Uma das formas de se realizar estudos epidemiológicos de dispersão de patógenos é pela discriminação intra-específica (biotipagem) desses microrganismos em subgrupos (biotipos). Métodos fenotípicos que permitem a discriminação de linhagens clínicas são almejados principalmente pela facilidade de execução e por terem menor custo, quando comparados com os métodos moleculares. O sistema killer, baseado em padrões de sensibilidade à toxina, pode representar uma ferramenta simples, barata, sensível e reprodutível para biotipagem de microrganismos de importância clínica. Neste estudo, foi pesquisada a presença deste fenótipo em 595 isolados de alimentos e de fontes ambientais, de onde foram selecionadas 32 cepas para testes de identificação molecular, caracterização genética do fenótipo killer, caracterização morfológica do mecanismo de ação da toxina e aplicação em painéis de biotipagem.A linhagem KYQU89 (CBS10423), proveniente de queijo, foi detectada como uma espécie nova, com seqüência idêntica a dois isolados killer oriundos de insetos. As três linhagens demonstraram ser relacionadas ao clado Ovoides no gênero Trichosporon, sendo caracterizadas por sequenciamento da região D1/D2 do rDNA , da região interespaçadora ITS e perfil bioquímico. A espécie nova foi denominada Trichosporon insectorum. Vinte linhagens killer foram selecionadas para compor um painel de biotipagem sobre cem isolados clínicos e ambientais de Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii. A partir dos padrões de sensibilidade à toxina, foi gerado um dendrogramademonstrando a total discriminação das linhagens. A ação letal da toxina sobre as células destas duas espécies de Cryptococcus foi observada por microscopia eletrônica de varredura e óptica, evidenciando que não houve a formação de poros na parede celular, mas sim uma provável interferência no ciclo celular da célula. Da mesma forma, um painel de 11 linhagens killer selecionadas foi utilizado para a biotipagem de cepas multi-resistentes de Staphylococcus epidermidis, provenientes de dois hospitais em Porto Alegre, RS, também sendo capaz de discriminá-las totalmente. / One of the forms of performing epidemiological studies of dispersion of pathogenic microorganisms is by means of intra-specific discrimination (biotyping) of these microorganisms in sub-groups (biotype). Phenotypic methods that allow the clinical discrimination of strains are needed, especially because they are easy to perform and have low cost, when compared to molecular methods. The killer system, based on patterns of sensitivity towards the toxin, can represent a simple, cheap, sensible and reproductive tool for biotyping of microorganisms of clinical importance. In our study, the presence of this phenotype was evaluated in 595 isolates from natural environments and food and 32 killer strains were selected for molecular identification, genetic characterization of killer phenotype, morphologic characterization of the mechanism of action, and application in biotyping panels.The strain KYQU89 (CBS10423), isolated from cheese, was found to be a new species, with D1/D2 sequence identical to two killer isolates from insects. The three strains were shown to be related to the Ovoides clade of the genus Trichosporon, and were characterized bysequencing of the D1/D2 region of the LSU rDNA and physiological profiles the new species was called Trichosporon insectorum. Twenty killer strains were selected to compose a panel of biotyping against one hundred clinical and environmental isolates of Cryptococcus neformans and Cryptococcus gattii. Basedon the killer sensitivity patterns, a dendrogram demonstrating the total discrimination of the strains was done. The lethal action of the toxin on the cells of Cryptococcus was observed by means of optical and scanning electron microscopy, showing that there was no formation of pores on the cell surface of the sensitive cells in contact with the toxins, but a probable interference in the cell cycle. In the same way, a panel of 11 selected killer strains was used for the biotyping of multi-resistant Staphylococcus epidermidis strains, provenient from two hospitals in Porto Alegre, RS, being also capable of discriminating all the strains.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:50:43Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4462_1.pdf: 969527 bytes, checksum: 2742833f24533974ca79f9689a36f81e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / A freqüente resistência das micobactérias atípicas às drogas antituberculose, a ausência de esquemas terapêuticos eficazes e os estudos concernentes à aplicação de novas moléculas sobre micobactérias motivaram a determinação do efeito pós-antibiótico (EPA) in vitro de um novo derivado 1,2,4-oxadiazol-hidrazida (HHBA) e de suas associações com o quimioterápico ofloxacino (OFLO), uma fluorquinolona, e o m-Flúor-Fenilalanina (m-FFen), um inibidor da síntese da parede celular. O EPA foi avaliado após o tempo de contato de 2 e 4 horas frente ao Mycobacterium fortuitum e ao Mycobacterium smegmatis. As drogas foram testadas em concentrações equivalentes a concentração inibitória mínima (CIM). Considerado um parâmetro farmacodinâmico de grande relevância em situações clínicas, o EPA exerce a sua maior importância na escolha do antimicrobiano, nos regimes de dosagem terapêutica e nos seus intervalos de administração. O EPA pode ser induzido pela exposição do microrganismo ao antimicrobiano por um período de tempo determinado, seguindo da rápida retirada deste antimicrobiano, e o acompanhamento do recrescimento deste microrganismo. Matematicamente, o EPA é calculado pela fórmula: EPA= T C, em que T representa o tempo necessário para que a cultura teste cresça o equivalente a 1log10 em relação à numeração efetuada logo após a retirada da droga e C representa o tempo necessário para que a cultura controle cresça igualmente de 1log10. O que concerne ao efeito pós-antibiótico sobre o M. fortuitum após 2 horas de contato a OFLO apresentou os maiores valores de EPA, 8,60 ± 1,50 horas. Todas as associações mostraram-se antagônicas com exceção da HHBA+m-FFen que induziu a um EPA indiferente de 1,20 ± 1,20 horas. Após 4 horas de contato, a OFLO continuou apresentando a melhor atividade cujo EPA foi equivalente a 11,50 ± 2,00 horas, sua associação com a m-FFen apresentou um EPA indiferente de 11,00 ± 2,70 horas. As demais associações apresentaram-se antagônicas. O efeito pós-antibiótico do HHBA frente ao M. smegmatis após um contato de 2 horas foi de 2,40 ± 2,80 horas e a sua associação com a OFLO mostrou ser a mais efetiva cujo valor do EPA foi de 3,30± 2,80 horas. Após 4 horas de contato o EPA do HHBA não foi alterado, permanecendo em 3,30 ± 2,60 horas. O aumento do tempo de contato induziu um aumento dos valores do EPA para as drogas estudadas e suas associações, exceto o m-FFen, as associações OFLO-HHBA e OFLO-HHBA-m-FFen frente ao M. smegmatis, e o HHBA e sua associação HHBA-m-FFen, frente ao M. fortuitum. A ofloxacino foi o antimicrobiano que induziu os melhores valores de EPA para o M. fortuitum, bem como o HHBA foi o antimicrobiano que induziu os melhores valores de EPA para o M. smegmatis. O aumento do tempo de contato de 2 para 4 horas potencializou os EPAs das drogas estudadas.Todas as associações testadas apresentaram um caráter antagônico, exceto a associação OFLO-m-FFen após 4 horas de contato, frente o M. smegmatis. E os tempos de contatos escolhidos, bem como a CMI utilizada para os ensaios, foram insuficientes para que as drogas e suas associações pudessem induzir EPAs sinérgicos. Como os mecanismos do EPA ainda não estão totalmente definidos é difícil lançar hipóteses acerca do qual ou quais mecanismos estão implicados na variação dos resultados dos EPAs de drogas testadas em associação

Orientador: Glaucia M. Pastore / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-21T18:50:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SousaNeto_Roselide_M.pdf: 5421437 bytes, checksum: bb45f47bcfa77af3377a10cacce24442 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Quinhentas e cinquenta linhagens de microrganismos foram isolados do solo, frutas, resíduos industriais e testados quanto à capacidade de hidrolisar glicerídeos em meio alcalino. Cinco linhagens de bactérias foram selecionadas como produtoras de lipase alcalina. Entre elas, uma linhagem identificada como Alcaligenes sp., apresentou alta produção de lipase alcalina em meio de cultivo composto por: 2% de farinha de soja torrada, 1% farinha de trigo, 0,5% de K2HPO4, 1 % de água de maceração de milho (com steep liquor) e 0,2% de Na2CO3. A enzima lipolítica de Alcaligenes sp. hidrolisou as ligações éster de triglicerídeos insolúveis em água, podendo assim, ser classificada como lipase (Glicerol Éster Hidrolase E.C.3.1.1.3). Estudou-se a produção da lipase extracelular pela linhagem selecionada, a caracterização da enzima no estado bruto e a purificação através de fracionamento com sulfato de amônio e cromatografia em coluna DEAE- Sephadex A-50. Na purificação das proteínas, foram detectadas 2 frações com atividade de lipase, sendo denominadas de frações I e II. As frações foram coletadas e concentradas em membrana de ultrafiltração. A fração I apresentou atividade ótima. em pH 8 a 40°C. A fração II apresentou atividade ótima em pH 9 a 45°C. A presença de MgSO4 e CaCl2 provocaram um aumento da atividade enzimática das duas frações, por outro lado, ZnSO4 e FeSO4 inibiram moderadamente a atividade enzimática de ambas frações. Os reagentes cisteína e f3-mercaptoetanol inibiram significativamente a atividade enzimática das frações I e II. A esterificação de ácido graxo e glicerol pela lipase bruta de Alcaligenes sp. foi examinada e verificou-se que a enzima esterificou apenas 34% após 48 horas de incubação. A lipase bruta de Alcaligenes sp. mostrou-se estável na presença de detergentes e protease a pH 9. / Abstract: The screening of alkaline lipase of producing microorganisms was performed using 550 strains of microorganisms wich were isolated from samples of soil, fruits and industrial residues. It was found that five strains of bacteria produced high activity of extracellular lipase and one of them produced exceptionally high alkaline lipase activity. This strain was identified as Alcaligenes sp. The medium for lipase production was composed of 2% roasted soybean meal, 1 % wheat meal, 0,5% K2HP04, 1 % of com steep liquor and 0,2% Na2C03. Maximum enzyme activity with olive oil as substrate was observed at pH 9,0 at 45°C. The enzyme extract was purified by fractionation with ammonium sulfate and DEAE Sephadex A-50 column chromatography. In the elution between 0,lM and 0,3M of NaCI, two active fractions were separately, collected, concentrated by ultrafiltration on membrane and characterized. It was observed that optimum pH activity for the fraction I was 8,0 at 40°C with olive oil as substrate. The optimum pH activity for the fraction II was 9,0 at 45°C with olive oil as substrate. The effects of various metal ions and other reagentes at the final concentration of 1 mM on the lipase activity were studied. The fractions I and II were inhibited by ZnS04 and FeS04, on other hand CaCl2 and MgS04 increased the activity. Both fractions were inhibited by f3- mercaptoethanol and cysteine. The enzimatic esterification using oleic acid and glycerol by lipase from Alcaligenes sp was examined. It was found that the reaction system esterified only 34% after 48 hours of reaction time. The lipase from Alcaligenes sp was estable on detergents and protease systems / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

Orientador: Lucia Regina Durrant / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-22T01:35:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sette_LaraDuraes_M.pdf: 5310744 bytes, checksum: 6b0cd9eb702de9b3eebf535684b8e7a8 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: O sistema ligninolítico produzido por fungos apresenta grande interesse nos dias de hoje, por possuir diferentes aplicações, com mínima agressividade ambiental. As enzimas ligninolíticas podem ser utilizadas para o tratamento de resíduos lignocelulósicos, biopolpação, tratamento de efluentes, etc, além de poderem degradar uma variedade de poluentes orgânicos. No presente trabalho foi realizado o estudo do sistema ligninolítico de cinco linhagens de fungos, capazes de produzir enzimas que participam da degradação da lignina, em diferentes condições de oxigenação. A seleção dos microrganismos foi efetivada a partir dos resultados de produção enzimática de dez linhagens iniciais, crescidas em meio contendo papel de filtro como fonte de carbono, sob condições aeróbica com agitação, aeróbica sem agitação e sob condição microaerofílica. Os resultados de produção de enzimas celulolíticas pelas linhagens iniciais também foram levados em consideração na seleção. Quatro linhagens de fungos filamentosos LH5 (deuteromiceto), 20 (deuteromiceto), Q10 {Trichocladium canadense), H2 (basidiomiceto), e uma linhagem de levedura LD {Geotrichum sp) foram selecionadas. Após a seleção os cinco microrganismos foram cultivados sob condição de baixa oxigenação em seis diferentes meios de cultura contendo como fontes de carbono: álcool veratrílico (0,4 mM); ácido lignosulfônico (0,5%); ácido lignosulfônico dialisado (0,5%); xilana (0,5%); serragem (0,5%) e bagaço de cana (0,5%). Os resultados de produção das enzimas lignina peroxidase (LiP), manganês peroxidase (MnP), lacase, peroxidases e álcool veratrílico oxidase (AVO) revelaram que em meios contendo álcool veratrílico, xilana, serragem e bagaço de cana, houve melhor produção da enzima MnP, enquanto que para os meios onde o ácido lignosulfônico e o ácido lignosulfônico dialisado foram utilizados como fontes de carbono, a melhor produção foi para as enzimas LiP e AVO. Os microrganismos cultivados sob condição aeróbica com agitação em meios contendo papel de filtro, serragem e bagaço de cana apresentaram, de maneira geral, melhor produção de MnP. Os microrganismos também foram crescidos nesses três meios, primeiramente sob condição de agitação sendo posteriormente colocados sob condição microaerofilica, onde foi observado um aumento de produção das enzimas LiP e AVO. A verificação da degradação do ácido lignosulfônico utilizado como substrato, e da presença de etanol nos caldos enzimáticos obtidos dos microrganismos crescidos em serragem e em bagaço de cana, foram monitorados por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Os cromatogramas dos caldos de cultivo apresentaram melhores resultados de degradação para o ácido lignosulfônico dialisado do que para o ácido lignosulfônico não dialisado. A detecção do etanol nos sobrenadantes das culturas variou com a fonte de carbono, serragem ou bagasso de cana, e com as condições de crescimento utilizadas / Abstract: The ligninolytic system produced by fungi is currently of great interest because it has many environmental applications. Ligninolytic enzymes can be used for the treatment lignocellulosic wastes, biopulping, effluent treatment, etc., and one able to degrade a variety of organic pollutants. In the present work a study was made of the ligninolytic system of five fungal strains, capable of producing enzymes that participate in lignin degradation, under different conditions of oxygenation. The screening of microorganisms was made considering the results of enzymatic production in ten strains, grown in a medium containing ground Whatman n° 1 paper as the carbon source, under aerobic conditions with or without shaking and also under microaerophilic conditions. The production of celullolytic enzymes by the initial strains were also considered in the screening. Four strains of filamentous fungi LH5 (deuteromycete), 20 (deuteromycete), Q10 {Trichocladium canadense), H2 (basidiomycete) and one yeast strain LD (Geotrichum sp) were selected. These five microorganisms were grown under low oxygenation conditions in six different culture media containing as carbon sources: veratryl alcohol (0,4mM); lignosulfonic acid (0,5%); dialised lignosulfonic acid (0,5%); xylan (0,5%); sawdust (0,5%) and sugar-cane bagasse (0,5%). The production of the enzymes lignin peroxidase (LiP); manganese peroxidase (MnP); laccase; peroxidases and veratryl alcohol oxidase (VAO) revealed that in media containing veratryl alcohol, xylan, sawdust and sugar-cane bagasse, there was a better production of MnP, while in media where the lignosulfonic acid and dialysed lignosulfonic acid were used as carbon sources, the greatest production was of LiP and VAO. The microorganisms that were grown on ground Whatman n°l paper, sawdust and sugar-cane bagasse under shaking showed better production, in general, of MnP. The strains were also grown in these media primarily under shaking conditions, subsequently being under microaerophylic conditions, where an increase in the production of the enzymes LiP and VAO was observed. The demonstration of lignosulfonic acid degradation and the presence of ethanol in the enzymatic supernatant of the microorganisms grown in sawdust and in sugar-cane bagasse, were monitored by HPLC. Dialysis of the lignosulfonic acid resulted in higher degradation levels after growth of the fungi, whem compared to the non-dialysed one. The ethanol appearence in the cultures broth varied with the carbon sources sawdust or sugar-cane bagasse and also with the growth conditions used / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

Orientador: Glaucia Maria Pastore / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-23T11:10:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marques_DanielleBarbosa_M.pdf: 6891782 bytes, checksum: 475db923868c9d35e385cfda8b00fc0b (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Uma linhagem de levedura previamente isolada e selecionada pelo Laboratório de Bioquímica de Alimentos da Unicamp, foi identificada através de suas características morfológicas, bioquímicas e fisiológicas como sendo Pichia membranaefaciens. Esta levedura foi testada em diversas condições de cultivo, tais como variação da composição do meio de cultura, pH do meio, temperatura e tempo de incubação, visando a obtenção de aromas de frutas. Foram selecionadas as fontes de carbono: glicose, frutose e manose, bem como autolisado de levedura e extrato de levedura como fontes de nitrogênio, para o estudo dos parâmetros para a produção de aromas de frutas. Os principais compostos voláteis produzidos por Pichia membranaefaciens nos meios de cultura selecionados foram: acetato de etila, isobutanol, 1-butanol, propanoato de etila, álcool isoamílico, álcool n-amílico, acetato de isoamila, acetato de n-butila, caproato de etila e álcool feniletílico. Estes compostos foram analisados por cromatografia gasosa e identificados através de cromatografia gasosa e espectrometria de massa. A produção dos compostos voláteis por Pichia membranaefaciens, foi influenciada principalmente pela composição dos meios de cultura, pelo tempo e temperatura de incubação. Os rendimentos máximos de cada composto foram registrados em várias condições de fermentação. Entretanto, para a maioria dos compostos voláteis formados, o período que apresentou maior rendimento foi após 72 horas de incubação, à 30°C. A síntese de acetato de etila, principal composto produzido por P. membranaefaciens, já começa na fase ativa de crescimento. Os diferentes compostos apresentam rendimentos máximos em momentos diferentes. Os resultados mostraram que a composição de meio de cultura, as condições de fermentação e a escolha da linhagem determinam a natureza e quantidade de cada composto volátil produzido. Pode-se concluir que existem possibilidades interessantes utilizando-se P. membranaefaciens na síntese de acetato de etila. Os altos rendimentos e a especificidade dos compostos voláteis dependem das fontes de carbono e de nitrogênio e das condições de fermentação. Portanto, é essencial entender o mecanismo e os vias bioquímicas que estão envolvidas na formação dos compostos voláteis de aroma de frutas, produzidos por P. membranaefaciens / Abstract: A yeast strain, previously isolated and selected in the Food Biochemistry Laboratory of the University of Campinas, was identified from its morphological, biochemical and physiological features as being Pichia membranaefaciens. This yeast was tested under several growth conditions, such as variation of culture medium composition, pH, temperature and incubation time, with the objective of producing fruit flavors. For this purpose, the following carbon sources were selected for testing: glucose, fructose and mannose, and autolysed yeast and yeast extract as nitrogen sources. The main volatile compounds produced by Pichia membranaefaciens on the selected media were: ethyl acetate, isobutanol, , l-butanol, ethyl proponate, iso-amyl alcohol, n-amyl alcohol, iso-amylacetate, n-butyl acetate, ethyl caproate, phenylethyl alcohol. These compounds were analysed by gas chromatography and identified by gas chromatography-mass spectrometry. The production of volatile compounds by Pichia membranaefaciens, was influenced mainly by the culture medium composition and incubation time and temperature. The maximum yields of each compound were registered under several fermentation conditions. However, for most of the volatile compounds formed, the incubation time presenting the greatest yield of the volatile compounds was 72 hours of incubation at 30°C. The synthesis of ethyl acetate begins already in the active phase. The differents compounds reach na optimum each at a distinct moment. The results showed that the culture medium composition, the fermentation conditions and the choice of the strain determine the nature and the proportion of each volatile compound. It may conclued that there are interesting possibilities in using P. membranaefaciens for the bio-synthesis of ethyl acetate. High yields and especificity of the produced flavor compounds depend on the type of carbon and nitrogen sources and the fermentation conditions. In this respect, its is essential to understand the mecanism and the biochemical background of flavor compounds formation in P. membranaefaciens / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / Chromobacterium violaceum à classificada como uma β-proteobactÃria, saprÃfita, comumente encontrada em solo de regiÃes de clima tropical e subtropical, produz vÃrios metabÃlitos de grande interesse biotecnolÃgico, dentre eles, a violaceÃna. Este trabalho consiste numa caracterizaÃÃo fenotÃpica e genotÃpica de cinco cepas de Chromobacterium violaceum isolados nos MunicÃpios de TejussuÃca e BanabuiÃ, ambas, no Estado do CearÃ. A caracterizaÃÃo genotÃpica consistiu de sequenciamento da regiÃo rDNA 16S e anÃlises RFLP do gene recA. Para a caracterizaÃÃo fenotÃpica, foram realizados testes bioquÃmicos e susceptibilidade a antibiÃticos, a Ãleos essenciais de Lippia alba, bem como seus constituintes majoritÃrios. Com o sequenciamento, as cepas isoladas no estado do Cearà sÃo espÃcies de Chromobacterium violaceum. Por ser um gene conservado, o recA à utilizado como marcador molecular, fornecendo mais informaÃÃes na especificidade dos genoma bacterianos. Pela a anÃlise por RFLP, as cepas 1425, 1323, 2221 e a ATCC 12472 apresentaram trÃs fragmentos digeridos pela enzima, enquanto que as cepas 1221 e 1222 apresentaram dois fragmentos, indicando sequÃncias nucleotÃdicas diferentes para este gene conservado. As cincos cepas apresentaram caracterÃsticas fenotÃpicas iguais a Chromobacterium violaceum ATCC 12472, todas demonstraram ser resistentes a uma grande variedade de antibiÃticos β-lactÃmicos e mais susceptÃveis as fluorquinolonas. Este à o primeiro trabalho na literatura cientÃfica que trata da aÃÃo antimicrobiana dos Ãleos essenciais da Lippia alba sobre a Chromobacterium violaceum, e pelos resultados obtidos, os Ãleos essenciais exerceram aÃÃo bactericida sobre todas as cepas, sugerindo ser uma possÃvel alternativa de tratamento nos casos de doenÃa provocada pela Chromobacterium violaceum, que na maioria dos casos à confundida pela classe mÃdica com a melioidose provocada pela Burkholderia pseudomallei.

Orientador: Arnaldo Yoshiteru Kuaye / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-11T23:44:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Passos_MariaHelenaCastroReis_D.pdf: 44844774 bytes, checksum: ccf6e139e22145e43467dd180f6fcd44 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: O resumo podera ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The abstract is available with the full electronic digital document / Doutorado / Doutor em Tecnologia de Alimentos

Orientador : Anita Jocelyne Marsaioli / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-01T20:41:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Goncalves_ReginaAparecidaCorreia_D.pdf: 5533117 bytes, checksum: 5da1d1f0e263cc27684eb4ce6516c346 (MD5) Previous issue date: 2002 / Doutorado

Orientador : Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-02T20:00:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jacinto_RogeriodeCastilho_M.pdf: 4731181 bytes, checksum: cbedbdceb1b92740d564848eca283e16 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O objetivo deste estudo foi analisar a microbiota de canais radiculares infectados e com lesão periapical de dentes sintomáticos e assintomáticos; correlacionar a presença de bactérias específicas com a sintomatologia endodôntica e investigar a suscetibilidade antimicrobiana de bactérias anaeróbias Gram-negativas isoladas dos canais de dentes sintomáticos com lesão periapical contra 8 antibióticos usando o E-test. Amostras microbiológicas foram coletadas de 48 canais radiculares com polpa necrosada, 29 com dor espontânea e 19 sem dor espontânea no momento da coleta, usando técnicas microbiológicas adequadas. Um total de 218 isolados clínicos foi encontrado, os quais pertenciam a 48 diferentes espécies e 19 diferentes gêneros. Canais radiculares de dentes sintomáticos apresentaram uma predominância de anaeróbios estritos e um número maior de espécies por canal radicular em relação aos dentes assintomáticos. Mais de 70% do total das bactérias isoladas eram anaeróbias estritas. Análise estatística foi feita através dos testes X2 de Person ou de Fisher. Associações foram encontradas entre grupos microbianos específicos, principalmente anaeróbios Gram-negativos e a presença de dor espontânea ou dor prévia, dor à percussão, dor à palpação e edema. Amoxicilina, amoxicilina + ácido c1avulânico e cefac1or foram efetivos contra todas as cepas testadas. A menor taxa de suscetibilidade foi apresentada por Prevotella intermedia/nigrescens contra penicilina G. Nossos resultados sugerem que bactérias específicas estão associadas aos sinais e sintomas endodônticos de dentes com canais contaminados e lesão periapical e que, a maioria das espécies Gram-negativas testadas foram sensíveis aos antibióticos estudados / Abstract: The aim of this study was to analyse the microflora isolated ITom infected root canals of symptomatic or asymptomatic teeth, to correlate the presence of specific bacteria with endodontic symptomatology and to investigate the antibiotic susceptibility of the anaerobic Gram-negative bacteria isolated ITom symptomatic teeth with periapicallesions against 8 antibiotics through the E-test. Microbial samples were taken ITom root canals of 48 teeth with necrotic dental pulp, 29 symptomatic and 19 asymptomatic, using adequate techniques. A total of 218 cultivable isolates were recovered ITom 48 different microbial species and 19 different genera. Root canals ITom symptomatic teeth harboured more obligate anaerobes and a bigger number of bacterial species than the asymptomatic teeth. More than 70% ofthe total bacterial isolates were strict anaerobes. Statistical analysis used a Pearson r test or a one-sided Fisher' s Exact test, as appropriate. Relationships were found between specific microorganisms, especially Gram-negative anaerobes and the presence of pain or histol)' ofpain, tendemess to percussion, pain to palpation and swelling. Amoxicillin, amoxicillin + clavulanate and cephaclor were efIective against all the strains tested. The lowest susceptibility rate was presented by Prevotella intermedia/nigrescens against penicillin G. Our results suggested that specific bacteria are associated with endodontic symptoms of infected teeth and the majority of the Gram-negative bacterial species tested were susceptible to all antibiotics studied. / Mestrado / Endodontia / Mestre em Clínica Odontológica

Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T05:58:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vianna_MorganaEli_M.pdf: 7088316 bytes, checksum: 0e314769ae8042fb301e19ad3c3768ae (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Este trabalho teve como proposta avaliar in vitro a propriedade antimicrobiana de várias substâncias químicas. As soluções irrigadoras intracanais testadas foram: a) hipoclorito de sódio e b) clorexidina utilizados como irrigantes intracanais. Os medicamentos intracanais testados foram: c) clorexidina geI 2%, d) hidróxido de cálcio e e) associação da clorexidina gel 2% e hidróxido de cálcio. A atividade antimicrobiana das substâncias foi avaliada frente a microrganismos aeróbios, anaeróbios facultativos e anaeróbios estritos. Para realização deste trabalho foram empregadas duas metodologias: Método de Difusão em Ágar e Método do Contato Direto. Pôde-se verificar que dentre os irrigantes testados, NaOCI a 5,25%, clorexidina gel e líquida 2% e clorexidina líquida 1% necessitaram de 1 minuto ou menos para eliminar os microrganismos testados. As pastas de 'Ca(OH) IND. 2¿ com paramonoclorofenol canforado apresentaram os maiores halos de inibição e necessitaram de menores tempos para eliminar os microrganismos aeróbios e anaeróbios facultativos. A associação da clorexidina gel 2% com 'Ca(OH) IND. 2¿ apresentou menor atividade que a clorexidina gel 2% e maior atividade que a pasta de 'Ca(OH) IND. 2¿ com água destilada. Concluímos que todos irrigantes e medicamentos intracanais testados tiveram atividade antimicrobiana, sendo que esta atividade variou de acordo com as formulações empregadas / Abstract: The aim of the present work was to evaluate in vitro the antimicrobial property of various medicaments. The intracanal irrigating solutions testes were a) sodium hypochlorite and b) chlorhexidine. The intracanal medicaments were c) 2% chlorhexidine gel, d) calcium hydroxide combined with several vehicles, and e) calcium hydroxide combined with 2% chlorhexidine gel. The antimicrobial activity of the substances was evaluated against aerobic, facultative anaerobic and strict anaerobic microorganisms. For the accomplishment of this work Agar Diffusion Method and Broth Dilution Test methodologies were used. It could be verified that amongst the tested irrigants the 5.25% NaOCI, and the 2% chlorhexidine needed 1 min or less to eliminate the tested microorganisms. The 'Ca(OH) IND. 2¿ pastes with CMCP presented the largest inhibitions growth zones and needed a shorter length of time to eliminate the aerobic and facultative anaerobic microorganisms. The 2% chlorhexidine gel combined with 'Ca(OH) IND. 2¿ presented intermediate antimicrobial activity, being smaller than 2% chlorhexidine gel and larger than the 'Ca(OH) IND. 2¿ with sterile water. We concluded that ali tested irrigants and intracanal medicaments showed antimicrobial activity, which varied in accordance with their formulations / Mestrado / Endodontia / Mestre em Clínica Odontológica