O presente estudo foi dividido em duas fases; a primeira visou avaliar o desempenho de diversos meios de cultura, para fungos, no ar de ambientes de produção de alimentos, através da resposta de contagem e identificação dos gêneros que podem conter espécies indesejáveis; também foi avaliada a condição ambiental juntamente com a contagem total de bactérias. O ambiente de duas áreas foi utilizado para a pesquisa, uma indústria de doces, produção de doce de leite e doce de amendoim, na Cidade de Ribeirão Preto (SP) e, outra, uma indústria de embutidos, nos setores de empacotamento e produção, na Região de Piracicaba (SP). Os meios de cultura utilizados foram: "ichloran Rose Bengal Chloramphenicol Ágar" RBC), "Sabouraud Dextrose a 4% Ágar", "Malt Ágar" (MA), "Malt Extract Agar – Yeast and Molds" (MEAYM), "Plate Count Ágar-Cloranfenicol" (PCA-Cloranfenicol), "Dichloran 18% Glycerol Ágar" (DG 18), Batata Dextrose Ágar (BDA) e "Oxytetracycline Glucose YeastAgar" (OGY); para a contagem de bactérias foi utilizado o meio "Plate Count Agar" (PCA). Cada um dos pontos foi amostrado em triplicata utilizando um amostrador de impactação linear. A segunda fase do projeto avaliou os meios de cultura "Dichloran Rose Bengal Chloramphenicol Ágar" (DRBC), "Sabouraud Dextrose a 4% Ágar" selecionados da primeira fase. Novas coletas foram realizadas amostrando cinco repetições em cada um dos pontos, que permaneceram os mesmos da primeira fase. Em paralelo foram utilizadas culturas puras de Aspergillus flavus, Aspergillus fumigatus, Aspergillus niger, Aspergillus parasiticus, Fusarium moniliforme, Fusarium verticulloides, Histoplasma capsulatum e Stachybotrys chartarum, inoculando os dois meios selecionados e avaliando o desenvolvimento desses fungos ao longo do período de incubação de sete dias, a 28ºC, para servir de parâmetro de comparação com as coletas de ar realizadas no mesmo período, a fim de se verificar se algum desses fungos indesejáveis estaria presente nas amostras de ar. De acordo com os resultados obtidos, os meios DRBC e Sabouraud Dextrose a 4% Ágar, foram, estatisticamente, melhores que os demais meios testados, apresentando um maior número de unidades formadoras de colônias/m3. O meio de Extrato de Malte diferenciou estatisticamente dos demais e teve o menor desempenho para a quantificação desses microrganismos no ar. A recomendação do melhor meio para identificação de fungos no ar de indústrias alimentícias não foi conclusiva, com exceção do PCA-Cloranfenicol que apresentou baixa diversidade de gêneros, sendo considerado reprovado. No geral foi observado um número elevado de unidades formadoras de colônias de fungos e bactérias/m 3 durante as amostragens. A avaliação quali-quantitativa dos ambientes estudados sugere que esses não se encontram em condições adequadas, sendo necessária a elaboração de um padrão referencial para o monitoramento da indústria alimentícia em nosso país. O amostrador utilizado nas coletas promoveu rapidez nas coletas e proporcionou a expressão dos resultados em medidas confiáveis, por ser um equipamento que permite calibração em seu sistema de aspiração de ar. / The present study consisted of two phases. The first one aimed at evaluating the performance of different culture media for fungi found in the air of food production environments, through the results of counting and identifying genders that may contain undesirable species. The environmental condition was also evaluated along with a total bacteria counting. The present work took place in two different places, an industry which produces sweets made from milk or peanuts, in Ribeirao Preto city (SP) and, in the packing and production sections of a meat encased products industry located in Piracicaba region (SP). The culture media used were: "Dichloran Rose Bengal Chloramphenicol Agar (DRBC)", "Sabouraud Dextrose 4% Agar (MA)", "Malt Extract Agar – Yeast and Molds (MEAYM)", "Plate Count Agar – Chloramphenicol (PCA-Chloramphenicol)", "Dichloran 18% Glycerol Agar (DG 18)", "Potato Dextrose Agar (BDA)" and "Oxytetracycline Glucose Yeast Agar (OGY)". The medium used for the bacteria counting was "Plate Count Agar (PCA)". Three replicates of each sampled spot were obtained by using a linear impacting sampler. The second phase of this project evaluated the following culture media, selected during the first phase of this study: "Dichloran Rose Bengal Chloramphenicol Agar (DRBC)" and "Sabouraud Dextrose 4% Agar". New sample collections (five replicates) were carried out for each of the spots selected. The sampled spots were the same for both phases. In a parallel manner, pure cultures of Aspergillus flavus, Aspergillus fumigatus, Aspergillus niger, Aspergillus parasiticus, Fusarium moniliforme, Fusarium verticulloides, Histoplasma capsulatum and Stachybotrys chartarum were employed to inoculate the two selected media. The development of these fungi was evaluated throughout a 7-day-incubation period, at 28ºC, to function as a comparative reference for the air samples obtained in the same period in order to verify if any of these undesirable fungi was present in the air samples. According to the results obtained, DRBC and Sabouraud Dextrose 4% Agar media were statistically superior than the others, presenting a higher number of colony forming units/m3. The Malt Extract medium was statistically different from the others and showed the worse performance as to the quantification of microorganisms present in the air. There was no conclusive recommendation as to the best medium for the identification of fungi found in the air of food industries, except for PCA-Chloramphenicol, which showed low diversity of genders and was discarded. In general, a high number of fungi and bacteria colony forming units/m3 was observed during the sampling procedures. The qualitative-quantitative evaluation of the environments studied suggests that they do not present adequate conditions, evidencing the need for the establishment of a referential standard in order to monitor food industries in our country. The sampler used in this work allowed a quick sample collection and a reliable expression of results, as this equipment enables the calibration of its air intake system.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-06-13T12:50:57Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 739948 bytes, checksum: e22b7ad0fc203f73756f4e4f2c810e59 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-13T12:50:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 739948 bytes, checksum: e22b7ad0fc203f73756f4e4f2c810e59 (MD5) Previous issue date: 2018-03-14 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Biofilmes bacterianos formados em áreas de processamento de alimentos podem se tornar fonte de contaminação cruzada. Dessa forma, torna-se importante a correta manipulação das matérias-primas que chegam até a indústria, além do uso adequado de sanitizantes no processo de higienização de equipamentos e superfícies. Objetivou-se com este estudo avaliar a formação de biofilme e potencial de biotransferência de Pseudomonas aeruginosa em aço inoxidável, em contato com leite integral UHT e caldo de vegetais. E o efeito de três surfactantes, em concentrações abaixo, próxima e acima da concentração crítica de micelas, na redução de biofilmes. Cada meio de cultivo foi inoculado com P. aeruginosa ATCC 15442, distribuídos em poços de microplaca contendo cupons de aço inoxidável AISI 304 # 4 e incubados a 15 °C. O número de células aderidas foi determinado após 24, 48, 72, 96 e 120 h e o potencial de biotransferência a partir de 48 h. Soluções de cloreto de benzalcônio (CB), dodecilbenzeno sulfonato de sódio (DBSS) e Tween 80 foram avaliados sobre os biofilmes formados por 72 h. Cupons de aço, antes e após os tratamentos, foram observados por microscopia confocal de varredura a laser. Verificou-se que, apesar do leite integral conter maior concentração de nutrientes em relação ao caldo de vegetais, não houve diferença na formação de biofilme de P. aeruginosa. O potencial de biotransferência do micro-organismo aos meios de cultivo foi observado durante todo o período avaliado. As soluções surfactantes mostraram-se eficientes na redução do número de células aderidas com o aumento da concentração, principalmente o CB. Tween 80 e DBSS reduziram menos de 2 log UFC∙cm -2 de células viáveis, enquanto o CB reduziu até 6 log UFC∙cm -2 . A partir dos resultados obtidos verificou-se que P. aeruginosa pode produzir biofilmes em superfície utilizada no processamento de alimentos, independente do tipo de resíduo alimentar presente. Os surfactantes aplicados apresentaram melhor eficiência em concentrações mais elevadas, acima da crítica de micelas, e a classe desses agentes também contribuiu para a redução das células aderidas. / Bacterial biofilms formed in food processing areas can become a source of cross-contamination. Thus, the correct handling of the raw materials coming into the industry becomes important, as well as the proper use of sanitizing in the cleaning process of equipment and surfaces. The aim of this study was to evaluate the biofilm formation and biotransferential potential of Pseudomonas aeruginosa in stainless steel, in contact with UHT whole milk and vegetable broth. Also, it was evaluated the effect of three surfactants at concentrations below, above and near the critical micelle concentration, in the reduction of biofilms. Each culture medium was inoculated with P. aeruginosa ATCC 15442, distributed in microplate wells containing stainless steel coupons AISI 304 # 4 and incubated at 15 °C. The number of adhered cells was determined after 24, 48, 72, 96 and 120 h and the potential of biotransference after 48 h. Benzalkonium chloride (BAC), sodium dodecylbenzene sulfonate (SDBS) and Tween 80 solutions were evaluated on biofilms formed for 72 h. Steel coupons, before and after treatments, were observed by confocal laser scanning microscopy. It was verified that, although the milk had higher concentration of nutrients in relation to the vegetable broth, there was no difference in the formation of P. aeruginosa biofilm. The biotransfer potential of the microorganism to the culture media was observed throughout the evaluated period. The surfactant solutions were efficient in reducing the number of cells adhered with the concentration increase, mainly of the BAC. Tween 80 and SDBS reduced less than 2 log CFU∙cm -2 of viable cells, while BAC reduced up to 6 log CFU∙cm -2 . From the results obtained it was verified that P. aeruginosa can produce biofilms on the surface used in food processing, regardless of the type of food residue present. The applied surfactants presented better efficiency at higher concentrations, above the critical micelle, and the class of these agents also contributed to the reduction of the adhered cells.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Ripening is the phase which determines the aroma and flavour of a mature cheese, and it demands special care. One of these cares is the prevention of fungi development on its surface. The objective of this study was to control the development of fungi during maturation of Minas standard cheese, through the use of two anti-fungi in aqueous solution, after the salt process. The treatments included the control, natamicine at 0,05% and 0,1% concentrations, and the sorbate of potassium at 25% and at 30%. Physical - chemical and microbiological analysis were realized. The experiment was submitted to sensorial analysis by a non-trained panel. The results have shown that the natamicine, as well as, the potassium sorbate have retarded the microbic development, and did not affect, significantly, the sensorial quality of the cheese. However, it was concluded that the most effective treatment to prevent fungi development in Minas standard cheese was the potassium sorbate at 30%, because in the three analysis period was observes the least mould and yeast development than other treatments. / A maturação é a fase que determina o aroma e sabor de um queijo maturado, e exige cuidados especiais. Um destes cuidados é a prevenção do crescimento de fungos na sua superfície. O presente trabalho teve como objetivo controlar o crescimento de fungos durante a maturação do queijo Minas padrão, através do uso de dois antifúngicos em solução aquosa, após a salga. Os tratamentos constaram do controle, da natamicina nas concentrações de 0,05 % e 0,1 % e o sorbato de potássio a 25 % e a 30 %. Realizou-se análises físico-químicas e microbiológicas. O experimento foi submetido à análise sensorial por um painel não treinado. Os resultados demonstraram que tanto a natamicina como o sorbato de potássio retardaram o crescimento microbiano e não afetaram, de forma significativa, a qualidade sensorial dos queijos. Entretanto, conclui-se que o tratamento mais eficiente para prevenção do desenvolvimento de fungos em queijo Minas padrão foi o sorbato de potássio a 30 %, pois nos três períodos de análise observou-se a menor contagem de bolores e leveduras comparando com os outros tratamentos.

A análise microbiológica atua como ferramenta fundamental para a obtenção de dados sobre a qualidade, sanidade, higiene e segurança na produção de alimentos; desta forma, tem sido adotada na indústria alimentícia para o controle de qualidade. Por sua composição completa e balanceada, o leite é um substrato ideal para o desenvolvimento de diversos grupos de microrganismos. Com o objetivo de pesquisar bactérias da espécie Bacillus cereus em amostras de leite fluido, bem como a capacidade de germinação de esporos e a multiplicação dessa bactéria após processo de fervura, com manutenção das amostras à temperatura ambiente e à temperatura de refrigeração por períodos de 1, 2, 4, 6, 8, 10 e 12 horas, foram analisadas 75 amostras de leite, conforme as metodologias recomendadas por Silva et al. (2007). Destas, 46 amostras (61,3%) mostraram-se com algum grau de contaminação pela bactéria antes de serem submetidas à fervura. Por sua vez, as amostras mantidas à temperatura ambiente após a fervura, tiveram suas contagens bacterianas, principalmente a partir da 8a hora, superiores à contagem inicial, inclusive atingindo níveis capazes de desencadear uma toxinfecção alimentar, demonstrando a ocorrência da germinação dos esporos e a multiplicação das células vegetativas. Por outro lado, alíquotas dessas mesmas amostras mantidas sob refrigeração (7ºC) não atingiram populações preocupantes, enfatizando, desse modo, a importância da necessidade da refrigeração do leite após a fervura. / The microbiological analysis acts as basic tool for the attainment of data on the quality, health, hygiene and security in the food production, in such a way, she has been adopted in the nourishing industry for the quality control. For its complete and balanced composition, milk is an ideal substratum for the development of diverse groups of microorganisms. With the objective to search cereus bacteria of the Bacillus species in fluid milk samples, as well as the capacity of germination of spores and the multiplication of this bacterium after boil process, with maintenance of the samples to the ambient temperature and the temperature of refrigeration for periods of 1, 2, 4, 6, 8, 10 and 12 hours, 75 milk samples had been analyzed, as the methodologies recommended for Silva et al. (2007). Of these, 46 samples (61.3%) had revealed with some degree of contamination for the bacterium before being submitted to the boil. In turn, the samples kept to the ambient temperature after the boil, had its bacterial countings, mainly from 8a hour, superiors to the initial counting, also reaching levels capable to unchain an alimentary toxinfection, demonstrating to the occurrence of the germination of the spores and the multiplication of the vegetative cells. On the other hand, aliquot of these same samples kept under refrigeration (7ºC) had not reached preoccupying populations, emphasizing, in this manner, the importance of the necessity of the refrigeration of milk after the boil.

Made available in DSpace on 2016-05-02T13:55:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rafaela Bergamnn Strada de Oliveira -texto completo.pdf: 165879 bytes, checksum: 16f4ae2af5ae0b292cf9953ec0fb7dbd (MD5) Previous issue date: 2005-02-21 / Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de Nïvel Superior / Probiotics are supplementary foods produced by living microorganisms that improve animal health by promoting balance of the intestinal microbiota To be considered probiotic the microorganism must either be a normal inhabitant of the gastrointestinal tract survive the passage through the stomach resist the action of digestive enzymes and bile and keep its viability and metabolic activity in the intestines Kefir is a probiotic made by several bacteria and yeasts encapsulated in a polyssacharide matrix and looking like jelly grains Traditional kefir is a byproduct of milk resulting from double fermentation alcoholic and lactic There are two kinds of kefir sugary in aqueous fermentation and milky Kefir grains and their supernatant are composed of microorganisms polysacharides aminated molecules vitamins aminoacids peptides ethanol and volatile compounds Kefir is known to have diverse microbial contents depending on country and fermentative substrates what causes distinct probiotic effects So the purpose of this paper was to isolate identify quantify and characterize the microorganisms of kefir samples including the kefir added to food pellets for rabbits Serial dilutions of distinct kefir sources (fermented suspension lyophilized grains) and mixed pellets were plated in Rogosa agar (AR) and De Man Rogosa and Sharpe (MRS) for Lactobacillus Brain Heart Infusion (BHI) for total bacteria Sabouraud-glucose for yeast and filamentous fungi thioglycolate for Streptococcus Acetobacteria and Leuconostoc coconut water agar (AAC) and coconut water agar supplemented with yeasts (AACE) In pellet analysis plating with Mitis Salivarius agar (Streptococcus) EMB35ºC (total enterobacteria) and EMB45ºC (fecal enterobacteria) were also used Genus and species of all strains were identified through usual biochemical reactions and specific API systems In general literature recognize the existence of differences in kefir microbial contents depending on the source of the grains but the kefir of this study has a microbial composition similar to the one described in the literature and also shows other microorganisms not reported yet The data obtained with the AAC and AACE media suggested that both substrates are alternative and salutary media for culture of kefir strains / Os alimentos probióticos são suplementos alimentares elaborados à base de microrganismos vivos que quando ingeridos em determinado teor afetam beneficamente o animal hospedeiro promovendo um balanço da microbiota intestinal O microrganismo para ser considerado probiótico deve ser habitante normal do trato gastrintestinal sobreviver à passagem pelo estômago manter a viabilidade e atividade metabólica no intestino O quefir enquadra-se no grupo dos alimentos probióticos O quefir tradicional é um subproduto do leite resultante de dupla fermentação alcoólica e láctica proporcionada pelos grãos do quefir-conglomerado de organismos vivos-constituindo microecossistemas apresentando complexos processos simbióticos Existem dois tipos de quefir açucarado em fermentado aquoso e lácteo Os grãos de quefir e seu sobrenadante são compostos de microrganismos polissacarídeos moléculas aminadas vitaminas álcool e substâncias voláteis Sua composição microbiológica é bastante variável o que resulta em distintos perfis de bioprodutos e conseqüente ação probiótica Este trabalho teve por objetivo isolar quantificar e caracterizar os microrganismos presentes em amostras de quefir e os estabilizados em ração comercial para consumo em cunicultura O processo de quantificação microbiana do quefir liofilizado do quefir total (suspensão e grãos) e da ração misturada ao quefir foi realizado através de diluições decimais plaqueadas nos meios Ágar Rogosa (AR) e De Man Rogosa e Sharpe (MRS) para Lactobacillus "Brain Heart Infusion" (BHI) para contagem global de bactérias Sabouraud glicose(para leveduras e fungos filamentosos) Tioglicolato para Estreptococos Acetobacter e Leuconostoc e Ágar Água-de-Coco (AAC) e Ágar Água-de-Coco com Extrato de Leveduras (AACE) para crescimento de gêneros diversos (grão suspensão e liofilizado) Utilizaram-se também os meios Ágar Mitis Salivarius (para Streptococcus) o EMB35ºC (coliformes totais) e EMB45ºC (coliformes fecais) para a análise das rações Para a identificação de gêneros e espécies foram utilizadas provas bioquímicas convencionais além de galerias API específicas Concluiu-se que a microbiota do quefir não é igual em todos os aspectos se comparada com a literatura disponível existindo vários fatores que influenciam na sua composição sendo que o quefir em estudo possui microrganismos semelhantes aos da literatura existente apresentando também algumas particularidades ainda não descritas As bactérias encontradas foram Leuconostoc ssp Lactobacillus lactis cremoris Chyseomonas luteola e Acetobacter As leveduras encontradas foram Sacharomyces cerevisae Candida colliculosa Toruspola delbruechii Candida inconspicua Candida magnoliae Kloekera sp Candida famata Kluyveromices lactis Kluyveromices marxianus e Candida quefir O meio Ágar Água-de-Coco demonstrou um bom crescimento para microrganismos sendo indicado como meio de cultivo alternativo com melhor resultado se acrescido de extrato de leveduras O quefir no estado liofilizado foi o que apresentou a contagem de bactérias mais elevada possivelmente em virtude de sua concentração

A presença de Salmonella em 200 amostras de alimentos crus de origem animal foi investigada empregando-se os dois ensaios imunoenzimáticos rápidos TECRA™ Salmonella VIA e TECRA™ Salmonella UNIQUE (TECRA Diagnostics, Rosewille, NSW, Australia) e o método de cultura convencional empregado rotineiramente no Instituto Adolfo Lutz, São Paulo, SP. Quarenta e cinco amostras (22.5%) foram Salmonella positivas por pelo menos um dos três métodos. O número de amostras positivas de acordo com o método analítico foi 34 (75,6%) para o método de cultura convencional, 29 (64,4%) para TECRA™ Salmonella VIA e 27 (60.0%) para TECRA™ Salmonella UNIQUE. O método de cultura convencional detectou quatro amostras positivas não detectadas por nenhum dos outros dois métodos rápidos. TECRA™ Salmonella UNIQUE detectou sete amostras positivas não detectadas pelos demais métodos. Uma amostra foi positiva apenas pelo método TECRA™ Salmonella VIA. Considerando todos os resultados (positivos e negativos) o teste de qui quadrado de McNemar indicou que as diferenças entre os resultados obtidos pelos métodos rápidos, quando comparados aos obtidos pelo método convencional, não foram estatisticamente significativas (p>0.05). / The presence of Salmonella in 200 raw food samples of animal origin was investigated by means of rapid immunoassays TECRA™ Salmonella VIA and TECRA™ Salmonella UNIQUE (TECRA Diagnostics, Rosewille, NSW, Australia) and the cultural procedure used routinely in Instituto Adolfo Lutz, Sao Paulo, SP. Forty-five samples (22.5%) were Salmonella positive by at least one of the three methods. The number of positive samples according to the analytical method was 34 (75.6%) for the cultural procedure, 29 (64.4%) for TECRA™ Salmonella VIA and 27 (60.0%) for TECRA™ Salmonella UNIQUE. The cultural method detected four positive samples that both rapid methods were unable to detect. TECRA™ Salmonella UNIQUE detected seven positive samples that were not detected by the two other methods. One sample was positive by the TECRA™ Salmonella VIA exclusively. Considering overall results (positive and negative) McNemar\'s chi square tests indicated that the differences between results given by the rapid immunoassays when compared to those of the cultural method were not significant (p>0.05).

A demanda por frutas e hortaliças frescas, associada à necessidade de maior praticidade da vida atual, está causando um aumento no interesse, por parte dos consumidores, nos produtos minimamente processados (MP). Processamento mínimo inclui as operações de lavagem, corte, descascamento e embalagem do produto. Entre os microrganismos patogênicos que, potencialmente, podem ser transmitidos por vegetais MP citam-se: Listeria monocytogenes, Escherichia coli O157:H7 e Salmonella sp. A pesquisa destes microrganismos é usualmente demorada mas, a cada dia, novos métodos para detecção rápida de patógenos em alimentos são lançados no mercado. Dentre estes métodos, aqueles que empregam ferramentas moleculares têm se tornado mais populares, cabendo destacar os que empregam a reação de polimerização em cadeia (PCR). Para a pesquisa de Listeria monocytogenes existe no mercado o sistema automatizado BAX®System que permite a detecção de L. monocytogenes em, no máximo, 54 h. Neste estudo, buscou-se avaliar a microbiota de vegetais folhosos MP além do emprego do sistema BAX® para a detecção de L. monocytogenes nestes produtos. Foram examinadas, no período de março a julho de 2003, 181 amostras de saladas MP coletadas em diferentes estabelecimentos comerciais no município de São Paulo, SP. Em 133 amostras foram feitas determinações das populações de coliformes totais e fecais, Enterobacteriaceae, microrganismos psicrotróficos aeróbios e pesquisa de Salmonella sp. L. monocytogenes foi pesquisada nas 181 amostras empregando-se o sistema BAX® e, paralelamente, a semeadura do caldo de enriquecimento em placas contendo ágar Palcam e Oxford, com a identificação das colônias suspeitas através de testes bioquímicos tradicionais. Das 133 amostras, 51% apresentaram populações de microrganismos psicrotróficos aeróbios > 106 UFC/g e 42% apresentaram populações de Enterobacteriaceae entre 105 – 106 UFC/g. Coliformes fecais estiveram presente em populações superiores a 102 UFC/g em 97 amostras (73%) e Salmonella foi detectada em 4 amostras (3%). L. monocytogenes estava presente em 1 (0.6%) amostra de espinafre das 181 amostras examinadas, tendo sido detectada, simultaneamente, por ambos os métodos empregados. As outras espécies de Listeria encontradas, empregando-se a semeadura em placa foram: L. welshimeri (1 amostra de alface mimosa) e L. innocua (2 amostras de agrião). Os resultados indicam que grande parte dos vegetais MP examinados, apresentaram qualidade microbiológica deficiente e podem ser veículos de patógenos como a Salmonella. O BAX®System é de grande utilidade para as análises de vegetais MP, que permite a obtenção de resultados mais rapidamente que o método tradicional, sem perda na sensibilidade e na especificidade. / The increasing demand for fresh fruits and vegetables, associated with the desire of convenient goodies, is causing an expansion on the market share of minimally processed products (MP). Minimal processing includes operations such as washing, cutting, peeling and packaging of the product. Amongst pathogenic microorganisms that can be transmitted by MP vegetables are: Listeria monocytogenes (Lm), Escherichia coli O157:H7 and Salmonella sp. Searching for these microorganisms is labor intense and time-consuming, however new methods for fast detection of pathogens are commercially available. Methods employing molecular technology are becoming more popular and the polymerase chain reaction (PCR) is now a good choice. There is an automatized PCR system (BAX®System) that can be used for Lm detection in up to 54 h. The aims of this study was to evaluate the microflora of MP vegetables and to evaluate the effectiveness of the BAX®System for screening Lm on those products. From March to July 2003, 181 samples of MP salads were collected at retail level in the city of São Paulo, SP. Total and faecal coliforms, Enterobacteriaceae, psychrotrophic microorganisms enumeration and Salmonella evaluation were conducted in 133 samples. L. monocytogenes was assessed in 181 samples using the BAX®System and also by plating the enrichment broth onto palcam and Oxford agars. Suspected colonies of Listeria were submited to classical biochemical tests. Population of psychrotrophic microorganisms >106 CFU/g was observed in 51% of the 133 samples and Enterobacteriaceae population between 105 - 106 CFU/g was in 42%. 97 samples (73%) showed population of faecal coliforms >102 CFU/g (Brazilian standard) and Salmonella was detected in 4 samples (3%). L. monocytogenes was detected in 1 spinach sample (0,6%) out of the 181 examined MP vegetables. This positive sample was simultaneously detected by both methods. The other Listeria species identified by plating were L. welshimeri (1 sample of curly lettuce) and L. innocua (2 watercress samples). The results indicate that the MP vegetables had poor microbiological quality and could be vehicle of pathogens such as Salmonella. BAX®System showed good specificity and sensitivity when used for vegetable analysis and was easier to perform and faster than the classical method.

A preocupação constante com a inocuidade e a qualidade dos alimentos irradiados, aliada à tendência de se estudar os aspectos sensoriais desses alimentos, foram a motivação para o desenvolvimento deste trabalho que teve como objetivos verificar os efeitos da radiação ionizante produzida pelo 60Co na sobrevivência de Salmonella sp em hambúrgueres de carne de frango congelados e verificar a aceitação do produto irradiado durante o seu período de estocagem. Amostras de hambúrguer de carne de frango congelados, inoculados com quatro cepas diferentes de Salmonella sp foram expostos a níveis de radiação com doses variando entre O e 3,5 kGy para verificação da sobrevivência da população de Salmonella sp presente. Amostras não inoculadas e irradiadas com doses de 0,5 e 7 kGy foram submetidas à avaliação sensorial por painel não treinado, pelo período de 120 dias, com o intuito de se verificar o decaimento da qualidade do produto. Os valores D10 encontrados para Salmonella sp variaram entre 1,02 e 1,32 kGy, portanto, as doses de 5 e 7 kGy, utilizadas nas fases seguintes do experimento, seriam suficientes para reduzir a população de Salmonella sp no produto em 5-6 ciclos logarítmicos. A exposição às doses de 5 e 7 kGy não afetou as características sensoriais do produto. A vida de prateleira do hambúrguer de carne de frango congelado e irradiado com doses de 5 e 7 kGy foi de, no mínimo, 120 dias, ou seja, igual à do produto não irradiado. / Safety and quality of irradiated foods are still of great concern to researchers and consumers, in general. The aims of this research were to study the effects of ionizing radiation from 60Co on the population of Salmonella sp inoculated in frozen chicken meat patties as well as on their sensory characterisitcs during the storage period. Samples of frozen chicken meat patties, inoculated with a pool of four strains of Salmonella sp, were exposed to irradiation doses varying from 0 to 3.5 kGy in order to determine their sensitivity (D10). Non inoculated samples of frozen chicken meat patties exposed to 5 and 7 kGy and a non inoculated and non irradiated sample were submitted to sensory evaluation by a non-trained panel. 010 values varied from 1.02 to 1.32 kGy Samples exposed to 5 and 7 kGy did not showed appreciable changes during the storage period of 120 days. Therefore, irradiation can be applied to chicken meat patties in order to improve their safety during a storage period of, at least, 120 days.

Clostridium perfringens é um dos microrganismos mais freqüentemente envolvidos em surtos de enfermidades transmitidas por alimentos. Este microrganismo pode ser classificado em cinco tipos toxigênicos (A-E), de acordo com a detecção dos genes codificadores de suas principais toxinas: alfa (cpa), beta (cpb), épsilon (etx) e iota (iap), sendo que técnicas moleculares empregando a PCR são atualmente utilizadas para genotipagem desses isolados. Alguns isolados de C. perfringens produzem uma enterotoxina (CPE) que é responsável pelos sintomas clínicos desenvolvidos em casos de toxinfecção alimentar, sendo que esta toxina é codificada pelo gene cpe. A simples detecção de C. perfringens em um alimento, mesmo naqueles suspeitos de causar surtos, não é suficiente para considerá-lo como de risco à saúde do consumidor. Isto porque dentre os isolados de C. perfringens apenas um número muito pequeno apresenta o gene cpe. Além disso, isolados de C. perfringens não produtores de CPE estão amplamente disseminados no ambiente, em alimentos e mesmo em fezes de pessoas. Desta forma, com o presente estudo verificou-se a freqüência de C. perfringens dentre isolados de clostrídios sulfito redutores, a freqüência de C. perfringens potencialmente enterotoxigênicos e sua variabilidade genética, de modo a evidenciar a importância dessas cepas como causadoras de doenças, além de fornecer subsídios para melhorar os conhecimentos sobre as características das cepas circulantes em nosso meio. Foram utilizados 335 isolados de clostrídios sulfito redutores provenientes de alimentos (126), solo (84) e fezes de animais (125). Dos 335 isolados, 146 (43,6%) foram caracterizados, através de reações bioquímicas e moleculares, comoC. perfringens, sendo 75 isolados (59,5%) provenientes de alimentos, 43 (51,2%) de solo e 28 (22,4%) de fezes de animais. Todas as cepas de C. perfringens analisadas foram tipadas como C. perfringens tipo A. Dos 75 isolados de C. perfringens provenientes de alimentos, 20 apresentaram o gene cpe, sendo 13 (65%) com localização cromossomal; nas demais cepas não foi possível determinar sua localização. Nos isolados de C. perfringens provenientes de solo e das fezes de animais não se verificou a presença desse gene. Das 20 cepas de C. perfringens que apresentaram o gene cpe detectou-se em 15 a produção de enterotoxina; as cinco cepas restantes não apresentaram esporulação no meio DUNCAN STRONG modificado, não sendo possível avaliar sua atividade enterotoxigênica. As 146 cepas de C. perfringens quando submetidas à PFGE geraram 69 perfis PFGE distintos, sendo 42 exclusivos para uma única cepa, indicando uma grande variabilidade genética, entre isolados provenientes de amostra de alimentos, fezes ou solo. A utilização de clostrídios sulfito redutores, ou mesmo de C. perfringens como indicador de possível risco à saúde dos consumidores pode levar à condenação desnecessária de alimentos, uma vez que existe baixa correlação entre costrídios sulfito redutores e C. perfringens, independente da fonte de isolamento, além da baixa freqüência do gene cpe nas cepas estudadas. / Clostridium perfringens is one of the most frequently microorganism involved in outbreaks of foodborne diseases. This microorganism can be classified into five toxigenic types (A to E), according to the detection of genes encoding its major toxins: alpha (cpa), beta (cpb), epsilon (etx) and iota (iap). Molecular techniques using PCR are currently used for genotyping this isolates. Besides the major toxins, some isolates of C. perfringens produce an enterotoxin (CPE) that is responsible for clinical symptoms developed in cases of food poisoning. This enterotoxin is encoded by the cpe gene. The simple detection of C. perfringens in food, even in those suspected of causing outbreaks, is not enough to consider it as a risk to consumers´ health. This happens because among the isolates ofC. perfringens only a very small number shows the cpe gene. In addition, isolates of C. perfringens that do not produce CPE are widespread in the environment, food and even in feces of humans. Thus, the present study examined the frequency of C. perfringens isolates among sulfite reducing clostridia, the frequency of potentially enterotoxigenic C. perfringens and its genetic variability in order to highlight the importance of these strains in causing diseases, and provides subsidies to improve the knowledge about the strains that are circulating in our environment. A total of 335 isolates of sulfite reducing clostridia from foods (126), soil (84) and animal feces (125) were used. Among the 335 isolates, 146 (43.6%) were characterized by biochemical and molecular reactions as C. perfringens, being 75 (59.5%) from foods, 43 (51.2%) from soil and 28 (22.4%) from animal feces. All strains of C. perfringens were typed as C. perfringens type A. Of the 75 isolates of C. perfringens from food, 20 had the cpe gene, and in 13 (65%) the gene was chromosomally located. In the other strains it was not possible to determine the location of this gene. In isolates of C. perfringens from soil and animal feces the cpe gene was not present. Amongst the 20 strains of C. perfringens positive for cpe, enterotoxin production was detected in 15. Five strains showed no sporulation in the medium modified Duncan Strong, being not possible to verify their enterotoxigenic activity. All C. perfringens were subjected to PFGE and generated 69 different PFGE profiles, being 42 unique to a single strain, indicating a great genetic variability among isolates from food, feces or soil. The use of sulfite reducing clostridia, or even C. perfringens as an indicator of possible health risk to consumers can lead to unnecessary condemnation of food, since there is low correlation between sulfite reducing clostridia and C. perfringens, regardless of source of isolation. This study also shows a low frequency of cpe gene in the strains indicating the low risk in causing foodborne disease.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:23:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Pabline Chediak Spini Santos.pdf: 3128269 bytes, checksum: a46ac7942c153b3e6caff9051d9abe5b (MD5) Previous issue date: 2011-04-05 / The guarantee of adequate nutrition is a right that must be provided to all Brazilians, and in a hospital environment this is no different. Thinking about this, the This work aimed to assess the hygienic and sanitary conditions of the food services from four state hospitals in Goiânia and its metropolitan area, Goiás. Thus, there was a diagnosis of physical and functional conditions of these establishments and microbiological quality of food produced by themselves. Data were collected between the months of September of 2009 and March of 2010. The physico-functional conditions were identified using a check-list, pre-tested, prepared according to the Brazilian legislation. To proceed the microbiological analysis were collected samples from six or seven preparations, according to the day‟s menu in three random visits on different days, totaling 74 samples, of the standard oral meal offered in lunch at each hospital. As for the physical-functional, three of the establishments were classified as "Approved", reaching the attendance of more than 76% compliance of the evaluated items, and one was classified as "Not Approved". Regarding microbiological analysis, in each one of the hospitals studied was found at least one contaminated sample. From a total of 74 preparations examined, 13.5% were contaminated by at least one microorganism over the limit set by law. In two samples was the presence of more than one sort of bacteria. Although only one of the food services from the hospitals surveyed has been classified as " Not Approved" in all of them were detected nonconformities in many aspects as in the building, premises, conservation of the areas of foreign and domestic establishments in addition to the inefficient control of food quality during their processing. All these non-conformities found in both the physical and functional aspects contribute to the finding of contamination by pathogenic microorganisms in food in every hospitals surveyed what constitutes a potential risk to the clientele of these hospitals in the public health system. / A garantia de alimentação adequada é um direito que deve ser assegurado a todos os brasileiros e, em um ambiente hospitalar, isto não é diferente. Pensando nisto, o objetivo deste trabalho foi avaliar as condições higiênico-sanitárias de Unidades de Alimentação e Nutrição de quatro hospitais estaduais de Goiânia e região metropolitana, Goiás. Assim, realizou-se um diagnóstico das condições físico-funcionais destes estabelecimentos e da qualidade microbiológica das refeições produzidas pelos mesmos. Os dados foram coletados entre os meses de setembro de 2009 a março de 2010. As condições físico-funcionais foram estudadas utilizado-se um check-list, previamente testado, elaborado de acordo com a legislação sanitária vigente no Brasil. Para procedimento das análises microbiológicas foram coletadas amostras de seis ou sete preparações, de acordo com o cardápio do dia da coleta, em três visitas aleatórias, em dias distintos, totalizando 74 amostras das preparações da Dieta Livre oferecidas na refeição almoço de cada hospital. Quanto às condições físico-funcionais, três dos estabelecimentos foram classificados como Aprovado , alcançando o atendimento de conformidade em mais de 76% dos itens avaliados e um deles foi classificado como Reprovado . Quanto às análises microbiológicas, em cada um dos hospitais analisados foi encontrada, pelo menos, uma amostra contaminada. Do total das 74 preparações analisadas, 13,5% apresentaram contaminação por, pelo menos, um micro-organismo acima do limite estabelecido pela legislação. Em duas amostras houve a presença de mais de um tipo de bactéria. Embora apenas uma das UAN hospitalares pesquisadas tenha sido classificada como Reprovada , em todas elas foram detectadas não-conformidades em diversos aspectos como na edificação, nas instalações, na conservação das áreas externa e interna dos estabelecimentos, além do ineficiente controle de qualidade dos alimentos, durante o seu processamento. Todas essas não-conformidades verificadas, tanto nos aspectos físicos quanto nos funcionais contribuem para a constatação de contaminação por micro-organismos patogênicos nas refeições em todos os hospitais pesquisados, o que constitui risco potencial à clientela destes hospitais no sistema público brasileiro de saúde.