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Enxertia de plantas de pimentão em Capsicum spp. no manejo de nema tóides de galha /

Oliveira, Cristina Duda de. January 2007 (has links)
Resumo: O presente trabalho teve por objetivos avaliar: 1 - a utilização de aspersão de água e o repouso das suspensões de ovos e juvenis de Meloídogyne spp. pelos períodos de O; 5; 10; 15; 20; 25 e 30 minutos, na eliminação de espumas retidas sobre estes; 2 - a resistência a Me/oidogyne incogníta de 64 genótipos de pimenta Capsícum chínense; cinco da C. annuum; dois da C. baccatum e um da C. frutescens, e de dez cultivares comerciais de pimentão; 3 - a resistência a M. javaníca e a M. mayaguensis dos genótipos resistentes a M. íncognita; 4 - a compatibilidade da enxertia, dos genótipos resistentes a M. íncogníta, com os híbridos de pimentão Rubia R, Margarita e Maximos, nas fases de muda, de crescimento e na produtiva, e 5 - a manutenção da resistência dos porta-enxertos a M. íncogníta, ao final do ciclo da cultura. Os experimentos de aspersão de água e de repouso das suspensões foram conduzidos no Laboratório de Nematologia da UNESP-FCAV, em Jaboticabal-SP, no ano de 2004. Após a trituração das raízes de Capsicum spp., no experimento de aspersão de água, as suspensões foram vertidas na peneira com orifícios de 0,074 mm (200 mesh) sobre a peneira com orifícios de 0,025 mm (500 mesh) e lavadas, sendo as espumas, retidas sobre os ovos e juvenis na peneira de 500 mesh, aspergidas ou não com 50 mL de água, por 20 segundos. No experimento de repouso, após a trituração, as suspensões ficaram em repouso pelos períodos estabelecidos, sendo, na seqüência, vertidas sobre as peneiras e lavadas. Os experimentos de resistência de Capsicum spp. a Meloidogyne spp., de compatibilidade de enxertia e de manutenção da resistência a nematóides de galha, foram conduzidos em casa de vegetação, em Jaboticabal-SP, entre os anos de 2004 e 2005... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of the present work was to study: 1 - the utilization of water sprinkling and letting suspensions of eggs and juveniles of Meloidogyne spp. stand for periods of O; 5; 10; 15; 20; 25 and 30 min, to eliminate foam remaining on them; 2 resistance to Me/oidogyne incognita in 64 pepper genotypes of the species Capsicum chinense, five of C. Annuum, two of C. baccatum and one of C. frutescens, and of ten commercial pepper cultivars; 3 - resistance to M. javanica and M. mayaguensis in genotypes resistant to M. incognita; 4 - compatibility of grafting of genotypes resistant to M. incognita with the bell pepper hybrids Rubia R, Margarita and Maximos, during seedling, growth and productive phases; and 5 - maintenance of resistance of rootstocks to M. incognita at the end of the cultivation cycle. The experiments studying water sprinkling and letting suspensions stand were conducted in the Nematology Laboratory of UNESP-FCAV, at Jaboticabal-SP, during 2004. In nematode application with water sprinkling, the roots of Capsicum spp. were triturated, and the suspensions were poured over a sieve with a pore size of 0.074 mm (200 mesh) on top of a sieve with a pore size of 0.025 mm (500 mesh) and washed; the foam retained on the eggs and juveniles on the 500-mesh was sprinkled or not using 50 mL of water. In the experiment of letting suspensions stand, after trituration the suspensions were allowed to stand for the periods established, after which they were poured over the sieves and washed. The experiments on the resistance of Capsicum spp. to Meloidogyne spp., the compatibility of grafting and the maintenance of resistance to root-knot nematodes were conducted in a greenhouse, at Jaboticabal-SP, between 2004 and 2005. In experiments on resistance of the genotypes to Meloidogyne spp., ten plants were used per genotype, where each plant was considered a repetition... (Complete abstract click electronic access below) / Orientadora: Leila Trevizan Braz / Coorientador: David Ariovaldo Benzatto / Coorientador: Jaime Maia dos Santos / Banca: Arthur Bernardes Cecílio Filho / Banca: Clélia Aparecida Iunes Lapera / Banca: Rumy Goto / Banca: Izabel Cristina Leite / Doutor
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Podridão floral dos citros : variabilidade, sobrevivência e controle do agente causal, Colletotrichum acutatum /

Cintra, Gabriella Souza. January 2009 (has links)
Orientador: Antonio de Goes / Banca: Katia Cristina Kupper / Banca: Marcel Bellato Spósito / Banca: Eduardo Sanches Stuchi / Banca: Modesto Barreto / Resumo: Este estudo teve como objetivos: (i) identificar e caracterizar do ponto de vista genetico, morfológico e patogênico isolados de Colletotrichum acutatum, agente causal da doença Podridão floral dos citros; (ii) determinar fontes de inóculo e condições de sobrevivência deste patógeno em órgãos vegetativos; (iii) avaliar o controle da doença mediante o emprego de fungicidas, assim como os estádios de florescimento mais adequados para pulverização, em campo; (iv) avaliar o efeito pós e pré-infeccional de C. acutatum a fungicidas, em casa de vegetação e; (v) avaliar a sensibilidade de C. acutatum a fungicidas, in vitro. Isolados associados à PFC pertencem à espécie Colletotrichum acutatum. Há uma elevada variabilidade morfológica entre isolados de C. acutatum, indicativo de polimorfismo entre as populações. De acordo com as variáveis morfológicas avaliadas e, mediante análises exploratórias foram determinados seis grupos de isolados. Todos os estágios de florescimento, assim como a fase 'chumbinho' são suscetíveis a C. acutatum. As flores de plantas cítricas de laranjas doce 'Pêra', 'Natal', 'Valência', 'Hamlin' e 'Folha Murcha' mostraram-se suscetíveis a C. acutatum. Cálices retidos, pétalas e folhas são fontes de inóculo de C. acutatum. Colletotrichum acutatum sobrevive em cálices retidos e em folhas, no entanto, o maior número de colônias procedeu-se de cálices retidos. Colletotrichum acutatum sobrevive em folhas de plantas jovens. Os fungicidas sistêmicos, carbendazim, tiofanato-metílico e pyraclostrobin e o protetor folpet quando aplicados isoladamente em 'cabeça-de-fósforo' e 'cotonete' não diferiram entre si, portanto esses fungicidas tornam-se alternativas no controle da PFC. As aplicações de erradicante ou protetor nos estádios, primórdio floral e 'cabeça-de-alfinete' em combinação com fungicidas ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study aimed to: (i) identify and to characterize point of view genetic, morphologic and pathogenic isolates of Colletotrichum acutatum, causal agent of postbloom fruit drop; (ii) to determine inoculum sources and conditions for survival of this pathogen in vegetative organs; (iii) to evaluate disease control through the use of fungicides, as well as the flowering stage more suitable for spray field; (iv) evaluate the effect pos and pre-infection of C. acutatum to fungicides in the greenhouse and; (v) to evaluate sensitivity of C. acutatum to fungicide in vitro. Isolates associated with PFD belong to the specie Colletotrichum acutatum. There is a high morphological variability among isolates of C. acutatum, indicative of polymorphism among populations. According to the morphological and evaluated by exploratory analysis were determined six groups of isolates. All stages of flowering and the fruitlet are susceptible to C. acutatum. The flowers of citrus trees, of sweet orange 'Pera', 'Natal', 'Valencia', 'Hamlin' and 'Folha Murcha' were susceptible to C. acutatum. Persistent calyces, petals and leaves are sources of inoculum of C. acutatum. Colletotrichum acutatum survives in persistent calyces and in leaves, however the largest number of colonies was persistent calyces. Colletotrichum acutatum survives in leaves of young plants. The fungicides, carbendazim, thiophanate-methyl and pyraclostrobin and the protector folpet when applied alone in 'white bud' and 'hollow ball' did not differ, so these fungicides become alternatives to control of the PFD. The applications eradicative or protector in the stages, floral prime and 'green bud' in combination with fungicides in 'white bud' and 'hollow ball' is not different from the systemic applications alone, so the conditions under which experiments were performed, applications eradicative or protector became expendable. There was no ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Podridão floral dos citros: variabilidade, sobrevivência e controle do agente causal, Colletotrichum acutatum

Cintra, Gabriella Souza [UNESP] 05 October 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-10-05Bitstream added on 2014-06-13T19:21:47Z : No. of bitstreams: 1 cintra_gs_dr_jabo.pdf: 1086456 bytes, checksum: 617472b95305beb61a8b8caa42aa0eaf (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este estudo teve como objetivos: (i) identificar e caracterizar do ponto de vista genetico, morfológico e patogênico isolados de Colletotrichum acutatum, agente causal da doença Podridão floral dos citros; (ii) determinar fontes de inóculo e condições de sobrevivência deste patógeno em órgãos vegetativos; (iii) avaliar o controle da doença mediante o emprego de fungicidas, assim como os estádios de florescimento mais adequados para pulverização, em campo; (iv) avaliar o efeito pós e pré-infeccional de C. acutatum a fungicidas, em casa de vegetação e; (v) avaliar a sensibilidade de C. acutatum a fungicidas, in vitro. Isolados associados à PFC pertencem à espécie Colletotrichum acutatum. Há uma elevada variabilidade morfológica entre isolados de C. acutatum, indicativo de polimorfismo entre as populações. De acordo com as variáveis morfológicas avaliadas e, mediante análises exploratórias foram determinados seis grupos de isolados. Todos os estágios de florescimento, assim como a fase ‘chumbinho’ são suscetíveis a C. acutatum. As flores de plantas cítricas de laranjas doce ‘Pêra’, ‘Natal’, ‘Valência’, ‘Hamlin’ e ‘Folha Murcha’ mostraram-se suscetíveis a C. acutatum. Cálices retidos, pétalas e folhas são fontes de inóculo de C. acutatum. Colletotrichum acutatum sobrevive em cálices retidos e em folhas, no entanto, o maior número de colônias procedeu-se de cálices retidos. Colletotrichum acutatum sobrevive em folhas de plantas jovens. Os fungicidas sistêmicos, carbendazim, tiofanato-metílico e pyraclostrobin e o protetor folpet quando aplicados isoladamente em ‘cabeça-de-fósforo’ e ‘cotonete’ não diferiram entre si, portanto esses fungicidas tornam-se alternativas no controle da PFC. As aplicações de erradicante ou protetor nos estádios, primórdio floral e ‘cabeça-de-alfinete’ em combinação com fungicidas... / This study aimed to: (i) identify and to characterize point of view genetic, morphologic and pathogenic isolates of Colletotrichum acutatum, causal agent of postbloom fruit drop; (ii) to determine inoculum sources and conditions for survival of this pathogen in vegetative organs; (iii) to evaluate disease control through the use of fungicides, as well as the flowering stage more suitable for spray field; (iv) evaluate the effect pos and pre-infection of C. acutatum to fungicides in the greenhouse and; (v) to evaluate sensitivity of C. acutatum to fungicide in vitro. Isolates associated with PFD belong to the specie Colletotrichum acutatum. There is a high morphological variability among isolates of C. acutatum, indicative of polymorphism among populations. According to the morphological and evaluated by exploratory analysis were determined six groups of isolates. All stages of flowering and the fruitlet are susceptible to C. acutatum. The flowers of citrus trees, of sweet orange 'Pera', 'Natal', 'Valencia', 'Hamlin' and 'Folha Murcha' were susceptible to C. acutatum. Persistent calyces, petals and leaves are sources of inoculum of C. acutatum. Colletotrichum acutatum survives in persistent calyces and in leaves, however the largest number of colonies was persistent calyces. Colletotrichum acutatum survives in leaves of young plants. The fungicides, carbendazim, thiophanate-methyl and pyraclostrobin and the protector folpet when applied alone in 'white bud' and 'hollow ball' did not differ, so these fungicides become alternatives to control of the PFD. The applications eradicative or protector in the stages, floral prime and ‘green bud’ in combination with fungicides in 'white bud' and 'hollow ball' is not different from the systemic applications alone, so the conditions under which experiments were performed, applications eradicative or protector became expendable. There was no ... (Complete abstract click electronic access below)
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Enxertia de plantas de pimentão em Capsicum spp. no manejo de nema tóides de galha

Oliveira, Cristina Duda de [UNESP] 22 February 2007 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-22Bitstream added on 2014-06-13T19:23:54Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_cd_dr_jabo_prot.pdf: 6450834 bytes, checksum: 54ef6c225a3ecd6cbc9589a230eb0ac4 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente trabalho teve por objetivos avaliar: 1 - a utilização de aspersão de água e o repouso das suspensões de ovos e juvenis de Meloídogyne spp. pelos períodos de O; 5; 10; 15; 20; 25 e 30 minutos, na eliminação de espumas retidas sobre estes; 2 - a resistência a Me/oidogyne incogníta de 64 genótipos de pimenta Capsícum chínense; cinco da C. annuum; dois da C. baccatum e um da C. frutescens, e de dez cultivares comerciais de pimentão; 3 - a resistência a M. javaníca e a M. mayaguensis dos genótipos resistentes a M. íncognita; 4 - a compatibilidade da enxertia, dos genótipos resistentes a M. íncogníta, com os híbridos de pimentão Rubia R, Margarita e Maximos, nas fases de muda, de crescimento e na produtiva, e 5 - a manutenção da resistência dos porta-enxertos a M. íncogníta, ao final do ciclo da cultura. Os experimentos de aspersão de água e de repouso das suspensões foram conduzidos no Laboratório de Nematologia da UNESP-FCAV, em Jaboticabal-SP, no ano de 2004. Após a trituração das raízes de Capsicum spp., no experimento de aspersão de água, as suspensões foram vertidas na peneira com orifícios de 0,074 mm (200 mesh) sobre a peneira com orifícios de 0,025 mm (500 mesh) e lavadas, sendo as espumas, retidas sobre os ovos e juvenis na peneira de 500 mesh, aspergidas ou não com 50 mL de água, por 20 segundos. No experimento de repouso, após a trituração, as suspensões ficaram em repouso pelos períodos estabelecidos, sendo, na seqüência, vertidas sobre as peneiras e lavadas. Os experimentos de resistência de Capsicum spp. a Meloidogyne spp., de compatibilidade de enxertia e de manutenção da resistência a nematóides de galha, foram conduzidos em casa de vegetação, em Jaboticabal-SP, entre os anos de 2004 e 2005... / The aim of the present work was to study: 1 - the utilization of water sprinkling and letting suspensions of eggs and juveniles of Meloidogyne spp. stand for periods of O; 5; 10; 15; 20; 25 and 30 min, to eliminate foam remaining on them; 2 resistance to Me/oidogyne incognita in 64 pepper genotypes of the species Capsicum chinense, five of C. Annuum, two of C. baccatum and one of C. frutescens, and of ten commercial pepper cultivars; 3 - resistance to M. javanica and M. mayaguensis in genotypes resistant to M. incognita; 4 - compatibility of grafting of genotypes resistant to M. incognita with the bell pepper hybrids Rubia R, Margarita and Maximos, during seedling, growth and productive phases; and 5 - maintenance of resistance of rootstocks to M. incognita at the end of the cultivation cycle. The experiments studying water sprinkling and letting suspensions stand were conducted in the Nematology Laboratory of UNESP-FCAV, at Jaboticabal-SP, during 2004. In nematode application with water sprinkling, the roots of Capsicum spp. were triturated, and the suspensions were poured over a sieve with a pore size of 0.074 mm (200 mesh) on top of a sieve with a pore size of 0.025 mm (500 mesh) and washed; the foam retained on the eggs and juveniles on the 500-mesh was sprinkled or not using 50 mL of water. In the experiment of letting suspensions stand, after trituration the suspensions were allowed to stand for the periods established, after which they were poured over the sieves and washed. The experiments on the resistance of Capsicum spp. to Meloidogyne spp., the compatibility of grafting and the maintenance of resistance to root-knot nematodes were conducted in a greenhouse, at Jaboticabal-SP, between 2004 and 2005. In experiments on resistance of the genotypes to Meloidogyne spp., ten plants were used per genotype, where each plant was considered a repetition... (Complete abstract click electronic access below)
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Indução da esporulação de stenocarpella maydis / Induction of sporulation of the Stenocarpella maydis

Kuhnem Júnior, Paulo Roberto 03 February 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV09MA040.pdf: 1813024 bytes, checksum: fd828a9db77a0c94957d7cf4a2f333a1 (MD5) Previous issue date: 2009-02-03 / The fungus Stenocarpella maydis usually can cause corn stalk and ear rot. There is little data on the genetic resistance of maize plants to S. maydis. The Stenocarpella resistance has been investigated around the world by artificial inoculation techniques with inoculum produced mostly in fragments of maize plant and sorghum and oats grains. The amount of inoculum produced by these techniques is low, require a long period of incubation to gave a satisfactory inoculum levels. Despite of the substrate, temperature and luminosity are essential factors to stimulate the pathogens sporulation. The objective of this study was to determine an easy, quick and reproducible method by relative low cost to induce the S. maydis sporulation. The experiments were carry out at the Plant Pathology Laboratory at the Centro de Ciências Agroveterinárias- CAV/UDESC during the years 2007/08. The S. maydis monosporic isolate was obtained from commercial crops naturally infected in the Aberlado Luz County, Santa Catarina State. Preliminary were carry out a experiment with 20 potentials natural substrates from grains and leaves and stalks fragments of different plants like, sorghum, wheat, white oat, black oat, rye, barley and maize , with the objective to select the most promising substates. Were discarded 13 substrates by not present desirable features in any stage of preparation, maintenance, production and conidia amount. The remained 07 natural substrates based in grains of sorghum, wheat, white and black oat, rye, barley and maize were submitted to temperatures of 21, 24, 27, 30 and 33ºC on continuous light systems and darkness by period of 12 hours Each substrate was soaked in 100 mL of water for 24 hours in Erlenmeyer. After removal of excess water, the grains were sterilized twice in autoclave by 20 min at 127ºC. In each flask were added three disks of fungus mycelium. The material was incubated in growth chamber according to the different temperatures and light regimes. For each treatment three replicates were used. The assessment of the conidia number per gram of grains and conidia viability were measured at 15 days of incubation. The data of conidia number per gram of grain and conidia viability were transformed into √ (x +1) and subjected to analysis of variance and compared by Bonfferroni test by 1% of significance. Subsequent tests were done with the best natural substrates with the objective to evaluate differences between cultivars and the incubation period on the conidia production and viability. Many cereal grains, oil seeds and crushed fragments of maize can not be used as substrates to induce S. maydis sporulation. The grains of barley, black oat and wheat were the best ones for S. maydis conidia production and viability. The barley grain was the natural substrate that showed the biggest conidia production. The conidia production and viability were influenced by temperature and photoperiod. The S. maydis developed better at temperature of 27ºC and 12 h of photoperiod. There is conidia number variation among barley cultivars, which was not checked for viability of conidia. Same procedure was performed with Stenocarpella macrospora, however not obtained enough for measurement of spore production and germination of conidia. Keywords: Conidia. Diplodia. inoculum production. Zea mays / O fungo Stenocarpella maydis comumente causa podridão do colmo e da espiga em milho. Pouca informação existe sobre a resistência genética de plantas de milho à S. maydis. A resistência à Stenocarpella vem sendo investigada em diversas partes do mundo por técnicas de inoculação artificial a partir de inóculo produzido, principalmente, em fragmentos da planta de milho e grãos de sorgo e aveia. Neste caso, a quantidade de inóculo produzido é baixa, necessitando longo período de incubação para a produção de inóculo em níveis satisfatórios. Além do substrato, temperatura e luminosidade são fatores essenciais para estimular a esporulação dos fitopatógenos. O objetivo deste trabalho foi determinar um método fácil, rápido, reproduzível e de baixo custo para a indução à esporulação de S. maydis. O experimento foi conduzido no Laboratório de Fitopatologia Centro de Ciências Agroveterinárias da Universidade do Estado de Santa Catarina, CAV/UDESC, Lages, SC, em 2008. O isolado monospórico do fungo foi obtido de grãos de milho naturalmente infectados oriundos de lavouras comerciais de município de Abelardo Luz, SC. Previamente foram realizados ensaios com 20 possíveis substratos naturais a partir de compostos de grãos, fragmentos de folhas e colmos de plantas como sorgo, trigo, aveia branca, aveia preta, centeio, cevada e milho a fim de selecionar os mais promissores. Foram descartados 13 diferentes substratos naturais que não apresentaram caracteristicas desejáveis em qualquer etapa de preparação, manutenção, produção e contagem de conídios. Os 07 substratos naturais de grãos de sorgo, trigo, aveia branca, aveia preta, centeio, cevada e milho, foram submetido às temperaturas de 21, 24, 27, 30 e 33ºC, em regimes de luz contínua, escuro e por período de 12 horas. Cada substrato foi embebido em 100 mL de água por 24 horas em Erlenmyers. Após a remoção do excesso de água os grãos foram esterilizados por duas autoclavagens por 20 min a 127ºC. Em cada Erlenmeyer foram inseridos três discos de micélio do fungo. O material foi incubado em câmara de crescimento nas respectivas temperaturas e regimes de luz. Para cada tratamento foram utilizadas três repetições. A avaliação do número de conídios por grama de grãos e a viabilidade dos conídios foi quantificada aos 15 dias de incubação. Os dados do número de conídios/g de grãos e a viabilidade dos conídios foram transformados em √(x+1) e submetidos a análise de variância e comparados pelo teste de Bonfferroni a 1% de significância. Posteriormente foi realizado ensaio com o melhor substrato natural com o objetivo de avaliar diferenças entre cultivares e tempo de incubação na produção e viabilidade de conídios. Muitos grãos de cereais, oleaginosas e fragmentos de milho não podem ser usados como substratos para induzir a esporulação de S. maydis. Os grãos de cevada, aveia preta e trigo foram os melhores para produção e viabilidade de conídios de S. maydis. A cevada foi o substrato natural que apresentou a maior produção de conídios. A produção de conídios e a viabilidade são influenciadas pela temperatura e fotoperiodo, sendo que S. maydis responde melhor a temperatura de 27 ºC e fotoperíodo 12 h. Existe variação entre cultivares de cevada para número de conídios, o que não foi verificado para viabilidade de conídios. Procedimento igual foi realizado com Stenocarpella macrospora, no entanto não se obteve esporulação suficiente para mensuração da produção e germinação de conídios
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Indução da supressividade à murcha-de-fusário do caupi pela adubação verde

OLIVEIRA, Saulo Alves Santos de 22 February 2008 (has links)
Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-03-23T15:01:07Z No. of bitstreams: 1 Saulo Alves Santos de Oliveira.pdf: 568684 bytes, checksum: 71c7b0fec544e230da1790c5e7f73322 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-23T15:01:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Saulo Alves Santos de Oliveira.pdf: 568684 bytes, checksum: 71c7b0fec544e230da1790c5e7f73322 (MD5) Previous issue date: 2008-02-22 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The cowpea (Vigna unguiculata) is a crop of great economical and strategic importance, mainly for the Northeast region of Brazil. In the state of Pernambuco, the main cowpea production areas are located in Agreste and Sertão regions. Fusarium wilt, caused by Fusarium oxysporum f.sp. tracheiphilum, is an important cowpea disease worldwide. This work aimed to evaluate the potential of green manure in inducing suppressiveness to Fusarium wilt as well as to identify the factors related to suppressivity. The experiment was carried out in greenhouse conditions. A sandy loam soil with no native populations of F. oxysporum was used. Eleven treatments were compared after soil infestation with F. oxysporum f.sp. tracheiphilum. Different combinations of non-cropping, cowpea (cv. BR-17 Gurguéia) and green manures (showy crotalaria, sunn hemp, mucuna, lablab, canavalia and pigeonpea), in four growing seasons, were compared. Disease severity evaluations along with microbial and chemical characteristics of soil were carried out at the end of the 2nd and 4th growing seasons. For the two evaluations, the incorporation of sunn hemp into the soil led to smallest levels of severity (SVD) of cowpea Fusarium wilt. There was no correlationbetween F. oxysporum population density in soil and SVD. For the first evaluation (2nd season), SVD was negative correlated (r = -0.69) with Bacillus sp. population. Thus, this bacteria was regarded a suppressiveness factor. For the 4th growing season, no significant correlation between SVD and soil microbiological characteristics was found. These results suggest that other mechanisms are involved in disease suppressivenes. Despite the reduction in SVD by sunn hemp incorporation, more studies are necessary to clarify the factors inducing suppressiveness to Fusarium wilt before sunn hemp is recommended for commercial plantations. It is worth considering that the disease suppression in greenhouse conditions does not guarantee similar levels of suppression in commercially cultivated areas under diverse conditions of soil, environment conditions, and management. / O caupi (Vigna unguiculata) é uma cultura de grande importância econômica e estratégica, principalmente para a região Nordeste do Brasil. No estado de Pernambuco, as principais áreas de produção concentram-se nas microrregiões do Agreste e Sertão. A murcha-de-fusário, causada por Fusarium oxysporum f.sp. tracheiphilum, é uma importante doença do caupi nas regiões Norte e Nordeste do Brasil. Este estudo objetivou avaliar o potencial da utilização de adubos verdes na indução da supressão à doença e identificar os possíveis fatores responsáveis pela supressividade. O experimento foi conduzido em casa de vegetação, em solo franco arenoso, no qual não foram detectadas populações autóctones de F. oxysporum. Após a infestação do solo com F. oxysporum f.sp. tracheiphilum, foram comparados 11 tratamentos, considerando diferentes combinações de pousio, caupi (cv. BR-17 Gurguéia) e adubos verdes (crotalária juncea, crotalária spectabilis, feijão-de-porco, guandu, labe-labe e mucuna-preta), em quatro ciclos de cultivo. As avaliações da severidade da doença e das características microbianas e químicas dos solos foram realizadas ao final do 2° e do 4° ciclo de cultivo. Nas duas avaliações, a incorporação de crotalária juncea ao soloproporcionou os menores níveis de severidade (SVD) da murcha-de-fusário em caupi, enquanto os demais adubos verdes não foram eficientes na redução da SVD. Não houve correlação entre a densidade populacional de F. oxysporum no solo e a SVD nas duas avaliações. Na primeira avaliação (2° ciclo), a SVD apresentou correlação negativa significativa (r = -0,69) com a população de Bacillus sp., sendo esta bactéria identificada como um fator de supressividade. Não foram constatadas correlações significativas entre SVD e as características microbiológicas dos solos ao final do 4º ciclo de cultivo, indicando que outros mecanismos podem estar envolvidos na supressividade da doença. Apesar da redução da SVD pela adubação verde com crotalátia juncea tornam-se necessários mais estudos sobre os fatores responsáveis pela supressividade à murcha-de-fusário para a adoção efetiva da crotalária juncea em plantios comerciais, já que a supressão da doença na casa de vegetação ou pequenas parcelas não garante níveis similares de supressão em campos de produção sob diversas condições de solo e ambiente, bem como diversas opções de manejo.
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Aplicação de Bacillus cereus e Enterococcus faecalis, isolados de bacalhau seco salgado (Gadus sp), no tratamento de resíduos sólidos agroindustriais salinos por compostagem controlada / Aplication of Bacillus cereus and Enterococcus faecalis. strains isolated from salted dry cod (Gadus sp.) in the treatment of saline agrodindustrial solid waste by controlled microcomposting

Araujo, Thayli Ramires 21 May 2018 (has links)
Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2018-07-27T22:02:00Z No. of bitstreams: 1 Dissertação THAYLI RAMIRES ARAUJO 2018.pdf: 1826233 bytes, checksum: bb42c5caf9e8edf5af4dce72d1cca93f (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2018-07-31T19:05:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação THAYLI RAMIRES ARAUJO 2018.pdf: 1826233 bytes, checksum: bb42c5caf9e8edf5af4dce72d1cca93f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-31T19:05:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação THAYLI RAMIRES ARAUJO 2018.pdf: 1826233 bytes, checksum: bb42c5caf9e8edf5af4dce72d1cca93f (MD5) Previous issue date: 2018-05-21 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / A atividade das agroindústrias tem causado impactos ao meio ambiente, dentre eles a contaminação de solo, águas subterrâneas e superficiais, atmosfera. Na indústria de alimentos o sal é utilizado em diversas etapas de processamento de alimentos, e também é considerado o ingrediente mais consumido pelos humanos. Na indústria pesqueira marítima o sal está presente desde a descarga de material e o efluente gerado quando tratado origina o chamado lodo de estação de efluentes de pescado salgado, esse resíduo lançado ao meio ambiente sem tratamento acarreta sérios problemas ambientais, tais como a inibição da microbiota natural do meio afetando o ciclo biogeoquímico. Uma das ferramentas para o tratamento desse resíduo salino é o processo de compostagem, que pode ser aplicada no tratamento de diversos resíduos sólidos agroindustriais. Uma questão a ser discutida é a presença de sal nesse resíduo. A pressão osmótica provoca a inibição do crescimento (atividade) da microbiota natural podendo levá-la a morte por extravasamento do conteúdo celular. Para solucionar esses problemas apresentados, a adição de cepas halofílicas e/ou halotolerantes seria uma alternativa para que ocorra a compostagem desse resíduo salino. Portanto, um dos objetivos desse trabalho foi isolar e identificar por PCR bactérias halofílicas de uma matriz alimentar salgada como o bacalhau seco salgado. Os resultados demostraram que as cepas Bacillus cereus, Enterococcus faecalis e Lactobacillus spp foram as mais promissoras quando submetidas a multiplicação bacteriana em caldo suplementado com 7,5% de NaCl. Outro objetivo deste trabalho constituiu em avaliar através de parâmetros físico-químicos a microcompostagem da mistura de lodo de pescado salino, casca-de-arroz e serragem com a adição de B. cereus, E. faecalis e consórcio delas nos dias de processo de compostagem. Os resultados demonstraram eficácia na queda da condutividade elétrica no período estudado pelas cepas utilizadas nos tratamentos. O pH apesar de ter apresentado queda durante a compostagem se manteve acima de 6, padrão estabelecido pela legislação brasileira para comercialização do composto. Durante todo o período de compostagem, o teor de nitrogênio encontrado permaneceu em porcentagens baixas, devido ao uso de bactérias halotolenrantes, apesar de serem utilizadas como probióticas causam a desnitrificação, assim elevando o percentual de nitrogênio no decorrer do experimento. Em relação ao carbono a porcentagem de carbono teve uma queda o insignificativa durante o processo, a porcentagem de carbono encontrada durante o experimento é respondido pela alta atividade microbiana obtido em porcentagens de carbono abaixo dos 45% ao final dos 26 dias de incubação. A umidade para os tratamentos com adição de probióticos estiveram dentro do padrão estipulado pelo MAPA, entre 40 e 60%, contrariamente dos tratamentos sem os inóculos que apresentaram valores acima. E a matéria mineral, apresentou valores maiores ao final da compostagem devido a ação microbiana e a redução da matéria orgânica e formação de minerais. O lodo de pescado salino de estação de tratamento de efluentes obteve melhores resultados com adição de inóculo, como adição de outro resíduo rico em nitrogênio, modificação de volume/volume e material estruturante, e maior tempo de compostagem. Apesar dessas observações os resultados apresentados foram dentro dos padrões da legislação brasileira. / The activity of the agroindustries has caused impacts to the environment, among them the contamination of soil, groundwater and surface, atmosphere. In the food industry, salt is used in several stages of food processing, and is also considered the most consumed ingredient by humans. In the marine fishing industry salt is present since the discharge of material and the effluent generated when treated gives rise to so-called salty fish effluent seasoning, this waste released to the environment without treatment causes serious environmental problems such as the inhibition of the microbiota natural environment affecting the biogeochemical cycle. One of the tools for the treatment of this saline residue is the composting process, which can be applied in the treatment of various agroindustrial solid wastes. One issue to be discussed is the presence of salt in this residue. The osmotic pressure causes the inhibition of the growth (activity) of the natural microbiota and can lead to death by extravasation of the cellular content. To solve these problems, the addition of halophilic and / or halotolerant strains would be an alternative for the composting of this saline residue. Therefore, one of the objectives of this work was to isolate and identify, by PCR, halophilic bacteria from a salt food matrix such as salted dry cod. The results showed that the Bacillus cereus, Enterococcus faecalis and Lactobacillus spp strains were the most promising when submitted to bacterial multiplication in broth supplemented with 7.5% NaCl. Another objective of this work was to evaluate the microcompaction of the sludge mixture of saline fish, rice husk and sawdust with the addition of B. cereus, E. faecalis and their consortium in the days of the composting process. The results demonstrated efficacy in the reduction of the electrical conductivity in the period studied by the strains used in the treatments. The pH, even though it showed a drop during composting, remained above 6, a standard established by the Brazilian legislation for the commercialization of the compost. During the whole composting period, the nitrogen content remained low, due to the use of halotolenating bacteria, although they are used as probiotics, causing denitrification, thus raising the percentage of nitrogen during the experiment. In relation to carbon the percentage of carbon had an insignificant drop during the process, the percentage of carbon found during the experiment is answered by the high microbial activity obtained in carbon percentages below 45% at the end of the 26 days of incubation. The humidity for the treatments with addition of probiotics were within the standard stipulated by MAPA, between 40 and 60%, contrary to the treatments without the inocula that presented values above. And mineral matter presented higher values at the end of composting due to microbial action and reduction of organic matter and mineral formation. The saline fish sludge from the effluent treatment station obtained better results with addition of inoculum, as addition of another residue rich in nitrogen, modification of volume / volume and structuring material, and greater time of composting. Despite these observations, the results presented were within the brazilian legislation.
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ProduÃÃo de Proteases por Aspergillus em FermentaÃÃo Semi-sÃlida utilizando Torta de Canola / PRODUCTION PROTEASES FOR ASPERGILLUS BY SOLID-STATE FERMENTATION USING THE CANOLA OIL CAKE

Adriana Crispim de Freitas 19 February 2009 (has links)
As proteases fazem parte da classe de enzimas com a capacidade de hidrolisar ligaÃÃes peptÃdicas em proteÃnas e fragmentos de proteÃnas, modificando os substratos com grande seletividade e especificidade. A fermentaÃÃo semi-sÃlida à um processo fermentativo no qual o crescimento do microrganismo e a formaÃÃo dos produtos ocorrem na superfÃcie do substrato sÃlido prÃximo à ausÃncia de Ãgua livre, geralmente utilizando matÃria-prima natural como fonte de carbono e energia. Realizou-se neste estudo o cultivo semi-sÃlido de fungos filamentosos, visando à produÃÃo de proteases utilizando como substrato a torta de canola. Avaliando-se, em um primeiro estudo, o potencial de diferentes linhagens de Aspergillus para a produÃÃo de proteases. As linhagens estudadas foram Aspergillus niger (CNPAT 001, IOC 207, IOC 4222, IOC 4220 e IOC 3883) e Aspergillus oryzae IV. A melhor linhagem obtida para a produÃÃo de protease foi a linhagem de Aspergillus oryzae IV. Em seguida, estudou-se a influÃncia da adiÃÃo de diferentes volumes de Ãgua a torta, onde a melhor produÃÃo foi obtida nos meios com proporÃÃo 40 mL de Ãgua para 100 g de torta. Determinada a melhor umidade do meio, avaliou-se a temperatura de incubaÃÃo, os melhores resultados obtidos foram em meios incubados a 20ÂC. Na sequÃncia, foram feitos estudos para determinaÃÃo da melhor concentraÃÃo de inÃculo, as concentraÃÃes testas foram 1Ã104, 1Ã105, 1Ã106 e 1Ã107 esporos por grama de meio, sendo 1Ã107 a melhor concentraÃÃo analisada. Avaliou-se a influÃncia da suplementaÃÃo do meio fermentativo com fontes de fÃsforo, carbono e nitrogÃnio. A suplementaÃÃo da torta de canola, com 1% (m/m) de fosfato de sÃdio monobÃsico nÃo influenciou positivamente na produÃÃo de proteases. A suplementaÃÃo do meio com diferentes fontes de nitrogÃnio foram estudadas na proporÃÃo de 1,0 % (m/m) em relaÃÃo ao peso do substrato, sendo o extrato de levedura a melhor fonte avaliada, apresentando maior produÃÃo de proteases. Em seguida, testou-se o perÃodo de incubaÃÃo do meio sem suplementaÃÃo de nutrientes, entre 0 e 240 horas de fermentaÃÃo com amostras sendo retiradas a cada 24 h de processo fermentativo. A maior produÃÃo ocorreu em 96 h com produÃÃo de 336 U.g-1 de proteases. ApÃs esta etapa, avaliou-se a suplementaÃÃo do meio com diferentes fontes de carbono em diferentes concentraÃÃes, 1,0; 2,0; 3,0; 4,0; 5,0; 7,5; 10,0; 12,5 15,0 % (m/m) em relaÃÃo ao peso do substrato, a maior produÃÃo de proteases ocorreu no meio com adiÃÃo de glicose na concentraÃÃo de 7,5 % obtendo 452 U.g-1. Na Ãltima etapa, fez-se a caracterizaÃÃo do meio ao longo do processo fermentativo, atravÃs de determinaÃÃes analÃticas de ordem quÃmicas e fÃsico-quÃmicas. A maior produÃÃo de proteases obtida foi de 452 U.g-1 em 96 horas de processo fermentativo, nos meios suplementados com 7,5 % de glicose, nas seguintes condiÃÃes fermentativas: temperatura de incubaÃÃo do meio a 20ÂC, torta umedecida com 40 mL de Ãgua por 100 g de substrato e concentraÃÃo de inÃculo de 1Ã107 esporos.g-1. / The proteases belong to the class of enzymes with the capacity to hydrolyze peptidic connections into protein and protein fragments, modifying the substrate by great selectivity and specification. The semi-solid fermentation is a fermentation process in which the growth of microorganisms and the formation of the products occur on the surface of the solid substrate next to the absence of free water, usually using natural raw materials as a source of carbon and energy. On this study, it was done the semi solid cultivation of filament fungi, in order to produce proteases using as a substrate a cake of canola. It was evaluated, in a first study, the potential of different strains of Aspergillus for the production of proteases. The strains studied were Aspergillus niger (CNPAT 001, IOC 207, IOC 4222, IOC 4220 and IOC 3883) and Aspergillus oryzae IV. The best strain obtained for the production of protease was a strain of Aspergillus oryzae IV. Later on, it was studied the influence of the different quantities of water and coke canola added; the best production was obtained in proportion with 40 mL of water to 100 g of cake. After determination to medium of moisture, was evaluated the temperature of incubation, the best results were obtained in media incubated at 20 C. Further, studies were done to determine the best concentration of inoculum, the concentrations tested were 1 à 104, 1 à 105, 1 à 106 and 1 à 107 spores per gram of medium, being 1 à 107 to better concentration analyzed. The influence of supplementation of fermentation medium with sources of phosphorus, carbon and nitrogen was evalueted. Supplementation of the cake of canola, with 1% (w/w) monobasic sodium phosphate did not influence positively the production of proteases. Supplementation of medium with different sources of nitrogen were studied in the proportion of 1.0% (w/w) in the weight of the substrate, being the yeast extract of the best source evaluated, showing increased production of proteases. Then, it was tested the incubation period of the medium without supplementation of nutrients, between 0 and 240 hours of fermentation with samples being removed every 24 h of fermentation process. The highest production occurred at 96 h with production of 336 U.g-1 protease. After this stage, was evaluated the supplementation of medium with different carbon sources at different concentrations, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0, 7.5, 10.0, 12, 5 15.0 % (w/w) in the weight of the substrate; the increased production of proteases occurred in the medium with the addition of glucose at a concentration of 7.5 % obtaining 452 Ug-1. In the last stage, was performed the characterization of the medium during the fermentation process by of a chemical and physicochemical analytical determinations. The increased production of proteases obtained was 452 U.g-1 in 96 hours of fermentation process, in media supplemented with 7.5 % glucose, at the fermentation conditions: temperature of incubation of the medium at 20 C, damp cake with 40 mL water per 100 g of substrate and concentration of inoculum of 1 à 107 spores.g-1.
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Reação de cultivares de soja a Meloidogyne incognita e M. javanica / Reaction of soybean cultivars to Meloidogyne incongnita and M. javanica

Teixeira, Renato Andrade 28 February 2013 (has links)
Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-04-20T20:30:17Z No. of bitstreams: 2 Tese - Renato Andrade Teixeira - 2013.pdf: 891118 bytes, checksum: 3dbc3af80e3adaf1035bdf07f259d219 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-04-20T20:35:17Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Renato Andrade Teixeira - 2013.pdf: 891118 bytes, checksum: 3dbc3af80e3adaf1035bdf07f259d219 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-20T20:35:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Renato Andrade Teixeira - 2013.pdf: 891118 bytes, checksum: 3dbc3af80e3adaf1035bdf07f259d219 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 / Soybean has great economic importance for Brazil, which is among the major producing countries. The crop is attacked by various pathogens and among them are the nematodes of the genera Meloidogyne that can reduce the yeld. Among the various methods of control the use of resistant cultivars is one of them, but there are several cultivars still without information about its reaction to this genera of nematodes. In this study we evaluated the response of soybean cultivars to Meloidogyne incognita race 3 and Meloidogyne javanica, and the penetration of these nematodes in soybean cultivars exposed to different inoculoum concentrations. The experiments were conducted in a greenhouse installed at the Universidade Federal de Goiás, Goiânia, GO. Seeds were planted into a sterilized substrate and the seedlings were inoculated with M. incognita or M. javanica eggs and J2. In assessing the cultivars response to the nematodes we evaluated the population density (eggs and J2/10 g root) and reproduction factor (RF) at 60 days after inoculation. In another experiment the penetration of nematodes was observed at 10 days after inoculation by counting the number of J2 and J3 within the plant tissue. 45 days after inoculation the population density (eggs and J2/10 g root) was also evaluated. M. incognita had the RF < 1,0 in most of the cultivars tested and M. javanica had RF > 1,0 in all the cultivars. By using Moura & Régis (1987) criteria fifteen cultivars were ranked as resistant or highly resistant and none as registant to M. javanica. In general, the increase of inoculum concentration increased the amount of nematodes in the roots. / A cultura da soja tem grande importância econômica para o Brasil, a qual está entre os principais países produtores. Esta cultura é atacada por vários patógenos e entre esses estão os nematoides do gênero Meloidogyne, responsáveis pela redução de produtividade de grãos. Entre os vários métodos de controle, tem-se o uso de cultivares resistentes, mas ainda existem várias cultivares com ausência de informação sobre suas reações. Neste trabalho, avaliou-se a reação de cultivares de soja a Meloidogyne incognita raça 3 e M. javanica, e a penetração dos nematoides em cultivares de soja submetidas a diferentes concentrações de inóculo. Os experimentos forma conduzido em condições de casa de vegetação na Universidade Federal de Goiás, no município de Goiânia, GO. Para a semeadura utilizou-se copos plásticos de 400 mL de capacidade contendo substrato esterilizado composto de solo e areia na proporção de 1:1. A inoculação artificial com ovos e J2 do nematoide ocorreram treze dias após a semeadura. Na avaliação da reação das cultivares foram consideradas a densidade populacional (ovos e J2/10 g de raiz) e fator de reprodução (FR) aos 60 dias após a inoculação. A penetração dos nematoides foi avaliada aos 10 dias após a inoculação, medida pela quantidade de J2 e J3 no interior das raízes e, aos 45 dias após a inoculação, avaliou-se a densidade populacional (ovos e J2/10 g de raiz). Para a espécie M. incognita, o FR da maioria das cultivares foram abaixo de um e para M. javanica todos tiveram FR > 1,0. Assim, utilizando o critério de Moura & Régis (1987) quinze cultivares foram classificadas como resistentes ou altamente resistentes a M. incognita e todas foram consideradas suscetíveis a M. javanica. Em geral, quanto maior a concentração de inóculo maior foi a quantidade de nematoides nas raízes de soja.
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Uso de inóculo de fezes como substituição do conteúdo ruminal de bubalinos na técnica in vitro de produção de gases / Use of faeces as inoculum as alternative for buffalo rumen contents in the in vitro gas production technique

Nancy Rodrigues Simões 17 February 2012 (has links)
Com o objetivo de estudar o uso de inóculo de fezes em substituição do conteúdo ruminal de bubalinos na técnica in vitro de produção de gases, este presente trabalho comparou as avaliações realizadas em três ensaios. Foram utilizados três bubalinos da raça Mediterrâneo, machos, adultos, castrados, fistulados no rúmen com média de peso vivo de 450 (± 18,7) kg. Estes animais receberam uma dieta basal, composta de silagem de milho (70%) e concentrado (30%). Estes animais foram os doadores dos 2 tipos de inóculos, que foram conteúdo ruminal (CR) e fezes. O primeiro ensaio realizado foi com alimentos concentrados: grão de milho, farelo de soja, farelo de trigo e farelo de algodão; o segundo ensaio foi com leguminosas forrageiras: alfafa (Medicago sativa L. ), estilosantes pioneiro (Stylosanthes macrocephala cv. Pioneiro), soja perene (Neonotonia wightii) e leucena (Leucaena leucocephala); e o terceiro e último ensaio foi realizado com gramíneas forrageiras: capim braquiarão (Brachiaria brizantha cv. Marandu), capim buffel (Cenchrus ciliaris L. cv. Biloela), estrela africana (Cynodon plectostachyus) e capim mombaça (Panicum maximum Jacq. cv. Mombaça). Os valores médios obtidos de produção potencial de gases em cada ensaio foram menores (P&lt;0,05) para as amostras fermentadas com inóculos de fezes que com conteúdo ruminal, sendo respectivamente, para concentrados (140,23 e 194,08 mL.g-1MS), gramíneas (161,99 e 230,25 mL.g-1MS) e leguminosas (141,78 e 170,70 mL.gm-1MS). Conclui-se que inóculos de fezes não apresentam condições satisfatórias para substituição do inóculum com conteúdo ruminal para uso na técnica de produção in vitro de gases. / In order to study the use of faeces as inoculum as alternative for buffalo rumen contents in the in vitro gas production technique, the present work evaluations of three tests. We used three Mediterranean buffalos, male, adult, neutered, fistulated in the rumen, with an average live weight of 450 (± 18.7) kg. These animals received a basal diet composed of corn silage (70%) and concentrated (30%). These buffalo were the donors of the two types of inocula, rumen content (CR) and faeces. The first test was carried out with concentrate foods: corn grain, soybean meal, wheat bran and cottonseed meal, the second test was with legumes: alfalfa (Medicago sativa L. ), Pioneiro estilo (Stylosanthes macrocephala cv. Pioneiro) , perennial soybean (Neonotonia wightii) and leucaena (Leucaena leucocephala) and the third and last test was carried out with grasses: Marandu grass (Brachiaria brizantha cv. Marandu), buffel grass (Cenchrus ciliaris L. cv. Biloela), African Star grass (Cynodon plectostachyus) and Mombasa grass (Panicum maximum Jacq. cv. Mombasa). The average values of potential production of gas in each test were lower (P&lt;0.05) for samples fermented with an inoculum of faeces with rumen contents, being respectively, for concentrates (140.23 and 194.08 mL.g-1MS), grasses (161.99 and 230.25 mL.g-1MS) and legumes (141.78 and 170.70 mL.g-1MS). It follows that fecal inoculum unsatisfactory condition for replacing the inoculum with rumen technique for use in the in vitro production of gases technique.

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