O uso de pesticidas constitui um importante aspecto na agricultura moderna, com inquestionável beneficio na produção agrícola. Porém a contaminação dos alimentos por pesticidas constitui um sério risco a saúde do consumidor. A determinação de resíduo de pesticidas em alimentos envolve procedimentos laboriosos, com elevado tempo de análise e várias etapas de pré-concentração. Neste trabalho, procedimentos alternativos de extração e pré-concentração para analise multiresíduo de pesticida em água, frutas e tubérculos foram desenvolvidos. A eletroforese capilar em seu modo MEKC em condições de alto e baixo fluxo eletrosmótico foi empregado para a otimização da separação de diferentes classes de pesticidas (triazinas, organofosforado, carbendamidazóis, feniluréia e carbamatos). A composição do eletrólito de separação otimizada para condições de alto EOF foi: 10 mmol L-1 de tetraborato de sódio (pH 9,3),50 mmol L-1 de SDS e 5% etanol e 5% propanol, enquanto que para condições de baixo EOF foi: 10 mmol L-1 de tampão fosfato (pH 2,5), 25 mmol L-1 de SDS e 10% metanol. Estratégias de pré-concetração on-line conhecida como sweeping (SW) e stacking nos modos de migração reversa das micelas (SRMM) e migração reversa com um plug de água (SWR) bem como as suas versões modificadas foram avaliadas, obtendo fatores de pré-concetração de variaram de 2,6 a 19 para o SW, 2,9 a 15 para o SRW e de 5,5 a 15 para o método SRMM modificado. Varias metodologias de extração envolvendo extração em fase sólida (SPE) e extração líquido-líquido (LLE) foram testada. A estratégia de extração por cloud point foi aplicada a uma amostra de abacaxi. O procedimento denominado dispersão da matriz em fase sólida (sigla inglesa MSPD), que minimiza o uso de solventes orgânicos e é de fácil implementação foi aplicado a amostras de cenoura. A combinação do SPE off-line e das estratégias de pré-concentração anteriormente mencionadas permitiram a determinação de alguns pesticidas na concentração de 0,1 &#181;g L-1 em amostras de água potável. O método de extração e clean-up MSPD seguida da análise de MEKC em alto EOF foi otimizado e algumas figuras de mérito foram estabelecidas baseados em protocolos de validação para análise de pesticidas (IAEA-FAO). Boa linearidade (r > 0,99) foi obtido para todos os pesticidas estudados, exceto para linuron e dimetoato. A precisão do método foi estimada através de testes de recuperação. Dois níveis de fortificação foram utilizados para a avaliação, foram obtidos recuperações de 51 a 89 % para o nível mais baixo e 67 a 100% para o maior nível. Foi obtida uma boa precisão intraensaio (CV < 15%). O método otimizado foi aplicado para análise multiresíduo de cenouras. Uma amostra adquirida no comércio local foi quantificada encontrando-se 0,88 mg kg-1 de simazina, 0,13 mg kg-1 de atrazina e 0,08 mg kg-1 de propazina. / The use of pesticides constitutes an important aspect of modem agriculture, with unquestionable impact on crop production. However, food contamination by pesticide residues is a serious risk for the consumer. The determination of pesticide residues in food usually involves laborious procedures, with time consuming sample clean up and preconcentration steps prior to the analysis. In this work, alternative methodologies for extraction, pre-concentration and analysis of pesticide multi-residue in water, fruits and tubers were developed. Capillary electrophoresis in its micellar mode (micellar electrokinetic Chromatography, MEKC) under low and high electroosmotic flow (EOF) conditions was used for the separation of pesticides from different chemical classes (triazines, organophosphorous, carbendamidazols, phenilurea and carbamates). Optimized electrolyte compositions were: high EOF - 10 mmol L-1 tetraborate (pH 9.3), 50 mmol L-1 SDS, 5 % ethanol and 5 % propanol; low EOF - 10 mmol L-1 phosphate buffer (pH 2.5), 25 mmol L-1 SDS and 10 % methanol. On-line preconcentration strategies for MEKC known as sweeping (SW) and stacking with reverse migrating micelles with (SRW) and without (SRMM) a plug of water prior to the sample plug as well as modified versions of SRW and RMM were evaluated and contrasted in terms of signal enhancement factor (peak height ratios) Signal enhancement factors for SW varied from 2,6 to 19 for SRW from 2,9 to 15, whereas for modified-SRMM from 5,5 to 15. Among the extraction methodologies, several procedures involving solid-phase extraction (SPE) and liquid-liquid extraction (LLE) were tested. It is worth mentioning a strategy based upon cloud point extraction, which was applied to pineapple samples and a procedure denominated matrix solid-phase dispersion (MSPD), which combines low cost, saves in solvents and easy implementation, applied to carrots. The combination of off-line SPE and the above mentioned on-line preconcentration strategies allowed the determination of selected pesticides in the 0.1 &#181;/L level (drinking water sample). A complete methodology involving MSPD for extraction and sample clean-up followed by MEKC in high EOF was optimized and a few figures of merit were established based on method validation protocols for pesticide analysis (IAEA-FAO). Good linearity (r>0.99) was obtained for all pesticides under investigation, except for linuron and dimetoate. The method accuracy was estimated by recovery tests. Two level standard spiking were conducted with recoveries of 51 to 89 % for the lowest level and 67 to 100 % for the highest level. Acceptable intra-day precision was obtained (CV < 15 %). The optimized method was applied to the analysis of multi-residue pesticides in carrots. In a sample acquired in a local grocery store an unusual amount of triazines was found: simazine (O,88 mg/kg), atrazine (0,13 mg/kg) and propazine (0,088mg/kg).

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / CHAPTER II: The standardization of inter-laboratory results of germination test of forest species seeds requires that the methods be robust and subject to low variability. Therefore, the objective was to compare and discuss different forms of the coefficient of variation for normal seedlings in the method validation process for testing germination of seeds of 20 species of the Fabaceae family. Coefficients of variation for the experiment by lot and by laboratory were calculated for normal seedlings from the statistical analysis of method validations. For normal seedlings of 20 Brazilian forest species, the coefficients of variation were low (up to 9.84%), to average (up to 17.66%), contrary to expectations due to high genetic variability in these barely improved species. The increase of the coefficient is not related to treatment for breaking dormancy, but it grows as the lot quality decreases. The high coefficients by laboratory, overestimated by the lot effect, are uniform indicating that the methods are repeatable. The coefficient is not an indicator capable of predicting the heterogeneity of model variance. As normal distribution models random events, randomness is present in the validation process of the 20 forest species of the Fabaceae family. CHAPTER III: There are many treatments to overcome dormancy. However, descriptions of the consequences of these methods in seedling development are scarce. Because of the relevance of Fabaceae family in the context of dormancy seeds, seedlings and seeds of 10 forest species were evaluated quantitatively and qualitatively as to damage and infections caused by invasive treatments. Scarification, cutting and preheat methods were applied to seeds. They were then sampled was arranged in germitest, forming rolls distributed in a germination boxes under continuous fluorescent white light at 25 °C. Root protrusion used as the sole criterion, overestimates the efficiency of germination treatments to overcome dormancy. Scarification and cutting are efficient for Enterolobium contortisiliquum, Parkia pendula, Senna multijuga and Senna macranthera seeds, as well as cutting for Mimosa caesalpiniaefolia seeds. However, they are inefficient for Dimorphandra mollis and Enterolobium maximum because of the increase in the percentage of infected seedlings, and to Stryphnodendron adstringens, for dead seeds. The high percentage of damaged seedlings of Erythrina velutina and Erythrina speciosa cannot be attributed solely to treatment, because without pretreatment the root system gets strapped, forming a loop. The preheat treatment is inefficient because it results in a high percentage of hard seeds remaining. / CAPÍTULO II: A uniformização dos resultados inter laboratoriais de testes de germinação de sementes de espécies florestais exige que os métodos sejam robustos e sujeitos à baixa variabilidade. Assim, o objetivo foi comparar e discutir as diferentes formas de cálculo do coeficiente de variação para plântulas normais do processo de validação de métodos para teste de germinação de sementes de 20 espécies da família Fabaceae. Os experimentos de germinação de sementes para todas as espécies incluindo tratamentos pré-germinativos, tempos de contagem, substrato, temperatura e fotoperíodo foram validados com base no Manual de Validação da Associação Internacional para Teste de Sementes. Coeficientes de variação para o experimento, por lote e por laboratório para plântulas normais foram calculados, a partir das análises estatísticas previstas para a validação dos métodos, como exclusão de valores discrepantes, testes para as pressuposições do modelo e análise de variância. Para plântulas normais de 20 espécies florestais nativas, os coeficientes de variação foram de baixos (até 9,84%) a médios (até 17,66%), contrariando o esperado pela grande variabilidade genética dessas espécies pouco melhoradas. O aumento do coeficiente de variação não está relacionado ao tratamento de superação de dormência, porém cresce à medida que a qualidade do lote decresce. Os altos coeficientes de variação estimados por laboratório, superestimados pelo efeito de lotes, são uniformes indicando que os métodos são reproduzíveis. O coeficiente não é um indício capaz de predizer a heterogeneidade das variâncias e, consequentemente, a necessidade de transformação dos dados. Como a distribuição normal modela eventos aleatórios, a aleatoriedade está presente no processo de validação de métodos das 20 espécies da família Fabaceae, justificada pela distribuição normal dos resíduos. CAPÍTULO III: Muitos são os tratamentos descritos na literatura para superação da dormência de sementes, porém as consequências dos procedimentos no desenvolvimento das plântulas são raramente descritas. Pela relevância da família Fabaceae no contexto dos tratamentos para superação da dormência, plântulas e sementes de 10 espécies foram avaliadas quantitativamente e qualitativamente com o objetivo de determinar danos e infecções causados por tratamentos invasivos. Após revisão de literatura foram escolhidos métodos considerados eficientes para cada espécie. Experimentos foram conduzidos em delineamentos de blocos ao acaso e inteiramente casualizados, com sementes dispostas em papel germitest, com rolos dispostos em câmara de germinação sob luz branca fluorescente contínua a 25 ºC. Após a análise estatística selecionou-se o método que promoveu as maiores germinabilidades, maiores percentuais de plântulas normais, menores de anormais e de sementes mortas e duras, juntando-se outro relacionado ao mesmo procedimento e o tratamento térmico. A protrusão da raiz quando usado como critério único de germinação superestima a eficência dos tratamentos de superação da dormência de sementes de Fabaceae, porém é um indicador eficiente do potencial germinativo. A escarificação e o desponte são tratamentos eficientes de superação de dormência de sementes de Mimosa caesalpiniaefolia, Parkia pendula, Senna macranthera e Senna multijuga quando precedidos e seguidos pela assepsia com hipoclorito de sódio. Contudo, são ineficientes para sementes de Dimorphandra mollis e Enterolobium maximum pelo aumento dos percentuais de plântulas anormais infeccionadas e, para sementes de Stryphnodendron adstringens, pelo aumento dos percentuais de sementes mortas. Em Erythrina speciosa e Erythrina velutina os altos percentuais de plântulas anormais danificadas registrados a partir de sementes escarificadas e despontadas, não podem ser atribuídos exclusivamente aos tratamentos. A anormalidade causada pelo sistema radicular que fica preso no tegumento e enovela também é muito frequente em sementes sem qualquer pré-tratamento; O tratamento térmico úmido é ineficiente na superação de dormência de sementes de Fabaceae, mesmo com embebição posterior, pela desuniformidade pelos altos percentuais de sementes duras ao final do teste. / Mestre em Agronomia

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:42:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3476957 bytes, checksum: 7b79218599a11932aefca465d11aafc6 (MD5) Previous issue date: 2013-07-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The present work reports results from the research developed at the "International consortium for the sequencing of the genome and transcriptome of the common bean (Phaseolus vulgaris)" (Prosul/CNPq and CYTED) project conducted at Embrapa Rice and Beans (CNPAF) and the Federal University of Viçosa (UFV), which is composed of two distinct subprojects: Sequencing and characterization of the BACs-ends and Identification and development of SNPs markers in common bean . The dissert were structured in two chapters, each derived from their respective subprojects, containing the objectives and the main results presented below: Chapter 1- With the intention of amplifying and deepening the understanding about the P. vulgaris genome structure and composition, the goal of this study was to generate BAC-end sequences (BESs) from one BAC (Bacterial Artificial Chromosome) library and analyze the sequences for the presence of SSRs and genomic annotation. In total, 52,270 BESs were generated and processed equaling 32 Mbp (6.5%) of the P. vulgaris genome, with 39% of GC content. A total of 3,789 BES-SSRs were found, one for every 8.36 kb. Of these, 2,000 SSRs were appropriated for the development of molecular markers, of these 194 were evaluated and 40 were characterized for genetic and operational aspects. Of the 52,270 BESs, approximately, 2% contained sequences that encode transcription factors and 3% contained transposable elements. Through the comparison with the NCBI non-redundant protein database, it was possible to identify putative functions for 24,321 BESs, accounting for 46.53% of the total sequences analyzed. According to Gene Ontology (GO) terms functional categories were assigned to 19,363 BESs involved in biological process (52%), molecular function (65%) and cellular component (22%). This study allowed us to successfully identify BES-SSRs, highly polymorphic, searching for SSRs motifs of tri- to hexanucleotides, adding appropriate genetic features and with the potential to be used in the common bean genetic breeding programs. Additionally, the generated and processed BESs were integrated into the international project of common bean genome sequencing assisting in the composition and assembly of the genome. Chapter 2- The objectives of this study were to evaluate and compare the informativeness of 58 SSRs (24 SSRs-di dinucleotide microsatellites and 34 BES-SSRs tri- to hexanucleotide microsatellites) and 345 SNPs, as suited tools to P. vulgaris breeding programs. A germplasm set of 88 genotypes compounded of 55 breeding material and 33 landraces was evaluated, including eight biparental combinations derived from inter and intra-gene pool crosses. The SSRs-di displayed higher average of alleles/locus (9.916) and gene diversity (72.1%), exhibiting a superior capacity to distinguish the whole group of genotypes. Fourteen SSRs, out of the 58, with a considerable number of private alleles (over 14.93/locus) and high levels of gene diversity (84%), discriminated all 88 genotypes. The polymorphic SNPs, among inter (78.2%) and intra-gene pool (17.7%) combinations, were evaluated concerning their employment in genetic mapping. The approaches utilized to infer the genetic population structure presented correspondent results among all classes of markers, differentiating the genotypes within Andean and Mesoamerican gene pools. The SNPs, however, evidenced a superior (K = 2, FST = 0.895) competence to differentiate between the two gene pools. Furthermore, the SSRs-di distinguished, within Mesoamerican gene pool, the breeding material and the landraces germplasm (K = 3). Despite the high levels of linkage disequilibrium for both SSRs and SNPs, the latter yielded higher levels (84.92%). The linkage disequilibrium levels dropped when Andean and Mesoamerican genotypes were analyzed separately. The SSRs and SNPs distribution in P. vulgaris genome was abundant and random. Concerning the breeding program, SSRs and SNPs genotyping panels are now available, allowing the germplasm origin to be disclosed. In addition, a group of polymorphic SNPs, between several biparental populations, presents itself as an extension of such technology in the development of high-density genetic maps, with a substantial marker overlapping through crosses. This study contributes for the integration of genomic tools within breeding programs, connecting feasible and low cost techniques with efficient/wide genome sampling of the common bean. / Este trabalho apresenta resultados de pesquisas desenvolvidas no âmbito do Projeto Consórcio internacional para o sequenciamento do genoma e do transcriptoma do feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris) (Prosul/CNPq e CYTED) conduzido na Embrapa Arroz e Feijão (CNPAF) e na Universidade Federal de Viçosa (UFV), sendo este composto por dois subprojetos distintos: Sequenciamento e caracterização das pontas de BACs e Identificação e desenvolvimento de marcadores SNPs em feijoeiro comum . A dissertação foi estruturada em dois capítulos, cada um derivado de um subprojeto, contendo os objetivos e os principais resultados apresentados a seguir: Capítulo 1- Com o intuito de ampliar e aprofundar o conhecimento sobre a estrutura e composição do genoma de P. vulgaris este estudo teve como objetivo sequenciar uma biblioteca BAC (Bacterial Artificial Chromosome) a partir de suas extremidades (BESs BAC-end sequences) e analisar as sequências quanto à presença de SSRs e a anotação genômica. Ao todo, 52.270 BESs foram geradas e processadas equivalendo a 32 Mpb (6,5%) do genoma de P. vulgaris, com conteúdo de GC estimado em 39%. Foram encontrados um total de 3.789 BES-SSRs, um a cada 8,36 kb. Destes, 2.000 foram adequados para o desenvolvimento de marcadores moleculares, dos quais 194 foram avaliados e 40 deles foram caracterizados quanto a aspectos genéticos operacionais. Das 52.270 BESs, aproximadamente 2% continham sequências que codificavam fatores de transcrição e 3% continham elementos transponíveis. Através da comparação com o banco de dados não-redundante de proteínas do NCBI, foi possível identificar funções putativas para 24.321 BESs, contabilizando 46,53% do total de sequências analisadas. Com base nos termos do Gene Ontology (GO), foram atribuídas categorias funcionais a 19.363 BESs inseridas em processos biológicos (52%), função molecular (65%) e componente celular (22%). Este estudo permitiu identificar com sucesso BES-SSRs altamente polimórficos, buscando motivos SSRs de tri- a hexanucleotídeos, agregando características genéticas adequadas e com potencial de serem utilizados no programa de melhoramento genético de feijoeiro comum. Adicionalmente, as BESs geradas e processadas foram integradas ao projeto internacional de sequenciamento do genoma de feijoeiro comum auxiliando na composição e montagem do mesmo. Capítulo 2- O objetivo desse estudo foi avaliar e comparar o poder de informação genética de um grupo de 58 marcadores SSRs (24 SSRs-di microssatélites dinucleotídeo e 34 BES-SSRs microssatélites tri- a hexanucleoídeo) e 345 SNPs para aplicações no melhoramento genético de P. vulgaris. Foram avaliados 88 genótipos representativos de 55 acessos melhorados e 33 variedades tradicionais, incluindo oito combinações biparentais composta por cruzamentos inter- e intra-pool gênico. Os SSRs-di apresentaram maior média de alelos por loco gênico (9,916) e revelaram maior diversidade genética média (72,1%), sendo o grupo de marcadores com o maior poder de discriminação genética entre indivíduos. Entre os 58 SSRs, 14 com uma elevada média de alelos privativos (14,93/loco) e diversidade genética (84%) possibilitaram a discriminação individual dos 88 genótipos. Os SNPs polimórficos entre cruzamentos biparentais, intra- (17,7%) e inter-pool gênico (78,2%), foram avaliados quanto à aplicação prática no mapeamento genético. As abordagens utilizadas para inferir a estrutura genética populacional apresentaram resultados similares entre os grupos de marcadores, discriminando os genótipos nos pools gênicos Mesoamericano e Andino, com a maior diferenciação genética (K = 2, FST = 0,895) apresentada pelos SNPs. Os SSRs- di possibilitaram discriminar dentro do pool gênico Mesoamenricano o germoplasma melhorado e tradicional (K = 3). O desequilíbrio de ligação testado para todos os marcadores foi elevado, sendo maior para os SNPs (84,92%), reduzindo significativamente quando avaliado separadamente para os genótipos Andinos e Mesoamericanos. A distribuição dos SSRs e SNPs foi ampla e aleatória em todo o genoma de P. vulgaris. Em termos de resultados práticos para o programa de melhoramento, neste estudo foram derivados painéis de genotipagem operacionais baseado em SSRs e SNPs com alto e eficiente poder de discriminação do germoplasma por origem. Adicionalmente, um conjunto de SNPs polimórficos entre diversas populações biparentais representa uma aplicação adicional dessa tecnologia para geração de mapas genéticos de alta densidade compreendendo uma proporção substancial de marcadores compartilhados entre cruzamentos. Esse estudo contribui para a integração crescente da genômica nos programas de melhoramento, aliando metodologias de genotipagem acessíveis e a baixos custos que permitem amostrar de modo eficiente e/ou amplo o genoma de feijoeiro comum.

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA13MA108.pdf: 977023 bytes, checksum: fe38f03043d055013017d24a7b4a3124 (MD5) Previous issue date: 2013-08-02 / Management strategies for increasing legumes I the ruminant diets and mitigate methane emissions on tropical livestock production systems need to b better studied. The aim of this work was to evaluate herbage intake, animal performance and enteric methane of cattle grazing dwarf elephant grass (Pennisetum purpureum cv BRS Kurumi) pastures with or whithout access to an exclusive area of peanuts (Arachis pintoi cv Amarillo) pastures. The experimental treatments were: dwarf elephant grass (DEG) pastures in extreme cultivation receiving nitrogen fertilization (150 kg N/ha as ammonium nitrate) and DEG intercropped with peanuts (Arachis pintoi cv Amarillo) plus an adjacent area formed by the same legume which was allowed to be accessed by grazing animals for 5 h/day (from 7 to 12 am). Twelve Charolais steers (213 +- 8.9 kg of body live weight, LW) were assigned in four groups, two per treatment. The animals were managed according to a intermittent grazing method with an herbage allowance of dry leaf of 6.0 kg/100 kg of LW. Both, average daily gain and DM herbage intake were higher (P<0.05) while morning and total grazing time were lower (P<0.001) for animals grazing legume pastures. The daily methane emissions was higher (P<0.05) in animals grazing legume pastures, whereas methane emission by kg of DM intake was not affected by treatments. Steers grazing DEG with access to peanut pastures can improve their performance without increased methane production by kg of DM intake / O uso eficiente das leguminosas tropicais na produção de ruminantes a pasto pode ser uma alternativa para melhoria dos índices zootécnicos, agronômicos e ambientais. O objetivo deste trabalho foi avaliar o consumo de forragem, o desempenho animal e a emissão de metano entérico por bovinos pastejando capim-elefante anão (Pennisetum purpureum cv. BRS Kurumi) com ou sem acesso a uma área exclusiva de amendoim forrageiro (Arachis pintoi cv amarillo). Os tratamentos experimentais foram: pasto de capim elefante anão em cultivo estreme (CEA) recebendo adubação nitrogenada (150 kg/há de N na forma de nitrato de amônio) e capim elefante anão consorciado com amendoim forrageiro (Arachis pintoi cv Amarillo), mais uma área adjacente formado pela mesma leguminosa com acesso dos animais no pasto por 5 h/dia (7-12 horas) (CEL). Doze bovinos Charolês (213 + - 8,9 kg de peso vivo, PV) foram distribuídos em quatro grupos, dois por tratamento. Os animais permaneciam em pastejo intermitente, com uma oferta de MS de folhas verdes de 6,0 kg/100 kg de PV. O ganho médio diário (P<0,01) e consumo de MS (P < 0,05) foram maiores, enquanto o tempo de pastejo pela manhã e tempo total de pastejo foram menores (P < 0,001) nos animais que tiveram acesso à leguminosa. A emissão diária de metano foi superior (P < 0,05) nos animais com acesso à leguminosa, enquanto a emissão de metano por kg de MS consumida não foi afetada pelos tratamentos. Bovinos pastejando capim-elefante anão com acesso horário a amendoim forrageiro melhoram seu desempenho e a eficiência do tempo alocado para atividade de pastejo sem aumentar a produção de metano por kg de MS ingerida

Made available in DSpace on 2014-07-29T14:52:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese thannya nascimento.pdf: 3166640 bytes, checksum: 0a9faeb659c9594423ee5e7f8b495662 (MD5) Previous issue date: 2009-01-22 / The goal of this study was to evaluate the genetic structure and the spatial pattern of intra and interpopulational gene flow of Dipteryx alata Vogel, based on nuclear and chloroplastidial microsatellite markers. Primers were developed based on sequencing of random fragments from a shotgun genomic library for detection of microsatellite regions. 12 microsatellites regions were obtained from 688 sequences, which allowed the construction of pairs of primers. These regions are composed of motifs with two to six nucleotides, ranging from 136 to 380 base pairs. This shows that the random sequencing strategy from shotgun libraries is interesting because it allows the achievement of primers for repetitive regions with different motifs. Two of these loci (Da_E06 e Da_E12) were polymorphic with three alleles each. He estimation for these loci showed satisfactory values (0.2946 and 0.2879, respectively), considering the number of alleles. Also, we used a transferred primer from the species Phaseolus vulgaris (BM164) for D. alata. Moreover, other two chloroplastidials microsatellite primers were used for molecular analyses of georeferenced subpopulations, totalizing 775 plants distributed over the natural occurrence area of Cerrado. 210 of these plants were collected and georeferenced one by one along the margins of the Araguaia River in the states of Mato-Grosso (RAMT) and Goiás (RAGO) for spatial distribution of genetic variability in local scale analysis. The relationship between estimations of genetic diversity parameters with patterns of potential distribution of species was evaluated. This was used to test the hypothesis that the genetic variability of D. alata populations is distributed according to the central-periphery model. D. alata subpopulations showed considerable high levels of genetic variability that was significantly structured among subpopulations and well structured in space, both for nuclear and chloroplastidial data. The estimation of the apparent cross-fertilization rate (ta = 1.0575) indicates that the species is allogamous. Estimations of migration rates by pollen and by seeds were lower than one, indicating that seed dispersal contributes more effectively for total gene flow. Estimates of the genetic diversity parameters from the Araguaia River population showed similar values between both margins. The estimation of the apparent cross-fertilization rate (0.9434) indicated that the Araguaia River is not a physical barrier to effective gene flow. The effective size of the neighborhood, i.e., the mean number of individuals in an area where panmixia occurs was 85.64 and 22.99 for nuclear and chloroplastidial data, respectively, indicating that seed dispersal is more restricted. The correlogram generated with chloroplastidial data presented a cline pattern of variance more evident than with nuclear data, suggesting that the presence of spatial genetic structure is being more influenced by seed dispersal. We observed that the genetic parameters do not follow a classical central-periphery model, because peripheral population (according to geographical distribution of sampling locations) tended to demonstrate higher values for these estimations, mainly the South and Western subpopulations. The relationship found between the fixation index (f) with human impact indicated that the subpopulations evaluated can be affected by fragmentation process and land use, probably caused by the recent human colonization in Cerrado biome. / O objetivo geral deste estudo foi avaliar a estrutura genética e o padrão espacial do fluxo gênico intra e interpopulacional de Dipteryx alata Vogel, com base em marcadores microssatélites nucleares e cloroplastidiais. Foi utilizada uma estratégia de desenvolvimento de iniciadores que se baseia no seqüenciamento aleatório de fragmentos provenientes de uma biblioteca genômica shotgun para a detecção de regiões microssatélites, em barueiro. Das 668 sequências obtidas, foram encontradas 12 regiões microssatélites que possibilitaram a construção dos pares de iniciadores. Estas regiões são compostas por motivos com dois a seis nucleotídeos, que variam entre 136 a 380 pb. Isto mostra que a estratégia de sequenciamento aleatório a partir de bibliotecas shotgun é interessante por possibilitar a obtenção de iniciadores para regiões repetitivas com diferentes motivos. Dois destes locos (Da_E06 e Da_E12) foram polimórficos, apresentando três alelos cada. As estimativas de He para estes locos apresentaram valores satisfatórios, considerando o número de alelos, e foram iguais a 0,2946 e 0,2879, respectivamente. Isto indica que os iniciadores desenvolvidos e padronizados com sucesso neste trabalho podem ser utilizados para estudos genético-populacionais. Juntamente com estes dois iniciadores desenvolvidos, foi utilizado outro transferido da espécie Phaseolus vulgaris (BM164) para D. alata, além de outros dois iniciadores microssatélites cloroplastidiais para análises moleculares de 23 subpopulações georeferenciadas, totalizando 775 plantas, distribuídas ao longo da área de ocorrência natural do Cerrado. Destas plantas, 210 foram coletadas e georreferenciadas uma a uma, ao longo das margens do alto rio Araguaia nos estados de Mato-Grosso (RAMT) e Goiás (RAGO), para análises de distribuição espacial da variabilidade genética em escala local. Para testar a hipótese de que a variabilidade genética das subpopulações de D. alata se distribui conforme o modelo central-periférico, foram avaliadas as relações entre as estimativas de parâmetro genético de diversidade com os padrões de distribuição potencial da espécie. Foi observado que as subpopulações de D. alata apresentam consideráveis níveis de variabilidade genética que se encontra significativamente estruturada entre as subpopulações, tanto para os dados nucleares quanto para os cloroplastidiais, apresentando-se também estruturada no espaço. A estimativa da taxa de fecundação cruzada aparente (ta = 1,0575) indica que a espécie seja alógama. As estimativas das razões de migração via pólen e via semente foram menores do que 1, o que indica que a dispersão de sementes contribui mais efetivamente para o fluxo gênico total em escala regional. As estimativas dos parâmetros genéticos de diversidade referentes à população contígua ao Rio Araguaia mostraram valores semelhantes entre as margens do rio. A estimativa da taxa de fecundação cruzada aparente (0,9434) confirma a reprodução por alogamia no barueiro. O baixo nível de diferenciação entre as subpopulações das duas margens do rio indica que o rio Araguaia não confere uma barreira física efetiva ao fluxo gênico. O tamanho efetivo de vizinhança, ou seja, o número médio de indivíduos numa área onde ocorre panmixia, para os dados nucleares e cloroplastidiais foi igual a 85,64 e 22,99, respectivamente, indicando que a dispersão de sementes é mais restrita em escala local. O correlograma gerado a partir dos dados cloroplastidiais apresenta um padrão clinal de variação mais evidente do que o proveniente dos dados nucleares, o que sugere que a presença da estrutura genética espacial deve estar sendo mais influenciada pelo padrão de dispersão da semente. Foi observado que parâmetros genéticos estimados para D. alata não se enquadram no clássico modelo central-periférico, pois as populações tidas como periféricas (de acordo com a distribuição geográfica dos pontos de coleta) tendem a exibir maiores valores para estas estimativas, com destaque para as as subpopulações das bordas Sul e Oeste do bioma. A relação encontrada entre os valores estimados para o índice de fixação intrapopulacional (f) com o impacto humano indica que as subpopulações estudadas podem estar sofrendo as conseqüências dos processos de fragmentação e uso da terra na variabilidade genética, causado provavelmente pelo recente processo de ocupação do Cerrado.

O uso de pesticidas constitui um importante aspecto na agricultura moderna, com inquestionável beneficio na produção agrícola. Porém a contaminação dos alimentos por pesticidas constitui um sério risco a saúde do consumidor. A determinação de resíduo de pesticidas em alimentos envolve procedimentos laboriosos, com elevado tempo de análise e várias etapas de pré-concentração. Neste trabalho, procedimentos alternativos de extração e pré-concentração para analise multiresíduo de pesticida em água, frutas e tubérculos foram desenvolvidos. A eletroforese capilar em seu modo MEKC em condições de alto e baixo fluxo eletrosmótico foi empregado para a otimização da separação de diferentes classes de pesticidas (triazinas, organofosforado, carbendamidazóis, feniluréia e carbamatos). A composição do eletrólito de separação otimizada para condições de alto EOF foi: 10 mmol L-1 de tetraborato de sódio (pH 9,3),50 mmol L-1 de SDS e 5% etanol e 5% propanol, enquanto que para condições de baixo EOF foi: 10 mmol L-1 de tampão fosfato (pH 2,5), 25 mmol L-1 de SDS e 10% metanol. Estratégias de pré-concetração on-line conhecida como sweeping (SW) e stacking nos modos de migração reversa das micelas (SRMM) e migração reversa com um plug de água (SWR) bem como as suas versões modificadas foram avaliadas, obtendo fatores de pré-concetração de variaram de 2,6 a 19 para o SW, 2,9 a 15 para o SRW e de 5,5 a 15 para o método SRMM modificado. Varias metodologias de extração envolvendo extração em fase sólida (SPE) e extração líquido-líquido (LLE) foram testada. A estratégia de extração por cloud point foi aplicada a uma amostra de abacaxi. O procedimento denominado dispersão da matriz em fase sólida (sigla inglesa MSPD), que minimiza o uso de solventes orgânicos e é de fácil implementação foi aplicado a amostras de cenoura. A combinação do SPE off-line e das estratégias de pré-concentração anteriormente mencionadas permitiram a determinação de alguns pesticidas na concentração de 0,1 &#181;g L-1 em amostras de água potável. O método de extração e clean-up MSPD seguida da análise de MEKC em alto EOF foi otimizado e algumas figuras de mérito foram estabelecidas baseados em protocolos de validação para análise de pesticidas (IAEA-FAO). Boa linearidade (r > 0,99) foi obtido para todos os pesticidas estudados, exceto para linuron e dimetoato. A precisão do método foi estimada através de testes de recuperação. Dois níveis de fortificação foram utilizados para a avaliação, foram obtidos recuperações de 51 a 89 % para o nível mais baixo e 67 a 100% para o maior nível. Foi obtida uma boa precisão intraensaio (CV < 15%). O método otimizado foi aplicado para análise multiresíduo de cenouras. Uma amostra adquirida no comércio local foi quantificada encontrando-se 0,88 mg kg-1 de simazina, 0,13 mg kg-1 de atrazina e 0,08 mg kg-1 de propazina. / The use of pesticides constitutes an important aspect of modem agriculture, with unquestionable impact on crop production. However, food contamination by pesticide residues is a serious risk for the consumer. The determination of pesticide residues in food usually involves laborious procedures, with time consuming sample clean up and preconcentration steps prior to the analysis. In this work, alternative methodologies for extraction, pre-concentration and analysis of pesticide multi-residue in water, fruits and tubers were developed. Capillary electrophoresis in its micellar mode (micellar electrokinetic Chromatography, MEKC) under low and high electroosmotic flow (EOF) conditions was used for the separation of pesticides from different chemical classes (triazines, organophosphorous, carbendamidazols, phenilurea and carbamates). Optimized electrolyte compositions were: high EOF - 10 mmol L-1 tetraborate (pH 9.3), 50 mmol L-1 SDS, 5 % ethanol and 5 % propanol; low EOF - 10 mmol L-1 phosphate buffer (pH 2.5), 25 mmol L-1 SDS and 10 % methanol. On-line preconcentration strategies for MEKC known as sweeping (SW) and stacking with reverse migrating micelles with (SRW) and without (SRMM) a plug of water prior to the sample plug as well as modified versions of SRW and RMM were evaluated and contrasted in terms of signal enhancement factor (peak height ratios) Signal enhancement factors for SW varied from 2,6 to 19 for SRW from 2,9 to 15, whereas for modified-SRMM from 5,5 to 15. Among the extraction methodologies, several procedures involving solid-phase extraction (SPE) and liquid-liquid extraction (LLE) were tested. It is worth mentioning a strategy based upon cloud point extraction, which was applied to pineapple samples and a procedure denominated matrix solid-phase dispersion (MSPD), which combines low cost, saves in solvents and easy implementation, applied to carrots. The combination of off-line SPE and the above mentioned on-line preconcentration strategies allowed the determination of selected pesticides in the 0.1 &#181;/L level (drinking water sample). A complete methodology involving MSPD for extraction and sample clean-up followed by MEKC in high EOF was optimized and a few figures of merit were established based on method validation protocols for pesticide analysis (IAEA-FAO). Good linearity (r>0.99) was obtained for all pesticides under investigation, except for linuron and dimetoate. The method accuracy was estimated by recovery tests. Two level standard spiking were conducted with recoveries of 51 to 89 % for the lowest level and 67 to 100 % for the highest level. Acceptable intra-day precision was obtained (CV < 15 %). The optimized method was applied to the analysis of multi-residue pesticides in carrots. In a sample acquired in a local grocery store an unusual amount of triazines was found: simazine (O,88 mg/kg), atrazine (0,13 mg/kg) and propazine (0,088mg/kg).

[ES] La arquitectura de la inflorescencia determina la posición y el número de flores (y frutos) en la planta. Esto afecta a la forma de la planta, lo que contribuye a la diversidad morfológica e influye en la producción de semillas. Por lo tanto, comprender cómo funciona la genética que está detrás del desarrollo de la inflorescencia es relevante no solo para saber más sobre la biología del desarrollo de las plantas, sino también para la agricultura, con el fin de diseñar nuevas estrategias para la mejora de plantas. La mayoría de las leguminosas tienen inflorescencias compuestas, en las que las flores no se forman en el tallo principal sino a partir de inflorescencias secundarias (I2) en los flancos de la inflorescencia primaria o principal (I1). Esto contrasta con las plantas con inflorescencias simples, como Arabidopsis, donde las flores se forman directamente a partir del I1. El guisante (Pisum sativum) pertenece a la familia de las Fabaceae y al clado galegoide de las leguminosas y tiene una inflorescencia compuesta. Es bien sabido que VEGETATIVE1/ FULc (VEG1) codifica un factor de transcripción que especifica la identidad del meristemo I2 en leguminosas, pero aún se desconoce cómo y a través de qué genes VEG1 controla el desarrollo del I2 y las vías genéticas en las que está involucrado. En este trabajo, nuestro objetivo fue identificar las dianas regulatorias de VEG1. Para ello, comparamos los transcriptomas provenientes de ápices de inflorescencia del control silvestre (wild-type) con los de mutantes de guisante con defectos en el desarrollo de la inflorescencia: proliferating inflorescence meristems (pim - con múltiples meristemos I2), veg1 y vegetative2 (veg2 - ninguno de los cuales produce ni meristemos I2 ni flores). Usando este enfoque, hemos aislado algunos genes que se expresan en el I2 e identificado algunas posibles dianas de VEG1, entre ellas algunos genes que parecen prometedores para ser usados a modo de herramientas genéticas para la mejora del rendimiento en la producción en leguminosas. FLOWERING LOCUS T (FT) es un regulador clave en la red genética del fotoperíodo que controla el tiempo de floración en Arabidopsis. En leguminosas, el clado FT se ha diversificado en tres subclados: FTa, FTb y FTc. En guisante,el gen FTc se encuentra distante filogenéticamente de los otros genes FT y tiene un patrón de expresión inusual, ya que solo se expresa en el ápice de la inflorescencia. En este trabajo hemos caracterizado mutantes ftc de guisante y los hemos utilizado para analizar las interacciones genéticas de FTc con DETERMINATE y LATE FLOWERING, que son los homólogos en guisante de TERMINAL FLOWER 1 de Arabidopsis. Este análisis ha revelado una función de FTc en el control de la floración y, curiosamente, también en el desarrollo del meristemo I2, estando esta segunda función posiblemente mediada por la regulación de FTc en la expresión de VEG1. / [CA] L'arquitectura de la inflorescència determina la posició i el nombre de flors (i fruits) en la planta. Això afecta a la forma de la planta, la qual cosa contribueix a la diversitat morfològica i influeix en la producció de llavors. Per tant, comprendre com funciona la genètica que està darrere del desenvolupament de la inflorescència és rellevant no sols per a saber més sobre la biologia del desenvolupament de les plantes, sinó també per a l'agricultura, amb la finalitat de dissenyar noves estratègies per a la millora de plantes. La majoria de les lleguminoses tenen inflorescències compostes, en les quals les flors no es formen en la tija principal sinó a partir d'inflorescències secundàries (I2) en els flancs de la inflorescència primària o principal (I1). Això contrasta amb les plantes amb inflorescències simples, com Arabidopsis, on les flors es formen directament a partir de l'I1. El pésol (Pisum sativum) pertany a la família de les Fabaceae i al clade galegoide de les lleguminoses i té una inflorescència composta. És ben sabut que VEGETATIVE1/ FULc (VEG1) codifica un factor de transcripció que especifica la identitat del meristemo I2 en lleguminoses, però encara es desconeix com i a través de quins gens VEG1 controla el desenvolupament de l'I2 i les vies genètiques en les quals està involucrat. En aquest treball, el nostre objectiu va ser identificar les dianes reguladores de VEG1. Per a això, comparem els transcriptomas provinents d'àpexs d'inflorescència del control silvestre (wild-type) amb els de mutants de pésol amb defectes en el desenvolupament de la inflorescència: proliferating inflorescence meristems (pim - amb múltiples meristemos I2), veg1 i vegetative2 (veg2 - cap dels quals produeix ni meristemos I2 ni flors). Usant aquest enfocament, hem aïllat alguns gens que s'expressen en l'I2 i identificat algunes possibles dianes de VEG1, entre elles alguns gens que semblen prometedors per a ser usats a manera d'eines genètiques per a la millora del rendiment en la producció en lleguminoses. FLOWERING LOCUS T (FT) és un regulador clau en la xarxa genètica del fotoperíode que controla el temps de floració en Arabidopsis. En lleguminoses, el clade FT s'ha diversificat en tres subclades: FTa, FTb i FTc. En pésol, el gen FTc es troba distant filogenéticamente dels altres gens FT i té un patró d'expressió inusual, ja que només s'expressa en l'àpex de la inflorescència. En aquest treball hem caracteritzat mutants ftc de pésol i els hem utilitzats per a analitzar les interaccions genètiques de FTc amb DETERMINATE i LATE FLOWERING, que són els homòlegs en pésol de TERMINAL FLOWER 1 d' Arabidopsis. Aquest anàlisi ha revelat una funció de FTc en el control de la floració i, curiosament, també en el desenvolupament del meristemo I2, estant aquesta segona funció possiblement mediada per la regulació de FTc en l'expressió de VEG1. / [EN] Inflorescence architecture determines position and number of flowers (and fruits) in the plant. This affects plant shape, contributing to morphological diversity, and also influences seed yield. Therefore, understanding the genetics behind inflorescence development is relevant not only to plant developmental biology but also to agriculture, to design new breeding strategies. Most legumes have compound inflorescences, in which the flowers do not form on the main stem but from secondary inflorescences (I2) at the flanks of the main primary inflorescence (I1). This is in contrast to plants with simple inflorescences, such as Arabidopsis, where the flowers directly form at the I1. Pea (Pisum sativum) belongs to the Fabaceae family and the galegoid clade of legumes and has a compound inflorescence. It is well known that VEGETATIVE1/ FULc (VEG1) encodes a transcription factor that specifies the identity of the I2 meristem in legumes, but it is still unknown how and through which genes VEG1 controls I2 development and the genetic pathways in which it is involved. In this work, we aimed to identify regulatory targets of VEG1. For that, we compared the transcriptomes of inflorescence apices from wild type and pea mutants with defects in inflorescence development: proliferating inflorescence meristems (pim - with multiple I2 meristems), veg1 and vegetative2 (veg2), none of which produce neither I2 meristems nor flowers). Using this approach, we have isolated I2-expressed meristem genes and identified some possible targets of VEG1, among them some genes that seem promising tools to improve yield in legumes. FLOWERING LOCUS T (FT) is a key regulator of the photoperiod inductive pathway that controls flowering time in Arabidopsis. In legumes, the FT clade has diversified into three subclades: FTa, FTb and FTc. Pea FTc is distant phylogenetically from the other FTs and has an unusual expression pattern, being expressed only at the inflorescence apex. In this work we have characterized pea ftc mutants and used them to analyze the genetic interactions of FTc with DETERMINATE and LATE FLOWERING, pea homologues of TERMINAL FLOWER 1 of Arabidopsis. This analysis has revealed a function of FTc in the control of flowering and, interestingly, of I2 meristem development, this second function being possibly mediated through FTc regulation of VEG1 expression. / Serra Picó, MP. (2022). New Insights into Pea Compound Inflorescence Development: Role of FTc and VEGETATIVE1 as Regulatory Factors [Tesis doctoral]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/181299

Submitted by Johnny Rodrigues (johnnyrodrigues@ufcg.edu.br) on 2018-05-27T13:22:22Z No. of bitstreams: 1 ANA PAULA MORAIS NEVES - DISSERTAÇÃO PPGSA PROFISSIONAL 2017..pdf: 735461 bytes, checksum: c320ee1307d508a5d5811325882d133c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-27T13:22:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ANA PAULA MORAIS NEVES - DISSERTAÇÃO PPGSA PROFISSIONAL 2017..pdf: 735461 bytes, checksum: c320ee1307d508a5d5811325882d133c (MD5) Previous issue date: 2016-11-29 / Uso de leguminosas como adubo verde é uma prática bastante consolidada, pelo fato de estar adicionando ao solo material vegetal rico em nitrogênio. O experimento foi conduzido na Fazenda Experimental Rafael Fernandes, no distrito de Alagoinha, zona rural de Mossoró-RN no período de agosto de 2015 a janeiro de 2016, com o objetivo de avaliar a Presença e ausência do feijão mungo sob doses de esterco bovino na viabilidade agroeconômica da alface. O delineamento experimental utilizado foi de blocos completos casualizados com os tratamentos arranjados em esquema fatorial 4 x 2, com quatro repetições. O primeiro fator foi constituído das doses de esterco bovino (1,0; 2,0; 3,0; 4,0 kg m-2 de canteiro) e o segundo fator foi constituído pela presença e ausência do adubo verde (feijão mungo). A cultivar da alface utilizada foi a “Regina”. Foram avaliadas as seguintes características: altura de planta, número de folhas planta-1, diâmetro da cabeça, produção de alface e massa seca de alface. Foram determinados alguns indicadores econômicos tais como: custo de produção, renda bruta, renda líquida, taxa de retorno e índice de lucratividade dos dois cultivos. Não houve interação entre os fatores-tratamentos para as características de produção, com produção de alface de 87,8 kg/100 m2. Houve diferença estatística no fator presença e ausência do feijão mungo com valores médios de 81,4 e 67 kg/100 m2 de alface, respectivamente. A maior eficiência econômica no cultivo da alface se deu na presença do feijão mungo na quantidade de 3,0 kg m-2, com renda bruta de 3343,75, renda líquida de 1582,40, taxa de retorno de 1,90 e índice de lucratividade de 43,42%. A utilização de feijão mungo no cultivo da alface constitui-se em uma opção viável para ser utilizado pelo agricultor. / The use of legumes as green manure is a well-established practice, because it is adding nitrogen-rich plant material to the soil. The experiment was conducted at the Fazenda Experimental Rafael Fernandes, in the district of Alagoinha, rural area of Mossoró-RN, from August 2015 to January 2016, with the objective of evaluating the Presence and absence of mung bean under doses of bovine manure in the agroeconomic viability of lettuce. The experimental design was a randomized complete block with treatments arranged in a 4 x 2 factorial scheme, with four replications. The first factor consisted of bovine manure (1.0, 2.0, 3.0, 4.0 kg m-2 of bed) and the second factor was the presence and absence of green mango (mung bean). The lettuce cultivar used was the "Regina". The following characteristics were evaluated: plant height, number of plant-1 leaves, head diameter, lettuce production and lettuce dry mass. Some economic indicators were determined such as: production cost, gross income, net income, rate of return and profitability index of the two crops. There was no interaction between the treatment factors for the production characteristics, with lettuce production of 87.8 kg / 100 m2. There was a statistical difference in the presence and absence of mung beans, with mean values of 81.4 and 67 kg / 100 m2 of lettuce, respectively. The highest economic efficiency in lettuce cultivation occurred in the presence of mung beans in the amount of 3.0 kg m-2, with gross income of 3343.75, net income of 1582.40, rate of return of 1.90 and index of profitability of 43.42%. The use of mung beans in lettuce cultivation is a viable option for the farmer to use.

Submitted by Celso Magalhaes (celsomagalhaes@ufrrj.br) on 2018-09-11T19:30:41Z No. of bitstreams: 1 2017 - Marcius Nei Zanin Cesar.pdf: 3447328 bytes, checksum: 098490a3674208d8609db17b18d3c285 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-11T19:30:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017 - Marcius Nei Zanin Cesar.pdf: 3447328 bytes, checksum: 098490a3674208d8609db17b18d3c285 (MD5) Previous issue date: 2009-04-30 / Cap. I The aim of this work is to evaluate the agronomic behavior of different legume species under cerrado conditions in Mato Grosso do Sul. Seven experiments were carried out, all of them in the experimental field of the (Ag?ncia de Desenvolvimento Agr?rio e Extens?o Rural de MS), (Agency of rural development and extension of MS). Two of these experiments referred to the performance of legumes evaluation. The first experiment was carried out during the Spring- Summer period, and the second one during the Fall- Winter period. The treatments were constituted by the legume species (Crotalaria juncea, Crotalaria ochroleuca, Crotalaria mucronata, Crotalaria reviflora, Mucuna pruriens, Mucuna aterrima, Cajanus cajan (L.) Millsp Cv Fava larga and Cv IAPAR Arat? 43 an?o, Canavalia ensiformes and Canavalia brasiliensis). The third experiment was carried out to determine the dry phytomass decomposition rate and the nitrogen release of the species that were evaluated; this happened during the Fall-Winter period, and the treatments were the mulching of the legumes cited above, except C. breviflora, which was severely attacked by Fusarium sp. The experimental design adopted was randomized blocks, with eleven treatments and nine harvest dates disposed with four replicates. The forth and the fifth experiments were carried out in the subsequent year, their aim was qualifying the Biological Nitrogen Fixation (hereinafter called BNF) and determining the isotope discrimination value ?B value?; their treatments were seven legume species previously selected due to their performances on the former experimental actions and three checks, Brachiaria decumbens, Helianthus annuus, and Zea mays cv BR 106, disposed in randomized blocks with four replicates. The sixth and the seventh experiments were carried out to evaluate the performance of the cabbage cv Astrus under organic management in no-tillage system. The treatments of the sixth experiment were maize-velvet bean intercrop. The later was sown in five different times after maize germination, mucuna alone, maize alone, spontaneous vegetation, and cultivation with conventional tillage of the soil. The treatments of the seventh experiment were maize intercropped with Crotalaria juncea, the latter was slashed, slashed and pruned, maize with basic fertilizer, maize with basic and dressing fertilizers, crotalaria alone, maize alone, spontaneous vegetation, and cultivation with conventional tillage of the soil. The experimental design adopted for both experiments was randomized blocks. The evaluation of the aerial phytomass production was determined when the legume species flowered and when the non-legume ones underwent the grain filling process. The quantification of BNF and the determination of the B value were estimated by using natural abundance 15N and the 15N dilution technique. Functional growth analyses were also carried out as well as soil cover rates, digestion time of the plant tissues, and the phytosociology were determined. On the sixth and seventh experiments the green manure contributions on the agronomic behavior of the cabbage cultivated in no-tillage system under organic management were evaluated. The results obtained have demonstrated the viability for the cultivations of these legume species at the Cerrado Biome, with the contribution of the BNF varying between 75 and 85% of the nitrogen found in the plant tissue originating from the air. They have also demonstrated the viability of using C. juncea and velvet bean when both are intercropped with maize in the mulching formation to the organic cultivation of the cabbage in no-tillage system Cap. II Two experiments were carried out to evaluate the agronomic behavior of legume species in which several components of plant growth were evaluated, such as aerial phytomass production, soil cover rate, seed production, besides phytosociology and in situ decomposition rate under cerrado conditions in Mato Grosso do Sul in two periods of the year. One experiment was carried out during the Spring-Summer period and the other one was carried out during the Fall-Winter period. Both experiments were carried out at the Centro de Pesquisa da Ag?ncia de Desenvolvimento Rural e Extens?o Rural de Mato Grosso do Sul (Mato Grosso do Sul Research center of the Agency of rural development and extension), in Campo Grande ? MS. The experimental design adopted for both was randomized blocks, formed by eleven treatments made up by the species C. juncea, C. ochroleuca, C. mucronata, C. spectabilis, C. breviflora, Mucuna aterrima, Mucuna pruriens, Canavalia brasiliensis, Canavalia ensiformis, Cajanus Cajans cv ?IAPAR an?o?, and Cajanus Cajans cv. giant broad bean. The agronomic behavior of the species that were studied was evaluated by the analysis of the stem and the leaf separately. It was observed that the aerial phytomass productions differed significantly with the species of the genus Crotalaria, showing the best results. Crotalaria juncea stands out with 14.16 Mg ha-1, followed by the Cajanus cajan cv. Fava larga with 11.58 Mg ha-1; there were no significant differences among the species of prostrate habit, mucunas and Brazilian jackbean (Canavalia brasiliensis). The later obtained 3.56 Mg ha-1 and the former did 2.85 Mg ha-1. Regarding seed production, the best performances were obtained during the Fall-Winter period for all legume species, except jack bean and feij?o-bravo (Capparis flexuosa), both obtained similar performances on the two periods of sowing, probably because they might be more tolerant to the drought stress. Regarding the decomposition rate, the results have revealed that the decomposition constants and the residue half-lives had different behaviors on the species that were studied; the Crotalaria species obtained higher decomposition rates when compared to the other species, differentiated behaviors were also noticed on the stem and on the leaf. The C. juncea, jack bean, and the two species of mucuna obtained higher soil cover rate, which reflected a higher suppression of spontaneous plants Cap. III Two experiments related to the quantification of BNF and the determination of the isotope discrimination, ?B value?, in legume species previously selected were simultaneously carried out in the experimental field of the AGRAER-MS, in Campo Grande-MS, during the Spring/Summer period in the 2005/2006 year of production. The experimental design adopted was randomized blocks, formed by ten treatments made up by the species C. juncea, C. ochroleuca, C. mucronata, C. spectabilis, velvet bean, Brazilian jackbean, and Pigeon pea; there have been also, as checks, Sunflower, Maize, and Brachiaria species. The aerial phytomass productions were determined when each legume species flowered and when the non-legume ones underwent the grain filling process. With the samples of legumes and check plants, the quantities of N and the BNF were estimated by using the 15N dilution technique. Afterwards, when the BNF values were known, they were applied to the equation used in natural abundance 15N with the aim of estimating the B value. Regarding the aerial phytomass production, the Pigeon pea had the best performance, followed by the C. ochroleuca, reaching averages of 16.24 Mg ha-1 against 14.44 Mg ha-1. The legume species behaved similarly to the amount of accumulated nitrogen; the Pigeon pea, C. ohcroleuca, and C. mucronata reached values of 346.57 kg ha-1, 333.25 kg ha-1, and 277.35 kg ha- 1 respectively, and they deserve a distinction. Regarding the %BNF, it was observed that the 15N dilution technique could not be applied in all the species that were studied since the cycle of most legumes species was different from the checks; in this way, the checks were not appropriate because the technique demands that legumes and checks grow simultaneously and under the same conditions. However, to the varieties which were more precocious that the checks, the BNF value must be at least between 73 to 87%. Just on the specie C. mucronata it was possible to estimate the BNF and the B value with the rigor that the applied isotopic methodologies demand. The B value of this specie was -3.69. Cap. IV The aim of this study is to evaluate the agronomic behavior of the cabbage in no-tillage system under organic management and the contribution of the prior cultivation of two legumes with different growing habits intercropping with maize in the mulching formation. Both experiments were carried out in the experimental field of AGRAER-MS, in Campo Grande-MS. The first experiment was the maize-C. juncea intercrop, the latter was managed, slashed, pruned, and slashed afterwards; besides the cultivation of single maize, single C. juncea, cultivation with conventional tillage of the soil with and without fertilization with equivalent amounts of 100 Kg N ha-1 at planting and sidressed 30 days after the maize cultivation, making up eight treatments with four replications in randomized blocks. The dry matter productions in the aerial part of the cover crops and the spontaneous vegetation were evaluated. Agronomic characteristics that were evaluated on the cabbage: productivity, commercial standard, fresh and dry weight, besides the dry phytomass of the prior cultivation. On this experiment it was possible to verify better yields regarding the fresh weight and head diameter when we used single, pruned C. juncea maize with basic fertilizer, and maize with base and dressing fertilizers, reaching a fresh weight over 1.0 Kg and heads diameter over 10 cm. Regarding maize and cabbage productivity, they were not influenced by the different kinds of intercrop systems; there were no significant statistic difference of treatments, which also reflected on the dry matter production of the prior cultivations. On the second experiment, the experimental design which was adopted was randomized blocks, with nine treatments and four replicates. The treatments were: maize-velvet bean intercrop, the later was planted in five different times: after the maize germination, maize alone, mucuna alone, cultivation with conventional tillage of the soil, and fallow with spontaneous vegetation, making up a total number of nine treatments. The parameters that were evaluated were similar to the ones of the former experiment.The cabbage production showed the most promising yield 2.06 Kg of head average weight and when cultivated as a sequential crop to the maize-velvet bean intercrop sown 15 days after the maize germination, differing significantly from the other treatments. When we analyzed the maize productivities, we noticed fall of productivity around 29% when it was intercropped with velvet bean at 15 and 30 days after its germination when it was compared to the other prior cultivations in which the intercrop system was used. / Cap. I O presente trabalho teve como finalidade avaliar o comportamento agron?mico de diferentes esp?cies de leguminosas nas condi??es do cerrado de Mato Grosso do Sul. Foram conduzidos sete experimentos, todos no campo experimental da Ag?ncia de Desenvolvimento Agr?rio e Extens?o Rural de MS, sendo que dois deles foram referentes ? avalia??o do desempenho das leguminosas. O primeiro foi instalado no per?odo de primavera-ver?o e o segundo no outonoinverno. Os tratamentos foram constitu?dos das esp?cies de leguminosas Crotal?ria juncea, Crotal?ria ochroleuca, Crotal?ria mucronata, Crotal?ria reviflora, Mucuna pruriens, Mucuna aterrima, Cajanus cajan (L.) Millsp cv Fava larga e Cv IAPAR Arat? 43 an?o, Canavalia ensiformes e Canavalia brasiliensis. O terceiro experimento foi realizado para determinar a taxa de decomposi??o da fitomassa seca e libera??o de nitrog?nio das esp?cies avaliadas, realizado no per?odo de outono-inverno, com os tratamentos constituindo-se da palhada das leguminosas descrita acima, exceto C. breviflora, pois a leguminosa sofreu ataque severo de Fusarium sp. O delineamento experimental foi em blocos ao acaso, com onze tratamentos e nove ?pocas de coleta distribu?dos em quatro repeti??es. O quarto e o quinto experimentos foram realizados no ano subsequente e tiveram como finalidade quantificar a Fixa??o Biol?gica de Nitrog?nio (FBN) e determinar o valor de discrimina??o isot?pica ?Valor B?, tendo como tratamentos sete esp?cies de leguminosas previamente selecionadas pelos seus desempenhos nas a??es experimentais anteriores e tr?s testemunhas, Brachiaria decumbens, Helianthus annuus e Zea mays cv BR 106, dispostos em blocos ao acaso com quatro repeti??es. O sexto e o s?timo experimentos foram conduzidos para avaliar o desempenho do repolho cv Astrus sob manejo org?nico em sistema plantio direto, sendo que o sexto experimento teve como tratamentos cons?rcio milho x mucuna cinza, sendo esta semeada em cinco ?pocas diferentes, ap?s germina??o do milho, mucuna em monocultivo, milho em monocultivo, vegeta??o espont?nea e cultivo com preparo convencional do solo. O s?timo experimento teve como tratamentos milho consorciado com Crotal?ria juncea, sendo esta ro?ada, ro?ada e podada, milho com aduba??o de base, milho com aduba??o de base e cobertura, crotal?ria em monocultivo, milho em monocultivo, vegeta??o espont?nea e cultivo com preparo convencional do solo. O delineamento experimental adotado em ambos os experimentos foi o de blocos ao acaso. A avalia??o da produ??o de fitomassa a?rea foi determinada por ocasi?o do florescimento para as esp?cies de leguminosas e de enchimento de gr?os para as n?o-leguminosas. A quantifica??o da FBN e determina??o do valor ?B? foram estimadas utilizando-se a t?cnica de abund?ncia natural 15N e da dilui??o isot?pica de 15N. Foram tamb?m realizadas an?lises funcionais de crescimento, bem como determinadas as taxas de cobertura do solo, tempo de decomposi??o dos tecidos vegetais e a fitossociologia. No sexto e no s?timo experimentos, foram avaliadas as contribui??es da aduba??o verde no desempenho agron?mico do repolho cultivado em sistema de plantio direto, sob manejo org?nico. Os resultados obtidos demonstraram a viabilidade do cultivo destas leguminosas no bioma cerrado, com a contribui??o da FBN, variando entre 75 e 85% do nitrog?nio encontrado no tecido vegetal proveniente do ar. Tamb?m, demonstraram a viabilidade do uso da C. juncea e M. cinza quando cultivadas em cons?rcio com milho para obten??o de palhada ao cultivo org?nico do repolho em sistema plantio direto. Cap. II Dois experimentos foram conduzidos para avaliar o comportamento agron?mico de esp?cies de leguminosas, onde foram avaliados diferentes componentes do crescimento vegetal, como produ??o fitomassa a?rea, taxa de cobertura de solo, produ??o de sementes, al?m da fitossociologia e taxa de decomposi??o ?in situ?, nas condi??es do cerrado de Mato Grosso do Sul, em duas ?pocas do ano. Os experimentos foram conduzidos no Centro de Pesquisa da Ag?ncia de Desenvolvimento Agr?rio e Extens?o Rural de Mato Grosso do Sul, localizado em Campo Grande - MS, sendo um no per?odo de primavera-ver?o e outro no outono-inverno. Em ambos, o delineamento experimental adotado foi o de blocos ao acaso, formado de onze tratamentos constitu?dos das esp?cies C. juncea, C. ochroleuca, C. mucronata, C. spectabilis, C. breviflora, Mucuna aterrima, Mucuna pruriens, Canavalia brasiliensis, Canavalia ensiformis, Cajanus Cajans cv. IAPAR an?o e Cajanus Cajans cv. fava larga gigante. O comportamento agron?mico das esp?cies estudadas foi avaliado analisando-se separadamente haste e folha. Observou-se que as produ??es de fitomassa a?rea diferiram de forma significativa com as esp?cies do g?nero crotal?ria, obtendo-se melhores desempenhos. Destacam-se a Crotal?ria juncea com 14,16 Mg ha-1, seguida do Guandu cv fava-larga com 11,58 Mg ha-1; entre as esp?cies de h?bito prostrado, n?o houve diferen?as significativas, mucunas e o feij?o-bravo-do Cear?, sendo que esse obteve 3,56 Mg ha-1 contra 2,85 Mg ha-1 da M. preta. Com rela??o ? produ??o de sementes, os melhores desempenhos foram obtidos no per?odo de outono-inverno para todas as leguminosas, com exce??o do feij?o-de-porco e feij?o-bravo, que obtiveram desempenhos semelhantes nas duas ?pocas de semeadura, provavelmente, por serem mais tolerantes ao estresse h?drico. No tocante ? taxa de decomposi??o, os resultados revelaram que as constantes de decomposi??o e tempo de meia-vida tiveram comportamentos diferentes para as esp?cies estudadas, com esp?cies de crotal?ria obtendo maiores velocidades de decomposi??o quando comparadas ?s demais esp?cies, notou-se tamb?m comportamentos diferenciados para haste e folha. A C. juncea, feij?o de porco e as duas esp?cies de mucuna obtiveram maior taxa de cobertura de solo, o que refletiu em uma maior supress?o da vegeta??o de ocorr?ncia espont?nea Cap III Foram conduzidos simultaneamente dois experimentos relacionados ? quantifica??o da FBN e determina??o do valor de discrimina??o isot?pica, valor ?B?, em esp?cies de leguminosas previamente selecionadas. Os experimentos foram conduzidos no campo experimental da AGRAER-MS, localizado em Campo Grande-MS, no per?odo de primavera-ver?o, no ano agr?cola 2005/06. O delineamento estat?stico utilizado foi o de blocos ao acaso, constitu?dos de dez tratamentos, sendo este compostos pelas esp?cies C. juncea, C. ochroleuca, C. mucronata, C. spectabilis, Mucuna cinza, Feij?o-bravo-do-cear? e Guandu fava larga; e como testemunhas as esp?cies Girassol, Milho e Braqui?ria. Por ocasi?o do florescimento de cada esp?cie de leguminosa e enchimento de gr?os das n?o-leguminosas, foram determinadas as produ??es de fitomassa a?rea. A partir das amostras de leguminosas e plantas testemunhas, estimaram-se as quantidades de N e a FBN, para tanto usando a t?cnica de dilui??o isot?pica de 15N . Posteriormente, conhecendo-se os valores de FBN, aplicou-se aos mesmos a equa??o utilizada na t?cnica de abund?ncia natural de 15N com a finalidade de estimar o valor B. Com rela??o ? produ??o de fitomassa a?rea, o Guandu fava larga obteve melhor desempenho seguido da C. ochroleuca, atingindo m?dias de 16,24 Mg ha -1 contra 14,44 Mg ha-1. Para a quantidade de nitrog?nio acumulada as esp?cies de leguminosas se comportaram de maneira semelhante, com destaque para o Guandu fava larga, C. ohcroleuca e C. Mucronata, atingido valores de 346,57 kg ha-1, 333,25 kg ha-1 e 277,35 kg ha-1 respectivamente. No tocante ? %FBN, observou-se que a t?cnica de dilui??o isot?pica de 15N n?o poderia ser aplicada para todas as esp?cies estudadas, uma vez que a maioria das esp?cies de leguminosas teve ciclo diferenciado das testemunhas, desta forma, as testemunhas n?o foram apropriadas, visto que a t?cnica exige que tanto as leguminosas como as testemunhas cres?am nas mesmas condi??es e de forma simult?nea. Contudo, para as variedades mais precoces que as testemunhas, o valor de FBN deve estar no m?nimo entre 73 a 87%. Somente na esp?cie C. Mucronata, foi poss?vel estimar a FBN e o valor B com o rigor que exigem as metodologias isot?picas aplicadas. O valor B para esta esp?cie foi de -3,69. Cap. IV O presente estudo teve o objetivo de avaliar o desempenho agron?mico do repolho em sistema plantio direto, sob manejo org?nico, e a contribui??o do pr?-cultivo de duas leguminosas de h?bitos de crescimento distintos em cons?rcio com milho, na forma??o de palhada. Ambos experimentos foram implantados no Campo Experimental da AGRAER, em Campo Grande-MS. O primeiro experimento consistiu no cons?rcio entre milho e C. juncea, sendo esta manejada, somente com ro?ada (taratamento 6), podada e posteriormente ro?ada (tratamento 5), al?m do cultivo do milho solteiro, C. juncea solteira, cultivo com preparo convencional do solo, com aus?ncia e presen?a de aduba??o, em quantidades equivalentes a 100 Kg N ha-1 no plantio e em cobertura 30 dias ap?s plantio do milho, perfazendo oito tratamentos com quatro repeti??es, dispostos em blocos ao acaso. Avaliaram-se as produ??es de mat?ria seca na parte a?rea das plantas de cobertura e da vegeta??o espont?nea. As caracter?sticas agron?micas avaliadas no repolho foram: produtividade, padr?o comercial, peso fresco e seco, al?m da fitomassa seca do pr?-cultivo. Neste experimento, verificaram-se melhores rendimentos quanto ao peso m?dio e di?metro da cabe?a quando se utilizaram C. juncea solteira, C.juncea ro?ada, milho com aduba??o de base e milho com aduba??o de base e cobertura, alcan?ando peso m?dio acima de 1,0 kg e di?metro das cabe?as acima de 10 cm. Quanto ? produtividade do milho e do repolho, estes n?o foram influenciados pelos diferentes tipos de cons?rcios, n?o havendo diferen?a estat?stica significativa entre os tratamentos, o que refletiu tamb?m na produ??o de mat?ria seca dos pr?-cultivos. No segundo experimento, o delineamento experimental utilizado foi o de blocos ao acaso com nove tratamentos e quatro repeti??es. Os tratamentos foram: o cons?rcio entre milho e mucuna cinza, sendo esta plantada em cinco ?pocas diferentes - ap?s a germina??o do milho, monocultivo do milho, monocultivo da mucuna, cultivo com preparo convencional do solo e pousio com vegeta??o espont?nea -, perfazendo um total de nove tratamentos. Os par?metros avaliados foram semelhantes aos do experimento anterior. A produ??o do repolho alcan?ou melhores rendimentos, 2,06 kg de peso m?dio da cabe?a; e, quando cultivado em sucess?o ao cons?rcio milho x M. Cinza, semeada aos 15 dias ap?s germina??o do milho, diferiu significativamente dos demais tratamentos. Ao se analisarem as produtividades do milho, notouse uma queda de rendimento em torno de 29% quando este foi consorciado com M. Cinza, aos 15 e 30 dias ap?s sua germina??o, ao comparar-lo aos demais pr?-cultivos utilizando-se cons?rcios