Orientador: Vanessa Doro Abdallah Kozlowiski / Coorientador: Rodney Kozlowiski de Azevedo / Banca: Reinaldo José da Silva / Banca: Ricardo Massato / Resumo: A biodiversidade dos ecossistemas dulcícolas tem sido ameaçada por problemas ambientais e o rio Batalha que pertence à Bacia Hidrográfica do Tietê-Batalha é um exemplo de ambiente que vem sofrendo com várias agressões antrópicas. Nesse sentido, o estudo da ictiofauna parasitária tem um papel fundamental, já que traz diversos indicativos sobre as condições dos ecossistemas. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi diagnosticar qualitativamente e quantitativamente as comunidades parasitárias de Astyanax altiparanae, A. bockmanni e A. fasciatus provenientes do rio Batalha. Ao todo, foram coletados 125 peixes e recuperados 1295 parasitos pertencentes a quatro grupos: Myxozoa (Henneguya sp.), Monogenea (Cacatuocotyle guaibensis, Characithecium sp., Diaphorocleidus kabatai, Diaphorocleidus sp.1, Diaphorocleidus sp.2, Diaphorocleidus sp.3 e Jainus hexops), Digenea (Auriculostoma sp., Austrodiplostomum compactum, Bacciger delvalleensis, Bellumcorpus majus, Clinostomum sp. e Diplostomidae gen. sp.) e Nematoda (Contracaecum sp., Cystidicoloides sp., Heliconema izecksohni, Philometroides caudata e Spiroxys sp.). Para a análise da sazonalidade, foram coletados 44 espécimes de A. altiparanae no período "seco" e 31 no período "chuvoso". Nos dois períodos houve uma prevalência maior de monogenéticos. No período "seco" três espécies de monogenéticos apresentaram correlações positivas e o digenético B. majus teve correlação negativa em relação ao comprimento dos hospedeiros. No período "chuvoso" apenas o parasito Diaphorocleidus sp.2 apresentou correlação positiva em relação ao comprimento dos seus hospedeiros. Todos os parasitos, com exceção do digenético B. majus apresentaram padrão de distribuição agregado para o período "seco", já no período "chuvoso" todos os parasitos apresentaram padrão de distribuição agregado. Como foram coletados apenas... / Abstract: The biodiversity of freshwater ecosystems have been threatened by environmental problems and the Batalha river that belongs to the Tietê-Batalha River Basin is an example environment that has suffered from several anthropogenic aggressions. In this sense, the study of parasitic fish fauna plays a key role, since it has several indicative of the conditions of ecosystems. Thus, the objective of this study was to diagnose qualitatively and quantitatively the parasite communities of Astyanax altiparanae, A. bockmanni and A. fasciatus from the Batalha river. In all, 125 fish were collected and recovered 1295 parasites belonging to four groups: Myxozoa (Henneguya sp.), Monogenea (Cacatuocotyle guaibensis, Characithecium sp., Diaphorocleidus kabatai, Diaphorocleidus sp.1, Diaphorocleidus sp.2, Diaphorocleidus sp.3 and Jainus hexops), Digenea (Austrodiplostomum compactum, Auriculostoma sp., Bacciger delvalleensis, Bellumcorpus majus, Clinostomum sp. and Diplostomidae gen. sp.) and Nematoda (Contracaecum sp., Cystidicoloides sp., Heliconema izecksohni, Philometroides caudata and Spiroxys sp.). For the analysis of seasonality, were collected 44 specimens of A. altiparanae in the "dry" period and 31 in "rainy" period. In both periods there was a higher prevalence of monogenetic. In the "dry" period three species of monogenetic showed positive correlations and the B. majus digenetic had negative correlation to the length of the hosts. In the "rainy" period only the parasite Diaphorocleidus sp.2 was positively correlated to the length of their hosts. All parasites except the B. majus digenetic had aggregated pattern for the "dry" period, in the period "rainy" all parasites showed an aggregated distribution pattern. How were collected only 19 specimens of A. bockmanni, were not performed statistical analyzes for this species of fish. Thirty-one A. fasciatus specimens were collected and the monogenetic accounted for the majority of parasites recovered... / Mestre

Orientador: Nelson da Silva Cordeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:18:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barassa_Bianca_M.pdf: 4898369 bytes, checksum: 69954549f09b0f7d1530d9d5bad3c722 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Com a finalidade de contribuir com o conhecimento de parasitos do filo Myxozoa em peixes de água doce, acrescentando possíveis novas espécies às já descritas, foram examinados deJaneiro a Dezembro de 2001, 120 exemplares de Astyanax altiparanae e 18 exemplares de Serrasalmus spilopleura, coletados em um lago da Fazenda Rio das Pedras, localizada no município de Campinas, SP. Verificou-se também a prevalência e os aspectos histopatológicos provocados no hospedeiro. Os peixes coletados com o auxílio de vara comum de pesca, foram transportados vivos para o laboratório, onde todos os seus órgãos foram examinados. A detenninação do parasito foi realizada mediante comparações morfométricas com as espécies já descritas na literatura. Em A. altiparanae foi observado a ocorrência de duas novas espécies de mixosporídios pertencentes ao gênero Henneguya: Henneguya chydadea, parasitando as brânquias, com prevalência de 88,3% e Henneguya sp. 1 parasitando as nadadeiras, com prevalência de 44,3%. O desenvolvimento dos cistos de H. chydadea no epitélio lamelar resultou em deformação da lamela e compressão dos capilares. Em estágios mais avançados observou-se retração das lamelas vizinhas, com redução da superfície para as trocas gasosas. Similar estudo histológico revelou que os cistos de Henneguya sp. 1, desenvolvem-se no tecido conjuntivo da base dos raios das nadadeiras. A presença desses cistos não provocou nenhuma resposta inflamatória no hospedeiro. Nas brânquias de S. spilopleura foi verificado, a ocorrência de uma nova espécie de mixosporídio, Henneguya curvata, com prevalência de 100%. O parasito produziu defonnação -das estruturas lamelares, incluindo compressão dos capilares, o qual levou a um discreto edema. Em estágios mais avançados os cistos produziram fusão entre as lamelas vizinhas / Abstract: Aiming to contribute to the knowledge of parasites of the filo Myxozoa in freshwater fish, adding possible new species to the ones already described, 120 samples ofAstyanas altiparanae and 18 samples of Serrasalmus spilopleura were examined between January and December 2001, collected ftom a lake located on Rio das Pedras fimn, close to the city of Campinas, state of São Paulo, Brazil. Prevalence was also veritied and the histopathological aspects provoked in the host. The fish collected with the aid of an ordinary fishing rod, were transported alive to the laboratory, where all their organs were examined. The determination of the parasite was perceived upon morphometrical comparisons with the species already described in the literature. In A. altiparanae was observed the occurrence of two new species of myxosporeans belonging to the genera Henneguya: Henneguya chydadea, parasitising the gill, with prevalence of 88.3 % and Henneguya sp. 1 parasitising the fins, with prevalence of 44.3 %. The development ofthe cysts of H. chydadea in the lamellar epithelium resulted in defonnation ofthe lamellae and compression of the capillaries. In more advanced stages, retraction of the neighboring lamellae was observed, with reduction of the surfuce for the gas exchanges. Similar histological study revealed that the cysts of Henneguya sp. 1 developed in the conjunctive tis sue ofthe basis ofthe radii of the fins. The presence of these cysts did not provoke anY inflammatory response in the host. In the gill of S. spilopleura was observed the occurrence of a new species of myxosporeans, Henneguya curvata, with prevalence ofl 00%. The parasite produced deformation -of the lamellar structures, including compression of the capillaries, which lead to slight edema. In more advanced stages the cysts produced fusion among the neighboring lamellae / Mestrado / Mestre em Parasitologia

Orientador: Wagner Cotroni Valenti / Banca: Alessandra da Silva Augusto / Banca: Fábio Rosa Sussel / Banca: Guilherme Wolff Bueno / Resumo: Os sistemas de produção de lambari se diferenciam pelo nível de controle da reprodução da espécie. As técnicas utilizadas envolvem desde a reprodução natural até a utilização de laboratório para indução hormonal. Assim, classificamos os sistemas produção de lambari em baixo (LCS), médio (MCS) e alto (HCS) controle. Nosso objetivo é caracterizar os três principais sistemas de produção de lambari do Estado de São Paulo e avaliar a sustentabilidade de cada um. A sustentabilidade foi avaliada por meio de indicadores ambientais, sociais, econômicos e de governança. Visitamos nove propriedades selecionadas de acordo com o nível de controle de produção. Os dados sociais, econômicos e de governança foram obtidos por meio de um questionário semiestruturado e dados secundários obtidos em órgãos públicos. Amostras de água, sedimento, lambaris produzidos e dieta fornecida foram coletadas nas fases inicial e final do ciclo de produção em cada propriedade e analisados no Laboratório de Aquicultura Sustentável, do CAUNESP, no Campus de São Vicente da UNESP. As variáveis obtidas foram comparadas entre os sistemas. Os indicadores foram calculados e transformados em escala de performance. Assim, foram calculados índices de sustentabilidade ambiental, social, econômica e institucional por combinação linear e gerado um índice geral de sustentabilidade para cada sistema. Os sistemas de médio e alto controle de produção foram classificados como Potencialmente Sustentável, com índices de 0.686 e 0.... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The production systems of lambari differ by the level of control of the reproduction. The techniques used vary from natural reproduction to laboratory use for hormonal induction. Thus, we classify the lambari production systems in low (LCS), medium (MCS) and high (HCS) control . Our objective is to characterize the three main lambari production systems in the São Paulo State and to evaluate t he sustainability of each one. The s ustainability was assessed by environmental, social, economic and governance indicators. We visited nine properties selected according to thei r level of control of production. Social, economic and governance data were obtained through a semi - structured questionnaire and secondary data obtained from public agencies. Samples of water, sediment, lambari produced and diet supplied were collected in the initial and final phases of the breeding cycle in each property and analyzed in the Sustainab le Aquaculture Laboratory of CAUNESP, at the São Vicente Campus of UNESP. The obtained variables were compared between the systems. The indicators were calcula ted and transformed into a performance scale. Thus, environmental, social, economic and governance sustainability indexes were calculated by linear combination and generated a general sustainability index for each system. The systems of medium and high con trol of production were classified as Potentially Sustainable, with indexes of 0.686 and 0.775, respectively. The low production control system was cl... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Resumo: O lambari Astyanax altiparanae Garutti e Britski (2000) vem ganhando a atenção de pesquisadores e produtores, devido a sua alta taxa de sobrevivência, rápido crescimento, fácil aceitação de alimento artificial, carne saborosa e grande procura como isca viva. As fêmeas apresentam taxas de crescimento mais elevadas do que os machos tornando sua criação mais vantajosa. O processo de diferenciação sexual pode ser controlado pela administração de hormônios sexuais, em peixes sexualmente indiferenciados, alterando o curso da diferenciação no sentido do sexo desejado. Neste trabalho, o desenvolvimento gonadal foi acompanhado nas primeiras 180 horas pós eclosão - hpe (7,5 dias pós eclosão - dpe) das larvas, na tentativa de se conhecer o momento da diferenciação sexual e/ou a melhor fase para aplicação de hormônio feminizante. Foram mantidas 1.000 larvas recémeclodidas em tanques de incubadoras sob aeração constante e temperatura ambiente. Dez exemplares foram diariamente fixados em solução Karnovsky modificada, incluídos em historesina, e corados com HE. Os resultados revelaram que as 12 hpe, o cordão gonadal já está alocado permanecendo por todo o período estudado. Durante o período inicial de aproximadamente 206ºC dias de vida da larva não observou-se, por meio de análise histológica, diferenciação sexual em A. altiparanae. Nesta fase foi possível observar, a abertura da boca que se deu às 19 hpe e a transição alimentar que ocorreu entre 43 e 60 hpe. Em um segundo estudo, a produção de lotes monossexos femininos do lambari foi avaliada, pelo método direto, utilizando o estrógeno, valerato de estradiol, na tentativa de provocar a feminização dos machos. Para isto, foram utilizadas 1.000 larvas de lambari que foram distribuídas em quatro tanques de incubadoras com temperatura média de 21.8 ± 2ºC... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The lambari Astyanax altiparanae Garutti and Britski (2000) has been getting attention of researchers and producers, due to its high rate of survival, fast growth, easy acceptance of food artificial, tasty meat and high demand as live bait. Females have higher growth rates than males making its creation more advantageous. The process of sexual differentiation can be controlled by administration of sex hormones in fish sexually undifferentiated, altering the course of differentiation towards the desired sex. In this study, the gonadal development was observed in the first 180 hours post-hatching - hph (7,5 days post-hatching - dph) of the larvae, in attempt to know the time of sexual differentiation and/or the best stage for the application of female hormone. 1.000 larvae, which were newly-hatched in tanks of incubators under constant aeration and ambient temperature, were kept. Ten specimens were daily fixed in solution Karnovsky modified, included in historesin, and stained with HE. The results showed that 12 hph, the gonadal cord is already allocated by remaining throughout the study period. During the initial period of, approximately, 206ºC-day life of the larva, it is not observed, by means of histological analysis, sexual differentiation in A. altiparanae. At this stage, it was possible to observe the opening of the mouth, which happened at 19 hph, and the food transition, which occurred between 43 and 60 hph. In a second study, the production of female monossex lots of lambari was evaluated by the direct method, using estrogen, estradiol valerate, in an attempt to cause the feminization of males. For this purpose, 1.000 lambari larvae, which had been distributed in four tanks of incubators, in an average temperature of 21.8 ± 2ºC, were used. Initially, the larvae were fed by nauplii of Artemia salina and, 72 hph, their food was replaced by a diet containing 35% crude protein... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Patricia Pasquali Parise Maltempi / Coorientador: Carmem Silvia Fontanetti Christofoletti / Banca: Rosicleire Veríssimo Silveira / Banca: Yara Aiko Tabata / Mestre

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-06-21T11:13:21Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 935768 bytes, checksum: 367eab646a5e48be7141bcfc1719890d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-21T11:13:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 935768 bytes, checksum: 367eab646a5e48be7141bcfc1719890d (MD5) Previous issue date: 2016-02-17 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Durante a criação de peixes, diversas práticas culturais podem causar estresse aos animais, como por exemplo, manipulação associada à captura e triagem, densidade de estocagem inadequada, transporte, interações biológicas, qualidade da água e manejo de alimentação. Dentre as alternativas para minimizar os efeitos do estresse em peixes cultivados, o uso de plantas medicinais como aditivos em dietas destaca-se em função destas apresentarem menos efeitos colaterais, menor toxicidade e melhor biodegradabilidade, quando comparados aos antibióticos, o que as tornam potencialmente seguras em termos da saúde animal e para o meio ambiente. Durante a última década, a atenção tem sido cada vez mais focada no uso de plantas medicinais para promover uma aquicultura sustentável, uma vez que esses produtos podem ser utilizados para diversos fins como: anestésicos, promotores de crescimento, imunoestimulantes, na profilaxia e tratamento de doenças e como redutores de estresse. Além de avaliar a eficácia dos extratos vegetais no crescimento e no aumento da resistência ao estresse, é necessário avaliar também a segurança do seu uso, uma vez que as plantas podem apresentar toxicidade tanto para o homem quanto para os animais. Dentre as plantas com potencial para serem usadas como aditivos em dietas, a Curcuma longa destaca-se devido a sua grande diversidade de propriedades biológicas como: anti-inflamatória, imunoestimulante, antioxidante, antimicrobiana e anticarcinogênica. Além disso, a cúrcuma apresenta efeitos benéficos na secreção de enzimas digestivas, na desintoxicação do organismo, sobre o desenvolvimento do epitélio intestinal, sobre o metabolismo dos lipídios, sobre a secreção de insulina, sendo hipoglicemiante. Dessa forma, objetivamos avaliar a segurança e eficácia da Curcuma longa na dieta de Astyanax aff. bimaculatus, na produção e no estresse por transporte. Juvenis de Astyanax aff. bimaculatus (0,83 ± 0,04g) foram mantidos em 24 aquários (80L de água), na densidade de 0,5 peixes.L^-1, durante 90 dias. Foram avaliadas seis dietas suplementadas com 0,0; 20,0; 40,0; 60,0; 80,0 e 100,0 g de cúrcuma.kg^-1. Ao final desse período, para a realização do transporte foram utilizados 24 sacos plásticos com 15 peixes cada, contendo 1,5 litros de água, preenchidos com oxigênio. Os peixes foram mantidos nos sacos plásticos durante 24 horas, no porta-malas de um automóvel que alternou períodos em movimento e parado. Os demais peixes foram eutanasiados por excesso de anestésico (400mg de óleo de cravo.L^-1 de água) para a coleta das amostras biológicas. Antes do transporte, foi observado efeito linear crecente da cúrcuma na espessura da túnica muscular, e na altura e largura das pregas dos intestinos. No fígado, houve efeito quadrático da cúrcuma sobre a porcentagem de citoplasma dos hepatócitos, sendo o valor estimado para maximizar essa variável de 86,88 g de cúrcuma.kg^-1 e efeito linear decrescente sobre o percentual de capilares sinusoides. Foi observado efeito quadrático da cúrcuma sobre os níveis de glicogênio hepático, sendo o valor que maximiza essa variável de 45,00 g de cúrcuma.kg^-1. Nas análises histopatológicas, foi observado efeito quadrático da cúrcuma para o índice de brânquias (IBRA), sendo o valor estimado que minimiza esse índice igual a 30,23 g de cúrcuma.kg^-1. Após o transporte, pelo modelo descontínuo LRP (Linear Response Plateau), que melhor se ajustou aos dados (P<0,01), a menor concentração estimada de cúrcuma que maximiza a taxa de sobrevivência foi igual a 16,67 g.kg^-1. Houve efeito quadrático da cúrcuma sobre o lactato sanguíneo, sendo o valor estimado para minimizar essa variável igual a 64,7 g de cúrcuma.kg^-1. Foi observado efeito quadrático da cúrcuma sobre a atividade da enzima superóxido dismutase e para a concentração do malondialdeído nas brânquias dos peixes, sendo os valores que minimizam essas variáveis de 42,50 e 83,33 g de cúrcuma.kg^-1, respectivamente. Dessa forma, concluímos que a Curcuma longa na alimentação de peixes é segura em doses até 30,23 g.kg^-1 de dieta, e que a mesma tem efeito trófico no epitélio e túnica muscular do intestino. Doses baixas de cúrcuma causam aumento da deposição de glicogênio hepático, no entanto, doses elevadas causam diminuição dessa variável. Além disso, após o transporte, a cúrcuma minimiza as respostas de estresse e melhora o estado antioxidante. / In fish farming, diverse cultural practices can cause stress to animals, such as handling associated with the capture and sorting, the use of inadequate stocking density, transport, biological interactions, water quality and feeding management. Among the alternatives to minimize the effects of stress in farmed fish, the use of medicinal plants as feed additives stands out in function of these have fewer side effects, less toxicity and better biodegradability compared to antibiotics, which make them potentially safe in terms of animal health and for the environment. During the last decade, attention has been increasingly focussed on the use of medicinal plants to promote a sustainable aquaculture, since such products can be used for various purposes such as anesthetics, growth promoters, immunostimulants, for the prophylaxis and treatment of diseases and stress reducers. In addition to evaluating the effectiveness of plant extracts on growth and increased resistance to stress is also necessary to evaluate the safety of their use, since plants may exhibit toxicity both for humans and for animals. Among the plants with potential for use as additives in animal feed, the Curcuma longa stands out due to its wide range of biological properties such as anti-inflammatory, immunostimulant, antioxidant, antimicrobial and anticarcinogenic. In addition, the turmeric has beneficial effects on the secretion of digestive enzymes, body detoxification, the development of intestinal epithelium, lipid metabolism, insulin secretion and hypoglycemic. Thus, we aimed to assess the efficacy and safety of the use of Curcuma longa in diets for Astyanax aff bimaculatus before and after stress by transport. Juvenile Astyanax aff. bimaculatus (0.83 ± 0.04g) were kept in aquariums 24 (80L water), at a density of 0.5 fish.L^-1 for 90 days. Six diets were evaluated supplemented with 0.0; 20.0; 40.0; 60.0; 80.0 and 100.0 g kg^-1 of turmeric. After this period, for the realization of transport were used 24 plastic bags with 15 fish each, containing 1.5 liters of water, filled with oxygen. Fish were kept in the plastic bags in the trunk of a car for 24 hours, with alternating periods of movement and non- movement. Other fish were euthanized by an excess of anesthetic (400 mg L^-1 clove oil in water) for collection of biological samples. Before transport, there was an increasing linear effect of turmeric on the thickness of the muscular layer, and height and width of the folds of the intestines. In the liver, a quadratic effect was observed of turmeric on the percentage of hepatocyte cytoplasm, and the estimated value to maximize this variable was equal to 86.88 g turmeric.kg^-1 and a decreasing linear effect on the percentage of sinusoid capillaries. A quadratic effect of turmeric treatment was also observed of turmeric on the liver glycogen and the value that maximize this variable was equal to 45.00 g turmeric.kg^-1. In the histopathological analysis, it was observed a quadratic effect of turmeric to the gills Index (I GILLS ), and the estimated value that minimize this index was iqual to 30.23 g turmeric.kg^-1. After transport, according to the discontinuous model LRP (Linear Response Plateau), which best fit to the data (P <0.01), the estimated lowest concentration of turmeric that maximize the survival rate was 16.67 g.kg^-1. A quadratic effects of turmeric to blood lactate was observed, and the estimated value to minimize this variable was equal to 64.7 g turmeric.kg^-1. It was observed quadratic effect of turmeric on the enzyme superoxide dismutase activity and the concentration of malondialdehyde in the fish gills, and the values that minimize these variables were of 42.50 and 83.33 g turmeric.kg^-1, respectively. Thus, we conclude that Curcuma longa in fish feeding is safe at doses up to 30.23 g.kg^-1 diet and that it has a trophic effect on epithelial and muscular layers of the intestines. Low doses of turmeric cause increased deposition of liver glycogen, however, high doses lead to a decrease in this variable. In addition, after transport, the turmeric minimizes the stress responses and improves antioxidant status.

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-14Bitstream added on 2014-11-10T11:58:09Z : No. of bitstreams: 1 000777313_20150214.pdf: 550077 bytes, checksum: d8e01ff78c8836d4f7aed4afe688ca49 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-02-18T15:02:15Z: 000777313_20150214.pdf,Bitstream added on 2015-02-18T15:02:48Z : No. of bitstreams: 1 000777313.pdf: 519896 bytes, checksum: f1173172b8a785b6cd1ddbebc6b8e207 (MD5) / O objetivo deste trabalho foi estudar aspectos básicos dos gametas e o desenvolvimento inicial de Astyanax altiparanae, para futura aplicação na área de biotecnologia, incluindo manipulação cromossômica de embriões. No Capítulo I, os ovócitos foram analisados por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e a dose inseminante foi determinada. O sêmen também foi coletado e analisado com sistema de análise computadorizada (CASA). A dose inseminante reduzida encontrada para a espécie foi explicada pela morfologia dos ovócitos através de análise em MEV, que revelou vilosidades que cercam a micrópila relacionadas à orientação do esperma para a fecundação. No capítulo II, vários parâmetros relacionados com a fertilização foram descritos, incluindo a extrusão do segundo corpúsculo polar, a fusão dos pronúcleos e a formação do cone de fertilização. Além disso, o efeito de três temperaturas (22°C, 26°C e 30°C) sobre os estádios de desenvolvimento foi determinado. A extrusão do segundo corpúsculo polar ocorreu em 4-6 minutos pós-fertilização (mpf), e os pronúcleos fundiram-se com 8-10 mpf. O espermatozoide apresentou uma cabeça esférica, peça intermediária e flagelo. Como esperado, as temperaturas mais elevadas deram origem a um desenvolvimento e incubação mais rápidos. As informações obtidas neste estudo irão abrir novas possibilidades no campo da manipulação cromossômica de embriões, incluindo poliploidia, quimerismo, transgenia e outras técnicas / The aim of this study was to study basic aspects of gametes and early development of yellowtail tetra Astyanax altiparanae, for future application in biotechnology including chromosome and embryo manipulation. In Chapter I, the oocytes were analyzed by Scanning Electron Microscopy (SEM) and the insemination dose was determined. Semen was also collected and analyzed using a Computer Assisted Sperm Analysis (CASA). Such a reduced inseminating dose was explained by oocyte morphology because SEM analysis revealed villosities surrounding the micropyle that is related to the sperm guidance for fertilization. In addition, the duration of sperm motility was longer in comparison to most teleosts, what may improve fertilization ability. In Chapter II, several parameters related with fertilization were described, including the second polar body extrusion, fusion of the pronuclei and the formation of the fertilization cone. Moreover, the effect of three temperatures (22°C, 26°C and 30°C) on developmental stages was determined. 2nd polar body was extruded at 4-6 minutes post fertilization (mpf), and the pronuclei were formed at 8-10 mpf. The sperm showed a spherical head, midpiece and flagellum. As expected, higher temperatures gave rise to faster development and hatching. The information obtained in this study will open new possibilities in the field of chromosome and embryo manipulation including poliploidy, chimerism, transgenesis and other techniques

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-05-07Bitstream added on 2014-06-13T19:49:29Z : No. of bitstreams: 1 bem_jc_me_rcla.pdf: 669449 bytes, checksum: 0288c0d763b074ddbb25c517c036ec04 (MD5) / O lambari Astyanax altiparanae Garutti e Britski (2000) vem ganhando a atenção de pesquisadores e produtores, devido a sua alta taxa de sobrevivência, rápido crescimento, fácil aceitação de alimento artificial, carne saborosa e grande procura como isca viva. As fêmeas apresentam taxas de crescimento mais elevadas do que os machos tornando sua criação mais vantajosa. O processo de diferenciação sexual pode ser controlado pela administração de hormônios sexuais, em peixes sexualmente indiferenciados, alterando o curso da diferenciação no sentido do sexo desejado. Neste trabalho, o desenvolvimento gonadal foi acompanhado nas primeiras 180 horas pós eclosão – hpe (7,5 dias pós eclosão - dpe) das larvas, na tentativa de se conhecer o momento da diferenciação sexual e/ou a melhor fase para aplicação de hormônio feminizante. Foram mantidas 1.000 larvas recémeclodidas em tanques de incubadoras sob aeração constante e temperatura ambiente. Dez exemplares foram diariamente fixados em solução Karnovsky modificada, incluídos em historesina, e corados com HE. Os resultados revelaram que as 12 hpe, o cordão gonadal já está alocado permanecendo por todo o período estudado. Durante o período inicial de aproximadamente 206ºC dias de vida da larva não observou-se, por meio de análise histológica, diferenciação sexual em A. altiparanae. Nesta fase foi possível observar, a abertura da boca que se deu às 19 hpe e a transição alimentar que ocorreu entre 43 e 60 hpe. Em um segundo estudo, a produção de lotes monossexos femininos do lambari foi avaliada, pelo método direto, utilizando o estrógeno, valerato de estradiol, na tentativa de provocar a feminização dos machos. Para isto, foram utilizadas 1.000 larvas de lambari que foram distribuídas em quatro tanques de incubadoras com temperatura média de 21.8 ± 2ºC... / The lambari Astyanax altiparanae Garutti and Britski (2000) has been getting attention of researchers and producers, due to its high rate of survival, fast growth, easy acceptance of food artificial, tasty meat and high demand as live bait. Females have higher growth rates than males making its creation more advantageous. The process of sexual differentiation can be controlled by administration of sex hormones in fish sexually undifferentiated, altering the course of differentiation towards the desired sex. In this study, the gonadal development was observed in the first 180 hours post-hatching – hph (7,5 days post-hatching - dph) of the larvae, in attempt to know the time of sexual differentiation and/or the best stage for the application of female hormone. 1.000 larvae, which were newly-hatched in tanks of incubators under constant aeration and ambient temperature, were kept. Ten specimens were daily fixed in solution Karnovsky modified, included in historesin, and stained with HE. The results showed that 12 hph, the gonadal cord is already allocated by remaining throughout the study period. During the initial period of, approximately, 206ºC-day life of the larva, it is not observed, by means of histological analysis, sexual differentiation in A. altiparanae. At this stage, it was possible to observe the opening of the mouth, which happened at 19 hph, and the food transition, which occurred between 43 and 60 hph. In a second study, the production of female monossex lots of lambari was evaluated by the direct method, using estrogen, estradiol valerate, in an attempt to cause the feminization of males. For this purpose, 1.000 lambari larvae, which had been distributed in four tanks of incubators, in an average temperature of 21.8 ± 2ºC, were used. Initially, the larvae were fed by nauplii of Artemia salina and, 72 hph, their food was replaced by a diet containing 35% crude protein... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Eduardo Alves de Almeida / Banca: Luis Octavio Regasini / Banca: Camilo Dias Seabra Pereira / Resumo: Dentre os efeitos negativos da exposição a poluentes nos animais aquáticos podemos destacar o estresse oxidativo, uma produção exacerbada de espécies reativas de oxigênio, consequentemente, uma cascata de eventos bioquímicos denominados peroxidação lipídica (PL) ocorrem tendo como principal produto o malondialdeído (MDA). Assim, ainda que o aumento dos níveis de MDA esteja relacionado a intoxicação por poluentes, alguns trabalhos têm mostrado uma diminuição do MDA frente a essa exposição, mesmo com alterações em enzimas antioxidantes. Deste modo, este trabalho teve por objetivo avaliar se possíveis decréscimos nos níveis de MDA em peixes Astyanax altiparanae expostos a contaminantes ambientais pode ter relação com aumentos na atividade de defesas antioxidantes, aumentos na atividade da ALDH ou excreção do MDA na água. Assim, os lambaris foram expostos a misturas de metais (cádmio e cobre) nas concentrações 40 e 100 μg/L e a biodiesel B5 nas concentrações de 0,001, 0,01 e 0,1 mL/L para verificar a relação entre MDA e as enzimas antioxidantes, em amostras de brânquia e fígado. Um segundo experimento, injetando MDA nos espécimes foi realizado, nestes organismos, foram injetados intraperitonealmente doses de 10 mg/kg e 100 mg/kg de MDA com coleta do material biológico após 5 dias para avaliar o efeito do MDA no fígado e na brânquia do lambari. Um terceiro experimento foi realizado para avaliar a metabolização do MDA em brânquia e fígado e sangue com coleta de material biológico e água nos tempos zero (logo após receber a dose), 1 e 12 horas. Nestes experimentos a metabolização do MDA foi observada pela atividade da enzima aldeído desidrogenase (ALDH) e as enzimas antioxidantes catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPx), glicose - 6- fosfatodesidrogenase (G6PDH) e a de biotransformação glutationa S-transferase (GST), peróxidos... / Abstract: Among the adverse effects of exposure to pollutants in aquatic animals, we can highlight oxidative stress, which can be caused due to an exacerbated production of reactive oxygen species along with a cascade of biochemical events. During this cascade, one of oxidative consequences we can observe is called lipid peroxidation (LPO) with its main product malondialdehyde (MDA). Thus, although the increase in MDA levels is related to intoxication by pollutants, some studies have shown a decrease in MDA levels in aquatic organisms exposed to pollutants, even with significant improvment in antioxidant enzymes. Thus, this study aimed to assess the relationship among the reduced MDA levels in Astyanax altiparanae fish exposed to environmental contaminants, and increased antioxidant defenses and aldehyde dehydrogenase (ALDH) activity, or excretion of MDA in the water. In this way, the fishes were exposed to mixtures of metals (cadmium or copper) at concentrations of 40 g/L and 100 g/L and to B5 biodiesel in concentrations of 0.001 mL/L, 0.01 mL/L and 0.1 mL/L in order to verify the relation between MDA and antioxidant enzymes in the liver, and gill samples. We performed a second experiment by injecting MDA in the fish specimens. We intraperitoneally injected doses of 10 mg/kg and 100 mg/kg of MDA. After 5 days, we collected the liver and gill in order to evaluate the effect of MDA in the fishes. A third experiment was conducted to investigate MDA metabolization in blood, gill and liver samples, through collection of biological material and water at zero time (shortly after receiving the same intraperitoneal injections as in the second experiment), 1 and 12 hours after the injections. In these experiments, the MDA metabolization was monitored by the activity of ALDH and by the antioxidant enzymes such as catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx), glucose-6-phosphate dehydrogenase ... / Mestre

Orientador: Laura Satiko Okada Nakaghi / Coorientador: George Shigueki Yasui / Banca: Carlos Alberto Vicentini / Banca: José Augusto Senhorini / Resumo: O objetivo deste trabalho foi estudar aspectos básicos dos gametas e o desenvolvimento inicial de Astyanax altiparanae, para futura aplicação na área de biotecnologia, incluindo manipulação cromossômica de embriões. No Capítulo I, os ovócitos foram analisados por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e a dose inseminante foi determinada. O sêmen também foi coletado e analisado com sistema de análise computadorizada (CASA). A dose inseminante reduzida encontrada para a espécie foi explicada pela morfologia dos ovócitos através de análise em MEV, que revelou vilosidades que cercam a micrópila relacionadas à orientação do esperma para a fecundação. No capítulo II, vários parâmetros relacionados com a fertilização foram descritos, incluindo a extrusão do segundo corpúsculo polar, a fusão dos pronúcleos e a formação do cone de fertilização. Além disso, o efeito de três temperaturas (22°C, 26°C e 30°C) sobre os estádios de desenvolvimento foi determinado. A extrusão do segundo corpúsculo polar ocorreu em 4-6 minutos pós-fertilização (mpf), e os pronúcleos fundiram-se com 8-10 mpf. O espermatozoide apresentou uma cabeça esférica, peça intermediária e flagelo. Como esperado, as temperaturas mais elevadas deram origem a um desenvolvimento e incubação mais rápidos. As informações obtidas neste estudo irão abrir novas possibilidades no campo da manipulação cromossômica de embriões, incluindo poliploidia, quimerismo, transgenia e outras técnicas / Abstract: The aim of this study was to study basic aspects of gametes and early development of yellowtail tetra Astyanax altiparanae, for future application in biotechnology including chromosome and embryo manipulation. In Chapter I, the oocytes were analyzed by Scanning Electron Microscopy (SEM) and the insemination dose was determined. Semen was also collected and analyzed using a Computer Assisted Sperm Analysis (CASA). Such a reduced inseminating dose was explained by oocyte morphology because SEM analysis revealed villosities surrounding the micropyle that is related to the sperm guidance for fertilization. In addition, the duration of sperm motility was longer in comparison to most teleosts, what may improve fertilization ability. In Chapter II, several parameters related with fertilization were described, including the second polar body extrusion, fusion of the pronuclei and the formation of the fertilization cone. Moreover, the effect of three temperatures (22°C, 26°C and 30°C) on developmental stages was determined. 2nd polar body was extruded at 4-6 minutes post fertilization (mpf), and the pronuclei were formed at 8-10 mpf. The sperm showed a spherical head, midpiece and flagellum. As expected, higher temperatures gave rise to faster development and hatching. The information obtained in this study will open new possibilities in the field of chromosome and embryo manipulation including poliploidy, chimerism, transgenesis and other techniques / Mestre

Orientador: Fernando Rogério de Carvalho / Banca: Luiz Roberto Malabarba / Banca: Francisco Langeani Neto / Resumo: A sistemática de Piabina Reinhardt, 1867 tem sido questionada recentemente. Espécies novas e possíveis sinônimos (e.g., Astyanax paranahybae) foram sugeridos para o gênero e a espécie-tipo, Piabina argentea, foi considerada recentemente um complexo de espécies. Diante dessas hipóteses realizamos uma revisão sistemática, incluindo análises taxonômica, filogenética e discriminante, compreendendo as espécies válidas e as supostamente novas (Capítulo I). Foi possível reconhecer quatro morfotipos intraespecíficos com base em caracteres morfológicos [Piabina argentea sensu stricto, Piabina sp. A (sensu Cardoso), Piabina sp. 'nordeste' e Piabina sp. 'tiete']. No entanto, observou-se elevada sobreposição nos caracteres morfológicos entre os morfotipos, corroborado pela análise discriminante (DAPC). Caracteres filogenéticos homoplásticos foram recobrados para as espécies e morfotipos de Piabina, encontrados em politomia no gênero. A sobreposição de caracteres morfológicos e a ausência de caracteres filogenéticos robustos às espécies e aos morfotipos impossibilitam o reconhecimento inequívoco destes como unidades biológicas distintas. Assim, Piabina é considerada um gênero monotípico, com P. anhembi e Astyanax paranahybae como sinônimos juniores de P. argentea. Piabina argentea é semelhante a outros Stevardiinae, principalmente algumas espécies de Bryconamericus e Creagrutus. Equívocos na identificação da espécie em coleções científicas motivaram a elaboração de uma chave para identificação de Stevardiinae da bacia do alto rio Paraná. A chave, que inclui 15 espécies de estevardiíneos, é uma ferramenta útil à identificação correta das espécies, especialmente as relacionadas filogeneticamente à P. argentea (Capítulo II) / Abstract: Recently, the systematic of Piabina Reinhardt, 1867 has been questioned. New species and possible synonyms (e.g., Astyanax paranahybae) were suggested to the genus and the type species, Piabina argentea, was recently considered as a complex of different species. In view of these new hypothesis, we performed a systematic review with taxonomic, phylogenetic, and discriminant data, including all valid species and the species reported as new of Piabina (Chapter I). We identified four intraspecific morphotypes based on morphological characters [Piabina argentea sensu stricto, Piabina sp. A (sensu Cardoso), Piabina sp. 'nordeste' e Piabina sp. 'tiete']. However, it was observed a significant overlapping of taxonomic characters among the morphotypes, posteriorly corroborated by the discriminant analysis (DAPC). We found homoplastics phylogenetic characters to species and morphotypes of Piabina, arranged in politomy in the genus. The overlapping of morphological characters and the lack of robust phylogenetic characters do not allow us to recognize these taxa as distinct biological units. Thus, Piabina was considered a monotipic genus, with P. anhembi and Astyanax paranahybae as junior synonyms of P. argentea. Piabina argentea is similar to other species of Stevardiinae, mainly some Bryconamericus and Creagrutus species. Mistakes in Piabina identification observed in scientific collections motivated the elaboration of an identification key to the Stevardiinae from the upper Paraná River basin. The key included 15 Stevardiinae species and represents a helpful tool to identify species correctly, especially the species phylogenetic related to P. argentea (Chapter II) / Mestre