7 e os compostos de núcleo guanidínico com um grupo fenil substituído em para por uma metila e outro por um flúor. A partir deste resultado, os compostos foram submetidos à avaliação de sua atividade antiproliferativa frente às mesmas células. GC7 promoveu inibição da proliferação c... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Eukaryotic translation factor eIF5A is described as the only protein that presents the amino acid hypusine that is generated by a post-translational modification, which is essential for cell proliferation in all the eukaryotes studied to date. The enzyme deoxyhypusine synthase (DHPS) is responsible for the first stage of formation of this amino acid in eIF5A. Therefore, the inhibition of DHPS also prevents the modification of the eIF5A, making this protein non-functional, which may have application in the treatment of cancer kinds in which this factor is involved. Although N1-guanyl-1,7-diaminoheptane (GC7) is a strong inhibitor of the DHPS enzyme, other effects on the cell were observed due to the acting of the compound on non-specific targets. Thus, the present work aims to search for new DHPS inhibitors, with low cytotoxicity and able to reduce cell proliferation or inhibit the growth of pathogenic eukaryotic microorganisms such as some fungal species. Firstly, the cytotoxicity of different compounds with guanidinic nucleus against murine macrophages was evaluated. Among the compounds tested, those that showed the lowest cytotoxicity were the GC7 compound and the guanidine core compounds with a phenyl group substituted in para for one methyl and another with fluorine. From these data, the antiproliferative activity of the compounds towards the same cells was evaluated. GC7 promoted inhibition of proliferation as already described in the literature, but the compounds tested... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientadora: Dulce Helena Siqueira Silva / Banca: Cintia Duarte de Freitas Milagre / Banca: Mariana Helena Chaves / Resumo: Sabe-se que os fungos exercem importantes papéis no cotidiano, sendo utilizados na produção de alimentos fermentados e de enzimas de interesse industrial, em processos de biodegradação e tratamento biológico de efluentes, além de auxiliar na agricultura como parte do corpo de decompositores, e ainda na defesa e crescimento de plantas em que vivem em simbiose. Adicionalmente, nos últimos anos, as pesquisas com fungos e outros micro-organismos têm-se intensificado pelo surgimento de evidências crescentes de seu potencial como fonte de substâncias bioativas para o desenvolvimento de agentes terapêuticos, como as penicilinas e cefalosporinas - antibióticos, a mevastatina e lovastatina - redutores de colesterol, ciclosporina e rapamicina-imunossupressores, entre outros. Muitos fungos endofíticos possuem potencial farmacológico, demonstrando atividades como citotóxica, antibacteriana, anticolinesterásica, antifúngica, antiplasmódica, entre outras. Além de indicarem ser fonte de uma grande variedade de novos metabólitos secundários, decorrente de sua quimiodiversidade marcante. Este contexto levou à investigação de uma linhagem fúngica isolada da alga marinha Asparagopsis taxiformis (Delile) Trevisan, identificada como Microascus intricatus. O cultivo desta linhagem em meio PDB por 28 dias, 65 frascos de Erlenmeyer forneceu o extrato AT-07, que foi submetido a partição com acetato de etila. As frações AT-07 F3, AT-07 F4 e AT-07 F6 foram submetidas a procedimentos cromatográficos e l... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Fungi play important roles in our daily life as in the production of fermented food and enzymes for industrial applications, biodegradation processes and biological treatment of effluents, in addition to its roles in agriculture, enhancing decomposition, and defense and growth of plants living in symbiosis.Research involving fungi and other microorganisms has been intensified in the last decades owing to growing evidence of their potential as important sources of novel bioactive compounds for the development of therapeutic agents as penicillins, cephalosporins (antibiotics), mevastatin and lovastatin (cholesterol lowering agents), cyclosporine and rapamycin (immunosuppressors), among others.Several endophytic fungal strains exhibit pharmacological potential as cytotoxic, antibacterial, anticholinesterase antifungal, antiplasmodial activities, which has been markedly associated to the huge chemodiversity of their secondary metabolites.Such context prompted us to investigate one fungal strain isolated from marine red alga Asparagopsis taxiformis (Delile) Trevisan, which has been identified as Microascus intricatus.Cultivation of the fungal strain in PDB media for 28 days, Erlenmeyr flasks yielded extract AT-07 partition with etoac extract which was submitted to chromatographic procedures and led to the isolation of natural products belonging to diketopiperazines classes and one isoflavone.The isolated compounds were identified as cyclo-(Pro-Tir), cyclo-(ProPhe), cyclo-(Phe-Phe)... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-12-06Bitstream added on 2014-08-13T18:01:04Z : No. of bitstreams: 1 000747336_20141206.pdf: 1912597 bytes, checksum: 84c5cc72a9058e08a4f2c5b561a0faa3 (MD5) / Nos últimos anos o interesse na obtenção de novos fármacos a base de metais vem aumentando consideravelmente. Desde a descoberta da atividade antitumoral da cisplatina na década de 60 inúmeros complexos de Pt(II) foram sintetizados, mas poucos chegaram aos testes clínicos. Por este motivo, o íon Pd(II) vem sendo usado sistematicamente no planejamento de novos compostos biologicamente ativos, pois apresenta a configuração eletrônica d8 e a mesma geometria quadrado planar dos compostos de platina, além de exibir outros modos de ação frente aos seus alvos biológicos. Neste trabalho foram sintetizados e caracterizados novos complexos de paládio(II) do tipo [PdX2(TAA)(PPh3)] e [PdX(L)(PPh3)]X [X = Cl-, Br-, I-, SCN-; TAA = tioacetamida; L = 4-metil-3-tiossemicarbazida (4-MeT) ou 4-fenil-3-tiossemicarbazida (4-PhT)]. Os complexos foram caracterizados pelas técnicas de IV, RMN, análise elementar e análise termogravimétrica. As estruturas moleculares dos complexos [PdI(4-MeT)(PPh3)]I (3), [Pd(SCN)(4-MeT)(PPh3)](SCN) (4) e [PdI(4-PhT)(PPh3)]I (7) foram determinadas via difração de raios X de monocristal, indicando um ambiente quadrático plano ao redor do metal, com seus sítios de coordenação ocupados pela trifenilfosfina, pela tiossemicarbazida coordenada de maneira bidentada e o I ou SCN. A citotoxicidade in vitro de todos os complexos foi avaliada pelo método do MTT, frente as culturas celulares de tumores murinos LM3 (adenocarcinoma mamário) e LP07 (adenocarcinoma pulmonar). Os compostos mais promissores tiveram sua capacidade de interação com o DNA investigada. Os resultados demostraram que o DNA não é o alvo principal, uma vez que os complexos só interagiram com a biomolécula em altas concentrações. Diante disto, outros possíveis alvos foram investigados. A capacidade dos complexos em inibir as enzimas topoisomerases foi avaliada pela técnica de eletroforese em gel de agarose e os dados mostraram que quase todos... / In the last years the interest in obtaining new metal drugs has increased considerably. Since the discovery of the antitumor activity of cisplatin in the 60's, many Pt(II) complexes were synthesized, but only few reached the clinical trials. For this reason, the Pd(II) ion has been used systematically in the design of new biologically active compounds. Palladium complexes display the same electron configuration and square planar geometry of platinum compounds, furthermore these complexes can interact through different way towards pharmacological targets. In this work new palladium(II) complexes of the type [PdX2(TA)(PPh3)] and [PdX(L)(PPh3)]X [X = Cl-, Br-, I-, SCN-; TAA = thioacetamide , L = 4-methyl-3-thiosemicarbazide (4-MeT) or 4-phenyl-3-thiosemicarbazide (4-PhT)], were synthesized and characterized. All the compounds were characterized by infrared, nuclear magnetic resonance spectroscopy, elemental analysis and thermogravimetric analysis. The structures of three complexes [(PdI(4-MeT)(PPh3)]I, [Pd(SCN)(4-MeT)(PPh3)](SCN) and [(PdI(4-PhT)(PPh3)]I were determined by single crystal X-ray diffraction and was observerd a square planar environment around the metal center, with the coordination sites occupied by triphenylphosphine, the N,S-donors ligand and iodine atom or thiocyanate group. The in vitro cytotoxicity of the complexes were evaluated against the murine tumor cells LM3 (breast adenocarcinoma) and LP07 (lung adenocarcinoma). The most promising compounds were further evaluated by their ability to interact with a purine base and the DNA. The results showed that DNA is not the primary target of these compounds because they only interacted with this biomolecule at high concentrations. Thus, others potential targets were investigated . The capacity of the complexes to inhibit topoisomerase enzymes was evaluated by electrophoresis, and the data showed that almost all the compounds inhibit this enzyme at a concentration rage...

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:05:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004 / A angiotensina II (AngII), produto final da cascata bioquímica do sistema renina angiotensina (SRA), é formada sob a ação da enzima conversora de angiotensina (ECA). No coração, a Ang II pode atuar na gênese da hipertrofia cardíaca (HC) tanto em situações fisiológicas quanto patológicas. Além disso, o SRA parece estar associado às adaptações cardiovasculares e metabólicas ao treinamento físico (TF). No presente estudo, camundongos geneticamente modificados contendo 1 a 4 cópias do gene a ECA foram submetidos ao TF com natação (2 sessões de 1,5h, 5 dias/semana durante 4 semanas) ou mantidos sedentários (S), com a finalidade de avaliar in vivo o efeito do genótipo da ECA para a magnitude de desenvolvimento da HC. O TF melhorou a capacidade de realização, de exercício físico, reduziu a freqüência cardíaca de repouso elevou a atividade da citrato sintase (CS) (T1: 12.8 e 41.8 por cento, T2: 12.3 e 34.4 por cento, T3: 14. e 51.8 por cento, T4: 14.3 e 26.2 por cento), enquanto a concentração de lactato sangüíneo e pressão arterial sistólica permaneceram inalteradas. O aumento da razão número de capilares/fibras foi observado apenas nos treinados com 3 e 4 cópias (21 por cento e 28 por cento, respectivamente). O peso de ventrículo esquerdo e diâmetro de miócitos aumentaram significativamente em todos os treinados comparados com os respectivos grupos sedentários (TI: 12.6 e 17.9 por cento, T2: 15.2 e 13.8 por cento, T3: 16.9 e 20 por cento , T4: 17 e 19 por cento). Entretanto, a HC foi semelhante entre os grupos e somente a resposta metabólica muscular foi genótipo dependente, onde a maior atividade da CS foi associada à menor dosagem de ECA muscular (mECA). A atividade da renina plasmática (ARP) foi maior no grupo sedentário com 1 cópia comparado com os grupos S3 e S4 (4.89±0.5 versus 2.43±0.6 e 2.12±01.1 ng.ml-1. AngI, respectivamente) enquanto a ECA cardíaca (CECA) foi maior no grupo S3 comparado com S 1 e S2 (5946±590.8 versus 2951.5±328.3 e 3504.1±258.9 uF.min-1.ml-1, respectivamente). Já a mECA, foi maior nos grupos sedentários com 3 e 4 cópias comparados com o grupo S1 (11.42±2.8 e 10.85±2, respectivamente versus 4.61±2.9 uF.min-1.ml-1). Após o TF, ARP e mECA permaneceram inalteradas. CECA e angiotensina II foram semelhantes nos grupos treinados. Desta forma, observamos que os animais treinados apresentaram adaptações aeróbias ao TF com natação, especialmente HC em igual magnitude. Contrário aos modelos patológicos de HC, nossos resultados indicaram que o genótipo da ECA não influenciou a magnitude de HC fisiológica em camundongos treinados com natação. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. / Made available in DSpace on 2012-10-18T00:22:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T18:03:06Z : No. of bitstreams: 1 170966.pdf: 2860510 bytes, checksum: f684509f14267a0919dd3c1ac1dbf1eb (MD5) / Investigação dos efeitos da quercetina (30 mg/Kg v.o.) no extravasamento plasmático induzido pela substância P (10 nmol/Kg i.v.) em diversos tecidos do sistema nervoso central (cerebelo, bulbo olfatório e córtex) e dura-máter de ratos além dos efeitos da inibição da endopeptidase neutra pelo fosforamidon (2,5 µg/Kg i.v.) e da enzima conversora da angiotensina pelo captopril (10 nmol/Kg i.v.) nos mesmos tecidos. A substância P aumentou o extravasamento plasmático de modo dose relacionada na dura-máter, não alterando os outros tecidos. A inibição farmacológica seletiva da endopeptidase neutra e da enzima conversora da angiotensina com fosforamidon e captopril respectivamente aumentaram o extravasamento plasmático induzido pela substância P na dura-máter de ratos. O pré-tratamento isolado com quercetina (30mg/Kg, v.o) aumentou o extravasamento plasmático em relação ao controle em todos os tecidos quando administrada isoladamente e potencializou o extravasamento plasmático induzido pela substância P na dura-máter, tecido onde há inervação peptidérgica o que coincide com a modulação da endopeptidase neutra e da enzima conversora da angiotensina.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciencias Biologicas / Made available in DSpace on 2012-10-17T09:45:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-09T01:08:59Z : No. of bitstreams: 1 149228.pdf: 2011337 bytes, checksum: af54d03742f9ae8eb7d443c2580dfe7f (MD5) / Análise da influência do receptor GABAB no desenvolvimento da tolerância rápida ao etanol em camundongos, no teste do rota-rod. Os animais foram treinados diariamente, durante cinco dias, no aparelho do rota-rod, até que atingissem linha de base mínima para serem selecionados para os testes. No dia dos testes, a velocidade de queda (rpm/min) do animal, do eixo giratório do aparelho, foi registrada antes da administração de drogas, e comparada àquela registrada durante os experimentos. Foram estudados os efeitos do tratamento prévio com três drogas: o (-baclofeno, agonista GABAB; o CGP36742 e o CGP56433, antagonistas GABAB. O (-)baclofeno impediu o desenvolvimento da tolerância rápida de forma dependente da dose, mas os resultados com doses mais elevadas foram prejudicados pelos efeitos miorrelaxantes da droga. Tanto o CGP36742 quanto o CGP56433 facilitaram o desenvolvimento da tolerância rápida de forma dose-dependente. No entanto, a administração posterior de (-) baclofeno impediu total ou parcialmente essa facilitação pelo CGP36742, e não impediu os efeitos do CGP56433 na maioria das doses testadas. Finalmente, uma possível interação farmacocinética, entre as drogas utilizadas no estudo e o etanoi foi excluída através da dosagem da alcoolemia, que não revelou diferenças estatisticamente significantes entre as amostras encaminhadas para análise. Em conclusão, os resultados desse estudo sugerem o envolvimento do receptor GABAB no desenvolvimento da tolerância rápida aos efeitos do etanol. Sugere-se que este desenvolvimento tenha ocorrido, possivelmente, através da menor ou maior modulação do complexo NMDA, levando à inibição ou à facilitação de mecanismos ligados aos processos de aprendizagem e memória. receptor GABAB tolerância etanol (-)baclofeno CGP36742 CGP56433 NMDA aprendizagem memória.