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Influência do período de molhamento, temperatura e concentração de inóculo de Pyricularia grisea na ocorrência da brusone em plântulas de trigo / Influence of period of foliar wetness, temperature and concentration of Pyricularia grisea on the occurrence of blast in wheat seedlingsStorani, Waleska Del Pietro 26 June 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-06-26 / Financiadora de Estudos e Projetos / Blast disease, caused by Magnaporthe grisea (anamorph Pyricularia grisea), is one of the main diseases of wheat and is disseminated throughout main producing states of the Country. It has been causing significant yield loss and is a limiting factor for the crop s expansion in central Brazil where the weather is highly favorable. The use of resistant cultivars can be influenced by weather conditions and concentration of inoculum. Chapter 1 of the present dissertation describes the influence of period of foliar wetness on the occurrence of blast in wheat seedlings in two experiments. The first one employed cultivars BH1146 (resistant) and BR40 (susceptible) inoculated with the Pyricularia isolate PR06- 03. In the second assay, the cultivars were BR18 (resistant) and Anahuac (susceptible) inoculated with the fungal isolate PR01-23. Five treatments were the period of wetness (6, 10, 14, 18 and 24h) in ten replications. Analysis was performed using a completely randomized design with a factorial plan of the treatments (five foliar wetness periods and 2 cultivars). Results showed that the minimum period needed for the development of the disease was 10 hours when inoculated with the isolate PR06-03. The longer the foliar wetness period the higher the incidence and severity of the disease regardless the resistance of cultivars. Chapter 2 aimed to determine the influence of the weather and concentration of P. grisea on the incidence and severity of blast. The experiment used totally randomized design with a factorial plan of the treatments: four concentrations (10³, 104, 105, 106 spores/ml) and two cultivars, ten repetitions. The wheat cultivars were BR18 (resistant) and Anahuac (susceptible) which were inoculated with 50ml of P. grisea suspension (isolate PR06-03) at the concentrations 10³, 104, 105, 106 spores/ml. The seedlings were submitted to temperatures of 22ºC and 28ºC for 18 hours of foliar wetness. The results showed that at 22ºC higher disease severity occurred on susceptible cultivar whereas the disease was the same for both cultivars at 28ºC. The resistant cultivar reacted like a susceptible when submitted to high temperature and high concentration of pathogen. / A brusone é uma das principais doenças do trigo e está disseminada nos principais estados produtores do país, causando danos significativos e sendo fator limitante para a expansão da cultura no Brasil central, principalmente por ser uma doença altamente influenciada pelo clima. Seu controle através de cultivares resistentes pode ser influenciado pelas condições climáticas e pela concentração de inóculo na lavoura. O Capítulo 1 desta dissertação descreve a influência do período de molhamento foliar na ocorrência da brusone, em plântulas de trigo, em dois experimentos. O primeiro com o isolado do fungo Pyricularia grisea (PR01-23) e duas cultivares de trigo no estádio de plântula, com reação diferenciada ao isolado (Anahuac suscetível e BR18 resistente) e o segundo com o isolado do fungo (PR06-03) e duas cultivares de trigo no estádio de plântula (BR40 suscetível e BH1146 resistente). Foram empregadas dez repetições de cinco tratamentos com os diferentes períodos de molhamento foliar (6, 10, 14, 18 e 24h). Avaliou-se a incidência e a severidade da brusone em porcentagem. A análise foi feita através de um delineamento estatístico inteiramente casualizado, com um esquema fatorial dos tratamentos (cinco períodos de molhamento e duas cultivares). Os resultados mostraram que o tempo mínimo requerido para o aparecimento da doença nas plântulas foi de 10 horas, quando inoculadas com o isolado PR01-23 e de 14 horas, quando inoculadas com o isolado PR06-03. Quanto maior o período de molhamento foliar, maior a incidência e a severidade da doença, independente da resistência da cultivar. O Capítulo 2 teve como objetivo determinar a influência da temperatura e concentração de inóculo de Pyricularia grisea na incidência e na severidade da brusone. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, com um esquema fatorial dos tratamentos: quatro concentrações de inóculo (10³, 104, 105 e 106 esporos/mL) e duas cultivares, dez repetições. Utilizou-se duas cultivares de trigo no estádio de plântula (BR18 resistente e Anahuac suscetível) que foram inoculadas com 50 mL de suspensão de P. grisea (isolado PR06-03) nas concentrações 10³, 104, 105 e 106 esporos/mL. As plantas foram submetidas às temperaturas de 22ºC e 28ºC por 18 horas de molhamento foliar. Avaliou-se a incidência e a severidade da brusone em porcentagem. Os resultados obtidos mostraram que à 22ºC a severidade foi maior na cultivar suscetível e igual para as cultivares a 28ºC. A cultivar resistente se comportou de forma semelhante a suscetível, quando submetida à alta temperatura e altas concentrações de inóculo.
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Degradação de fenantreno em latossolo: efeito da concentração do contaminante e da adição de surfactina / Phenanthrene s degradation in latosol: effect of contaminant s concentration and the addition of surfactinMorais, Daniel Kumazawa 26 July 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-07-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAH) consist exclusively of carbon and hydrogen atoms arranged in a linear, angular or clustered. Several PAH suffer enzymatic activation and tend to bind to DNA, causing mutations and replication errors. Many of these molecules are known to be toxic, mutagenic and carcinogenic. The PAH are recalcitrant compounds due to its low water solubility and high sorption to soil. The use of biosurfactants has been an option usually effective for removing hydrophobic organic contaminants in complex matrices such as soil. The surfactin is a lipopeptide synthesized by Bacillus subtilis and highly effective in reduction of tension between water and hydrophobiccompounds.Unlike of an exhaustive extraction, the biosurfactants act by increasing the bioavailability of the contaminant and facilitates its degradation.In this work the experiment of phenanthrene biodegradation was conducted in clayed soils contaminated with 14C-phenanthrene and 4 12C-phenanthrene concentrations (1, 10, 40 and 100 mg g-1). Biodegradation was evaluated with the addition of supplements: surfactin (0.825 mg g-1), yeast extract (1.0 mg g-1) and an inoculum (30 mg g-1) obtained from the addition of diesel to a compost made of the municipal solid waste, for enrichment of microorganisms degraders of hydrocarbons. The flasks were kept at 35 °C for
49 days. The 14CO2 produced was captured in scintillation vials containing 2 ml of KOH (1 mol L-1). The bottles were changed on days 8, 18, 25, 32, 37, 44 and 49. After replacing the vials on the thirtieth-second day, was made a second application of surfactin (0.230 mg g-1) in all treatments. The highest degradation activity was achieved in the first 8 days of incubation, only treatments that received the inoculum. After the eighth day until the new surfactin supplementation (32 days), increased activity was not significant in any of the treatments. The activity increased again after the addition of surfactin further, but at a lower rate than achieved in the first 8 days. This result was attributed to the lower concentration of surfactin and the effects of adsorption of phenanthrene to the soil. The degradation activity in samples with the highest concentration of phenanthrene (100 mg g-1) did not differ in the treatments with and without surfactin. This result suggests that the concentration of bioavailable phenanthrene on this dose remained high enough to sustain the activity of degradation. Supplementation with yeast extract resulted in a lower degradation activity in treatments with 10, 40 and 100 mg g-1 of phenanthrene. In the treatments with the lowest dose of phenanthrene (1 mg g-1), yeast extract stimulated the degradation of the contaminant. It is concluded that supplementation with yeast extract stimulated the degradation of surfactin, which resulted in reducing the degradation of phenanthrene in higher concentrations of the contaminant. The results of the work indicate that the bioremediation of soils contaminated with PAH requires the maintenance of solubilizing agents such as surfactin. Due to the rapid degradation of biosurfactant on the ground, it is suggested that the best strategy is to inoculate microorganisms producers of this class of compounds and the maintenance of favorable conditions to ensure the production of biosurfactants in situ, during the process of bioremediation. / Os hidrocarbonetos policíclicos aromáticos (HPAS) são constituídos exclusivamente por átomos de carbono e hidrogênio e organizados sob forma linear, angular ou agrupada. Diversos HPA ao sofrerem ativação enzimática, tendem a ligar-se ao DNA, c ausando erros de replicação e mutações. Muitas dessas moléculas são reconhecidas como tóxicas, mutagênicas e carcinogênicas. Os HPA são compostos recalcitrantes, em razão de sua baixa solubilidade
em água e alta sorção ao solo. O uso de biossurfactantes é uma opção geralmente eficaz na remoção de contaminantes orgânicos hidrofóbicos de matrizes complexas, como o solo. A surfactina é um lipopeptídeo sintetizado por Bacillus subtilis e possui alta atividade de redução da tensão entre compostos hidrofóbicos e a água. Diferente de uma extração exaustiva, os biossurfactantes agem aumentando a biodisponibilidade do contaminante e facilitam a sua biodegradação. Neste trabalho, foi conduzido um experimento de biodegradação de fenantreno em latossolo argiloso, contaminado com 14C-fenantreno e com 4 concentrações de 12C-fenantreno (1, 10, 40 e 100 μg g-1). A biodegradação foi avaliada com a adição dos suplementos surfactina (0,825 mg g-1), extrato de levedura (1,0 mg g-1) e de um inóculo (30 mg g-1), obtido a partir da adição de óleo diesel a composto de resíduo sólido urbano, para enriquecimento de micro-organismos degradadores de hidrocarbonetos. Os frascos foram mantidos a 35 °C por 49 dias. O 14CO2 produzido foi capturado em tubos de cintilação, contendo 2 mL de KOH (1 mol L-1). Os frascos foram substituídos nos dias 8, 18, 25, 32, 37, 44 e 49. Após a troca do frasco no trigésimo segundo dia, foi feita uma segunda aplicação de surfactina (0,230 mg g-1), em todos os tratamentos. A maior atividade de degradação foi alcançada nos primeiros 8 dias de incubação, somente nos tratamentos que receberam o inóculo. Após o oitavo dia, até a nova suplementação com surfactina (32° dia), o aumento da atividade não foi significativo em nenhum dos tratamentos. A atividade voltou a aumentar após a adição suplementar de surfactina, porém, em uma taxa inferior à alcançada nos primeiros 8 dias. Esse resultado foi atribuído à menor concentração da surfactina e a efeitos de adsorção do fenantreno ao solo. Nas amostras com a maior concentração de fenantreno (100 μg g-1) a atividade de degradação não diferiu em função dos tratamentos com e sem surfactina. Esse resultado sugere que a concentração do fenantreno biodisponível, nessa dose, se manteve suficientemente alta para sustentar a atividade de degradação. A suplementação com extrato de levedura resultou em menor atividade de degradação, nos tratamentos com 10, 40 e 100 μg g-1 de fenantreno. Nos tratamentos com a menor dose de fenantreno (1 μg g-1), o extrato de levedura estimulou a degradação do contaminante. Conclui-se que a suplementação com extrato de levedura estimulou a degradação da surfactina, o que resultou em redução da degradação do fenantreno nas maiores concentrações do contaminante. Os resultados do trabalho indicam que a biorremediação de solos contaminados com HPA requer a manutenção de agentes solubilizadores, como a surfactina. Em razão da rápida degradação do biossurfactante no solo, sugere-se que a melhor estratégia seja a inoculação de micro-organismos produtores dessa classe de compostos e a manutenção de condições favoráveis a produção de biossurfactantes in situ, ao longo do processo de biorremediação.
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Epidemiologia da podridão-de-cratera em frutos de meloeiroSENHOR, Rosenberg Ferreira 07 March 2006 (has links)
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Previous issue date: 2006-03-07 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The crater rot, caused by the fungus Myrothecium roridum, is an important disease of melon (Cucumis melo) fruits in the Northeast producing fields of Brazil. This work aimed to analyze the influence of the inoculation method (pulverization, drop deposition, pulverization with wound, drop deposition with wound, and sub-epidermal injection), wound intensity (0, 1, 3, 5, 7, 9 and 10 wounds), wound age (0, 3 and 6 hours), fruit age (12, 22 and 27 days), humidity (with and without moist chamber), temperature (15, 20, 25, 30, 35 and 40 °C) and inoculum concentration (101, 102, 103, 104, 105, 106 and 107 conidia.mL-1) of three M. roridum isolates (LE-609, LE-636 and LE-766) on the severity of the crater rot in melon fruits type Yellow (cv. AF-682) and Honeydew (cv. Orange Flesh). All inoculations were made in melon health fruits, after washing and superficial desinfestation. Each fruit was inoculated in six equidistant points and the cater rot severity was evaluated after five days, by assesment of the lesion area in each inoculated point. Crater rot severity was influenced by the interaction between inoculation methods, pathogen isolates and melon cultivars. Symptoms werenot observed in the fruits without wounds. The inoculations by pulverization or drop deposition lead to bigger lesions in wounded fruits. Sub-epidermal injection inoculation presented smaller lesions when compared with pulverization or drop deposition methods. The disease severity increased as the number of wounds rise, reaching the maximum with 10 wounds. A tendency of reduction of the disease severity was verified in fruits with the increase of the wound age. Lesions were significantly smaller in the fruits wounded six hours before the inoculation than in those wounded immediately before the inoculation. Fruit age was not decisive to increase or reduce the cater rot severity. The presence of free water in the surface of the fruits was unnecessary to initiate the infection process by M. roridum isolates, although the lesions were bigger in the fruits kept under moist chamber. In the absence of moist chamber, the biggest lesions were verified in cultivar Orange Flesh. All M. roridum isolates caused disease symptoms, being distinguished LE-639 which caused the biggest lesions with and without moist chamber. The temperature significantly influenced the severity of thedisease. The optimum estimates temperatures for disease development in the cultivars AF-682 and Orange Flesh were 26.1ºC and 26.2ºC, respectively. The smaller lesions were esteemed at 38.6 ºC in all interactions. Disease severity increased with theincrement in M. roridum inoculum concentration, reaching the maximum at 107 conidia.mL-1. In cultivar AF-682, the presence of symptoms were not observed in the fruits inoculated with the isolate LE-609 in the concentration of 101 conidia.mL-1, the same pattern was observed with the isolates LE-639 and LE-766 at concentrations of 102 and 103 conidia.mL-1, respectively. Considering the cultivar Orange Flesh, all isolated were able to induce disease symptoms beginning at a concentration of 103 conidia.mL-1. / A podridão-de-cratera, causada pelo fungo Myrothecium roridum, é uma importante doença dos frutos de meloeiro (Cucumis melo) nos pólos produtores do Nordeste brasileiro. Este trabalho teve como objetivos avaliar a influência dos métodos de inoculação (gota, pulverização, gota com ferimento, pulverização com ferimento e injeção subepidérmica), da intensidade do ferimento (0, 1, 3, 5, 7, 9 e 10 ferimentos), da idade do ferimento (0, 3 e 6 horas), da idade do fruto (12, 22 e 27 dias), da umidade (sem e com câmara úmida), da temperatura (15, 20, 25, 30, 35 e 40 °C) e da concentração de inóculo (101, 102, 103, 104, 105, 106 e 107 conídios.mL-1) de três isolados de M. roridum (LE-609, LE-636 e LE-766) na severidade da podridão-de-cratera em frutos de meloeiro dos tipos Amarelo (cv. AF-682) e Honeydew (cv. Orange Flesh). As inoculações foram realizadas em frutos sadios de meloeiro, após lavagem e desinfestação superficiais. Cada fruto foi inoculado em seis pontos eqüidistantes e a avaliação da severidade da podridão-de-cratera realizada cinco dias após, pela mensuração da área lesionada externa em cada ponto inoculado. A severidade da doença foi influenciada pela interação entre métodos de inoculação, isolados e cultivares. Nãohouve desenvolvimento de lesões nos frutos quando as inoculações foram realizadas sem ferimento. As inoculações por pulverização ou gota com a suspensão de conídios propiciaram as maiores lesões nos frutos submetidos a ferimentos. A inoculação por injeção subepidérmica propiciou lesões menores que os métodos de pulverização ou gota com ferimento. A severidade aumentou com o incremento do número de ferimentos, atingindo o máximo com 10 ferimentos. Verificou-se uma tendência de redução da severidade da doença nos frutos com o aumento da idade do ferimento. As lesões foram significativamente menores nos frutos feridos seis horas antes da inoculação do que naqueles feridos imediatamente antes da inoculação. A idade do fruto não foi determinante para elevação ou redução da severidade da podridão-de-cratera. A presença de água livre na superfície dos frutos foi desnecessária para o início do processo de infecção pelos isolados de M. roridum, embora as lesões tenham sido maiores nos frutos submetidos à câmara úmida. Na ausência da câmara úmida, as maiores lesões foram verificadas na cultivar Orange Flesh. Todos os isolados de M.roridum provocaram sintomas da doença, destacando-se LE-639 ao causar as maioreslesões com e sem a câmara úmida. A temperatura influenciou significativamente a severidade da doença. As temperaturas ótimas estimadas para o desenvolvimento da doença nas cultivares AF-682 e Orange Flesh foram 26,1 ºC e 26,2 ºC, respectivamente. As menores lesões foram estimadas a 38,6 ºC em todas as interações. A severidade da doença aumentou com o incremento na concentração de inóculo de M. roridum, atingindo o máximo com 107 conídios.mL-1. Na cultivar AF-682, não foi observada a presença de sintomas nos frutos inoculados com o isolado LE-609 na concentração de 101 conídios.mL-1, bem como com os isolados LE-639 e LE-766 nas concentrações de 103 e 102 conídios.mL-1, respectivamente. Na cultivar Orange Flesh, todos os isolados do patógeno induziram sintomas a partir da concentração de 103 conídios.mL-1.
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Suscetibilidade in vitro e in vivo de Pythium insidiosum a quatro óleos essenciais de plantas da família Lamiaceae e proposta de um novo inoculo para testes de suscetibilidade in vitro / In vitro and in vivo susceptibility of Pythium insidiosum to four essential oils from the Lamiaceae plant family and the proposal of a new inoculum for in vitro susceptibility testingFonseca, Anelise Oliveira da Silva 27 February 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Pythium insidiosum é um oomiceto aquático e agente etiológico da pitiose, uma doença infecciosa, não contagiosa, de difícil tratamento e prognóstico desfavorável, que acomete mamíferos que habitam áreas pantanosas e alagadas. O presente estudo teve como objetivos: a) avaliar e padronizar um inóculo a partir de cultivo micelial de P. insidiosum; b) avaliar a suscetibilidade in vitro de P. insidiosum aos óleos essenciais de Origanum vulgare, Origanum majorana, Mentha piperita e Rosmarinus officinalis; c) investigar a ação antimicrobiana dos óleos essenciais de O. vulgare e M. piperita sozinhos, associados e em combinação com imunoterapia no tratamento da pitiose experimental. O inóculo foi confeccionado a partir de cultura micelial de P. insidiosum e testado frente a antifúngicos azólicos. Os resultados foram comparados aos testes de suscetibilidade empregando o inóculo padrão de zoósporos frente aos mesmos antifúngicos. O inóculo proposto mostrou padrões de suscetibilidade comparáveis ao inoculo padrão, indicando, portanto, que pode ser um método adequado para avaliar-se a suscetibilidade deste oomiceto, particularmente quando não é possível obter-se o inóculo padrão. Os óleos foram analisados por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa. Os componentes majoritários dos óleos essenciais foram os seguintes: O. vulgare: carvacrol (93,10%) e beta; O. majorana: 1,4-terpineol (34,34%); M. piperita: mentona (57,53%); R. officinalis: 1,8-cineol (64,53%). A atividade antimicrobiana foi determinada pelo método de microdiluição em caldo frente a 22 isolados de P. insidiosum. Os óleos foram submetidos a uma série de diluições, obtendo-se concentrações de 14 a 0,025mg/mL. As concentrações inibitórias mínimas para O. majorana, M. piperita e R. officinallis variaram de 0,11 a 3,5mg/mL e para O. vulgare de 0,05 a 1,75mg/mL. Os resultados evidenciaram que os óleos essenciais avaliados apresentaram ação antimicrobiana sobre P. insidiosum, ressaltando-se a melhor atividade do óleo essencial de O. vulgare. A partir destes dados delineou-se o experimento in vivo, no qual foram utilizados 18 coelhos com pitiose experimental, divididos em seis grupos de três animais sendo: grupo 1 controle; grupo 2 tratados com óleo essencial de M. piperita; grupo 3 tratados com óleo essencial de O. vulgare; grupo 4 tratados com imunoterápico Pitium Vac®; grupo 5 tratados com associação dos óleos de M. piperita e O. vulgare e grupo 6 tratados com associação dos óleos plus imunoterápico. Os óleos foram formulados em creme tópico e as lesões foram tratadas diariamente por 45 dias; os animais dos grupos 4 e 6 receberam uma dose do imunoterápico a cada 14 dias. Os resultados revelaram que a evolução das lesões dos grupos 5 e 6, não diferiram entre si, porém diferiram dos demais grupos. Evidenciou-se que as lesões do grupo 5 aumentaram 3.16 vezes a cada dia, enquanto àquelas do grupo 6, aumentaram 1.83 vezes, indicando o menor crescimento das lesões quando o tratamento empregou a combinação das terapias. Este estudo é pioneiro no tratamento da pitiose experimental empregando óleos essenciais de plantas e combinação de terapias com óleos em pitiose. Demonstrou que o emprego de óleos essenciais pode se constituir numa alternativa viável de tratamento da pitiose cutânea, particularmente quando utilizados em combinação ou em associação com imunoterapia. / Pythium insidiosum is an aquatic oomycete and etiological agent of Pythiosis, an infectious, non-contagious, difficult-to-treat disease. It affects mammals that inhabit marshy and flooded areas. This study aimed to: a) evaluate and standardize an inoculum from P. insidiosum mycelial culture; b) evaluate P. insidiosum in vitro susceptibility to Origanum vulgare, Origanum majorana, Mentha piperita and Rosmarinus officinalis essential oils; c) investigate the antimicrobial activity of O. vulgare and M. piperita essential oils separately, associated and in combination with immunotherapy in the treatment of experimental Pythiosis. The inoculum was prepared from P. insidiosum mycelial culture and tested against azole antifungals. The results were compared to susceptibility tests by using zoospore standard inoculum against the same antifungals. The proposed inoculum showed susceptibility patterns comparable to standard inoculum, thus indicating that it can be a suitable method to evaluate oomycete susceptibility, particularly when it is not possible to obtain standard inoculum. The oils were analyzed by gas chromatography mass spectrometry. Essential oils main components were as follows: O. vulgare: carvacrol (93.10%); O. majorana: 4-terpineol (34.34%); M. piperita: menthone (57.53%); A. officinalis: 1.8-cineole (64.53%). Antimicrobial activity was determined by the broth microdilution method against 22 P. insidiosum isolates. The oils were subjected to serial dilutions, and 14-0.025mg/mL concentrations were obtained. O. marjorana, M. piperita and R. officinalis minimum inhibitory concentrations ranged from 0.11 to 3.5 mg/mL, and those for O. vulgare, from 0.05 to 1.75 mg/mL. The results showed that the tested essential oils had antimicrobial effect on P. insidiosum, with O. vulgare essential oil being the most active. The in vivo experiment was outlined from these results. Eighteen rabbits with experimental Pythiosis, divided into six groups of three animals, were used: group 1 control; group 2 was treated with Mentha piperita essential oil; group 3 was treated with Origanum vulgare essential oil; group 4 was treated with commercial immunotherapic; group 5 was treated with a combination of Mentha piperita and Origanum vulgare oils, and group 6 was treated with a combination of immunotherapy plus oils. The oils were formulated as topical cream and lesions were treated daily for 45 days; animals in groups 4 and 6 received an immunotherapy dose every 14 days. The results revealed that the evolution of lesions in groups 5 and 6 did not differ between each other, but differed from the other groups. Group 5 lesions increased 3.16 fold every day, whereas those in group 6 increased 1.83 fold, thus showing that the smallest lesion growth occurred when an combination of therapies was employed. This is the first study to use essential oils from plants and a combined oil therapy in theexperimental treatment of Pythiosis. It was demonstrated that the use of essential oils can be a viable alternative for skin Pythiosis treatment, particularly when used in combination with or associated to immunotherapy.
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Influência da origem e do pré-tratamento do inóculo na produção de hidrogênio a partir de águas residuárias em biorreatores anaeróbios / Influence of source and pre-treatments method of seed sludge on the hydrogen production from wastewater in anaerobic bioreactorPenteado, Eduardo Dellosso 30 March 2012 (has links)
Esse trabalho investigou a influência de diferentes origens e pré-tratamentos do inóculo na produção de biohidrogênio em reatores anaeróbios de leito fixo e fluxo ascendente. Aparas de polietileno de baixa densidade foram usadas como material suporte para fixação da biomassa e os reatores foram operados com 2 h de tempo de detenção hidráulica (TDH) e a 25ºC, alimentados com efluente sintético a base de sacarose. Duas fontes de inóculo foram estudadas: lodo anaeróbio de reator UASB aplicado ao tratamento de água residuária de abatedouro de aves (D) e lodo anaeróbio de reator UASB aplicado ao tratamento de água residuária de suinocultura (S); além da autofermentação (A), quando não há nenhum inóculo no reator. Além disso, dois tipos de pré-tratamento térmico (T) e ácido (A) foram avaliados. Os rendimentos de hidrogênio foram de 2,1, 2,0, 2,0,1,0, 1,0, 0,7, 0,7 mol \'H IND.2\' mol-1 sacarose quando os reatores foram inoculados com A, DT, DA, D, SA, ST e S, respectivamente. Nessa nomenclatura, a primeira letra se refere à origem do inóculo e a segunda, ao pré-tratamento. Embora hidrogênio (20-78%) e dióxido de carbono (21-55%) tenham sido os principais produtos no biogás, metano foi detectado nos reatores inoculados com D, DA, S, ST e SA no início e no final da operação. A produção volumétrica máxima de hidrogênio (61,6 mL \'H IND.2\' h-1.L-1) foi obtida quando DA foi usado com inóculo. Porém, o menor valor (15,1 mL \'H IND.2\' h-1.L-1) foi observado usando o inóculo S. Quando o reator não foi inoculado (A), a produção volumétrica de hidrogênio foi 47,3 mL \'H IND.2\' h-1.L-1. Etanol, ácido butírico e acético foram os principais produtos \'metabólicos detectados na fase líquida. Em resumo, os resultados demonstraram que há influência da origem e do pré-tratamento do inóculo em todos os parâmetros analisados. Inóculos sem pré-tratamento resultaram em menor rendimento de hidrogênio do que os observados nos experimentos com inóculos pré-tratados devido a seleção das bactérias produtoras de hidrogênio (BPH). Ademais, embora o pré-tratamento térmico tenha gerado os maiores valores de rendimento, o pré-tratamento ácido resultou em uma operação mais estável com os maiores valores médios. A autofermentação teve desempenho semelhante aos DT e DA e pode ser uma alternativa para a produção biológica de hidrogênio, pois seleciona as BPH naturalmente. / This paper investigated the influence of different inoculums and pretreatment of seed sludge on the biohydrogen production in up-flow anaerobic fixed-bed reactors. Particles of low-density polyethylene were used as support for biomass attachment and the reactor was operated with hydraulic retention time (HRT) of 2 h at 25ºC, fed with a sucrose-based synthetic wastewater. Two sources of inoculums were studied: anaerobic sludge from an UASB (up-flow anaerobic sludge blanket) reactor applied to treat poultry slaughterhouse wastewater (Sl) and anaerobic sludge from an UASB reactor treating swine wastewater (Sw), besides the autofermentation (A), with no inoculation of the reactor. In addition, two kinds of pretreatment heat (He) and acid (Ac) shock were evaluated. Hydrogen yields were 2.1, 2.0, 2.0,1.0, 1.0, 0.7, 0.7, mol \'H IND.2\' mol-1 sucrose when the reactors were inoculated with A, SlHe, SlAc, SwAc, Sl, Sw, and SwHe, respectively. In this nomenclature, the first two letters refer to source and the others refer to pretreatment. Although hydrogen (20-78%) and carbon dioxide (21-55%) have been the main gaseous products in the biogas, methane was detected in Sl, SlAc, Sw, SwHe and SwAc at the beginning and in the last days of the operation. Optimal \'H IND.2\' production rate (61.6 mL \'H IND.2\' h-1 L-1) was obtained when SlAc was used as seed sludge. On the other hand, the smallest value (15.1 mL \'H IND.2\' h-1 L-1) were observed using Sw inoculums. When the reactor was not inoculated (A), \'H IND.2\' production rate was 47.3 mL \'H IND.2\' h-1 L-1. Ethanol, butyric acid and acetic acid were the main soluble products detected in the liquid phase. In summary, the results have demonstrated that there are influences of the source and the pretreatment of the seed sludge in all parameters analyzed. Inoculums without pretreatment resulted in hydrogen productivity lower than those observed for experiments with pretreated inoculums due the selection of hydrogen producing bacteria (HPB). Furthermore, although the heat shock has generated the highest values of hydrogen yield, the acid-shock provided more stable operation with the highest average values. Besides, the autofermentation had almost the same performance than SlAc and SlHe and could be an alternative for biological hydrogen production due to natural selection of HPB.
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Aspectos da biologia e manejo do nematoide de cisto da soja / Biology aspects and management of soybean cyst nematodeAraújo, Fernando Godinho de 04 July 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-07-04 / Soybean is the most important oilseed crop grown in the world and Brazil is the second largest producer. Many pest problems can affect soybean, including the soybean cyst nematode, Heterodera glycines. The search for efficient management alternatives of this nematode and understanding of their biology have been largely studied, but still lacking information. Experiments were conducted under greenhouse conditions and naturally infested field aiming to better understand the behavior of H. glycines and to propose management alternatives. The first study had the purpose to evaluate the penetration and life cycle of H. glycines, race 3 (HG Type 0 -) in soybean cultivars resistant (BRSGO 8860RR) and susceptible (BRS Valiosa RR) under greenhouse conditions. Evaluations in stained roots were made at 2, 4, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24 and 30 days after inoculation (DAI). The penetration of H glycines occurred throughout the period of evaluation in both cultivars. The H. glycines life cycle was completed in 15 days, both in the susceptible and resistant cultivars. Resistant cultivar had the peak period of formation of J3, J4 and females delayed in comparison with the susceptible cultivar. The second study aimed to evaluate effectiveness of the resistance to H. glycines under high inoculum concentration, and the effect of increasing inoculum rates on the penetration of juveniles and H. glycines survival. Two experiments were conducted using three soybean cultivars (BRS Valiosa RR, susceptible to H. glycines; BRSGO Chapadoes and BRSGO 8860RR, both resistant to H. glycines) under four inoculum concentrations (1.000, 2.500, 5.000 and 10.000 eggs and J2 per plant). The increase in the H. glycines inoculum concentration increased the final nematode population in the susceptible cultivar. The cultivar resistance was not affected by high inoculum concentration. The root penetration of J2 increased as the inoculum concentration increased regardless the cultivar. The survival rate was higher in the susceptible cultivar decreasing with increasing of inoculum concentration. The third study evaluated the effect of seed treatment two soybean cultivars (resistant BRSGO 8860RR and susceptible BRS Valiosa RR). Two experiments were conducted, one in a naturally infested field and other under greenhouse conditions. The seed treatments did not affect the stand and the plant height of the resistant soybean cultivar. There was no effect of seed treatments on the nematode population in the field experiment. Under greenhouse, seeds treated with abamectin (50 and 75 mL a.i. 100 kg seed-1) + thiamethoxam (70 mL a.i.), imidacloprid + thiodicarb (105+315 mL a.i.) and thiodicarb + imidacloprid with carbendazim + thiram (75+225 e 30+70 mL a.i.) reduced the number of females per gram of roots on the susceptible cultivar. Seed treatment with imidacloprid + thiodicarb (75+225 mL a.i.) also reduced the number of eggs per female on the resistant cultivar BRSGO 8860RR. / A soja é a mais importante oleaginosa cultivada no mundo sendo o Brasil o segundo maior produtor. Diversos problemas fitossanitários afetam a cultura da soja, dentre eles o nematoide de cisto da soja, Heterodera glycines. A busca por alternativas de manejo eficiente desse nematoide e a compreensão de sua biologia têm sido temas muito difundidos, mas ainda carente de estudos. Dessa forma, foram conduzidos experimentos em condições de casa de vegetação e campo naturalmente infestado visando conhecer melhor o comportamento de H. glycines e propor alternativas para seu manejo. O primeiro estudo teve como objetivo avaliar a penetração e a duração do ciclo de H. glycines, raça 3 (HG tipo 0-), em cultivares de soja resistente (BRSGO 8860RR) e suscetível (BRS Valiosa RR) em condições controladas de casa de vegetação. Foram realizadas avaliações de coloração de raiz aos 2, 4, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24 e 30 dias após a inoculação (DAI). A penetração do H. glycines ocorreu durante todo o período de avaliação nas duas cultivares. O ciclo do H. glycines se completou em 15 dias, tanto na cultivar suscetível como na cultivar resistente. Na cultivar resistente o período de pico de formação de J3, J4 e fêmeas foi atrasado em relação a cultivar suscetível. O segundo estudo teve como objetivo avaliar se a resistência ao H. glycines é eficiente na redução do desenvolvimento do nematoide, mesmo sob elevada concentração de inóculo, bem como se esse aumento na concentração de inóculo e a resistência afetam a penetração de juvenis e a taxa de sobrevivência do H. glycines. Foram conduzidos dois ensaios utilizando-se três cultivares de soja, uma suscetível (BRS Valiosa RR) e duas resistentes (BRSGO Chapadões e BRSGO 8860RR), submetidas a quatro concentrações de inóculo (1.000, 2.500, 5.000 e 10.000 ovos e J2 por vaso). O aumento na concentração inicial de inóculo de H. glycines resultou no aumento da população final do nematoide na cultivar suscetível. A reação de resistência das cultivares não foi afetada por altas concentrações de inóculo e a penetração de J2 nas raízes aumentou com o aumento da concentração de inóculo independentemente da cultivar. A taxa de sobrevivência do nematoide foi maior na cultivar suscetível diminuindo com o aumento da concentração do inóculo, não sendo influenciada pela concentração de inóculo para cultivares resistentes. O terceiro estudo teve como objetivo avaliar o efeito do tratamento de sementes de duas cultivares de soja resistente (BRSGO 8860RR) e suscetível (BRS Valiosa RR), com produtos a base de abamectina e tiodicarbe no manejo de H. glycines. Foram conduzidos dois experimentos, sendo um em campo naturalmente infestado e outro em condições de casa de vegetação. Os tratamentos de sementes não afetaram o estande e a altura das plantas de soja. Não foi observado efeito dos tratamentos de sementes sobre o nematoide no experimento conduzido em campo. Em condições de casa de vegetação os tratamentos de sementes com produtos a base de abamectina, nas dosagens de 50 e 75 mL i.a. 100 kg sementes-1 acrescido de tiametoxam (70 mL i.a.) e os tratamentos imidacloprido + tiodicarbe (105+315 mL i.a.) e imidacloprido + tiodicarbe e carbendazim + tiram (75+225 e 30+70 mL i.a.) reduziram o número de fêmeas por grama de raiz na cultivar suscetível. O tratamento de sementes com imidacloprido + tiodicarbe (75+225 mL i.a.) também reduziu o número de ovos por fêmea na cultivar resistente, BRSGO 8860RR.
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Influência da origem do inóculo e da adição de sulfato sobre a degradação de BTX em reator anaeróbio horizontal de leito fixo / Influence of different inoculum sources and sulphate addition on anaerobic BTX degradation in a packed-bed reactorFernandes, Bruna Soares 11 March 2005 (has links)
O desenvolvimento industrial tem, como conseqüência, a maior geração de resíduos, muitos deles tóxicos aos seres vivos. Dentre esses, benzeno, tolueno e xilenos (BTX), derivados do petróleo, estão contaminando aqüíferos por acidentes no transporte e no armazenamento. Por esse motivo, diversas pesquisas têm sido realizadas buscando formas de biodegradar BTX. Esses trabalhos indicam que os principais fatores que podem influenciar a degradação biológica dos BTX são temperatura, pH, disponibilidade de nutrientes, concentração de tóxicos e diversidade de microrganismos. Visando contribuir com o estudo desses fatores, este trabalho teve por objetivo avaliar a influência do inóculo e de aceptores de elétrons no processo de degradação anaeróbia de BTX. Neste trabalho três inóculos foram pesquisados: 1- biomassa proveniente de reator anteriormente submetido à mistura de gasolina comercial e água; 2- biomassa proveniente de reator da estação de tratamento de esgoto da USP - São Carlos; 3- biomassa proveniente de reator tratando água residuária de abatedouro de aves. Os resultados obtidos comprovaram que a origem do inóculo foi fundamental na degradação anaeróbia de BTX, pois os inóculos apresentaram diferentes períodos de adaptação e porcentagens de degradação do tóxico. Depois de 93 dias de operação os inóculos 1, 2 e 3 apresentaram eficiência de remoção de BTX da ordem de 57%, 83% e 90%, respectivamente. O reator com o inóculo 3 foi submetido a condições metanogênica, sulfetogênica com presença e ausência de Ferro (III). Os resultados demonstraram que a degradação dos BTX foi influenciada pelas diferentes condições adotadas. A adição de Fe (III) melhorou a degradação dos BTX, do reator sob condições sulfetogênicas. / The industrial development has increased the generation of residues. Some of them are toxics and impact the environment. Benzene, toluene and xylenes (BTX), petroleum sub products, are examples of such toxic compounds. These compounds may contaminate aquifers as a result of accidents during transportation or of leakages of storage tanks. Several factors are reported to affect the biodegradation of BTX, such as: temperature, pH, availability of nutrients, concentration of toxics and diversity of microorganisms. This research aimed to study some of these factors, such as different inoculum sources and different electrons acceptors during BTX degradation processes in an horizontal-flow anaerobic immobilized biomass (HAIB) reactor. In this research three inocula were studied: 1- an adapted microbial community for BTX degradation; 2 - microorganisms collected from a pilot-scale UASB reactor treating domestic wastewater; and 3 - Microorganisms collected from an UASB treating poultry slaughterhouse industry wastewater. The results have shown that the inoculum sources were fundamental to the adaptation period for the toxic biodegradation, producing different BTX removal efficiencies. After 93 days of operation, the inocula 1, 2 and 3 showed BTX removal efficiency of 57, 83 and 90%, respectively. The inoculum 3 was submitted to conditions of methanogesis and sulfetogenesis in the presence and absence of Fe (III). The results demonstrated that BTX degradation was affected by the different conditions adopted, showing that the addition of Fe (III) improved biodegradation in the reactor under sulfate reduction condition.
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Efeito da relação substrato/inóculo na partida de reator anaeróbio para digestão de resíduos alimentaresHallam, Jamile Machado 26 February 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-02-26 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / PROSUP - Programa de Suporte à Pós-Gradução de Instituições de Ensino Particulares / O aproveitamento energético obtido pela digestão anaeróbia é uma alternativa viável para o tratamento de resíduos alimentares, no entanto requer um estrito controle operacional. A escolha da melhor condição de partida pelo cálculo da relação substrato/inóculo (S/I) em termos de Sólidos voláteis (SV) pode facilitar estabilização do processo, resultando em elevada produtividade de biogás e teor de metano. Este estudo testou 5 diferentes relações de S/I em regime de batelada a 35oC, visando a estabilidade do processo e otimização da produção de biogás com alto teor de metano. Foi utilizado como substrato o resíduo coletado no restaurante universitário da Unisinos, e o como inóculo o lodo anaeróbio do reator UASB tratando esgoto doméstico da estação de tratamento de esgotos da mesma universidade. Os parâmetros monitorados foram pH, volume de biogás, teor de metano, alcalinidade e ácidos graxos voláteis. Todas as bateladas mantiveram-se dentro da faixa de pH recomendada pela literatura, entre 6,5 e 7,5, com exceção à batelada 5, que utilizou uma relação 1:1 S/I e onde o pH decaiu para 5,0. A produção de biogás em todas as condições estudadas teve sua máxima produção até o terceiro dia de inoculação e foi influenciada pela relação S/I aplicada, pois o aumento da quantidade de SV do substrato aumentou o rendimento e o teor de metano, com exceção da condição 1:1, onde houve a acidificação do sistema. O rendimento de biogás das condições 1:5, 1:4, 1:3, 1:2, 1:1 foram respectivamente 0,69, 0,75, 0,67, 0,89 e 0,18 L/g SV do substrato utilizado, e os teores médios de metano em cada batelada foram 69, 67, 65, 74 58%. Concluiu-se então, que a melhor relação substrato/inóculo para partida do processo foi 1:2, para a qual obteve-se 0,89 L de biogás/g SV do substrato com um teor de metano de 74%, mantendo uma relação AGV/ALC abaixo de 0,5, demonstrando a estabilidade do processo. / The energy recovery acquired through the anaerobic digestion is a viable alternative for treating food waste, though it requires an operational strict control. The choice of the best start up condition athwart the substratum /inoculum (S/I) ratios in terms of volatile solids (VS) may facilitate the process stabilization, resulting in increased production of biogas and methane content. The present study tested 5 different ratios of S/I in batch system at 35ºC, aiming the process stability and the optimization in the raised methane level biogas production. As the substrate, the residue collected at the university restaurant of Unisinos was used, and as inoculum the UASB reactor anaerobic sludge from the sewage wastewater treatment plant at the same university. The monitored parameters were pH, biogas amount, methane content, alkalinity and volatile fatty acids. All of the batches kept within the pH levels recommended by literature, between 6.5 and 7.5, exception to batch 5, which employed a relation of 1:1 substrate/inoculum and in which the pH level declined to 5.0. The biogas production in all of the studied conditions had its utmost production until the third day of inoculation and it was influenced by the S/I ration applied, since the increase of the substratum VS amount raised the yield and the methane content, exception to the condition 1:1 where there was an acidification of the system, and it was considered that the capacity of the commutation of substratum in methane was extrapolated. The biogas yields of the conditions 1:5, 1:4, 1:3, 1:2, 1:1 were, respectively, 0.69, 0.75, 0.67, 0.89 and 0.18 L/g VS of the substratum employed, and the average methane content in each batch were 69, 67, 65, 74 58%. The study shows that the best relation S/I to the process start-up was 1:2, to which it was obtained 0.89 L of biogas/g SV of the substratum with a methane content of 74% keeping the relation AGV/ALC under 0.5, demonstrating stability in the process.
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Densidade populacional, hospedabilidade e manejo de lavoura de soja, no controle do Pratylenchus brachyurus no Mato Grosso / Population density, hosted and management of the soybean crop in the control of Pratylenchus brachyurus in Mato GrossoLopes, Ligia Rossetto 11 July 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-07-11 / The soybean is one of the most important legume crops in Brazil and worldwide. However the risks and damages caused by nematodes have been prominent among the diseases of soybean. Recently in soybean areas in Brazil has increased the occurrence of root-lesion nematode, Pratylenchus brachyurus, causing high damage to culture and rising due to the sequential planting of susceptible crops. The objectives of this study was to evaluate the density population of P. brachyurus on soybean growing areas under no-tillage in the northern state of Mato Grosso, and from that sampling to perform experiments under controlled conditions on the hostel of soybean and millet genotypes grown over most abundant in weed found in the region . Were sampled four properties of commercial soybean crops under no-tillage system, which occurred in the soybean harvest 2009/2010 and 2010/2010, 2010/2010 off-season and pre-planting of the 2010/2011 crop soybeans. Inoculum was obtained from populations of P. brachyurus from samples of soil and root crops in the areas of commercial soybean harvest of 2009/2010 and was made multiplying the population of P. brachyurus on susceptible crops. Upon obtaining the inoculum, three experiments were conducted under controlled conditions to check the reaction of nematodes in plants. The first experiment was conducted to evaluations the host of P. brachyurus in nineteen soybean genotypes and four pearl millet genotypes, compared with two standard species susceptibility to P. brachyurus. The
second experiment was to evaluate the host of P. brachyurus in four nematode species of weeds. In the third experiment evaluated the effectiveness of seed treatment with Avicta Completo to control P. brachyurus in different soybean genotypes. All areas and seasons sampled showed P. brachyurus, at different levels of population density. Pearl millet cultivars ADR 300 and ADR 7010 showed low values of both reproduction factor (RF) of 0.2, being considered bad hosts on nematode. Over all soybean cultivars evaluated were susceptible to P. brachyurus. All weed species evaluated were susceptible to P. brachyurus and allowed the increase of the nematode population. The seed treatment with Avicta Completo contributed to reducing the reproduction rate of P. brachyurus on soybean plants. / A soja é uma das mais importantes leguminosas cultivadas no Brasil e no mundo. No entanto a cultura sofre riscos fitossanitários, e os danos causados por
fitonematoides têm se destacado entre as doenças. Recentemente, nas áreas de
cultivo de soja do Brasil, vem aumentando a ocorrência do nematoide das lesões
radiculares, Pratylenchus brachyurus, ocasionando danos elevados e crescentes. Os objetivos do trabalho foram avaliar a densidade populacional de P. brachyurus em áreas de cultivo de soja sob o sistema de plantio direto na região Médio-Norte do estado de Mato Grosso, e a partir dessa amostragem efetuar experimentos em
condições controladas sobre a hospedabilidade de cultivares de soja e milheto mais
cultivados e plantas daninhas mais abundantes na região. Foram amostradas quatro
propriedades de lavouras comerciais sob sistema de plantio direto, nas safras
agrícola de soja 2009/2010 e 2010/2010, safrinha 2010/2010 e no pré-plantio de soja
safra 2010/2011. Obteve-se inóculo de populações de P. brachyurus extraída das
amostras de solo e raízes das áreas de lavouras comerciais da safra agrícola
2009/2010 e foi efetuada a multiplicação da população de P. brachyurus em culturas
suscetíveis. No primeiro experimento avaliou a hospedabilidade do fitonematoide em 19 cultivares de soja e quatro cultivares de milheto, comparados com duas
espécies padrão de suscetibilidade ao P. brachyurus. O segundo experimento consistiu em avaliar a hospedabilidade de P. brachyurus em quatro espécies de plantas daninhas. No terceiro experimento avaliou-se a eficiência do tratamento de sementes com Avicta Completo no controle de P. brachyurus em diferentes cultivares de soja. Todas as áreas e épocas amostradas apresentaram P. brachyurus, em diferentes níveis de densidade populacional. As cultivares de milheto ADR 300 e ADR7010 apresentaram baixos valores de fator de reprodução ambos com FR de 0,2, sendo considerados maus hospedeiros do nematoide. De modo geral as cultivares de soja avaliadas apresentaram suscetibilidade a P. brachyurus. Todas as espécies de plantas daninhas avaliadas foram suscetíveis a P. brachyurus e permitiram o aumento populacional do nematoide. O tratamento de sementes com Avicta Completo contribuiu para a redução do fator de reprodução de Pratylenchus brachyurus em plantas de soja.
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Aplicação de carvacrol e 1,8-cineol na inibição de bactérias contaminantes de hortaliças minimamente processadas em inóculo mistoOliveira, Kataryne árabe Rima de 25 February 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The demand for fresh foods, with lower calories, high nutritional values and easily prepared has been increased the consumption of minimally processed vegetables. However, because the intense handling these products has been considered a potential problem to the microbiological safety, related mainly to the presence of psychrotrophic pathogenic and spoilage bacteria. The sanitization is considered a critical processing step for minimally processed vegetables, although some of the synthetic sanitizers allowed for the use in vegetables are cited as responsible for undesirable effects to consumers. In this context, as alternative to the synthetic sanitizers arise the essential oils, whose antimicrobial action mechanism is attributed, many times, to their majority compounds. Regarding these aspects, this study aimed to evaluate the potential application of carvacrol and 1,8-cineole against some strains of minimally processed vegetables contaminant bacteria (Listeria monocytogenes ATCC 7644, Aeromonas hydrophila INCQS 7966 and Pseudomonas fluorescens ATCC 11253), in mixed culture, by determining the values of Minimum Inhibitory Concentration (MIC), the index of Fractional Inhibitory Concentration (FIC), as well as by assessing the efficacy of the application of these compounds in inhibiting the growth and survival of the mixed bacterial inoculum in vegetable broth and in leafy vegetables. Moreover, it was performed the assessment of possible damage caused by the tested compounds in the morphology of the bacterial cells by the analysis of confocal microscopy and scanning electronic microscopy. MIC values of carvacrol and 1,8-cineole ranged from 1.25 e 40μL/mL, respectively. The FIC index against the mixed bacterial inoculum was 0.25, suggesting a synergic interaction between the tested compounds. The application of the compounds alone or combined in sub-inhibitory concentrations in vegetable broth caused a significant decrease (p <0.05) in counts (CFU/mL) of the tested bacteria over 24 h. The exposure of vegetables to the compounds for only 5 min also caused a significant reduction (p < 0.05) in counts of the tested bacteria. The observations of bacterial cell morphology suggest that the compounds carvacrol and 1,8-cineole alone or combined in sub-inhibitory concentrations, cause damage to the cell viability, and change the permeability of the cytoplasmic membrane and the cell surface, with the appearance of roughness appearance and like-vesicles structures. These results show that carvacrol and 1,8-cineole possess strong inhibitory effect of the growth and survival of bacteria associated with minimally processed vegetables when tested in mixed culture. Still, these data confirm that constituents of essential oils, with different molecular structures, when applied in combination can replace traditional synthetic sanitizing used in minimally processed vegetables allowing reaching the balance between the demand for microbiological safety and sensory acceptability of these products. / A demanda por alimentos frescos, de baixo teor calórico, elevados valores nutricionais e de fácil preparo, tem elevado o consumo de hortaliças minimamente processadas. Entretanto, devido a sua intensa manipulação estes produtos têm sido considerados um potencial problema de segurança microbiológica, envolvendo principalmente bactérias psicrotróficas patogênicas e deteriorantes. A sanitização é considerada uma etapa crítica do processamento deste de hortaliças minimamente processadas, embora alguns dos sanitizantes sintéticos permitidos para uso em vegetais sejam citados como responsáveis por efeitos indesejáveis para o consumidor. Neste sentido, como alternativa aos sanitizantes sintéticos, surgem os óleos essenciais, cujo potencial antimicrobiano é atribuído, muitas vezes, aos seus compostos majoritários. Diante deste contexto, este estudo objetivou avaliar o potencial da aplicação dos constituintes carvacrol e 1,8-cineol na inibição de cepas de bactérias contaminantes de vegetais minimamente processados (Listeria monocytogenes ATCC 7644, Aeromonas hydrophila ATCC 7966 e Pseudomonas fluorescens ATCC 11253), em inóculo misto, através da determinação dos valores de Concentração Inibitória Mínima (CIM), do índice de Concentração Inibitória Fracionada (CIF), bem como da influência da aplicação desses compostos na inibição do crescimento e sobrevivência do inóculo misto bacteriano em caldo vegetal e em vegetais folhosos. Além disso, foi realizada a avaliação dos possíveis danos causados pelos compostos testados à morfologia das células bacterianas através de análises de microscopia confocal e microscopia eletrônica de varredura. Os valores de CIM do carvacrol e do 1,8-cineol foram 1,25 e 40 μL/mL, respectivamente. O índice de CIF frente ao inóculo bacteriano misto foi 0,25, sugerindo uma interação sinérgica entre os compostos testados. A aplicação dos compostos isolados ou combinados em concentrações sub-inibitórias em caldo vegetal causou uma diminuição significativa (p < 0,05) na contagem das bactérias ensaiadas (UFC/mL) ao longo de 24 h. A exposição das hortaliças aos constituintes por apenas 5 min também causou uma redução significativa (p < 0,05) nas contagens dos micro-organismos testados. As observações morfológicas das células bacterianas sugerem ainda que os compostos carvacrol e 1,8-cineol, isolados ou combinados em concentrações sub-inibitórias, ocasionam danos à viabilidade celular, bem como alteração da permeabilidade da membrana citoplasmática e da superfície celular, com o aparecimento de rugosidades e estruturas semelhantes a vesículas. Estes resultados mostram que carvacrol e 1,8-cineol possuem considerável poder de inibição do crescimento e sobrevivência de bactérias contaminantes de hortaliças minimamente processadas, quando ensaiadas em inóculo misto. Ainda, confirmam que constituintes de óleos essenciais, com diferentes estruturas moleculares, quando aplicados em combinação podem substituir sanitizantes sintéticos clássicos utilizados em vegetais, possibilitando o alcance do equilíbrio entre a demanda pela segurança microbiológica e a aceitabilidade sensorial destes produtos.
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