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Identificar e isolar células reticulares fibroblásticas em linfonodos humanos / Identify and isolate fibroblastic reticular cells in human lymph nodes

Alvarenga, Heliene Gonçalves 14 April 2015 (has links)
Células reticulares fibroblásticas (FRCs, gp38+ e CD31-) e células duplo negativas (DNCs, gp38- e CD31-) são células estromais encontradas em órgãos linfoides secundários, como linfonodos. Enquanto as FRCs têm sido amplamente estudadas, pouco se sabe ainda sobre DNCs. Apesar da função estrutural das FRCs nos linfonodos já estar bem estabelecida, estudos recentes indicam que as FRCs também desempenham um papel fundamental em processos imunológicos, por exemplo, migração celular, ativação e qualidade da resposta imune, além da participação na tolerância periférica. Outra célula estromal em constante estudo são as células-tronco mesenquimais (CTMs), principalmente encontradas na medula óssea. Estas células compartilham similaridades, como por exemplo; são células estromais encontradas em órgãos linfoides, apresentam morfologia e características semelhantes quando cultivadas in vitro e estão envolvidas na resposta imune por mecanismos semelhantes. As CTMs são provenientes de um órgão linfoide primário, cuja função principal não está relacionada à resposta imunológica, entretanto, de acordo com inúmeros trabalhos, estas células possuem capacidade de interferir na ativação de várias células do sistema imunológico. Portanto, nossa hipótese é de que as FRCs e DNCs, que se encontram em um órgão linfoide secundário, cuja função principal remete a resposta imunológica, apresentem também um papel regulador, descrito na literatura como tolerância periférica e contração de uma resposta imunológica já estabelecida. Em nosso estudo mostramos que FRCs e DNCs foram isoladas a partir de linfonodos humanos e devidamente caraterizadas. Evidenciamos que FRCs e DNCs atendem todos os critérios mínimos propostos pela sociedade internacional de terapia celular para serem consideradas células-tronco estromais. Além disso, mostramos que FRCs e DNCs influênciam a proliferação e a expressão de moléculas de homing em linfócitos alogênicos in vitro. Portanto, contribuimos de forma inédita para o entendimento funcional das FRCs e DNCs, visto que estudos em humanos envolvendo estas células são escassos / Fibroblastic reticular cells (FRCs, gp38+ e CD31-) and double-negative cells (DNCs, gp38- e CD31-) are stromal cells found in secondary lymphoid organs, such as lymph nodes. While the FRCs has been widely studied, little is known about DNCs. Despite the structural function of FRCs on lymph nodes is well established, recent studies indicate that FRCs also play a key role in immunological processes, for example, cell migration, immune response activation and quality, beyond their involvement in peripheral tolerance. Another stromal cell type in constant study are mesenchymal stem cells (MSCs), mainly found in bone marrow. These cells share similarities with FRCs and DNCs, for example; they are estromal cells found in lymphoid organs, they present similar morphology and characteristics when cultured in vitro and they are involved in the immune response by similar mechanisms. MSCs are derived from a primary lymphoid organ which the major function is not related to immune response, but according to numerous studies these cells have the capacity of the interfere on activation of various immune cells. Consequently, our hypothesis is that FRCs and DNCs, usually found in secondary lymphoid organ, display immune regulatory roles, which were described in the literature as peripheral tolerance and immune response contraction. In our study we showed that FRCs and DNCs were isolated from human lymph nodes and adequately characterized. We evidenced that FRCs and DNCs meet all minimum criteria proposed by the International Society of Cell Therapy to be considerate a stromal stem cell. Therefore, we contributed in an unpublished manner to the functional understanding of FRCs and DNCs, since human studies involving these cells are scarce
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Prevalência de doenças oportunistas em biópsias de linfonodos periféricos de pacientes com infecção pelo HIV

Ramos, Carina Guedes January 2010 (has links)
Linfadenopatia pode estar presente em qualquer fase da infecção pelo HIV a apresenta uma variedade de diagnósticos diferenciais possíveis, desde manifestações secundárias ao próprio HIV até doenças oportunistas ou neoplasias. Foi realizado um estudo de corte transversal de pacientes que realizaram biópsias de linfonodo periférico no Hospital de Clínicas de Porto Alegre entre Janeiro de 2004 a Dezembro de 2008. Foram realizadas 210 biópsias, 131 (61,9%) pacientes eram do sexo masculino, a mediana da idade foi 36 (18-74) anos e da contagem de CD4 149 (1-756) cels/mm3. Cento e seis (50,5%) biópsias foram realizadas na região cervical. Os diagnósticos mais prevalentes incluíram micobacteriose 105 casos (50,2%) sendo que mais de 90% dos casos foram tuberculose; hiperplasia reacional (HR) 48 casos (22,7%), linfoma 19 casos (9,0%) e micoses sistêmicas 12 casos (5,7%) que incluíram a histoplasmose, paracoccidioidomicose e criptococose. Esse estudo demonstra que a biópsia de linfonodos periféricos em pacientes com infecção pelo HIV é uma importante ferramenta no diagnóstico de doenças oportunistas no nosso meio. / Peripheral lymphadenopathy is commonly present in HIV- infected patients and has a wide spectrum of differential diagnoses. We performed a cross-sectional study of peripheral lymph node biopsies performed from 2004 to 2008 in HIV patients assisted in a public hospital in Southern Brazil. Two hundred and ten biopsies were performed, 131(61.9%) patients were male, median of age was 36 years old with a mean of lymphocyte CD4 count of 149 (1-756) cells/mm3. Most of biopsies were performed in the cervical site 106 (50.5%). The most prevalent diagnosis were mycobacteriosis 105 (50.2%), more than 90% was tuberculosis; reactive follicular hyperplasia 48 (22.7%); lymphoma 19 (9.0%); systemic mycosis 12 (5.7%), including histoplasmosis, paracoccidioidomycosis and cryptococcosis. Peripheral lymph node biopsy is a useful tool to diagnose opportunistic diseases such as mycobacteriosis, HIV related malignancies and invasive fungal infections in HIV-infected patients.
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Avaliação de fatores associados à invasão, migração celular e transformação maligna em mulheres com endometriose profunda / Evaluation of factors related to invasion, cell migration and malignant transformation in women with deep endometriosis

Giuliano Moysés Borrelli 22 September 2015 (has links)
INTRODUÇÃO: A endometriose é uma doença crônica de natureza benigna e de alta prevalência, definida pela presença de tecido endometrial fora da cavidade uterina. Dentre os principais sintomas, destacam-se a dor pélvica crônica, dismenorreia e infertilidade. Clinicamente, apresenta-se de três formas distintas: endometriose peritoneal ou superficial, endometriose ovariana - endometrioma - e endometriose profunda (EP). A EP apresenta um padrão de comportamento semelhante ao das doenças malignas, com capacidade de crescimento infiltrativo e destrutivo em diferentes sítios. Lesões endometrióticas já foram identificadas em linfonodos pélvicos, evidenciando a disseminação linfática das células endometrióticas. Em neoplasias malignas, as quimiocinas e seus receptores desempenham papel soberano no processo de metástase e na disseminação linfática das células tumorais. OBJETIVOS: 1) avaliar a expressão das quimiocinas que no câncer estão relacionadas ao processo de metástase - CXCL12-CXCR4, CCL19/CCL21-CCR7 - na EP do compartimento posterior da pelve e nos respectivos linfonodos-sentinela (LS); 2) avaliar a concentração dessas quimiocinas no líquido peritoneal (LP) de pacientes com e sem endometriose; 3) avaliar a expressão da proteína BAF250a, relacionada à transformação maligna, na endometriose, com ênfase na EP do compartimento posterior da pelve. MÉTODOS: 123 pacientes foram incluídas neste estudo. Nós realizamos a coloração imuno-histoquímica para avaliar a expressão das quimiocinas - ligantes e receptores - nas lesões de EP retovaginal/do compartimento posterior da pelve (n=27), nos respectivos LS (n=27) e no endométrio de pacientes-controle sem endometriose (n=20); a concentração das quimiocinas no LP foi avaliada por meio da tecnologia multiplex - Luminex® xMAP® Technology - em um subgrupo de pacientes com (n=36) e sem (n=27) endometriose; a possibilidade de transformação maligna também foi avaliada por meio da imuno-histoquímica para analisar a expressão da proteína BAF250a dentre as lesões de endometriose - EP retovaginal (n=30), lesões de endometriose nos LS (n=7), endometriose ovariana (n=20), sarcoma do estroma endometrial extragenital (SEEE) de intestino (n=2) e no endométrio de pacientes sem endometriose (n=20). RESULTADOS: o padrão de coloração IHQ das quimiocinas relacionadas à metástase no câncer foi caracterizado pela primeira vez na EP do compartimento posterior da pelve e nas lesões de endometriose acometendo os LS; a expressão de CXCR4 foi diretamente relacionada ao tamanho da lesão de EP; CCL19, CCL2 e CXCL8 apresentaram concentrações no LP estatisticamente maiores em mulheres com endometriose comparadas aos controles sem doença e a associação delas aumentou a probabilidade de identificar pacientes com endometriose; além disso, nós identificamos a perda clonal da expressão da BAF250a em 36% (9/25) dos casos de EP, 40% (2/5) das lesões de endometriose nos LS, 30% (6/20) dos endometriomas e em 25% (5/20) no endométrio tópico das pacientes-controle. CONCLUSÕES: quimiocinas parecem estar envolvidas no mecanismo de disseminação da endometriose e algumas mostraram potencial para serem utilizadas como marcadores da doença; a perda clonal da expressão da proteína BAF250a na EP possa talvez representar um marcador de risco para transformação maligna nessas lesões. O valor desses achados precisa ser ainda esclarecido em futuras análises / INTRODUCTION: Endometriosis is a chronic disease of benign nature and of high prevalence, defined by the presence of endometrial tissue outside the uterine cavity. Among the main symptoms are highlighted chronic pelvic pain, dysmenorrhea and infertility; clinically, it may appear in three distinct ways: peritoneal endometriosis, ovarian endometriosis - endometriomas - and deep infiltrating endometriosis (DIE). DIE presents a behavioral pattern in many ways similar to that of malignancies, as capacity of infiltrative and destructive growth in different sites. Endometriotic lesions have already been identified in pelvic lymph nodes, showing the possibility of lymphatic dissemination of endometriotic cells. In malignancies, chemokines play a sovereign role in the process of metastasis and lymphatic spread of tumor cells. OBJECTIVES: 1) to evaluate the expression of cancer-related chemokines - CXCL12-CXCR4, CCL19/CCL21-CCR7 - in rectovaginal DIE (or endometriosis of the posterior compartment of the pelvis) and the respective pelvic sentinel lymph node (PSLN); 2) to evaluate the concentration levels of those chemokines in the peritoneal fluid (PF) of patients with and without endometriosis; 3) to evaluate the expression of protein BAF250a, related to malignant transformation, in endometriosis, with emphasis in rectovaginal DIE. METHODS: 123 patients were enrolled in this study. We performed immunohistochemical staining to assess the expression of all chemokines - ligands and receptors - in rectovaginal DIE (n=27), PSLN (n=27) and eutopic endometrium (EE) from patients without endometriosis as controls (n=20); chemokine concentration in the PF was assessed with multiplexing technology - Luminex® x-MAP® Technology - in a subgroup of patients with (n=36) and without (n=27) endometriosis; the possibility of malignant transformation was also assessed by means of immunohistochemistry to evaluate the expression of BAF250a protein among endometriosis lesions - rectovaginal DIE (n=30), compromised PSLN (n=7), ovarian endometriosis (n=20), extragenital endometrial stromal sarcoma (EESS) affecting the bowel (n=2) and EE from controls without the disease (n=20). RESULTS: the staining pattern of cancer metastasis-related chemokines was characterized for the first time in rectovaginal DIE and lesions compromising the PSLN; CXCR4 expression was directly correlated with the size of the DIE lesions; CCL19, CCL2 and CXCL8 presented higher statistically significant PF concentrations in women with endometriosis compared with controls and their association improved the likelihood of identifying patients with endometriosis; furthermore, we identified the clonal loss of BAF250a expression in 36% (9/25) of DIE, 40% (2/5) of endometriotic lesions in the PSLN, 30% (6/20) of endometriomas and in 25% (5/20) of EE from controls. CONCLUSIONS: chemokines might be involved in the mechanism of dissemination of endometriosis and some have shown potential to be used as markers of the disease; clonal loss of protein BAF250a in DIE might represent a marker for malignant transformation in these lesions. The value of these findings needs to be clarified in further analysis
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Detecção de Salmonella spp. em amostras de fezes, linfonodos e carcaças de suínos no momento do abate / Detection of Salmonella spp. in samples of faeces, lyinfh nods and carcasses of swine in the moment of the slaughter

Teixeira, Solange Rosa 15 February 2007 (has links)
Microrganismos do gênero Salmonella são eliminados em maior número por ocasião do abate, em função do estresse a que são submetidos os animais, pelo transporte da granja ao frigorífico e pelo reagrupamento anterior ao abate. Por este motivo, o estudo da presença de Salmonella spp. na linha de abate de suínos tem fundamental importância para o entendimento da epidemiologia deste agente e posterior melhoria no controle higiênico-sanitário, com conseqüente oferecimento ao consumidor de um produto de melhor qualidade. O presente trabalho teve como objetivo comparar o método tradicional de isolamento com o teste imunoenzimático (Assurance Salmonella EIA Gold - BioControl) a partir de amostras de fezes, linfonodos mesentéricos e carcaças de suínos abatidos no estado de São Paulo. Foram analisadas 92 amostras de fezes, 92 de linfonodos mesentéricos e 91 de suabes de carcaça. O teste imunoenzimático apresentou positividade de: fezes - 18,47% (17), linfonodos mesentéricos - 17,39% (16) e "swabs" de carcaça - 12,08% (11). Ao isolamento, foram observadas porcentagens de positivos em: fezes - 13,04% (12), linfonodos mesentéricos - 10,86% (10) e "swabs" de carcaça - 2,19% (2). A concordância entre os resultados obtidos através dos dois métodos foi fraca. O teste imunoenzimático se mostrou mais eficiente na pesquisa direta do agente quando comparado ao isolamento bacteriano, o que pode ser justificado pela alta sensibilidade das técnicas imunoenzimáticas e pela dependência da viabilidade das estirpes bacterianas para que as mesmas sejam isoladas em meios de cultura. A necessidade de métodos mais rápidos e menos laboriosos de detecção tem levado a avanços significativos no desenvolvimento de pesquisas e comercialização de kits de diagnóstico baseados em técnicas sorológicas, imunoabsorbância enzimática e hibridização de ácidos nucléicos. / Microorganisms of the Salmonella genera are eliminated in major number by occasion of the slaughter, in function of the stress that the animals are submitted for the transport of the farm to the slaughterhouse and for the reassemblage previous to the slaughter. For this reason, the study of the presence of Salmonella spp. in swine line of slaughter has fundamental importance for the understanding of epidemiology of this agent and subsequent improvement in the hygienic-sanitarium control, with consequent offer to the consumer of a product with better quality. The present study had as objective to compare the traditional method for isolation with imunoenzymatic assay (Assurance Salmonella EIA Gold - BioControl) from faeces samples, mesenteric lynfh nods and carcasses of slaughtered swine in São Paulo State. Ninety two faeces samples, 92 mesenteric lynfh nods and 91 carcass swabs were analyzed. The imunoenzymatic assay presented positivity of: faeces - 18,47% (17/92), mesenterics lynfh nods - 17,39% (16/92) and "swabs" of carcass -12,08% (11/91). The isolation showed: faeces - 13,04% (12/92) of positives samples, mesenteric lynfh nods - 10,86% (10/92) of positive samples and "swabs" of carcass - 2,19% (2/91) of positive samples. The agreement among the results obtained by the two methods was weak. The imunoenzymatic assay was shown more efficient when compared to the bacterial isolation, what can be justified for the high sensibility of imunoenzymatics techniques and the dependence of the bacterial sample viability for the isolation. The need of faster and less laborious methods of detection has been taking to significant progresses in the development of researches and commercialization of diagnosis kits based on sorological techniques, enzymatic immunoabsorbent and nucleic acid hibridization.
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Avaliação de fatores associados à invasão, migração celular e transformação maligna em mulheres com endometriose profunda / Evaluation of factors related to invasion, cell migration and malignant transformation in women with deep endometriosis

Borrelli, Giuliano Moysés 22 September 2015 (has links)
INTRODUÇÃO: A endometriose é uma doença crônica de natureza benigna e de alta prevalência, definida pela presença de tecido endometrial fora da cavidade uterina. Dentre os principais sintomas, destacam-se a dor pélvica crônica, dismenorreia e infertilidade. Clinicamente, apresenta-se de três formas distintas: endometriose peritoneal ou superficial, endometriose ovariana - endometrioma - e endometriose profunda (EP). A EP apresenta um padrão de comportamento semelhante ao das doenças malignas, com capacidade de crescimento infiltrativo e destrutivo em diferentes sítios. Lesões endometrióticas já foram identificadas em linfonodos pélvicos, evidenciando a disseminação linfática das células endometrióticas. Em neoplasias malignas, as quimiocinas e seus receptores desempenham papel soberano no processo de metástase e na disseminação linfática das células tumorais. OBJETIVOS: 1) avaliar a expressão das quimiocinas que no câncer estão relacionadas ao processo de metástase - CXCL12-CXCR4, CCL19/CCL21-CCR7 - na EP do compartimento posterior da pelve e nos respectivos linfonodos-sentinela (LS); 2) avaliar a concentração dessas quimiocinas no líquido peritoneal (LP) de pacientes com e sem endometriose; 3) avaliar a expressão da proteína BAF250a, relacionada à transformação maligna, na endometriose, com ênfase na EP do compartimento posterior da pelve. MÉTODOS: 123 pacientes foram incluídas neste estudo. Nós realizamos a coloração imuno-histoquímica para avaliar a expressão das quimiocinas - ligantes e receptores - nas lesões de EP retovaginal/do compartimento posterior da pelve (n=27), nos respectivos LS (n=27) e no endométrio de pacientes-controle sem endometriose (n=20); a concentração das quimiocinas no LP foi avaliada por meio da tecnologia multiplex - Luminex® xMAP® Technology - em um subgrupo de pacientes com (n=36) e sem (n=27) endometriose; a possibilidade de transformação maligna também foi avaliada por meio da imuno-histoquímica para analisar a expressão da proteína BAF250a dentre as lesões de endometriose - EP retovaginal (n=30), lesões de endometriose nos LS (n=7), endometriose ovariana (n=20), sarcoma do estroma endometrial extragenital (SEEE) de intestino (n=2) e no endométrio de pacientes sem endometriose (n=20). RESULTADOS: o padrão de coloração IHQ das quimiocinas relacionadas à metástase no câncer foi caracterizado pela primeira vez na EP do compartimento posterior da pelve e nas lesões de endometriose acometendo os LS; a expressão de CXCR4 foi diretamente relacionada ao tamanho da lesão de EP; CCL19, CCL2 e CXCL8 apresentaram concentrações no LP estatisticamente maiores em mulheres com endometriose comparadas aos controles sem doença e a associação delas aumentou a probabilidade de identificar pacientes com endometriose; além disso, nós identificamos a perda clonal da expressão da BAF250a em 36% (9/25) dos casos de EP, 40% (2/5) das lesões de endometriose nos LS, 30% (6/20) dos endometriomas e em 25% (5/20) no endométrio tópico das pacientes-controle. CONCLUSÕES: quimiocinas parecem estar envolvidas no mecanismo de disseminação da endometriose e algumas mostraram potencial para serem utilizadas como marcadores da doença; a perda clonal da expressão da proteína BAF250a na EP possa talvez representar um marcador de risco para transformação maligna nessas lesões. O valor desses achados precisa ser ainda esclarecido em futuras análises / INTRODUCTION: Endometriosis is a chronic disease of benign nature and of high prevalence, defined by the presence of endometrial tissue outside the uterine cavity. Among the main symptoms are highlighted chronic pelvic pain, dysmenorrhea and infertility; clinically, it may appear in three distinct ways: peritoneal endometriosis, ovarian endometriosis - endometriomas - and deep infiltrating endometriosis (DIE). DIE presents a behavioral pattern in many ways similar to that of malignancies, as capacity of infiltrative and destructive growth in different sites. Endometriotic lesions have already been identified in pelvic lymph nodes, showing the possibility of lymphatic dissemination of endometriotic cells. In malignancies, chemokines play a sovereign role in the process of metastasis and lymphatic spread of tumor cells. OBJECTIVES: 1) to evaluate the expression of cancer-related chemokines - CXCL12-CXCR4, CCL19/CCL21-CCR7 - in rectovaginal DIE (or endometriosis of the posterior compartment of the pelvis) and the respective pelvic sentinel lymph node (PSLN); 2) to evaluate the concentration levels of those chemokines in the peritoneal fluid (PF) of patients with and without endometriosis; 3) to evaluate the expression of protein BAF250a, related to malignant transformation, in endometriosis, with emphasis in rectovaginal DIE. METHODS: 123 patients were enrolled in this study. We performed immunohistochemical staining to assess the expression of all chemokines - ligands and receptors - in rectovaginal DIE (n=27), PSLN (n=27) and eutopic endometrium (EE) from patients without endometriosis as controls (n=20); chemokine concentration in the PF was assessed with multiplexing technology - Luminex® x-MAP® Technology - in a subgroup of patients with (n=36) and without (n=27) endometriosis; the possibility of malignant transformation was also assessed by means of immunohistochemistry to evaluate the expression of BAF250a protein among endometriosis lesions - rectovaginal DIE (n=30), compromised PSLN (n=7), ovarian endometriosis (n=20), extragenital endometrial stromal sarcoma (EESS) affecting the bowel (n=2) and EE from controls without the disease (n=20). RESULTS: the staining pattern of cancer metastasis-related chemokines was characterized for the first time in rectovaginal DIE and lesions compromising the PSLN; CXCR4 expression was directly correlated with the size of the DIE lesions; CCL19, CCL2 and CXCL8 presented higher statistically significant PF concentrations in women with endometriosis compared with controls and their association improved the likelihood of identifying patients with endometriosis; furthermore, we identified the clonal loss of BAF250a expression in 36% (9/25) of DIE, 40% (2/5) of endometriotic lesions in the PSLN, 30% (6/20) of endometriomas and in 25% (5/20) of EE from controls. CONCLUSIONS: chemokines might be involved in the mechanism of dissemination of endometriosis and some have shown potential to be used as markers of the disease; clonal loss of protein BAF250a in DIE might represent a marker for malignant transformation in these lesions. The value of these findings needs to be clarified in further analysis
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Prevalência de doenças oportunistas em biópsias de linfonodos periféricos de pacientes com infecção pelo HIV

Ramos, Carina Guedes January 2010 (has links)
Linfadenopatia pode estar presente em qualquer fase da infecção pelo HIV a apresenta uma variedade de diagnósticos diferenciais possíveis, desde manifestações secundárias ao próprio HIV até doenças oportunistas ou neoplasias. Foi realizado um estudo de corte transversal de pacientes que realizaram biópsias de linfonodo periférico no Hospital de Clínicas de Porto Alegre entre Janeiro de 2004 a Dezembro de 2008. Foram realizadas 210 biópsias, 131 (61,9%) pacientes eram do sexo masculino, a mediana da idade foi 36 (18-74) anos e da contagem de CD4 149 (1-756) cels/mm3. Cento e seis (50,5%) biópsias foram realizadas na região cervical. Os diagnósticos mais prevalentes incluíram micobacteriose 105 casos (50,2%) sendo que mais de 90% dos casos foram tuberculose; hiperplasia reacional (HR) 48 casos (22,7%), linfoma 19 casos (9,0%) e micoses sistêmicas 12 casos (5,7%) que incluíram a histoplasmose, paracoccidioidomicose e criptococose. Esse estudo demonstra que a biópsia de linfonodos periféricos em pacientes com infecção pelo HIV é uma importante ferramenta no diagnóstico de doenças oportunistas no nosso meio. / Peripheral lymphadenopathy is commonly present in HIV- infected patients and has a wide spectrum of differential diagnoses. We performed a cross-sectional study of peripheral lymph node biopsies performed from 2004 to 2008 in HIV patients assisted in a public hospital in Southern Brazil. Two hundred and ten biopsies were performed, 131(61.9%) patients were male, median of age was 36 years old with a mean of lymphocyte CD4 count of 149 (1-756) cells/mm3. Most of biopsies were performed in the cervical site 106 (50.5%). The most prevalent diagnosis were mycobacteriosis 105 (50.2%), more than 90% was tuberculosis; reactive follicular hyperplasia 48 (22.7%); lymphoma 19 (9.0%); systemic mycosis 12 (5.7%), including histoplasmosis, paracoccidioidomycosis and cryptococcosis. Peripheral lymph node biopsy is a useful tool to diagnose opportunistic diseases such as mycobacteriosis, HIV related malignancies and invasive fungal infections in HIV-infected patients.
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Prevalência de doenças oportunistas em biópsias de linfonodos periféricos de pacientes com infecção pelo HIV

Ramos, Carina Guedes January 2010 (has links)
Linfadenopatia pode estar presente em qualquer fase da infecção pelo HIV a apresenta uma variedade de diagnósticos diferenciais possíveis, desde manifestações secundárias ao próprio HIV até doenças oportunistas ou neoplasias. Foi realizado um estudo de corte transversal de pacientes que realizaram biópsias de linfonodo periférico no Hospital de Clínicas de Porto Alegre entre Janeiro de 2004 a Dezembro de 2008. Foram realizadas 210 biópsias, 131 (61,9%) pacientes eram do sexo masculino, a mediana da idade foi 36 (18-74) anos e da contagem de CD4 149 (1-756) cels/mm3. Cento e seis (50,5%) biópsias foram realizadas na região cervical. Os diagnósticos mais prevalentes incluíram micobacteriose 105 casos (50,2%) sendo que mais de 90% dos casos foram tuberculose; hiperplasia reacional (HR) 48 casos (22,7%), linfoma 19 casos (9,0%) e micoses sistêmicas 12 casos (5,7%) que incluíram a histoplasmose, paracoccidioidomicose e criptococose. Esse estudo demonstra que a biópsia de linfonodos periféricos em pacientes com infecção pelo HIV é uma importante ferramenta no diagnóstico de doenças oportunistas no nosso meio. / Peripheral lymphadenopathy is commonly present in HIV- infected patients and has a wide spectrum of differential diagnoses. We performed a cross-sectional study of peripheral lymph node biopsies performed from 2004 to 2008 in HIV patients assisted in a public hospital in Southern Brazil. Two hundred and ten biopsies were performed, 131(61.9%) patients were male, median of age was 36 years old with a mean of lymphocyte CD4 count of 149 (1-756) cells/mm3. Most of biopsies were performed in the cervical site 106 (50.5%). The most prevalent diagnosis were mycobacteriosis 105 (50.2%), more than 90% was tuberculosis; reactive follicular hyperplasia 48 (22.7%); lymphoma 19 (9.0%); systemic mycosis 12 (5.7%), including histoplasmosis, paracoccidioidomycosis and cryptococcosis. Peripheral lymph node biopsy is a useful tool to diagnose opportunistic diseases such as mycobacteriosis, HIV related malignancies and invasive fungal infections in HIV-infected patients.
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Detecção de Salmonella spp. em amostras de fezes, linfonodos e carcaças de suínos no momento do abate / Detection of Salmonella spp. in samples of faeces, lyinfh nods and carcasses of swine in the moment of the slaughter

Solange Rosa Teixeira 15 February 2007 (has links)
Microrganismos do gênero Salmonella são eliminados em maior número por ocasião do abate, em função do estresse a que são submetidos os animais, pelo transporte da granja ao frigorífico e pelo reagrupamento anterior ao abate. Por este motivo, o estudo da presença de Salmonella spp. na linha de abate de suínos tem fundamental importância para o entendimento da epidemiologia deste agente e posterior melhoria no controle higiênico-sanitário, com conseqüente oferecimento ao consumidor de um produto de melhor qualidade. O presente trabalho teve como objetivo comparar o método tradicional de isolamento com o teste imunoenzimático (Assurance Salmonella EIA Gold - BioControl) a partir de amostras de fezes, linfonodos mesentéricos e carcaças de suínos abatidos no estado de São Paulo. Foram analisadas 92 amostras de fezes, 92 de linfonodos mesentéricos e 91 de suabes de carcaça. O teste imunoenzimático apresentou positividade de: fezes - 18,47% (17), linfonodos mesentéricos - 17,39% (16) e "swabs" de carcaça - 12,08% (11). Ao isolamento, foram observadas porcentagens de positivos em: fezes - 13,04% (12), linfonodos mesentéricos - 10,86% (10) e "swabs" de carcaça - 2,19% (2). A concordância entre os resultados obtidos através dos dois métodos foi fraca. O teste imunoenzimático se mostrou mais eficiente na pesquisa direta do agente quando comparado ao isolamento bacteriano, o que pode ser justificado pela alta sensibilidade das técnicas imunoenzimáticas e pela dependência da viabilidade das estirpes bacterianas para que as mesmas sejam isoladas em meios de cultura. A necessidade de métodos mais rápidos e menos laboriosos de detecção tem levado a avanços significativos no desenvolvimento de pesquisas e comercialização de kits de diagnóstico baseados em técnicas sorológicas, imunoabsorbância enzimática e hibridização de ácidos nucléicos. / Microorganisms of the Salmonella genera are eliminated in major number by occasion of the slaughter, in function of the stress that the animals are submitted for the transport of the farm to the slaughterhouse and for the reassemblage previous to the slaughter. For this reason, the study of the presence of Salmonella spp. in swine line of slaughter has fundamental importance for the understanding of epidemiology of this agent and subsequent improvement in the hygienic-sanitarium control, with consequent offer to the consumer of a product with better quality. The present study had as objective to compare the traditional method for isolation with imunoenzymatic assay (Assurance Salmonella EIA Gold - BioControl) from faeces samples, mesenteric lynfh nods and carcasses of slaughtered swine in São Paulo State. Ninety two faeces samples, 92 mesenteric lynfh nods and 91 carcass swabs were analyzed. The imunoenzymatic assay presented positivity of: faeces - 18,47% (17/92), mesenterics lynfh nods - 17,39% (16/92) and "swabs" of carcass -12,08% (11/91). The isolation showed: faeces - 13,04% (12/92) of positives samples, mesenteric lynfh nods - 10,86% (10/92) of positive samples and "swabs" of carcass - 2,19% (2/91) of positive samples. The agreement among the results obtained by the two methods was weak. The imunoenzymatic assay was shown more efficient when compared to the bacterial isolation, what can be justified for the high sensibility of imunoenzymatics techniques and the dependence of the bacterial sample viability for the isolation. The need of faster and less laborious methods of detection has been taking to significant progresses in the development of researches and commercialization of diagnosis kits based on sorological techniques, enzymatic immunoabsorbent and nucleic acid hibridization.
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Associação da expressão do Ki67 e linfonodos axilares metastáticos com a sobrevida livre de doença no câncer de mama invasivo

PAIVA, Carina Batista 23 February 2016 (has links)
Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2017-08-09T14:09:09Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Dissertaçao_Carina_Paiva_PPG_MESTRADO_PATOLOGIA_TURMA2014-2016.pdf: 7682349 bytes, checksum: 18a47d04a840b2356f9461b6b6d72f96 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-09T14:09:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Dissertaçao_Carina_Paiva_PPG_MESTRADO_PATOLOGIA_TURMA2014-2016.pdf: 7682349 bytes, checksum: 18a47d04a840b2356f9461b6b6d72f96 (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / Marcadores biológicos são requeridos para estimar o risco de recorrência da doença em mulheres com câncer de mama. O Ki67 é um marcador de proliferação celular e seu valor preditivo e prognóstico tem sido estudado como um importante biomarcador de rotina na prática clínica. Nosso estudo teve como objetivo avaliar a relação entre a intensidade da expressão do Ki-67 e o envolvimento de linfonodos axilares com metástases com a sobrevida livre de doença em mulheres com câncer de mama. Esse estudo foi retrospectivo e 134 pacientes foram elegíveis para o estudo. A associação entre os escores do Ki67 e outros fatores prognósticos, tais como tamanho do tumor, grau, status dos linfonodos axilares, invasão perineural e linfovascular, biomarcadores RE, RPg e HER-2 foram avaliados, além da análise de sobrevivência. Dos 134 pacientes, 53 tiveram recorrência da doença. O valor da mediana dos escores do Ki67 foi de 30% de todos os pacientes. Um total de 78 (58,25) dos pacientes tiverm escores alto do Ki67. A associação estatisticamente significante foi entre os escores altos do Ki67 com o grau histológico (p<0.001), subtipos moleculares (p<0.001), receptores de estrógeno (p=0.023) e receptores de progesterona (p=0.001). A sobrevida livre de doença em indivíduos com Ki67 alto e axila clinicamente negativa apresentou um menor tempo em meses em comparação com os indivíduos com escores do Ki67 baixo (p=0.049). / Biological markers are required to estimate the risk of disease recurrence in women with breast cancer. The Ki 67 is a cell proliferation marker and its predictive and prognostic value has been studied as an important marker in routine clinical practice. Our study aimed to evaluate the relationship between the intensity of Ki67 expression and involvement of axillary lymph nodes with metastases to the disease-free survival in women with breast cancer. This was a retrospective study and 134 patients were eligible for the study. The association between the scores of Ki67 and other prognostic factors such as tumor size, grade, status of axillary lymph nodes, perineural invasion and lymphovascular, in addition to biomarkers ER, PgR, and HER2 were evaluated, as well as survival analysis. Of the 134 patients, 53 have had recurrence of disease. The median value of Ki scores 67 was 30% of all patients. A total of 78 (58.25) of the patients had high scores Ki 67. A statistically significant association was between high scores of Ki67 with the histological grade, molecular subtypes of progesterone receptors estrogen receptors. A statistically significant association was between high scores of Ki67 with the histological grade (p <0.001), molecular subtypes (p <0.001), estrogen receptor (p = 0.023) and progesterone receptors (p = 0.001). The disease-free survival in patients with high Ki67 and clinically negative axilla had a shorter time in months compared to individuals with low Ki67 scores (p = 0.049).
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Identificar e isolar células reticulares fibroblásticas em linfonodos humanos / Identify and isolate fibroblastic reticular cells in human lymph nodes

Heliene Gonçalves Alvarenga 14 April 2015 (has links)
Células reticulares fibroblásticas (FRCs, gp38+ e CD31-) e células duplo negativas (DNCs, gp38- e CD31-) são células estromais encontradas em órgãos linfoides secundários, como linfonodos. Enquanto as FRCs têm sido amplamente estudadas, pouco se sabe ainda sobre DNCs. Apesar da função estrutural das FRCs nos linfonodos já estar bem estabelecida, estudos recentes indicam que as FRCs também desempenham um papel fundamental em processos imunológicos, por exemplo, migração celular, ativação e qualidade da resposta imune, além da participação na tolerância periférica. Outra célula estromal em constante estudo são as células-tronco mesenquimais (CTMs), principalmente encontradas na medula óssea. Estas células compartilham similaridades, como por exemplo; são células estromais encontradas em órgãos linfoides, apresentam morfologia e características semelhantes quando cultivadas in vitro e estão envolvidas na resposta imune por mecanismos semelhantes. As CTMs são provenientes de um órgão linfoide primário, cuja função principal não está relacionada à resposta imunológica, entretanto, de acordo com inúmeros trabalhos, estas células possuem capacidade de interferir na ativação de várias células do sistema imunológico. Portanto, nossa hipótese é de que as FRCs e DNCs, que se encontram em um órgão linfoide secundário, cuja função principal remete a resposta imunológica, apresentem também um papel regulador, descrito na literatura como tolerância periférica e contração de uma resposta imunológica já estabelecida. Em nosso estudo mostramos que FRCs e DNCs foram isoladas a partir de linfonodos humanos e devidamente caraterizadas. Evidenciamos que FRCs e DNCs atendem todos os critérios mínimos propostos pela sociedade internacional de terapia celular para serem consideradas células-tronco estromais. Além disso, mostramos que FRCs e DNCs influênciam a proliferação e a expressão de moléculas de homing em linfócitos alogênicos in vitro. Portanto, contribuimos de forma inédita para o entendimento funcional das FRCs e DNCs, visto que estudos em humanos envolvendo estas células são escassos / Fibroblastic reticular cells (FRCs, gp38+ e CD31-) and double-negative cells (DNCs, gp38- e CD31-) are stromal cells found in secondary lymphoid organs, such as lymph nodes. While the FRCs has been widely studied, little is known about DNCs. Despite the structural function of FRCs on lymph nodes is well established, recent studies indicate that FRCs also play a key role in immunological processes, for example, cell migration, immune response activation and quality, beyond their involvement in peripheral tolerance. Another stromal cell type in constant study are mesenchymal stem cells (MSCs), mainly found in bone marrow. These cells share similarities with FRCs and DNCs, for example; they are estromal cells found in lymphoid organs, they present similar morphology and characteristics when cultured in vitro and they are involved in the immune response by similar mechanisms. MSCs are derived from a primary lymphoid organ which the major function is not related to immune response, but according to numerous studies these cells have the capacity of the interfere on activation of various immune cells. Consequently, our hypothesis is that FRCs and DNCs, usually found in secondary lymphoid organ, display immune regulatory roles, which were described in the literature as peripheral tolerance and immune response contraction. In our study we showed that FRCs and DNCs were isolated from human lymph nodes and adequately characterized. We evidenced that FRCs and DNCs meet all minimum criteria proposed by the International Society of Cell Therapy to be considerate a stromal stem cell. Therefore, we contributed in an unpublished manner to the functional understanding of FRCs and DNCs, since human studies involving these cells are scarce

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