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Purificação e caracterização de enzimas envolvidas na bioluminescência de fungos / Purification and Caracterization of enzymes involved in fungi bioluminescence

Tatiana Araujo Pereira 13 December 2017 (has links)
Esta tese descreve estudos realizados na tentativa de purificar e caracterizar enzimas envolvidas na BL de fungos, além de trabalhos conduzidos a fim de investigar o mecanismo da bioluminescência de fungos. Inicialmente, tentou-se isolar as duas enzimas supostamente responsáveis pala reação bioluminescente em fungos. Parâmetros de atividade ótima (pH e temperatura) e comportamento cinético foram investigados. Todavia, com a descoberta de que a luciferina fúngica é o derivado hidroxilado da hispidina (3-hidróxihispidina), novas estratégias foram abordadas. Os esforços se concentraram na purificação da luciferase, visto que a hidroxilase não faz parte do sistema bioluminescente de fungos. Avaliação da interação da luciferase fúngica com a luciferina ou derivados dela sugeriram comportamento relativamente promíscuo da enzima. Os resultados indicaram que a reação luciferina-luciferase é favorecida em meio básico (pH ~8), a ~20 °C. Ensaios com 18O2 revelaram que a inserção de oxigênio na molécula de luciferina produz um intermediário cuja descarboxilação gera a oxiluciferina. Paralelamente, a síntese da hispidina in vitro a partir de ácido cafeico na presença de malonil-CoA e de extrato de micélios bioluminescentes resultou na emissão de luz, confirmando que a luciferina é reciclada no processo. / This work describes studies performed to purify and characterize enzymes responsible for the fungal bioluminescence. Also, it shows important data that contributes to understand the mechanism for bioluminescence reaction in fungi. First, we tried to isolate two enzymes suspected of being involved on fungal bioluminescence. Optimum activity parameters (pH and temperature) and kinetic behavior were investigated. However, the discovery that fungal luciferin is the hispidin derivative 3-hydroxyhispidin demanded adaptations in the project. First of all, concentrates efforts to luciferase purification was priority, since hydroxylase is not part of the bioluminescent system of fungi. Studies on the luciferase interaction with different substrates showed some promiscuity for the enzyme. The results indicated higher intensity of light from luciferin-luciferase reaction in alkaline solutions (pH ~ 8) at ~ 20 °C. The reaction in medium with 18O2 revealed that insertion of oxygen into the luciferin structure produces an intermediate whose decarboxylation generates oxyluciferin. In parallel, the in vitro synthesis of hispidin using caffeic acid and malonyl-CoA with the mycelium extract resulted in the emission of light, confirming that luciferin is recycled in the process.
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Efeito dos inibidores de proteinase de soja no padrão de expressão de proteinases de Spodoptera frugiperda / Effect of soybean peptidase inhibitor in pattern endopeptidase expression of Spodoptera frugiperda

Souza, Thais Paula de 02 September 2013 (has links)
Dentre as substâncias químicas secretadas pelas plantas, contra os insetos herbívoros, os inibidores de peptidases são de grande interesse. A atenção dada a esses inibidores deve-se ao fato, de eles serem uma boa alternativa no controle de insetos praga, uma vez que não causam danos ao meio ambiente. Contudo, muitas espécies de insetos são capazes de escapar dos efeitos negativos dos inibidores de peptidases das plantas, via diferentes mecanismos adaptativos. Devido a esse fato, é importante compreender os mecanismos desenvolvidos pelos insetos para burlar os efeitos dos inibidores de peptidases das plantas. Diante desse panorama, este trabalho teve como objetivo estudar o mecanismo adaptativo das serina endopeptidases de Spodoptera frugiperda aos inibidores de endopeptidases de soja. Foram realizadas análises do transcriptoma dos intestinos das lagartas mantidas em exposição crônica ao inibidor. Para averiguar os efeitos causados devido à exposição crônica ao inibidor, foram realizadas comparações da expressão relativa, dos genes de tripsinas e quimotripsinas, de intestinos de lagartas de sexto instar. Contudo, para entender o efeito da exposição aguda ao inibidor, lagartas de S. frugiperda foram criadas em dieta artificial controle até o primeiro dia do sexto instar, após esse período elas foram transferidas para dieta artificial acrescida com 0,5 % dos inibidores de endopeptidases de soja, durante 48 horas. Para verificar a ocorrência de um possível controle epigenético na expressão dos genes, as lagartas foram conduzidas até a fase adulta e os adultos, de cada tratamento, foram acasalados entre si, constituindo uma segunda geração. Dados de expressão relativa foram obtidos, de indivíduos da primeira e segunda geração, e foram então comparados. Foram identificados 14 possíveis genes de quimotripsinas e nove possíveis genes de tripsinas. Os genes de tripsina foram divididos em dois grupos distintos em relação a sua sensibilidade aos inibidores de endopepetidases de soja e expressão relativa. Houve uma resposta diferenciada na ativação dos genes de serina endopeptidases de S. frugiperda, a qual dividiu os genes em dois grupos, os responsivos e os não responsivos ao inibidor. A exposição aguda ao inibidor ativou um pequeno grupo de genes, enquanto que a exposição crônica promoveu uma maior amplitude de expressão gênica, sugerindo mecanismos temporalmente regulados. Por último, evidências indicam, pela primeira vez, a possível ocorrência de um mecanismo epigenético, na resposta das enzimas digestivas aos inibidores de serina endopeptidases de soja. / Among the chemicals secreted by plants against insect herbivores, peptidase inhibitors (PIs) are of great interest. The attention given to PIs is due to the fact that they are a good alternative to control insect pests since they do not cause damage to human health and the environment. However, many species of insects are able to escape the negative effects of PIs plants via different adaptive mechanisms. Because of this, it is important to understand the mechanisms developed by insects to circumvent the effects of PIs plants. Against this background, this research aimed to study the adaptive mechanism of serine endopeptidases Spodoptera frugiperda to soybean endopeptidase inhibitors. For this purpose, larvae of S. frugiperda were reared on artificial diet and control artificial diet plus 0.5% of endopeptidase inhibitors of soybean. We conducted a transcriptome midgut of worms maintained in chronic ingestion of the inhibitor. The relative expression of the genes, trypsin and chymotrypsin, was also compared the midgut of sixth instar larvae kept in these diets. In another experiment, the larvae were conducted to moth, then the treatments were mated forming a second generation. Relative expression data were obtained for individuals of the first and second generation, and then compared. Identified 14 genes with potential of chymotrypsin and 9 trypsin like genes. The trypsin gene were divided into two groups for both their sensitivity to PI soybean endopeptidase, and for their relative expression pattern. There was a differentiated response on the genes activation of S. frugiperda serina endopeptidases. The genes were clustered in 2 groups, the responsive ones and the non responsive to the inhibitor. The acute exposition to the inhibitor activated a small group of genes and the chronic exposition affected several genes, indicating the existence of temporal regulated mechanism. Besides, there is a possible occurance of an epigenetic mechanism, which is related to the digestive serina endopeptidases inhibitors of soybean.
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Avaliação da atividade antiviral do peptídeo P34 e moléculas da classe da 4-tiazolidinona frente a vírus de importância veterinária / Evaluation of the antiviral activity of the P34 peptide and molecules from the class of thiazolidin-4-one against virus veterinary importance

Castro, Clarissa Caetano de 24 March 2016 (has links)
Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2017-06-07T15:21:51Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Clarissa Caetano de Castro.pdf: 1512780 bytes, checksum: 8bb13b97653dff0e33b2ee2f520be9f0 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-06-08T13:02:14Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Clarissa Caetano de Castro.pdf: 1512780 bytes, checksum: 8bb13b97653dff0e33b2ee2f520be9f0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-08T13:02:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Clarissa Caetano de Castro.pdf: 1512780 bytes, checksum: 8bb13b97653dff0e33b2ee2f520be9f0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-03-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / A busca de novas substâncias com atividade antiviral levou este estudo a investigar a ação do peptídeo antimicrobiano P34, produzido pelo Bacillus sp. P34, frente ao herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) e de moléculas sintetizadas da 2-picolilamina e 2-aminoetilpiperidina derivadas da classe da 4-tiazolidinona denominadas V19 (2a), V20 (2b), V23 (2c), V28 (2d), V29 (2e), AK11 (1a), AK16 (1d), AK17 (1e), AK18 (1b) e AK20 (1c) frente a diversos vírus que infectam animais. Inicialmente foram determinadas as concentrações não citotóxicas dos diferentes compostos, em diferentes linhagens celulares, através dos métodos MTT e vermelho neutro. A seguir a atividade antiviral foi avaliada mediante um ensaio de inibição do efeito citopático. Em todos os testes, o título viral em cultivo celular foi comparado ao título viral na presença de cada composto para a determinação do percentual de inibição (PI). O P34 demonstrou um PI de 99,94% e alto índice de seletividade (SI de 22,9). Os testes para identificar o modo de ação indicaram que o peptídeo P34 não atua sobre as células MDBK, ou receptores celulares. Em concentrações citotóxicas o P34 obteve efeito virucida e 100% de inibição viral nos ensaios de redução viral e de penetração. Foi evidenciada total inibição na produção das partículas de BoHV-1 quando as células foram tratadas com o P34 posterior a 8 h de infecção. Houve redução significativa (p< 0.01) do título do BoHV-1 na presença do P34 após 8 h de infecção (PI de 90%), chegando a 99,9% de PI após 18 h de tratamento pós-infecção. O P34 inibiu o BoHV-1 tanto no meio extracelular, inibindo a infecção celular, quanto no meio intracelular, após a infecção, impedindo o egresso. Com relação às moléculas derivadas da 4-tiazolidinona a menos tóxica foi a AK 16 (157 μg/mL) nas quatro linhagens de células (RK13, MDCK, CRFK e MDBK) e as mais tóxicas foram as AK11, AK18 e AK20 (19 μg/mL). O PI da molécula AK16 foi de 96,9%, 90,1% e 90,1% contra o EAV, FCV e CPV-2, respectivamente. O composto AK17 mostrou PI de 90,1% contra o EAV, a V20 de 78% contra BVDV, a V28 de 94,4% contra EIV e 78% contra BVDV e a V29 de 94,4% contra CPV-2. As moléculas V20 e V28 foram escolhidas para dar continuidade ao estudo frente ao BVDV. Foram determinados para V20 um SI de 16,8 e de 14,73 para V28. Nos ensaios de inibição da produção de partículas virais, adsorção, competição com receptores celulares, penetração viral e efeito virucida não foram observadas diferenças significativas entre os títulos do BVDV com e sem tratamentos com as moléculas. A associação das moléculas V20 e V28 aumentou de 78 para 82% o PI, não sendo verificada alteração no PI quando as moléculas foram associadas com os antivirais interferon-α 2b ou ribavirina. Através da determinação da curva de crescimento do BVDV foi evidenciada atuação no período entre 1 a 5 h pós-infecção com o BVDV, sugerindo ação posterior à entrada viral, mas antes do egresso, provavelmente no período de síntese do RNA e enzimas virais. Os resultados demonstram que o peptídeo P34 e os compostos V20 e V28 derivados da 4-tiazolidinona podem ser considerados promissores antivirais contra BoHV-1 e BVDV. / The search for new substances with antiviral activity has led this study to investigate the action of the antimicrobial peptide P34, produced by Bacillus sp. P34 against bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) and of the synthetic molecules 2-picolylamine and 2-aminoethylpiperidine, which are derived from the class of thiazolidin-4-one named V19 (2a), V20 (2b), V23 (2c), V28 (2d), V29 (2e), AK11 (1a), AK16 (1d), AK17 (1e), AK18 (1b) and AK20 (1c) in opposition to several viruses that infect animals. Initially non-cytotoxic concentrations of the different compounds were determined, in different cell lines, through the MTT and neutral red methods. Then, the antiviral activity was evaluated by an assay of the cytopathic effect inhibition. In all tests, the viral titer in cell culture was compared to the viral titer in the presence of each compound to determine the percentage of inhibition (PI). The P34 demonstrated a PI of 99.94% and high selectivity index (SI 22.9). Tests to identify the mode of action indicated that the peptide P34 has no effect on MDBK cells, or cell receptors. In cytotoxic concentrations P34 obtained virucidal effect and 100% inhibition in viral reduction viral and penetration assays. Total inhibition was observed in the production of the BoHV-1 particles when cells were treated with P34 after 8 h of infection. There was a significant reduction (p <0.01) in BoHV-1 titer in the presence of P34 after 8 h of infection (PI 90%), reaching 99.9% PI after 18 h post-infection treatment. P34 inhibited BoHV-1 as extracellularly, inhibiting cell infection, as intracellularly, after infection, preventing its egress. Regarding molecules derived from thiazolidin-4-one the less toxic was AK16 (157 μg/mL) in the four cell lines (RK13, MDCK, CRFK and MDBK), and the most toxics were AK11, AK18 and AK20 (19 μg/mL). The PI of AK16 molecule was 96.9%, 90.1% and 90.1% against EAV, FCV and CPV-2, respectively. The compound AK17 showed PI of 90.1% against EAV, V20 of 78% against BVDV, V28 of 94.4% against EIV and 78% against BVDV and the V29 of 94.4% against CPV-2. V20 and V28 molecules were chosen to continue the study against BVDV. To V20 and V28 molecules, were determined SI of 16.8 and 14.73, respectively. In assays of inhibition of production of viral particles, adsorption, competing with cellular receptors, viral penetration and virucidal effect no significant differences were observed between titers the BVDV with and without treatment with the molecules. The association of V20 and V28 molecules increased the PI from 78 to 82%, and changes in the PI were not verified when the molecules were associated with antiviral interferon-α 2b and ribavirin. Through the determination of BVDV growth curve, was observed activity in the period between 1 to 5 h post-infection with BVDV, suggesting further action on viral entry, but probably, before the egress, in the period of RNA synthesis and viral enzymes. The results demonstrate that peptide P34 and compounds V20 and V28 derived from thiazolidin-4-one can be considered as promising antiviral against BoHV-1 and BVDV.
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Resistência da planta daninha capim-branco (Chloris polydactyla) ao herbicida glyphosate / Resistance of Tall windmill grass (Chloris polydactyla) to glyphosate

Caio Augusto de Castro Grossi Brunharo 16 July 2014 (has links)
Recentemente, tem sido constatadas falhas no controle da planta daninha capim-branco (Chloris polydactyla) pelo herbicida glyphosate em áreas de culturas anuais e perenes no Brasil. Suspeita-se que estas falhas sejam decorrentes da seleção de populações resistentes desta planta daninha ao glyphosate. No entanto, até o momento, poucos relatos estão disponíveis na literatura caracterizando estas falhas. Esta pesquisa teve como objetivo a caracterização dos níveis de suscetibilidade de populações que apresentaram falha de controle, assim como estudar seus mecanismos de resistência. Também foi objetivo do trabalho analisar comparativamente o crescimento das populações suscetíveis e as supostamente resistentes ao glyphosate e avaliar a eficácia de herbicidas considerados alternativos ao glyphosate. Na primeira etapa, foram estudadas 87 populações do capim-branco vinda de diferentes regiões do Brasil, das quais duas sobreviveram ao experimento designado \"screening\". Esses dois biótipos, 59 e 69, juntamente com outras 15 populações suscetíveis, foram submetidos a experimentos de dose-resposta para a caracterização de suas suscetibilidades e determinação da dose eficiente de controle, da qual foi calculada em 705,41 g e.a. ha-1 de glyphosate. Em seguida, os biótipos supostamente resistentes foram comparados a um biótipo suscetível (34) para o cálculo do fator de resistência, que variou entre 3,92 e 7,95, confirmando a resistência dos biótipos. Não foi possível inferir claramente que existem diferenças de crescimento entre os biótipos resistente e suscetível que implicaria em custo adaptativo do biótipo resistente. No entanto, fica evidente que nas fases iniciais de crescimento, o biótipo 34S foi ou superior ou estatisticamente igual ao biótipo 69R. Não foi possível estabelecer uma relação entre diferenças de suscetibilidade entre os biótipos, portanto, a resistência do biótipo 69R ao glyphosate não alterou sua suscetibilidade aos herbicidas alternativos ao glyphosate aqui estudados. Na pós-emergência, clethodim e fenoxaprop-P-ethyl foram eficientes para controlar os biótipos 34S e 69R, enquanto que em pré-emergência, todos os herbicidas testados foram eficientes. O biótipo 69R absorveu menor quantidade de 14glyphosate em relação ao biótipo 34S em todos os tratamentos, do qual foi estatisticamente inferior àqueles contendo 14glyphosate + surfactante não-iônico (0,25%), 14glyphosate + sulfato de amônio (3kg ha-1) e 14glyphosate isolado. O tratamento que proporcionou maior absorção para ambos os biótipos foi o 14glyphosate + surfactante não-iônico. O biótipo 69R teve absorção máxima (Amax) 17% inferior ao biótipo 34S e maior retenção de 14glyphosate na folha tratada. O acúmulo de ácido chiquímico no biótipo 34S foi 2,56 vezes maior que no biótipo 69R. Mutações no gene que codificam a EPSPs dos biótipos 34S e 69R não foram observadas. Por fim, baseando-se nos dados aqui obtidos, é possível afirmar que a absorção reduzida, bem como a maior retenção do 14glyphosate nas folhas do biótipo 69R, possuem papel importante na resistência desse biótipo ao glyphosate. / It has been recently observed failures in controlling Tall windmill grass (Chloris polydactyla) by glyphosate in agricultural areas in Brazil. It is suspected that these failures are due to selection of resistant biotypes to glyphosate. However, to date, few reports are available in the literature characterizing these failures. Therefore, this study aimed to characterize the levels of susceptibility of differents populations of Chloris polydactyla, and to study the possible mechanisms of resistance to glyphosate. It was also an objective of this study to build a comparative growth analysis between populations, as well as evaluating the effectiveness of alternatives herbicides to glyphosate. In the first step, 87 populations from different regions of Brazil were studied, of which two survived the experiment called \"screening\". These two biotypes, 59 and 69, along with 15 other susceptible populations were subjected to a dose- response experiment for the characterization and determination of their susceptibility to glyphosate and a baseline herbicide sensitivity was obteined, which was calculated in 705.41 g ae ha-1 of glyphosate. Then the supposedly resistant biotypes (59R and 69R) were compared to a susceptible population (34S) for calculate the resistance factor, which ranged from 3.92 to 7.95, confirming the resistance of the biotypes. It was impossible to infer accurately that there are differences in growth between the resistant and susceptible biotypes of Tall windmill grass, which would imply in fitness penalty for the resistant biotype. However, it is evident that in the early growth stages, in most of the variables analyzed, the 34S was biotype or higher or statistically equal to biotype 69R. It was not possible to establish a statistical difference in susceptibility among biotypes, therefore the resistance of 69R biotype to glyphosate did not alter its susceptibility to alternative herbicides. At post-emergence, clethodin and fenoxaprop-P-ethyl were efficient to control biotypes 34S and 69R. On the other hand, at pre-emergence, all herbicides were efficient to control both biotypes. The biotype 69R absorbed smaller amount of 14glyphosate relative to 34S biotype in all treatments, which was statistically inferior to those containing 14glyphosate + non-ionic surfactant (0.25%), 14glyphosate + ammonium sulfate (3 kg ha-1) and 14glyphosate alone. The treatment providing greater absorption for both biotypes was 14glyphosate + non-ionic surfactant. Biotype 69R absorbed 17% less than the biotype 34S and had higher treated leaf retention. The shikimic acid accumulation assay in the biotype 34S was 2.56 times higher than in biotype 69R. Mutations in the gene encoding EPSPs were not observed. Finally, based on data obtained here, it is clear that the reduced absorption and treated leaf retention of 14glyphosate in biotype 69R, have an important role in the resistance of this biotype to glyphosate.
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Modelagem Computacional de Ventosas AutomÃticas de Duplo Efeito com Abertura e Fechamento nÃo instantÃneos como Mecanismo de AlÃvio do Golpe de ArÃete. / Computational modeling of double effect automatic air valves, with non-instantaneous opening and closing as Waterhammer protection devices

Marcus VinÃcius Sousa Rodrigues 30 September 2008 (has links)
nÃo hà / Durante fenÃmenos transitÃrios podem ocorrer pressÃes muito baixas nos trechos mais elevados de uma tubulaÃÃo, correndo o acÃmulo de ar que à arrastado pela Ãgua ocasionando sÃrios danos à tubulaÃÃo. A presenÃa de uma grande quantidade de ar na tubulaÃÃo de um sistema de aduÃÃo de Ãgua por recalque à a causa direta de reduÃÃo da seÃÃo e como conseqÃÃncia tem-se a reduÃÃo da capacidade de transporte, comprometendo seriamente o rendimento deste sistema. Os dispositivos mais modernos para o alÃvio do golpe de arÃete trabalham com ar, dentre eles, os mais utilizados na prÃtica sÃo as ventosas automÃticas, foco deste trabalho. A condiÃÃo de contorno destas ventosas à bem complexa, resultando em uma equaÃÃo nÃo linear, alÃm do fato de a Ãrea do orifÃcio da ventosa variar linearmente com o tempo. Para resolver esta nÃo linearidade aplicou-se o mÃtodo da aproximaÃÃo parabÃlica nos intervalos onde ocorre escoamento do ar em regime subsÃnico. Neste trabalho foram feitas simulaÃÃes do transiente hidrÃulico para verificar a eficiÃncia das ventosas automÃticas de duplo efeito com abertura e fechamento nÃo instantÃneos como um mecanismo de alÃvio do golpe de arÃete. As simulaÃÃes foram feitas utilizando o software UFC6 produzido no LaboratÃrio de HidrÃulica Computacional (LAHC) da Universidade Federal do CearÃ. As vÃlvulas ventosas representam uma soluÃÃo hidrÃulica satisfatÃria, pois, sÃo equipamentos de fÃcil instalaÃÃo e manutenÃÃo, alÃm do fato de serem bem mais compensadores do ponto de vista econÃmico. Os resultados obtidos mostraram a eficiÃncia deste mecanismo como alÃvio do golpe de arÃete. / During time dependent phenomena in pipelines, very low pressures may occur, mostly in points of dow elevations. In these cases, air accumulated in these points is carried out by the water flow and may damage the pipeline. This also causes reduction of the flow area and consequently, reduction of the flow itself. The most modern Waterhammer protection devices and among them, we find the air entry valves, which is the object of this work. The boundary conditions for these devices is very complex and results in a non-linear equations. Besides, we have to consider that the air flow cross-section area of the valves orifice varies linearly with time. In order to solve this non-linearity it was used the method of parabolic approximation for solving the equation in each interval of subsonic air flow. In the present work, several Waterhammer pipeline simulations were performed in order to verify the performance of the double effect automatic air valves, with non-instantaneous closing. The UFC6 computer software were used to accomplish these simulations. Air valves are a satisfactory hydraulic solution for the Waterhammer problem since they are cheaper than other devices and easy to install and mountain.
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Semeadura da soja em sistemas de rotação de culturas e integração agricultura-pecuária em um latossolo sob sistema de plantio direto / Seeding of soybean in systems of handling culture and cattle-raising integration in oxisol under no tillage system

Gurgacz, Flavio 17 May 2007 (has links)
Made available in DSpace on 2017-07-10T19:25:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Flavio_texto.pdf: 2261502 bytes, checksum: 70662acf10f6cee0e3ad7d7d457cd0c3 (MD5) Previous issue date: 2007-05-17 / The no tillage system with cattle-raising integration blunts as an alternative to agricultural activities diversification providing income increase, production risks decrease and optimization of the machinery and inputs. The no tillage seed drill available in the market disposal some components that adapts itselves to different plantation conditions. On the other hand some information are necessary to indicate in which situations the mechanism must be modified and what is its effect in the culture implantion. In this direction it was conducted a research under an oxisol in Cascavel-PR evaluating the performance of a fertilizer and seed drill in the implantation of soybean culture under different systems of soil management. Were used fertilizer coulters cinzel type, double disc and its absence under two rotation systems (wheat/soybean and covering plant/soybean) and cattle-raising integration. For the area characterization were determined the density, macroporosity, microporosity, penetration resistance, humidity and soil vegetal covering. In the tractor were determined the fuel consumption, the drawbar force, pneumatic slip, rotation of the engine and speed. The other evaluated parameters were the depth of ridge and seeds, mobilized soil in the line, index of emergency speed (IVE), plant population and productivity. The results showed a tendency of modification in the soil physics parameters according to management system and a modification in the seeder performance equipped with different coulters under the different soil conditions.The fuel consumption, drawbar force, pneumatic silp and speed were significantly modified by the coulter mechanism. The cinzel coulter showed greater depth of ridge and seeds, soil mobilizing in the line and minor IVE. The soybean productivity was not influenced by the coulter mechanism but was affected by the management system being the major value obtained in the cattle-raising integration system in function of the biggest population of plants gotten. It was concluded that when it works with different management systems it is necessary to modify the coulters of soil preparation in the sowing line to get the desired results. / O sistema plantio direto junto com a integração agricultura-pecuária desponta como alternativa à diversificação das atividades agrícolas, proporcionando aumento de renda, diminuição dos riscos de produção e otimização de máquinas e insumos. As semeadoras para plantio direto, disponíveis no mercado, disponibilizam vários componentes que se adaptam as diferentes condições de implantação da lavoura. Por outro lado, são necessárias informações que indiquem em quais situações deve-se modificar um mecanismo e qual seu efeito na implantação da cultura. Nesse sentido, implantou-se um trabalho sob latossolo no município de Cascavel - PR, avaliando-se o desempenho de uma semeadora adubadora na implantação da cultura da soja sob diferentes sistemas de manejo do solo. Utilizou-se sulcadores de fertilizante tipo haste, disco duplo e sua ausência sob dois sistemas de rotação de cultura (trigo/soja e planta de cobertura/soja) e integração agricultura-pecuária. Para a caracterização da área, mensurou-se a densidade, macroporosidade, microporosidade, resistência à penetração, umidade e cobertura vegetal do solo. No trator, foram mensurados o consumo de combustível, força na barra de tração, patinagem dos rodados, rotação do motor e velocidade. Os outros parâmetros avaliados foram a profundidade de sulco e sementes, revolvimento do solo na linha, índice de velocidade de emergência (IVE), população de plantas e produtividade. Os resultados mostram uma tendência de modificação nos parâmetros físicos do solo de acordo com o sistema de manejo e modificação do desempenho da semeadora equipada com os diferentes mecanismos sob as diferentes condições de solo. O consumo de combustível, requerimento de força, patinagem e velocidade foram significativamente modificados pelo mecanismo sulcador. O mecanismo tipo haste obteve maior profundidade de sulco e sementes, revolvimento do solo na linha e menor IVE. A produtividade de soja não foi influenciada pelo mecanismo sulcador e sim pelo sistema de manejo, sendo o maior valor obtido no sistema integração agricultura-pecuária, em função da maior população de plantas obtida. Concluiu-se que, quando se trabalha com diferentes sistemas de manejo, é necessário modificar os mecanismos de preparo do solo na linha de semeadura, para se obterem os resultados desejados.
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Semeadura da soja em sistemas de rotação de culturas e integração agricultura-pecuária em um latossolo sob sistema de plantio direto / Seeding of soybean in systems of handling culture and cattle-raising integration in oxisol under no tillage system

Gurgacz, Flavio 17 May 2007 (has links)
Made available in DSpace on 2017-05-12T14:48:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Flavio_texto.pdf: 2261502 bytes, checksum: 70662acf10f6cee0e3ad7d7d457cd0c3 (MD5) Previous issue date: 2007-05-17 / The no tillage system with cattle-raising integration blunts as an alternative to agricultural activities diversification providing income increase, production risks decrease and optimization of the machinery and inputs. The no tillage seed drill available in the market disposal some components that adapts itselves to different plantation conditions. On the other hand some information are necessary to indicate in which situations the mechanism must be modified and what is its effect in the culture implantion. In this direction it was conducted a research under an oxisol in Cascavel-PR evaluating the performance of a fertilizer and seed drill in the implantation of soybean culture under different systems of soil management. Were used fertilizer coulters cinzel type, double disc and its absence under two rotation systems (wheat/soybean and covering plant/soybean) and cattle-raising integration. For the area characterization were determined the density, macroporosity, microporosity, penetration resistance, humidity and soil vegetal covering. In the tractor were determined the fuel consumption, the drawbar force, pneumatic slip, rotation of the engine and speed. The other evaluated parameters were the depth of ridge and seeds, mobilized soil in the line, index of emergency speed (IVE), plant population and productivity. The results showed a tendency of modification in the soil physics parameters according to management system and a modification in the seeder performance equipped with different coulters under the different soil conditions.The fuel consumption, drawbar force, pneumatic silp and speed were significantly modified by the coulter mechanism. The cinzel coulter showed greater depth of ridge and seeds, soil mobilizing in the line and minor IVE. The soybean productivity was not influenced by the coulter mechanism but was affected by the management system being the major value obtained in the cattle-raising integration system in function of the biggest population of plants gotten. It was concluded that when it works with different management systems it is necessary to modify the coulters of soil preparation in the sowing line to get the desired results. / O sistema plantio direto junto com a integração agricultura-pecuária desponta como alternativa à diversificação das atividades agrícolas, proporcionando aumento de renda, diminuição dos riscos de produção e otimização de máquinas e insumos. As semeadoras para plantio direto, disponíveis no mercado, disponibilizam vários componentes que se adaptam as diferentes condições de implantação da lavoura. Por outro lado, são necessárias informações que indiquem em quais situações deve-se modificar um mecanismo e qual seu efeito na implantação da cultura. Nesse sentido, implantou-se um trabalho sob latossolo no município de Cascavel - PR, avaliando-se o desempenho de uma semeadora adubadora na implantação da cultura da soja sob diferentes sistemas de manejo do solo. Utilizou-se sulcadores de fertilizante tipo haste, disco duplo e sua ausência sob dois sistemas de rotação de cultura (trigo/soja e planta de cobertura/soja) e integração agricultura-pecuária. Para a caracterização da área, mensurou-se a densidade, macroporosidade, microporosidade, resistência à penetração, umidade e cobertura vegetal do solo. No trator, foram mensurados o consumo de combustível, força na barra de tração, patinagem dos rodados, rotação do motor e velocidade. Os outros parâmetros avaliados foram a profundidade de sulco e sementes, revolvimento do solo na linha, índice de velocidade de emergência (IVE), população de plantas e produtividade. Os resultados mostram uma tendência de modificação nos parâmetros físicos do solo de acordo com o sistema de manejo e modificação do desempenho da semeadora equipada com os diferentes mecanismos sob as diferentes condições de solo. O consumo de combustível, requerimento de força, patinagem e velocidade foram significativamente modificados pelo mecanismo sulcador. O mecanismo tipo haste obteve maior profundidade de sulco e sementes, revolvimento do solo na linha e menor IVE. A produtividade de soja não foi influenciada pelo mecanismo sulcador e sim pelo sistema de manejo, sendo o maior valor obtido no sistema integração agricultura-pecuária, em função da maior população de plantas obtida. Concluiu-se que, quando se trabalha com diferentes sistemas de manejo, é necessário modificar os mecanismos de preparo do solo na linha de semeadura, para se obterem os resultados desejados.
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Reações de acoplamento-cruzado de heck catalisadas por metais de transição: um estudo mecanístico baseado na teoria do funcional de densidade / Transition metal-catalyzed cross-coupling Heck reactions: A mechanistic study based on Density Functional Theory

Menezes da Silva, Vitor Hugo 25 August 2017 (has links)
Neste trabalho, várias reações de Heck foram investigadas utilizando principalmente métodos baseados na Teoria do Funcional de Densidade (DFT). Na primeira parte foi proposto um novo ciclo catalítico de Heck, com etapas aniônicas e neutras combinadas desencadeado por um complexo de paládio (Pd) suportado por um ligante carbeno N-heterocíclico (NHC) inédito. Posteriormente, a influência estérica do ligante NHC foi investigada na seletividade da reação de Heck inicialmente estudada. Para o NHC pouco volumoso, a componente eletrônica era majoritária comparada às contribuições de caráter não-covalente. Entretanto, quando o NHC com maior impedimento estérico foi analisado, somente alguns funcionais de densidade (TPSS-D3, &#969;B97x-D, BP86-D3, e M06-L), juntamente com o método de função de onda DLPNO-MP2, foram capazes de predizer a tendência de seletividade experimental. Por fim, a natureza do metal foi analisada por meio de uma comparação entre catalisadores NHC de níquel (Ni) e Pd nas reações de Heck. Os resultados teóricos forneceram indícios mecanísticos para o entendimento da menor atividade catalítica usualmente encontrada nos processos envolvendo complexos NHC de Ni e da necessidade experimental da formação de complexos de Ni catiônicos para atingir uma maior eficiência catalítica nessas reações. Na segunda parte deste estudo, dois exemplos marcantes da literatura sobre as reações de Heck-Matsuda enantiosseletivas foram teoricamente investigadas. Os cálculos DFT mostraram a influência crucial do substrato (olefina) na seletividade destas reações. Em um dos casos a seletividade da reação foi aprimorada através dos dados mecanísticos fornecidos pelos cálculos DFT. / In this work, several examples of Heck reactions were investigated using mostly Density Functional Theory (DFT) methods. At the first part, a new Heck catalytic cycle was proposed with combined anionic and neutral steps initiated by a newly N-heterocyclic carbene (NHC) based palladium (Pd) complex. Posteriorly, the influence of steric demanding of NHC ligand was investigated on selectivity of Heck reaction initially studied. In the case of small NHC ligand, the electronic component is more important than the noncovalent contributions. However, when the crowded NHC ligands were studied only selected density functionals (TPSS-D3, &#969;B97x-D, BP86-D3, e M06-L), and the wavefunction based method DLPNO-MP2, were capable to predict the experimental selectivity trends reported. Finally, the metal nature was analyzed by a comparison of the nickel (Ni) and Pd catalyzed Heck reactions. The theoretical results provided mechanistic insights that help to understand the low catalytic activity usually reported when Ni catalysts were used and the experimental requirement of cationic intermediates to achieve some efficiency for NHC-Ni-catalyzed Heck coupling. At second part, two representative examples from literature about the enantioselective Heck-Matsuda reactions were theoretically investigated. DFT calculations shown the crucial influence of substrate (olefin) on the selectivity of these reactions. One of cases studied, the selectivity of reaction was improved by the DFT results
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Contribuição ao estudo do valor, das perspectivas e da efetividade do mecanismo de desenvolvimento limpo no Protocolo de Kyoto / CONTRIBUTION TO THE VALUES STUDY, PERSPECTIVES AND EFFECTIVENESS OF THE CLEAN DEVELOPMENT MECHANISM OF THE KYOTOS PROTOCOL

Moraes, Luiz Antonio Grell de 24 June 2008 (has links)
Esta dissertação trata da história e características do Protocolo de Kyoto (PK), seguido do estudo do valor, das perspectivas e da efetividade do Mecanismo de Desenvolvimento Limpo (MDL), definido pelo Artigo 12 daquele Protocolo à Convenção Quadro das Nações Unidas sobre Mudança do Clima (CQNUMC). Nesse propósito, foram desenvolvidas análises conceituais das pretensões, possibilidades, valor e mesmo das equivocações do MDL. A grande importância desse instrumento acaba demonstrada que não é o seu objetivo primeiro, de auxilio nos compromissos dos países desenvolvidos (PDs), mas sim as diversas vantagens que promove para os países em desenvolvimento (PEDs). Esse instrumento de flexibilização, que foi concebido para auxiliar o cumprimento das obrigações (redução das emissões de CO2) dos países desenvolvidos (PDs) no Protocolo, pode ir muito além, com projetos de desenvolvimento sustentável (social, econômico, étnico, cultural, técnico e ambientalmente) adequados e favorável aos PEDs. Seus projetos podem e deve travar um bom combate à pobreza, o que garante também um avanço correto na perseguição do controle das causas e efeitos das mudanças climáticas. O MDL permeia todas essas questões e constitui o instrumento já presente e de conscientização, para trazer a necessária capacidade financeira e tecnológica do Norte ao encontro do Sul para que todas essas pretensões possam ocorrer. / This paper deals with the history and characteristics of the Kyotos Protocol (KP), followed by the values study about the prospects and effectiveness of the Clean Development Mechanism (CDM), as defined by the 12th Article of the Protocol to the United Nations Framework Convention on Climate Change (UNFCCC). In this purpose, conceptual analyses were developed about the objectives, possibilities, values and even mistakes of the CDM. The great importance of this instrument had been demonstrated that it is not its first objective to help the commitments of the developed countries, but the many advantages that promotes to the developing countries. This instrument of facility, which was conceived to assist the fulfillment of the obligations (reducing CO2 emissions) of developed countries in the Protocol, can go far beyond, with sustainable development projects (social, economic, ethnic, cultural, technical and environmentally) appropriated and favorable to developing countries. Their projects can and should fight against poverty, which also ensures a correct advance in pursuit of the causes and effects control of the climatic changes. The CDM permeates all these issues and is the instrument already present and of awareness, to bring the necessary financial and technological capacity from the North to the South, allowing these claims occur.
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BIODIGESTORES E BIOGÁS: BALANÇO ENERGÉTICO, POSSIBILIDADES DE UTILIZAÇÃO E MITIGAÇÃO DO EFEITO ESTUFA / BIODIGESTORS AND BIOGAS: ENERGETIC BALANCE, POSSIBILITING THE USE AND MITIGATION OF THE GREENHOUSE EFFECT

Brondani, José Carlos 30 April 2010 (has links)
Biogas is a gaseous composition formed mainly by the methane gas (CH4) and by the carbon dioxide (CO2), generated especially by microbiologic processes in environment with few or no oxygen. This research was carried out on the biogas produced from the treatment of swine dejections in breathing decomposition and accumulated in the interior of biodigestors, in swine culture in the state of Rio Grande do Sul. Within the range of this present work, the same gas is rusted and it turns into CO2 by the burning in flare. Through the literature review and applied questionnaires, possibilities of treatment of swine objections were raised, through comparative flow chart. Through measuring the biogas flow in appropriate equipments and mathematic analyses, several conclusive results were reached. It was tried to evidence not only the various possibilities of biogas use, mainly the generation of electric energy, but also the heating of swine culture in the winter. It was approached the necessary equipments to invest in the first item mentioned, as well as deadlines for these investments return. From another point of view , it was evidenced the biogas nonuse in aid of the swine culture, but the investment in a Mechanism of Clean Development (MCD) to obtain the Credits of Carbon, where it was observed the great difficulties, mainly financial, to a swine breeder implant the same. Several technical and economical possibilities to mitigate the greenhouse effect were analyzed. / Biogás é uma composição gasosa formada principalmente pelo gás metano (CH4) e pelo dióxido de carbono (CO2), gerado especialmente por processos microbiológicos em ambiente com pouco ou nenhum oxigênio. Esta pesquisa foi realizada sobre o biogás produzido a partir do tratamento de dejetos suínos em decomposição anaeróbica e acumulado no interior de biodigestores, em suinocultura do Estado do Rio Grande do Sul. No âmbito do presente trabalho, o mesmo é oxidado e transforma-se em CO2 pela queima em flare. Através da revisão da literatura e questionários aplicados, foram levantadas possibilidades de tratamento dos dejetos suínos, através de fluxogramas comparativos. Através da medição da vazão do biogás em equipamentos apropriados e análise matemática, obteve-se resultados conclusivos. Procurou-se evidenciar as diversas possibilidades de aproveitamento do biogás, principalmente a geração de energia elétrica, mas também o aquecimento da suinocultura no inverno. Abordou-se os equipamentos necessários para investir no primeiro item anteriormente citado, assim como prazos para retorno destes investimentos. De outro ângulo de visão , evidenciou-se o não aproveitamento do biogás em benefício da suinocultura, mas o investimento em um Mecanismo de Desenvolvimento Limpo (MDL) para obter os Créditos de Carbono, onde observou-se as grandes dificuldades, principalmente financeiras, para um suinocultor implantar o mesmo. Diversas possibilidades técnicas e econômicas para mitigar o efeito estufa foram analisadas.

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