Submitted by Geandra Rodrigues (geandrar@gmail.com) on 2017-12-20T18:15:26Z No. of bitstreams: 1 fabianasantossilvabittencourt.pdf: 2189252 bytes, checksum: 4b5feb8512efd1ad20a4d234e11cad83 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-12-21T10:40:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 fabianasantossilvabittencourt.pdf: 2189252 bytes, checksum: 4b5feb8512efd1ad20a4d234e11cad83 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-21T10:40:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 fabianasantossilvabittencourt.pdf: 2189252 bytes, checksum: 4b5feb8512efd1ad20a4d234e11cad83 (MD5) Previous issue date: 2017-08-25 / O presente projeto objetivou validar e avaliar o desempenho de produtos comerciais para triagem de resíduos de antibióticos em amostras de leite bovino cru, conforme a Decisão 2002/657/CE da União Européia, que constitui parte dos requerimentos de avaliação de desempenho e validação de ensaios analíticos estabelecidos pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. O escopo e as referências para limites máximos de resíduos (LMR) dos analitos ensaiados observaram a integridade do Plano Nacional de Controle de Resíduos e Contaminantes aplicável à matriz leite (PNCR-Leite), que abrange cinco grupos de analitos (beta-lactâmicos, tetraciclinas, sulfonamidas, anfenicóis e quinolonas), totalizando 30 analitos examinados. Avaliaram-se produtos específicos da linha Charm® ROSA® (Rapid One Step Assay, ou ensaio rápido em uma etapa), baseados em reação com imunoreceptores para cada um dos cinco grupos relevantes de analitos, bem como o produto baseado em inibição de microrganismo indicador, o Charm® CowSideII®. Os resultados indicam que os produtos da linha Charm® ROSA® foram capazes de detectar satisfatoriamente 26 dentre os 30 analitos constantes do escopo do PNCR-Leite, ao passo que o produto Charm® CowSideII® foi capaz de detectar satisfatoriamente 17 analitos. De fato, os valores para capacidade de detecção (CCβ, com β=5%) dos produtos Charm® ROSA® para os 26 analitos foram, em sua maioria (20 em 26), iguais ou menores que metade do respectivo LMR. Resultados similares foram obtidos para os 17 analitos satisfatoriamente determinados pelo Charm® CowSideII®. Os produtos Charm® ROSA® também apresentaram características de seletividade/especificidade consistentemente satisfatórias, podendo inclusive (com exceção do Charm® Chloroamphenicol Test®), ser empregados em amostras de leite cru adicionadas dos conservantes Azidiol® ou Bronopol®, conforme rotineiramente recebidas nos laboratórios da RBQL, tutelada pelo MAPA. Entretanto, tais conservantes adicionados ao leite branco qualificado podem gerar resultados falsos não conformes quando do uso do produto Charm® CowSideII®, o que inviabiliza seu emprego em amostras adicionadas de qualquer um dos referidos conservantes. Os resultados para os ensaios de robustez dos produtos frente a pequenas alterações de sete variáveis de teste mostraram-se majoritariamente satisfatórios para todos os produtos testados. Entretanto, os dados experimentais sugerem, em especial, que deve ser evitado o emprego dos produtos de teste em amostras de leite apresentando acidez titulável elevada a 18°D, ou contendo teor de gordura elevado, próximo a 6%. Essas recomendações reforçam a necessidade de observância elementar de adequada uniformização do leite antes da amostragem, bem como emprego de leite de razoável qualidade para triagem de resíduos de antibióticos. Coletivamente, as evidências obtidas no presente estudo permitem indicar a inserção educada e inteligente dos ensaios comerciais de triagem, examinados, visando suplementar e potencializar a agenda nacional oficial já existente para controle de resíduos de antibióticos no leite brasileiro, contribuindo com as políticas nacionais de segurança de alimentos e de saúde pública. / The present study sought to validate and to assess the performance of commercial screening tests for antibiotic residues in raw, commingled bovine milk according to The Decision 2002/657/EC of the European Community, which is part of the requirements for performance evaluation and validation of established analytical tests by the Brazilian Ministry of Agriculture, Animal Production and Food Supply (MAPA). In particular, its National Residue Control Plan (PNCR-Milk) was fully observed to define the scope of this study and the references for Maximum Residue Limits (MRL) for each analyte. Thus, five analyte groups were covered (beta-lactams, tetracyclines, sulfonamides, amphenicols and quinolones), yielding 30 PNCR-Milk analytes being examined. Five products belonging to the Charm®ROSA® product line (Rapid One Step Assay, based on immunoreceptors) were assessed, each covering one of the five analyte groups. Also evaluated was the Charm® CowSideII®, a product based on a sensitive indicator microorganism. Results indicate that the products under the Charm® ROSA® line could satisfactorily screen for 26 out of 30 PNCR-Milk analytes, whereas Charm® CowSideII® could satisfactorily screen for 16 PNCR-Milk analytes. In fact, detection capability (CCβ, with β=5%) values for Charm® ROSA® products based on the 26 analytes were for the majority of the cases (20 out 26) equal to, or less than, 0.50 of the respective MRL. Similar performance was obtained for the 17 analytes that were satisfactorily detected by Charm® CowSideII®. Charm® ROSA® products also showed consistent, adequate specificity/selectivity characteristics; furthermore, all products - but the Charm® Chloroamphenicol Test® - can reliably screen milk samples containing the preservatives Azidiol® or Bronopol®, which are generally adopted by the RBQL laboratories’ overseen by MAPA. However, qualified milk samples containing such preservatives yielded false non-compliant results when tested with Charm® CowSideII®. This evidence should preclude the use of Charm® CowSideII® to screen for antibiotic residues in samples containing one of these preservatives. Results for test robustness under small changes of seven test variables were mostly adequate for all products tested. Nonetheless, experimental data support our recommendation to avoid the testing of milk samples showing increased titratable acidity (18°D), or increased fat content (ca. 6%), and, notably, this finding further reinforces the fundamental need to ensure adequate milk agitation prior to sampling, in addition to using milk of fair quality when screening for antibiotic residues. Collectively, the body of evidence hereby generated support an indication for the intelligent, educated insertion of the assessed commercial screening test products to supplement the existing national residue and chemical contaminants control framework for Brazilian milk, as a contribution to national policies in food safety and public health.

A Contagem Bacteriana Total (CBT) é um critério de avaliação da qualidade higiênico-sanitária do leite. O presente estudo teve por finalidade avaliar o efeito da CBT do leite cru refrigerado, sobre as características físico-químicas, microbiológicas e rendimento do queijo Minas Frescal. Utilizaram-se leites com dois níveis de CBT para a fabricação dos queijos: baixa CBT= média de 18.400 UFC/mL e alta CBT= média de 74.100 UFC/mL. As etapas de elaboração dos queijos incluíram a pasteurização do leite, adição dos ingredientes (cloreto de cálcio, cloreto de sódio e coalho), coagulação e obtenção do coágulo, dessoragem, enformagem e embalagem. Os queijos foram embalados em embalagens plásticas e analisados nos dias 1, 7, 14 e 21 após a fabricação e durante esse período foram mantidos em câmara fria a 6°C. A sequência de elaboração dos queijos foi repetida 3 vezes, para cada nível de CBT, totalizando 60 unidades por tratamento. Cinco unidades de queijos foram analisadas por dia, os parâmetros físico-químicos avaliados foram: teores de umidade, proteína e gordura, índices de extensão e profundidade da proteólise, pH, acidez titulável e extensão da lipólise, e os microbiológicos: coliformes termotolerantes, estafilococos coagulase positiva, Salmonella spp. e Listeria monocytogenes. Utilizou-se um delineamento experimental em parcelas subdivididas em blocos, considerando-se a contagem bacteriana total como efeito principal, os dias de análise como subparcelas e os processamentos como blocos. Nos queijos Minas Frescal não houve interação dos níveis de CBT e período de armazenamentos para os teores de umidade, proteína, gordura e índices de extensão e profundidade da proteólise. Entretanto, houve efeito dos níveis de CBT para as porcentagens médias de proteína e índices de extensão e profundidade da proteólise, com valores superiores para o tratamento com alta CBT, para o teor de umidade houve efeito dos níveis de CBT, com médias de 63,46% e 60,77% para os tratamentos com baixa e alta CBT, respectivamente. Independentemente dos níveis de CBT, houve efeito do período de armazenamento, com decréscimo no teor médio de umidade e elevação nos teores médios de gordura, proteína e índice de extensão da proteólise. Para as características de pH e acidez titulável houve interação para os níveis de CBT e período de armazenamento, a partir do 14° dia. O pH do tratamento com baixa CBT apresentou variação discreta (6,59-6,49), enquanto que para o tratamento com alta CBT houve decréscimo de 6,72 para 6,15, o aumento de acidez foi verificado em ambos os tratamentos, porém em maior grau no grupo de alta CBT. A extensão da lipólise apresentou interação para os níveis de CBT e período de armazenamento, no 21° dia após a fabricação, com aumento no teor de ácidos graxos livres. Salmonella spp. e Listeria monocytogenes não foram encontradas nos queijos, 5,2% das amostras apresentaram coliformes termotolerantes, porém em contagem permitida pela legislação brasileira. No entanto, no 14° dia após a fabricação, 9,56% das amostras apresentaram estafilococos coagulase positiva, em contagens superiores aos padrões legais. O rendimento dos queijos Minas Frescal não sofreu influência dos níveis de CBT. Os resultados do trabalho indicaram que os queijos Minas Frescal produzidos com leites contendo CBT inferior a 50.000 UFC/mL, originam produtos mais estáveis e de melhor qualidade ao longo do período de armazenamento. / The Total Bacterial Count (TBC) is a criterion for the evaluation of hygienic-sanitary quality of milk. The present study had the purpose of evaluating the effect of TBC of the refrigerated raw milk, on the physical-chemical characteristics, microbiological and yield of the Minas Frescal cheese. Milks with two levels of TBC were used for cheese production: low TBC= mean of 18400 CFU/mL and high TBC= mean of 74100 CFU/mL. The manufacture of cheeses included: pasteurization of the milk, addition of ingredients (calcium chloride, sodium chloride and rennet), coagulation, mass cutting, desorption, forming and packaging. The cheeses were packed in plastic bags and analyzed on days 1, 7, 14 and 21 after manufacture and during that period were kept in a cold chamber at 6°C. The sequence of elaboration of the Minas cheeses were repeated 3 times, for each level of TBC, totaling 60 units per treatment. Five cheese units were analyzed per day, the physical-chemical parameters evaluated were: percentages of fat, humidity, protein, extension and depth of proteolysis, pH, titratable acidity and extent of lipolysis, and the micro-organisms evaluated were: thermotolerant coliforms, coagulase-positive staphylococci, Salmonella spp. and Listeria monocytogenes. A completely randomized block design was used, considering TBC as the main effect, the days of analysis as sub parcels and the processing batches as the blocks. In the Minas Fresch cheese there weren\'t interaction for TBC levels and storage period for humidity, protein, fat contents and extension and depth of proteolysis. However, there were effect for TBC levels and protein percentages and extension and depth of proteolysis, with higher values for treatment with low TBC, for moisture content there was effect for TBC levels, with averages of 63.46% and 60.77% for treatments low and high TBC, respectively. Regardless of TBC levels, there were effect for the storage period, with decreases in the moisture content and elevation in the protein, fat contents and proteolysis extension index. For the characteristics pH and titratable acidity there were interaction for TBC levels and storage period, on day 14, for pH the treatment with low TBC did not present expressive variation (6.59-6.49), while the treatment high TBC presented a decrease from 6.72 to 6.15, the increase of acidity was observed in both treatments, but to a greater extent in the high TBC group. The extent of lipolysis showed interaction for TBC levels and storage period, on day 21, with elevation of content of free fatty acids. Salmonella spp. and Listeria monocytogenes were not found in the cheeses. 5.2% of the samples presented thermotolerant coliforms but in count allowed by the Brazilian legislation. However on the 14th day after the manufacture, 9.56% of the samples presented coagulase-positive staphylococci in scores above legal standards. The yield of the Minas Frescal cheeses was not influenced by TBC levels. The results of the study indicated that Minas Frescal cheeses produced with milks containing TBC of less than 50.000 CFU/mL produce more stable and better quality products throughout the storage period.

O objetivo deste trabalho foi verificar as possíveis correlações entre os índices de mastite e a qualidade microbiológica do leite cru, em 36 propriedades com atividade exploratória leiteira, no Estado de São Paulo, Brasil. Examinou-se 4662 quartos mamários de 1180 animais em lactação para se verificar a presença de mastite pelos Testes de Caneca de Fundo Escuro e CMT, e coletou-se uma amostra de cada quarto mamário positivo em pelo menos um dos testes para exame microbiológico. Para se avaliar a qualidade microbiológica do leite cru, coletou-se uma amostra de cada propriedade e fez-se a Contagem de microrganismos mesófilos aeróbios facultativos viáveis, Contagem de microrganismos psicrotróficos aeróbios facultativos viáveis, Contagem de microrganismos termófilos aeróbios facultativos viáveis, Contagem de Enterococcus spp., Contagem de Stapylococcus spp., Contagem de Streptococcus spp., Contagem de Corynebacterium spp., Contagem de bolores e leveduras, Número Mais Provável de coliformes totais e Número Mais Provável de coliformes fecais. Aplicou-se teste de Correlação de Pearson e Regressão Linear. Para comparação entre os índices de mastite, a melhor correlação foi entre o índice de resultados positivos ao teste CMT e os casos de mastite por causa infecciosa (r = 0,920 e R2 = 84,7%). Comparando-se o índice de mastite e a qualidade microbiológica do leite cru, o melhor resultado que apresentou correlação significativa foi entre o índice de casos de mastite por Staphylococcus spp. e a Contagem de microrganismos termófilos aeróbios facultativos viáveis (r = 0,522 e R2 = 27,3%). Pelo baixo número de análises que apresentaram resultado de Correlação significativa, notou-se que o índice mastite em rebanhos bovinos leiteiros não interfere na qualidade microbiológica do leite cru, nas condições estudadas neste experimento. / The purpose of this research was to investigate the possible correlations between the mastitis rate and raw milk microbiology quality, from 36 dairy farms, in São Paulo State, Brazil. It was investigated 4662 mammary quarters of 1180 lactant animals to examine mastitis cases using Tamis test and CMT. It was collected one sample of each positive mammary quarter in one test at least to microbiological analysis. To estimate the raw milk microbiological quality, it was colected one sample from each farm and realized one aerobic plate count of microorganisms mesophilic, aerobic plate count of microorganisms psychrotrophic, aerobic plate count of microorganisms termophilic, Enterococcus spp. plate count, Stahylococcus spp. plate count, Streptococcus spp. plate count, Corynebacterium spp. plate count, Yeast and Molds plate count, Most Probable Number of coliforms, Most Probable Number of fecal coliforms. It was used Pearson Correlation test and Linear Regression. In order to compare mastitis rates, the best correlation was between positives CMT test rate and the cases of mastitis caused by infections disease (r = 0,920 and R2 = 84,7%). Analysing the mastitis rate and the raw milk microbiological quality, the best result of correlation was between Staphylococcus mastitis rate and the aerobic plate count of microorganisms termophilic (r = 0,522 e R2 = 27,3%). Because of the low number of significant correlation, it was observed that the mastitis heard in dairy bovines herds do not interfere in raw milk microbiological quality, in the condition of this experiment.

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:44:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Michelle_Medeiros_Carvalho.pdf: 938080 bytes, checksum: 942326b46b04f46650ea2a86d579a566 (MD5) Previous issue date: 2015-09-21 / In the name of food policy, the processing and marketing of Artisanal Cheese made from raw milk have been inhibited by the action of regulatory agencies, which have been demanding pasteurization of milk for the manufacture of cheese as a solution to ensure product safety. A specific legislation for raw milk cheese production was recently published to meet various requirements of society in defense of Artisanal Cheese. The aim of this study was to investigate the situation of 12 rural properties in Seara-SC that were producing and selling Artisanal Colonial-Type Cheese informally. Producers were visited and their conditions for obtaining water, performing milking and making cheese were assessed. A semi-structured questionnaire was used to analyze the difficulties faced by farmers in compliance with current legislation for artisanal raw milk cheese production. Physical, chemical and microbiological analyzes of water, milk and cheese were conducted to check the adequacy of legal standards. It was found that none of the Colonial cheese makers investigated met the requirements established by law for Artisanal Cheese production from raw milk. Among the samples of water, milk and cheese analyzed, 91.7% (n = 11), 50% (n = 6) and 100% (n = 12), respectively, were found outside the legal parameters. It was concluded that cheese makers were unable to meet the requirements set by law, without some technical support, because they were difficult to be applied by them. They often need guidance and do not know where to seek orientation to meet all legal specifications. This study also concluded that public policies need to be employed for the preservation of Artisanal Colonial-Type Cheese, considering its historical and socio-economic relevance for family farming, to preserve the cultural tradition of such communities / Em nome da segurança alimentar a elaboração e comercialização de queijos artesanais produzidos a partir de leite cru vem sendo inibida pela ação de órgãos fiscalizadores, que vêm exigindo a pasteurização do leite para o fabrico de queijos como solução para garantir a inocuidade do produto. Para atender a diversas pressões da sociedade em defesa do queijo artesanal, recentemente foi publicada legislação específica para produção de queijo a partir de leite cru. O objetivo deste trabalho foi investigar a situação de 12 propriedades rurais do município de Seara/SC que produziam e comercializavam Queijo Colonial Artesanal de maneira informal. Os produtores foram visitados com o intuito de conhecer as instalações da ordenha e fabricação do queijo, bem como a forma de obtenção e tratamento da água das propriedades. Também foi conhecida a forma como o queijo é produzido. Por meio da aplicação de um questionário semiestruturado, aplicado foram analisadas as dificuldades enfrentadas pelos produtores rurais para atendimento à legislação vigente para a produção de queijo artesanal feito com leite cru. Foram realizadas análises físico-químicas e microbiológicas de água, leite e queijo dessas propriedades rurais para verificação da adequação aos parâmetros legais existentes. Constatou-se que nenhum produtor de Queijo Colonial pesquisado atende às exigências estabelecidas pela legislação em vigor para produção de Queijo Artesanal a partir de leite cru. Das amostras de água, leite e queijo analisadas, 91,7% (n=11), 50% (n=6) e 100% (n=12), respectivamente, encontraram-se fora dos parâmetros legais. Concluiu-se que os produtores não conseguem atender, sem apoio técnico, às exigências estabelecidas pela legislação vigente por se tratar de medidas difíceis de serem aplicadas por eles, que normalmente necessitam de orientação e têm dificuldades no atendimento de todas as especificações legais. O estudo também concluiu que há necessidade de implementação de políticas públicas para a preservação do Queijo Colonial Artesanal, devido à sua importância histórica e socioeconômica dentro da agricultura familiar, perpetuando a tradição cultural desses produtores rurais

A caseína e os ácidos graxos livres (AGL) são importantes componentes do leite relacionados às suas características industriais e sensoriais. Alguns fatores são responsáveis por alterações em suas concentrações, dentre eles, pode-se destacar as condições de armazenamento, além da agitação e, principalmente, a contagem de células somáticas (CCS). Para estudar tais alterações, avaliou-se através do presente estudo o efeito da temperatura de armazenamento (- 20oC e 7oC) e da idade das amostras (3, 6, 9 e 12 dias), assim como da CCS (CCS1: 400 mil, CCS2:400-750 mil e CCS3: 750 mil células somáticas/mL de leite). O efeito das condições de armazenamento sobre a caseína e os AGL foi avaliado no primeiro estudo. O efeito da CCS sobre a caseína e os AGL, por outro lado, foi avaliado no segundo estudo. No primeiro estudo, observou-se aumento nos teores de AGL ao longo do tempo, ou seja, acompanhando o aumento do período de armazenamento, com médias superiores em amostras resfriadas (7oC), em relação às congeladas (-20oC). Desta forma, sugere-se que análises laboratoriais devem ser realizadas em até três dias para este componente, devido ao seu aumento progressivo em amostras resfriadas. Para a caseína, entretanto, não foi identificada interação entre os fatores idade e temperatura. As médias deste componente não diferiram considerando-se as condições de armazenamento avaliadas, indicando que as análises para este componente podem ser realizadas até doze dias após a coleta, independente da temperatura de armazenamento. No segundo estudo, identificou-se interação entre classes de CCS e época de coleta, para caseína. A partir dos resultados de AGL, pode-se concluir que o leite encontra-se com altas concentrações deste componente, quando coletado na propriedade rural, sendo também observada influência da CCS sobre as concentrações de caseína e AGL no leite cru. Os AGL apresentaram incrementos significativos comparando-se amostras coletadas em diferentes locais, no trajeto da fazenda à indústria. Por outro lado, comparando-se os mesmos locais: tanque, rota e silo, as médias de caseína não diferiram. Observou-se correlação entre as variáveis CCS e caseína e CCS e AGL. / The casein and the free fatty acids (FFA) are important milk components related to its industrial and sensory characteristics. Some factors are responsible for changes in their concentration among them can highlight the storage conditions, as well as agitation and, especially, the somatic cell count (SCC). To study such changes, we assessed through the present study the effect of storage temperature (-20oC and 7oC) and the age of samples (3, 6, 9 e 12 days), as well as the CCS (CCS1: 400 mil; CCS2: 400-750 mil; CCS3: 750 mil somatic cells/mL of milk). The effect of CCS storage conditions on casein and FFA was evaluated in the first study. The effect of CCS on casein and FFA moreover, was evaluated in the second study. In the first study, it was observed increased levels the AGL over time, ie, accompanying the increase of the storage period, with means higher in refrigerated samples (7oC), in relation to frozen samples (- 20oC). Thus, it is suggested that laboratory examinations shall be performed up to three days to this component, due to their progressive increase in refrigerated samples. For casein, however, was not identified interaction between the factors age and temperature. The mean of this component did not differ considering the storage conditions, indicating that the analyzes for this component can be made until twelve days after collection, regardless of storage temperature. In the second study, we identified interactions between CCS classes and seasons, for casein. From the FFA results, we can conclude that milk meets with high concentrations of this component, when collected in the rural property, being also observed influence of CCS on concentrations of casein and FFA in raw milk. The FFA showed significant increases compared to samples collected at different locations on the path from farm to industry. On the other hand, comparing the same locations, tank, route and silo, the casein average did not differ. Correlation was observed between the variables casein and CCS and FFA and CCS.

O gênero Mycobacterium spp. compreende microrganismos saprófitas e patogênicos de interesse em saúde animal e humana. A espécie M. bovis, que causa tuberculose nos animais, é excretada através do leite de bovinos infectados e tem no consumo de leite cru e seus derivados uma importante via de transmissão para o homem, causando uma doença tão grave quanto à causada pelo M. tuberculosis. Como a doença nos animais é endêmica no Brasil e o queijo minas meia cura é normalmente fabricado com leite cru e muito apreciado pelo consumidor paulistano, amostras desse produto, obtidas em feiras-livres, foram analisadas quanto à ocorrência de micobactérias. As amostras foram descontaminadas pelo método HPC 1,5%, semeadas em meio Stonebrink-Leslie (incubadas a 37ºC/90 dias) e as colônias suspeitas, submetidas à reação de PCR TB multiplex e sequenciamento nucleotídico. Em 12% das amostras (16/133) foram isoladas 26 colônias de Mycobacterium spp., tendo sido identificadas 6 espécies, todas ambientais: Mycobacterium fortuitum, M. confluentis, M. elephantis, M. novocastrense, M. sphagni e M. arupense; 7 isolados, no entanto, permaneceram sem caracterização quanto à espécie. O M. fortuitum é um patógeno oportunista importante em saúde pública, sem que haja, entretanto, evidências de transmissão alimentar; o M. novocastrense, M. arupense e M. elephantis também têm sido consideradas espécies com potencial patogênico ao ser humano. Os resultados sugerem, tal como era esperado, que a frequência e a carga inicial de M. bovis em queijo Minas meia cura sejam baixas, mas se deve considerar que a metodologia empregada, por falta de outra específica, não privilegia a detecção em cenário de baixa carga inicial do agente acompanhada por alta carga contaminante. Sugerem também a necessidade de se avaliar a importância da transmissão alimentar de micobactérias não tuberculosas, especialmente para indivíduos imunossuprimidos. / Mycobacterium genus consists of saprophytic and pathogenic microorganisms of interest in animal and human health. M. bovis specie, which causes tuberculosis in animals, is excreted through the milk of infected cattle and the consumption of raw milk and its derivatives is an important route of transmission to humans, causing a disease as serious as the one caused by M. tuberculosis. Considering that the disease in animals is endemic in Brazil and that minas meia cura cheese cure is usually made from raw milk and much appreciated by paulistano consumer, samples of the product acquired in open markets, were analyzed for the occurrence of mycobacteria. The samples were decontaminated by the method HPC 1.5%, sown in Stonebrink-Leslie medium (incubated at 37 ° C/90 da ys) and the suspected colonies, submitted to PCR TB multiplex and nucleotide sequencing reaction. In 12% of samples (16/133) were isolated 26 colonies of Mycobacterium spp. and 6 species have been identified, all of them are environmental Mycobacterium fortuitum, M. confluentis, M. elephantis, M. novocastrense, M. sphagni and M. arupense; 7 isolates, however, remained without characterization for the specie. M. fortuitum is an important opportunistic pathogen in public health, without, however, evidence of being transmitted by food; M. novocastrense, M. arupense and M. elephantis species have also been considered potentially pathogenic to humans. The results suggest that the frequency and/or contamination load of M. bovis in meia cura Minas cheese is (are) low (s). We have to consider, however, that this result may have been influenced by the absence of an analytical method capable of identifying the agent in the food matrix in which a low load of microorganism is expected, accompanied by high load of contaminants. Also suggest the need to evaluate the possible importance of foodborne non-tuberculous mycobacteria, especially for immunocompromised individuals.

O gênero Mycobacterium spp. compreende microrganismos saprófitas e patogênicos de interesse em saúde animal e humana. A espécie M. bovis, que causa tuberculose nos animais, é excretada através do leite de bovinos infectados e tem no consumo de leite cru e seus derivados uma importante via de transmissão para o homem, causando uma doença tão grave quanto à causada pelo M. tuberculosis. Como a doença nos animais é endêmica no Brasil e o queijo minas meia cura é normalmente fabricado com leite cru e muito apreciado pelo consumidor paulistano, amostras desse produto, obtidas em feiras-livres, foram analisadas quanto à ocorrência de micobactérias. As amostras foram descontaminadas pelo método HPC 1,5%, semeadas em meio Stonebrink-Leslie (incubadas a 37ºC/90 dias) e as colônias suspeitas, submetidas à reação de PCR TB multiplex e sequenciamento nucleotídico. Em 12% das amostras (16/133) foram isoladas 26 colônias de Mycobacterium spp., tendo sido identificadas 6 espécies, todas ambientais: Mycobacterium fortuitum, M. confluentis, M. elephantis, M. novocastrense, M. sphagni e M. arupense; 7 isolados, no entanto, permaneceram sem caracterização quanto à espécie. O M. fortuitum é um patógeno oportunista importante em saúde pública, sem que haja, entretanto, evidências de transmissão alimentar; o M. novocastrense, M. arupense e M. elephantis também têm sido consideradas espécies com potencial patogênico ao ser humano. Os resultados sugerem, tal como era esperado, que a frequência e a carga inicial de M. bovis em queijo Minas meia cura sejam baixas, mas se deve considerar que a metodologia empregada, por falta de outra específica, não privilegia a detecção em cenário de baixa carga inicial do agente acompanhada por alta carga contaminante. Sugerem também a necessidade de se avaliar a importância da transmissão alimentar de micobactérias não tuberculosas, especialmente para indivíduos imunossuprimidos. / Mycobacterium genus consists of saprophytic and pathogenic microorganisms of interest in animal and human health. M. bovis specie, which causes tuberculosis in animals, is excreted through the milk of infected cattle and the consumption of raw milk and its derivatives is an important route of transmission to humans, causing a disease as serious as the one caused by M. tuberculosis. Considering that the disease in animals is endemic in Brazil and that minas meia cura cheese cure is usually made from raw milk and much appreciated by paulistano consumer, samples of the product acquired in open markets, were analyzed for the occurrence of mycobacteria. The samples were decontaminated by the method HPC 1.5%, sown in Stonebrink-Leslie medium (incubated at 37 ° C/90 da ys) and the suspected colonies, submitted to PCR TB multiplex and nucleotide sequencing reaction. In 12% of samples (16/133) were isolated 26 colonies of Mycobacterium spp. and 6 species have been identified, all of them are environmental Mycobacterium fortuitum, M. confluentis, M. elephantis, M. novocastrense, M. sphagni and M. arupense; 7 isolates, however, remained without characterization for the specie. M. fortuitum is an important opportunistic pathogen in public health, without, however, evidence of being transmitted by food; M. novocastrense, M. arupense and M. elephantis species have also been considered potentially pathogenic to humans. The results suggest that the frequency and/or contamination load of M. bovis in meia cura Minas cheese is (are) low (s). We have to consider, however, that this result may have been influenced by the absence of an analytical method capable of identifying the agent in the food matrix in which a low load of microorganism is expected, accompanied by high load of contaminants. Also suggest the need to evaluate the possible importance of foodborne non-tuberculous mycobacteria, especially for immunocompromised individuals.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:22:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao flavio pereira.pdf: 1203680 bytes, checksum: bcaf62e9eb5545119172fb4728bdaaee (MD5) Previous issue date: 2010-02-26 / Raw milk is a natural culture medium for the microbial growth and easy deterioration, because of that, thermal processing is needed as soon as possible. A new technology has been used to improve the food quality, active packaging, such as antimicrobial films, wich the intention to control the microbial growth in the products. The aim of this study was to evaluate the UHT milk quality produced in Goiás State, isolation and identification of Bacillus sporothermodurans, beside create a antimicrobial film for inhibition of this microrganism high heat resistance spore former. The isolation of psychrotrophic in raw milk was used PCA with incubation at 21 °C for 72h. To evaluate the UHT milk has been doing research on aerobic mesophilic in PCA with incubation at 30 °C for 72h and to thermoresistents microrganisms was in ABHI with incubation at 35 °C for 48h. The identification of isolates was performed according to convetional methods of biochemistry identification. From raw milk, the psychrotrophic microrganisms most isolates were Staphylococcus sp. and Corynebacterium sp., both with 21,5% from 70 isolates, verifying a higher contauge of Gram-positive microrganisms (82,85%). Considering the 157 UHT isolates, just 31 were identified as Gram-positive microrganisms through biochemical tests, only 2 correponded to B. sporothermodurans, although there are differences from the tests and their results between various authors, requiring more accurate identification using molecular biology. The antimicrobial film maded of cellulose acetate with addition of nisin to inhibit the development of B. sporothermodurans, the results indicated action of nisin in inhibition this microrganism, however, when incorporated into the film, did not show the expected results in both tests, solid and liquid medium, although the specific rate (μ) growth of the microrganism was changing iin the lowest concentration tested. There is a need to conduct testing in foods, mainly in dairy products which have been reported contamination by B. sporothermodurans. / O leite por ser um alimento rico, constituí-se em um meio natural para o desenvolvimento de vários microrganismos, principalmente bactérias; desta forma, muito perecível. É necessário tratamento térmico o mais rápido possível, a fim de manter a qualidade. Uma nova tecnologia vem sendo utilizada na melhoria dos alimentos, denominada de embalagem ativa, como os filmes antimicrobianos, na intenção de controlar o desenvolvimento microbiano no produto. O objetivo deste trabalho foi de avaliar a qualidade de leite UAT produzido no Estado de Goiás, assim como isolar e identificar microrganismos psicrotróficos de leite cru e microrganismos de leite UAT, sendo que para este direcionado para identificação de Bacillus sporothermodurans, bem como criação de filme antimicrobiano para inibição deste microrganismo produtor de esporos altamente resistentes. Para o isolamento de psicrotróficos em leite cru, foi utilizado PCA e incubação à 21°C por 72h. Para avaliação de qualidade do leite UAT, foi feito a pesquisa de aeróbios mesófilos em PCA com incubação à 30°C por 72h e o isolamento de microrganismos termorresistentes foi realizado em ABHI com incubação a 35°C por 48h. A identificação dos isolados foi realizada conforme metodologias clássicas de identificação bioquímica. Segundo esta identificação, os microrganismos psicrotróficos mais isolado foram Staphylococcus sp. e Corynebacterium sp. com 21,5% cada, dos 70 isolados, verificando uma percentagem maior de microrganismos Gram-positivos (82,85%). Considerando os isolados de leite UHT, dos 157, apenas 31 foram identificados como sendo bastonetes Gram-positivos que submetidos a testes bioquímicos, apenas 2 corresponderam ao B. sporothermodurans seguindo-se os resultados conforme registrado, apesar de haver divergências quanto a alguns testes e seus resultados, necessitando de identificação mais apurada utilizando-se de biologia molecular. Quanto ao filme antimicrobiano a base polimérica utilizada foi o acetato de celulose com incorporação de nisina, a fim de inibir o desenvolvimento do B. sporothermodurans com o intuito de verificar a ação deste peptídeo antimicrobiano frente a este microrganismo. Os resultados obtidos indicaram ação da nisina na inibição do microrganismo estudado, no entanto, quando incorporado ao filme, não apresentou o resultado esperado, tanto em testes em meio sólido como em meio líquido, apesar de ter alterando a velocidade específica (μ) de crescimento do microrganismo na concentração mais baixa testada. Há a necessidade de realização de teste em alimentos, especialmente em leite e derivados em que foram relatados a contaminação pelo B. sporothermodurans

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2017-06-21T17:56:23Z No. of bitstreams: 1 2016 - Ros?ngela Pezza Cintr?o.pdf: 3487632 bytes, checksum: b58a311d44d01ef224bccf9be913f986 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-21T17:56:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016 - Ros?ngela Pezza Cintr?o.pdf: 3487632 bytes, checksum: b58a311d44d01ef224bccf9be913f986 (MD5) Previous issue date: 2016-09-06 / CNPq / The dissertation focuses on conflicts and disputes about the sanitary (il)legalization of artisanal raw milk cheese in the state of Minas Gerais, which have become stronger since the 1990?s. It shows how State apparatus, laws, rules and regulations conceived with the aim of protecting the health of the population and usually presented as neutral and scientific end up, through various and complex ways, serving as instruments to establish barriers to entry amidst the disputes on dairy products? markets. The sanitary regulation of artisanal cheese is analyzed as a part of a process of progressive governamentalization of the State, which favors industrial, large-scale patterns of production, processing and distribution of food. The need to pasteurize and the minimum time for ripening are in the core of the debates and of the international regulations (Codex Alimentarius). In the case in focus, the legitimization of sanitary regulation is achieved by means of standards of ?quality?, ?risk?, and ?food safety? based in laboratory exams that search for the presence, in levels higher than legally permitted, of two groups of microorganisms (faecal coliforms and Staphiylococcus aureus), leading to the legal classification as ?improper for human consumption?. This conflicts with the population?s perception of these cheeses as a tasty and safe food, part of the cultural identity of people from Minas Gerais. As cheese is an essentially ?living? product, that may have ?bad? microorganisms but also has ?good? microorganisms that are responsible for unique characteristics of flavor and texture, sanitary rules based on industrial criteria are in conflict with traditional ways of producing and consuming cheese. Thus, illegalization processes lead to reactions, such as looking for possibilities of legalization amidst legal and institutional tangles that are ever more complex and permit the inclusion of only a minority of cheese-producing families. The majority of these families remain informal, which is increasingly constructed as illegal. Fieldwork was done in two municipalities in the region of the cheese known as Canastra, and the analysis points to a set of elements enabling people to remain in cheese-related activities, both as producers and as traders, in forms that are culturally established as part of a way of life and that ensure the families? social reproduction and their resiliency in face of external pressures. The study of this case thus brings forth more general issues about the relation between State, Law, Science and markets, and about their relation with peasant populations. It also discusses hegemonic notions of risk concerning health and food, and its effects on the way of life of peasant populations and on the consumers? possibilities of choice. / A tese aborda os conflitos e disputas em torno da (i)legaliza??o sanit?ria dos queijos artesanais de leite cru em Minas Gerais, que se acentuam ap?s a d?cada de 1990. Aponta como aparatos estatais, leis, normas e regulamentos, criados tendo como objetivo a defesa da sa?de da popula??o e normalmente apresentados como neutros e cient?ficos, por caminhos m?ltiplos e complexos acabam servindo como instrumentos para a cria??o de barreiras ? entrada em disputas por mercados de produtos l?cteos. A regula??o sanit?ria dos queijos artesanais ? analisada como parte de um processo de progressiva governamentaliza??o do Estado, que termina favorecendo padr?es industriais de produ??o, processamento e distribui??o de alimentos em maior escala. No centro das controv?rsias est? a exig?ncia de pasteuriza??o dos queijos ou de tempos m?nimos de cura, presentes em normas internacionais (Codex Alimentarius). No caso analisado, a legitima??o da regula??o sanit?ria se d? atrav?s da constru??o de padr?es de 'qualidade', 'risco' e 'seguran?a do alimentos', baseados em exames laboratoriais que apontam a presen?a, acima dos n?veis legais, em especial de dois grupos de microorganismos (coliformes fecais e Staphylococcus aureos), que levam ? classifica??o legal dos queijos como 'impr?prios ao consumo humano', entrando em choque com a percep??o da popula??o desses queijos como alimentos saborosos e seguros, parte da identidade cultural dos mineiros. Por serem produtos essencialmente 'vivos', contendo 'maus microrganismos' mas tamb?m 'bons microrganismos', respons?veis por caracter?sticas ?nicas de sabor e textura, as normas sanit?rias baseadas em crit?rios industriais entram em choque com tradi??es de produ??o e consumo dos queijos. Assim, os processos de ilegaliza??o geram rea??es, que buscam possibilidades de legaliza??o em emaranhados legais e institucionais cada vez mais complexos e que permitem a inclus?o apenas de uma minoria de fam?lias produtoras. A grande maioria permanece na informalidade, cada vez mais constru?da como ilegalidade. O trabalho de campo analisa dois munic?pios na regi?o do queijo Canastra e aponta um conjunto de elementos que comp?em um modo de se manter na atividade do queijo, que envolve tanto formas de produ??o quanto de comercializa??o, inseridas culturalmente num modo de vida, que garantem a reprodu??o das fam?lias e sua resili?ncia frente ?s press?es externas. O estudo desse caso coloca quest?es mais gerais sobre a rela??o entre Estado, Direito, Ci?ncia e mercados, assim como destes com popula??es camponesas. Discute tamb?m com no??es hegem?nicas de risco no que diz respeito ? sa?de e ? alimenta??o e seus efeitos sobre o modo de vida dessas mesmas popula??es e sobre as op??es de escolha dos consumidores.

Made available in DSpace on 2016-05-02T13:55:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Norberto Bonamichi NetoDissertacao.pdf: 924328 bytes, checksum: 8e5270f5a465b88647392cac145ba780 (MD5) Previous issue date: 2013-05-29 / The goal of the experiment was to measure and assess the effects of lack of adequate cooling in obtaining and transporting the raw milk to dairy until his arrival by physical chemical and microbiological tests on hand milking and without milk coolers. The experiment was performed with milk coming from a single produceralso designed to evaluate the influence of the time of the year. For the tests were used 40 crossbred females, healthy lactating in a randomized block designand treatments were assembled in minutes elapsed to perform the analysis of quality of milk from milking until the end of the course of 150 minutes, being 30 minutes T1 after milking, 60 minutes T2 after milking, 90 minutes T3 after milking, 120 minutes T4 after milking and 150 minutes T5 after milking, during five days in the winter and five days in the spring. The days are repetitions of the treatment groups in minutes elapsed analyzed within each period (winter and spring). We measured pH tests, titratable acidity, density, freezing point, fat, total count of aerobic mesophilic, total solids and solids not. For the period of 30 minutes after milking, the difference was p<0.05 for the parameters acidity, fat, total solids and solids not fat, that result is repeated in periods of 60 and 90 minutes after milking, in periods of 120 and 150 minutes after milking the difference was p<0.05 for the parameters acidity, fat, aerobic mesophilic count, total solids and solids not fat. The milk collected at both stations during milking after 30 and 60 minutes is shown in better physical-chemical and microbiological, showing that the environmental factor was decisive for such results. The results of the analysis were submitted to Student's t test at a significance level of 5%, using statistical parametric Sisvar software version 5.1. / O objetivo do experimento foi mensurar e avaliar os efeitos da falta de refrigeração adequada na obtenção e transporte do leite cru até sua chegada ao laticínio pelos testes físicos químicos e microbiológicos na ordenha manual e sem resfrirador. O experimento foi realizado com leite oriundo de um único produtor com intuito de avaliar também a influência do período do ano.Para tanto utilizou 40 fêmeas mestiças, hígidas em lactação num delineamento em blocos casualizados e os tratamentos foram montados em minutos decorridos para realizar a análise de qualidade do leite entre o fim da ordenha até o decorrer de 150 minutos, sendo, T1 de 30 minutos pós ordenha, T2 de 60 minutos pós ordenha, T3 de 90 minutos pós ordenha, T4 de 120 minutos pós ordenha e T5 de 150 minutos pós ordenha, com cinco dias, no inverno e cinco dias na primavera. Os dias são as repetições dos grupos de tratamentos em minutos decorridos analisado dentro de cada período (inverno e primavera). Foram mensuradas os testes de pH, acidez titulável, densidade, crioscopia, gordura, contagem global de aeróbios mesófilos, sólidos totais e sólidos não gordurosos. Para o período de 30 minutos pós ordenha observou diferença p<0,05 para os parâmetros acidez, gordura, sólidos totais e sólidos não gordurosos, resultado que se repete nos períodos de 60 e 90 minutos pós ordenha, já nos períodos de 120 e 150 minutos pós ordenha observou diferença p<0,05 para os parâmetros acidez, gordura, contagem de aeróbios mesófilos, sólidos totais e sólidos não gordurosos. O leite colhido em ambas as estações, nos períodos pós ordenha de 30 e 60 minutos se mostraram em melhor estado físico-químico e microbiológico, mostrando que o fator ambiental foi decisivo para tais resultados. Os resultados das analises foram submetidos ao Teste t de Student ao nível de significância de 5%, utilizando o software estatístico paramétricoSisvar versão 5.1.