Made available in DSpace on 2015-03-26T13:52:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 996773 bytes, checksum: 7322b4697c096a6f17a4388ca498fede (MD5) Previous issue date: 2014-02-17 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / The L-ascorbic acid (ALA) is produced naturally by plants from D-glucose. Yeasts synthesize a similar metabolite, D-eritroascorbic acid (ADEA). Although this compound does not show activity against scurvy, it contains an antioxidant function, but it is produced in low concentrations by the microorganism. Recently, in order to make yeasts are capable of converting D-galactose D-lactose from cheese whey into ALA, the wild strain Kluyveromyces lactis CBS2359 has been transformed with genes that integrate the L-galactose biosynthesis pathway, isolated from Arabidopsis thaliana. In the presence of intermediate L-galactose, ALA can be synthesized by yeast with enzymes responsible for ADEA production. It has been demonstrated that the engineered strain JVC 1-56 was able to synthesize ALA compared to the wild type, but the yield was still low. In this regard, studies to assist the increased of ALA production are relevant. Once the engineered ALA pathway and native cell wall formation pathway of K. lactis have a common intermediate, GDP-D-mannose, we need to evaluate the effect of uncoupling of vitamin C synthesis route of the growth that requires constant wall synthesis. Moreover, considering the antioxidant properties of ALA, the expectation is that the production of this metabolite increase when JVC 1-56 is exposed to a oxidative stress condition by menadione. In this context, this study investigated the both physiological conditions, using the media Yeast Galactose Base (YGB) and ultrafiltered cheese whey (SQU - byproduct of cheese industry that predominates lactose as carbon source). It was analyzed that Kluyveromyces lactis JVC 1-56 produces higher yields of ALA when it is grown for 96 hours in batch culture in the middle YPGal. Cultivation at low growth rates (0.04 h-1) predisposes the cells to synthesize more ALA per unit cell mass (0.80 mg/mg). However, the yield of continuous culture operated as quimostato, limiting the substrate nitrogen, still proved to be lower than expected in the batch (1.94 mg/mg). Oxidative stress by 12.5 mM menadione on K. lactis JVC1 -56, in the conditions applied, was not effective in the increasing the ALA production (1.47 mg/mg). Still, ADEA yield was higher than ALA in two strategies: 1.37 mg/mg at 0.21 h-1 in culture under steady state, 8.52 mg/mg in batch under oxidative stress and 10.33 mg/mg in the batch in the absence of oxidizing agent, indicating that ADEA may be in a more stable configuration than vitamin C. Finally, the permeate cheese whey remains a prospect for the conversion of lactose into a biotechnological product of higher value aggregate. / O ácido L-ascórbico (ALA) é produzido naturalmente por plantas a partir de D-glicose. Leveduras sintetizam um metabólito semelhante, o ácido D-eritroascórbico (ADEA). Embora este composto não mostre atividade contra o escorbuto, ele contém uma função antioxidante, mas é produzido pelo micro-organismo em baixas concentrações. Recentemente, com a finalidade de fazer as leveduras serem capazes de converter o componente D-galactose da D-lactose do soro de queijo em ALA, a linhagem selvagem de Kluyveromyces lactis CBS2359 foi transformada com genes, que integram a via de biossíntese de L-galactose, isolados de Arabidopsis thaliana. Na presença do intermediário L-galactose, ALA pode então ser sintetizado pela levedura com as enzimas responsáveis pela produção de ADEA. Foi demonstrado que a linhagem engenheirada JVC 1-56 foi capaz de sintetizar ALA em comparação com a selvagem, mas com baixo rendimento. Neste sentido, estudos que auxiliem o aumento da produção de ALA são relevantes. Uma vez que a via engenheirada da síntese de ALA e a via nativa da formação da parede celular de K. lactis possuem um intermediário comum, GDP-D-manose, faz-se necessário avaliar o efeito do desacoplamento da produção de ALA do crescimento que requer constante síntese da parede. Além disso, considerando a propriedade antioxidante do ALA, a expectativa é de que a produção deste metabólito aumentasse quando JVC 1-56 fosse exposta a uma condição de estresse oxidativo por menadiona. Neste contexto, este trabalho investigou as condições fisiológicas mencionadas utilizando os meios Yeast Galactose Base (YGB) e soro de queijo ultrafiltrado (SQU - subproduto de indústrias de queijo em que predomina lactose como fonte de carbono). Foi averiguado que Kluyveromyces lactis JVC 1-56 produz ALA com rendimentos maiores quando cultivada por 96 horas em batelada no meio YPGal. O cultivo em baixas velocidades de crescimento (0,04 h -1) predispõe as células a sintetizar mais ALA por unidade de massa celular (0,80 mg/mg). Entretanto, o rendimento da cultura contínua operada como quimostato, tendo nitrogênio como substrato limitante, ainda mostrou ser inferior ao previsto na batelada (1,94 mg/mg). Já o estresse oxidativo por 12,5 μM de menadiona sobre K. lactis JVC1- 56, nas condições aplicadas, não foi eficaz no aumento da produção de ALA (1,47 mg/mg). Ainda, o rendimento de ADEA foi superior ao de ALA nas duas estratégias: 1,37 mg/mg a 0,21 h-1 na cultura sob regime permanente, 8,52 mg/mg na batelada sob estresse oxidativo e 10,33 mg/mg na batelada na ausência do agente oxidante, indicando que ele pode estar em uma configuração mais estável do que a vitamina C. Finalmente, o permeado do soro de queijo continua sendo uma perspectiva para a conversão da lactose em um produto biotecnológico de maior valor agregado.

Las variedades tradicionales de tomate son apreciadas por los consumidores, que están dispuestos a pagar mayores precios por recuperar el sabor del tomate. Este interés ha propiciado que los estudios referentes a estos materiales se hayan multiplicado durante los últimos años, aunque normalmente se ciñen a pocas variedades, pocas poblaciones por variedad, o a aspectos muy concretos de sus características. El presente trabajo aborda una caracterización de variedades tradicionales del levante español que permita reunir e integrar los resultados de caracterización morfo-agronómica, organoléptica, funcional y molecular, en un intento de poner en valor estos importantes recursos fitogenéticos. Dentro de las poblaciones de las variedades tradicionales evaluadas se han observado niveles elevados de variación en características morfo-agronómicas y funcionales. Dicha variación puede deberse a factores micro-ambientales o diferencias genotípicas, puesto que se trata de variedades población. No obstante, las diferencias observadas en los niveles de variación respecto a híbridos F1 empleados como control, sugiere que las diferencias genotípicas entre individuos no serían tan importantes como cabría pensar. La variación detectada entre poblaciones de la misma variedad es, en general, mayor en todos los niveles (morfo-agronómico, organoléptico, funcional y molecular). Aunque parece existir una cierta tendencia en el perfil organoléptico, funcional y morfológico para cada variedad, lo cierto es que los rangos de variación de estos perfiles entre distintas variedades se solapan. La selección diferencial realizada por cada agricultor dentro de variedad podría ser una de las principales causas de la elevada variabilidad detectada. A ésta se añade los efectos de la mezcla de semillas y los cruzamientos espontáneos que se han evidenciado en la evaluación de los materiales (tanto por segregación morfo-agronómica como por los niveles de heterocigosidad observada en algunas poblaciones). De esta forma, tras estos sucesos el agricultor aplicaría una elevada presión de selección para recuperar las características básicas externas de la variedad, pero la variación se mantendría, especialmente, en los caracteres internos. La elevada variabilidad entre las poblaciones de una misma variedad presenta varios problemas a la hora de abordar la promoción de su cultivo y su conservación in situ. Por un lado, la existencia de tanta variación complica que los consumidores asocien un morfotipo muy definido con un elevado estándar de calidad. Además, la falta de un ideotipo claro y relativamente uniforme, dificulta el registro de los materiales como variedades de conservación. Por otro lado, no todas las poblaciones de una variedad aglutinan una morfología y estructura del fruto adecuada, representativa de la variedad y que además manifieste el mejor sabor posible. Por ello, es conveniente llevar a cabo programas de depuración varietal en los que se realicen selecciones de las mejores poblaciones que reúnan las mejores características. Por otro lado, también sería recomendable realizar selecciones dentro de población en los casos en los que la variación intra-poblacional sea excesiva. En ocasiones, y de forma complementaria, podría contemplarse la introgresión de genes de resistencia a virosis en variedades tradicionales, como medida necesaria en aquellas zonas especialmente afectadas por determinadas enfermedades. De forma adicional, considerando el creciente interés por los alimentos saludables, la detección de variedades o poblaciones dentro de variedad que destaquen por un elevado valor funcional, puede contribuir a identificar un valor añadido que permita valorizar estas variedades tradicionales. En este contexto, se han encontrado poblaciones con niveles de vitamina C próximos a los mostrados por cultivares “Double Rich”, de licopeno dentro del rango de variación mostrado por cultivares “high pigment” y de β-caroteno comparables a los mejores resultados obtenidos en cultivares “high pigment”. Estos materiales resultan potencialmente útiles como fuentes de variación o pueden ser directamente aprovechables para ser reintroducidos en el mercado con un valor añadido contrastado. Aunque se ha encontrado variación para el contenido en polifenoles totales, éstos han sido intermedios. Finalmente, a la hora de realizar una adecuada identificación del ideotipo varietal, de depurar una variedad descartando poblaciones, de acelerar programas de introgresión de genes o simplemente para defender los mercados de calidad frente a fraudes que pretendan aprovechar los diferenciales de precio de las variedades tradicionales, es necesario contar con herramientas de caracterización molecular eficientes. En este trabajo se ha seleccionado y comprobado la efectividad de una colección de marcadores SNP para caracterizar variedades tradicionales de tomate y se han obtenido huellas moleculares para las variedades: “Centenares”, “Cuarenteno”, “De la pera”, “De pera”, “Flor de baladre”, “Gordo rojo”, “Moruno”, “Muchamiel”, “Negre”, “Pimiento”, “Valenciano” y “Tomaca gallega”. La tipificación varietal, la identificación de un valor añadido en las características organolépticas y funcionales de estos materiales, y la detección de perfiles moleculares que permitan autentificarlos, son elementos clave y necesarios para asegurar la protección de estos recursos genéticos. Estas actividades contribuirán a consolidar los mercados de calidad, satisfaciendo las demandas de los consumidores, y ofreciendo una alternativa de cultivo rentable a agricultores en sistemas minifundistas. / Cortés Olmos, C. (2015). Puesta en valor de variedades tradicionales de tomate [Tesis doctoral]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/48532

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:42:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_Miriane Lucas Azevedo.pdf: 711423 bytes, checksum: 1434a3d0c7af1c168d1730ce49dc9d17 (MD5) Previous issue date: 2010-02-28 / Blackberry (Rubus fruticosus) is considered a fruit rich in the phytochemical compounds, mainly phenolic acids and anthocyanins, which have a high potential for antioxidant and are also present L-ascorbic acid, carotenoids and tocopherols. Based on the concentration changes that these compounds undergo during the fruit ripening stages, this work aims to study the changes in the phytochemical profile of blackberry cv. Tupy, grown in temperate climates, in Pelotas, and effects on antioxidant and antimicrobial activity. Were determined five stages of ripening from green to mature through the external color of the fruit, and to confirm the differences between them, each stage was measured physical-chemical, determining total acidity (TA), total soluble solids (SS),ripening index (SS/TA) and instrumental analysis of color (hue angle). With regard to the phytochemical profile were analyzed phenolic compounds, L-ascorbic acid, carotenoids and tocopherols. It can be stated that according to the results of the different ripening stages did not affect significantly (p≤0.05) the total phenolic compounds, catechin and L-ascorbic acid. For the individual phenolic compounds during the fruit development, the derivatives of benzoic acid increased, the same behavior occurs with epicatechin, that among these is composed of higher concentration, the levels of cinnamic acid derivatives showed a different behavior, there fall of these levels. Anthocyanins increased during the fruit ripening, detaching the cyanidin-3-glucoside. The carotenoids and tocopherols decreased during ripening. One can conclude that it is possible to mount a phytochemical profile of blackberry cv. Tupy, grown in temperate climates, to differentiate their ripening stages, but it is necessary to carry out several determinations, since it is not possible to say which assessment contributed most to the differentiation of stages along the ripening. Another observation concerns the antioxidant activity increased during ripening, in vitro and in vivo, but noted that it is not possible to determine which compound has a higher antioxidant capacity in isolation, but found that there was a synergism between the phytochemical compounds present in fruit, which vary over the course of its development. Likewise, we can not say if there was an increase in antimicrobial activity over the course of ripening, and even if there was a specific secondary compound responsible for this antimicrobial activity, but that it exists, since the bacterium Salmonella enteritidis showed sensitivity to the extracts but with different answers. / Amora-preta (Rubus fruticosus) é considerada um fruto rico em compostos fitoquímicos, principalmente ácidos fenólicos e antocianinas, que possuem um elevado potencial antioxidante e também estão presentes ácido L-ascórbico, carotenóides e tocoferóis. Com base nas mudanças de concentração que esses compostos sofrem ao longo dos estádios de amadurecimento do fruto, este trabalho tem por objetivo estudar as alterações no perfil fitoquímico da amora-preta cv. Tupy, cultivada em clima temperado, na região de Pelotas, e os efeitos na capacidade antioxidante e antimicrobiana. Foram determinados cinco pontos de maturação do verde ao mais maduro, através da coloração externa do fruto, e para confirmar as diferenças entre estes, cada estádio foi avaliado físico-químicamente, determinandose acidez total titulável (AT), sólidos solúveis totais (SS), índice de maturação (SS/AT) e análise instrumental da cor (ângulo hue). Com relação ao perfil fitoquímico foram analisados os compostos fenólicos, ácido L-ascórbico, carotenóides e tocoferóis. Pode-se afirmar que de acordo com os resultados os diferentes estádios de maturação não afetaram significativamente (p≤0,05) os compostos fenólicos totais, a catequina e o ácido L-ascórbico. Para os compostos fenólicos individuais ao longo do desenvolvimento dos frutos, os derivados do ácido benzóico aumentaram, o mesmo comportamento ocorre com a epicatequina, que dentre todos é o composto de maior concentração, os teores dos derivados do ácido cinâmico apresentaram um comportamento diferenciado, houve queda destes teores. As antocianinas aumentaram ao longo da maturação do fruto, destacando a cianidina-3-glicosídeo. Os carotenóides e os tocoferóis decresceram no decorrer da maturação. Pode-se concluir que é possível montar um perfil fitoquímico da amora-preta cv. Tupy, cultivada em clima temperado, para diferenciar seus estádios de maturação, porém é necessária a realização de diversas determinações, uma vez que não é possível afirmar qual avaliação contribuiu em maior parte para a diferenciação dos estádios ao longo da maturação. Outra observação, diz respeito à atividade antioxidante que aumentou ao longo da maturação, tanto in vitro quanto in vivo, contudo foi observado que não é possível determinar qual composto tem maior capacidade antioxidante isoladamente, mas sim foi verificado que há um sinergismo entre os compostos fitoquímicos presentes no fruto, que variam ao decorrer do seu desenvolvimento. Da mesma maneira, não podemos afirmar se houve um aumento na atividade antimicrobiana ao decorrer da maturação, e nem se houve um composto secundário específico responsável por esta atividade antimicrobiana, mas sim que esta existe, uma vez que a bactéria Salmonella Enteritidis mostrou sensibilidade aos extratos, porém com diferentes respostas.

Made available in DSpace on 2015-04-17T14:49:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 parte1.pdf: 3805618 bytes, checksum: c5283752b1a8775c6dd8cef062f7c370 (MD5) Previous issue date: 2009-11-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The objective of this research was to evaluate the physical, physical-chemical, bioactive, and sensorial attributes of the first Brazilian seedless grapes (Vitis vinifera L.) varieties 'BRS Clara', 'BRS Linda', 'BRS Morena', and Advanced Selection 8, compared with the North American 'Crimson Seedless'. Three experiments had been carried out. For the first one, taking into account the Normative Brazilian/2002 and the requirements for exportations, it was determined that Advanced Selection 8 develops large cluster, inserted in class 2, with dark reddish berry, caliber 20, and ellipsoid format; 'BRS Morena' presents cluster of medium size, in class 2, with berry colored of black nuance, caliber 20, and format between ellipsoid and globoid; 'BRS Linda' with large cluster, in class 2, light-green color, and 'Crimson Seedless' with pink colored and small cluster inserted in class 1, offer berries in caliber 18 with ellipsoid formats; 'BRS Clara' develops medium size cluster in class 2, berry with caliber, green yellowish green color and a format elongated ellipsoid. All of these grapes meet the standards for national market that demands a minimum of 12 millimeters of diameter. On the other hand, 'BRS Clara' does not meet the minimum diameter demanded for exportations. The red grapes ' BRS Morena' e 'Crimson Seedless' develop the firmest berries. The hydrogenionic potential, titratable acidity and soluble solids content meet the official standard values. The largest clusters are significantly less acid and present higher soluble solid/titratable acidity ratio, inferring to be the sweetest when mature. For the second experiment, it was determined and correlated the content of acid Lascorbic, total phenolic composites, trans-resveratrol, and the total antioxidative capacity of the studied grapes. All grape samples presented low acid L-ascorbic contents. The white 'BRS Clara' presents marked content of total phenolic compounds, followed by the white 'BRS Linda', in third position are the red ones: Advanced Selection 8, 'BRS Morena', and 'Crimson Seedless'. 5 Grapes presented distinct contents of trans-resveratrol in this following order of superiority: 'BRS Morena', 'Crimson', Advanced Selection 8, 'BRS Linda', and 'BRS Clara'. Trans-resveratrol seems to provide varietal identity. Red grapes presented higher contents of trans-resveratrol. 'BRS Clara', ' Crimson Seedless', and 'BRS Linda', similarly, presented the highest antioxidative capacity and the color of the grape did not influence on that. The contents of total extractable phenolic compounds influenced positively on the antioxidative capacity. Grapes presenting larger contents of total extractable phenolic compounds presented lower content of transresveratrol. For the third experiment it was used the Quantitative Descriptive Sensorial Analysis, by means of selected and trained judges. On the global quality, 'BRS Morena' was superior than others grapes evaluated, while Advanced Selection 8 was in second position, and 'BRS Linda' and 'Crimson Seedless' occupied the third position, while 'BRS Clara' showed the most inferior sensorial quality. The general characteristics flavor, with large superiority, followed, in this order, by the strongest tonality, the red color, the most spherical format, the highest firmness, succulence, crispness, and sweetness contributed positively with the global quality. The bitter taste and the sensorial acidity, in this sequence of intensity, were the attributes of larger negative influence. The results for physical and physical-chemical evaluations, together, reflect significantly the sensorial perceptions. Therefore, once inserted in the official standards of identity and quality, beside the varietal characteristic flavor, producers must prefer to produce grapes of stronger tone, larger sizes, and more spherical or globular formats. / O objetivo desta pesquisa foi avaliar os atributos físicos, físico-químicos, bioativos e sensoriais das primeiras variedades de uvas (Vitis vinifera L.) sem sementes brasileiras, 'BRS Clara', 'BRS Linda' e 'BRS Morena', mais a Seleção Avançada 8, comparadas com a norte-americana 'Crimson Seedless'. Foram conduzidos três experimentos. Assim, com o primeiro considerando as Normativas brasileiras/2002 e as exigências para exportações, determinou-se que a Seleção Avançada 8 possui cacho grande na classe 2 com baga avermelhada escura, calibre 20 e formato elipsóide; A 'BRS Morena' apresenta cacho médio na classe 2, com baga colorida de nuança preta, calibre 20 e de formato elipsóide a quase globoso; a 'BRS Linda' com cacho grande, classe 2, de cor verde clara e a 'Crimson' com cacho róseo, pequeno na classe 1 oferecem bagas de calibre 18 e com formatos elipsóides; a 'BRS Clara' possui cacho médio e de classe 2, com baga de calibre 14, tom verde amarelado e de formato elipsóide alongado. Todas atendem o mercado nacional quanto aos diâmetros mínimos de 12 milímetros. A 'BRS Clara' não atende os diâmetros exigidos para exportações. As uvas tintas 'BRS Morena' e 'Crimson Seedless' dispõem das bagas mais firmes. O potencial hidrogeniônico, a acidez titulável e os teores de açúcares solúveis atendem aos padrões oficiais. Os cachos maiores são os menos ácidos e apresentam a melhor relação de sólidos solúveis/acidez titulável, inferindo serem os mais doces, quando maduros. O segundo experimento determinou e correlacionou os teores de ácido L-ascórbico, compostos fenólicos totais extraíveis, trans-resveratrol e a capacidade antioxidante total das uvas estudadas. Todas as amostras apresentaram baixos conteúdos de ácido L-ascórbico. A branca 'BRS Clara' apresenta destacado teor de compostos fenólicos totais extraíveis, seguida pela branca 'BRS Linda', em terceiro lugar encontram-se as tintas Seleção 8, 'BRS Morena' e 3 'Crimson'. As uvas apresentaram conteúdos distintos do trans-resveratrol e nessa ordem de superioridade: 'BRS Morena', 'Crimson', Seleção Avançada 8, 'BRS Linda' e 'BRS Clara'. O trans-resveratrol parece conferir identidade varietal. As tintas apresentaram maiores conteúdos de trans-resveratrol. A 'BRS Clara', 'Crimson' e 'BRS Linda', igualmente, apresentaram a maior capacidade antioxidante. A cor não interferiu na capacidade antioxidante. Os compostos fenólicos totais influenciaram positivamente na capacidade antioxidante. Uvas com maiores quantidades de compostos fenólicos totais extraíveis, apresentam menores teores de transresveratrol. No terceiro experimento utilizou-se a Análise Sensorial Descritiva Quantitativa, mediante julgadores selecionados e treinados. Quanto à qualidade global, a 'BRS Morena' apresentou-se superior, a Seleção Avançada 8 destacou-se em segundo lugar, enquanto, a 'BRS Linda' e 'Crimson Seedless' ocuparam o terceiro lugar e a BRS Clara' foi de qualidade inferior, sensorialmente. O sabor geral característico, com ampla superioridade, seguido na ordem, pela tonalidade mais forte, a cor tinta, o formato mais esférico, a maior firmeza, suculência, crocância e doçura contribuíram positivamente com a qualidade global. O amargor e a acidez sensorial, nesta seqüência de intensidade, foram os atributos de maior influência negativa. Os resultados das avaliações físicas e físico-químicas, em conjunto, refletem com significância as percepções sensoriais. Uma vez, dentro dos padrões de identidade e qualidade oficiais, além do sabor varietal característico, os produtores devem preferir produzir uvas de tons mais fortes, tamanhos maiores e de formatos mais esféricos ou globosos.