Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-07T15:33:57Z No. of bitstreams: 1 Acidalia Claudino Machado.pdf: 1261012 bytes, checksum: b14728c52e587b92663812a40c6b23a8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-07T15:33:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Acidalia Claudino Machado.pdf: 1261012 bytes, checksum: b14728c52e587b92663812a40c6b23a8 (MD5) Previous issue date: 2013-02-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The aim of the present study was to characterize the epidemiological situation and spatial distribution of Leptospira spp. infection of small ruminants in the Agreste and Sertão regions of the state of Pernambuco (Brazil). The search for antibodies was conducted with 902 animals (476 goats and 426 sheep), which were at least a year old, on 23 separate properties. The microscopic agglutination test (MAT) was applied, using 23 pathogenic serovars of Leptospira spp. as antigens. The cutoff point used was 1:100. A standardized investigative questionnaire was used to study the risk factors. This questionnaire contained objective questions for the breeder related to the general characteristics of the property, as well as reproduction and sanitary conditions on the property. Of the 902 samples analyzed, 213 (23.6% C.I. 20.9% - 26.5%) were positive, which included 27.3% (130/476 C.I 23.4% - 31.6%) of goats and 19.5% (83/426 C.I. 15.9% - 23.6%) of sheep. The most common serovars were Autumnalis (54.1%), Icterohaemorrhagiae (15.0%) and Copenhageni (10.8%) among goats and Autumnalis (32.4%), Icterohaemorrhagiae (14.0%) and Castellonis (9.8%) among sheep. The most widespread serovar was Autumnalis in goats and Icterohaemorrhagiae in sheep. There was at least one positive animal (from one or both species) on all of the properties. In total, 87.5% (14/16) of the properties were considered to contain foci associated with goats. This figure was 92.8% (13/14) for sheep. It was possible to identify areas of a greater density of foci, which were higher risk areas, such as the Sertão for goats and three of the micro-regions studied for sheep. In terms of the risk factors, significant differences were found for the gender of goats (OR=0.40; C.I. 0.18 – 0.88) and sheep (OR=0.38; C.I. 0.14 – 0.99), the breeding system used (OR=2.03; C.I. 1.07 – 3.84), the type of herd (OR=2.28; C.I. 1.39 – 3.72), an absence of rats in food (OR=0.55; C.I. 0.34 – 0.91) and restricted surface water (OR=0.60; C.I. 0.37 – 0.99) for sheep. Many factors can affect the occurrence of leptospirosis in herds of small ruminants in the Agreste and Sertão regions of Pernambuco. Health education and employee training programs related to prevention and control methods for leptospirosis and other infectious diseases could help to reduce the number of infections and consequently, the economic losses caused by this disease. / Objetivou-se com este estudo caracterizar a situação epidemiológica da infecção por Leptospira spp. em pequenos ruminantes nas mesoregiões Agreste e do Sertão do Estado de Pernambuco, Brasil. O inquérito soro-epidemiológico foi realizado em 902 animais (476 caprinos e 426 ovinos) com idade superior a um ano, em 23 propriedades. Utilizou-se a técnica de Soroaglutinação Microscópica (SAM), empregando-se 23 sorovares patogênicos de Leptospira spp. como antígenos; o ponto de corte utilizado foi 1:100. Para o estudo de fatores de risco aplicou-se um questionário investigativo padronizado, constituído por perguntas objetivas ao criador, referentes às características gerais da propriedade, ao manejo produtivo, reprodutivo e sanitário. Das 902 amostras analisadas, 213 (23,6%; I.C. 20,9% - 26,5%) foram positivas, sendo 27,3% (130/476; I.C. 23,4% - 31,6%) caprinos e 19,5% (83/426; I.C. 15,9% - 23,6%) ovinos. Os sorovares mais prevalentes em caprinos foram Autumnalis (54,1%), Icterohaemorrhagiae (15,0%) e Copenhageni (10,8%), enquanto nos ovinos foram Autumnalis (32,4%), Icterohaemorrhagiae (14,0%) e Castellonis (9,8%). Houve maior dispersão do sorovar Autumnalis em caprinos e do Icterohaemorrhagiae em ovinos. Em relação ao número de focos, observou-se que para a espécie caprina 87,5% (14/16) das propriedades foram consideradas focos, enquanto para ovinos foram 92,8% (13/14). Foi possível ainda identificar áreas de maior densidade de focos, apontadas como de maior risco, sendo para caprinos o Sertão e para ovinos as três microrregiões estudadas. Quanto aos fatores de risco, foram observadas diferenças significativas entre sexo para caprinos (OR=0,40; I.C. 0,18 – 0,88) e ovinos (OR=0,38; I.C. 0,14 – 0,99); sistema de criação (OR=2,03; I.C. 1,07 – 3,84), tipo de rebanho (OR=2,28; I.C. 1,39 – 3,72), ausência do acesso de ratos a ração (OR=0,55; I.C. 0,34 – 0,91) e restrição a águas de superfície (OR=0,60; I.C. 0,37 – 0,99) para a espécie ovina. São múltiplos os fatores que podem influenciar a ocorrência da leptospirose nos rebanhos de pequenos ruminantes do Agreste e do Sertão de Pernambuco. A implantação de programas de educação em saúde e o treinamento da mão de obra em métodos de prevenção e controle da leptospirose e outras doenças infecciosas podem ser úteis na redução dos casos de infecção e na minimização das perdas econômicas causadas por esta enfermidade.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-09T12:22:55Z No. of bitstreams: 1 Francisco David Nascimento Sousa.pdf: 1748878 bytes, checksum: f75f899a3117c09975b8cfcef18e67a6 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-09T12:22:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Francisco David Nascimento Sousa.pdf: 1748878 bytes, checksum: f75f899a3117c09975b8cfcef18e67a6 (MD5) Previous issue date: 2013-02-08 / The objective of this study was to detect the DNA of Ureaplasma spp. and Mycoplasma agalactiae in sheep semen by the technique of Polymerase Chain Reaction (PCR). Were analyzed 240 samples, 120 frozen semen obtained from central artificial insemination (AI) and 120 fresh semen of breeding sheep from the states of Alagoas, Ceará, Paraíba, Pernambuco and Rio Grande do Norte collected during the Northeastern Exposure animals in Recife. After collection of the samples were carried out DNA extraction and detection of genomic DNA of the agents studied. For the first time in Brazil, was detected the presence of agents Ureaplasma spp. and Mycoplasma agalactiae in samples of frozen semen of sheep. Samples of frozen semen, DNA was detected Ureaplasma spp. in 2.5% (3/120) and Mycoplasma agalactiae of 4.2% (5/120). For fresh semen was detected DNA of Ureaplasma spp. in 8.3% (10/120) of the samples and 6.7% (8/120) of Mycoplasma agalactiae When evaluating the association between the type of semen and DNA detection for Ureaplasma spp. and Mycoplasma agalactiae, a significant association was observed only for Ureaplasma spp. (p = 0.046), being more common detection of this micro-organism in fresh semen samples. We also observed positive samples Ureaplasma spp. and Mycoplasma agalactiae from the states of Paraíba, Pernambuco and Rio Grande do Norte. All samples from the states of Alagoas and Ceará results were negative. Results obtained in this study, there is the presence of DNA of these microorganisms in semen of the breedings sheep. Thus, it is suggested that techniques for detecting these agents must be used in insemination centers and breeding sheep with high genetic potential to maximize the efficiency of the sheep reproduction by preventing the spread of these pathogens. / Objetivou-se com este estudo detectar o DNA de Ureaplasma spp. e Mycoplasma agalactiae em sêmen de ovinos pela técnica da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Foram analisadas 240 amostras, sendo 120 de sêmen congelado obtidas de centrais de inseminação artificial (IA) e 120 de sêmen fresco de reprodutores ovinos provenientes dos estados de Alagoas, Ceará, Paraíba, Pernambuco e Rio Grande do Norte coletados durante a realização da Exposição nordestina de animais em Recife,PE. Após a colheita das amostras, foram realizadas a extração de DNA e detecção de DNA genômico dos agentes estudados. Pela primeira vez no Brasil, foi detectada a presença dos agentes Ureaplasma spp. e Mycoplasma agalactiae em amostras de sêmen congelado da espécie ovina. Nas amostras de sêmen congelado, detectou-se DNA de Ureaplasma spp. em 2,5% (3/120) e de Mycoplasma agalactiae em 4,2% (5/120). Para o sêmen fresco, detectou-se DNA de Ureaplasma spp. em 8,3% (10/120) das amostras analisadas e 6,7% (8/120) de Mycoplasma agalactiae Ao avaliar a associação entre o tipo de sêmen e a detecção de DNA para Ureaplasma spp. e Mycoplasma agalactiae, observou-se associação significativa somente para Ureaplasma spp. (p= 0,046), sendo mais comum a detecção deste micro-organismo em amostras de sêmen fresco. Foram observadas ainda, amostras positivas para Ureaplasma spp. e Mycoplasma agalactiae provenientes dos estados da Paraíba, Pernambuco e Rio Grande do Norte. Todas as amostras oriundas dos estados de Alagoas e do Ceará obtiveram resultados negativos. Diante dos resultados obtidos neste estudo, constata-se a presença de DNA destes micro-organismos em sêmen de reprodutores ovinos. Desta forma, sugere-se que técnicas para detecção desses agentes sejam utilizadas em centrais de inseminação e em reprodutores ovinos com alto potencial genético, maximizando a eficiência da prática na reprodução de ovinos, evitando a disseminação destes patógenos.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-09T12:48:58Z No. of bitstreams: 1 Gislaine Raquel dos Santos.pdf: 1237145 bytes, checksum: 1d84eb25ea90c4c2359acf5c66e01410 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-09T12:48:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gislaine Raquel dos Santos.pdf: 1237145 bytes, checksum: 1d84eb25ea90c4c2359acf5c66e01410 (MD5) Previous issue date: 2011-02-09 / The objective of this thesis was to conduct a epidemiological study about the Enzootic Bovine Leukosis virus infection in dairy cattle originating from farms in the micro region of Garanhuns, State of Pernambuco. Four hundred forty five blood samples were collected on 19 dairy herds distributed in 15 towns. Samples were submitted to the Agar Gel Immunodiffusion (AGID) technique to detect anti-VLB serum antibodies. To identify the risk factors associated with infection was performed an univariate statistical analysis for those variables of interest using the chi-square test and later was made a logistic regression analysis considering as dependent variable serology (reagent or no reagent). There was a prevalence of 20.7% (95% CI; 17.1 - 82.9). Prevalence of infection at the studied properties ranged from 0.1% to 77.9%. There was at least one infected animal in 63.2% of farms. After logistic regression analysis were observed as risk factors: intensive farming (OR 19.1, CI 6.9 - 52.6), performance of palpation (OR 2.1, CI 1.3 - 3.4); management of handlers (OR 2.8, CI 1.2 - 6.5) and as a protective factor fly control (OR 0.2, CI 0, 1 - 0.4), heat treatment of colostrum (OR 0.7, CI 0.5 - 0.9); replacement animal import (OR 0.5, CI 0.3 - 0.9). According to the results, BLV infection is widespread in the studied region and control management should be implemented to prevent the spread of the virus to other properties in the region and other states. / Objetivou-se realizar um estudo epidemiológico sobre a infecção pelo vírus da Leucose Enzoótica em bovinos leiteiros procedentes de propriedades rurais na Microrregião de Garanhuns, Estado de Pernambuco. Foram coletadas 449 amostras de sangue em 19 rebanhos leiteiros distribuídos em 15 municípios. As amostras foram submetidas à técnica de Imunodifusão em Gel de Ágar (IDGA) para detecção de anticorpos séricos contra o VLB. Para a identificação dos fatores de risco associados à infecção foi realizada uma análise estatística univariada para aquelas variáveis de interesse através do teste quiquadrado de Pearson e posteriormente realizou-se a regressão logística, considerando como variável dependente o exame sorológico (reagente ou não reagente). Observou-se uma prevalência de 20,7% (IC 95%; 17,1 - 82,9). A prevalência da infecção nas propriedades estudadas variou de 0,1 a 77,9%. Observou-se que 63,2% das propriedades possuíam ao menos um animal infectado. Na análise de regressão logística observou-se como fator de risco: sistema de criação intensivo (OR 19,1; IC 6,9 – 52,6); realização de exame de palpação (OR 2,1; IC 1,3 - 3,4); manejo dos tratadores (OR 2,8; IC 1,2 – 6,5) e como fator de proteção o controle de mosca (OR 0,2; IC 0,1-0,4); tratamento térmico do colostro (OR 0,7; IC 0,5 – 0,9); importação de animais para reposição (OR 0,5; IC 0,3 – 0,9). Diante os resultados obtidos constata-se que a infecção pelo VLB está distribuída na região estudada e que medidas de controle devem ser implementadas para impedir a propagação do vírus para as demais propriedades da região e outros estados brasileiros.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-10T14:13:30Z No. of bitstreams: 1 Temistocles Soares de Oliveiira Neto.pdf: 940451 bytes, checksum: bdd46bcb24745cec8b47e3a355ed2dbb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-10T14:13:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Temistocles Soares de Oliveiira Neto.pdf: 940451 bytes, checksum: bdd46bcb24745cec8b47e3a355ed2dbb (MD5) Previous issue date: 2013-07-26 / The analysis of samples from cattle in slaughterhouse may be important to assess the health status of a flock. Health records generated in these slaughterhouses, from ante-mortem inspection to the post-mortem one, create health history of slaughter routine and constitute an important source of nosological information. It is valuable to examine the animal’s lesions from those establishments, in order to indicate the presence and causes of diseases in the organics animal systems. Liver is susceptible to several kinds of lesions due to its metabolic functions, and its diseases are commonly related as a result of the action of diverse pathological processes. In order to promote an effective inspection both during the ante-mortem examination and the post-mortem judgment, the criteria established by macroscopic evaluation should be done, when it is possible, by laboratory investigation. Macroscopic evaluation sometimes is not similar to the microscopic one, so it is necessary to do an analysis of the animal’s tissues by macroscopic examination together with complementary tests to estimate more accurately the prevalence and impact of different causes of viscera condemnation. Thus, it is possible to assist the implementation and evaluation of control programs and eradication of zoonosis diseases and diagnosis. / A análise de amostras de bovinos sacrificados durante a linha de abate em matadouros pode ter grande importância na avaliação do estado sanitário de um rebanho. Tendo em vista que os registros sanitários gerados nesses estabelecimentos de abate, a começar da inspeção ante-mortem e culminando com a post-mortem, compõem o histórico sanitário da rotina de abate e constituem uma das importantes fontes de informações nosológicas. O valor diagnóstico das lesões, observadas nesses estabelecimentos, consiste em indicar a presença e as causas de doenças nos sistemas orgânicos do animal. O fígado é um órgão susceptível a diversos tipos de lesões em virtude de suas funções metabólicas, sendo as doenças hepáticas comumente relacionadas como resultado da ação de vários processos patológicos. Visando uma maior eficácia da inspeção, tanto no exame ante-mortem quanto o post-mortem, os critérios de julgamento estabelecidos pela avaliação macroscópica devem ser subsidiados quando possível pela investigação laboratorial, já que a avaliação macroscópica, muitas vezes, não é condizente com a avaliação microscópica. Dessa forma a análise de tecidos animais através do exame macroscópico aliado a exames complementares podem estimar com maior segurança a prevalência e o impacto das diferentes causas de condenações das vísceras e, com isso, ajudar na implementação e avaliação de programas de controle e erradicação das enfermidades e diagnóstico de zoonoses.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:15:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007-Fabiola do Nascimento Correa.pdf: 1170487 bytes, checksum: 12941bc2fa78c4d327c2059d03bf1c5c (MD5) Previous issue date: 2007-02-27 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Rearing buffaloes in Brazil has been increasing notoriously and leaving of being a simple activity to justify the use of poor fertility lands. Right now the rearing buffalo is considered a promissory lucrative activity, but the information about sanitary aspects to improve buffaloes health are not consistent. Borreliosis is a systemic infectious disease caused by many Borrelia species, which have a cosmopolitan distribution, and affects various species of domestic and wild animals, including human beings. Borrelia theileri is the specie more commonly reported in ruminants. However, these animals can also be infected by B. burgdorferi sensu lato and B. coriaceae, which cause Lyme borreliosis and abortion epizootic bovine, respectively. Meanwhile, there are no seroepidemiologic studies of borreliosis in buffaloes. The aim of this study was to know the frequency of anti- B. burgdorferi homologous antibodies in buffaloes serum samples proceeding from Castanhal, Santa Isabel, Nova Timboteua and Santar?m Novo, in the continental part of Par? state and Cachoeira do Arari in Maraj? Island were collected. Serums of 491 buffaloes were analyzed by indirect ELISA test. The serologic analysis of the samples showed that 412 serums (83.91%) were positive, without different statistical significance between positive animals from Maraj? Island 81.469% (2362/284) and from the continental part 86.96% (180/207). Was observed that buffaloes of these five municipalities studied have high antibodies frequency against spirochetes B. burgdorferi. The Correspondence Analysis test showed the formation of three different municipalities groups of according with seropositives animals number. The first group was formed by Cachoeira do Arari and Castanhal, the second by Nova Timboteua and Santar?m Novo. The third group was constituted by Santa Isabel only, which presented statisticment loss antibodies frequency than others municipalities. The high frequency of positives animals found can be explained by presence of tick Boophilus microplus and by the existence of report on Borrelia sp. infecting buffalo in the studied region. These facts suggest cross-reactivity between strain g39/40 of B. burgdorferi used as antigenic substratum and Borrelia species that infect buffaloes in Par? state. Despite of low specificity of indirect ELISA test used in this study, it is a good method to select e screen infected animals in studies about Borrelia sp. in buffaloes. / A cria??o de b?falos tem expandido no Brasil deixando de ser um simples elemento de ocupa??o de terras pouco f?rteis para tornar-se sin?nimo de produ??o pecu?ria rent?vel. No entanto, os pecuaristas e profissionais de sa?de carecem de informa??es consistentes sobre sanidade desses animais. A borreliose ? uma enfermidade sist?mica, infecciosa e cosmopolita, causada por microrganismos do g?nero Borrelia, que acometem diversas esp?cies de animais dom?sticos e silvestres, al?m do homem. A esp?cie de Borrelia mais comumente reportada em ruminantes ? B. theileri. Estes animais tamb?m podem ser infectados por B. burgdorferi sensu lato, agente da borreliose de Lyme e B. coriaceae que causa o aborto epizo?tico bovino. No entanto, n?o h? estudos soroepidemiol?gicos sobre borreliose em bubalinos. Com o objetivo de conhecer a freq??ncia de anticorpos hom?logos anti-B. burgdorferi de b?falos provenientes dos munic?pios Castanhal, Santa Isabel, Nova Timboteua e Santar?m Novo, na parte continental do estado do Par? e Cachoeira do Arari na Ilha de Maraj? foram coletados soros de 491 b?falos, os quais foram analisados por meio do teste ELISA indireto. A an?lise sorol?gica das amostras revelou que 412 soros (83,91%) foram positivos, n?o ocorrendo diferen?a estat?stica significativa entre os amimais positivos provenientes da Ilha de Maraj? 81,69% (232/284) e da por??o continental do estado 86,96% (180/207). Quanto ? freq??ncia de soropositivos por munic?pio estudado, a an?lise de correspond?ncia, indicou a forma??o de tr?s grupos distintos, o primeiro formado pelos munic?pios de Cachoeira do Arari e Castanhal, o segundo formado pelos munic?pios de Nova Timboteua e Santar?m Novo e o terceiro formado apenas pelo munic?pio de Santa Isabel. Este ?ltimo apresentou estatisticamente menor freq??ncia de anticorpos em rela??o aos outros quatro munic?pios. No entanto, foi observado que b?falos dos cinco munic?pios estudados possuem alta freq??ncia de anticorpos hom?logos contra espiroquetas B. burgdorferi. A alta freq??ncia de animais soropositivos encontrada pode ser explicada pela presen?a do carrapato Boophilus microplus e pela exist?ncia de relato sobre Borrelia sp. infectando b?falo na regi?o estudada. Estes fatos sugerem rea??o cruzada entre a cepa americana g39/40 de B. burgdorferi utilizada como substrato antig?nico e a esp?cie de Borrelia que infecta os b?falos no estado do Par?. Apesar da baixa especificidade do ELISA indireto usado neste estudo, este teste constitui-se em um bom exame para triagem e monitoramento de indiv?duos infectados por microrganismos do g?nero Borrelia.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:15:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009 - Aline Rodrigues Bernardo.pdf: 1109499 bytes, checksum: 4b0f2adb9ceeb43406ffa4f7d20978ba (MD5) Previous issue date: 2009-02-09 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The production of specific antibody (IgY) in chickens (Gallus gallus domesticus) and its purification from the yolk of the egg is attracting the interest of the scientific community due to the numerous advantages of the IgG of mammals. Low cost, high volume production, recognition proteins highly conserved in mammals, in addition to preventing the suffering and death of animals for experimentation, are the main advantages. The aim of our study was to develop, standardize and deploy the technology IgY for aviaries production of antibodies with aim to obtain IGY-specific forms to promastigotes of Leishmania (Leishmania) amazonensis. Initially, matching was performed by two methods of precipitation and the comparison between them, to obtain the pure IgY from the yolk of egg white obtained in trade. The method of purification employing polietienoglicol (PEG-6000) was able to extract IgY with purity comparable to commercial standard IgY (Sigma) and more than obtained by the method with 25% ammonium sulfate. Later, chickens were inoculated with three doses of inactivated antigen (promastigotes forms of L. amazonensis) mixed with incomplete Freund's adjuvant, at 0, 14 and 21 days, IM route. High yield of total and specific IgY was obtained, as determined by the methods of Bradford and ELISA, respectively. The IgY antibodies showed high specificity (indirect immunofluorescence), sensitivity and avidity (ELISA) for promastigotes forms of L. amazonensis, from the second immunization. The level of IgY-specific antibodies remained high until the end of the analysis, around 56 days. Based on the results we can conclude that the "Technology IgY" allows to obtain antibodies with high specificity and sensitivity, in ethics, can be used successfully in various fields of science. / A produ??o de anticorpo espec?fico (IgY) em galinhas (Gallus gallus domesticus) e sua purifica??o a partir da gema do ovo vem atraindo o interesse da comunidade cient?fica devido as in?meras vantagens sobre os anticorpos IgG de mam?feros. Baixo custo, produ??o em quantidades elevada, reconhecimento de prote?nas altamente conservadas de mam?feros, al?m de se evitar o sofrimento e morte de animais de experimenta??o, s?o as principais vantagens. O objetivo geral de nosso estudo foi desenvolver, padronizar e implantar a Tecnologia IgY para produ??o de anticorpos avi?rios, tendo como meta a obten??o de IgY-espec?fica para formas promastigotas de Leishmania (Leishmania) amazonensis. Inicialmente, foi realizada adequa??o de dois m?todos de precipita??o e a compara??o entre eles, visando a obten??o da IgY pura a partir da gema de ovos brancos adquiridos no com?rcio. O m?todo de purifica??o empregando polietienoglicol (PEG-6000) foi capaz de extrair IgY com pureza compar?vel ao padr?o IgY comercial (Sigma) e superior a obtida pelo m?todo com sulfato de am?nio 25%. Posteriormente, galinhas foram inoculadas com tr?s doses de ant?geno inativado (formas promastigotas de L. amazonensis) misturados com adjuvante incompleto de Freund, nos tempos 0, 14 e 21 dias, por via intramuscular. Elevado rendimento da IgY total e espec?fica foi obtido, sendo determinado atrav?s dos m?todos de Bradford e ELISA, respectivamente. Os anticorpos IgY apresentaram elevada especificidade (Imunofluoresc?ncia indireta), sensibilidade e avidez (ELISA) para formas promastigotas de L. amazonensis, a partir da segunda imuniza??o. O n?vel de anticorpos IgY-espec?ficos permaneceu elevado at? o final da an?lise, por volta do 56? dia. Com base nos resultados obtidos podemos concluir que a Tecnologia IgY possibilita a obten??o de anticorpos com alta especificidade e sensibilidade, de forma ?tica, podendo ser utilizada com sucesso em diversos campo da ci?ncia.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:16:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007-Renata Cunha Madureira.pdf: 2108717 bytes, checksum: 17e511fe376ace549930ffeb6fed483c (MD5) Previous issue date: 2007-09-17 / Funda??o Carlos Chagas Filho de Amparo a Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / Spirochetes of the genus Borrelia attack animals and humans all over the world, causing different types of diseases. The unique species of Borrelia known and identified in Brazil which infects bovines and equines is B. theileri, transmitted by Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Several studies were been made to identify another spirochete that circulates in the country and infects both animals and humans, providing clinical symptoms regarding Lyme disease (LD). The objectives of this work were to determine the frequency of serum-positive animals for Borrelia burgdorferi stricto sensu in equines of the Maraj? Island and the municipality of Castanhal, State of Par?; to caracterize morfometrically and genotypically isolates of B. theileri from equine and to analyze genotipycally spirochetes the tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus, and human, by analysis of partial sequence of the gene 16S rRNA, fla and rpoB. Serum from 105 equines from the Maraj? Island and 103 from Castanhal municipality were collected and analyzed by indirect ELISA test. Fifteen equines (7.2% of the total) were serum-positive, being 10 from the Maraj? Island (9.5%) and five from the Castanhal municipality (4.9%). For the morfometric and genotypic characterization was collected serum of equine from the Rio de Janeiro State. Tick isolate was obtained from supernatant of a cell culture of ticks from the Mato Grosso do Sul State. Human isolate was obtained from blood sample of a woman, from the Serop?dica municipality, RJ, with LDsimile. The PCR was carried through using primers for the gene 16S rRNA, fla and rpoB. The products of amplification were cloned and sequenced. The analysis of the sequences of the isolated of equine for the genes 16S rRNA and fla of 99% (609/611) and 98% (222/226) of identity with sequences of B. theileri, respectively, in set with morfometric analysis (17.2 ? 3.6μm of length; 10 ? 2 espiras) revealed to be the microrganism in question, B. theileri. For the gene rpoB it was observed 92%(250/270) of identity with sequences of B. hermisii. The analysis of the sequences of the tick isolated revealed an identification of 100% (177/177) for the gene 16S rRNA with sequences of B. burgdorferi deposited in "GeneBank", 100% of identity (23/23) for the gene fla with B. theileri and 92% of identity (250/270) for the gene rpoB with sequence of B. hermisii. The analysis of the sequences of the human isolated revealed an identification of 99% (886/889) for the gene 16S rRNA with B. burgdorferi sequences. The presence of antibodies against Borrelia burgdorferi in equines from both places is an indicative of the presence of Borrelia sp., and, despite the lower frequency of infected animals, attention is needed for the possible occurrence of human borreliosis in those areas, considering the importance of this emergent zoonosis. This is the first genotypic characterization of a Brazilian isolate of B. theileri, as well as the first report of species of Borrelia different of B. theileri attack R. (Boophilus) microplus and confirmation of the presence of the genus Borrelia causing LD-simile in Brazil. / Espiroquetas do g?nero Borrelia acometem animais e humanos em todo o mundo determinando diferentes tipos de doen?as. A ?nica esp?cie de Borrelia reconhecida e identificada no Brasil que infecta bovinos e eq?inos ? Borrelia theileri, transmitida por Rhipicephalus (Boophilus) microplus. V?rios estudos t?m sido feitos a fim de se identificar outro espiroquet?deo que circula em nosso meio e infecta animais e humanos, levando a quadro cl?nico semelhante ? borreliose de Lyme (BL). O objetivo do presente trabalho foi determinar a freq??ncia de animais soropositivos para Borrelia burgdorferi sensu stricto em eq?inos da Ilha de Maraj? e munic?pio de Castanhal, Estado do Par?, caracterizar morfometricamente B. theileri isolado de eq?ino e genotipicamente isolados de espiroquetas obtidos de eq?ino, carrapato R. (Boophilus) microplus e humano, por an?lise das seq??ncias parciais dos genes 16S rRNA, fla e rpoB. Coletou-se 105 soros de eq?inos provenientes da Ilha de Maraj? e 103 do munic?pio de Castanhal (n=208), os quais foram analisados pelo ELISA indireto. Observou-se 15 animais soropositivos (7,2%), sendo 10 (9,5%) animais da Ilha de Maraj? e cinco (4,9%) de Castanhal. Para caracteriza??o morfom?trica e genot?pica foi coletado sangue de um eq?ino, proveniente do Estado do Rio de Janeiro. O isolado de carrapato foi obtido a partir de sobrenadante de cultura de c?lulas de carrapatos R. (Boophilus) microplus, proveniente do Estado do Mato Grosso do Sul. O isolado de humano foi obtido do sangue de um indiv?duo do sexo feminino, residente no munic?pio de Serop?dica-RJ, com BLsimile. Realizou-se a t?cnica de PCR utilizando iniciadores para o gene 16S rRNA, fla e rpoB. Os produtos da amplifica??o foram clonados e sequenciados. A an?lise das seq??ncias do isolado de eq?ino para os genes 16S rRNA e fla, 99% (609/611) e 98% (222/226) de identidade com seq??ncias depositadas no GeneBank para B. theileri, respectivamente, em conjunto com a an?lise morfom?trica (17,2 ? 3,6 μm de comprimento; 10 ? 2 espiras) revelou ser o microrganismo em quest?o, B. theileri. Para o gene rpoB observou-se 92%(250/270) de identidade com seq??ncias de B. hermisii. O sequenciamento do isolado de carrapato revelou 100% de identidade (177/177) para o gene 16S rRNA com seq??ncias de B. burgdorferi depositadas no GeneBank , 100% de identidade (23/23) para o gene fla com B. theileri e 92% de identidade (250/270) para o gene rpoB com B. hermisii. O sequenciamento do gene 16S rRNA de sangue humano com sintomatologia para borreliose de Lyme-simile, apresentou identidade de 99% (886/889) com B. burgdorferi. A presen?a de anticorpos hom?logos contra B. burgdorferi em eq?inos na Ilha de Maraj? e munic?pio de Castanhal ? indicativo da presen?a de Borrelia sp. e, apesar da baixa freq??ncia de animais soropositivos ? necess?rio aten??o para ocorr?ncia de borreliose humana nas regi?es estudadas, considerando a import?ncia dessa enfermidade como zoonose emergente. Esta ? a primeira descri??o genot?pica de isolado brasileiro de B. theileri, assim como o primeiro relato de esp?cie de Borrelia diferente de B. theileri infectando R. (Boophilus) microplus e confirma??o da presen?a de espiroquet?deo do g?nero Borrelia causando borreliose de Lyme-simile no Brasil.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:16:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007- Fabiano Araujo Pires-01.pdf: 878766 bytes, checksum: 9179bfb28ddd6cee14d8d4414534b8f8 (MD5) Previous issue date: 2007-04-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / We performed a combination of proteinase assay, either in solution or immobilized in sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel copolymerized with gelatin, to detect and quantify proteinases of Dermatobia hominis second (L2) and third (L3) instar larvae. In quantitative assays, we examined proteinase activity by hydrolysis of a panel of peptide bonds specific for the main proteinase classes. We verified that the pGlu-Phe-Leu p-nitroanilide substrate was hydrolyzed by crude extracts of L2 (3.0 ? 0.2 nmoles hour-1 mg of protein-1) and L3 (7.7 ? 0.1 nmoles hour-1 mg of protein-1) and that both activities were partially inhibited by transepoxysuccinyl- L-leucylamido-(4-guanidino)butane, 15 % and 3 % respectively. Also, we demonstrated that the Na-p-Tosyl-L-Arg methyl ester substrate was hydrolyzed by crude extracts of L2 (117 ? 24 nmoles hour-1 mg of protein-1) and L3 (111 ? 10 nmoles hour-1 mg of protein-1), suggesting a predominance of esterase activity in the crude larval preparation. Interestingly, the specific activity of serine-proteinases was totally inhibited by Phenylmethylsulphonyl fluoride in the L3 crude extract, while only 10 % of this enzyme class activity was inhibited in the L2 crude extract. Also, we have detected crude extract L2 (Km = 7,59) larvae have more affinity than L3 larvae (Km = 35,75) to Na-p-Tosyl-L-Arg methyl ester. The results of the qualitative assays with substrate gels suggested that L2 and L3 larvae express serine-proteinases with similar (13 kDa and 22 kDa) and distinct (50 kDa in L2 and 30 kDa in L3) relative molecular masses. Additionally, we have isolated an enriched esterase activity from L3 crude extract using successive chromatographies in Aprotinine-Agarose and DEAE-Sephacell columns. By this strategy we detected only one 50 kDa proteinase in this larvae crude extract. Finally, these findings contribute to the biochemical characterization of D. hominis L2 and L3 larvae. / Neste trabalho foram realizados ensaios de atividade de proteinase em solu??o e com prote?nas imobilizadas em gel de poliacrilamida contendo dodecil sulfato de s?dio copolimerizado com gelatina, para detec??o e quantifica??o das proteinases presentes nos extratos larvares de segundo (L2) e terceiro (L3) est?gios de Dermatobia hominis. Nos ensaios quantitativos, utilizou-se um painel de pept?deos sint?ticos espec?ficos para as principais classes de proteinases. Verificamos que o substrato pGlu-Phe-Leu p-nitroanilide foi hidrolisado pelo extrato total de L2 (3,0 ? 0,2 nmoles hora-1 mg de prote?na-1) e L3 (7,7 ? 0,1 nmoles hora-1 mg de prote?na-1) e que ambas atividades foram parcialmente inibidas pelo trans-epoxysuccinyl-L-leucylamido-(4-guanidino)butane, 15 % e 3 % respectivamente. Tamb?m, demonstramos que o substrato Na-p-Tosyl-L-Arg methyl ester foi hidrolisado pelos extratos totais de L2 (117 ? 24 nmoles hora-1 mg de prote?na-1) e L3 (111 ? 10 nmoles hora-1 mg de proteina-1), sugerindo uma predomin?ncia da atividade ester?sica nestes extratos. A atividade espec?fica de serino-proteinases foi totalmente inibida pelo phenylmethylsulphonyl fluoride nos extratos de L3, enquanto que somente 10 % desta atividade foi inibida nos extrados de L2. Al?m disso, n?s detectamos que o extrato total das larvas L2 (Km = 7,59) tem maior afinidade ao Na-p-Tosyl-L-Arg methyl ester do que o extrato total das larva de L3 (Km = 35,75). Os resultados do ensaio qualitativo com g?is de substrato sugerem que os extratos larvares L2 e L3 expressam serino-proteinases com similares (13 kDa e 22 kDa) e distintas (50 kDa em L2 e 30 kDa em L3) massas moleculares relativas. Adicionalmente, isolamos uma atividade ester?sica enriquecida do extrato total de L3 utilizando sucessivas cromatografias em colunas de Aprotinina-Agarose e DEAE-Sephacell. Com esta estrat?gia, detectamos somente uma banda de proteinase de 50 kDa neste extrato total. Estes resultados contribuem para a caracteriza??o das proteinases larvares de D. hominis.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:16:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007- Flavio Augusto Soares Graca01.pdf: 782491 bytes, checksum: aca3b139eb03d06af06c5dd1c95ec3d7 (MD5) Previous issue date: 2007-04-26 / Crotalus poisoning was experimentally reproduced by inoculation of Crotalus durissus terrificus (South American Rattlesnake) venom by subcutaneous via in ten clinically healthy mixed breed bovine, weighing between 125 and 449 kg and aged 12 to 36 months. Two bovine of the same age range and breed standard were used as controls. The bovine that received a 0.03 mg/kg p.v. dose died 7h40min after inoculation. A 0.015 mg/kg p.v. dose provoked death in four out of seven inoculated bovine, while two bovine experimentally poisoned with 0.0075 mg/kg p.v. became mildly sick and recovered. Onset of symptoms occurred between 1h30min and 13h45min after inoculation. Evolution oscillated between 5h25min and 44h59min for bovine deaths and between 33h15min and 17 days for bovine that recovered. The principal nervous signs observed were diminished response to external stimuli, hypotonic reflexes, dragging of hooves along the ground, apparent lethargy, difficulties in moving around obstacles, ocular globe paralysis, lateral and sternal decubitus and tongue paralysis. Constant adypsia and petechiae in the conjunctival and vaginal mucosa was also verified. A discrete to moderate increase in bleeding time was verified in six bovine and a moderate increase in partial thromboplastin time was activated in seven bovine. Moderate leukocytosis with neutrophilia, relative lymphopenia, eosinopenia and monocytosis occurred and a discrete increase in the number of rods. A significant increase in creatine kinase serum levels was observed, of a ten-fold order. No significant alterations were observed at urinalysis. At necropsy there were minimal edema at the inoculation site, discrete petechiae and suffusions in the epicardium, omentum, biliary vesicle and bladder mucosa. Histopathological examination revealed necrosis (hyalinization) of groups or isolated myocytes in ten different muscles examined, both close and distant from the inoculation site. Faced with the clinic-pathological picture, observations were made regarding the diagnosis of crotalus envenomation and its differentiation from deseases which course with paralysis and muscular necrosis in cattle in Brazil. / Reproduziu-se experimentalmente o envenenamento crot?lico, atrav?s da inocula??o, por via subcut?nea, do veneno de Crotalus durissus terrificus (Cascavel sul-americana) em dez bovinos mesti?os, com peso variando entre os 125 e 449 quilogramas e idade entre 12 e 36 meses. Dois animais na mesma faixa et?ria e padr?o racial foram utilizados como controle. O animal que recebeu dose de 0,03 mg/kg p.v. foi a ?bito 7h40min ap?s a inocula??o. A dose de 0,015 mg/kg p.v. induziu o ?bito em quatro de sete bovinos inoculados, enquanto os dois animais que receberam 0,0075 mg/Kg, adoeceram discretamente e se recuperaram. Os sintomas tiveram in?cio entre 1h30min e 13h45min ap?s a inocula??o. A evolu??o oscilou entre 5h25min e 44h59min para os animais que morreram e entre 33h15min e 17 dias entre os animais que se recuperaram. Os principais sinais nervosos observados foram diminui??o da resposta aos est?mulos externos, reflexos hipot?nicos, arrastar dos cascos no solo, aparente letargia, paralisia do globo ocular e da l?ngua, dec?bito esternal e lateral. Verificou-se tamb?m adipsia constante e pet?quias nas mucosas vaginal e conjuntival. Observaram-se discreto a moderado aumento do tempo de sangramento em seis animais e moderado aumento do tempo de tromboplastina parcial ativada em sete bovinos. Houve moderada leucocitose com neutrofilia, linfopenia relativa, eosinopenia, monocitose e discreto aumento do n?mero de bast?es. Foi evidenciado significativo aumento dos n?veis s?ricos de creatinaquinase, da ordem de dez vezes. N?o foram observadas altera??es significativas atrav?s da urin?lise. ? necropsia constataram-se edema quase impercept?vel no local da inocula??o, discretas pet?quias e sufus?es no epic?rdio, omento, ves?cula biliar e mucosa da bexiga. Os exames histopatol?gicos revelaram necrose (hialiniza??o) de grupos de mi?citos ou em mi?citos isolados em dez diferentes m?sculos esquel?ticos examinados, pr?ximos ou distantes do local de inocula??o. Diante do quadro cl?nico-patol?gico foram feitas observa??es sobre o diagn?stico do envenenamento crot?lico e sua diferencia??o com enfermidades que cursam com paralisia e necrose muscular em bovinos do Brasil.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:17:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009 - Felipe Victorio de Castro Bath.pdf: 899860 bytes, checksum: 4fd602f8c11878cd5b06034ba2ab2b10 (MD5) Previous issue date: 2009-03-26 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The objective of this work was checked Candida's percentage spp in oropharynx of ostriches (Struthio camelus) and he valued in vitro the virulence of the isolated strains. The motivation for this research was due to the fact of the ostrich be exotic sorts and for the ignorance of the potential microrganisms that this one has. The animals were divided in four groups, totalizing 80 samples. The research of the presence of the agent in swabs originating from the birds was done in the Laboratory of Patogenic Yeasts and You set, Depto of Microbiology and Imunology Veterinary, Institute of Veterinary, UFRRJ, for processing of same, with sowings in environment of cultivation on Sabouraud dextrose agar. The confirmation of isolations were carried out through tests of macromorphology, micromorphology, realization of auxanogram, zimogram and complementary proofs. Of the total of samples of the oropharynx, 32,5 % obtained growth with yeasts, only or accompanied by moulds. The growth of C. albicans corresponded to 65,38 % of the total of isolates. The most of the isolated ones were strongly positive for production of protease and approximately also they showed half of these positive samples for the production of phospholipases what suggests some degree of virulence of these strains. / O objetivo deste trabalho foi verificar o percentual de Candida spp em orofaringe de avestruzes (Struthio camelus) e avaliar a virul?ncia in vitro das esp?cies isoladas. A motiva??o para esta pesquisa deveu-se ao fato do avestruz ser uma esp?cie ex?tica e pelo n?o conhecimento do potencial de microrganismos que esta possui. Os animais foram divididos em quatro grupos, totalizando 80 amostras. A pesquisa da presen?a do agente nos swabs oriundos das aves foi feita no Lab. de Leveduras. Patog?nicas e Ambientais, Depto de Microbiologia e Imunologia Veterin?ria, IV, UFRRJ, por processamento dos mesmos, com semeadura em meio de cultivo ?gar Sabouraud dextrose. As confirma??es de isolamento foram realizadas por meio de testes de macromorfologia, micromorfologia, realiza??o de auxanograma, zimograma e provas complementares. Do total de amostras processadas da orofaringe, 32,5% obtiveram crescimento leveduriforme, ?nico ou acompanhado de fungos filamentosos. O crescimento de C. albicans correspondeu a 65,38% do total de isolados leveduriformes. A maioria dos isolados foi fortemente positiva para produ??o de protease e aproximadamente metade destas amostras tamb?m mostraram-se positivas para a produ??o de fosfolipases o que sugere a alta virul?ncia destas amostras. Palavras chave: Candida, avestruzes, virul?ncia.