Made available in DSpace on 2014-06-12T23:13:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2942_1.pdf: 3805386 bytes, checksum: 4004f77652d51ce9af718b944debdecf (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / O benznidazol (BNZ) é o único medicamento com ação tripanocida empregado clinicamente no Brasil, sendo o fármaco de escolha para o tratamento da doença de Chagas, doença crônica que leva o paciente à utilização da medicação com o BNZ por longos períodos de tempo. A ingestão prolongada deste fármaco pode levar ao seu acúmulo no organismo, podendo esse sofrer uma série de reações inesperadas em condições orgânicas como oxidações, hidrólises ácidas, básicas ou neutras, podendo ainda em condições in vitro de armazenamento e estocagem, simular a termo e fotodegradação dos princípios ativos. Neste sentido foi realizado o estudo de degradação forçada do BNZ para delineamento da estabilidade deste ativo. No estudo de estabilidade forçada do BNZ foram utilizadas condições de estresse hidrolítico (em meio ácido, básico e neutro), oxidativo (em peróxido de hidrogênio 3%), fotolítico (em lâmpadas ultravioleta e branca fria) e termodegradação (em estufa à 60°C e com termogravimetria até 700°C), as quais foram avaliadas por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Posteriormente, avaliou-se a cinética de degradação do BNZ sob condições básica, oxidativa e fotolítica, onde se verificou maior degradação. O método indicativo de estabilidade para detecção e quantificação do BNZ e seus produtos de degradação foi desenvolvido e validado. Sendo amostras de comprimido de BNZ submetidas a estudo de estabilidade acelerada (40±2°C / 75±5% UR) a fim de avaliar a nescessidade de notificar, identificar ou qualificar os produtos de degradação obtidos a partir do BNZ em produtos acabados comercializados. Sendo a análise de um lote idicativa da qualificação dos produtos de degradação do BNZ

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-09-22T20:18:29Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) RAQUEL BALESTRI HELENO FERREIRA ate AGO 2021.pdf: 1629744 bytes, checksum: 7d6690d50c0536d3f7683a73db84827d (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-09-22T20:18:45Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) RAQUEL BALESTRI HELENO FERREIRA ate AGO 2021.pdf: 1629744 bytes, checksum: 7d6690d50c0536d3f7683a73db84827d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-22T20:18:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) RAQUEL BALESTRI HELENO FERREIRA ate AGO 2021.pdf: 1629744 bytes, checksum: 7d6690d50c0536d3f7683a73db84827d (MD5) Previous issue date: 2016 / A linagliptina (LGT) é um fármaco inibidor da DPP-4, da classe das gliptinas, utilizado para o controle glicêmico de diabetes mellitus tipo 2. Levando-se em conta que os fármacos utilizados no processo de produção das formulações farmacêuticas não são considerados totalmente puros, alguns Guias Regulatórios (ICH) descrevem a necessidade da quantificação do fármaco e suas impurezas de síntese. Diante disso, o objetivo do estudo é o desenvolvimento de um método por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) para quantificação do fármaco e de suas três principais impurezas de síntese e o estudo de segurança biológica destas substâncias. O desenvolvimento e a validação do método para LGT e das três impurezas foram realizados por CLAE acoplada a um detector de arranjo de diodo (DAD), utilizando coluna C8 (5 μm - 4,6x100 mm), fase móvel eluída em modo gradiente, constituída de uma mistura de ácido fórmico 0,1% pH 3,5 e acetonitrila (ACN) eluída com uma rampa crescente de 10% na proporção de ACN de (0) zero ao 4 min (30% para 70%) e decrescente de 10% na proporção de ACN de 5 a 8 min (70% para 30%), vazão de 0,6 mL/min, volume de injeção de 20 μL e temperatura do forno de 30°C. Os comprimentos de onda de detecção utilizados foram 294, 278, 268 e 280 nm para LGT, impureza 1, 2 e 3, respectivamente. O método apresentou-se seletivo e específico para a LGT e as impurezas, pois não houve interferência dos produtos de degradação por Ultravioleta A, hidrólise básica (hidróxido de sódio 1,0 mol/L) e ácida (ácido clorídrico 1,0 mol/L), peróxido hidrogênio 30%, temperatura 60 °C e hidrólise básica e ácida em condições térmicas à 80 °C e dos excipientes na quantificação do fármaco. A resposta foi linear na faixa de 2,41-144,0 μg/mL (r = 0,9996) para a LGT e na faixa de 0,06-3,6 μg/mL para as impurezas testadas (r = 0,9963, 0,9994 e 0,9991 para impureza 1, 2 e 3, respectivamente). O método demonstrou exatidão, com teores de recuperação de 99,79, 93,12, 92,92 e 93,99% para a LGT e impureza 1, 2 e 3, respectivamente. A precisão intra e inter-dia foi satisfatória (RSD 1,36, 4,14, 3,50 e 4,08% para a LGT e impureza 1, 2 e 3, respectivamente) e a robustez não apresentou diferenças significativas com pequenas alterações nas condições analíticas (pH, fase móvel, temperatura, fluxo e detector). A cinética de degradação em condição alcalina associada a temperatura de (80 ºC), apresentou resultados de primeira ordem. A avaliação da segurança biológica foi realizada por meio da citotoxicidade, mutagenicidade e genotoxicidade através dos testes de viabilidade celular, micronúcleo e cometa, respectivamente. Nos testes de segurança biológica a LGT apresentou-se apenas citotóxica na concentração 10 vezes superior a concentração plasmática máxima, enquanto as impurezas 1 e 3 apresentaram-se citotóxica, mutagênica e genotóxica em uma concentração equivalente a 10% concentração plasmática máxima do fármaco e a impureza 2 evidenciou sua citotoxicidade e genotoxicidade na concentração equivalente a 10% da concentração plasmática máxima do fármaco. De acordo com os resultados obtidos, pode-se observar que o método proposto foi indicativo de estabilidade por CLAE para LGT e ainda demonstrou-se adequado para análise quantitativa das impurezas de síntese do fármaco. Além disso, evidenciou-se que a LGT e as impurezas de síntese estão em conformidade com os testes de segurança biológica empregados, desde que utilizadas nas concentrações adequadas. / Linagliptin (LGT) is an inhibitor of DPP4 used for glycemic control of type 2 mellitus diabetes. Since the drugs used in the production process of the pharmaceutical formulations are not considered totally pure, the Regulatory Guides describing the need of the drug quantification and impurities potentials. Therefore, the aim of this study was to develop a method by highperformance liquid chromatography to quantify the drug and three potential synthetic impurities and biological safety studies. The development and validation of the method for LGT and the three impurities were carried out by HPLC coupled to a photodiode array detector. The chromatographic separation was performed in a RP8 column (150 x 4.6 mm, 5 μm), at 30°C. The separation was performed by means of a linear gradient elution (eluent A: formic acid 0.1% pH 3.5; eluent B: acetonitrile). The gradient obeys the following sequence: 3070% of B (0 - 4 minutes) and 7030 of B (4,01 - 8 minutes) at a flowrate of 0.6 mL min1 and run time of 10 minutes. The injection volume was 20 μL and detection at 294, 278, 268 e 280 nm for LGT, impurity 1, 2 and 3, respectively. The method showed selectivity and specific for the LGT and synthetic impurities, therefore no interference of degradation products (UV-A, basic hydrolysis (sodium hydroxide 1.0 mol L1) and acid (hydrochloric acid 1.0 mol L1), peroxide (30%), temperature (60 ° C) and acidic and basic hydrolysis under thermal conditions (80° C)) and the excipients in the quantification of the drug. The response was linear from 2.41 to 144.0 μg mL1 (r = 0.9996) for the LGT and in the range of 0.06 to 3.6 μg mL1 (r = 0.9963, 0.9994 and 0.9991 for impurity 1, 2 and 3, respectively ). The method showed accuracy, with recovery levels of 99.79, 93.12, 92.92 and 93.99% for LGT and impurity 1, 2 and 3, respectively. The intra and inter-day precision was suitable (RSD 1.36, 4.14, 3.50 and 4.08% for LGT and impurity 1, 2 and 3, respectively) and the robustness showed no significant differences with small changes in the analytical conditions (pH of the mobile phase, temperature, flow-rate and detector). The kinetics of degradation in alkaline conditions associated with temperature (80° C), showed results of the first order. The evaluation of the biological was performed by cytotoxicity, mutagenicity and genotoxicity through the cell viability test, micronucleus and comet, respectively. In biological safety testing LGT had only cytotoxic activity at a concentration of 10 times the maximum plasma concentration, while the impurity 1 and 3 set out cytotoxic, mutagenic and genotoxic in a concentration equivalent to 10% maximum plasma concentration of the drug and impurity 2 showed cytotoxicity and genotoxicity in concentration equivalent to 10% of the maximum plasma concentration of the drug. According to the results, it can be seen that the proposed method by HPLC is stability-indicating and suitable for quantitative analysis of the drug and synthetic impurities. Furthermore, it was observed that the LGT and synthetic impurities are in accordance with biological safety studies, if they are used in appropriate concentration.

Em julho de 2008, a ANVISA publicou um informe técnico esclarecendo um item importante da RE nº 1 (2005), que trata sobre os estudos de estabilidade de medicamentos. Este documento originou uma nova RDC de nº 58, publicada em dezembro de 2013, a qual estabelece limites para produtos de degradação em medicamentos. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o comportamento do antineoplástico cloridrato de doxorrubicina frente a condições de decomposição (hidrólise ácida, básica, oxidação, temperatura e fotólise), a fim de se determinar suas principais vias de degradação e também elucidar as estruturas de seus principais produtos de degradação. Para isso foi desenvolvido e validado um método indicativo de estabilidade por HPLC-DAD-MS, o qual utiliza como fase estacionária uma coluna Luna C18(2) (150 mm x 3,0 mm, µm) com gradiente de fase móvel de tampão formiato de amônio 5 mmoles.L-1 pH 3 e metanol e fluxo de 0,3 mL.min-1. Ao longo do estudo foram encontrados diversos produtos de degradação, dentre eles a 7- deoxidehidrodoxorrubicinona, originada por hidrólise ácida e também o produto da degradação térmica de m/z 530, o qual foi encontrado nas análises do medicamento após expirado seu prazo de validade. Além disso, a avaliação da toxicidade in vitro de amostras contendo produtos de degradação de origem térmica indicou atividade citotóxica para células mononucleares. / ANVISA has published in July 2008, a technical sheet expaining an important item of the RE No. 1 (2005), which describes drugs stability studies. This document originated a new RDC No. 58, published in December 2013, which sets thresholds for degradation products in pharmaceuticals. The aim of this study was to evaluate the behavior for the antineoplastic doxorubicin when exposed to stress conditions (acid and base hydrolysis, oxidaton, photolysis and temperature) in order to determine the major pathaways of degradation and also to elucidate the stuctures of their main degradation products. To this was developed and validated a target stability indicatinf method by HPLC-DAD-MS, with Luna C18 (2) (150 mm x 3.0 mm. 3 µm) column as stationary phase and a mobile phase gradient composed of ammonium formate buffer 5 mmoles.L-1 and pH 3 and metanol with flow of 0.3 ml min-1. Throughout the study many degradation products was discovered, among them 7- deoxydehydrodoxorubicinone, formed by acid hydrolysis and also the main product of termal decomposition of m/z 530, wich was found in the analyzes of the medicine after the expiry of its validity were found. Furthermore, evaluation of the in vitro toxicity of samples containing degradation products of thermal decomposition was found to be citotoxic for mononuclear cells.

Em julho de 2008, a ANVISA publicou um informe técnico esclarecendo um item importante da RE nº 1 (2005), que trata sobre os estudos de estabilidade de medicamentos. Este documento originou uma nova RDC de nº 58, publicada em dezembro de 2013, a qual estabelece limites para produtos de degradação em medicamentos. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o comportamento do antineoplástico cloridrato de doxorrubicina frente a condições de decomposição (hidrólise ácida, básica, oxidação, temperatura e fotólise), a fim de se determinar suas principais vias de degradação e também elucidar as estruturas de seus principais produtos de degradação. Para isso foi desenvolvido e validado um método indicativo de estabilidade por HPLC-DAD-MS, o qual utiliza como fase estacionária uma coluna Luna C18(2) (150 mm x 3,0 mm, µm) com gradiente de fase móvel de tampão formiato de amônio 5 mmoles.L-1 pH 3 e metanol e fluxo de 0,3 mL.min-1. Ao longo do estudo foram encontrados diversos produtos de degradação, dentre eles a 7- deoxidehidrodoxorrubicinona, originada por hidrólise ácida e também o produto da degradação térmica de m/z 530, o qual foi encontrado nas análises do medicamento após expirado seu prazo de validade. Além disso, a avaliação da toxicidade in vitro de amostras contendo produtos de degradação de origem térmica indicou atividade citotóxica para células mononucleares. / ANVISA has published in July 2008, a technical sheet expaining an important item of the RE No. 1 (2005), which describes drugs stability studies. This document originated a new RDC No. 58, published in December 2013, which sets thresholds for degradation products in pharmaceuticals. The aim of this study was to evaluate the behavior for the antineoplastic doxorubicin when exposed to stress conditions (acid and base hydrolysis, oxidaton, photolysis and temperature) in order to determine the major pathaways of degradation and also to elucidate the stuctures of their main degradation products. To this was developed and validated a target stability indicatinf method by HPLC-DAD-MS, with Luna C18 (2) (150 mm x 3.0 mm. 3 µm) column as stationary phase and a mobile phase gradient composed of ammonium formate buffer 5 mmoles.L-1 and pH 3 and metanol with flow of 0.3 ml min-1. Throughout the study many degradation products was discovered, among them 7- deoxydehydrodoxorubicinone, formed by acid hydrolysis and also the main product of termal decomposition of m/z 530, wich was found in the analyzes of the medicine after the expiry of its validity were found. Furthermore, evaluation of the in vitro toxicity of samples containing degradation products of thermal decomposition was found to be citotoxic for mononuclear cells.

Os diuréticos aumentam o fluxo urinário e a excreção de sódio e são utilizados para ajustar o volume e/ou a composição dos líquidos corporais em uma variedade de situações clínicas. A furosemida é um agente diurético potente que induz uma poderosa diurese. É utilizada no tratamento de edema associado com o coração e doenças renais. Nesta pesquisa objetivou-se desenvolver métodos indicativos de estabilidade para a furosemida, por eletroforese capilar em solução livre (FSCE) e cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE). O método por FSCE utilizou um capilar de sílica fundida com comprimento total de 30,2 cm x 50,0 µm d.i. O tampão utilizado foi tetraborato de sódio 2,0 mmol L-1 e 10% de metanol, injeção hidrodinâmica 0,5 psi/5s, tensão aplicada +25 kV, detecção em 273 nm e temperatura a 25ºC. O tempo de migração da furosemida foi de 1,8 minutos. O método obteve boa linearidade no intervalo de 70,0 a 130,0 µg.mL-1 com coeficiente de correlação maior de 0,99. Os limites de detecção e de quantificação foram 6,2 µg.mL-1 e 20,6 µg.mL-1, respectivamente. A precisão do sistema foi inferior a 2,0%. A repetibilidade e precisão intermediária foram inferiores a 5,0%. A recuperação média foi de 102,1 %. No teste de especificidade, foram detectados três potenciais produtos de degradação com os seguintes tempos de retenção 1,3 2,0 e 2,2 min. O método por CLAE utilizou uma coluna Shim-pack CLC-ODS(M)® (250mm x4.6mm, 5µm). A fase móvel era constituída de acetonitrila:água (50:50) com 0,1% de ácido fórmico. O fluxo foi de 1.0 mL min-1 e detecção em 273 nm e temperatura a 30 ± 1 ºC. O método apresentou boa linearidade nas concentrações entre 7,0 e 13 µg.mL-1; com coeficiente de correlação maior de 0,99. E tempo de retenção para furosemida foi de 4,9 minutos. Os limites de detecção e de quantificação foram 0,6 µg.mL-1 e 1,9 µg.mL-1, respectivamente. A precisão do sistema foi inferior a 1,0%. A repetibilidade e precisão intermediária foram inferiores a 3,0%. A recuperação média foi de 105,1 %. No teste de especificidade, foram detectados três potenciais produtos de degradação com os seguintes tempos de retenção 2,4, 3,1 e 3,8 min. / Diuretics increase urine flow and sodium excretion and are used to adjust volume and / or composition of body fluids in a variety of clinical situations. Furosemide is a potent diuretic agent that induces a strong diuresis. It is used in the treatment of edema associated with heart and kidney disease. This research aimed to develop stability indicative methods for furosemide, by capillary electrophoresis in free solution (FSCE) and high-performance liquid chromatography (HPLC). The method FSCE used a fused silica capillary with a total length of 30.2 cm x 50.0 um di The buffer used was sodium tetraborate 2.0 mmol L-1 and 10% methanol, hydrodynamic injection 0.5 psi / 5s, +25 kV applied voltage, detection at 273 nm and 25 °C. The furosemide migration time was 1.8 minutes. The method achieved good linearity in the range of 70.0 to 130.0 µg.mL-1 with correlation coefficient higher of 0.99. The limits of detection and quantification were 6.2 and 20.6 µg.mL-1 µg.mL-1, respectively. The system accuracy was less than 2.0%. The repeatability and intermediate precision were less than 5.0%. The average recovery was 102.1%. The specificity test detected three potential degradation products with the following retention times 1.3, 2.0 and 2.2 min. The HPLC method used a Shim-pack CLC-ODS (M)® column (250mm x 4.6mm, 5µm). The mobile phase consisted of acetonitrile: water (50:50) with 0.1% formic acid. The flow rate was 1.0 mL min-1, detection at 273 nm and temperature at 30 ± 1°C. The method showed good linearity in concentrations between 7.0 and 13.0 µg.mL-1; with correlation coefficient higher of 0.99. Retention time for furosemide was 4.9 minutes. The limits of detection and quantification were 0.6 µg.mL-1 and 1.9 µg.mL-1, respectively. The system accuracy was less than 1.0%. The repeatability and intermediate precision were less than 3.0%. The average recovery was 105.1%. The specificity test detected three potential degradation products of the following retention times of 2.4, 3.1 and 3.8 min.

Os diuréticos aumentam o fluxo urinário e a excreção de sódio e são utilizados para ajustar o volume e/ou a composição dos líquidos corporais em uma variedade de situações clínicas. A furosemida é um agente diurético potente que induz uma poderosa diurese. É utilizada no tratamento de edema associado com o coração e doenças renais. Nesta pesquisa objetivou-se desenvolver métodos indicativos de estabilidade para a furosemida, por eletroforese capilar em solução livre (FSCE) e cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE). O método por FSCE utilizou um capilar de sílica fundida com comprimento total de 30,2 cm x 50,0 µm d.i. O tampão utilizado foi tetraborato de sódio 2,0 mmol L-1 e 10% de metanol, injeção hidrodinâmica 0,5 psi/5s, tensão aplicada +25 kV, detecção em 273 nm e temperatura a 25ºC. O tempo de migração da furosemida foi de 1,8 minutos. O método obteve boa linearidade no intervalo de 70,0 a 130,0 µg.mL-1 com coeficiente de correlação maior de 0,99. Os limites de detecção e de quantificação foram 6,2 µg.mL-1 e 20,6 µg.mL-1, respectivamente. A precisão do sistema foi inferior a 2,0%. A repetibilidade e precisão intermediária foram inferiores a 5,0%. A recuperação média foi de 102,1 %. No teste de especificidade, foram detectados três potenciais produtos de degradação com os seguintes tempos de retenção 1,3 2,0 e 2,2 min. O método por CLAE utilizou uma coluna Shim-pack CLC-ODS(M)® (250mm x4.6mm, 5µm). A fase móvel era constituída de acetonitrila:água (50:50) com 0,1% de ácido fórmico. O fluxo foi de 1.0 mL min-1 e detecção em 273 nm e temperatura a 30 ± 1 ºC. O método apresentou boa linearidade nas concentrações entre 7,0 e 13 µg.mL-1; com coeficiente de correlação maior de 0,99. E tempo de retenção para furosemida foi de 4,9 minutos. Os limites de detecção e de quantificação foram 0,6 µg.mL-1 e 1,9 µg.mL-1, respectivamente. A precisão do sistema foi inferior a 1,0%. A repetibilidade e precisão intermediária foram inferiores a 3,0%. A recuperação média foi de 105,1 %. No teste de especificidade, foram detectados três potenciais produtos de degradação com os seguintes tempos de retenção 2,4, 3,1 e 3,8 min. / Diuretics increase urine flow and sodium excretion and are used to adjust volume and / or composition of body fluids in a variety of clinical situations. Furosemide is a potent diuretic agent that induces a strong diuresis. It is used in the treatment of edema associated with heart and kidney disease. This research aimed to develop stability indicative methods for furosemide, by capillary electrophoresis in free solution (FSCE) and high-performance liquid chromatography (HPLC). The method FSCE used a fused silica capillary with a total length of 30.2 cm x 50.0 um di The buffer used was sodium tetraborate 2.0 mmol L-1 and 10% methanol, hydrodynamic injection 0.5 psi / 5s, +25 kV applied voltage, detection at 273 nm and 25 °C. The furosemide migration time was 1.8 minutes. The method achieved good linearity in the range of 70.0 to 130.0 µg.mL-1 with correlation coefficient higher of 0.99. The limits of detection and quantification were 6.2 and 20.6 µg.mL-1 µg.mL-1, respectively. The system accuracy was less than 2.0%. The repeatability and intermediate precision were less than 5.0%. The average recovery was 102.1%. The specificity test detected three potential degradation products with the following retention times 1.3, 2.0 and 2.2 min. The HPLC method used a Shim-pack CLC-ODS (M)® column (250mm x 4.6mm, 5µm). The mobile phase consisted of acetonitrile: water (50:50) with 0.1% formic acid. The flow rate was 1.0 mL min-1, detection at 273 nm and temperature at 30 ± 1°C. The method showed good linearity in concentrations between 7.0 and 13.0 µg.mL-1; with correlation coefficient higher of 0.99. Retention time for furosemide was 4.9 minutes. The limits of detection and quantification were 0.6 µg.mL-1 and 1.9 µg.mL-1, respectively. The system accuracy was less than 1.0%. The repeatability and intermediate precision were less than 3.0%. The average recovery was 105.1%. The specificity test detected three potential degradation products of the following retention times of 2.4, 3.1 and 3.8 min.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-06-28T14:51:48Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO (Salvo Automaticamente)_correto.pdf: 1889034 bytes, checksum: eb0752322509ac8a41b42b336e30870a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-28T14:51:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO (Salvo Automaticamente)_correto.pdf: 1889034 bytes, checksum: eb0752322509ac8a41b42b336e30870a (MD5) Previous issue date: 2014-05-30 / A metildopa (a-metil-3, 4-dighidro-l-fenilalanina) é um agente hipotensor de ação central, é uma pró-droga, que exerce sua ação anti-hipertensiva através de um metabólito ativo. A estabilidade é um importante parâmetro para avaliar a segurança, eficácia e qualidade exigidas para o registro sanitário de produtos farmacêuticos. Vários países publicam diretrizes para estabilidade farmacêutica. No Brasil, estes estudos devem ser conduzidos segundo o Guia para a Realização de Estudos de Estabilidade, publicada na resolução - RE n.01 de 29 de julho de 2005 e a RDC 58 de 20 de dezembro de 2013 que estabelece parâmetros para a notificação, identificação e qualificação de produtos de degradação em medicamentos com substâncias ativas sintéticas e semissintéticas, classificados como novos, genéricos e similares e dá outras providências. O objetivo desse trabalho foi desenvolver um método indicativo de estabilidade para comprimidos revestidos de metildopa 500mg, avaliando a especificidade e a seletividade deste método. Para avaliação da especificidade e seletividade do método foram mantidas amostras da metildopa matéria-prima, comprimido revestido 500mg e placebo nas seguintes condições de estresse: hidrólises (ácida, básica e neutra), oxidação e temperatura; as amostras também foram submetidas ao teste de fotoestabilidade. A seletividade do método também foi demonstrada após realização de testes com o padrão primário de metildopa contaminado com a impureza 3-O-metil-metildopa. Os resultados foram analisados segundo dados gerados por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detector de arranjo de diodos (DAD). A 3-O-metildopa apresenta tempo de retenção relativo (TRR) de 1,37 frente à metildopa. A metildopa mostrou-se estável nas hidrólises neutras e ácida menos concentradas bem como na degradação térmica, oxidativa e na fotoestabilidade. Apresentou um decaimento muito acentuado nas condições básicas (NaOH 0,1 e 1,0M), sendo inadequado para o estudo de métodos indicativos de estabilidade como indica a RDC 58 de 2013. A condição mais severa da hidrolise ácida (HCl 5,0M) apresentou um teor de 77,80% para a matéria-prima e 82,99% para o comprimido revestido em comparação com o padrão de trabalho após 72 horas de estudo, ambos apresentaram um pico de degradação com TRR de aproximadamente 2,00. Na condição de hidrólise alcalina menos concentrada (NaOH 0,01M) apareceram produtos de degradação tanto na matéria-prima como para o comprimido revestido de metildopa, porém, o pico que apresenta área significativa apresenta TRR de 0.38 e o teor do fármaco foi de 73,49% para a matéria-prima e 74,48% para o comprimido revestido em comparação com o padrão de trabalho após 72 horas de estudo. Através das análises dos resultados obtidos utilizando as ferramentas de integração e de análise espectral para avaliação da similaridade e pureza dos picos, verifica-se que o método utilizado consegue detectar os produtos de degradação que venham a surgir durante os estudos de estabilidade. O método posteriormente foi validado utilizando como referências a RE 899 de 2003 e a norma técnica da ICH Q2 R1. O método desenvolvido e validado foi utilizado no estudo de estabilidade de um comprimido revestido de metildopa 500mg similar constante no mercado brasileiro, apresentando resultados dentro da especificação exigida para o produto. / Methyldopa (a-methyl-3,4-dihydro-l-phenylalanine) is a centrally acting antihypertensive agent, is a prodrug, which exerts its antihypertensive action through an active metabolite. Stability is an important parameter to evaluate the safety, efficacy and quality required for sanitary registration of pharmaceutical products. Several countries publish guidelines for pharmaceutical stability. In Brazil, the stability studies should be conducted according to the guide on conducting stability studies, published in the resolution RE 01 of July 29, 2005 and RDC 58 of December 20, 2013 laying down parameters for notification, identification and qualification of degradation products in medicine with synthetic and semi synthetic active substances classified as new, generic and similar and other measures. The aim of this study was to develop a stability indicating method for coated tablets 500mg of methyldopa following and evaluating the specificity and selectivity of this method. To assess the specificity and selectivity of the method of methyldopa samples were stored raw material, coated tablet 500mg and placebo in the following stress conditions: hydrolysis (acidic, basic and neutral), oxidation, light and temperature. The selectivity of the method was demonstrated after testing with the primary pattern methyldopa contaminated with impurity 3-O-methyl-methyldopa. The results were analyzed according to data generated by high performance liquid chromatography (HPLC) with diode array detector (DAD). 3-O-methyl-methyldopa has RRT 1.37 front methyldopa. Methyldopa was stable in neutral and acidic hydrolysis less concentrated as well as thermal, oxidative degradation and photostability. Showed a dramatic decay in basic conditions (NaOH 0,1 and 1,0M) and unsuitable for the study of stability indicating methods as shown in the RDC 58/ 2013. The most severe conditions of acid hydrolysis (5,0M HCl) showed a content of 77.80 % for the raw material and 82.99 % for the coated tablet compared the standard of work after 72 hours of study, both showed a peak of degradation with TRR approximately 2,00. In the condition of less concentrated alkaline hydrolysis (0,01M NaOH) appeared both in the degradation products as raw material for the coated tablet methyldopa, however, the peak that shows significant area RRT 0,38 and shows content of the drug was 73,49% for raw and 74,48% for the coated tablet compared the standard of work after 72 hours of study. Through the analysis of the results obtained using the tools of integration and spectral analysis for assessing similarity and purity of the peaks, it is found that the method can detect possible degradation products that arise during the stability studies . The method was subsequently validated using as references to RE 899 2003 and the technical standards of the ICH Q2 R1. The developed and validated method was used on a tablet stability study coated methyldopa 500mg similar constant in the Brazilian market, presenting results within the specification required for the product.

ultravioleta e espectrometria de massas para análise do teor e limite de impurezas e compostos de degradação para o principio ativo farmacêutico ondansetrona e três diferentes formas farmacêuticas foi desenvolvido utilizando conceitos de qualidade analítica por planejamento (aQbD) e validado de acordo com os requerimentos da USP-NF e do ICH. O método desenvolvido apresentou capacidade de separação de vinte compostos detectados nas amostras envolvidas no estudo: o princípio ativo ondansetrona, sete impurezas descritas nos principais compêndios farmacopéicos mundiais (United States Pharmacopeia-National Formulary, European Pharmacopoeia, British Pharmacopoeia e Indian Pharmacopoeia), onze compostos de degradação gerados pelos estudos de estresse e um excipiente. O método final apresentou um tempo de corrida de 14 minutos, com vazão de fase móvel de 0,4 mL/min, detecção de impurezas por ultravioleta a 220 nm e do princípio ativo a 305 nm, com apoio da detecção por espectrometria de massas de alta resolução (QTOF). Em comparação aos métodos requeridos pelas monografias relacionadas à ondansetrona publicadas nos compêndios farmacopéicos citados, o método desenvolvido apresenta uma alternativa eficiente e econômica para a análise de rotina de diferentes formas da matéria-prima ondansetrona (base, cloridrato, diferentes níveis de hidratação) e formas farmacêuticas (comprimidos, comprimidos de desintegração oral e solução injetável), mostrando que a modernização dos métodos cromatográficos, além de garantir a qualidade dos produtos farmacêuticos e promover a saúde da população, tem um impacto relevante na economia da produção e análise de medicamentos e na diminuição do impacto ao meio ambiente / An analytical method by ultraperformance liquid chromatography and detection by UV and mass spectrometry for assay and limit test for impurities and degradation compounds for the active pharmaceutical ingredient ondansetron and three different pharmaceutical products was developed using the analytical Quality by Design (aQbD) approach, and was validated according to the USP-NF and ICH requirements. The analytical method was efficient for the separation of twenty different compounds, detected in the samples involved in this study: the active ingredient ondansetron, seven impurities mentioned in the main global pharmacopeial compendia (United States Pharmacopeia-National Formulary, European Pharmacopoeia, British Pharmacopoeia e Indian Pharmacopoeia), eleven degradation compounds detected in the samples from stress studies and one excipient. The final method was composed by a 14 minutes run, using mobile phase flow at 0.4 mL/min, detection by UV at 220 nm for the impurities and degradation compounds and at 305 nm for ondansetron, supported by the high-resolution mass spectrometry detection (QTOF). Comparing the method developed with the chromatographic methods required by the monographs related to ondansetron published in the mentioned pharmacopeial compendia, it represents an efficient and economic alternative to the routine analysis of different ondansetron raw material forms (base, hydrochloride, different hydrates) and pharmaceutical products (tablets, orally disintegrating tablets and injectable), demonstrating the importance of the modernization of analytical procedures, with regard to not only the quality assurance of pharmaceutical products and promotion of public health, but also to the positive impact on the economy and sustainability of the pharmaceutical analysis and manufacturing.

ultravioleta e espectrometria de massas para análise do teor e limite de impurezas e compostos de degradação para o principio ativo farmacêutico ondansetrona e três diferentes formas farmacêuticas foi desenvolvido utilizando conceitos de qualidade analítica por planejamento (aQbD) e validado de acordo com os requerimentos da USP-NF e do ICH. O método desenvolvido apresentou capacidade de separação de vinte compostos detectados nas amostras envolvidas no estudo: o princípio ativo ondansetrona, sete impurezas descritas nos principais compêndios farmacopéicos mundiais (United States Pharmacopeia-National Formulary, European Pharmacopoeia, British Pharmacopoeia e Indian Pharmacopoeia), onze compostos de degradação gerados pelos estudos de estresse e um excipiente. O método final apresentou um tempo de corrida de 14 minutos, com vazão de fase móvel de 0,4 mL/min, detecção de impurezas por ultravioleta a 220 nm e do princípio ativo a 305 nm, com apoio da detecção por espectrometria de massas de alta resolução (QTOF). Em comparação aos métodos requeridos pelas monografias relacionadas à ondansetrona publicadas nos compêndios farmacopéicos citados, o método desenvolvido apresenta uma alternativa eficiente e econômica para a análise de rotina de diferentes formas da matéria-prima ondansetrona (base, cloridrato, diferentes níveis de hidratação) e formas farmacêuticas (comprimidos, comprimidos de desintegração oral e solução injetável), mostrando que a modernização dos métodos cromatográficos, além de garantir a qualidade dos produtos farmacêuticos e promover a saúde da população, tem um impacto relevante na economia da produção e análise de medicamentos e na diminuição do impacto ao meio ambiente / An analytical method by ultraperformance liquid chromatography and detection by UV and mass spectrometry for assay and limit test for impurities and degradation compounds for the active pharmaceutical ingredient ondansetron and three different pharmaceutical products was developed using the analytical Quality by Design (aQbD) approach, and was validated according to the USP-NF and ICH requirements. The analytical method was efficient for the separation of twenty different compounds, detected in the samples involved in this study: the active ingredient ondansetron, seven impurities mentioned in the main global pharmacopeial compendia (United States Pharmacopeia-National Formulary, European Pharmacopoeia, British Pharmacopoeia e Indian Pharmacopoeia), eleven degradation compounds detected in the samples from stress studies and one excipient. The final method was composed by a 14 minutes run, using mobile phase flow at 0.4 mL/min, detection by UV at 220 nm for the impurities and degradation compounds and at 305 nm for ondansetron, supported by the high-resolution mass spectrometry detection (QTOF). Comparing the method developed with the chromatographic methods required by the monographs related to ondansetron published in the mentioned pharmacopeial compendia, it represents an efficient and economic alternative to the routine analysis of different ondansetron raw material forms (base, hydrochloride, different hydrates) and pharmaceutical products (tablets, orally disintegrating tablets and injectable), demonstrating the importance of the modernization of analytical procedures, with regard to not only the quality assurance of pharmaceutical products and promotion of public health, but also to the positive impact on the economy and sustainability of the pharmaceutical analysis and manufacturing.