Pour améliorer la compétitivité de l'industrie porcine, le porc canadien doit être attrayant et présenter un avantage unique qui permettrait à cette industrie de se démarquer des autres produits alimentaires. La carnosine pourrait offrir un tel avantage et ainsi aider l'industrie porcine à obtenir une plus grande part de marché, tout en modifiant les perceptions négatives liées à la consommation de viande. La carnosine fut, en 1900, le premier peptide jamais isolé à partir de matériel biologique. Chez l'homme, certaines propriétés curatives ont été associées à la consommation de carnosine. Ces propriétés peuvent être expliquées, en partie, par la capacité de la carnosine à inhiber la glycation non enzymatique des protéines et leurs agrégations au cours du vieillissement. Mais son potentiel d'améliorer la qualité de la viande de porc est tout aussi intéressant à développer. En effet, la carnosine musculaire agirait comme tampon de pH, ce qui permettrait de ralentir l’acidification dans le muscle squelettique. La carnosine présente également des propriétés antioxydantes, ce qui peut aussi contribuer à améliorer la qualité de la viande. Ce projet de maîtrise fait partie d’un programme de recherche plus large ayant pour objectif d'augmenter la teneur en carnosine musculaire chez le porc en croissance afin de différencier et de donner une valeur ajoutée au porc canadien. Dans cette étude, nous avons supposé qu’un contenu élevé en carnosine musculaire serait associé à de meilleurs paramètres de qualité de la viande chez le porc en croissance et que l'expression des gènes liés au métabolisme de la carnosine serait modulée chez les porcs ayant différents niveaux de carnosine musculaire, de même que dans les muscles de porcs de différentes races. En second lieu, nous avons supposé que des polymorphismes d'un seul nucléotide (SNP), observés sur les gènes liés au métabolisme de la carnosine, pourraient aussi affecter le dépôt de carnosine musculaire chez le porc. Un total de 282 porcs de race pure a été utilisé pour ce projet, incluant 85 Duroc, 92 Landrace et 105 Yorkshire, lesquels provenaient de 16 producteurs différents à travers le Canada. Ces porcs sont entrés à la station de Deschambault (Québec, Canada) entre 10 à 16 jours d’âge, ont tous été élevés dans des conditions similaires et abattus à 120 kg de poids vif. Les carcasses ont été suivies individuellement à l’abattoir pour permettre l’échantillonnage du muscle longissimus thoracis immédiatement après la mort de l’animal et de prendre les mesures de qualité de la viande, 24 h postmortem. Les valeurs de qualité de la viande et de carnosine musculaire étaient disponibles au début de ce projet de maîtrise (projet de recherche antérieur). Dans un premier temps, les niveaux d’expression génique de gènes du métabolisme de la carnosine ont été mesurés par la méthode de PCR en temps réel. Les gènes sélectionnés incluent des enzymes (ABAT, 4-aminobutyrate aminotransferase; CARNS1, carnosine synthase 1; CNDP1, CNDP dipeptidase 1; CNDP2, CNDP dipeptidase 2; HDC, histidine decarboxylase) et des transporteurs (SLC6A6, solute carrier family 6, member 6; SLC15A1, solute carrier family 15, member 1; SLC15A2, solute carrier family 15, member 2; SLC15A3, solute carrier family 15, member 3; SLC15A4, solute carrier family 15, member 4; SLC36A1, solute carrier family 36, member 1) reliés au métabolisme de la carnosine. Les gènes ABAT, CDNP1, HDC, SLC15A1 et SLC15A2 ont été abandonnés puisque leurs transcrits étaient indétectables ou présents à de très faibles quantités. En ce qui concerne les autres gènes, l’analyse des résultats a révélé un effet de race pour l’expression génique de CARNS1, CNDP2 et SLC36A1, les valeurs les plus élevées étant observées chez les porcs de race Duroc, lesquels présentent également des niveaux plus élevés en carnosine musculaire. Pour chaque race, les animaux ont été regroupés en trois catégories selon leur teneur en carnosine musculaire (Bas, Moyen et Élevé). Pour les Duroc, l'abondance en ARNm de la CARNS1 est plus élevée pour le groupe Bas que pour les groupes Moyen et Élevé en carnosine. Ce résultat laisse croire à un possible rétrocontrôle de la carnosine musculaire sur la transcription de la CARNS1, l’enzyme responsable de sa synthèse. Pour les gènes SLC15A3 et SLC15A4, nous observons des niveaux d’ARNm plus élevés chez les animaux à haute teneur en carnosine. Ainsi, des niveaux plus élevés de carnosine musculaire pourraient entrainer une augmentation de la transcription de SLC15A3 et SLC15A4, deux gènes impliqués dans le transport de la carnosine. Dans un deuxième temps, l’effet de la quantité de carnosine musculaire sur différents caractères de qualité de la viande a aussi été étudié. Ces résultats nous démontrent que les porcs ayant des niveaux de carnosine élevés, présentent également une meilleure qualité de la viande, tel que démontré par un pH à 24h plus élevé, une meilleure capacité de rétention d’eau et une diminution des indices de couleur b* (couleur jaune) et L* (luminance).Enfin, une recherche de polymorphismes d’ADN a aussi été effectuée sur quatre gènes cibles (CARNS1, SLC6A6, SLC15A3 et SLC15A4) ayant un fort potentiel d’affecter les niveaux de carnosine musculaire. Les séquences codantes et 3’UTR de chacun de ces gènes ont tout d’abord été séquencées sur une population restreinte de 28 Duroc, 27 Landrace et 30 Yorkshire, incluant des porcs présentant de faibles et de hauts niveaux de carnosine musculaire. Un total de 27 SNPs ont été identifiés pour ces quatre gènes. De ce nombre, quatre SNPs furent sélectionnés pour effectuer le génotypage de la population entière (n = 590). De ces SNPs, deux entrainent un changement d’acide aminé dans le gène SLC15A4 (SNP c.658A>G : Ile220Val; SNP c.818G>A : Ser273Asn)) et deux autres SNPs dans le gène SLC15A3 se retrouvent sur un site reconnu par un micro-ARN (c.*35C>T and c.*52C>T). Des analyses d’association ont ensuite été effectuées afin de déterminer l’effet des différents SNPs et diplotypes sur les caractères de qualité de la viande et sur les niveaux de carnosine et d’ansérine (analogue méthylé de la carnosine). Nos résultats démontrent qu’une sélection en faveur du génotype c.658AA ou du diplotype AA/GG pour le gène SLC15A4 résulterait en une augmentation de carnosine musculaire et une amélioration de certains paramètres de qualité de la viande tels que la couleur, la rétention d’eau et le pH à 24 h. Collectivement ces résultats montrent que les porcs présentant de hauts niveaux de carnosine musculaire présentent également une meilleure qualité de la viande. De plus, les niveaux d’expression de certains gènes du métabolisme de la carnosine sont modulés selon la race de porc (influence génétique possible) et aussi selon le contenu de carnosine musculaire. Enfin, une amélioration générale de la qualité de la viande serait possible par la sélection d’allèles favorables du gène SLC15A4. Cependant, les fréquences observées pour les allèles mineures du SNP c.658A>G (i.e. Duroc, 0.01; Landrace, 0.09) suggèrent une amélioration génétique limitée chez les Duroc et les Landrace.

Resumo: No presente trabalho, avaliou-se o efeito do processo de maturação na qualidade da carne do músculo Longissimus de 35 tourinhos da raça Nelore confinados por 96 dias e abatidos com peso de 532,17 ± 30,25kg e 24 meses de idade. Os animais foram alimentados com uma dieta controle sem a adição de óleo e outras quatro dietas contendo diferentes fontes de óleo (soja ou linhaça) protegido ou não da degradação ruminal. Após o abate e 24 horas de resfriamento foram retirados 3 bifes de 2,5cm de espessura entre a 12a e 13a costelas do músculo Longissimus, posteriormente embalados à vácuo e maturados em estufa B.O.D. à temperatura de 2oC durante 7, 14 e 21 dias. Em seguida, foram analisadas as seguintes características: força de cisalhamento, ph, cor, perdas na maturação e composição química da carne assada. Após liofilização, o extrato etéreo foi extraído, metilado e as leituras realizadas por cromatografia gasosa. O delineamento estatístico utilizado foi em blocos casualizados, sendo 5 tratamentos, em 7 blocos e utilizadas 4 medidas repetidas no tempo. As variáveis foram avaliadas por meio de análise de variância e teste t Student à 5% de probabilidade e para as características sensoriais da carne foi utilizado o teste não paramétrico de Kruskal-Wallis. Houve efeito significativo para as variáveis matéria seca, extrato etéreo e matéria mineral. A força de cisalhamento apresentou diferenças entre os grupos de bifes maturados, (5,97; 4,31; 3,25 e 2,96kgf/cm2, para 0, 7, 14 e 21 dias de maturação, respectivamente), sendo que o tempo 14 e 21 foram mais macios que o tempo 7, e este, mais macio que o tempo 0. O ph apresentou diferença entre a carne in natura e os períodos de maturação. Houve efeito significativo para a maturação das variáveis luminosidade, intensidade da cor vermelha e intensidade da cor amarela. As perdas por exsudação na maturação ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In this study, we assess the effect of the ageing process in the meat quality of Longissimus muscles from 35 Nellore bulls young bulls confined for 96 days and slaughtered weighing 532.17 ± 30.25 kg and 24 months of age. The animals were fed with five different diets: the first one was a control diet, without oil and the other four diets containing different oil sources (soy or flaxseed) protected or not from ruminal degradation. After slaughter and 24 hours of cooling, 3 samples with 2.5 cm thickness were removed between the 12th and 13th ribs of Longissimus muscles and subsequently vacuum packaged and aged in an environmental chamber at a temperature of 2o C for 7, 14 and 21 days. We assess the characteristics: shear force, pH, color, ageing losses, chemical composition and fatty acids of meat. The fatty acids were assess by gas chromatography. Variables were evaluated by analysis of variance and Student t test at 5% probability and the sensory characteristics of meat was used nonparametric Kruskal-Wallis test. Shear force differed between the ageing groups, (5.97; 4.31, 3.25 and 2.96 Kgf/cm2 to 0, 7, 14 and 21 days) the period 14 and 21 were softer than the period 7. The pH was different between the fresh beef and the other periods. There was a significant effect on the variable lightness, red color intensity and intensity of yellow color. The losses were larger as the period of ageing increased, and the period of 21 days showed 5.58% of losses. The sensory evaluation showed the difference to variable smoothness for the period of 7 days.. There was a significant effect on concentration of myristic acids (C14: 0), miristoleico \ (C14: 1), pentadecanoic (C15: 0), palmitic (C16: 0), palmitoleic (C16: 1) vacênico (C18: 1 n7) and oleic (C18: 1 n9). In contrast there was an increase in the levels of stearic (C18: 0), linoleic (C18: 2 n6) eicosenoic (C20: 1 n9), eicosadienoico (C20: 2) ... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Alexandre Amstalden Moraes Sampaio / Coorientador: Wignez Henrique / Banca: Hirasilva Borba / Banca: Alexandre Rodrigo Mendes Fernandes / Mestre

Two similarly managed trials were conducted to investigate serial ultrasound measures of body composition (longissimus muscle area (ULMA), 12th - rib fat thickness (UFAT), and percentage of intramuscular fat (UIMF)) early in the lives of feeder calves as they compared to carcass traits. Group 1 cattle were Charolais-sired by Brahman-British crossbred dams whereas Group 2 cattle were purebred Beefmaster. Both groups were fed at the same commercial feedlot (Graham Land and Cattle Co.) in Gonzales, Texas. In both data sets classifications were developed for ribeye area of Lower (less than 70.95 cm2, Middle (between 70.95 cm2 and 90.3 cm2) and Upper (over 90.3 cm2) based on a range that fit within the ribeye specifications of such branded beef programs as Certified Angus Beef and Nolan Ryan?s Tender Aged Beef. Differences among ribeye area and quality grade (Choice vs. Select) categories were evaluated for ultrasound and carcass traits. As reported previously, correlations between ultrasound measures and carcass traits became larger at times closer to harvest. In both sets of cattle, there were no differences in fat thickness or intramuscular fat at the ultrasound scan sessions or in these carcass traits due to ribeye area category. The same trend for quality grade classification was not seen across both groups of cattle however. In Group 1, there were no differences in early measures of body composition between carcass quality grade classes except for ultrasound fat thickness at weaning. However, in Group 2 cattle there were differences in ultrasound fat at times 1 and 2, IMF at time 1, and ribeye area at time 2 between cattle that graded choice verses those that graded select. Correlations between ultrasound measures of REA (r of .26 to .50) and ultrasound REA and carcass REA (r of .16 to .81) appeared to be lower in Group 1 vs. Group 2 (r of .55, and .64 to 81 respectively). Results from this project imply that changes in ribeye area will not automatically result in changes of marbling and vice versa. Furthermore, these results also show that ultrasound is useful to help predict beef carcass traits, but that early measures of body composition used alone do not explain a large portion of the variation in the carcass measures and specific methods should be developed by different biological cattle types.

Com o objetivo de caracterizar o crescimento de animais cruza Wagyu x Angus, 24 machos castrados e 23 fêmeas foram separados em: G1M (Grupo 1 Machos, com percentagem de gordura intramuscular inicial > 3,4%, n= 11), G2M (Grupo 2 Machos, com percentagem de gordura intramuscular inicial < 3,4%, n= 13), G1F (Grupo 1 Fêmeas, com percentagem de gordura intramuscular inicial > 3,9%, n= 12) e G2F (Grupo 2 Fêmeas, com percentagem de gordura intramuscular inicial < 3,9%, n= 11) e avaliados com medidas seriadas de ultrassom ajustadas a cada 56 dias. Para estimar as características de carcaça foram utilizados 21 machos castrados, avaliados por ultrassom 3 a 8 dias pré abate e posteriormente na carcaça com 48 horas de resfriamento. O grupo G2M apresentou maior deposição de gordura subcutânea por ultrassom (EGSUS) em seis períodos de avaliação quando comparado ao G1M, apresentando uma taxa de deposição de gordura subcutânea distinta entre grupos de 0.69mm/100 dias e 0.65mm/100 dias para o G2M e G1M, respectivamente. Somente foi possível evidenciar diferença significativa na primeira avaliação de percentagem de gordura intramuscular (PGIMUS) entre G1M e G2M, ambos apresentaram crescimento linear com taxa de aumento de 0.28%/100 dias, foi possível evidenciar que ocorreram aumentos acima de 0.1% da PGIMUS a partir dos 280 dias do período de avaliação, quando o ganho médio diário (GMD) de peso vivo ficou acima de 0.650 kg/dia. A taxa de desenvolvimento da área do músculo longissimus (AOLUS) foi distinta entre os grupos de fêmeas, aumentando 3.8 cm2/100 dias e 3.4 cm2/100 dias para o G1F e G2F, respectivamente. Ocorreram diferenças significativas na PGIMUS somente nas quatro primeiras avaliações entre G1F e G2F. A correlação entre a área do músculo longissimus medida na carcaça (AOLC) e por ultrassom (AOLUS) foi de 0.93, para espessura de gordura subcutânea medida na carcaça (EGSC) e por ultrassom (EGSUS) foi de 0.86. A PGIMUS a desmama não afetou o crescimento do tecido muscular nos machos e adiposo nas fêmeas. As características gordura subcutânea no sítio anatômico da costela nos machos e AOLUS nas fêmeas apresentaram crescimento distinto com relação à PGIMUS a desmama. A ultrassonografia é uma tecnologia que pode ser utilizada para estimar o desenvolvimento tecidual da gordura e músculo com medidas repetidas no tempo. O peso vivo e o GMD afetaram a alteração do tecido muscular e adiposo durante o crescimento. / Aiming to characterize the growth crossbred Wagyu x Angus, 24 steers and 23 heifers were separated in: G1M (Group 1 Males, with initial percentage of intramuscular fat > 3,4%, n= 11), G2M (Group 1 Males, with initial percentage of intramuscular fat < 3,4%, n= 13), G1F (Group 1 Females with initial percentage of intramuscular fat > 3,9%, n= 12) e G2F (Group 2 Females, with initial of intramuscular fat percentage < 3,9%, n= 11) and evaluated with serial ultrasound measurements fitted every 56 days. To estimate carcass traits were used 21 steers, assessed by ultrasound 3 to 8 days pre slaughter and afterwards in the carcass after 48 hours of cooling. The G2M group showed higher deposition of ultrasound subcutaneous fat thickness (UFAT) in six periods of evaluation when compared to G1M, displaying a distinct subcutaneous fat deposition rate between groups of 0.69 mm/100 days and 0.65mm/100 days to G2M and G1M, respectively. Only possible to evidence a significant difference in the first evaluation of the ultrasound percentage of intramuscular fat (UPFAT) between G1M and G2M, both showed linear growth with an increase rate of 0.28%/100 days, it became clear that there were rises above 0.1% of UPFAT from 280 days of the evaluation period, when the average daily gain (ADG) of body weight was above 0.650 kg/day. The development rate of ultrasound longissimus muscle area (ULMA) was different between the groups of females, increasing 3.8 cm2/100 days and 3.4 cm2/100 days to the G1F and G2F, respectively. There were significant differences in the UPFAT in just the first four assessments between G1F and G2F. The corrections between carcass longissimus muscle area (CLMA) wit measured by ultrasound (ULMA) was 0.93 and carcass fat thickness (CFAT) whit fat thickness by ultrasound (UFAT) was 0.86. The UPFAT weaning did not affect the growth of muscle tissue in males and fat in females. Subcutaneous fat in the anatomical site of the rib in males and ULMA in females showed distinct growth compared to the UPFAT weaning. Ultrasonography is a technology that can be used to estimate the development of tissue fat and muscle with repeated measurements over time. The body weight and the ADG affected the change in muscle and adipose tissue during growth.

Submitted by MARCELO ESTREMOTE null (marcelo.do@hotmail.com) on 2016-03-28T11:08:49Z No. of bitstreams: 1 Dissertação 22-03 (corrigida)-docx.pdf: 713571 bytes, checksum: 989b8a9aa5d1883cd03b7d3899c15d6c (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-03-28T18:02:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 estremote_m_me_ilha.pdf: 713571 bytes, checksum: 989b8a9aa5d1883cd03b7d3899c15d6c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-28T18:02:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 estremote_m_me_ilha.pdf: 713571 bytes, checksum: 989b8a9aa5d1883cd03b7d3899c15d6c (MD5) Previous issue date: 2016-02-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo do trabalho foi verificar a influência de teores de concentrado na emissão de metano e de dióxido de carbono, no desempenho e digestibilidade de bovinos Guzerá terminados em confinamento. Foram utilizados trinta e seis bovinos da raça Guzerá, com peso médio de 464 kg e idade de 30 meses e alojados em baias individuais de 10m2 . O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com três tratamentos 30, 50 e 70% de concentrado na dieta e 12 repetições por tratamento para o desempenho e digestibilidade. Para obtenção dos dados referentes à produção de metano, pH e a degradação ruminal, o delineamento foi em blocos casualizados com 3 períodos de incubação totalizando 21 repetições por ingrediente. O ganho de peso diário foi de 0,99 kg, 1,33kg e 1,22kg respectivamente, para dieta com 30, 50 e 70%, evidenciando que houve diferença (P<0,01) entre os tratamentos. O consumo de matéria seca foi menor à medida que aumentou o nível de concentrado com médias de 11,04, 10,75 e 7,67 kg/dia respectivamente para dietas com 30, 50 e 70%. A melhor conversão alimentar foi observada no tratamento de 70% de concentrado (6,73%), a qual também apresentou melhor digestibilidade entre os tratamentos. A produção de metano na dieta com 50% de concentrado apresentou as maiores médias. Na produção de gases em 12 e 24 horas foram observados que níveis maiores de concentrado apresentaram maior nível de dióxido de carbono em relação ao metano. Sendo assim as dietas com 50 e 70% de concentrado apresentaram melhor desempenho; a dieta com 70% de concentrado apresentou menor produção de metano, maior digestibilidade, menor conversão alimentar e ganho de peso em relação as dietas dos demais tratamentos.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-08-21Bitstream added on 2014-06-13T20:54:00Z : No. of bitstreams: 1 giusti_j_me_jabo.pdf: 404389 bytes, checksum: 4ca4ff97dca68401b3e43806b72f5f85 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Todas as características de um organismo vivo são controladas pela expressão de genes específicos, e na qualidade da carne não é diferente. O presente estudo teve como objetivo correlacionar a expressão dos genes μ-Calpaína (CALP 1), m-Calpaína (CALP 2), Calpastatina (CAST), Tireoglobulina (TG), Diacilglicerol aciltransferase 1 (DGAT1) e a Leptina (LEP) com a qualidade da carne do Longissimus dorsi em dois grupos genéticos: Nelore (Bos indicus) e Canchim (5/8 de Bos taurus x 3/8 Bos indicus) em dois períodos (carne não maturada e com sete dias de maturação), e utilizá-la como marcador genético. Foram analisados 30 touros jovens, 15 Nelore e 15 Canchim, todos mantidos nas instalações do confinamento experimental da FMVZ-UNESP Botucatu, recebendo a mesma dieta e mesmo manejo. Alcançando peso de 370 kg e espessura de gordura de cobertura de 4 mm, foram abatidos e amostras do músculo Longissimus dorsi foram coletadas para análises de: lipídeos totais (LT), força de cisalhamento (FC), índice de fragmentação miofibrilar (MFI) e análise da expressão gênica por RT-qPCR. Entre as características de qualidade da carne, LT e MFI0 apresentaram diferença entre as raças (P<0,01), sendo MFI0 superior no Canchim e LT no Nelore. Quanto à expressão gênica, as CALPs não mostraram expressão diferencial entre os grupos (P>0,05), assim como DGAT1, TG e LEP. CAST foi mais expresso na raça Nelore (P<0,05). Quanto às correlações, foi observada apenas uma positiva entre DGAT1 e MFI0 (r=0,79, P<0,01) no Canchim. Diante dos resultados, sugere-se que a maior expressão de CAST no Nelore propiciou aos animais uma carne mais dura, quando comparados ao Canchim, e que a expressão gênica não pode ser usada como um marcador genético / All the features of a living organism are controlled by the expression of specific genes, and the quality of the meat is no different. The present study was performed to correlate gene expression μ-calpain (CALP 1), m-calpain (CALP 2), calpastatin (CAST), thyroglobulin (TG), Diacylglycerol acyltransferase 1 (DGTA1) and leptin (LEP) with the meat quality of Longissimus dorsi muscle in two genetic groups: Nellore (Bos indicus) and Canchim (5/8 Bos taurus x 3/8 Bos indicus) in two periods, and use it as a genetic marker. We analyzed 30 young bulls, 15 and 15 Canchim Nellore. The animals were kept on the installation of the experimental confinement FMVZ-UNESP-Botucatu, receiving the same diet and management. When reached a weight of approximately 370 kg and a subcutaneous fat thickness of 4 mm, they were slaughtered and samples of the Longissimus dorsi muscle were collected for analysis of the: total lipids (TL), shear force (SF), myofibrillar fragmentation index (MFI) and analysis of gene expression by RT-qPCR. Among the characteristics of meat quality, LT and MFI0 showed differences between breeds (P<0,01), higher MFI0 in Canchim and LT higher in Nellore. Regarding gene expression, the CALPs showed no differential expression between groups (P>0.05), as well as DGAT1, TG, and LEP. CAST was more expressed in Nellore (P<0.05). Regarding the correlation was only observed a positive relationship between DGAT1 and MFI0 (r = 0.79, P <0.01) in Canchim. Considering the results, it is suggested that the increased expression of CAST in Nellore animals led to a tougher meat compared to Canchim, and that gene expression can not be used as a genetic marker

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-25Bitstream added on 2014-06-13T19:16:09Z : No. of bitstreams: 1 pivaro_tm_me_jabo.pdf: 588445 bytes, checksum: 95df0e35e0500ea8feeb836651cb1172 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / No presente trabalho, avaliou-se o efeito do processo de maturação na qualidade da carne do músculo Longissimus de 35 tourinhos da raça Nelore confinados por 96 dias e abatidos com peso de 532,17 ± 30,25kg e 24 meses de idade. Os animais foram alimentados com uma dieta controle sem a adição de óleo e outras quatro dietas contendo diferentes fontes de óleo (soja ou linhaça) protegido ou não da degradação ruminal. Após o abate e 24 horas de resfriamento foram retirados 3 bifes de 2,5cm de espessura entre a 12a e 13a costelas do músculo Longissimus, posteriormente embalados à vácuo e maturados em estufa B.O.D. à temperatura de 2oC durante 7, 14 e 21 dias. Em seguida, foram analisadas as seguintes características: força de cisalhamento, ph, cor, perdas na maturação e composição química da carne assada. Após liofilização, o extrato etéreo foi extraído, metilado e as leituras realizadas por cromatografia gasosa. O delineamento estatístico utilizado foi em blocos casualizados, sendo 5 tratamentos, em 7 blocos e utilizadas 4 medidas repetidas no tempo. As variáveis foram avaliadas por meio de análise de variância e teste t Student à 5% de probabilidade e para as características sensoriais da carne foi utilizado o teste não paramétrico de Kruskal-Wallis. Houve efeito significativo para as variáveis matéria seca, extrato etéreo e matéria mineral. A força de cisalhamento apresentou diferenças entre os grupos de bifes maturados, (5,97; 4,31; 3,25 e 2,96kgf/cm2, para 0, 7, 14 e 21 dias de maturação, respectivamente), sendo que o tempo 14 e 21 foram mais macios que o tempo 7, e este, mais macio que o tempo 0. O ph apresentou diferença entre a carne in natura e os períodos de maturação. Houve efeito significativo para a maturação das variáveis luminosidade, intensidade da cor vermelha e intensidade da cor amarela. As perdas por exsudação na maturação... / In this study, we assess the effect of the ageing process in the meat quality of Longissimus muscles from 35 Nellore bulls young bulls confined for 96 days and slaughtered weighing 532.17 ± 30.25 kg and 24 months of age. The animals were fed with five different diets: the first one was a control diet, without oil and the other four diets containing different oil sources (soy or flaxseed) protected or not from ruminal degradation. After slaughter and 24 hours of cooling, 3 samples with 2.5 cm thickness were removed between the 12th and 13th ribs of Longissimus muscles and subsequently vacuum packaged and aged in an environmental chamber at a temperature of 2o C for 7, 14 and 21 days. We assess the characteristics: shear force, pH, color, ageing losses, chemical composition and fatty acids of meat. The fatty acids were assess by gas chromatography. Variables were evaluated by analysis of variance and Student t test at 5% probability and the sensory characteristics of meat was used nonparametric Kruskal-Wallis test. Shear force differed between the ageing groups, (5.97; 4.31, 3.25 and 2.96 Kgf/cm2 to 0, 7, 14 and 21 days) the period 14 and 21 were softer than the period 7. The pH was different between the fresh beef and the other periods. There was a significant effect on the variable lightness, red color intensity and intensity of yellow color. The losses were larger as the period of ageing increased, and the period of 21 days showed 5.58% of losses. The sensory evaluation showed the difference to variable smoothness for the period of 7 days.. There was a significant effect on concentration of myristic acids (C14: 0), miristoleico \ (C14: 1), pentadecanoic (C15: 0), palmitic (C16: 0), palmitoleic (C16: 1) vacênico (C18: 1 n7) and oleic (C18: 1 n9). In contrast there was an increase in the levels of stearic (C18: 0), linoleic (C18: 2 n6) eicosenoic (C20: 1 n9), eicosadienoico (C20: 2) ... (Complete abstract click electronic access below)

Com o objetivo de caracterizar o crescimento de animais cruza Wagyu x Angus, 24 machos castrados e 23 fêmeas foram separados em: G1M (Grupo 1 Machos, com percentagem de gordura intramuscular inicial > 3,4%, n= 11), G2M (Grupo 2 Machos, com percentagem de gordura intramuscular inicial < 3,4%, n= 13), G1F (Grupo 1 Fêmeas, com percentagem de gordura intramuscular inicial > 3,9%, n= 12) e G2F (Grupo 2 Fêmeas, com percentagem de gordura intramuscular inicial < 3,9%, n= 11) e avaliados com medidas seriadas de ultrassom ajustadas a cada 56 dias. Para estimar as características de carcaça foram utilizados 21 machos castrados, avaliados por ultrassom 3 a 8 dias pré abate e posteriormente na carcaça com 48 horas de resfriamento. O grupo G2M apresentou maior deposição de gordura subcutânea por ultrassom (EGSUS) em seis períodos de avaliação quando comparado ao G1M, apresentando uma taxa de deposição de gordura subcutânea distinta entre grupos de 0.69mm/100 dias e 0.65mm/100 dias para o G2M e G1M, respectivamente. Somente foi possível evidenciar diferença significativa na primeira avaliação de percentagem de gordura intramuscular (PGIMUS) entre G1M e G2M, ambos apresentaram crescimento linear com taxa de aumento de 0.28%/100 dias, foi possível evidenciar que ocorreram aumentos acima de 0.1% da PGIMUS a partir dos 280 dias do período de avaliação, quando o ganho médio diário (GMD) de peso vivo ficou acima de 0.650 kg/dia. A taxa de desenvolvimento da área do músculo longissimus (AOLUS) foi distinta entre os grupos de fêmeas, aumentando 3.8 cm2/100 dias e 3.4 cm2/100 dias para o G1F e G2F, respectivamente. Ocorreram diferenças significativas na PGIMUS somente nas quatro primeiras avaliações entre G1F e G2F. A correlação entre a área do músculo longissimus medida na carcaça (AOLC) e por ultrassom (AOLUS) foi de 0.93, para espessura de gordura subcutânea medida na carcaça (EGSC) e por ultrassom (EGSUS) foi de 0.86. A PGIMUS a desmama não afetou o crescimento do tecido muscular nos machos e adiposo nas fêmeas. As características gordura subcutânea no sítio anatômico da costela nos machos e AOLUS nas fêmeas apresentaram crescimento distinto com relação à PGIMUS a desmama. A ultrassonografia é uma tecnologia que pode ser utilizada para estimar o desenvolvimento tecidual da gordura e músculo com medidas repetidas no tempo. O peso vivo e o GMD afetaram a alteração do tecido muscular e adiposo durante o crescimento. / Aiming to characterize the growth crossbred Wagyu x Angus, 24 steers and 23 heifers were separated in: G1M (Group 1 Males, with initial percentage of intramuscular fat > 3,4%, n= 11), G2M (Group 1 Males, with initial percentage of intramuscular fat < 3,4%, n= 13), G1F (Group 1 Females with initial percentage of intramuscular fat > 3,9%, n= 12) e G2F (Group 2 Females, with initial of intramuscular fat percentage < 3,9%, n= 11) and evaluated with serial ultrasound measurements fitted every 56 days. To estimate carcass traits were used 21 steers, assessed by ultrasound 3 to 8 days pre slaughter and afterwards in the carcass after 48 hours of cooling. The G2M group showed higher deposition of ultrasound subcutaneous fat thickness (UFAT) in six periods of evaluation when compared to G1M, displaying a distinct subcutaneous fat deposition rate between groups of 0.69 mm/100 days and 0.65mm/100 days to G2M and G1M, respectively. Only possible to evidence a significant difference in the first evaluation of the ultrasound percentage of intramuscular fat (UPFAT) between G1M and G2M, both showed linear growth with an increase rate of 0.28%/100 days, it became clear that there were rises above 0.1% of UPFAT from 280 days of the evaluation period, when the average daily gain (ADG) of body weight was above 0.650 kg/day. The development rate of ultrasound longissimus muscle area (ULMA) was different between the groups of females, increasing 3.8 cm2/100 days and 3.4 cm2/100 days to the G1F and G2F, respectively. There were significant differences in the UPFAT in just the first four assessments between G1F and G2F. The corrections between carcass longissimus muscle area (CLMA) wit measured by ultrasound (ULMA) was 0.93 and carcass fat thickness (CFAT) whit fat thickness by ultrasound (UFAT) was 0.86. The UPFAT weaning did not affect the growth of muscle tissue in males and fat in females. Subcutaneous fat in the anatomical site of the rib in males and ULMA in females showed distinct growth compared to the UPFAT weaning. Ultrasonography is a technology that can be used to estimate the development of tissue fat and muscle with repeated measurements over time. The body weight and the ADG affected the change in muscle and adipose tissue during growth.

Com o objetivo de caracterizar o crescimento de animais cruza Wagyu x Angus, 24 machos castrados e 23 fêmeas foram separados em: G1M (Grupo 1 Machos, com percentagem de gordura intramuscular inicial > 3,4%, n= 11), G2M (Grupo 2 Machos, com percentagem de gordura intramuscular inicial < 3,4%, n= 13), G1F (Grupo 1 Fêmeas, com percentagem de gordura intramuscular inicial > 3,9%, n= 12) e G2F (Grupo 2 Fêmeas, com percentagem de gordura intramuscular inicial < 3,9%, n= 11) e avaliados com medidas seriadas de ultrassom ajustadas a cada 56 dias. Para estimar as características de carcaça foram utilizados 21 machos castrados, avaliados por ultrassom 3 a 8 dias pré abate e posteriormente na carcaça com 48 horas de resfriamento. O grupo G2M apresentou maior deposição de gordura subcutânea por ultrassom (EGSUS) em seis períodos de avaliação quando comparado ao G1M, apresentando uma taxa de deposição de gordura subcutânea distinta entre grupos de 0.69mm/100 dias e 0.65mm/100 dias para o G2M e G1M, respectivamente. Somente foi possível evidenciar diferença significativa na primeira avaliação de percentagem de gordura intramuscular (PGIMUS) entre G1M e G2M, ambos apresentaram crescimento linear com taxa de aumento de 0.28%/100 dias, foi possível evidenciar que ocorreram aumentos acima de 0.1% da PGIMUS a partir dos 280 dias do período de avaliação, quando o ganho médio diário (GMD) de peso vivo ficou acima de 0.650 kg/dia. A taxa de desenvolvimento da área do músculo longissimus (AOLUS) foi distinta entre os grupos de fêmeas, aumentando 3.8 cm2/100 dias e 3.4 cm2/100 dias para o G1F e G2F, respectivamente. Ocorreram diferenças significativas na PGIMUS somente nas quatro primeiras avaliações entre G1F e G2F. A correlação entre a área do músculo longissimus medida na carcaça (AOLC) e por ultrassom (AOLUS) foi de 0.93, para espessura de gordura subcutânea medida na carcaça (EGSC) e por ultrassom (EGSUS) foi de 0.86. A PGIMUS a desmama não afetou o crescimento do tecido muscular nos machos e adiposo nas fêmeas. As características gordura subcutânea no sítio anatômico da costela nos machos e AOLUS nas fêmeas apresentaram crescimento distinto com relação à PGIMUS a desmama. A ultrassonografia é uma tecnologia que pode ser utilizada para estimar o desenvolvimento tecidual da gordura e músculo com medidas repetidas no tempo. O peso vivo e o GMD afetaram a alteração do tecido muscular e adiposo durante o crescimento. / Aiming to characterize the growth crossbred Wagyu x Angus, 24 steers and 23 heifers were separated in: G1M (Group 1 Males, with initial percentage of intramuscular fat > 3,4%, n= 11), G2M (Group 1 Males, with initial percentage of intramuscular fat < 3,4%, n= 13), G1F (Group 1 Females with initial percentage of intramuscular fat > 3,9%, n= 12) e G2F (Group 2 Females, with initial of intramuscular fat percentage < 3,9%, n= 11) and evaluated with serial ultrasound measurements fitted every 56 days. To estimate carcass traits were used 21 steers, assessed by ultrasound 3 to 8 days pre slaughter and afterwards in the carcass after 48 hours of cooling. The G2M group showed higher deposition of ultrasound subcutaneous fat thickness (UFAT) in six periods of evaluation when compared to G1M, displaying a distinct subcutaneous fat deposition rate between groups of 0.69 mm/100 days and 0.65mm/100 days to G2M and G1M, respectively. Only possible to evidence a significant difference in the first evaluation of the ultrasound percentage of intramuscular fat (UPFAT) between G1M and G2M, both showed linear growth with an increase rate of 0.28%/100 days, it became clear that there were rises above 0.1% of UPFAT from 280 days of the evaluation period, when the average daily gain (ADG) of body weight was above 0.650 kg/day. The development rate of ultrasound longissimus muscle area (ULMA) was different between the groups of females, increasing 3.8 cm2/100 days and 3.4 cm2/100 days to the G1F and G2F, respectively. There were significant differences in the UPFAT in just the first four assessments between G1F and G2F. The corrections between carcass longissimus muscle area (CLMA) wit measured by ultrasound (ULMA) was 0.93 and carcass fat thickness (CFAT) whit fat thickness by ultrasound (UFAT) was 0.86. The UPFAT weaning did not affect the growth of muscle tissue in males and fat in females. Subcutaneous fat in the anatomical site of the rib in males and ULMA in females showed distinct growth compared to the UPFAT weaning. Ultrasonography is a technology that can be used to estimate the development of tissue fat and muscle with repeated measurements over time. The body weight and the ADG affected the change in muscle and adipose tissue during growth.

FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / A tese à composta por dois capÃtulos. O primeiro capÃtulo inclui o trabalho cujo objetivo foi investigar o potencial uso de pares de transcritos correlativos baseados em microarranjos como marcadores de fertilidade masculina usando a displasia da bainha fibrosa (DFS) como modelo afetado. Atualmente à bastante reconhecido que a tecnologia de microarranjos pode ser limitada pelos custos e que a qualidade dos transcritos permanece relativamente desconhecida. Para responder essas questÃes, nÃs analizamos pares de transcritos estÃveis por qPCR com um processo sistemÃtico de desenho de primers sistemÃtico. Nesse estudo experimental, nÃs utilizamos amostras de homens com fertilidade comprovada e de homens com diagnÃtico de DFS. Nossa abordagem foi baseada nas sequÃncias de primers dos seis genes de interesse, os quais foram desenhados utilizando os programas Oligo7 e Primer3Plus. A especificidade do primer foi inicialmente analisada in silico atravÃs de pesquisas nos bancos de dados ENSEMBL, University of California Santa Cruz (UCSC), e National Center for Biotechnology Information (NCBI) para uso de sequÃncias especÃficas aos genes alvos. A habilidade dos pares de transcritos em classificar as amostras de homens de fertilidade comprovada das amostras de DFS foi avaliada. Nossos resultados mostraram que em conjunÃÃo com a identificaÃÃo de quatro novos pares estÃveis, a comparaÃÃo dos coeficientes de correlaÃÃo dos valores de C(t) dos DSF revelou a interrupÃÃo de quatro pares estÃveis identificados nas amostras de homens normais. Esta seleÃÃo de pares estÃveis resolve a questÃo sobre a DSF. Em conclusÃo, os resultados mostram efetivamente que o desenho de primers e qPCR podem fornecer um ensaio molecular de baixo custo para avaliar a fertilidade masculina. O segundo capÃtulo divide-se em dois estudos e avalia em carneiros os efeitos de uma dieta suplementada com farelo de castanha de caju. No estudo 1, nosso objetivo foi detectar a presenÃa de transcritos para Heat Shock Protein (HSP70), clusterina (CLU), proteÃna semelhante à subunidade alfa do complexo T (TCP1) e proteÃna do complexo T subunidade 8 (CCT8) no espermatozÃide de ovinos, seguindo a mesma metodologia para qPCR utilizada no capitulo 1. As sequÃncias de primers foram desenhadas utilizando os programas Primer3Plus e Oligo Analyzer. Gene para protamina 2 (PRM2) foi usado como controle interno de reaÃÃo. O sÃmen foi coletado de machos pÃberes Morada Nova utlizando eletroejaculador. As amostras selecionadas para extraÃÃo de RNA espermÃtico seguiram as recomendaÃÃes do ColÃgio Brasileiro de ReproduÃÃo Animal quanto aos parÃmetros de motilidade, vigor e concentraÃÃo. Nossos resultados mostraram a presenÃa de mRNA para a HSP70 nos espermatozÃides de ovinos. Maiores estudos sÃo necessÃrios a fim de confirmar ou refutar a presenÃa das chaperonas TCP1 e CCT8 no espermatozÃide ovino. A presenÃa do transcrito da HSP70 no espermatozÃide de ovinos abre perspectivas para estudos futuros sobre os efeitos do mRNA HSP70 no desenvolvimento embrionÃrio, de modo a avaliar se essa expressÃo ocorre de modo espontÃneo, programado e seqÃencial, e se esses mecanismos se refletem na fertilidade e no desenvolvimento embrionÃrio. O segundo estudo tem como principal objetivo avaliar os efeitos de uma dieta contendo farelo de castanha de caju (FCC) na expressÃo de genes relacionados ao metabolismo dos lipÃdios no mÃsculo Longissimus dorsi de carneiros Morada Nova. Vinte carneiros maduros sexualmente foram divididos em dois grupos baseando-se no peso vivo. Os animais foram mantidos em baias individuais. Durante trÃs meses, o grupo castanha (GCA) foi alimentado com raÃÃo contendo FCC, enquanto o grupo controle (GCO) recebeu raÃÃo à base de milho e soja. As duas dietas eram isocalÃricas e isoprotÃicas, adicionadas de suplemento mineral. Os carneiros tambÃm receberam feno de Tifton e Ãgua à vontade. A quantidade de alimento ofertado (raÃÃo e feno) foi ajustada diariamente para sobra de 10%. Sete genes codificantes de proteÃnas envolvidas direta ou indiretamente foram selecionados como alvos, incluindo: GH, ACACA, CAST, CAPN3, LPL, SCD e FASN. Para normalizaÃÃo, foram selecionados cinco genes candidatos: ACTB, GAPDH, RPL4, RPS18 e TBP. Dentre os sete genes alvos selecionados anteriormente, os alvos GH, ACACA e CAST foram removidos. Os dois primeiros foram removidos devido amplificaÃÃo de alinhamento mÃltiplo (baixa especificidade do primers), enquanto CAST apresentou baixa eficiÃncia de amplificaÃÃo. Da lista de gene alvo final, a expressÃo de somente dois genes foi afetada pela dieta, SCD (p<0.01) e FASN (p<0.05), enquanto LPL (p=0,1022) e CAPN3 (p=0,0939) nÃo apresentaram diferenÃa significativa (p<0.05). Os genes SCD e FASN foram reprimidos no GCA comparada ao GCO. Este à o primeiro relato de que uma raÃÃo contendo FCC afetou a expressÃo gÃnica de proteÃnas envolvidas na deposiÃÃo de lipÃdios no mÃsculo em ovinos. Considerando que uma dieta contendo FCC altera a expressÃo de genes lipogÃnicos sem afetar o ganho de peso nem a eficiÃncia reprodutiva de ovinos, faz da castanha de caju uma importante alternativa para o sistema de produÃÃo de ovinos criados em regiÃes tropicais. / This thesis presents two chapters. In the first chapter, its objective was to investigate the potential use of correlative microarray-based transcript pairs as candidate markers for male fertility using dysplasia of the fibrous sheath (DFS) as an affected model. It is widely recognized that microarray technology may be limited by cost and that the quality of the transcript remains relatively unknown. To address these issues, we analyzed the stable transcript pairs by qPCR with a systematic primer design process. On this experimental study, we used men with proven fertility and men with a diagnosis of DFS. Our approach was based on primer sequences for six genes of interest were designed using Oligo7 and Primer3Plus. Primer specificity was initially assessed in silico by searching the ENSEMBL, University of California Santa Cruz, and National Center for Biotechnology Information databases for nontarget complementary sequences throughout the genome. The ability of transcript pairs to classify samples from males of proven fertility away from DFS was assessed. Our results showed that in conjunction with identifying four new stable transcript pairs, comparison of the DFS qPCR C(t) correlation coefficients revealed the disruption of four stable fertile sample transcript pairs. This suite of transcript pairs resolves DFS. In conclusion, the results show that with effectively designed primers, qPCR may provide an affordable molecular assay to assess male fertility status. Second chapter includes two studies regarding evaluations of ram feeded with supplemented diet with cashew nut. On the frist study, our goal was detect transcripts for Heat Shock Protein (HSP70), Clusterin (CLU), Ovis aries T-complex protein 1 alfa subunit-like protein (TCP1) e Ovis aries chaperonin containing TCP1, subunit 8 (theta) (CCT8) on ram sperm by. For primer designing we used published ESTs from NCBI and manually annotated by us using Primer3Plus and OligoAnalizer. PRM2 was used as internal qPCR control. Semen samples from mature Morada Nova ram were collected by eletroejaculator, washed in PBS and prepared for further RNA extraction. Selected samples followed quality recommendatios from ColÃgio Brasileiro de ReproduÃÃo Animal regarding motility, vigor and concentration. Our results showed presence of mRNA HSP70 on ram sperm and they can possible be envolved in early embryo development, oocyte activation and post fertilization events. Further analyses will be necessary to confirm presence of TCP1 and CCT8 on ram sperm. Our findings indicate new perpectives about the effects of these chaperones during embryo development mesuring if its expression reflects male fertility on the early embryo development. On the second study the the main goal is to evaluate the effects of a lipid-enriched diet containing cashew nut brain on the expression of genes related to lipid metabolism in the longissimus dorsi muscle of Morada Nova rams. Twenty sexually mature and reproductively sound rams were divided in two groups based on ram live weight, and each ram was kept on individual pens. During three months, group 1 (G1) rams were fed with a lipid-rich diet, containing cashew nut bran (CNB), while group 2 (G2) was fed with a meal based on corn and soy. Both diets were isocaloric and isoproteic, and had a mineral mix added-in. The rams also were offered Tifton grass hay and had free access to water. The amount of diet offered (ration plus hay) was adjusted everyday to a maximum waste of 10%. Seven genes coding for proteins directly or indirectly involved in lipid metabolism were initially selected as targets, incluiding GH, ACACA, CAST, CAPN3, LPL, SCD, and FASN. Also, five genes were selected as reference genes, ACTB, GAPDH, RPL4, RPS18 and TBP. From the seven genes originally selected as targets, GH, ACACA and CAST were removed, leaving the final list with four targets. The first two genes were removed due to alternative pairing of the primers (low specificity), while CAST showed low amplification efficiency during PCR reaction. From the final target list, the expression of only two genes was affected by diet, SCD (p<0.01) and FASN (p<0.05), while LPL (p=0,1022) and CAPN3 (p=0,0939) were not different at the p<0.05 level. Both SCD and FASN genes were down-regulated in G1 (lipid-rich diet containing CNB) compared to G2. These genes are involved in lipogenic pathways, related to tissue lipid deposition; therefore, these results were expected. This is the first time that a fat-rich diet based on CNB was shown to affect gene expression of proteins involved in fat deposition in carcass muscles of rams. Longissimus dorsi is one of the finest meat cuts. Considering that human diets rich in poli-unsaturated fatty acids (PUFA) can decrease the risk of heart and other chronic diseases, a change in the fatty acid profile of this muscle could contribute to a healthier diet, aggregating value to the end-product of the lamb meat market. The effects of CNB-based diet on the gene expression of SCD and FASN support the notion that such diet, as previously shown for other sources of lipid in ruminants, can potentially change the fatty acid composition of L. dorsi, but this hypothesis needs to be experimentally verified by profiling fatty acids in animals fed CNB versus carbohydrate-based diets. CNB use as an ingredient in animal feeding is environmentally-friendly, since it contributes to by-product recycling from the agroindustrial plants in Northeast Brazil. Also, considering that CNB-based diet changes lipogenic gene expression without affecting weight gain or reproductive status of the rams, as shown in another work from our team, makes CNB a very important alternative food in ram production systems in tropical regions.