Made available in DSpace on 2018-08-02T00:00:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_4830_Tiago Tadeu Wirtti Mestrado.pdf: 5897734 bytes, checksum: 2159faee3acbb302df7a59e7fa502a83 (MD5) Previous issue date: 2012-12-05 / O presente trabalho sugere uma metodologia para segmentação de massas em mamografias digitalizadas. A massa se destaca dos demais tecidos da mama por apresentar densidade parcialmente homogênea e formato arredondado, espiculado ou indefinido. A estratégia de segmentação baseia-se na separação da mamografia digital em fatias por faixa de intensidade e avaliação da densidade de cada fatia usando transformada wavelet multiescala. Os dados de densidade obtidos através do processamento com wavelets são usadospara treinar uma rede neural perceptron multicamadas com uma camada oculta com retropropagação de erro. Após Não disponível.O presente trabalho sugere uma metodologia para segmentação de massas em mamografias digitalizadas. A massa se destaca dos demais tecidos da mama por apresentar densidade parcialmente homogênea e formato arredondado, espiculado ou indefinido. A estratégia de segmentação baseia-se na separação da mamografia digital em fatias por faixa de intensidade e avaliação da densidade de cada fatia usando transformada wavelet multiescala. Os dados de densidade obtidos através do processamento com wavelets são usadospara treinar uma rede neural perceptron multicamadas com uma camada oculta com retropropagação de erro. Após a fase de treinamento, mamografias da base de teste, exceto aquelas utilizadas na fase de treinamento, podem ser submetidas à rede neural treinada. O processamento resultante, realizado sobre cada fatia da imagem investigada, evidenciaachados de densidade relevante. Os achados em cada fatia são avaliados por um filtro de gradiente, gerando fatias contendo informação relevante sobre o gradiente acumulado de cada achado. Os gradientes acumulados que aparecem na mesma posição em fatias subsequentes são analisados de forma heurística resultando na seleção das massas. Foram utilizadas 31 imagens da base de mamografias mini-MIAS, sendo duas imagens para treinamento e as demais para teste do classificador. Obteve-se TPR(sensibilidade) de 75,00 %, FPRde 23,91 %, especificidade de 76,09 % a fase de treinamento, mamografias da base de teste, exceto aquelas utilizadas na fase de treinamento, podem ser submetidas à rede neural treinada. O processamento resultante, realizado sobre cada fatia da imagem investigada, evidenciaachados de densidade relevante. Os achados em cada fatia são avaliados por um filtro de gradiente, gerando fatias contendo informação relevante sobre o gradiente acumulado de cada achado. Os gradientes acumulados que aparecem na mesma posição em fatias subsequentes são analisados de forma heurística resultando na seleção das massas. Foram utilizadas 31 imagens da base de mamografias mini-MIAS, sendo duas imagens para treinamento e as demais para teste do classificador. Obteve-se TPR(sensibilidade) de 75,00 %, FPRde 23,91 %, especificidade de 76,09 %

Orientador: Mariângela Esther Alencar Marques / Banca: Gilberto Uemura / Banca: Sérgio Vicente Serrano / Banca: José Roberto Figaro Caldeira / Banca: Cleverson Teixeira Soares / Resumo: O câncer de mama (CM) representa um importante problema de saúde pública no mundo, com aproximadamente 1.400.000 casos diagnosticados e 460.000 mortes por ano. É considerada uma doença heterogênea, com alterações em diversas vias de sinalização molecular. Tanto os marcadores prognósticos quanto os preditivos são de grande importância para a tomada de decisões terapêuticas. No caso do CM operado, os marcadores prognósticos ajudam a determinar se a paciente necessita de tratamento adicional e os marcadores preditivos auxiliam o clínico a decidir qual tratamento a ser utilizado. Desta forma, o melhor conhecimento dos marcadores prognósticos e preditivos conhecidos e a identificação de novos marcadores, poderão auxiliar o tratamento de pacientes com CM de forma mais adequada. Dois marcadores tumorais com possíveis implicações clínicas são o TGF-β1 e o seu receptor TGF-βRII. Em relação ao impacto preditor de resposta a quimioterapia, os referidos marcadores ainda não foram devidamente estudados. Quanto ao papel prognóstico, os estudos em literatura são contraditórios. Acredita-se que o TGF-β atue de forma diferente em função do tipo celular e do contexto biológico envolvido. Assim, é supressor tumoral nos estágios iniciais da carcinogenese e promotor tumoral nos estágios tardios. O momento da troca de papéis não está estabelecido, porém, sabe-se que, em um mesmo tumor, o TGF-β pode atuar tanto como supressor quanto como promotor tumoral simultaneamente. Em face da complexidade biológica do TGF-β, optou-se por estudar um grupo homogêneo de mulheres com CM em estádio TNM III, com longo período de seguimento clínico, submetidas à quimioterapia neoadjuvante (QtNeo) baseada em doxorrubicina e também à quimioterapia adjuvante. Desta forma, o objetivo deste... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Breast cancer (BC) represents an important public heatlh problem worldwide, with approximately 1.4 million new cases and 460,000 deaths per year. It is considered a heterogeneous disease with changes in several molecular signalling pathways. Both the predictive and prognostic markers are important for making therapeutic decisions. In the case of operated BC, prognostic markers help to determine if the patient needs additional treatment and predictive markers help the clinician to decide which treatment to use. Thus, a better knowledge of known predictive and prognostic markers and the identification of new markers, may improve the treatment of BC patients. Two tumor markers with potential clinical implications are TGF-β1 and its receptor TGF-βRII. Regarding the prediction of response to cancer chemotherapy, these markers have not been adequately studied. Considering its prognostic value, published studies are contradictory. It is believed that the TGF-β acts differently depending on the cell type and the biological context involved. Thus, it acts as a tumor suppressor in the early stages of carcinogenesis and as a tumor promoter in later stages. The moment of role switch is not established, however, it is known that in the same tumor, TGF-β can act as both tumor suppressor and promoter simultaneously. Given the biological complexity of TGF-β, we chose to study a homogeneous group of women with TNM stage III BCs comprising tumors with long follow-up period, submitted to doxorubicinbased neoadjuvant chemotherapy (NAC) and adjuvant chemotherapy as well. Thus, the aim of this study was to evaluate the protein expression of TGF-β1 and TGF-βRII in a sample of BCs and to correlate it with clinical and pathological response rates, occurrence of distant metastasis, and survival analysis. To this end... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Debora Aparecida Pires de Campos Zuccari / Banca: Dorotéia Rossi Souza / Banca: Flavia Cristina Rodrigues Lisoni / Banca: Marília de Freitas Calmon / Banca: Wilson Araújo da Silva Filho / Resumo: O câncer de mama apresenta altas taxas de incidência e também de mortalidade, sendo a neoplasia mais comum entre as mulheres. MicroRNAs (miRNAs) são pequenas moléculas de RNAs não codificantes que desempenham papel fundamental na regulação gênica. Estudos recentes têm demonstrado que miRNAs estão diretamente envolvidos na iniciação e progressão de vários tipos tumorais, incluindo o câncer de mama. Diversos miRNAs têm sido descritos como promotores ou supressores tumorais, podendo estar associados ao crescimento do tumor e metástase. Atualmente, tem sido demonstrado que a administração exógena da melatonina, um hormônio naturalmente secretado pela glândula pineal, apresenta diversos efeitos oncostáticos em diferentes tipos tumorais. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar o papel da melatonina em uma possível via metastática envolvendo a regulação de miRNAs em células da linhagem de câncer de mama metastática e triplo-negativa MDA-MB-231. Inicialmente, a expressão de 384 miRNAs foi avaliada utilizando placas "Taqman Low-density Array" (TLDA). Para futuras validações, foram selecionados apenas miRNAs que apresentaram fold change >1,5 e <0,5. Os resultados demonstraram que a melatonina modulou a expressão de 17 miRNAs (11 superexpressos e 6 inibidos). Dentre os miRNAs modulados pela melatonina, miR-148b e miR-210 foram confirmados por qRT-PCR, selecionados e utilizados para investigações funcionais. As células MDAMB-231 foram então transfectadas para inibição... / Abstract: Breast cancer has high rates of incidence and mortality, and it is the most common cancer among women. MicroRNAs (miRNAs) are small molecules of non-coding mRNA that play a key role in gene regulation. Recent studies have shown that miRNAs are directly involved in the initiation and progression of various tumor types, including breast cancer. Several miRNAs have been described as promoters or suppressors of metastasis and may be associated with tumor growth and metastasis. Exogenous administration of melatonin, a hormone secreted by the pineal gland, has been shown several oncostatics effects on different types of cancers. Herein, we investigated if the antimetastatic effects of melatonin were coordinated by miRNAs involved in tumor progression. The expression of 384 miRNAs was measured using Taqman Low-density Array (TLDA) cards. Considering the cut-off we imposed (fold change >1.5 and (fold change >1.5 and<0.5) were evidenced the modulation of 17 miRNAs (11 up and 6 down). Among all miRNAs modulated, the selected miR-210 and miR-148b were further confirmed by qRT-PCR and tested for functional investigations. First, we engineered cells for miR-210 or miR-148b overexpression or depletion (stable or transient), then we evaluated the effect of melatonin on c-Myc protein expression and migration. Melatonin reduced c-Myc expression and migration in cell depleted or not for miR-148b. However no effect on c-Myc or migration was observed for cells depleted for miR-148b when ... / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-22Bitstream added on 2014-06-13T19:40:52Z : No. of bitstreams: 1 conde_sj_dr_botfm.pdf: 1083233 bytes, checksum: a328bfb8396940e543c7e1865edd1942 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Sabe-se que o E2 e o status hormonal da paciente são importantes para a proliferação e o tratamento do câncer de mama, quanto ao T3, apesar dos estudos epidemiológicos serem ainda contraditórios em relação a sua influência no câncer de mama, estudos laboratoriais demonstram sua capacidade de induzir a sua proliferação e induzir genes que são induzidos por estrógeno. Portanto a hipótese formulada foi que os hormônios tireoidianos modulam a expressão dos mesmos genes que o estrógeno em carcinoma de mama. Para materializar a hipótese o objetivo foi comparar a expressão dos genes TGFA, TGFB1 e PGR, resultantes da ação do estrógeno, e dos genes TNFRSF9, BMP6 e THRA, resultantes da ação do hormônio tireoidiano, combinados ou não com a ação do Tamoxifem, em carcinoma de mama colocado em cultura primária. Foram selecionadas 12 pacientes do sexo feminino, menopausadas, com Carcinoma de Mama estádio grau 1 e 2 , do Hospital do Câncer de São Paulo, verificou-se a existência de disfunção tireoidiana concomitante, através das dosagens laboratoriais de T3L, T4L, TSH, TPO-AB, assim como o status hormonal em relação aos níveis estrogênicos. Fragmentos tumorais obtidos cirurgicamente foram colocados em cultura primária. Essas células foram tratadas com E2 (10-7M), T3 (10-8M), E2 (10-7M) + TAM (10-6M), T3 (10-8M) + TAM (10-6M), TAM (10-6M), com posterior extração de RNA total. Foi utilizada a metodologia de PCR em Tempo Real para verificar a ação do T3 e do E2 em genes normalmente induzidos pelo E2 (PGR, TGFA e TGFB1), verificada a expressão de genes que aumentam (TNFRSF9 e THRA) e diminuem (BMP6) pela ação do T3 em seu receptor (TR) e a presença de mutações no TR. Não foram encontradas mutações envolvendo o receptor de hormônio... / It is known that E2 and the patient’s hormonal status is important for the proliferation and the treatment of the breast cancer. Despite the contradictory epidemic studies of T3 and its influence in the breast cancer, laboratory studies demonstrate its capacity to induce not only its proliferation but also genes that are induced by estrogen. Therefore the hypothesis was that the thyroid hormones modulate the expression of the same genes as the estrogen in breast carcinoma. The objective was to compare the expression of the genes TGFA, TGFB1 and PGR, resultant of the estrogen action and genes TNFRSF9, BMP6 and THRA, resultant of the thyroid hormone action, combined or not with the Tamoxifen action in breast carcinoma in primary culture. 12 menopausal patients with breast carcinoma stages 1 and 2, of São Paulo Cancer Hospital were selected. The existence of concomitant thyroid dysfunction was verified through laboratory dosages of T3L, T4L, TSH, TPOAB, as well as the hormonal status in relation to the estrogen levels. Tumor fragments surgically obtained were put in primary culture. Those cells were treated with E2 (10-7M), T3 (10-8M), E2 (10-7M) + …, with subsequent extraction of total RNA. The methodology of PCR was used in Real Time to verify the action of T3 and E2 in genes usually induced by E2 (PGR, TGFA and TGFB1), verified the expression of genes which increase (TNFRSF9 and THRA) and decrease (BMP6) by the action of T3 in its receptor (TR) and the presence of mutations in TR. Mutations involving the thyroid hormone receptor were not found. Related to the genic expressions, in the ER positive patients, the treatment with T3 increased the expression of TGFA, THRA, TNFRSF9 and PGR genes significantly and reduced the expression of TGFB1 and BMP6. When... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Denise Fecchio / Coorientador: Célia Regina Nogueira / Banca: Selma Giorgio / Banca: Dulce Helena Jardim Costantino / Banca: Paula de Oliveira Montandon Hokama / Banca: Rozany Mucha Dofloth / Resumo: A importância do estrógeno (E2) no desenvolvimento do câncer de mama é bem estabelecido na literatura. O uso de antagonistas de E2 para o tratamento de tumores positivos para o receptor de estrógeno mostra-se importante para a sobrevida de pacientes acometidas pela doença. Amphiregulin (Areg), um fator de crescimento regulador multifuncional que pode ser induzido por estrógeno, possui papel central no desenvolvimento da glândula mamária e na morfogênese de órgãos e é expresso tanto em tecidos normais como cancerosos. Estudos clínicos sugerem que amphiregulin também desempenha papel importante na progressão do câncer da mama humano e a sua expressão aumentada tem sido associada com doença agressiva. Para investigar o mecanismo pelo qual o E2 induz a expressão de AREG, células MCF-7 e MDA-MB-231 foram tratadas durante 10 minutos, 30 minutos, 1 hora e 4 horas com veículo (controle) ou E2 isoladamente ou em associação com Fulvestrant (ICI, inibidor do receptor de estrógeno), Actinomicina D (ACTD, inibidor da transcrição gênica), Ciclohexamida (CHX, inibidor da síntese proteica) ou LY (inibidor da via PI3K). Os inibidores também foram utilizados isoladamente. O RNAm foi extraído das células pelo método de trizol e a expressão de AREG foi analisada por qRT-PCR. O tratamento de ambas as células com E2 induziu aumento do RNAm de AREG em todos os tempos analisados. Esse aumento foi parcialmente dependente de ER nas células MCF-7 nos tempos de 10 minutos, 1 e 4 horas. Em 30 minutos não foi observado a ligação do E2 com o ER para que houvesse o aumento da expressão do gene alvo. Nas células MDA-MB-231 o estrógeno aumentou o RNAm de AREG por pelo menos duas vias distintas em todos tempos analisados. Uma das vias ativa a via PI3K para que este efeito ocorra. Nossos resultados demonstram que o E2 é capaz de induzir a expressão de AREG em linhagens de células de câncer de ... / Abstract: The relevance of estrogen in breast cancer development is well established in the literature. The use of E2 antagonists for ER-positive breast cancer treatment is shown to be important to patients' survival. Amphiregulin, a multifunctional growth regulator factor that may be induced by estrogen plays a central role in development of mammary glands and organ morphogenesis, is expressed in both normal and cancerous tissues. Clinical studies suggest that amphiregulin also is important in human breast cancer progression and its expression has been associated with aggressive disease. To investigate the mechanism whereby E2 induces AREG expression, MCF-7 and MDA-MB-231 cells were treated for 10 minutes, 30 minutes, 1 hour or 4 hours with vehicle (control) or estrogen (E2) isolated or in association with Fulvestrant (ICI, estrogen receptor inhibitor), Actinomycin D (ACTD, gene transcription inhibitor), Cycloheximide (CHX, protein synthesis inhibitor ) or LY (PI3K inhibitor). The inhibitors were also used alone. mRNA was extracted from the cells by the Trizol method and AREG expression analyzed by qRT-PCR. Treatment of both cell types with E2 increased AREG mRNA expression at all moments. This increase was partially ER-dependent in MCF- 7 cells at 10 minutes, 1 and 4 hours. At 30 min, no binding of E2 to ER was obseved. In MDA-MB-231 cells, the estrogen-induced AREG mRNA was enhanced by two distinct pathways at the moments analyzed and PI3K pathways participated in one of them. Our results showed that E2 was able to induce the AREG expression in breast cancer cell lines in an ER-dependent and -independent manner / Doutor

Orientador : Prof. Dr. Ricardo Lehtonen Rodrigues de Souza / Co-orientadora : Profª Drª Lupe Furtado Alle / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Genética. Defesa: Curitiba, 27/02/2013 / Inclui referências / Área de concentração : Genética / Resumo: Alterações na estrutura e na expressão de alguns genes são eventos comuns na formação e progressão de diversos tumores e possuem relevância na busca por marcadores de neoplasia ou ainda para a classificação e caracterização molecular de tumores. Existem na literatura alguns relatos de que as regiões onde estão localizados os genes ACHE e EPHB4 (7q22) e os genes BCHE e MME (3q26) apresentam amplificações e deleções em diversos tipos de câncer. Além disso, os produtos desses genes têm sido descritos com alterações no nível de expressão nessa doença. Com o objetivo de verificar se esses genes estão sofrendo alterações no número de cópias, analisamos 32 amostras de DNA do tumor e do sangue periférico de pacientes de câncer de mama, usando a técnica de qPCR e quantificando pelo método da curva padrão. Os genes ACHE e EPHB4 apresentaram uma tendência a estar amplificado (62,5% vs. 37,5%; p . 0,1; e 53,13% vs. 46,88%; p . 0,5; respectivamente) e os genes BCHE e MME uma tendência a estarem deletados (56,25% vs. 43,75% em ambos; p . 0,5). Essas alterações obtidas nos conjuntos de genes localizados proximamente (ACHE-EPHB4 e BCHE-MME) mostraram correlação (rs 0.5948; p = 0.0004; rs = 0.3581; p = 0.0478 respectivamente), indicando uma concordância na alteração da estrutura dessas regiões cromossômicas . Adicionalmente avaliamos a expressão relativa desses genes em 45 amostras de carcinoma mamário e em 8 amostras de tecido normal. Essa análise foi feita por RT-qPCR utilizando o método do Ct comparativo (2-..Ct). Observou-se que a expressão dos genes BCHE e MME encontra-se baixa em quase todas as amostras tumorais (95,6%), no entanto, os genes ACHE e EPHB4 não apresentam diferença no número de amostras com maior e menor expressão em tumores. A média de expressão de BCHE e MME é significativamente maior no tecido normal do que no tumoral (Z = -3,702; p < 0,001 e Z = -4,120; p < 0,001, respectivamente). Para os genes ACHE e EPHB4 essa diferença não é observada (Z = -0,870; p = 0,385 e Z = -0,025; p = 0,98, respectivamente). Correlacionou-se as alterações no número de cópias com os níveis de expressão relativa e verificou-se que não existe relação direta entre esses dois fatores para os genes estudados. Também não foi encontrado nenhuma relação dessas alterações com os parâmetros histopatológicos de cada paciente. Como conclusão, nota-se que não há uma relação causal direta dessa alteração do número de cópias com o desenvolvimento do tumor, podendo ser esta uma consequência do processo neoplásico, e que de alguma forma torna-se vantajoso para a progressão da doença. Além disso, pode-se observar também que o perfil de baixa expressão dos genes BCHE e MME é um comportamento característico desses genes no tecido tumoral, e por não ter relação direta com a tendência à deleção, propõe-se que possa ser regulada por algum outro fator, provavelmente algum evento epigenético. Já o perfil de expressão semelhante dos genes ACHE e EPHB4 nos dois tecidos nos permite sugerir que o padrão de expressão obtido para esses genes pode ser um evento comum na mama, parecendo não ser influenciado pelo processo de carcinogênese. Palavras-chave: alteração do número de cópias, expressão gênica relativa, câncer de mama, região 7q22, região 3q26. / Abstract: Changes in the structure and expression of some genes are common events in the formation and progression of several tumors and have relevance in the search for neoplasia markers or for the molecular characterization and classification of tumors. The regions where the ACHE and EPHB4 (7q22) and BCHE e MME (3q26) genes are mapping has been reported suffering amplifications and deletions in several types of cancer. And the products of these genes are described as showing changes in the level of expression in this disease. Aiming to verify whether these genes are undergoing copy number variation, we analyzed 32 samples of DNA from tumor and peripheral blood of breast cancer patients, using the qPCR technique and quantify by standard curve method. The ACHE and EPHB4 genes tended to be amplified (62,5% vs. 37,5%; p . 0,1; e 53,13% vs. 46,88%; p . 0,5; respectively) and BCHE and MME genes a tendency to be deleted (56,25% vs. 43,75% both; p . 0,5). Sets of genes close (ACHE-EPHB4 and BCHE-MME) showed that their variations are correlated (rs 0.5948; p = 0.0004; s = 0.3581; p = 0.0478 respectively). Further, assess the relative expression of these genes in 45 breast carcinoma samples and 8 of normal tissue. This analysis was performed by RT-qPCR using the comparative Ct method (2-..Ct). The expression of BCHE and MME genes is lower in almost every tumor samples (95,6%) and the ACHE and EPHB4 genes have no difference to the amount of overexpression and lowexpression samples in this tissue. The mean expression of BCHE and MME is significantly higher in normal tissue than (Z = -3,702; p < 0,001 e Z = -4,120; p < 0,001, respectively). To the ACHE and EPHB4 genes this difference does not exist (Z = -0,870; p = 0,385 e Z = -0,025; p = 0,98, respectively). Correlated the copy number variation to relative expression levels, however find that there is no direct relationship between these two factors for the genes studied. Found no relation of these alterations with histopathological parameters of each patient. It is possible to suggest that the low expression profile of BCHE and MME genes is a characteristic behavior in tumor tissue and having failed to direct relation with the tendency to deletion, it is proposed that this differential expression may be regulated by some other factor probably epigenetic. The same expression profile of the ACHE and EPHB4 genes in both tissues, as well as the fact that the amount of transcript overexpressed and lowexpressed be equal in breast carcinoma, allows us suggest that the expression pattern obtained for these genes may be a common event in breast, seems not to be influenced by the process of carcinogenesis Keywords: copy number variation, relative gene expression, breast cancer, 7q22 region, 3q26 region.

Orientador: Maria Denise Lopes / Banca: Noeme Sousa Rocha / Banca: Andrigo Barboza Di Nardi / Resumo: Os tumores mamários constituem as neoplasias de maior ocorrência nas cadelas e os hormônios são apontados como um dos principais fatores etiológicos. Foram utilizadas 26 cadelas portadoras de neoplasias mamárias e cinco cadelas sem afecções mamárias para o grupo controle. Através de um questionário respondido pelos proprietários das cadelas, parâmetros como pseudogestação, histórico de prenhez, uso de contraceptivos e tipo de alimentação foram analisados. Foram realizadas dosagens hormonais séricas e teciduais, através da técnica de radioimunoensaio, além da expressão de receptores de estrógeno e progesterona por meio da técnica de q-PCR. Os resultados obtidos demonstraram que há uma maior incidência das neoplasias malignas em relação às benignas na cidade de Botucatu e região. Em relação aos aspectos clínicos, a nuliparidade ou o pequeno número de gestações compreenderam a maioria dos animais com neoplasia mamária. Além disso, o estudo demonstrou um nível de conscientização dos proprietários da região, já que poucos utilizaram meios contraceptivos em seus animais. Em relação à dieta, a maioria dos animais estudados recebia carne bovina e suína. Foi observado que as neoplasias (benignas ou malignas) sintetizam uma quantidade maior de progesterona em relação à glândula mamária normal. Por fim, os três grupos de animais estudados (tumor maligno, benigno e controle) expressaram receptores de estrógeno alfa, beta e progesterona. A quantificação relativa mostrou uma tendência para expressão maior dos receptores no grupo controle e menor no grupo dos animais com neoplasias malignas. Além disso, houve uma expressão maior de ERα em relação ao ERβ e as neoplasias malignas de origem mista apresentaram maiores concentrações dos receptores PR, ERα e ERβ, comparadas às neoplasias de origem epitelial / Abstract: Mammary gland tumors are the neoplasms most common in female dogs and the hormones may be one of the principal etiologic factors. Twenty six female dogs with mammary neoplasias and five female dogs without mammary afeccions for the control group were used. Through questionary answered by female dogs owners, the variables as pseudopregnancy, pregnancy history, contraceptives use and diet were analyzed. It was done serum and tissue hormonal content by the radioimmunoassay technique, besides the estrogen and progesterone receptors expression by q-PCR technique. The results obtained showed higher incidence of malignant tumors in respect to benign tumors at Botucatu city and region. About clinical aspects the nulliparity or a small number of pregnancy are the major of animals with mammary tumors. Besides the study showed that owners have knowledge about the incorrect use of contraceptives in their animals. About the diet the major of animals analyzed received beef or pork. It was observed that tumors (benign or malignant) synthesize major progesterone amount in respect to the normal mammary gland. Finally the three animals groups evaluated (malignat tumor, benign tumor and control) expressed alpha and beta estrogen and progesterone receptors. The relative quantification showed a tendency for a higher expression of receptors from the controle group and smaller in the malignat tumors animal group. Besides there was a major ERα expression in respect to ERβ and the malignat tumors from mixed origin presented higher concentrations of receptors PR, ERα and ERβ, in compared to tumors from epithelial origin / Mestre

Orientador: Debora Aparecida Pires de Campos Zuccari / Coorientador: Eduardo Alves Almeida / Banca: Angelo Gustavo Zucca Matthes / Banca: Eny Maria Goloni Bertollo / Banca: Luiz Octávio Regasini / Banca: Sebastião Roberto Taboga / Resumo: O câncer de mama é a principal causa de mortes relacionadas ao câncer em mulheres e pesquisas têm sido focadas em identificar e validar biomarcadores que podem ser utilizados para confirmar o diagnóstico e determinar o prognóstico. Mudanças no ritmo circadiano podem contribuir para o desenvolvimento do câncer e sendo assim, a melatonina, um hormônio sintetizado pela glândula pineal à noite, na ausência de luz e seus metabolitos AFMK e AMK são sugeridos como potenciais biomarcadores. A melatonina pode atuar através do receptor MT1 regulando cinases e a expressão de genes específicos relacionados a proliferação, angiogênese, diferenciação celular e transporte de glicose. A expressão elevada de GLUT1 (Glucose Transporter-1) está associada ao prognóstico ruim no câncer. Os objetivos deste estudo foram comparar os níveis de melatonina, AFMK e AMK em mulheres recentemente diagnosticadas com câncer de mama, mulheres em quimioterapia adjuvante, enfermeiras que trabalham à noite em comparação com mulheres saudáveis e hábitos normais e avaliou-se a expressão do receptor MT1 e GLUT1 em tumores de mama e correlacionou com os subtipos moleculares, características patológicas e prognóstico. Foi coletado sangue de 53 mulheres com câncer de mama sendo 47 sem tratamento e 6 em quimioterapia adjuvante, 19 mulheres saudáveis sendo 1 O enfermeiras de turno noturno e 9 mulheres de hábitos normais. Os compostos foram quantificados por espectrometria de massas. Para a expressão de MT1 e GLUT1 foi... / Abstract: Breast cancer is the Jeading cause of cancer-related deaths in women and researches has been focused on identify and validate biomarkers that can be used to confirm the diagnosis and determine the prognosis. Changes in circadian rhythm may contribute to the development of cancer and thus melatonin, a hormone synthesized by the pineal gland at night, in the absence of light and its metabolites AFMK and AMK are suggested as potential biomarkers. Melatonin can act through the MT1 receptor by regulating kinases and the expression of specific genes related to proliferation, angiogenesis, ce/1 differentiation and glucose transport. High GLUT1 (Glucose Transporter-1) expression is associated with poor prognosis in cancer. The objectives of this study were to compare the leveis of melatonin, AFMK and AMK in women newly diagnosed with breast cancer, women on adjuvant chemotherapy, health nurses which work at night compared to healthy women and normal habits and the expression of MT1 receptor and GLUT1 in breast tumors and correlated with molecular subtypes, pathological features and prognosis. Blood from 53 women with breast cancer was colletcted, 47 of them without treatment and 6 in adjuvant chemotherapy, 19 healthy women, 1 O of them night shift nurses and 9 women of normal habits. Compounds were quantified by mass spectrometry. For the expression of MT1 and GLUT1, immunohistochemistry was performed in 42 breast tumors. The results showed that women with breast cancer had lower ... / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-06-01Bitstream added on 2014-06-13T21:03:44Z : No. of bitstreams: 1 prando_ec_dr_botib.pdf: 1650912 bytes, checksum: 61a3213e2810a3629780bb8a28aa87c8 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Atualmente, o silenciamento de genes supressores de tumor por mecanismos epigenéticos é reconhecido como uma característica importante das células tumorais. Estudos recentes mostraram que as alterações da metilação do DNA não estão restritas a genes discretos, mas podem afetar ilhas CpG consecutivas em algumas regiões genômicas, levando à hipótese de que mecanismos epigenéticos coordenados poderiam silenciar simultaneamente a expressão de vários genes. A perda da expressão da isoforma A do gene RASSF1, localizado em 3p21.3 (uma região cromossômica frequentemente deletada no câncer), constitui um dos principais exemplos de genes que são inativados tanto por mecanismos genéticos quanto epigenéticos no câncer, incluindo os carcinomas mamários. Este estudo teve como finalidade investigar a ocorrência de alterações epigenéticas em um agrupamento gênico em 3p21.3 contendo vários genes candidatos a supressores tumorais. Foram selecionados 10 genes contíguos (SEMA3B, HYAL3, HYAL1, HYAL2 TUSC2, RASSF1, ZMYND10, NPRL2, TMEM115 e CACNA2D2) e um painel de 17 linhagens celulares derivadas de carcinomas mamários (BT-20, BT-474, BT-483, BT-549, Hs578T, MCF7, MDA-MB-134 IV, MDA-MB-231, MDA-MB-361, MDA-MB-415, MDA-MB-436, MDAMB- 453, MDA-MB-468, SK-BR-3, T-47D, ZR-75-1 e ZR-75-30), uma linhagem epitelial derivada de doença fibrocística benigna da mama (MCF10A) e duas linhagens derivadas de epitélio mamário normal (184A1 e 184B5). Inicialmente, os níveis de expressão foram quantificados por qRT-PCR (quantitative real time Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction) após o tratamento das linhagens com as drogas 5-aza-2’-desoxicitidina (5AzadC), um agente desmetilante, e tricostatina A (TSA), um inibidor das desacetilases de histonas em... / Currently, the silencing of tumor suppressor genes by epigenetic mechanisms is recognized as an important feature of tumor cells. Recent studies have showed that aberrant DNA methylation patterns are not restricted to discrete genes, but also could affect consecutive CpG islands in some genomic regions, which suggested that epigenetically coordinated mechanisms could lead to the simultaneous silencing of cancer-related genes. The loss of expression of the isoform A of the RASSF1 gene, mapped at 3p21.3 (a chromosomal region frequently deleted in cancer), is listed among those genes inactivated by both, genetic and epigenetic mechanisms in human cancer, including breast carcinomas. The purpose of this study was to investigate the occurrence of epigenetic alterations in a gene cluster at 3p21.3 which contains several candidates to tumor suppressor genes. It was selected 10 contiguous genes (SEMA3B, HYAL3, HYAL1, HYAL2 TUSC2, RASSF1, ZMYND10A, NPRL2, TMEM115 and CACNA2D2) and a panel of 17 breast cancer cell lines (BT-20, BT-474, BT- 483, BT-549, Hs578T, MCF7, MDA-MB-134 IV, MDA-MB-231, MDA-MB-361, MDA-MB-415, MDA-MB-436, MDA-MB-453, MDA-MB-468, SK-BR-3, T-47D, ZR-75-1 and ZR-75-30), one cell line derived from benign fibrocystic disease of the breast (MCF10A) and two cell lines derived from normal mammary epithelium (184A1 and 184B5). Initially, the expression levels were quantified by qRT-PCR (quantitative real time Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction) after the treatments of the cell lines with the 5-aza-2'-deoxycytidine (5Azadc), a DNA demethylating agent and trichostatin A (TSA) a histone deacetylase inhibitor, relative to the untreated controls. The results obtained showed that RASSF1 transcripts were detected in all cell lines; however, the expression of RASSF1A isoform was detected only in the Hs578T and... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004Bitstream added on 2014-06-13T19:22:31Z : No. of bitstreams: 1 andrade_jc_dr_botfm.pdf: 2650759 bytes, checksum: 3247fedde23c0a35497a64d9285fa833 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O objetivo deste trabalho foi estudar através do exame Imunoistoquimico, a correlação entre alguns fatores Anatomopatológicos (tipo histológico e grau nuclear) e alguns fatores biológicos (receptores hormonais de estrógeno e de progesterona, proteína c-erbB-2 e proteína p53, no carcinoma de Paget da mama, doença rara e especial. No período entre Janeiro de 1980 a Dezembro de 1998 foram tratados no Instituto Brasileiro de Controle do Câncer, 6.303 casos de câncer de mama, deste total 98 casos foram diagnosticados como carcinoma de Paget, cuja incidência foi de 1,55%. Estudamos retrospectivamente 60 casos, sendo que 38 deles foram excluídos da análise, devido a limitação e escassez da amostra no material disponível, a idade das pacientes variou entre 26 e 84 anos, com média de 55,4 anos, as informações clínicas e terapêuticas foram obtidas dos prontuários das pacientes considerando, idade na época do diagnóstico, tamanho do tumor quando palpável, estadiamento clínico, e o tipo de cirurgia realizada. As amostras de tecido mamário foram recuperadas dos arquivos do Departamento de Anatomia Patológica do I.B.C.C. / MATTOSINHO. Após a revisão histológica, realizada por dois patologistas os casos foram classificados em quatro grupos: Grupo A- Doença de Paget (forma pura) n = 09 Grupo B- Doença de Paget + neoplasia ductal “in situ”, n = 12 Grupo C- Doença de Paget, neoplasia ductal invasora, n = 30 Grupo D- Doença de Paget + neoplasia ductal “in situ”+ neoplasia ductal invasora, n = 09. Entre as variáveis anatomopatológicas, o grupo C prevaleceu com 30 casos (50%). O grau nuclear (GN-II) predominou com 45 casos (75%). Em relação as variáveis biológicas o receptor de estrógeno negativo predominou com 41 casos (68,3%), seguido pelo receptor de progesterona negativo com 40 casos (66,7%), podemos dizer que... / The objective of this paper was to study the immunohistochemical efects of Paget’s disease, a rare and special carcinoma of the breast, by correlating anatomopathological (histological and nuclear grade) and biological (estrogen and progesterone hormonal receptors, c-erbB-2 protein and p53 protein) factors. Between January 1980 and December 1998, 6303 cases of breast cancer were treated at the Brazilian Institute of Cancer Control; 98 of these were diagnosed with Paget’s carcinoma, an incidence of 1.55%. We retrospectively studied 60 of these cases; 38 were excluded due to lack of available sample material. Patient age varied between 26 and 84 years (mean 55.4), clinical and therapeutic information were obtained from patient’s medical records considering age at time of diagnosis, tumor size when palpable, clinical stage, and type of surgery performed. Samples of breast tissue were retrieved the Anatomical Pathology Department, I.B.C.C. / MATTOSINHO. After histological review, by two different pathologists, they were classified into four groups: Group A- Paget’s disease (pure form) n = 09 Group B- Paget’s disease + “in situ” duct neoplasia n = 12 Group C- Paget’s disease, invasive duct neoplasia n = 30 Group D- Paget’s disease + “in situ” duct neoplasia + invasive duct neoplasia n = 09.Invasive duct neoplasia was the most prevalent anatomopathological variable (Group C, n = 30, 50%). Nuclear grade (GNII) was found in 45 cases (75%). In relation to the biological variables, the negative estrogen receptor was predominant with 41 cases (68.3%), followed by the negative progesterone receptor with 40 cases (66.7%); this correlation had good concordance by the Kappa test. The c-erbB-2 protein was positive in 53 cases (88.3%) and p53 was negative in 47 cases (78.3%). From these results, we concluded that there was no statistical... (Complete abstract click electronic address below)