O fungo leveduriforme Malassezia pachydermatis está presente na microbiota da pele dos animais. Alterações na imunidade da pele do hospedeiro fazem com que a levedura sofra adaptações modificando a expressão de fatores de virulência, causando otite, dermatite e até mesmo infecção sistêmica em animais e humanos. O tratamento de M. pachydermatis é relativamente simples, à base de antifúngicos azólicos. No entanto, o aparecimento de cepas resistentes e de infecções recorrentes tem gerado preocupação recentemente. Drosophila melanogaster tem sido um modelo promissor no estudo de microrganismos, apresentando duas vias de sinalização da resposta imune, a via Imd contra bactérias gram-negativas e a via Toll contra bactérias gram-positivas e fungos, as quais desencadeiam a produção dos peptídeos antimicrobianos locais e sistêmicos. A virulência de M. pachydermatis em moscas D. melanogaster wild-type e Toll-deficientes foi testada com inóculos nas concentrações entre 103 e 107 unidades formadoras de colônia (UFC)/ml e a infecção ocorreu pela punção com agulha no tórax das moscas, que foram colocadas em frascos com alimento e incubados à 29 °C por sete dias, com contagem diária da sobrevivência. Ainda foram realizados a contagem de UFC/ml/mosca e a histopatologia após os sete dias de observação. As moscas wild-type se mostraram resistentes à infecção. Curvas de mortalidade de moscas Toll-deficientes, em concentrações a partir de 104 leveduras/ml, diferiram estatisticamente do grupo controle. Após o sétimo dia de infecção, moscas wild-type inoculadas com 1 x 107 UFC/ml tinham carga fúngica variando entre 0,33 a 1 x 102 UFC/mosca, enquanto em moscas Toll-deficientes a carga fúngica variou de 2,3 x 103 a 1,3 x 104 UFC/mosca. Portanto, D. melanogaster Toll-deficientes são suscetíveis à infecção por M. pachydermatis devido à falta do sistema imune para o reconhecimento e montagem da resposta imune frente ao fungo, semelhante ao que ocorre em pacientes imunocomprometidos, dado o sistema imune conservado entre os mamíferos e a mosca-das-frutas. Deste modo, D. melanogaster é um modelo promissor e inovador para estudos de patogenicidade e de prospecção de fármacos frente a M. pachydermatis. / The yeast Malassezia pachydermatis is present in the normal microbiota of the skin of animals. Changes in the host's immunity cause the yeast to undergo adaptations modifying the expression of virulence factors, causing otitis, dermatitis and even systemic infection in animals and humans. The treatment of M. pachydermatis is relatively simple, based on the use of azole antifungals. However, the emergence of resistant strains and recurrent infections has generated concern recently. Drosophila melanogaster has been a promising model in the study of microorganisms, presenting two pathways of immune response signaling, the Imd pathway against gram-negative bacteria and the Toll pathway against gram-positive bacteria and fungi, which trigger the production of local and systemic antimicrobial peptides. The virulence of M. pachydermatis in wild-type and Toll-deficient D. melanogaster flies was tested with inoculum concentrations ranging between 103 and 107 colony forming units (CFU)/ml and the infection occurred by needle puncture in the thorax of the flies, which were placed in vials with food and incubated at 29 °C for seven days, with daily survival counts. Fungal burden counts and the histopathology were also performed after seven days of observation. Wild-type flies were resistant to infection. Mortality curves of Toll-deficient flies, at concentrations superior of 104 yeasts/ml, differed statistically from the control group. After the seventh day of infection, wild-type flies inoculated with 1 x 107 CFU/ml had fungal load ranging from 0.33 to 1 x 102 CFU/fly, while in Toll-deficient flies the fungal load ranged from 2.3 x 103 to 1.3 x 104 CFU/fly. We concluded that Toll-deficient D. melanogaster flies are susceptible to infection by M. pachydermatis due to lack of immune system for the recognition and assembly of immune response to the fungus, similar to that occurring in immunocompromised patients, given the conserved immune system among mammals and fruit flies. Therefore, D. melanogaster is a promising and innovative model for pathogenicity studies and prospection of drugs against M. pachydermatis.

Šio tyrimo tikslas buvo įvertinti Malassezia pachydermatis paplitimą sveikų ir kliniškai dermatitu sergančių šunų tarpe. Tyrimo metodika. Tyrimas atliktas su 118 šunimis. 33 šunys buvo kliniškai sveiki, o 85 – turėjo dermatitus įvairiose kūno vietose. Šunims buvo atliekamas odos citologinis tyrimas. Mėginys tyrimui buvo imamas objektinį stiklelį priglaudus prie odos ir gautą mėginį nudažius Diff-Quik® (Dade AG, Dudingen, Switzerland) dažais. Tyrimo metu buvo ieškoma M. pachydermatis mielių. Mėginiai kliniškai sveikiems šunims buvo imami nuo kaklo, alkūnių, kirkšnių, tarpupirščių ir iš ausų. Sergantiems dermatitu mėginiai buvo paimti iš ausų, alkūnių, kaklo, kirkšnių, kojų, krūtinės, nugaros, pilvo, snukio. Tyrimo rezultatai ir išvados. Nustatėme, kad kliniškai dermatitu sergančiųjų tarpe M. pachydermatis paplitimas buvo didesnis 59% (p<0,05), negu kliniškai sveikų šunų tarpe. M. pachydermatis mielės sergančių šunų grupėje daugiausia buvo paplitusios ausyse (p<0,05). Tokie veiksniai kaip šunų lytis, veislė, amžiaus grupė, plauko ilgis, ausų kaušelio tipas M. pachydermatis paplitimo neįtakojo (p<0,05). Lauke laikomų šunų tarpe M. pachydermatis paplitimas buvo 21 % didesnis (p<0,05), negu tarp patalpose laikomų šunų. O tarp dažnai maudomų šunų M. pachydermatis pasireiškia 2,5 karto dažniau, nei tarp retai maudomų (p<0,05). Išsiaiškinome, kad konkurentinės ligos ir gydymas gliukokortikoidais įtakoja M. pachydermatis mielių sukeltą dermatitą. Šunys, sergantys konkurentinėmis... [toliau žr. visą tekstą] / The objective of the study was to assess the prevalence of Malassezia pachydermatis in clinically healthy and ill dogs that were suffering from dermatitis Research methodology. The test was performed with 118 dogs. 33 dogs were clinically healthy but 85 had dermatitis in various body areas. The dogs were examined by performing skin cytological examination. The sample for examination was taken by touching glass slide on the skin and staining the resulting sample with Diff-Quik® (Dade AG, Dudingen, Switzerland) paint. During the investigation was sought to find M. pachydermatis yeast. The samples of clinically healthy dogs were taken from the neck, elbows, groin, toes and ears. Dogs that were suffering from dermatitis, samples were taken from the ears, elbows, neck, groin, legs, chest, back, abdomen and foot. The research results and conclusions. We determined that among patients that were clinically ill with dermatitis M. pachydermatis prevalence was higher by 59 % (p<0.05) than among clinically healthy dogs. The group of dogs with M. pachydermatis was mostly prevalent in the ears (p<0.05). Factors such as gender, breed, length of hair, earlobes and age group type of dogs did not affect the incidence of M. pachydermatis (p<0.05). Among dogs that were held outdoor the prevalence of M. pachydermatis was 21 % higher (p<0.05) than for dogs in the premises. For dogs that were often bathed M. pachydermatis occurs 2.5 times more often than rarely bathed (p<0.05). We found out that... [to full text]

Malassezia spp. são fungos lipofílicos, reconhecidos há mais de cem anos como membros da microbiota cutânea normal humana, bem como agentes de doenças dermatológicas. Desde 1980, são relatados como causadores de infecções sistêmicas oportunistas. Estas leveduras são frequentemente encontradas em uma grande variedade de animais homeotérmicos, e sua ampla distribuição no meio ambiente agora está sendo explorada através de técnicas moleculares e bioquímicas. O enfoque deste estudo foi a espécie não lipido-dependente Malassezia pachydermatis, e a sua caracterização através do perfil enzimático pelo sistema Api-Zym®. Deste modo, utilizaram-se 30 amostras de M. pachydermatis isoladas de cães, com e sem sinais clínicos, identificadas pela técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). As amostras foram cultivadas em meio de Dixon modificado, incubadas a 37°C durante 48 horas, para posterior quantificação através de espectrofotometria. Um inóculo de 65 μl foi colocado em cada orifício do kit comercial de verificação enzimática e, após, incubado a 37ºC por 4 horas. Os resultados foram obtidos através da leitura visual e interpretação das titulações por escalas pré-determinadas, também foram avaliadas as reações através de “escaneamento” eletrônico. Todos os testes foram realizados em triplicata. Os resultados demonstraram a atividade de enzimas específicas pertencentes ao grupo das peptídeo hidrolases (100%), fosfohidrolases (98,3%) e éster hidrolases (91,6%), enquanto que as enzimas α-galactosidase, β-galactosidase, β-glicuronidase, α-manosidase e α-fucosidase caracterizaram 10% de todos os isolados. Além disso, não se comprovou a viabilidade do sistema utilizado no estudo para a caracterização enzimática da levedura. / Malassezia spp. are lipophilic fungi, which have been recognised for over a century as members of the normal human cutaneous flora, and also as agents of certain skin diseases. In addition, since the 1980s, they have been reported as causing opportunistic systemic infections. These yeasts have frequently been found on a diverse range of other warm-blooded animals, and their wider distribution in nature is now being explored using molecular techniques. The focus of the present study was the species no lipid-dependent Malassezia pachydermatis, and its characterization through the enzymatic profile by the Api-Zym® system. Then 30 isolated samples of dogs had been used, with and without clinical signals, identified by the technique of Polymerase Chain Reaction (PCR). The samples were cultivated into Dixon’s modified medium, incubated at 37°C during 48 hours, for posterior quantification through spectrophotometry. An inocula of 65 μl was placed in each microwell of the commercial kit of enzymatic verification and, after, it was incubated at 37ºC for 4h. The results were obtained through the visual reading and interpretation of the titulations by predetermined scales, it were also evaluated the reactions through electronic scanning. All the tests were performed in triplicate. The results demonstrated the activity of specific enzymes pertaining to the group of the peptide hydrolases (100%), phosphohydrolases (98,3%) and ester hydrolases (91,6%), while the enzymes α-galactosidase, β-galactosidase, β-glucuronidase, α-mannosidase and α-fucosidase characterized 10% off all the isolates. Moreover, it was not proven the viability of the system used in the study for the enzymatic characterization of the yeast.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The yeast Malassezia pachydermatis belongs to the normal microbiota of animals, and is usually implicated as responsible for otitis media and recently by various forms of dermatitis, mainly in dogs. This study aimed to evaluate the in vitro susceptibility of 26 M. pachydermatis isolates against the antifungals fluconazole, itraconazole, ketoconazole, clotrimazole, miconazole, terbinafine and nystatin, and to the combinations of these with thymol, carvacrol and cinnamaldehyde by the checkerboard method, based on document M27-A3. The activity of itraconazol, ketoconazole and clotrimazole against 20 isolates of M. pachydermatis, through simultaneous and sequential exposure of these agents, was also evaluated by the disk-diffusion technique. The minimum inhibitory concentration (MIC) for fluconazole ranged from 1-64 μg/mL, itraconazole 0.01-1 μg/mL, ketoconazole 0.01-0.5 μg/mL, clotrimazole 0.5-32 μg/mL, miconazole 2-32 μg/mL, terbinafine 0.12-32 μg/mL and nystatin 16-64 μg/mL. High rates of synergism were observed in the combinations of nystatin + thymol (88.46%), nystatin + carvacrol (88.46%), nystatin + cinnamaldehyde (73.07%), clotrimazole + thymol (69.23%), clotrimazole + carvacrol (69.23%), miconazole + thymol (65.38%), miconazole + carvacrol (76.92%) and miconazole + cinnamaldehyde (65.38%). However, high rates of indifference were observed in the combinations of fluconazole + thymol (53.84%), carvacrol + fluconazole (46.15%), fluconazole + cinnamaldehyde (65.38%), thymol + itraconazole (61.53%), carvacrol + itraconazole (69.23%), itraconazole + cinnamaldehyde (65.38%), terbinafine + thymol (73.07%), terbinafine + carvacrol (65.38%), terbinafine + cinnamaldehyde (73.07%) and clotrimazole + cinnamaldehyde (61.53%). Ketoconazole combined with thymol, carvacrol and cinnamaldehyde had the highest rates of antagonism (42.3%). The prior exposure of M. pachydermatis to itraconazole resulted in a reduction of the inhibition halo when compared with itraconazole and ketoconazole used simultaneously (p <0.01). Moreover, prior exposure of clotrimazole significantly increased the zone of inhibition (p <0.001) when compared to the simultaneous exposure of itraconazole and clotrimazole. The most significant associations deserve in vivo evaluation in order to verify their potential in the treatment of infections caused by M. pachydermatis. / Malassezia pachydermatis é uma levedura pertencente à microbiota normal de animais e, usualmente, apontada como responsável por otites externas e recentemente por diversas formas de dermatites, principalmente em cães. Este estudo teve como objetivo avaliar a suscetibilidade in vitro de 26 isolados de M. pachydermatis frente aos antifúngicos fluconazol, itraconazol, cetoconazol, clotrimazol, miconazol, terbinafina e nistatina, e combinações desses com timol, carvacrol e cinamaldeído, através do método de checkerboard , baseado no documento M27-A3. Também foram avaliadas a atividade do itraconazol, cetoconazol e clotrimazol, em 20 isolados de M. pachydermatis, através da exposição simultânea e sequencial desses agentes utilizando-se a técnica de disco-difusão. Isoladamente, as concentrações inibitórias mínimas (CIMs) para o fluconazol variaram de 1- 64 μg/mL, para o itraconazol 0,01-1 μg/mL, para o cetoconazol 0,01-0,5 μg/mL, para o clotrimazol 0,5-32 μg/mL, para o miconazol 2-32 μg/mL, para a terbinafina 0,12-32 μg/mL e para a nistatina 16-64 μg/mL. Altas taxas de sinergismo foram observadas nas combinações de nistatina + timol (88,46%), nistatina + carvacrol (88,46%), nistatina + cinamaldeído (73,07%), clotrimazol + timol (69,23%), clotrimazol + carvacrol (69,23%), miconazol + timol (65,38%), miconazol + carvacrol (76,92%) e miconazol + cinamaldeído (65,38%). No entanto, fluconazol + timol (53,84%), fluconazol + carvacrol (46,15%), fluconazol + cinamaldeído (65,38%), itraconazol + timol (61,53%), itraconazol + carvacrol (69,23%), itraconazol + cinamaldeído (65,38%), terbinafina + timol (73,07%), terbinafina + carvacrol (65,38%), terbinafina + cinamaldeído (73,07%) e clotrimazol + cinamaldeído (61,53%) tiveram altas taxas de indiferença. Cetoconazol combinado com timol, carvacrol e cinamaldeído apresentaram as maiores taxas de antagonismo (42,3%). A exposição prévia de M. pachydermatis ao itraconazol resultou em uma diminuição da zona de inibição, quando comparado com o itraconazol e cetoconazol usados simultaneamente (p <0,01). Por outro lado, a exposição prévia do clotrimazol aumentou significativamente a zona de inibição (p <0,001), quando comparado à exposição simultânea de clotrimazol e itraconazol. As associações de maior relevância merecem avaliação in vivo, a fim de verificar o potencial das mesmas no tratamento de infecções por M. pachydermatis.

Malassezia spp. são fungos lipofílicos, reconhecidos há mais de cem anos como membros da microbiota cutânea normal humana, bem como agentes de doenças dermatológicas. Desde 1980, são relatados como causadores de infecções sistêmicas oportunistas. Estas leveduras são frequentemente encontradas em uma grande variedade de animais homeotérmicos, e sua ampla distribuição no meio ambiente agora está sendo explorada através de técnicas moleculares e bioquímicas. O enfoque deste estudo foi a espécie não lipido-dependente Malassezia pachydermatis, e a sua caracterização através do perfil enzimático pelo sistema Api-Zym®. Deste modo, utilizaram-se 30 amostras de M. pachydermatis isoladas de cães, com e sem sinais clínicos, identificadas pela técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). As amostras foram cultivadas em meio de Dixon modificado, incubadas a 37°C durante 48 horas, para posterior quantificação através de espectrofotometria. Um inóculo de 65 μl foi colocado em cada orifício do kit comercial de verificação enzimática e, após, incubado a 37ºC por 4 horas. Os resultados foram obtidos através da leitura visual e interpretação das titulações por escalas pré-determinadas, também foram avaliadas as reações através de “escaneamento” eletrônico. Todos os testes foram realizados em triplicata. Os resultados demonstraram a atividade de enzimas específicas pertencentes ao grupo das peptídeo hidrolases (100%), fosfohidrolases (98,3%) e éster hidrolases (91,6%), enquanto que as enzimas α-galactosidase, β-galactosidase, β-glicuronidase, α-manosidase e α-fucosidase caracterizaram 10% de todos os isolados. Além disso, não se comprovou a viabilidade do sistema utilizado no estudo para a caracterização enzimática da levedura. / Malassezia spp. are lipophilic fungi, which have been recognised for over a century as members of the normal human cutaneous flora, and also as agents of certain skin diseases. In addition, since the 1980s, they have been reported as causing opportunistic systemic infections. These yeasts have frequently been found on a diverse range of other warm-blooded animals, and their wider distribution in nature is now being explored using molecular techniques. The focus of the present study was the species no lipid-dependent Malassezia pachydermatis, and its characterization through the enzymatic profile by the Api-Zym® system. Then 30 isolated samples of dogs had been used, with and without clinical signals, identified by the technique of Polymerase Chain Reaction (PCR). The samples were cultivated into Dixon’s modified medium, incubated at 37°C during 48 hours, for posterior quantification through spectrophotometry. An inocula of 65 μl was placed in each microwell of the commercial kit of enzymatic verification and, after, it was incubated at 37ºC for 4h. The results were obtained through the visual reading and interpretation of the titulations by predetermined scales, it were also evaluated the reactions through electronic scanning. All the tests were performed in triplicate. The results demonstrated the activity of specific enzymes pertaining to the group of the peptide hydrolases (100%), phosphohydrolases (98,3%) and ester hydrolases (91,6%), while the enzymes α-galactosidase, β-galactosidase, β-glucuronidase, α-mannosidase and α-fucosidase characterized 10% off all the isolates. Moreover, it was not proven the viability of the system used in the study for the enzymatic characterization of the yeast.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Malassezia pachydermatis is opportunistic yeast that primarily affects animals, being associated with dermatomycoses and ear diseases in dogs and cats. This is important yeast in veterinary medicine and therefore the knowledge of its susceptibility profile against various antifungal agents, is necessary to obtain success in treating and preventing relapses of infection. The aim of this study was to compare the susceptibility between pathogenic and commensal M. pachydermatis strains against ketoconazole, miconazole, clotrimazole, itraconazole, fluconazole, voriconazole, amphotericin B and nystatin. All isolates were tested by the broth microdilution method using the CLSI M27-A3 (2008). The strains isolated from infectious processes (G1) showed higher MICs than commensals strains (G2). The azoles ketoconazole, itraconazole and voriconazole showed excellent effectiveness against M. pachydermatis isolates. Differences in susceptibility to amphotericin B, nystatin, miconazole, clotrimazole and fluconazole were observed between G1 and G2 groups. It can be explained by the variation in the lipid content of the capsule surrounding the organism and the concentration of intracellular antioxidant enzymes. M. pachydermatis is important yeast in veterinary medicine and therefore the knowledge of its susceptibility profile against various antifungal agents, is necessary to obtain success in treating and preventing relapses of infection. / Malassezia pachydermatis é uma levedura oportunista que acomete principalmente animais, estando associada a dermatomicoses e otopatias em cães e gatos. Por se tratar de um fungo de grande importância na medicina veterinária, o conhecimento do seu perfil de suscetibilidade frente a diversos antifúngicos se faz necessário para obtermos sucesso no tratamento e na prevenção de recidivas da malasseziose. Este estudo teve como objetivo principal comparar o perfil de suscetibilidade de isolados de M. pachydermatis, patógenos e comensais, frente aos antimicóticos cetoconazol, miconazol, clotrimazol, itraconazol, fluconazol, voriconazol, nistatina e anfotericina B utilizando a técnica de microdiluição em caldo RPMI 1640 tamponado, proposta pelo protocolo M27-A3 do CLSI (2008). Através da avaliação das CIMs, constatou-se menor sensibilidade dos isolados oriundos de processos infecciosos (G1) a todos os antifúngicos testados. As melhores respostas foram observadas frente aos azólicos cetoconazol, itraconazol e voriconazol, sendo o itraconazol considerado o mais eficiente, visto que a maioria dos isolados testados se mostraram sensíveis às menores concentrações deste antifúngico. Ao comparar o perfil de suscetibilidade dos dois grupos, foi observada diferença significativa entre eles frente aos antifúngicos miconazol, clotrimazol, fluconazol, anfotericina B e nistatina, fato que poderia ser explicado pela variação do conteúdo lipídico da cápsula que envolve o microrganismo e da concentração de enzimas antioxidantes intracelulares.

Malassezia spp. são fungos lipofílicos, reconhecidos há mais de cem anos como membros da microbiota cutânea normal humana, bem como agentes de doenças dermatológicas. Desde 1980, são relatados como causadores de infecções sistêmicas oportunistas. Estas leveduras são frequentemente encontradas em uma grande variedade de animais homeotérmicos, e sua ampla distribuição no meio ambiente agora está sendo explorada através de técnicas moleculares e bioquímicas. O enfoque deste estudo foi a espécie não lipido-dependente Malassezia pachydermatis, e a sua caracterização através do perfil enzimático pelo sistema Api-Zym®. Deste modo, utilizaram-se 30 amostras de M. pachydermatis isoladas de cães, com e sem sinais clínicos, identificadas pela técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). As amostras foram cultivadas em meio de Dixon modificado, incubadas a 37°C durante 48 horas, para posterior quantificação através de espectrofotometria. Um inóculo de 65 μl foi colocado em cada orifício do kit comercial de verificação enzimática e, após, incubado a 37ºC por 4 horas. Os resultados foram obtidos através da leitura visual e interpretação das titulações por escalas pré-determinadas, também foram avaliadas as reações através de “escaneamento” eletrônico. Todos os testes foram realizados em triplicata. Os resultados demonstraram a atividade de enzimas específicas pertencentes ao grupo das peptídeo hidrolases (100%), fosfohidrolases (98,3%) e éster hidrolases (91,6%), enquanto que as enzimas α-galactosidase, β-galactosidase, β-glicuronidase, α-manosidase e α-fucosidase caracterizaram 10% de todos os isolados. Além disso, não se comprovou a viabilidade do sistema utilizado no estudo para a caracterização enzimática da levedura. / Malassezia spp. are lipophilic fungi, which have been recognised for over a century as members of the normal human cutaneous flora, and also as agents of certain skin diseases. In addition, since the 1980s, they have been reported as causing opportunistic systemic infections. These yeasts have frequently been found on a diverse range of other warm-blooded animals, and their wider distribution in nature is now being explored using molecular techniques. The focus of the present study was the species no lipid-dependent Malassezia pachydermatis, and its characterization through the enzymatic profile by the Api-Zym® system. Then 30 isolated samples of dogs had been used, with and without clinical signals, identified by the technique of Polymerase Chain Reaction (PCR). The samples were cultivated into Dixon’s modified medium, incubated at 37°C during 48 hours, for posterior quantification through spectrophotometry. An inocula of 65 μl was placed in each microwell of the commercial kit of enzymatic verification and, after, it was incubated at 37ºC for 4h. The results were obtained through the visual reading and interpretation of the titulations by predetermined scales, it were also evaluated the reactions through electronic scanning. All the tests were performed in triplicate. The results demonstrated the activity of specific enzymes pertaining to the group of the peptide hydrolases (100%), phosphohydrolases (98,3%) and ester hydrolases (91,6%), while the enzymes α-galactosidase, β-galactosidase, β-glucuronidase, α-mannosidase and α-fucosidase characterized 10% off all the isolates. Moreover, it was not proven the viability of the system used in the study for the enzymatic characterization of the yeast.

O gÃnero Malassezia abrange leveduras lipofÃlicas e lipodependentes que, apÃs vÃrias mudanÃas em sua classificaÃÃo taxonÃmica, compreende na atualidade 13 espÃcies, incluindo M. pachydermatis, M. furfur, M. globosa, M. obtusa, M. sympodialis, M. slooffiae, M. restricta, M. dermatis, M. japonica, M. yamatoensis, M. nana, M. caprae e M. eqÃina. Estas leveduras estÃo associadas a vÃrias enfermidades que incluem infecÃÃes, como a pitirÃase versicolor ou dermatoses, dermatite seborrÃica e dermatite atÃpica, entre outras. O objetivo geral deste trabalho foi contribuir para melhor entendimento sobre a identificaÃÃo fenotÃpica, manutenÃÃo em micoteca e sensibilidade a antifÃngicos in vitro de Malassezia spp.. A fenotipagem baseou-se nas caracterÃsticas macro e micromorfolÃgicas, bem como anÃlises em bioquÃmicas e nutricionais. Doze cepas de diferentes espÃcies de Malassezia spp. sofreram estocagem a -80ÂC sob Ãleos vegetais. A tÃcnica de microdiluiÃÃo foi realizada em caldo RPMI 1640, suplementado com bile, glicerol e Tween 20, sendo complementada com subcultivo em Ãgar Dixon, para determinaÃÃo da concentraÃÃo inibitÃria mÃnima (CIM) e da concentraÃÃo fungicida mÃnima (CFM). As drogas testadas foram Cetoconazol (CET), Itraconazol (ITR), Fluconazol (FLU), Voriconazol (VOR), Anfotericina B (ANB) e Caspofungina (CAS). Com a anÃlise fenotÃpica convencional das cepas (n=38), pode-se sugerir a presenÃa de M. furfur/ M. dermatis (n=17), M. sympodialis (n=8), M. slooffiae (n=5) e M. pachydermatis (n=8). O estoque realizado em Ãleos vegetais a -80ÂC demonstrou significativas taxas de recuperaÃÃo, no entanto caracterÃsticas fisiolÃgicas foram alteradas como _-glicosidase e assimilaÃÃo de Chremophor EL. A maioria das cepas estudadas (84,21%), M. pahydermatis e cepas lipodependentes, foram sensÃveis ao CET e ITR, obtendo valores de CIM &#61603;&#61472;0,03&#956;g/mL. Para o FLU, os valores de CIM variaram de 4 a 64&#956;g/mL e frente ao VOR as cepas de M. pachydermatis obtiveram CIMs que variaram de <0,03 a 2&#956;g/mL, enquanto as cepas lipodependentes de Malassezia spp. obtiveram resultados mais dispersos que variaram de <0,03 a >16&#956;g/mL. Perante ANB, o intervalo de CIM encontrado foi de 1 a >16&#956;g/mL. NÃo foi possÃvel determinar os valores de CIM e CFM frente à caspofungina. Os extratos oriundos das sementes do abacate foram ativos contra as cepas de M. pachydermatis. / The genus Malassezia enclose lipophylic and lipid-dependent yeast that after many changes in its taxonomic classification, comprises in the atuality 13 species, including M. pachydermatis, M. furfur, M. sympodialis, M. globosa, M. obtusa, M. restricta, M. slooffiae, M. dermatis, M. japonica, M. yamatoensis, M. nana, M. equine, and M. caprae. These yeasts are associated to several diseases including, such as pityriasis versicolor, or dermatoses, seborrheic dermatitis and atopic dermatitis, among others. The general aim of this study was to contribute to better knowledgement about the phenotypical identification, storage in fungal collection and in vitro antifungal susceptibility of Malassezia spp. The phenotiping was based on macro and micromorphologics characteristics, as well as biochemistry and nutritional analisys. Twenteen strains suffers storage at -80ÂC in vegetables oils. The microdilution technique was accomplished in RPMI 1640 broth, supplemented with ox bile, Tween 20 and glycerol, being complemented with subculture on Dixon agar, for determination of the minimal inhibitory concentration (MIC) and minimal fungicidal concentration (CFM). The drugs tested were ketoconazole (KET), itraconazole (ITR), fluconazole (FLC), amphotericin B (AMB) and caspofungine (CAS). With the conventional phenotypical analysis of the strains (n=38), could suggest the presence of the M. furfur/ M. dermatis (n=17), M. sympodialis (n=8), M. slooffiae (n=5) and M. pachydermatis (n=8). The stored accomplished in vegetable oils at -80ÂC showed meaningful rate of recorver, but physiologic characteristics was modified, such as _-glicosidase activity and Chremophor EL assimilation. Most of the strains (84,21%) was sensitive for KET and ITR, obtaining values of MIC &#61603;&#61472;0.03&#956;g/mL. For FLC the MIC range was 4 to 64&#956;g/mL, against VOR the strains of M. pachydermatis obtained MIC range <0,03 a 2&#956;g/mL, therefore the lipid-dependents strains of Malassezia spp. obtained dispersive results from <0.03 to >16&#956;g/mL. Against ANB, the MIC range was 1 to >16&#956;g/mL. It was not possible determinate the MIC and MFC values for caspofungine. The extracts from avocado seeds were active against strains of M. pachydermatis.

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karolinska institutet, 2002. / Härtill 5 uppsatser.

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karol. Inst., 2002. / Härtill 4 uppsatser.