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Detecção de genes de entrotoxinas de Staphylococcus aureus e estafilococos coagulase negativos isolados de leite bovino e de tanques de refrigeração comunitários procedentes de pequenas propriedades da região de Bauru-SP

Lemos, Fabio Almeida de [UNESP] 30 April 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-10T14:22:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-04-30. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:28:56Z : No. of bitstreams: 1 000849670.pdf: 1421991 bytes, checksum: 5b10092e2a2350f4d4a5b9c0411c1341 (MD5) / O presente estudo teve como objetivo o isolamento de Staphylococcus aureus e estafilococos coagulase negativos (ECN), associados com casos de mastite subclínica, a partir de amostras de leite de 134 vacas, em dez pequenas propriedades leiteiras familiares, da região de Bauru - SP, determinar a susceptibilidade a antimicrobianos e investigar a presença de genes de enterotoxinas e do gene mecA de resistência à oxacilina, dos casos de mastite subclínica, a partir das cepas bacterianas isoladas do leite dos animais, e dos tanques de resfriamento. Isolaram se 105 amostras de Staphylococcus spp, sendo 55 (52,4%) estafilococos coagulase positivos (ECP) e 50 (47,6%) ECN. Entre os ECP, S.aureus foi isolado em 48 (87,3%) dos casos. Das 12 espécies de ECN isoladas, as mais freqüentes foram S. warneri, S. hyicus, e S. xylosus. Os maiores níveis de resistência, foram observados frente ao grupo dos beta-lactâmicos tanto para os ECP - 92,7% para penicilina e 90,9% para ampicilina, como para os ECN - 56% e 52% de resistência, respectivamente. Todas amostras de ECP foram sensíveis a cefalexina, e 96% dos isolados de ECN a enrofloxacina. Em relação a presença de genes codificadores de enterotoxinas, dos casos de mastite subclínica, 17/142 (12%) foi positiva para algum dos genes estudados. O gene sea foi o mais prevalente, sendo detectado em 11 (7,7%). O gene seb em 05 (3,5%) e o sec em 01 (0,7%) das amostras. Todas foram negativas para o gene sed. Dos Staphylococcus spp isolados das mastites subclínicas, houve detecção do gene sec em 8/105 (7,6%), sendo que cinco (4,7%) eram ECP, e três (2,8%) ECN. Das 10 amostras de leite dos tanques, duas (20%) foram positivas para sea e uma (10%) para seb. O gene mecA foi detectado em três cepas de S. aureus, (6,2%). A identificação de genes codificadores de enterotoxinas em casos de mastite subclínica e em tanques comunitários, sinalizam a importância do monitoramento destes agentes visando a... / This study aimed at the isolation of Staphylococcus aureus and coagulase-negative staphylococci, from bovine milk samples, associated with cases of subclinical mastitis detected in ten small properties from Bauru - SP. Also, determine the antimicrobial susceptibility of the agents isolated and to investigate the presence of enterotoxin gene and the mecA gene of oxacillin resistance from the bacterial strains, and milk samples from bulk tanks . Of 105 samples obtained, 55 ( 52.4 %) were coagulase positive staphylococcus (CPS) and 50 (47.6%) coagulase negative staphylococcus (CNS). Among the CPS, S. aureus was isolated in most cases, 48 ( 87.3 %). Of the 12 CNS species isolated, the most frequent were S. warneri, S. hyicus, both with 8 (16%) and S. xylosus 7 (14%) . The highest levels of antibiotics resistance were observed for the group of β - lactam antibiotics - penicillin 92.7% and ampicillin 90.9% CPS and ECN - 56 % and 52 % respectively. The greatest sensitivity of the CPS strains was to cephalexin, and for CNS isolates to enrofloxacin. From the cases of subclinical mastitis, genes encoding enterotoxins were found in, 17/142 (12%) . The sea gene was the most prevalent being detected in 11 ( 7.7 %). The seb gene was detected in five (3.5%) samples, and in one sec (0.7%). All were negative for sed gene. When we consider the results directly from cultures of Staphylococcus spp. isolated from subclinical mastitis, there was only the gene sec in 8/105 (7.6%).From these isolates of Staphylococcus spp., positive for sec 05/105 (4.8%) were CPS, (03 S. aureus and 02 S.intermedius) and 03/105 (2.8%) CNS, (01 S. xylosus, 01 S.hyicus and 01 S.lugdunensis). To sea, seb and sed samples were negative. Of the ten samples from the bulk tanks, 02/10 (20%) were positive for sea and 01/10 (10%) to seb. The mecA gene was detected in three strains of S. aureus, representing 6.2% of the total of 48 S. aureus strains isolated. The identification ...
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Proposta de um programa de qualidade o leite e controle da mastite em rebanho bovino de vacas holandesas / Proposal for a quality milk program and control of mastitis in holsteins cows casttle herd

Wanderley, Guido Gomes [UNESP] 24 April 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-10T14:23:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-04-24. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:29:45Z : No. of bitstreams: 1 000849387_20161231.pdf: 143497 bytes, checksum: ae5f76282e5b29080f53735526e3c528 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-01-02T15:03:58Z: 000849387_20161231.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-01-02T15:05:11Z : No. of bitstreams: 1 000849387.pdf: 2412719 bytes, checksum: bbc7948279cd76db4344ac1e779b661c (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A mastite é a afecção que mais onera o setor leiteiro mundial, sendo ainda importante entrave para melhoria da produção. O objetivo deste estudo epidemiológico prospectivo foi desenvolver um plano de controle de mastite em um rebanho de vacas Holandesas. A propriedade foi visitada durante 18 meses para colheita de dados e instituição do plano de controle. Os primeiros quatro meses corresponderam à fase de diagnóstico, seguida de uma fase de intervenção perfazendo 14 meses. O plano de controle reduziu de 53,7% para 23,3% a mastite subclínica. A contagem de células somáticas do tanque reduziu de 1446 x 103 células/mL para 214 x 103 células/mL. A prevalência de mastite clínica foi 11,11% e a incidência média foi de 7,6%. Do total de 704 casos, 30,1% (217/704) não puderam ser avaliados quanto à cura bacteriológica, por não haver a amostras pós-tratamento, 51,3% (249/485) curaram, 49,7% (236/485) falharam e repetiram o mesmo patógeno ou falharam com isolamento de um novo patógeno. Do total de 485 casos que puderam ser avaliados quanto à cura bacteriológica 71,9% (349/485), 19% (92/485), 7,4% (36/485) e 1,6% (8/485) eram, respectivamente, referentes aos primeiros, segundos, terceiros e quartos casos de mastite clínica na mesma glândula mamária. Houve falha no tratamento em 53,65% (44/82), 47,5% (165/347) e 48,21% 27/56, severidade um, dois e três, respectivamente. O plano de controle de mastite foi eficiente em reduzir a prevalência de mastite subclínica e elucidar os índices de mastite clínica, através de medidas simples de manejo e embasada no adequado diagnóstico epidemiológico / Mastitis is a disease that more burdens the world dairy sector still major obstacle to improving production. The aim of this prospective epidemiological study was to develop a mastitis control plan in a Holstein cow herd. The property has been visited for 18 months to harvest data and control plane of the institution. The first four months corresponded to the diagnostic phase, followed by an intervention phase amounting to 14 months. The control plan has reduced from 53.7% to 23.3% subclinical mastitis. The somatic cell count of the tank reduced from 1446 x 103 cells / ml to 214 x 103 cells/ml. The prevalence of clinical mastitis was 11.11% and the average incidence was 7.6%. Of the total 704 cases, 30.1% (217/704) could not be evaluated for bacteriological cure because there is no post-treatment samples, 51.3% (249/485) healed, 49.7% (236/485) failed and repeated the same pathogen or failed to isolation of a new pathogen. Of the total 485 cases that could be evaluated for bacteriological cure 71.9% (349/485), 19% (92/485), 7.4% (36/485) and 1.6% (8/485) They were, respectively, related to the first, second, third and fourth cases of clinical mastitis in the same mammary gland. There was treatment failure in 53.65% (44/82), 47.5% (165/347) and 48.21% 27/56, severity one, two and three, respectively. The mastitis control plan was effective in reducing the prevalence of subclinical mastitis and elucidate the clinical mastitis rates through simple measures of management and grounded in proper epidemiological diagnosis / FAPESP: 2013/24973-5
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Fatores de risco para casos repetidos de mastite clínica em vacas leiteiras de alta produção / Risk factor for repeated cases of clinical mastitis in high-producing dairy cows

Almeida, Arthur Pombo [UNESP] 15 February 2016 (has links)
Submitted by ARTHUR POMBO ALMEIDA null (arthurpombo_mv@hotmail.com) on 2016-02-24T11:32:48Z No. of bitstreams: 1 Almeida, A. P. - dissertação mestrado.pdf: 778761 bytes, checksum: f00e92022ebbb906ef31cb9f42ed714d (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-02-26T17:12:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 almeida_ap_me_bot.pdf: 778761 bytes, checksum: f00e92022ebbb906ef31cb9f42ed714d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-26T17:12:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 almeida_ap_me_bot.pdf: 778761 bytes, checksum: f00e92022ebbb906ef31cb9f42ed714d (MD5) Previous issue date: 2016-02-15 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo desse estudo foi identificar fatores de risco para casos repetidos de mastite clínica (MC). Duas fazendas foram visitadas mensalmente durante 10 meses. Amostras de leite foram colhidas de todos os casos incidentes de MC. Vacas foram observadas prospectivamente e um caso foi definido quando uma vaca sofreu o segundo caso de MC na mesma lactação. Para cada caso, três controles pareados por dias em lactação foram selecionados aleatoriamente a partir do coorte de vacas que não tiveram MC. Em cada visita, uma série de características do úbere e tetas foram avaliadas durante a ordenha. O tempo mediano até a ocorrência do primeiro caso de MC foi de 84 dias e o intervalo entre o primeiro e segundo casos foi de 39 dias. Distância da teta ao solo, hiperqueratose da extremidade da teta e produção de leite foram associadas individualmente à ocorrência de um caso repetido de MC, mas não permaneceram no modelo multivariável final. Vacas avaliadas como "muito fácil de ordenhar" foram 3,7 vezes mais propensas a sofrerem um caso repetido de MC do que vacas avaliadas como "difícil de ordenhar". Vacas cujos úberes eram posicionados abaixo do jarrete, e de paridade >2, foram 3,6 e 2,5 vezes mais propensas a sofrerem um caso repetido de MC do que aquelas cujo úbere foi posicionado acima do jarrete e vacas de paridade 1, respectivamente. Resultados deste estudo destacam a importância das características das tetas e do úbere como fatores de risco para casos repetidos de CM. / The objective of this study was to identify risk factors for the occurrence of repeated cases of clinical mastitis (CM). Two farms were visited monthly during 10 months. Milk samples were collected from all cases of CM. Cows were observed prospectively and a case was defined when a cow experienced the second case of CM within the same lactation. For each repeated case, three controls matched by days in milk (DIM) were randomly selected from the cohort of cows who did not experience CM. On each visit day, a series of udder and teat characteristics were recorded during milking. The median time to occurrence of the first case of CM was 84 DIM and the median interval between the first and second cases was 39 days. Teat to ground distance, teat-end hyperkeratosis, and milk production were individually associated with the occurrence of a repeated case of CM but did not remain in the final multivariable model. The odds of a repeated case of CM were 3.7 times greater for cows who were “very easy to milk”, as compared to cows who were “difficult to milk”. Cows who had their udders below the hock, and those of parity > 2 were 3.6 and 2.5 times more likely to experience a repeated case of CM, as compared to cows whose udder was positioned above the hock, and cows of parity 1, respectively. Findings of this study highlight the importance of teat and udder characteristics as risk factors for repeated cases of CM. / FAPESP: 2014/12642-0
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Características genotípicas de Staphylococcus coagulase-negativos e taxas de cura da mastite ovina / Genotypic characteristics of coagulase-negative Staphylococcus and cure rates for ovine mastitis

Pilon, Lucas Eduardo [UNESP] 05 February 2016 (has links)
Submitted by LUCAS EDUARDO PILON null (lucaseduardopilon@yahoo.com.br) on 2016-03-07T12:00:11Z No. of bitstreams: 1 Tese Lucas Eduardo Pilon.pdf: 1670960 bytes, checksum: 4da72578d702faee29a2735a07314cd0 (MD5) / Approved for entry into archive by Sandra Manzano de Almeida (smanzano@marilia.unesp.br) on 2016-03-07T13:38:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 pilon_le_dr_jabo.pdf: 1670960 bytes, checksum: 4da72578d702faee29a2735a07314cd0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-07T13:38:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 pilon_le_dr_jabo.pdf: 1670960 bytes, checksum: 4da72578d702faee29a2735a07314cd0 (MD5) Previous issue date: 2016-02-05 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A mastite em ovelhas de dupla aptidão é reconhecida por afetar a qualidade do leite. Staphylococcus coagulase-negativos (SCN) são os principais micro-organismos responsáveis pela doença, e o tratamento ao final da lactação, pode contribuir para a cura e prevenção de casos subclínicos na lactação consecutiva. Entretanto, fatores de virulência e mecanismos de resistência apresentados por SCN podem reduzir as taxas de cura. Os objetivos deste trabalho foram identificar no leite de ovelhas tratadas e não tratadas à secagem com antimicrobianos, as espécies de SCN antes e após o tratamento e identificar nesses micro-organismos a presença dos genes mecA, icaA, icaC, icaD, bap, bhp, sea, seb, sec, sed e tsst-1, determinar o perfil clonal das principais espécies identificadas e relacionar os casos de cura após o tratamento com a presença/ausência dos respectivos genes. Sessenta ovelhas foram divididas em três grupos experimentais: G1, controle, metades mamárias que não receberam antimicrobiano; G2, metades mamárias em que foram administrados 10 mL de cloxacilina-benzatina 100 mg via intramamária / estrutura convencional; G3, metades mamárias em que foram administrados 86 mL de cloxacilina-benzatina 50 mg via intramamária / estrutura nanoencapsulada. As amostras de leite foram coletadas à secagem e aos 15 e 30 dias pós-parto da lactação seguinte. As análises para identificação das espécies de SCN foram realizadas por meio de testes bioquímicos e Internal Transcribe Spacer (ITS-PCR), e a pesquisa dos genes responsáveis pelos fatores de virulência e pela resistência à oxacilina foram realizados por meio da técnica de reação em cadeia de polimerase (PCR). Dentre as espécies identificadas S. warneri prevaleceram nos três grupos experimentais. Nenhuma amostra foi positiva para o gene mecA. O único gene relacionado com a produção de enterotoxinas encontrado foi o sec. Dentre os genes relacionados com a produção de biofilme, icaD foi o único identificado nos três grupos experimentais. Staphylococcus warneri, S. simulans e S. epidermidis apresentaram clones na mesma metade mamária no pré e pós-parto das ovelhas. A cloxacilina benzatina nanoparticulada 50mg / 86 mL foi eficiente para reduzir a mastite subclínica no pós-parto de ovelhas (P= 0,0192). Staphylococcus warneri, S. simulans, S. epidermidis e S. xylosus foram as espécies de maior ocorrência. Os genes icaA, icaC, icaD e bap foram encontrados no momento da desmama e no pós-parto, os genes sec e icaD estão associados à ausência de cura da mastite subclínica no pós-parto. Ovelhas em que foram isolados SCN portadores de genes responsáveis pela formação de biofilme não apresentaram resultados satisfatórios quando submetidas a esquemas de controle e ao tratamento da mastite subclínica. Os genes sec e icaD, estão associadas à ausência de cura microbiológica da mastite subclínica no pós-parto. Staphylococcus epidermidis e S. xylosus portador do gene bap estão associados à reinfecção. / Mastitis in dual-purpose sheep is recognized to affect their milk quality. Coagulase-negative Staphylococcus (CNS) is the main microorganism responsible for this disease and treatment at the end of lactation may contribute towards curing it and preventing subclinical cases during the consecutive lactation. However, virulence factors and resistance mechanisms presented by CNS may reduce the cure rates. The aims of this study were to identify CNS species in sheep’s milk with and without treatment with antimicrobials at the time of drying off and, in these microorganisms, to identify presence of the genes mecA, icaA, icaC, icaD, bap, bhp, sea, seb, sec, sed and tsst-1, determine clonal profile of the main species identified and correlate the cases of cure after treatment with the presence or absence of the respective genes. Sixty sheep were divided into three experimental groups: G1 (control), mammary glands that did not receive antimicrobials; G2, mammary glands to which 10 mL of cloxacillin-benzathine (100 mg) was administered via the intramammary route in a conventional structure; and G3, mammary glands to which 86 mL of cloxacillin-benzathine (50 mg) was administered via the intramammary route in a nanoencapsulated structure. Milk samples were collected at the time of drying off and 15 and 30 days after lambing in the next lactation. The analyses to identify the CNS species were performed by means of biochemical tests and internal transcribe spacer polymerase chain reaction (ITS-PCR), and the genes responsible for the virulence factors and resistance to oxacillin were investigated by means of the PCR technique. Among the species identified, Staphylococcus warneri was most prevalent in the three experimental groups. None of the samples were positive for the gene mecA. The only gene relating to production of enterotoxins that was found was sec. Among the genes relating to biofilm production, icaD was the only one identified in the three experimental groups. Staphylococcus warneri, S. simulans and S. epidermidis presented clones in the same mammary gland before and after lambing. The dose of 86 mL of nanoparticulate cloxacillin-benzathine (50 mg) was efficient for reducing subclinical mastitis after lambing (P = 0.0192). Staphylococcus warneri, S. simulans, S. epidermidis and S. xylosus were the species that occurred most frequently. The genes icaA, icaC, icaD and bap were found at the time of weaning and in the postpartum period. The genes sec and icaD were correlated with absence of cure for subclinical mastitis after lambing. Sheep in which CNS carrying genes responsible for biofilm formation was isolated did not present satisfactory results when they were subjected to regimens for controlling and treating subclinical mastitis. The genes sec and icaD were correlated with absence of microbiological control over subclinical mastitis after lambing. Staphylococcus epidermidis and S. xylosus carrying the gene bap were correlated with reinfection. / FAPESP: 2012/23044-0
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Caracterização microbiológica, molecular e contagem de células somáticas por citometria de fluxo (Somacount 300®) e por contagem microscopia (Prescott e Breed, 1910) do leite caprino mastítico

Machado, Gustavo Puglia [UNESP] 27 June 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-06-27Bitstream added on 2014-06-13T18:43:42Z : No. of bitstreams: 1 000736347.pdf: 3203619 bytes, checksum: 506aebfe2bd88bd5a1d7ee4e36e61e4b (MD5) / Foram realizadas caracterizações microbiológicas dos estafilococos coagulase-positivo - ECP (Staphylococcus aureus, Staphylococcus intermedius e Staphylococcus hyicus), a pesquisa de Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae e Escherichia coli pela multiplex-PCR, California Mastitis Test (CMT), a contagem de células somáticas (CCS) automática pelo Somacount 300® calibrado para o leite bovino e CCS microscópica padronizada por Prescott e Breed (1910) em amostras de leite de 257 cabras, 513 metades mamárias e 10 tanques de expansão, além da aplicação de questionário epidemiológico nas 10 propriedades estudadas do estado de São Paulo. A prevalência de mastite subclínica em nível de cabra pela lactocultura foi de 43,6% e de mastite clínica 5,84%. Das 178 metades mamárias positivas na lactocultura, os patógenos mais prevalentes foram: Estafilococos coagulase-negativo - ECN (70%), S. aureus (13,5%), S. intermedius (7,9%) e Enterobacteriaceae (4%). Nenhuma das amostras mostrou-se negativa ao CMT, sendo a distribuição dos escores nas metades mamárias: 1+ (42,69%), 2+ (29,63%) e 3+ (27,68%). As prevalências dos patógenos na multiplex-PCR das metades mamárias foram: S. aureus (9,7%), S. agalactiae (5,5%) e E. coli (16,6%) e nos tanques de expansão: S. aureus (60%), S. agalactiae (10%) e E. coli (40%). Os resultados encontrados indicam que o CMT apresenta baixa sensibilidade e especificidade nos escores 2+ e 3+ para o diagnóstico de mastite subclínica. O Somacount 300® calibrado para o leite bovino superestima em 2,1 vezes a CCS microscópica, sendo que ambas não apresentaram nenhum ponto de corte eficiente para maximização simultânea da sensibilidade e especificidade. A multiplex-PCR apresenta boa acurácia para detecção de S. areus, S. agalactiae e E. coli no leite caprino mastítico Houve algumas diferenças estatísticas significantes nas análises univariadas dos fatores de risco para mastite... / Microbiological characterizations of the coagulase-positive staphylococci - CPS (Staphylococcus aureus, Staphylococcus intermedius and Staphylococcus hyicus), the research of Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae and Escherichia coli by multiplex-PCR, California Mastits Test (CMT), the automatic somatic cell count (SCC) by Somacount 300® equipment calibrated for bovine milk and the microscopic SCC standardized by Prescott and Breed (1910) in milk samples from 257 goats, 513 half-udders and 10 bulk tanks were carried out beyond the application of the epidemiological questionnaire in 10 properties studied of São Paulo State. The prevalence of subclinical and clinical mastitis by microbiological culture was 43.6% and 5.84% respectively. 178 half-udders were positive by microbiological culture, and coagulase-negative staphylococci - CNS (70%), S. aureus (13.5%), S. intermedius (7.9%) e Enterobacteriaceae (4%) were the most prevalent pathogens. No sample was negative to CMT. The distribution of scores CMT in half-udders were: 1+ (42.69%), 2+ (29.63%) and 3+ (27.68%). The prevalence of pathogens in multiplex-PCR in half-udders were: S. aureus (9.7%), S. agalactiae (5.5%) and E. coli (16.6%) and in bulk tanks: S. aureus (60%), S. agalactiae (10%) and E. coli (40%). The results indicate that the CMT scores 2+ and 3+ showed low sensitivity and specificity for the diagnosis of subclinical mastitis. The Somacount 300® calibrated to bovine milk overestimated the microscopic SCC in 2.1 fold, being that both showed no efficient cut-off point for simultaneous maximization of the sensitivity and the specificity. The multiplex-PCR presented good accuracy for the detection of S. aureus, S. agalactiae and E. coli in the mastitic caprine milk. There were some significant differences in the univariate analysis of risk factors for subclinical mastitis, however, when the analysis was adjusted for property, the ...
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Epidemiologia molecular dos Staphylococcus aureus isolados em diferentes pontos do fluxograma de produção do leite

Souza, Viviane de [UNESP] 20 July 2010 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-07-20Bitstream added on 2014-06-13T18:44:23Z : No. of bitstreams: 1 souza_v_dr_jabo.pdf: 824781 bytes, checksum: 699e9efd378fb4c601290d43aebe88bb (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A mastite bovina é a principal doença do gado leiteiro em todo o mundo, devido a sua elevada ocorrência, aos prejuízos econômicos que acarreta aos produtores e à perda da qualidade do leite. Dentre os agentes da mastite, o Staphylococcus aureus é o mais frequentemente isolado. Sabe-se que o conhecimento do perfil molecular deste microrganismo é de fundamental importância para uma melhor compreensão dos estudos epidemiológicos de dispersão deste patógeno nas propriedades rurais. Sendo assim, durante o período de janeiro a abril de 2009, 222 vacas lactantes pertencentes a 12 propriedades rurais situadas no Município de Sacramento-MG foram submetidas ao California Mastitis Test (CMT). Foram colhidas amostras de leite dos quartos reagentes ao CMT, assim como do leite produzido em cada propriedade rural e do leite de conjunto das 12 propriedades contido em dois tanques de expansão comunitários. Paralelamente, foram colhidas, também, amostras dos óstios papilares, dos latões, dos baldes, dos coadores, dos insufladores das ordenhadeiras, das mãos dos ordenhadores, da superfície dos tanques de expansão, da tubulação auxiliar no transvase do leite, da água utilizada no processo de produção e da água utilizada para higienização dos tanques comunitários. A partir das 446 amostras colhidas nos diversos pontos, 244 estirpes foram isoladas e caracterizadas bioquimicamente como estafilococos coagulase-positivos. O fragmento de DNA cromossômico específico da espécie de S. aureus foi amplificado em 106 estirpes, das quais 103 foram submetidas à eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE). Os pontos de colheita de amostras que apresentaram maior frequência de isolamento de estirpes de Staphylococcus aureus foram os óstios papilares (31,1%), o leite das vacas reagentes ao CMT (21,7%), os insufladores das ordenhadeiras mecânicas (21,7%), o leite dos latões (6,6%)... / Bovine mastitis is a main disease in milk cattle worldwide. Staphylococcus aureus is the most frequently isolated among mastitis agents. The microorganism’s molecular profile is of paramount importance for a better understanding of epidemiologic studies of these pathogens on farms and ranches. Two hundred twenty-two cows on 12 farms in the municipality of Sacramento-MG, Brazil were tested by the California Mastitis Test (CMT) between January and April 2009. Milk samples were collected from four CMT reagents, from the milk produced on each farm and from milk collectively collected from the 12 farms and maintained in two community bulk tanks. At the same time samples of papillary ostia were collected from milk pails, cans, sieves, milking machine insufflators, milkers’ hands, from the water used on the 12 farms and from the two community bulk tanks. Two hundred and forty-four strains among the 446 samples collected from several sites were isolated and biochemically characterized as positive coagulase Staphylococcus. Chromosome DNA fragment, specific to S. aureus, was amplified in 106 strains. Further, when 103 S. aureus strains underwent pulsed field gel electrophoresis (PFGE), the samples’ collection sites with the highest isolation frequency of S. aureus strains were papillary ostia (31.1%), milk of cows which reacted to CMT (21.7%), the insufflators of milking machines (21.7%), milk in pails (6.6%) and milk in the community bulk tanks (5.6%). Since 32 different pulsotypes were identified, genetic heterogeneity existed among the 106 S. aureus isolated strains. Pulsotype 1 had the highest similarity among the S. aureus isolated strains at the different sites of the milk production flowchart. Since highest isolation frequency of pulsotype 1 of S. aureus strains were papillary ostia (10.6%), milk of cows which reacted to CMT (5.8%), the insufflators of milking machines (3.8%)... (Complete abstract click electronic access below)
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Leucograma e perfil bioquímico sérico de cabras com mastite experimental causada por Staphylococcus aureus e Streptococcus agalactiae

Simplicio, Kalina Maria de Medeiros Gomes [UNESP] 23 May 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-05-23Bitstream added on 2015-04-09T12:47:41Z : No. of bitstreams: 1 000814573.pdf: 807081 bytes, checksum: 8a03a744864fbf115ad255dbc7d76363 (MD5) / Proteínas de fase aguda (PFA) são indicadores sensíveis e precoces de focos inflamatórios. No entanto, as informações disponíveis na literatura em relação à espécie caprina são escassas. Assim, o objetivo deste estudo foi determinar o leucograma e o perfil bioquímico sérico, em especial de PFA, de cabras com mastite induzida por Staphylococcus aureus (Grupo I) e Streptococcus agalactiae (Grupo II), a fim de verificar sua importância como biomarcadores precoces da infecção mamária nesta espécie. O GI foi composto por cinco cabras da raça Saanen, inoculadas por via intramamária com cerca de 9,5 x 109 unidades formadoras de colônia (UFC) de S. aureus e o GII composto por cinco cabras da raça Alpina Francesa inoculadas com aproximadamente 4,4 x 1011 UFC de S. agalactiae. O momento experimental imediatamente anterior à inoculação foi denominado M0 e os seguintes identificados como M1, M2, M3, M4, M5, M6 e M7, nos quais eram realizadas colheitas de sangue e leite. Com as amostras de sangue foram obtidos o leucograma, mensuração da concentração plasmática de fibrinogênio, determinação do teor sérico de aspartato aminotransferase, fosfatase alcalina, gamaglutamiltransferase e creatina quinase, além das concentrações séricas de proteína total, albumina, ureia, creatinina, cálcio total, fósforo, magnésio e ferro, utilizando-se kits comerciais. As concentrações séricas de transferrina, ceruloplasmina, haptoglobina e α1-glicoproteína ácida foram obtidas por meio da técnica de eletroforese SDS-Page. Com as amostras de leite foi realizado acompanhamento da evolução da mastite por meio dos testes da caneca de fundo escuro, California Mastitis Test (CMT) e análises microbiológicas. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias ao teste de Dunnet, considerando-se 95% de significância (p<0,05). Notou-se que o modelo de infecção experimental desenvolvido para a indução de mastite ... / Acute phase proteins (APP) are sensitive and early indicators of inflammation. However, information regarding goats APP are scarce in the literature. So the aim of this study was to determine the leukocyte count and serum biochemical profile, in particular APP, in goats with induced Staphylococcus aureus (Group I) and Streptococcus agalactiae (Group II) mastitis in order to verify its importance as early biomarkers of mammary infection in these species. GI was composed of five Saanen goats inoculated through the teat canal with about 9.5 x 109 colony forming units (CFU) of S. aureus and GII consisted of five French Alpine goats inoculated with approximately 4.4 x 1011 CFU of S. agalactiae. The experimental moment immediately prior to inoculation was designated M0 and the following identified as M1, M2, M3, M4, M5, M6 and M7 when blood and milk samples were obtained. Leucocyte count and measurement of plasma fibrinogen concentration, serum levels of aspartate aminotransferase, alkaline phosphatase, gamma glutamyl transferase, creatine kinase, total protein, albumin, urea, creatinine, total calcium, phosphorus, magnesium and iron, were determined with blood samples, using commercial kits. Serum transferrin, ceruloplasmin, haptoglobin and α1-acid glycoprotein were obtained by the SDS-Page Electrophoresis technique. Milk samples were used to monitor the development of clinical mastitis through the strip cup test, California Mastitis Test (CMT) and microbiological analyzes. Data were subjected to analysis of variance and the means to Dunnet test, considering a 95% significance level (p < 0.05). It was noted that the experimental infection model developed for the induction of clinical mastitis in goats was effective in both groups. Leucocyte count and serum biochemical profile, with the exception of APP, were unreliable laboratory tests to aid in the diagnosis or monitoring of experimental mastitis in goats, whether induced by S. aureus or ...
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Aspectos socioeconômicos, indicadores de qualidade do leite e pesquisa de linhagens toxigênicas de Staphylococcus em propriedades de agricultura familiar de Botucatu, SP

Lavor, Ubirajara Leoncy de [UNESP] 18 July 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2104-07-18. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:21Z : No. of bitstreams: 1 000830226.pdf: 861219 bytes, checksum: 814efdb359b08c3f5dab035dde587b30 (MD5) / A atividade leiteira na agricultura familiar é fundamental para sobrevivência e manutenção do homem no campo. A mastite bovina impacta negativamente a produção leiteira e oferece riscos à saúde pública. O presente estudo avaliou a qualidade do leite proveniente da agricultura familiar na região de Botucatu-SP, as dificuldades enfrentadas pelos produtores, a etiologia das mastites, e o perfil de sensibilidade dos patógenos aos antimicrobianos. Avaliou-se também a presença de genes produtores de enterotoxinas em linhagens de Staphylococcus isoladas. Objetivou também a recomendação de ações para melhoria na produção, visando a qualidade do leite. Aplicou-se um questionário socioeconômico aos produtores e foram coletadas amostras individuais do leite do conjunto de latões de cada propriedade e de vacas diagnosticadas com mastite pelo California Mastitis Test (CMT). Avaliou-se os teores de gordura, proteína, lactose, extrato seco, extrato seco desengordurado, a contagem bacteriana total (CBT), e a contagem de células somáticas (CCS). Foram analisadas 21 propriedades onde constatou-se que a idade média dos produtores era de 59 anos. Apenas cinco deles (23,8%) tinham ensino médio completo ou superior, sendo que nenhum (0%) contava com assessoria veterinária. Quanto às instalações da sala de ordenha, apenas quatro (19,0%) possuíam estábulos com piso concretado e quatro (19,0%) utilizavam sistema de ordenha mecânica. Quanto ao manejo, apenas um (4,8%) realizava pré-dipping corretamente, nenhum (0%) realizava pós-dipping, dois (9,5%) utilizavam papel toalha descartável na ordenha e somente dois produtores (9,5%) utilizavam o CMT com periodicidade. Em contrapartida, 15 produtores (71,4%) revelaram terem utilizado antimastíticos para tratamento das vacas. Com relação aos animais, foram avaliadas 239 vacas (média = 11,4 animais/propriedade). A mastite clínica foi verificada em apenas duas vacas (<1%), enquanto que ... / Dairy farming on family farms is critical for survival and maintenance of the rural worker. Bovine mastitis negatively impacts milk production and presents risks to public health. This study evaluated the quality of the milk from the family farm in the region of Botucatu-SP, the difficulties faced by producers, the mastitis etiology, and sensitivity profile of pathogens against antimicrobials. Also evaluated the presence of enterotoxin producing genes in isolated staphylococcal strains. Also aimed the recommendation of actions to improve the production, seeking the quality of the milk. A Socioeconomic questionnaire was applied to producers and individual milk samples were collected from the set of brasses of each property and from cows diagnosed with mastitis by California Mastitis Test (CMT). It was evaluated the levels of fat, protein, lactose, dried extract and nonfat dry extract, the total bacterial count (TBC) and the somatic cell count (SCC). Twenty one (21) properties were analyzed where it was found that the average of the farmers was 59 years. Only five of them (23.8%) had completed high school or higher, and none (0%) counted on veterinary advice. As for their facilities of milking parlor, only four (19.0%) had stables with concreted floor and four (19.0%) used mechanical milking system. As to the handling, only one (4.8%) performed pre-dipping correctly, none (0%) performed post-dipping, two (9.5%) used disposable paper for milking and only two producers (9.5%) used the CMT with periodicity. On the other hand, 15 producers (71.4%) stated that they used anti mastitis for treating the cows. Regarding the animals, 239 cows (average = 11.4 animals / property) were evaluated. The clinical mastitis was detected in only two cows (<1%), whereas 86 animals showed milk positive to CMT (35.9% of subclinical mastitis). One hundred seventy-seven (177) milk samples were cultured, on 55 (31.1%) of them it was identified staphylococci, on ...
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Indicadores de qualidade do leite de vacas criadas no sistema silvipastoril

Bolaños, Carmen Alicia Daza [UNESP] 17 February 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-17Bitstream added on 2014-08-13T17:59:52Z : No. of bitstreams: 1 000770992_20150217.pdf: 243087 bytes, checksum: a90b3c03b76c6a08535e6f943d4b7d69 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-02-18T15:02:18Z: 000770992_20150217.pdf,Bitstream added on 2015-02-18T15:02:49Z : No. of bitstreams: 1 000770992.pdf: 878622 bytes, checksum: 57403b297a66f823289c75003ed6eaa1 (MD5) / O sistema silvipastoril caracteriza-se por aumentar a produção de leite, com maior número de vacas por hectare, devido ao maior aporte de proteína na dieta. No sistema silvipastoril as vacas possuem a disposição para alimentação, além do pasto, pequenas árvores e arbustos. O objetivo do presente estudo foi investigar os principais indicadores de qualidade do leite e agentes causais de mastite em vacas criadas em sistema silvipastoril. Foram avaliadas a composição (teor de gordura, proteína, lactose, extrato seco, extrato seco desengordurado e nitrogênio ureico), contagem de células somáticas (CCS), contagem bacteriana total (CBT), ocorrência de mastite clínica e subclínica, isolamento microbiológico, perfil de sensibilidade bacteriana “in vitro” e detecção de resíduos de antimicrobianos/inibidores da multiplicação de micro-organismos, no leite de vacas, e do tanque de expansão e latões em propriedades do Vale do Cauca, Colômbia. Os teores médios dos principais constituintes do leite foram: 3,24% de gordura, 3,27% de proteína, 4,40% de lactose, 10,62% de extrato seco, 8,57% de extrato seco desengordurado e 15,82 mg/dL de nitrogênio ureico, enquanto do tanque de expansão e latões foi: 3,51% de gordura, 3,20% de proteína, 4,34% de lactose, 11,72% de extrato seco, 8,47% extrato seco desengordurado e 14,57 mg/dL de nitrogênio ureico. A celularidade média dos quartos mamários e do tanque de expansão e latões foram 141.252,75 CS/mL e 363.078,05 CS/mL, respectivamente. A CBT média dos quartos mamários e do tanque de expansão foram 4.466,84 UFC/mL e 24.547,01 UFC/mL respectivamente. Os principais micro-organismos isolados dos quartos mamários foram Staphylococcus spp. (17%), Corynebacterium bovis (5%), Staphylococcus aureus (4%), Streptococcus spp. (3%), Streptococcus dysgalactiae (2%) e Staphylococcus hyicus (1%), enquanto do tanque de expansão e latões foram identificados Streptococcus spp. (29%), ... / The silvopastoral system is characterized by increasing the production of milk with a greater number of cows per hectare due to the higher amount of protein in the diet. In silvopastoral system cows are fed in addition to pasture, with small trees and shrubs. The aim of present study was determinate the main indicators of milk quality and mastitis causal agents in cows bred on silvopastoral system. We evaluated the composition (fat, protein, lactose, solids, dry extract, nonfat dry and urea nitrogen), somatic cell count (SCC), total bacterial count (TBC), occurrence of clinical and subclinical mastitis, microbiological isolation, in vitro bacterial sensitivity profile and detection of antimicrobial/multiplication inhibitors residues in milk produced by cows raised in silvopastoral systems, as well as the bulk tank and churns in farms of Cauca Valley, Colombia. The concentration of the major constituents of milk were 3.24% fat, 3.27% protein, 4.40% lactose, 10.62% dry extract, 8.57% nonfat dry and 15.82 mg/dL urea nitrogen, while the bulk tank and churns was: 3.51% fat, 3.20% protein, 4.34% lactose, 11.72% dry extract, 8.47% nonfat dry and 14.57 mg/dL urea nitrogen. The cell count of the cows and the bulk tank were 141,252.75 CS/mL and 363,078.05 CS/mL, respectively. The TBC mean in cows and the bulk tank were 4,466.84 CFU/mL and 24.547.01 CFU/mL respectively. The main microorganisms isolated from the udder cows were Staphylococcus spp. (17%), Corynebacterium bovis (5%), Staphylococcus aureus (4%), Streptococcus spp. (3%), Streptococcus dysgalactiae (2%) and Staphylococcus hyicus (1%), while the bulk tank and churns were identified more often Streptococcus spp. (29%), Enterobacter cloacae (14%), Hafnia alveii (14%) and Streptococcus α-haemolytic (14%). Antimicrobial residues in cow milk and bulk or churn were detected in 30% and 86% respectively. The silvopastoral system is a good alternative to cow nutrition, however is important the ...
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Monitoramento da influência de medidas terapêuticas e higiênico-sanitárias sobre a etiopatologenia e a produção leiteira em um rebanho leiteiro de Taquara, região do Valo do Rio dos Sinos, RS. / Monitoring of the influence of therapeutic and hygienic -sanitary measures about etiopatogeny and the milking process in a dairy herd of taquara, vale do rio dos sinos, RS

Bangel Junior, Jorge Jose January 2004 (has links)
A mastite bovina é comprovadamente um dos maiores problemas atuais da pecuária leiteira no Brasil e no mundo, acarretando ônus aos produtores, à indústria e ao consumidor final. Numa propriedade leiteira do município de Taquara, Rio Grande do Sul, Brasil, diversas medidas terapêuticas e higiênico-sanitárias foram introduzidas com o objetivo de monitorar sua influência sobre a produção leiteira e a etiopatogenia dos agentes envolvidos nos casos de mastite. No início dos trabalhos, em 1990, mais de 70% dos animais apresentavam pelo menos um quarto mamário com mamite clínica, sendo que ao final do estudo, em 2002, nenhum caso clínico da enfermidade foi relatado, tendo sido eliminado completamente agentes como Streptococcus agalactiae, Arcanobacterium pyogenes e Nocardia spp. O conjunto de medidas introduzidas elevou a produção/dia da propriedade em mais de 600%, melhorando a qualidade genética e sanitária do rebanho. Apesar de ainda existirem casos esporádicos de mamite subclínica, as mudanças favoreceram na identificação de problemas ou falhas no processo, possibilitando medidas rápidas e eficazes de controle e tratamento. / The bovine mastite is one of the largest problems of dairy herds in Brazil and all over the world, resulting in losses to producers, to industry and the final consumer. In a dairy herd of the district of Taquara, Rio Grande do Sul, Brazil, several therapeutic and hygienicsanitary measures were introduced with the objective of monitoring the influence on the milking process and the etiopatogeny of the agents involved in cases of mastitis. In the beginning of the study, in 1990, more than 70% of the animals presented at least one mammary quarter with clinical mastitis, and at the end of the study, in 2002, no clinical cases of the illness was related, having been completely eliminated agents as Streptococcus agalactiae, Arcanobacterium pyogenes and Nocardia spp. The group of introduced measures elevated the production of the property, per day, in more than 600%, improving the genetic and sanitary quality of the flock. In spite of sporadic cases of subclinical mamitis that still exist, the measures provided a support in the identification of problems or flaws in the process, making possible fast and effective action of control and treatment.

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