Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2014-04-22T16:33:20Z No. of bitstreams: 1 Luciane Marieta Soares O uso da talidomida...2013.pdf: 1032465 bytes, checksum: 705c1f8374aee3a4f8a1b0f537cd33f6 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-04-22T16:33:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Luciane Marieta Soares O uso da talidomida...2013.pdf: 1032465 bytes, checksum: 705c1f8374aee3a4f8a1b0f537cd33f6 (MD5) Previous issue date: 2013 / Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / A leptospirose é uma zoonose de importância global, causada por leptospiras patogênicas. Seu tratamento é limitado quando iniciado após quatro dias do surgimento de sintomas, portanto, novas terapias adjuvantes são necessárias. Objetivo. Testar a droga imunomoduladora talidomida como terapia adjuvante à ampicilina no modelo de tratamento tardio da leptospirose experimental em hamsters. Métodos. 60 hamsters foram infectados via intraperitoneal por Leptospirainterrogans cepa L1-130, e foram separados em grupos: nenhum tratamento (NONE), talidomida (TAL), ampicilina (AMP) e ambos (AMP-TAL). A talidomida foi administrada via sonda orogástrica na dosagem de 50 mg/Kg diluída em óleo de linhaça (2ml/Kg) por três dias. Já a ampicilina por via intramuscular: 100mg/Kg/bid por seis dias. Foram realizados dois desenhos experimentais. Experimento 1: o tratamento foi iniciado 48h após o início dos sinais clínicos da doença. Experimento 2: o tratamento foi iniciado imediatamente após a detecção do primeiro óbito entre os animais infectados. Resultados. Experimento1: todos os hamsters dos grupos AMP e AMP-TAL sobreviveram (n=8) enquanto todos os animais dos grupos NONE (n=6) e TAL (n=8) morreram. Os hamsters dos grupos AMP e AMP-TAL não mostraram lesões renais, pulmonares ou hepáticas. Baixa carga de leptospiras foi detectada nos órgãos alvo. Experimento 2: o desfecho letal foi observado em 6/6 hamsters no grupo NONE, 8/8 do grupo TAL, 6/8 do AMP e 6/8 do AMP-TAL. A talidomida usada como adjuvante não prolongou a sobrevida dos animais tratados com ampicilina. No entanto, o grupo TAL apresentou sobrevida mais longa que o grupo que não recebeu tratamento algum. Os animais tratados apresentaram maior frequência de destrabeculação de hepatócitos. Conclusão: Esse estudo abre novas perspectivas no desenvolvimento de um tratamento tardio na leptospirose, contudo observou-se que a talidomida utilizada como terapia adjuvante não teve impacto na sobrevida de hamsters como modelo de início tardio de terapia antimicrobiana. / Leptospirosis is a zoonosis of global importance, caused by pathogenic leptospira. His treatment is limited when started after four days of onset of symptoms, increasing the risk of morbidity and mortality, so new adjuvant therapies are needed.Objectives.To test the immunomodulatory drug, thalidomide, as an adjuvant therapy to antibiotics in experimental leptospirosis. Methods. Hamsters were infected by Leptospirainterrogans strain L1-130, and groups were assigned based on no treatment (NONE), thalidomide only (TAL), ampicillin only (AMP) or both (AMP-TAL). Thalidomide was administered via a gastric tube: 50 mg/kg in linseed oil and 2 ml/kg for three days. Ampicillin was administered intramuscularly at the rate of 100 mg/kg/bid for six days. Treatment was started two days after the onset of symptoms (experiment 1) and immediately after detection of the first death (experiment 2). Results. Experiment 1: all hamsters from the groups AMP and AMP-TAL survived (n=8), while all hamsters from groups NONE (n=6) and TAL (n=8) died. The AMP and the AMP-TAL groups showed no renal, lung or liver pathology and absent or very low leptospiral burden in target organs. Experiment 2: lethal outcome was observed in 6/6 hamsters in the NONE group, 8/8 in the TAL group, and 6/8 in the AMP group and the AMP-TAL group. Thalidomide showed no survival benefit when compared to hamsters treated with ampicillin alone. The TAL group, however, had a longer interval between infection and death when compared to the NONE group. Treated animals had a higher frequency of liver plate disarray. The TAL, AMP and AMP-TAL groups had very low tissue leptospiral counts. Conclusion: This study may open new perspectives to assist the development of a delayed treatment in leptospirosis, however it was observed that thalidomide used as adjuvant therapy had no impact on the survival of hamsters as late onset of antimicrobial therapy model.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2014-05-20T17:14:19Z No. of bitstreams: 1 Adenizar Delgado das Chagas Jr. Avanços... 2014..pdf: 11153892 bytes, checksum: 48154dea65a7a4a32a54408e694c5d30 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-05-20T17:14:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Adenizar Delgado das Chagas Jr. Avanços... 2014..pdf: 11153892 bytes, checksum: 48154dea65a7a4a32a54408e694c5d30 (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / A leptospirose é uma zoonose causada por espiroquetas patogênicas pertencentes ao gênero Leptospira. O modelo da doença em camundongos tem vantagens devido à ampla gama de ferramentas genéticas e imunológicas disponíveis para pesquisas básicas. A maior limitação na conduta clínica e na pesquisa experimental da leptospirose é o fraco desempenho dos métodos disponíveis para detecção direta e para quantificação de leptospiras. Foi incluído nesta tese um conjunto de três manuscritos que visam investigar o desfecho da infecção pela cepa virulenta de Leptospira interrogans nas linhagens de camundongos selvagens (A, CBA, BALB/c e C57BL/6), em camundongos óxido nítrico sintase induzível (iNOS) Knockout (KO), camundongos gene ativador de recombinação 1 (RAG1) KO , camundongos CB17 com imunodeficiência combinada grave (SCID), e os seus respectivos controles selvagens C57BL/6 e BALB/c. Investigar a confiabilidade do método de quantificação do imprint (IM), comparando os resultados obtidos com esta técnica aos obtidos com a utilização do PCR em tempo real (qPCR) para detectar e quantificar leptospiras em amostras de rim de ratos e hamsters experimentalmente infectados. Como esperado, nenhuma das linhagens de camundongos selvagens foram suscetíveis à leptospirose letal. A linhagem A e C57BL/6 exibiram altas cargas de Leptospira nas amostras de rim e as linhagens CBA e C57BL/6 desenvolveram lesões inflamatórias graves, enquanto a linhagem BALB/c provou ser a mais resistente apresentando leptospirose subclínica. Os camundongos iNOS KO e selvagem sobreviveram sem sintomas clínicos de leptospirose. A frequência e gravidade das nefrites foram significantemente menores nos camundongos iNOS KO. Todos os animais RAG1 KO e SCID morreram de leptospirose aguda, enquanto que todos os camundongos selvagens sobreviveram. A hemorragia pulmonar foi observada em 57 e 94% dos camundongos RAG 1 KO e em 83 e 100% dos camundongos SCID, usando doses de inóculos de 107 e 106 leptospiras, respectivamente. Não houve evidências de hemorragia pulmonar nos controles selvagens. Nos modelos de infecção agudo e crônico, houve correlação positiva estatisticamente significante (P < 0,05) na quantificação de leptospiras pelos métodos do qPCR e do IM. Como conclusão geral, a linhagem de camundongos A pode ser a linhagem de escolha em estudos na qual se pretende recuperar um grande número de leptospiras de rins colonizados. As linhagens CBA e C57BL/6 desenvolveram, com maior frequência, lesões inflamatórias e podem ser as mais adequadas para estudos de leptospirose associados com nefrite intersticial. A linhagem BALB/c é a mais indicada para estudar mecanismos que envolvam a imunidade inata e/ou a rápida resposta imune adaptativa. A ausência do gene do iNOS no modelo murino resultou em uma diminuição significativa da suscetibilidade para o desenvolvimento da nefrite intersticial. Além disso, a ausência de linfócitos B e T funcionais não impediu a ocorrência de hemorragia pulmonar. Estes dados fornecem fortes evidências de que a hemorragia pulmonar na leptospirose não está relacionada apenas a mecanismos autoimunes. Para a detecção e quantificação de leptospiras o método do imprint foi equivalente ao qPCR. / Leptospirosis is a zoonosis caused by pathogenic spirochaetes belonging to the genus Leptospira. The mouse disease model is advantagous due to the broad array of immunological and genetic tools available for basic research. A major limitation in the clinical management and experimental research of leptospirosis is the poor performance of the available methods in the direct detection and quantification of leptospires. This thesis includes three manuscripts that investigate the outcome of infection by a virulent strain of Leptospira interrogans in wildtype mice strains: A, CBA, BALB/c and C57BL/6; in iNOS knockout (KO) mice, recombination activating gene 1 (RAG1) KO mice and CB17 severe combined immunodeficiency (SCID) mice. To investigate whether the imprint method (IM) of quantification was reliable we compared it with against real time PCR (qPCR) for the detection and quantification of leptospires in kidney samples from rats and hamsters. As expected, none of the wildtype mice were susceptible to lethal leptospirosis. The A and C57BL/6 strains exhibited high leptospiral loads in the kidney samples and the CBA and C57BL/6 strains developed severe inflammatory lesions, whilst the BALB/c strain proved to be the most resistant to subclinical leptospirosis. The iNOS KO mice survived with no clinical symptoms of leptospirosis. The frequency and severity of nephritis was significantly lower in the iNOS KO mice. All of the RAG 1 KO and SCID animals died of acute leptospirosis, whereas all of the wildtype mice survived. Pulmonary haemorrhage was observed in 57 and 94% of Rag1 KO mice and in 83 and 100% of SCID mice, using inoculum doses of 107 and 106 leptospires, respectively. There was no evidence of pulmonary haemorrhage in the wildtype controls. In both the acute and chronic infection models, the correlation between quantification by qPCR and the IM was found to be positive and statistically significant (P < 0.05). In conclusion, the mouse A strain would be the strain of choice in studies requiring the recovery of a large number of leptospires from colonized kidneys. The CBA and C57BL/6 strains developed more inflammatory lesions and would be the most suitable for studies of leptospirosis associated with interstitial nephritis. The BALB/c strain appeared to be the most suitable for studying mechanisms involving innate immunity and/or rapid adaptive immune response. The absence of the iNOS gene in the murine model resulted in a significant decrease in susceptibility to the development of interstitial nephritis. Furthermore, the absence of functional B and T lymphocytes did not prevent the occurrence of pulmonary hemorrhage. These data provide strong evidence that pulmonary hemorrhage in leptospirosis is not only related to autoimmune mechanisms. For the detection and quantification of leptospires the imprint method was quivalent to that of qPCR. Keywords:

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-08-03T19:02:15Z No. of bitstreams: 1 Ridalva Felzemburgh_Tese de Doutorado.pdf: 15605324 bytes, checksum: 23b238299d54fb2d6e747674800d3be3 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-08-03T19:02:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ridalva Felzemburgh_Tese de Doutorado.pdf: 15605324 bytes, checksum: 23b238299d54fb2d6e747674800d3be3 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / A leptospirose tem emergido como um importante problema de saúde pública no mundo. Em Salvador, esta zoonose é responsável por epidemias anuais que acometem principalmente indivíduos residentes em comunidades negligenciadas. Poucos estudos foram realizados no intuito de compreender a carga da doença e os fatores de risco para infecção. Estudos longitudinais são necessários para guiar intervenções de saúde pública voltadas para a prevenção da leptospirose urbana. Objetivos: 1-Determinar a soroprevalência de infecção prévia por Leptospira e identificar fatores de risco sociais e ambientais para infecção prévia por Leptospira, 2- avaliar a dinâmica nas taxas de infecção para três anos de seguimento da coorte e identificar possíveis fatores de risco para infecção. No presente estudo, foi realizado um estudo de coorte prospectiva com 2.003 residentes selecionados randomicamente em uma comunidade carente em Salvador-Bahia que foram acompanhados por três anos. Entrevistas domiciliares e inquéritos com Sistema de Informação Geográfica foram realizados anualmente para obter indicadores demográfico-comportamentais e geocodificar possíveis fontes ambientais de contaminação, respectivamente. O teste de microaglutinação foi utilizado para avaliar amostras sorológicas obtidas anualmente e identificar infecção por Leptospira. Em relação ao primeiro objetivo, 15% dos 3.171 participantes apresentaram evidência sorológica para infecção prévia pela Leptospira. Fatores associados de forma independente à infecção prévia por Leptospira foram: idade, tendo os indivíduos acima de 45 anos o maior risco entre as faixas etárias, sexo masculino, áreas com risco para alagamento com esgotos abertos, proximidade do domicílio a acúmulo de lixo, ver ratos, presença de galinhas no domicílio, raça negra e baixa renda. Cada acréscimo de 1 dólar na renda familiar per capita reduziu em 11% o risco de infecção prévia (IC 95%, 5%-18%). A respeito do segundo objetivo, 121 indivíduos foram infectados uma ou mais vezes (140 infecções no total) entre 1.300 (65% de 2.003) indivíduos da coorte que completaram os 3 anos de seguimento. A média de incidência anual de infecção foi 35,9 por 1.000 pessoas-ano (IC 95%, 25,8- 46,0), sendo a de infecção primária 32,2. Infecções repetidas foram comuns nesta população, isto se observa pelas taxas de infecção secundária 126,8 e infecção terciária 250,0. Fatores de risco independentes para infecção por Leptospira foram: idade, tendo como referência crianças de 5-14 anos, 15-24; 35-44; 45 ou mais; sexo masculino, residir a até 20m de esgoto aberto e a até 20m do ponto mais baixo no vale, raça negra e renda per capita. A cada dólar acrescido à renda familiar per capita foi decrescido em 24% o risco de infecção (IC 95%, 7%-38%). O número de infectados foi muito superior ao de casos graves notificados. Identificamos um grupo de risco nesta comunidade que está sendo infectado por Leptospira repetidas vezes. O presente estudo indica que medidas preventivas devem focalizar deficiências de infra-estrutura que servem como fontes de transmissão. Intervenções mais efetivas precisam se concentrar especialmente nos adultos jovens e os mais desfavorecidos nestas comunidades. / Leptospirosis has emerged to become a significant public health problem worldwide. In Salvador this zoonotic disease is responsible for annual epidemics which affect especially residents from neglected communities. Few studies have been performed to understand the disease burden and to identify risk factors for infection. Longitudinal studies are necessary to guide public health interventions to prevent urban leptospirosis. Objectives: 1- to determine the seroprevalence of previous Leptospira infection and identify environmental and social risk factors for previous Leptospira infection, 2- to evaluate Infection rates dynamics for the three-year of follow-up of the cohort and to identify risk factors for infection. In this present study, a prospective cohort study was performed with 2.003 randomly-selected residents of a slum community in the city of Salvador-Bahia and who were followed for three years. Household interviews and Geographical Information System surveys were performed annually to obtain information on demographics and risk behaviors and geocodify environmental transmission sources, respectively. The microagglutination test was used to evaluate serum samples obtained during annual serosurveys and identify Leptospira infection. In relation to the first objective, 15% of the 3,171 study participants had serological evidence for prior Leptospira infection. Factors independently associated with Leptospira infection were: age, with individuals aged 45 years or more being the at higher risk than the other age groups, male gender, residence in flood-risk regions with open sewers and proximity to accumulated refuse, sighting rats, presence of chickens in the household, black race and low income. An increase of a dollar per day in per capita household income was associated with an 11% (95% CI, 5%–18%) decrease in previous infection risk. With respect to the second objective, 121 individuals were infected one or more times (140 infections in total) among the 1,300 (65% of 2,003) cohort individuals who completed the three-year of follow-up period. The mean annual infection rate was 35.9 per 1,000 person-years (95% CI, 25.8- 46.0), being the primary infection rate 32.2. Repeated infections were common within this population, we can see this because of the secondary infection rate that was 126.8 and the tertiary infection rate which was 250.0. Independent factors for Leptospira infection were age, having the age group 5-14 as the reference group, 15-24; 25-34; 35-44; 45 or more; male gender, to reside in proximity (<20m) to open sewers and <20m to flood regions, black race and low income. Each dollar increase per day in per capita household income was associated with a 24% (95% CI, 7%-38%) decrease in infection risk. The number of infected individuals is much higher than the number of severe cases. We identified a high risk group within this community which is susceptible to being repeatedly infected with Leptospira. Prevention measures must target infrastructure deficiencies that serve as transmission sources. Effective interventions must focus on the young adults and the most neglected individuals within these communities.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-09-04T18:27:25Z No. of bitstreams: 1 Wildo Navegantes Aspectos epidemiologicos da leptospirose....pdf: 1357912 bytes, checksum: 01380ce81c921e78d62f63cce2d77036 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-04T18:27:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Wildo Navegantes Aspectos epidemiologicos da leptospirose....pdf: 1357912 bytes, checksum: 01380ce81c921e78d62f63cce2d77036 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / A leptospirose é a principal doença infecciosa zoonótica em áreas urbanas nos países em desenvolvimento, porém subnotificada. O conhecimento e as atitudes sobre a leptospirose é desconhecida nas comunidades brasileiras onde a doença é prevalente. Objetivos: 1) Descrever os casos notificados de leptospirose, fatores de risco para óbito, influência das chuvas em cidades metropolitanas e parte da carga da leptospirose no Brasil, 2000-2009. 2) Descrever o conhecimento e as atitudes sobre leptospirose dos moradores de uma favela na cidade de Salvador. Métodos:1) Foram descritos os casos notificados de leptospirose no Sistema Nacional de Vigilância de 2000 a 2009. Foi analisada a influência das chuvas e a ocorrência de casos de leptospirose em cinco metrópoles brasileiras. Foram calculadas as taxas de incidência, hospitalização, mortalidade e letalidade por leptospirose e foram avaliados os fatores de risco para óbito a partir das variáveis demográficas entre os casos confirmados. 2) Foi conduzido um estudo transversal sobre o conhecimento e atitudes sobre leptospirose na comunidade de Pau da Lima, Salvador – Bahia. Resultados: 1) A doença acomete populações vulneráveis socialmente que vivem em áreas urbanas. As taxas de incidência, hospitalização, mortalidade e letalidade foram 1,48, 1.04, 0,12 por 100.000 habitantes e 9%, respectivamente. A partir de 15 anos de idade (OR=1,88; IC95% 1,39-2,55), baixo nível educacional (OR=1,35; IC95% 1,17-1,56), viver em área urbana (OR=2,19; IC95% 1,80-2,69) foram detectados como fatores de risco para óbito entre os casos confirmados. As chuvas tiveram forte relação com a ocorrência de surtos sazonais da doença em cinco cidades metropolitanas. 2) 72,7% das pessoas sabem que a leptospirose é uma doença transmitida por ratos, 56,4% reconhecem que pegam a doença com o contato com urina de ratos, 17,8% referiram limpar esgotos ao redor da sua casa, 35,5% referiram usar luvas e 33,3% botas para se proteger. Conclusão: No Brasil, a doença acomete homens adultos, com baixa nível educacional que vivem em áreas urbanas, tais achados estão associados a óbitos. Muitos surtos sazonais ocorreram sob influência das chuvas nas cidades metropolitanas estudadas. Na comunidade de Pau da Lima, uma favela de Salvador, as pessoas conhecem a leptospirose e as principais atitudes detectadas estão relacionadas as contínuas exposições a água de chuvas e esgotos na comunidade. As conclusões deste trabalho apontam para a necessidade de estruturar serviços de saúde que antecedam as chuvas, e para obras de saneamento básico em regiões metropolitanas com maior incidência da doença. Recomendamos que sejam realizados outros estudos sobre o conhecimento em relação a leptospirose para entender os déficits de informação da população, assim como instruí-los para organizadamente cobrarem soluções como obras de saneamento básico que minimizem o impacto da leptospirose na população. / The leptospirosis is major zoonotic infectious disease in urban areas in the developing countries. However, the leptospirosis is underreported in the world. The knowledge and attitudes about leptospirosis of the communities which suffer due the leptospirosis is unavailable. Objectives 1) To describe the leptospirosis cases reported, risk factors for death, influence of the rainfalls in metropolitan cities and, part of the burden caused by the leptospirosis in Brazil from 2000 through 2009. 2) To describe the knowledge and attitudes about leptospirosis in slum area in metropolitan city of the Brazil. Methods: 1) Were described the leptospirosis cases reported in the National Surveillance System from 2000 to 2009. Were analyzed the influence of the rainfalls in metropolitan cities, were analyzed frequency measures and, were identified risk factors for death. 2) Was conducted a cross-section study about the knowledge and attitudes about leptospirosis in the community of “Pau da Lima”, Salvador- Bahia. Results: 1) The disease attacks adult men in economically active age with low educational level living in urban areas. Incidence, hospitalization, mortality and lethality rates were 1.48, 1.04, 0.12 per 100.000 inhabitants, and 9% respectively. Being aged 15 or above (OR=1.88; IC 95% 1.39-2.55), having low educational level (OR=1.35; IC 95% 1.17-1.56), and living in urban areas (OR=2.19; IC 95% 1.80-2.69) have been detected as risk factors for death among the confirmed cases. Rains were strongly related to the occurrence to seasonal outbreaks of the disease in five metropolitan cities studied. 2) In an urban slum in Salvador, 72.7% of the individuals know that leptospirosis is a disease transmitted by rats, 56.4% recognized that the disease can be contracted by getting in contact with the urine of rats, 17.8% clean the sewers surrounding their houses, 35.5% wear gloves and 33.3% wear boots to protect them. Conclusion: In Brazil, the disease attacks adult men with low educational level living in urban areas, these covariates are associated to death. Many seasonal outbreaks occur in the studied metropolitan cities under the influence of rain. In a slum area in Salvador, people know leptospirosis and the main attitudes detected are related to continuous exposition of the community to rainfalls and sewers. Health policies geared to structuring health services prior to rains and the implementation of basic sanitation infrastructure to be requirements for minimizing the occurrence of leptospirosis in mega cities. We also recommend the conduction of studies on the knowledge and attitudes in order to understand population’s information deficit, as well as to instruct them to demand solutions such as the construction of basic sanitation infrastructure in an orderly manner.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2014-07-21T18:05:28Z No. of bitstreams: 1 Alan Moreira de Araújo, Detecção de espécies... 2013.pdf: 1675349 bytes, checksum: 82f7886b065bdb7c68db0c1fb5d46f67 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-07-21T18:05:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alan Moreira de Araújo, Detecção de espécies... 2013.pdf: 1675349 bytes, checksum: 82f7886b065bdb7c68db0c1fb5d46f67 (MD5) Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Leptospirose é uma zoonose que pode levar a graves complicações, como a síndrome de Weil e a síndrome pulmonar hemorrágica, porém os mecanismos patogênicos que levam ao desenvolvimento das formas graves da doença ainda são desconhecidos. Após a penetração no indivíduo, as leptospiras invadem a corrente sanguínea e se disseminam para os órgãos. Dessa forma, a leptospirose apresenta características semelhantes as da sepse, doença que tem o estresse oxidativo como um dos principais responsáveis pelo seu agravamento. Entretanto, pouco se sabe sobre o envolvimento do estresse oxidativo na leptospirose. O presente estudo teve como objetivo avaliar se a produção de espécies reativas de oxigênio (ROS) e os níveis do antioxidante glutationa (GSH) estão relacionados com as manifestações clínicas mais graves de pacientes hospitalizados com leptospirose. A produção de ROS e os níveis de GSH foram avaliados nas amostras de sangue de doze pacientes e nove indivíduos saudáveis através dos ensaios de quimioluminescência e de absorbância, respectivamente. Nós observamos que os níveis de ROS estavam aumentados (p=0.0012) e os de GSH diminuídos (p=0.0002) nos pacientes quando comparados com os indivíduos saudáveis. Dentre os pacientes, a diminuição de GSH estava correlacionada com a trombocitopenia (r=0.63) e com elevados níveis de creatinina (r= -0.64), enquanto que a produção de ROS estava fortemente correlacionada com os níveis elevados de potássio sérico (r=0.8). A compreensão da importância biológica de ROS e do GSH na leptospirose faz-se necessária, pois uma investigação mais detalhada pode levar ao desenvolvimento de terapias adjuvantes focadas no estresse oxidativo. / Leptospirosis is a zoonotic disease that causes severe manifestations such as Weil’s disease and pulmonary hemorrhage syndrome, however the underlying mechanisms that lead to the development of severe forms are not clear. Leptospires penetrate through skin, reach the bloodstream and disseminate to the organs. Thus, leptospirosis and sepsis have similar characteristics. Although there is vast literature demonstrating that oxidative stress play an important role in the severity of sepsis, none is known about it in leptospirosis. The aim of this study was to evaluate whether reactive oxygen species (ROS) production and antioxidant reduced glutathione (GSH) levels are related to complications in patients hospitalized with leptospirosis. ROS production and GSH levels were measured in blood samples of twelve patients and nine healthy controls using chemiluminescence and absorbance assays. We found that ROS production was higher (p=0.0012) and GSH levels were lower (p=0.0002) in leptospirosis patients compared with healthy individuals. Among patients, GSH depletion was correlated with thrombocytopenia (r=0.63) and elevated serum creatinine (r= -0.64), while a strong positive correlation was observed between ROS production and elevated serum potassium (r=0.8). Additional investigation of the biological significance of ROS production and GSH levels is warranted as they may guide the development of novel adjuvant therapies for leptospirosis targeting oxidative stress.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-03-06T17:21:16Z No. of bitstreams: 1 Cleiton Silva Santos O papel...2014.pdf: 3463624 bytes, checksum: e0ea46a25188ac23e355981d84456b5f (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-03-06T17:44:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Cleiton Silva Santos O papel...2014.pdf: 3463624 bytes, checksum: e0ea46a25188ac23e355981d84456b5f (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-06T17:44:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cleiton Silva Santos O papel...2014.pdf: 3463624 bytes, checksum: e0ea46a25188ac23e355981d84456b5f (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / A patogênese da leptospirose é pouco compreendida e os estudos com enfoque na resposta inflamatória sistêmica ou local são escassos, em especial no que se refere ao papel do óxido nítrico (NO) e da enzima óxido nítrico sintase induzível (iNOS). Dados de ensaios em culturas de células renais sugerem um papel importante da liberação de mediadores inflamatórios, tais como NO, na resposta às leptospiras e consequente nefrite intersticial. A transposição destes achados para o modelo in vivo foi pouco explorada. Por outro lado, estudos em humanos sugerem que a liberação sistêmica de NO correlaciona-se com a gravidade da doença renal e, portanto, pode ser um potencial alvo para terapia adjuvante à antibioticoterapia. O presente trabalho estudou a correlação da iNOS com distúrbios hidroeletrolíticos na patogênese da leptospirose. No modelo experimental de hamsters, avaliamos a associação da inibição dos efeitos do NO, através da terapia combinada de antibioticoterapia padrão e azul de metileno, com distúrbios eletrolíticos, alterações histopatológicas em hamsters e sobrevida. Nenhum benefício da terapia adjuvante com azul de metileno foi demonstrado. No modelo de camundongos transgênicos, investigamos o efeito da ausência do gene da iNOS na nefrite intersticial e na quantidade de bactérias observadas nos tecidos. A ausência do gene iNOS esteve associado a menor frequência de nefrite intersticial grave. Maiores estudos são necessários para investigar a função da inibição da produção de NO na patogenia da doença e da nefrite associada a leptospirose. / The pathogenesis of leptospirosis is poorly understood, and there are few studies fusing on the systemic or local inflammatory responses, especially referring to the role of nitric oxide (NO) and the enzyme inducible nitric oxide synthase (iNOS). Data from in vitro studies suggest an important role of inflammatory mediators, such as NO, in the response to leptospires in the development of interstitial nephritis. The transposition of these findings to an in vivo model was little explored. However, studies in humans suggest that systemic liberation of NO is correlated with severity of renal disease and therefore can be potential target to adjuvant therapy along with antibiotic therapy. The present work evaluated the correlation of iNOS with the pathogenesis of leptospirosis. In the experimental hamster model, we evaluated the effect of inhibiting downstream effects of NO on electrolytic disorders, histopathological changes and survival. No benefit of methylene blue treatment could be observed when compared to antibiotic (ampicillin) therapy only. In the mouse transgenic model, we investigated the effect of the absence of the Inos gene in interstitial nephritis and in the bacterial burden in target tissues. The absence of a functional iNOS gene was associated with lower frequency of severe interstitial nephritis.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-09-29T16:45:14Z No. of bitstreams: 1 Alcinéia Oliveira Damiao caracterização ....PDF.pdf: 1250268 bytes, checksum: 8e253d5ec93aa5123f3f85b88d8bc154 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-09-29T16:45:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Alcinéia Oliveira Damiao caracterização ....PDF.pdf: 1250268 bytes, checksum: 8e253d5ec93aa5123f3f85b88d8bc154 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-09-29T16:45:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alcinéia Oliveira Damiao caracterização ....PDF.pdf: 1250268 bytes, checksum: 8e253d5ec93aa5123f3f85b88d8bc154 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / A leptospirose é uma zoonose de distribuição mundial, com 1,2 milhões de casos registrados a cada ano. De 1996 a 2013, o grupo de pesquisa de leptospirose do CPqGM, realiza uma vigilância ativa no Hospital Couto Maia em Salvador-Ba, onde foi recrutado 4612 casos suspeitos para leptospirose. Destes 4612 foi confirmado o diagnóstico de 1853 (40%) utilizando pelo menos um dos três métodos de diagnóstico (MAT, Hemocultura, qPCR). Dentre os casos confirmados, 1759 (95%) foram confirmados pelo MAT. A sensibilidade do MAT foi diferente entre as amostras aguda e convalescente, sendo 60% na fase aguda e 97% na fase convalescente. O sorogrupo Icterohaemorrhagiae foi o mais prevalente (90%) dos casos confirmados para MAT. Durante o período do estudo foram coletadas 1133 hemoculturas e destas 203 (18%) foram positivas, sendo possível isolar leptospiras de 93/203 (45%) das hemoculturas, as quais foram soro-agrupadas com soros heterológos de coelho. A concordância entre o sorogrupo encontrado no MAT e na soro-agrupagem foi de 80%. Os achados mostram que existe uma concordância significante entre o sorogrupo encontrado pelos dois métodos, o que indica que o painel de cepas utilizado no MAT apresenta uma ótima cobertura para os sorogrupos prevalentes na região. A predominância de um sorogrupo facilitou quanto a tomadas de decisões para prevenção e controle, assim como facilita para o desenvolvimento de novos testes de diagnóstico e vacinas mais direcionados. / Leptospirosis is a re-emerging zoonotic disease of global importance, with 1,2 million cases reported each year. Diagnosis of leptospirosis is often difficult given the nonspecific disease presentation. In order to compare the performance of the two gold standard diagnostic tests for leptospirosis, the group enrolled 4612 patients with suspected leptospirosis during active surveillance at the state infectious disease reference hospital, Hospital Couto Maia, in Salvador, Bahia between 1996 and 2013. Of these, was confirmed Leptospira infection in 1853 (40%) using at least one of three diagnostic methods (microagglutination (MAT), blood culture, and qPCR). Was confirmed 1759 (95%) cases using only the MAT assay, and identified the serogroup Icterohaemorrhagiae as the infective agent in 90% of MAT positive samples. It was determined the sensitivity of the MAT was 60% for acute phase samples and increased to 97% for convalescent samples. Within this study period, it was possible to collect 1133 blood cultures and was isolated leptospires from 93 of 203 (45%) of blood cultures, and determined the serotype using heterologous rabbit sera. The concordance between the infective serogroup identified using hemoculture and MAT techniques was 80%. This result indicates that the panel of 11 strains used in the MAT represents a majority of the infective serogroups causing disease in our study population. The predominance of a single serogroup in symptomatic cases informs the development of new diagnostic tests and novel vaccines to prevent leptospirosis in Brazil.

Made available in DSpace on 2016-12-23T13:53:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Priscilla Cortizo Costa.pdf: 3020906 bytes, checksum: 55567e96f2321e4aa28550671f51ef6b (MD5) Previous issue date: 2013-03-05 / The sheep and goats are gaining prominence in Brazil, making it an attractive alternative investment. This study aimed to assess the prevalence and risks associated with leptospirosis in sheep and goat flocks in the State of Espírito Santo, in a total of 24 herds with 737 animals. The technique used to determine the seroprevalence was the microscopic agglutination test (MAT), and the serovar Icterohaemorrhagiae was found in higher prevalence in both goats (97%) and sheep (78.26%). Aspects related to the creation were statistically analyzed using the Chi Square test in order to obtain the association between the variables. Factors such as the presence of wetlands, miscarriages and premature births were directly associated with the presence of leptospirosis in herds. There was found in the results that leptospirosis is present in the State of Espírito Santo, and is mainly associated with the breeding system and the frequency of abortions, interventions are needed to provide improvements in the sanitary control of livestock, contributing to the improvement of production in Espírito Santo goats and sheep / A produção ovina e caprina vêm ganhando destaque no Brasil, tornando-se um atrativo investimento alternativo. Esse trabalho teve como objetivo avaliar a soroprevalência e os riscos associados à leptospirose em rebanhos caprinos e

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-08-02Bitstream added on 2014-06-13T19:22:36Z : No. of bitstreams: 1 000735844.pdf: 2382723 bytes, checksum: 5bd3f7437b4f194480a3c609cd3dfb4e (MD5) / O objetivo desse trabalho foi verificar a ação de marcas diferentes de estreptomicinas polivalentes para o tratamento da leptospirose bovina em dose única (25 mg de estreptomicina por kg de peso corpóreo). O trabalho foi realizado com 14 touros adultos sorologicamente reagentes para Leptospira interrogans sorovar Hardjo, com título mínimo de 800 e com cultivo positivo. Os animais foram separados em 2 grupos de acordo com a marca da estreptomicina utilizada no tratamento, grupo 1: estreptomicina A e grupo 2: estreptomicina B. Os bovinos controles não receberam nenhum tratamento. Foram obtidas amostras de sangue e urina dos animais tratados e controles nos dias -1, 0, 1, 2, 3, 5, 10, 15 e 25; considerando-se o dia do tratamento como dia 0. Na urina dos bovinos tratados e controle foi realizada a reação em cadeia da polimerase (PCR) e isolamento com inoculação em hamsters. Observou-se que a estreptomicina da marca A, em dose única de 25 mg/kg de peso corpóreo, conseguiu eliminar a leptospirúria no grupo de touros após 24h do tratamento. Já no grupo de touros tratados com a estreptomicina da marca B, foi constatado a leptospirúria entre 48h e 72h, após o tratamento. Em ambos os grupos tratados, a resposta sorológica apresentou uma variação da queda dos níveis dos títulos de anticorpos aglutinantes, sendo que embora a estreptomicina A tenha aparentemente apresentado um melhor eficiência quando comparada com as médias geométricas dos títulos do grupo tratado com a estreptomicina B as médias não diferiram entre si pelo Teste de Tukey (P > 0,05). Nos bovinos tratados a leptospirúria foi intermitente e a média geométrica dos títulos foi menor que a média geométrica dos títulos dos bovinos controles. A diferença do efeito da ação das diferentes marcas de estreptomicina está possivelmente na qualidade da matéria prima produzida pelos laboratórios / The objective of the present work was to evaluated two different commercial streptomycin brands used for the treatment of bovine leptospirosis, administrated in a single dose (25mg/body weight). Thirty serologically reactive bulls for Leptospira interrogans serovar Hardjo were utilized. The bulls presented a 800 minimum antibody titer and positive results at urine samples isolation test. The animals were separated into 2 groups according to the streptomycin brand. Treatments consisted of: group 1: streptomycin A and group 2: streptomycin B. The control animals received no application of any streptomycin product. Blood and urine samples of treated and controls bulls were collected at -1, 0, 1, 2, 3, 5, 10, 15 and 25 days considering the treatment day as D0. Detection of leptospira genetic material was carried out in all bulls urine samples using the PCR assay. It was observed that the streptomycin A eliminated leptospiruria 24h after treatment. The elimination of leptospiruria was evidente 48 and 72hs in bulls treated with the streptomycin B. In both treated groups, the serological response varied considering antibodies titers decreasing. Streptomycin A group 1 showed a better performance accordingly to geometric means in comparison to antibodies titers of the streptomycin B group 2, although there were no significant difference found by the Tukey Test (P > 0.05). In the bovine control group the leptospiruria was intermittent and the treated bovines antibody titers average was lower than the average of the bovine controls, during all the experimental period. The action effect difference of the diferent streptomycin brands used is possibly due to the quality of the raw material used to produced the products manufactured by the pharmaceutical laboratories

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-09-01Bitstream added on 2014-06-13T20:26:15Z : No. of bitstreams: 1 lima_vy_dr_botfmvz.pdf: 252601 bytes, checksum: ccb77f186740e7b4309b3c17010d6394 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / As zoonoses são doenças e infecções naturalmente transmissíveis entre os hospedeiros vertebrados e o homem. Dentre estas enfermidades está à toxoplasmose, zoonose de distribuição mundial que em diversos inquéritos soroepidemiológicos observa-se uma infecção de 70 a 90% das populações. E à leptospirose, atualmente estão disponíveis dados que sugerem que é a enfermidade mais comum dos animais domésticos. O presente estudo verificou hábitos alimentares e de costumes com as zoonoses por meio de levantamento soro-epidemiológico e da ocorrência de infecção na população acadêmica de medicina veterinária de duas universidades localizadas no oeste do estado do Paraná. Foi observado uma porcentagem de 25,5% (73/286) e de 3,8% (11/286) de positividade para a toxoplasmose e leptospirose, respectivamente. Os dados epidemiológicos referentes aos questionários aplicados aos alunos foram analisados, isoladamente para ambas as enfermidades. A associação entre os resultados sorológicos e as variáveis epidemiológicas foi verificada pelos testes de Qui-quadrado ou Exato de Fischer, adotando-se um nível de significância (a) de 5%. Observou-se diferença estatística entre as variáveis conviver com animais dentro de casa, deixar a ração exposta, beber leite cru, área onde a família mora urbana ou rural, ingerir carne crua para a toxoplasmose e somente a variável conviver com animais dentro de casa para a leptospirose. Concluiu-se que a ingestão de alimentos crus, continua sendo um dos principais fatores de risco de infecção pelo Toxoplasma gondii entre a população adulta e que a convivência destes acadêmicos com as várias espécies animais, foi o fator de risco principal na população estudada em relação à leptospirose. / The zoonoses are diseases and infections naturally transmissible between the vertebrate hosts and humans. Toxoplasmosis is a worldwide distribution zoonosis, that in many seroepidemiologic inquires had infections rates of 70% to 90% of the population. Actual data shows that leptospirosis is the most common disease of the domestic animals. This project correlated behavioral aspects of the veterinary academic population on the west region of Paraná state with the incidence and/or prevalence of toxoplasmosis and leptospirosis using a seroepidemiologic approach. There were total of 25.5% (73/286) and 3.8% (11/286) positive cases for toxoplasmosis and leptospirosis respectively. The epidemiologic data from the students’ behavior inquiry were analyzed separately. The association between the serologic results and the epidemiologic data were verified by Chi-square and Fisher exact test, using a significance level (a) of 5%. There were statistical significance between the inquiry variables “live with indoor animals”; “the pet’s food is exposed”; “drink raw milk”; “the family lives in urban or country areas”; “ingestion of raw meat” and toxoplasmosis. Living with indoors pets was the only variable with statistical significance for leptospirosis infections. In conclusion, ingestion of raw food continues to be one of the most important risk factors for Toxoplasma gondii infections in adult population; and living with various animal species is the main risk factor for leptospirosis.