Orientador: Marco Antonio Alvarenga / Banca: Marco Antonio Alvarenga / Resumo: Em eqüinos existe um grande interesse em se desenvolver e aprimorar técnicas de inseminação artificial que possibilitam a obtenção de bons índices de fertilidade utilizando um baixo número de espermatozóides. O presente trabalho teve como objetivos avaliar: 1) a viabilidade, in vitro, do sêmen congelado de garanhões após a diluição em fluido folicular pré-ovulatório de éguas; 2) a população espermática no oviduto de éguas, utilizando diferentes técnicas de inseminação; 3) a fertilidade de éguas após a utilização de diferentes técnicas de inseminação artificial, utilizando um baixo número de espermatozóides; 4) a reação inflamatória na cavidade peritoneal após as inseminações intrafoliculares e intraperitoneais; 5) averiguar o efeito da presença de espermatozóides dentro do folículo pré-ovulatório, na capacidade de fertilização do oócito. No experimento 1 foram realizadas análises laboratoriais da viabilidade espermática, de sêmen congelado de garanhões sem diluição (GI), diluído em Kenney (GII) e diluído em fluido folicular (GIII). Observou-se que porcentagem de espermatozóides com membrana plasmática íntegra não diferiu significativamente entre os grupos (p>0,05). Também não foi observado diferença estatística (p>0,05) entre os grupos na porcentagem de espermatozóides vivos com membrana acrossomal íntegra. A motilidade total foi significativamente inferior (p<0,05) no grupo em que o sêmen foi diluído em fluido folicular (GIII) apenas no primeiro momento, logo após a diluição (T0). A motilidade progressiva foi significativamente maior (p<0,05) no grupo diluído com Kenney (GII) do que nos demais grupos em T0 e três horas após (T3). A velocidade espermática ao longo de uma trajetória média (VAP) foi significativamente maior (p<0,05) em GIII do que em GI nos momentos T0, após uma (T1) e duas horas (T2) da diluição. / Abstract: The objective of the present study was to evaluated the viability, in vitro, of stallion frozen semen after dilution in mare's pre-ovulatory follicular fluid; assess sperm population in mares's oviduct using differents artificial insemination techinics; verify the fertility of of differents artificial insemination techinics in mares with low sperm number; assess if mares develop an inflamatory reaction in the peritoneal cavity after intraperitoneal and intrafollicular insemination and to verify if the presence of sperm in pre-ovulatory follicle could interfere on oocyte fertilization capacity. In experiment 1, frozen-thawed semen viability was evaluated without dilution (GI) and after dilution with Kenney or Mare's pre-ovulatory follicular fluid. The percentage of sperm with plasmatic membrane integrity was not different between the groups (p>0,05). No statistical difference (p>0,05) was observed between the groups in percentage of live sperm with intact acrosome. Total motility (MT) was significantly lower (p<0,05) in follicular fluid group (GIII) just in the first moment (T0). Progressive motility was significantly higher (p<0,05) in group diluted with Kenney (GII) than the other groups in T0 and 3 hours after (T3). Average path velocity (VAP) was significantly higher (p<0,05) in GIII than GI in moments T0, T1 and T2. Straight line velocity (VSL), curvilinear velocity (VCL) and Beat cross frequence (BCF) were significantly lower (p<0,05) in GI in moments T0, T1 and T2, when compared with GIII. No statistical difference (p>0,05) were observed in amplitud of lateral head (ALH), straightness (STR) and percentage of sperm with linear (LIN) and rapid (RAP) movement between GI and GIII in any moment. In T3 no statistical difference was observed (p>0,05) between all groups in any motility parameters analyzed. / Doutor

Orientador: Paulo Henrique Franceschini / Banca: Francisco Guilherme Leite / Banca: Erika da Silva Carvalho Morani / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do meloxicam sobre a taxa de concepção inicial (TCi), final (TCf) e perda gestacional (PG) de vacas Holandesas de alta produção submetidas à Transferência de Embrião (TE) Inseminação Artificial (IA) e Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF). Na TE foram utilizadas, como receptoras de embrião, 492 vacas em lactação repetidoras de serviço. Na IA (n=312) e IATF (n=336) foram incluidas no estudo somente fêmeas recém paridas (com pelo menos 60 dias em lactação). Todas as fêmeas foram avaliadas e alocadas em um de dois grupos experimentais: Grupo Controle (GC) e Grupo Tratado (GT). O tratamento consistiu na administração i.m. de meloxicam injetável 2% (0,5mg/kg de peso) nos dias 7, 8 e 9 após a inovulação das receptoras de embrião, e nos dias 14, 15 e 16 da possível gestação das fêmeas submetidas a IA e IATF. Amostras de sangue foram colhidas nos D14 e D21 para posterior dosagem de progesterona (P4). O diagnóstico de gestação ocorreu aos 25-38 e 39-52 dias. O tratamento com o antiinflamatório não incrementou as TCi, TCf e tampouco diminuiu a PG em nenhuma das três biotecnologias. Contudo, observou-se que receptoras de embrião inovuladas com embriões congelados/descongelados do GT tiveram TCi e TCf menores que as do GC (GT= 25,8% v. GC=37,8%) .Não houve diferença na concentração sérica de progesterona de vacas do GC e do GT no D21. Contudo, houve efeito da estação do ano sobre as concentrações de P4 no D14 e D21 tanto na TE como na IA e IATF. Ainda, vacas gestantes apresentaram maiores concentrações de P4 que vacas não gestantes no D21. Conclui-se que o tratamento com meloxicam não incrementou as TCi, TCf, tampouco reduziu a PG de vacas Holandesas de alta produção / Abstract: The aim of this study was to evaluate the effect of meloxicam on initial conception rate, final conception rate and pregnancy loss of high-producing Holstein cows submitted to embryo transfer (ET), artificial insemination (AI) and timed artificial insemination (TAI). On ET, 492 repeat breeders in milk were used as recipients. On AI (n=312) and TAI (n=336) only freshly calved cows (with at least 60 days in milk) were included in the study. The animals were evaluated and allocated in one of two experimental groups: Control Group (CG) and Treated Group (TG). The treatment consisted on administration of meloxicam 2% i.m. (0.5mg/kg of weight) on days 7, 8 and 9 after inovulation of embryo recipients, and on days 14, 15 and 16 of the possible pregnancy of females submmited to AI and TAI. Blood samples were collected on D14 and D21 for progesterone assay. The diagnosis of pregnancy was done on days 25-38 and 39-52. The treatment with the antiinflamatory did not increase initial conception rates and final conception rates, nor decreased pregnancy loss of animals in all three biotechnologies. However, recipients of TG inovulated with frozen/thawed embryos had lesser initial and final conception rates than CG (TG= 25.8% v. CG=37.8%) There was no difference on progesterone serum concentration of cows from TG and CG on D21. However, there was a season effect on P4 concentrations on D14 and 21 for ET, AI and TAI. Pregnant cows had higher P4 concentrations than non-pregnant cows. In conclusion, the treatment with meloxicam did not increase initial and final conception rates, neither decreased pregnancy loss of high producing Holstein cows / Mestre

Orientador: Vera Fernanda Martins Hossepian de Lima / Coorientador: Rubens Paes de Arruda / Coorientador: Ricarda Maria dos Santos / Banca: Gisele Zoccal Mingoti / Banca: Sony Dimas Bicudo / Banca: Ed Hoffmann Madureira / Banca: Eneiva Carla Carvalho Celeghini / Resumo: Tem sido frequentemente demonstrado que variadas taxas de concepção podem ser obtidas de acordo com o sêmen utilizado, evidenciando uma importante variabilidade individual do reprodutor com relação à fertilidade. Além disso, as grandes dimensões dos rebanhos, associado ao intenso e crescente uso dos protocolos de IATF no Brasil, tem estimulado, cada vez mais, a prática do descongelamento simultâneo de diversas palhetas de sêmen em um mesmo descongelador. Entretanto, sob essas condições, o banho-maria do descongelador poderia atuar como ambiente de incubação para o sêmen, o que poderia influenciar a viabilidade do espermatozoide. Assim, o presente estudo teve por objetivos: 1) determinar o efeito da sequência de inseminação, após descongelamento simultâneo de diversas palhetas de sêmen, na taxa de concepção e na qualidade seminal; 2) investigar a fertilidade in vivo, bem como diversas características espermáticas in vitro, do sêmen de diferentes reprodutores utilizados no mesmo programa de IATF; 3) identificar, dentre as diversas análises laboratoriais realizadas, o grupo de características espermáticas consideradas importantes na predição da taxa de concepção. Para tal, o presente experimento foi realizado em duas etapas. A primeira etapa consistiu em um estudo a campo delineado para determinar a taxa de concepção após IATF de fêmeas pós-parto da raça Nelore (n=947), utilizando sêmen de três partidas de cada um dos três touros da raça Angus (n=9). A segunda etapa consistiu em um estudo laboratorial delineado para investigar diversas características espermáticas das doses de sêmen utilizadas no respectivo programa de IATF, utilizando as mesmas condições de descongelamento do estudo a campo. As seguintes análises laboratoriais foram realizadas: análise computadorizada do movimento... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: It has been reported that different conception rates can be obtained according to the semen used, indicating a significant variability regarding sire fertility. Furthermore, the large size of reproductive herds associated with the intense use of Timed-AI protocols in Brazil, has stimulated the routine practice of simultaneous thawing of multiple semen straws in the same thawing-bath. However, under these conditions, the thawing-bath could act as an incubator environment for the semen, which could influence the sperm viability. Thus, this study aimed to: 1) determine the effect of sequence of insemination after simultaneous thawing of multiple semen straws on conception rate and semen quality; 2) investigate the in vivo fertility, as well as several in vitro sperm characteristics, from different sires used in the same Timed-AI program; 3) identify, among the several in vitro sperm variables evaluated in laboratory, the group of sperm characteristics considered important in the prediction of conception rate. Hence, this study was conducted in two experiments. The first experiment was a field study designed to determine conception rate after Timed-AI of suckled multiparous Nelore cows (n = 944) using three semen batches from three Angus bulls (n = 9). The second experiment was a laboratory study designed to investigate several sperm characteristics of semen used in the Timed-AI program, using the same thawing conditions applied in the field experiment. The following laboratory analyses were performed: computer assisted semen analysis, hypo-osmotic swelling test, sperm resistance after 2 hours of thermal incubation, sperm morphology, integrity of plasma and acrosomal membranes, plasma membrane stability, lipid peroxidation, sperm morphology and chromatin condensation. According to the present experiment, it was concluded that... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Ciro Moraes Barros / Banca: Fabíola Freitas de Paula Lopes / Banca: Gisele Zoccal Mingoti / Resumo: Existem evidências de que os efeitos deletérios do estresse térmico calórico (ETC) sobre a fertilidade são menos pronunciados em raças tolerantes ao calor devido primariamente às diferenças na capacidade de termorregulação. Experimentos in vitro têm demonstrado que embriões zebuínos (Bos indicus) são mais resistentes ao ETC quando comparados a taurinos (Bos taurus). A fim de melhor compreender as diferenças entre zebuínos e taurinos em relação à resistência ao choque térmico, objetivou-se com o presente trabalho verificar se a resistência ao ETC é resultado da contribuição genética do oócito, do espermatozóide ou de ambos e se o intervalo de tempo entre o abate dos animais e a aspiração do oócito influencia o desenvolvimento do embrião. No experimento 1 oócitos de vacas das raças Nelore e mestiças com fenótipo predominante da raça Holandesa preto e branco (mHPB) foram coletados em frigorífico, maturados e fertilizados com espermatozóide de touros das raças Nelore (N), Angus (An), Brahman (Bra) e Gir (Gir). No experimento 2 oócitos de vacas das raças Nelore e HPB puras foram coletados em frigorífico, aspirados 4 e 6:30 horas após o abate dos animais, maturados e fertilizados com espermatozóide de touros das raças N, Gir e HPB. Em ambos os experimentos, noventa e seis horas pós-inseminação (hpi), os embriões com mais de 16 células foram separados ao acaso em dois grupos: controle e ETC. Os embriões do grupo controle foram cultivados a 39 oC continuamente e do grupo ETC expostos a 41 oC por 12 horas, retornando a seguir para 39 oC. No experimento 1 não foi observado efeito do ETC nas várias raças estudadas, não havendo portanto, redução nas taxas de blastocisto e blastocisto eclodido. As taxas de clivagem e mórula dos embriões mHPB x Gir foram inferiores (p<0,05) as das demais raças. As raças mHPB x N apresentaram taxas de blastocisto ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: There are evidences that deleterious effects of heat stress (HS) on fertility are less pronounced in breeds tolerant to high temperatures, due mainly to differences on their thermoregulatory capacity. In vitro experiments have shown that Bos indicus embryos are more resistant to HS when compared to Bos taurus. In order to better understand the differences related to heat shock resistance between Bos indicus and Bos taurus, the main objective of this study was to determine if tolerance to HS is cause by genetic contribution from the oocyte, spermatozoa or both. Additionaly, the influence of the time, between collection of ovaries in the abattoir and oocyte aspiration in the laboratory, on early embryo development was ascertained. In experiment 1, oocytes from Nellore and crossbreed Holstein cows (cHST), were collected in a local abattoir, matured and fertilized using semen from Nellore (N), Angus (An), Brahman (Bra) and Gir (Gir) bulls. In experiment 2, oocytes from Nelore and Holstein (HST) cows were collected in an abattoir and the oocytes were aspired in the laboratory 4 or 6:30 h afterwards, matured and fertilized using semen from N, Gir and HST. In both experiments, 96 h post insemination (hpi), embryos with 16 cells were separated in two groups: control and HS. In the control group the embryos were cultured at 39 oC, whereas in the HS group the embryos were submitted to 41 oC during for 12 h, and then returned to 39 oC. In experiment 1, there was no effect of HS on blastocyst and hatched blastocyst rates in all breeds studied.. The percentage of oocytes that cleaved and reached the morula stage was significantly lower (p<0.05) in cHST x Gir as compared to the other breeds. Additionaly, blastocyst rate was higher in cHST x N than in cHST x An and cHST x Gir (P<0.05). In experiment 2, cleavage, morula and blastocyst rates of Group 4 h were higher (P<0.05) as compared to Group ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Mateus José Rodrigues Paranhos da Costa / Banca: Pietro Sampaio Baruselli / Banca: Rui Machado / Banca: Alex Sandro Campos Maia / Banca: Maurício Mello de Alencar / Resumo: Esta pesquisa foi dividida em três estudos: O estudo 1 teve como objetivo avaliar o efeito do condicionamento operante com reforço positivo no temperamento de novilhas da raça Nelore. Foram utilizadas 170 novilhas da raça Nelore com idade média de 20,0±2,6 meses. Foram realizadas três avaliações, a primeira antes de iniciar o protocolo de condicionamento e após 60 (quando o protocolo de condicionamento foi finalizado) e 74 dias. A reatividade dos bovinos foi avaliada com o escore de tronco (ET) e a velocidade de fuga (VF). Foi realizada também a avaliação qualitativa do comportamento (QBA). Com base em ET foram definidas quatro classes de aprendizagem, quais sejam: (1) desejável, (2) aceitável, (3) inconstante e (4) indesejável. A VF média na primeira avaliação foi de 4,02±1,00 m/s, reduzindo para 2,88±0,6 e 2,90±1,07m, na segunda e terceira avaçiações, respectivamente. ET apresentou o mesmo padrão de distribuição que VF, com médias de 3,12±0,05; 2,92±0,05; 2,88±0,05; para cada uma das três avaiações. Não foi encontrado efeito das classes de aprendizagem na expressão dos descritores da análise qualitativa do comportamento (QBA). Concluiu-se que o protocolo de condicionamento foi eficiente em diminuir a reatividade dos animais. O objetivo do segundo estudo foi avaliar o efeito do condicionamento com reforço positivo no temperamento e na taxa de prenhez de novilhas. Foram utilizadas 46 novilhas, sendo 24 da raça Nelore e 22 cruzadas, com idade média de 24,94±3,49 meses. As novilhas foram distribuidas em dois grupos experimentais - condicionadas (C) e não condicionadas (NC). Para este estudo foram utilizados três escores visuais para avaliação do temperamento - movimentação (MOV), tensão (T) e ET, além da VF. Os testes foram aplicados em cinco momentos distintos: antes do início do protocolo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This research was divided in three studies: The first one aimed to evaluate the effect of operant conditioning with positive reinforcement on the Nellore heifers temperament; the study was.carried out with 170 Nellore heifers with 20.0±2.6 months of age, on average. Three assessments were realized, before start the conditioning protocol, and after 60 (when the conditioning protocol was finished) and 74 days. Cattle reactivity was assessed by measuring the crush score (CS) and flight speed (FS). A qualitivative behavior assessment (QBA) was also conducted. Based on the values of CS four classes of learning were defined, as follow: (1) desirable, (2) acceptable, (3) inconsistent and (4) undesirable. The FS average at the first evaluation was 4.02±1.00 m/s, decreasing to 2.88±0.6 and 2.90±1.07m, in the second and third assessments, respectively. There was effects of classes of learning on the expression of the descriptors of the qualitative behavior assessement (QBA) was not found. It was concluded that the operant condicioning protocol was effective in decreasing the animals' reactivity. The second study aimed to evaluate the effect of operant conditioning with positive reinforcement in the temperament and pregnancy rates of heifers; 46 heifers were used, being 24 Nellore, 22 crossed breeding with average age of 24.94 ± 3.49 months. The heifers were distributed into two treatments - conditioned (C) and non-conditioned (NC). For this study was used three scores for visual assessment of temperament - movement (MOV), tension (TENS), crush score (CS), to discrete measurements was used the flight speed (FS). The test was applied five times at distincts moments: before starting the operant conditioning protocol and four times after it, during the application of the fixed time artificial insemination (FTAI)... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Cezinande de Meira / Coorientador: José Paes de Oliveira Filho / Banca: Fabiana Ferreira de Ssouza / Banca: Fernanda da Cruz Landim / Banca: Paula de Carvalho Papa / Banca: Guilherme Pugliesi / Resumo: Com o objetivo de investigar os efeitos da administração de 2,5 mg de benzoato de estradiol (BE) seguido de 1500 mg de progesterona de longa ação (P4 LA) sobre a dinâmica molecular endometrial, características morfológicas do útero e concentrações plasmáticas de estrógeno e progesterona em éguas receptoras acíclicas, foram avaliados: a expressão proteica e as alterações na abundância relativa dos transcritos para os receptores de estrógeno (ER) e progesterona (PR) no endométrio por meio da RT-qPCR e imunohistoquímica; as características morfológicas do útero por ultrassonografia e palpação retal; e as concentrações plasmáticas do estrógeno e progesterona por meio de radioimunoensaio. A aplicação de 2,5 mg, 5 mg ou 10 mg de BE foram eficazes em causar edema uterino máximo 24 h após a administração. A dose de 2,5 mg de BE provocou picos de concentração de estradiol similares aos de éguas tratadas com 5 mg, 10 mg e aos de éguas cíclicas, sem elevar a concentração de estrógeno conjugado como observado com as outras doses de BE. Ainda, a concentração de P4 foi reduzida após a aplicação da P4 LA quando 10 mg de BE foram utilizados. A administração dos tratamentos hormonais alterou a abundância relativa dos transcritos para ERα, ERβ e PR de forma similar às alterações encontradas em éguas cíclicas quando o final do estro e início do diestro foram comparados. Em conclusão, o uso de 2,5 mg de BE seguido de 1500 mg de P4 LA provoca alterações similares na morfologia uterina, abundância relativa dos transcritos para ERα, ERβ e PR no endométrio, e de concentrações circulantes de estrógeno e progesterona às encontradas em éguas cíclicas / Abstract: To investigate the effects of the administration of 2.5 mg of estradiol benzoate (EB) followed by 1500 mg of long acting progesterone (LA P4) on endometrial molecular dynamics, uterine morphological characteristics, as well as estrogen and progesterone plasma concentrations in non-cyclic recipient mares, we evaluated: protein expression and changes in relative abundance of transcripts for estrogen (ER) and progesterone receptors (PR) in the endometrium by RT-qPCR and immunohistochemistry; uterine morphological characteristics by ultrasonography and rectal palpation; and estrogen and progesterone plasma concentrations by radioimmunoassay. The administration of 2.5 mg, 5 mg or 10 mg of EB were effective at promoting maximum uterine edema 24 h after their injection. The dose of 2.5 mg of EB caused similar estradiol concentration peaks to those observed in mares treated with 5 mg or10 mg of EB and to those observed in cyclic mares, which was not followed by increased concentrations of estrogen conjugate as observed for the other doses. Moreover, P4 concentration was reduced 24 h after LA P4 administration when the dose of 10 mg of EB was injected. The administration of the hormonal protocols altered the relative abundance of transcripts for ERα, ERβ and PR in non-cyclic mares as observed in cyclic ones when late estrus and early diestrus were compared. In conclusion, the use of 2.5 mg of EB followed by 1500 mg of LA P4 causes similar uterine morphology changes, relative abundance of transcripts for ERα, ERβ and PR, and estrogen and progesterone circulating concentrations to those found in cyclic mares / Doutor

Orientador: Eunice Oba / Banca: Yeda Watanabe / Banca: Mayra D'Avila Assumpção / Banca: Fernanda Landim Alvarenga / Banca: Sony Dimas Bicudo / Resumo: Uma variedade de fatores extrinsecos como ions organicos, tampoes, composicao atmosferica gasosa, aminoacidos, fatores de crescimento, vitaminas, a acao de proteinas e macromoleculas desconhecidas podem afetar a viabilidade embrionaria. A implantacao de um sistema artificial de manutencao e desenvolvimento embrionario que simule um ambiente compativel com o fisiologico ainda e o objetivo de diversos grupos de pesquisa. O tamponamento dos meios e dependente da composicao gasosa da atmosfera de cultivo e o desenvolvimento embrionario, principalmente na fase de cultivo, sofre com as variacoes de pH verificadas durante as manipulacoes realizadas fora da estufa. Os experimentos desenvolvidos tiveram como objetivo avaliar diferentes sistemas de tamponamento para os meios de cultivo, comparando-os entre si quanto a capacidade de proporcionarem maior estabilidade de pH aos embrioes produzidos in vitro. As modificacoes propostas na composicao dos meios de cultivo foram avaliadas em duas atmosferas gasosas. Um total de 3200 ovocitos foram maturados em gotas de 100 ÊL cobertas com oleo mineral por periodo de 24 horas, agrupados em numero de 20 ovocitos por gota de meio TCM-199 com sais de Hankfs (Sigma Aldrich.), acrescido de 0,5 Êg/mL de FSH e 0,03 UI/mL de LH, 10% SFB, 20mM HEPES e antibioticos. Apos a fertilizacao, os possiveis zigotos foram submetidos ao cultivo e distribuidos de acordo com os seguintes tratamentos (T): T1: grupo controle com sistema tampao de bicarbonato de sodio do meio HTF Irvine Scientific. acrescido de aminoacidos; T2: meio SOFaa com sistema tampao composto de 25 mM de bicarbonato de sodio; T3: meio SOFaa modificado pela associacao do sistema tampao com 9 mM de bicarbonato de sodio e 4 mM de HEPES e T4: meio SOFaa modificado pela associacao do sistema tampao com 9 mM de bicarbonato de sodio e 12 mM de fosfato de sodio. Os embrioes dispostos nos (Resumo completo, clicar acesso eletronico abaixo) / Abstract: A variable interation of intrinsic and extrinsic factors such as organics ions, buffers, atmosphere composition, aminoacids, growth factors, vitamins, proteins and other unknown components may play an important role increasing the developmental potential of in vitro produced bovine embryos. The importance of the development of an artificial system to maintain embryo viability, similar and comparable with physiologic environment, has been the objective of several studies. Therefore, the majority of those studies that focus on culture media formulations were based on the physiology of in vivo produced embryo. However, the development of commercial protocols that ensure embryo quality after in vitro production (IVP) demands some adaptations while considering the differences between in vivo and in vitro produced embryos. Media buffering depends on the gaseous atmosphere utilized during culture and embryo development is sensitive to pH variation during culture, especially in manipulations in the bench. The aim of the present study was to investigate the effect of different buffer systems in the pH stability of culture medium and in the developmental capacity of IVP embryos. 3200 COCs were cultured for 24h, using 20 oocytes per 100£gL droplet in TCM 199 (with HanksLOEsalts: Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA), containing 10% fetal bovine serum, 20mM HEPES and antibiotics under sterile paraffin oil. After fertilization, the zygotes were cultivated according with treatments (T): T1- control group with NaHCO3 (sodium bicarbonate) in medium HTF Irvine ScientificãÊ; T2- group with 25 mM NaHCO3 in medium SOFaa; T3 LV group with 9mM NaHCO3 and 4 mM HEPES in medium SOFaa and T4 LV group with 9mM NaHCO3 and 12 mM sodium phosphate in medium SOFaa. The embryos were exposed in two ambient: atmosphere with 5% CO2 + 5% O2 + 90% N2 at 39ØX C ...(Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: José Luiz Moraes Vasconcelos / Banca: Amauri Alcindo Alfieri / Banca: Marcos Bryan Heinemann / Resumo: O objetivo deste estudo foi determinar a incidência de perdas gestacionais em vacas de corte e avaliar o efeito da vacina contra IBR/BVD/Leptospirose (5,0 mL, Cattle Master® 4 + L5) na taxa de prenhez e perdas de gestação de vacas submetidas à Inseminação Artificial em Tempo Fixo [IATF, Protocolo; D0: benzoato de estradiol (2mg, Estrogin����) e inserção do dispositivo intravaginal de P4 (CIDR����, P4,1,9g); D7: dinoprost trometamina (PGF2α, 12,5mg, Lutalyse����); D9: retirada do dispositivo intravaginal de P4, administração cipionato de estradiol (0,5mg, ECP����) e remoção temporária de bezerros (RTB) por 48 horas; D11: IATF]. A avaliação de gestação foi realizada aos 30 e 120 dias pós IATF, para identificação de vacas prenhas e identificação de perdas gestacionais. No EXP1, foram avaliadas 8725 vacas para determinar a taxa de perda de gestação entre 30 e 120 dias. Foram usadas vacas pertencentes a dezenove propriedades com programas sanitários diferentes: sem imunização para doenças da reprodução (Grupo Sem, n = 7.311); com imunização semestral para Leptospirose (Grupo Leptospirose, n = 738); ou com imunização semestral para leptospirose e anual para Rinotraqueíte Infecciosa Bovina e Diarréia Viral Bovina (Grupo IBR/BVD/Leptospirose, n = 676). No EXP2 (n=1968) e EXP3 (n=2793), as vacas foram divididas aleatoriamente dentro do mesmo lote para receberem ou não a vacina contra IBR/BVD/Leptospirose (5,0 mL, Cattle Master®4 + L5): a primeira dose foi aplicada no início do protocolo de IATF e a segunda dose no momento do primeiro diagnóstico gestacional (US1/30d). No EXP2 as fazendas não utilizavam nenhum tipo de vacina preventiva para as doenças da reprodução, já no EXP3 as fazendas utilizavam vacinação contra Leptospirose. No EXP 4 foram utilizadas 367 vacas da raça Nelore... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to determine the incidence of pregnancy loss in beef cows, and evaluate the effect of the vaccine against IBR/BVD/Leptospirosis (5.0 mL, Cattle Master ® 4 + L5) in pregnancy rate and pregnancy loss of cows subjected to fixed-time artificial insemination [TAI, Protocol; D0: estradiol benzoate (2mg, Estrogin) and insertion of intravaginal P4 device (CIDR, P4, 1.9 g); D7: dinoprost tromethamine (PGF2, 5mg Lutalyse), D9: withdrawal of intravaginal P4 device, administration of estradiol cypionate (0.5 mg, ECP®) and temporary calf removal for 48 hours; D11: TAI]. The pregnancy diagnosis was performed at 30 and 120 days after TAI for identify cows pregnant and pregnancy loss respectively. In EXP1 8725 cows were evaluated to determine the rate of pregnancy loss between 30 and 120 days. The cows were from nineteen farms with different health programs. Cows without immunization reproductive diseases (Group No, n = 7311), with immunization semester to leptospirosis (Leptospirosis Group, n = 738) or semester immunization against leptospirosis and annual against infectious rhinotracheitis bovine and bovine viral diarrhea (Group IBR/BVD/Leptospirosis, n = 676). In EXP2 (n = 1968) and EXP3 (n = 2793) cows were randomly assigned within the same batch to receive or not vaccine against IBR/BVD/Leptospirosis (5.0 ml, 4 Cattle Master® L5 +): the first dose was administered at the beginning of the TAI protocol and the second dose at the time of first diagnosis of pregnancy (US1/30d). In EXP2 farms did not use any kind of preventive vaccine for diseases of reproduction, as in exp3 farms used vaccination against Leptospirosis. In EXP 4 367 nelore cows were submitted to TAI, the animals were randomly assigned to receive the vaccine at different times. Animals from groups:...(Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-05-28Bitstream added on 2014-06-13T20:27:13Z : No. of bitstreams: 1 araujo_lfp_me_botfm.pdf: 262924 bytes, checksum: f66d3aff3afec9b6471184734dc1a5cd (MD5) / Para saber quais casais de fato poderiam se beneficiar com a IIU, desenhamos esse estudo com o objetivo de avaliar se a motilidade espermática pós-capacitação em gradiente descontínuo de diferentes densidades e incubação em CO2 em indivíduos normospérmicos é capaz de predizer gravidez. Participaram do estudo 175 casais que foram submetidos à IIU. Os critérios de inclusão foram mulheres com idade inferior ou igual a 35 anos; com trompas sem alterações; endometriose Grau I e II; infertilidade sem causa aparente ou inexplicada; disfunção ovulatória não hiperandrogênica, e homens que apresentaram parâmetros seminais normais. Todas as pacientes foram submetidas à estimulação ovariana com Citrato de Clomifeno na dose de 50mg/dia, do 3° ao 7° dia do ciclo menstrual, associado à Gonadrotofina menopausal humana ou Hormônio Folículo Estimulante recombinante (FSH-r) no 3°, 5° e 7° dias do ciclo. O desenvolvimento folicular foi acompanhado pela ultrassonografia transvaginal e, quando um ou até três folículos medindo entre 18 e 20mm foram observados, foi administrado hCG ou hCG-r 250mg, e a IIU foi realizada 36-40h após hCG. Os parâmetros seminais foram analisados e classificados segundo os critérios da OMS de 2010. A capacitação espermática foi realizada utilizando a técnica de gradiente descontínuo de diferentes densidades. Uma alíquota de 20μl foi incubada por 24h a 37ºC em 5% de CO2. Após 24h de incubação, foi feita análise da motilidade total (progressão A+B) dos espermatozóides. Dos 175 casais, 52 obtiveram gravidez clínica e 123 não obtiveram êxito. A taxa de gravidez clínica foi de 29,7%. Houve também 4 abortos espontâneos (7,6%) e 1 gravidez múltipla (3,8%). Análises realizadas quanto a idade, duração e etiologia da infertilidade não mostraram diferenças estatísticas significantes entre os... / To assess what couples actually could benefit from IUI, we designed this study to evaluate the sperm motility through discontinuous gradient of different densities and incubation in CO2 in normospermic individuals is able to predict pregnancy. A total of 175 couples underwent IUI and inclusion criteria were women with age 35 years or younger, with normal tube; endometriosis grades I-II; unexplained infertility; ovulatory dysfunction not hyperandrogenic and men with normal seminal parameters. All patients underwent ovarian stimulation used 50mg/day clomiphene citrate on days 3-7 of menstrual cycle, associated to human menopausal gonadotropin (hMG) or follicle stimulating hormone recombinant (FSH-r). The follicular development was monitored by transvaginal ultrasound. When one or two follicles measuring 18 and 20mm were observed, hCG or hCG-r 250mg was administered and IUI was performed 36-40h after hCG. Seminal parameters were analyzed and classified according to 2010 WHO criteria. Spermatic capacitation was performed using discontinuous concentration gradient. A 20μl aliquote was incubated for 24 hours at 37ºC in 5% CO2. The sperm concentration was adjusted to a total of 10x106 motile sperm per milliliter of medium. After 24h incubation, it was performed total motility analysis (A+B). Of the 175 couples, 52 achieved clinical pregnancies and 123 did not have success. Pregnancy rate per cycle was 29.7%, there were 4 spontaneous abortions (7.6%) and multiple pregnancies (3.8%). Analysis of age, infertility duration and causes of infertility did not show statistic significance between pregnant and nonpregnant groups, as to results of seminal volume, total sperm concentration, total motile sperm and morphology, except sperm motility (p<0.00001). The comparison of motility A+B after processed and 24h after... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-08-24Bitstream added on 2014-06-13T19:00:05Z : No. of bitstreams: 1 frade_mc_me_araca.pdf: 3688644 bytes, checksum: c67834e95a497639db4eb0f813348b58 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Na IATF e TETF o uso da gonadotrofina coriônica eqüina (eCG) é recomendado com o objetivo de incrementar as concentrações plasmáticas de progesterona (P4) e as taxas de concepção. A hipótese do presente estudo é que em fêmeas tratadas com eCG maiores concentrações de P4 são observadas no D5 e D7 (D0 = dia da IATF) em fêmeas prenhes após à IATF e no D5 e D7 (D0 = dia esperado para o estro) em receptoras prenhes submetidas à TETF. No Experimento 1, fêmeas bovinas tratadas ou não com 300UI de eCG e submetidas à IATF, tiveram as concentrações de P4 mensuradas nos dias 0, 3, 5, 7 e 10 após a IATF. No Experimento 2, todas as fêmeas foram tratadas com 300UI de eCG e submetidas à IATF, sendo mensuradas as concentrações de P4 nos dias 3, 5, 7, 12 e 17 após a IATF. No Experimento 3, receptoras tratadas com 300UI de eCG, foram submetidas à TETF, após a observação da presença ou não de estro e as concentrações de P4 foram avaliadas nos dias 5 e 7, após o dia esperado do estro. A dosagem de P4 foi realizada pela técnica de radioimunoensaio e o diagnóstico de gestação através da ultrassonografia. No Experimento 1, observou-se que animais tratados com eCG apresentaram maior concentração de P4 nos dias 0, 7 e 10. No Experimento 2, não houve diferença significativa na concentração de P4 nos dias 3, 7 e 12, entre os animais prenhes e não prenhes, entretanto no dia 17 os animais não prenhes tiveram menor concentração de P4. No Experimento 3, maiores concentrações de P4 no D7 foram observadas em animais que não apresentaram estro e maiores concentrações de P4 foram detectadas em animais prenhes no D7. Conclui-se que em fêmeas tratadas com eCG maiores concentrações de P4 não foram observadas no D5 e D7 (D0 = dia da IATF)... / In FTET and FTAI the use of eCG is recommended in order to increase the synthesis of P4 and the conception rates. The hypothesis of this study is that females treated with eCG higher concentrations of P4 are observed on the D5 and D7 (D0 = day of FTAI) in pregnant females after the FTAI and on the D5 and D7 (D0 = day of expected estrus) in pregnant recipients submitted to FTET. In Experiment 1, cows treated or not with 300 IU of eCG and submitted to FTAI had the concentration of P4 measured on days 0, 3, 5, 7 and 10 after FTAI. In Experiment 2, all females were treated with 300 IU of eCG and submitted to FTAI, being measured the concentration of P4 on days 3, 5, 7, 12 and 17 after FTAI. In Experiment 3, recipients treated with 300 IU of eCG were submitted to FTET, after observation the presence or absence of estrus and measured the concentration of P4 on days 5 and 7 after the expected day of estrus. The P4 assay was performed by radioimmunoassay and pregnancy diagnosis by ultrasonography. In Experiment 1 was observed that animals treated with eCG showed higher concentration of P4 on days 0, 7 and 10. In Experiment 2 there was no significant difference in the concentration of P4 on days 3, 7 and 12 between non-pregnant and pregnant animals, since the day 17 non-pregnant animals had lower concentration of P4. In Experiment 3 highest concentrations of P4 in D7 were observed in animals that did not show estrus and higher concentrations of P4 were detected in pregnant animals on D7. It is concluded that in females treated with eCG higher concentrations of P4 were not observed in D5 and D7 (D0 = day of FTAI) in the pregnant after FTAI, however, the pregnancy rate in FTET embryos produced in vitro was... (Complete abstract click electronic access below)