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Análise morfológica dos ovários e testículos de tubarões oceânicos capturados no Atlântico Sul e EquatorialRÊGO, Mariana Gomes do 09 February 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-02-09 / This study aimed to evaluate the ovaries morphology and testes from oceanic sharks caught in the South Atlantic and Equatorial. For both samples were collected between January 2008 and March 2010, through the tuna fleet the vessels, captured along the South and Equatorial Atlantic, where they were collected 17 females and 164 males. In the vessels was removed visceral animals tract. After screening, the ovaries and testes were weighed and measured (length and width), identified macroscopically their maturational state. To perform the histological analysis of the material, the ovaries were fixed in 10% formalin sea water for 48 hours and testes in Bouin's fixative for 48 hours too. Then they were passed through the protocol histology. The microscopic analysis of ovaries was found three distinct maturational stages: Stage I (Immature), stage II (maturing) and stage III (mature). The first stage was classified immature ovaries; the second one was in five ovarian maturation and the third was nine ovarian mature. Immature females were found in ovaries with small width between 1.0 and 3.1 centimeters, with internal gelatinous structure or granules in maturing females, the ovaries were slightly higher showing varying width of 5.2 and 6.0 centimeters and mature ovaries had a width varying between 6.5 and 7.8 centimeters, with a rounded shape with large and well developed oocytes. On microscopic examination was observed that the ovaries are covered by epithelial tissue simple plan in the early stages of development, ranging for simple cubic in the final stages of maturation. Below the epithelium is the albuginea composed of dense connective tissue and regions of muscle fibers. In the initial stage of maturation, the ovaries presented epigone organ, they were not different histologically of the ovary. Now in the mature ovaries was shown a simple cubic epithelium, below the epithelium is a layer of dense connective tissue and muscle layer with the presence of vitellogenic oocytes and fat cells. It also showed a thin membrane enclosing the yolk oocytes. It was observed separating the pellucida zone of the oocyte from the follicle wall and a basal lamina between layers and granular teak layer. For the testes, of the 164 individuals collected, 52 were Isurus oxyrinchus, Carcharhinus falciformis 17 and 95 Carcharhinus longimanus. For the three species it was observed that the variation in the three maturation stages proposed had no visible morphological change. To characterize microscopic, cellular development in the three maturation stages, it also showed the same for all three species. The first stage was characterized by the presence of organ epigone that this phase is undifferentiated testis, thus presenting the same histological composition. The second stage there is a decrease in body epigone and differentiation of the testis with the emergence of the first germ cells (spermatogonia). The third stage the national epigone only present as a thin layer lining the testis, this is well developed and large seminiferous and the tubules with large amounts of sperm. In the classification of morphological testis there was a difference, once the species Isurus there was and Radial, for Carcharhinus was named as diametric. / Este trabalho teve por objetivo avaliar a morfologia dos ovários e testículos de tubarões oceânicos capturados no Atlântico sul e Equatorial. Para tanto as amostras foram coletadas, entre janeiro de 2008 e março de 2010, através das embarcações da frota atuneira, capturadas ao longo do Atlântico Sul e Equatorial, onde foram coletadas 17 fêmeas e 164 machos. Nas embarcações foi retirado o trato visceral dos animais. Após a triagem, os ovários e testículos foram pesados e medidos (comprimento e largura), sendo identificados macroscopicamente o seu estado maturacional. Para a realização da análise histológica do material, os ovários foram fixados em formol a 10% com água do mar, por 48 horas e os testículos em fixador de Bouin também por 48 horas. Em seguida passaram pelo protocolo histológico. Na análise macroscópica dos ovários foram encontrados três estágios maturacionais distintos: estágio I (Imaturo), estágio II (em maturação) e estágio III (Maduro). No estágio I foram classificados 3 ovários imaturos, no estágio II 5 ovários em maturação e no estágio III 9 ovários maduros. Nas fêmeas imaturas foram encontrados ovários pequenos com largura entre 1,0 e 3,1 cm, com estrutura interna gelatinosa ou granular, nas fêmeas em maturação, os ovários se encontravam um pouco maiores apresentando largura variando de 5,2 e 6,0 cm e nos ovários maduros possuía largura variando entre 6,5 e 7,8 cm, apresentando um formato arredondado, com ovócitos grandes e bem desenvolvidos. Na análise microscópica foi observado que os ovários são revestidos por tecido epitelial simples plano, nos primeiros estágios de desenvolvimento, variando para simples cúbico nos estágios finais da maturação. Logo abaixo do epitélio se encontra a albugínea composta por tecido conjuntivo denso e regiões de fibras musculares. No estágio inicial de maturação os ovários apresentam o órgão epigonal, não diferenciando-se histologicamente do ovário. Já nos ovários maduros foi evidenciado o epitélio simples cúbico, logo abaixo do epitélio encontra-se uma camada de tecido conjuntivo denso e uma camada muscular com presença de ovócitos vitelogênicos e células adiposas. Evidenciou-se também uma fina membrana vitelínica delimitando os ovócitos. Foi observada a zona pelúcida separando os ovócitos da parede do folículo e uma lâmina basal entre as camadas granulosas e a camada da teca. Para os testículos, dos 164 indivíduos coletados, 52 foram Isurus oxyrinchus, 17 Carcharhinus falciformis e 95 Carcharhinus longimanus. Para a três espécies estudadas foi observada que a variação nos três estágios maturacionais proposto não tiveram alteração morfológica visível. Para a caracterização microscópica, o desenvolvimento celular nos três estágios maturacionais, também se apresentou o mesmo para as três espécies estudadas. No estágio I caracterizou-se pela presença do órgão epigonal que nessa fase é indiferenciado do testículo, apresentando assim a mesma constituição histológica. No estágio II há uma diminuição do órgão epigonal e a diferenciação do testículo com o surgimento das primeiras células germinativas (espermatogônias). No estágio III o órgão epigonal se apresenta apenas como uma fina camada revestindo o testículo,este encontra-se bastante desenvolvido com presença de túbulos seminíferos grandes e com grande quantidade de espermatozóides. Já na classificação da disposição morfológica dos testículos ocorreu diferença, uma vez que, na espécie Isurus, evidenciou-se Radial e para os Carcharhinus foi denominada como diamétrica.
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Produção, caracterização e purificação parcial de quitinase produzida por Streptomyces sp. DPUA1581NASCIMENTO, Talita Camila Evaristo da Silva 27 July 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-07-27 / Sustainability is a theme that has been raised steadily in recent years, the production and use of enzymes in an efficient alternative recycling of industrial and agricultural waste. The chitinase acts in the hydrolysis of chitin, the substance can be found in large quantities in the shells of crustaceans. The objective of this research was to select Streptomyces spp. with the greatest potential in the production of chitinase, to characterize the crude and partially purified. For selection we used 30 strains of Streptomyces spp. isolated from lichen in the Amazon region. Parameters such as pH and temperature optima, stability to pH and temperature from the crude enzymatic extract. Partial purification of the enzyme was performed by precipitation in ammonium sulfate in the range of 0-80% and the electrophoresis profile by SDS-PAGE. Streptomyces sp. DPUA1581 chitinase produced by submerged fermentation with 1% of chitin, agitation 150 rpm, at 28 °C for 96 hours. The enzyme characterization showed the best activity in sodium phosphate buffer 100 mM, pH 7.0 and was stable after 180 minutes in all pHs tested. The optimum temperature was 80 °C chitinase, remained stable between 30 and 100 °C for 180 minutes. The activity was enhanced in the presence of Fe2+ (134%), Mn2+ (71%) and the anionic surfactant SDS (59%), however, Pb2+ (99%) and EDTA (62%) inhibited the enzyme function. After fractionation with ammonium sulfate showed the enzymatic extract purification factor equal to 7 and 108% yield. The chitinase produced by Streptomyces sp. DPUA1581 under the conditions described in this work, has a great industrial viability, demonstrating catalytic activity even when subjected to high temperatures for prolonged periods. / Sustentabilidade é um tema abordado constantemente nos últimos anos, sendo a produção e utilização de enzimas uma eficiente alternativa na reciclagem de resíduos industriais e agrícolas. A quitinase atua na hidrólise da quitina, esta substância pode ser encontrada em grande quantidade na carapaça de crustáceos. O objetivo desta pesquisa foi selecionar Streptomyces spp. com maior potencial na produção da quitinase, caracterizar o extrato bruto e purificar parcialmente. Para seleção foram utilizadas 30 linhagens de Streptomyces spp. isoladas de líquens da região Amazônica. Foram avaliados parâmetros como pH e temperatura ótimos, estabilidade ao pH e a temperatura a partir do extrato bruto enzimático. A purificação parcial da enzima foi realizada por precipitação em sulfato de amônio na faixa de 0-80% e o perfil eletroforético em SDS-PAGE. Streptomyces sp. DPUA1581 produziu quitinase por fermentação submersa com 1% de quitina, agitação de 150 rpm, a 28 °C por 96h. A caracterização enzimática demonstrou melhor atividade no tampão fosfato de sódio 100 mM, no pH 7,0 e manteve-se estável após 180 minutos em todas as variações de pH testadas. A temperatura ótima da quitinase foi 80 °C, mantendo-se estável entre 30 e 100 °C durante 180 minutos. A atividade foi potencializada na presença de Fe2+ (134%), Mn2+ (71%) e do surfactante aniônico SDS (59%), entretanto, Pb2+ (99%), e EDTA (62%) inibiram a função da enzima. Após o fracionamento com sulfato de amônio o extrato enzimático apresentou fator de purificação igual a 7 e rendimento de 108%. A quitinase produzida por Streptomyces sp. DPUA1581 nas condições descritas neste trabalho, apresenta grande viabilidade industrial, demonstrando atividade catalítica mesmo quando submetida a altas temperaturas por período prolongado.
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Avaliação das lesões inflamatórias e da carga parasitária em órgãos do sistema genital masculino e feminino de cães com infecção natural por Leishmania (Leishmania) infantum (Nicolle, 1908)OLIVEIRA, Vinícius Vasconcelos Gomes de 15 February 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-02-15 / The canine visceral leishmaniasis is an important parasitic zoonosis endemic in Brazil, caused by protozoa Leishmania infantum. In urban areas, dogs are considered the main reservoir of this parasite, in which the inflammatory lesions observed in tissues and organs may be related with parasite presence, including the genital system. Therefore, the aim of this study was to evaluate the inflammatory lesions and parasite load in the genital tract of dogs naturally infected with L. infantum. Thus, tissue samples collected from 12 female dogs and 19 dogs naturally infected by L. infantum from the municipalities of Caruaru and Petrolina, Pernambuco, respectively. Fragments of vulva, vagina, cervix, uterine body and horns and ovaries of the females and testes, epididymis, prostate, glans penis, prepuce and scrotum of the males were collected for structural assessment, immunohistochemistry and molecular. In the present study, vulva and vagina were the major sites to inflammatory lesion development and L. infantum amastigotes immunostaining in the reproductive tract of female dogs. Moreover, in the reproductive tract of male dogs: epididymis, prostate, glans penis, prepuce and scrotum showed lympho-histio-plasmacytic inflammatory lesion. L. infantum amastigotes immunolabeling just was visualized in testes, epididymis, glans penis and scrotum. In both sexes, there is no correlation between parasite load and inflammatory lesion on the genitals. / A leishmaniose visceral canina é uma importante zoonose parasitária endêmica no Brasil, causada por Leishmania infantum. Em áreas urbanas, os cães são considerados os principais reservatórios deste parasito, no qual, diversos órgãos e tecidos podem apresentar lesões decorrentes do parasito, inclusive com o envolvimento do sistema genital. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar as lesões inflamatórias e carga parasitária em órgãos do sistema genital masculino e feminino de cães com infecção natural por Leishmania infantum. Para tanto, foram utilizados fragmentos de órgãos do sistema genital de 12 cadelas e 19 machos naturalmente infectados por L. infantum provenientes dos municípios de Caruaru e Petrolina, Pernambuco, respectivamente. Amostras de vulva, vagina, cérvix, corpo e cornos uterinos e ovários para as fêmeas e testículos, epidídimos, próstata, glande, prepúcio e escroto para os machos foram coletados para avaliação estrutural, imunohistoquímica e molecular. No presente estudo, pode-se observar que os principais locais de desenvolvimento de lesões e imunomarcação de formas amastigotas de L. infantum no trato reprodutor das fêmeas foram vulva e vagina, enquanto que nos machos as lesões inflamatórias foram observadas no epidídimo, próstata, glande, prepúcio e escroto. Imunomarcação de formas amastigotas de L. infantum foram observadas nos testículos, epidídimo, glande e escroto. Em ambos os sexos, não foi obervada correlação entre carga parasitária e lesão inflamatória nos órgãos genitais.
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Avaliação da carga parasitária em cães com infecção natural Leishmania (Leishmania) infantum chagasi submetidos a tratamento experimental / Parasite load evaluation in gogs naturally infected with Leishmania (Leishmania) infantum chagasi submitted to experimental treatmentNASCIMENTO, Glaucia Grazielle 15 June 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-06-15 / The Canine Visceral Leishmaniasis is a disease whose etiological agent in Brazil is the species of Leishmania (Leishmania) infantum chagasi, endemic in several regions, transmitted by insect-vector Lutzomyia longipalpis. The domestic dog is considered the most important parasite reservoir. This study aimed to evaluate the parasite load in dogs naturally infected with Leishmania (L.) infantum chagasi submitted to experimental treatment. For this purpose we used 18 asymptomatic dogs naturally infected with Leishmania (L.) infantum chagasi of both sexes, various ages submitted to treatment protocol with allopurinol 10 mg / kg 12h hours, domperidone 1 mg / kg every 24 hours during twelve months, associated with inactivated vaccine, three doses at 21 days interval by the subcutaneous route at a dilution of lyophilized to two parts of a diluent. The animals were submitted to clinical evaluation, blood tests, biochemical, immunohistochemistry of skin and monitoring through the Polymerase Chain Reaction in moments zero (M0), six months (M6) and twelve months (12M). Were observed significant remission of clinical signs in 100% (18/18) of the dogs in the post-treatment times, as well as standardization and improvement of haematological and biochemical parameters. In immunohistochemistry the skin, there was a significant reduction and elimination of parasites in the skin between times. PCR detected DNA of the parasite in skin samples and bone marrow after twelve months of treatment, with significant reduction between the pre- and post-treatment. The results of this study conclude that the treatment with allopurinol and domperidone associated with inactivated vaccine, to promote remission of clinical signs and reduction of parasite burden in animals with visceral leishmaniasis. / A Leishmaniose Visceral Canina é uma doença que tem como agente etiológico no Brasil a espécie do protozoário Leishmania (Leishmania) infantum chagasi, endêmica em várias regiões, transmitida pelo inseto-vetor Lutzomyia longipalpis. O cão doméstico é considerado o mais importante reservatório do parasita. O objetivo deste trabalho foi avaliar a carga parasitária em cães naturalmente infectados com Leishmania (L.) infantum chagasi submetidos a tratamento experimental. Para tanto utilizou-se 18 cães sintomáticos, naturalmente infectados por Leishmania (L.) infantum chagasi de ambos os sexos, idades variadas submetidos a protocolo de tratamento com alopurinol 10 mg/kg a cada 12h horas, domperidona 1 mg/kg a cada 24 horas, durante doze meses, associado com a vacina inativada, três doses com intervalo de 21 dias, por via subcutânea, na diluição de duas partes do liofilizado para uma do diluente. Os animais foram submetidos à avaliação clínica, testes hematológicos, bioquímicos, imuno-histoquímica de pele e monitoramento através da Reação em Cadeia da Polimerase, nos momentos zero (M0), seis meses (M6) e doze meses (12M). Houve remissão significativa dos sinais clínicos em 100% (18/18) dos cães nos momentos pós-tratamento, bem como normalização e melhora dos parâmetros hematológicos e bioquímicos. Na imuno-histoquímica da pele, houve redução significativa e eliminação dos parasitos na pele entre os momentos. Na PCR foi detectado DNA do parasita nas amostras de pele e medula óssea após doze meses de tratamento, embora com redução significativas entre os momentos pré e pós-tratamento. Os resultados deste trabalho concluem que o tratamento com alopurinol e domperidona associado com a vacina inativada, promove a remissão dos sinais clinicos e redução da carga parasitária em animais com leishmaniose visceral.
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Avaliação ultramorfológica de formas imaturas e adultas de Lutzomyia lonpipalpis Lutz e Neiva, 1912 (Diptera: Psichodidae) procedentes do campo e de colônias de laboratórioVALENÇA, Luiz Augusto França 26 February 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-02-26 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Lutzomyia longipalpis has a great importance in public health to be transmitter of visceral leishmaniasis in the New World. This study aimed to observe, with the aid of scanning electron microscopy, the morphological and ultrastructural relevant aspects of the immature forms (eggs and larvae and pupae) and the laboratory adults species of L. longipalpis, comparing those from the field with those from laboratory colony. Eggs exochorion observations showed that the species L. longipalpis has unconnected crest ornaments and the presence of tubercles along its entire surface. In general, all larval stages of this species are similar. However, both morphological characteristics as distinct ultrastructural were observed. Morphology: size of the larvae in the different stages of growth had wormlike form, translucent white color, small and delicate caudal bristles developing along the larval growth, detailing the front wall of the first-stage larva, caudal segments. Ultrastructural characteristics as pseudo-feet, jaw, trichodea bristles, filiform bristles were observed. We can see in the larval exuvia pupae, body segments, forming the wings, antennae and legs. Regarding the analysis of adults both from field as those from colony in the laboratory, we can observe their morphological characteristics of male and female genitalia and sensilla. About the ultrastructural observations were seen: forms and distribution of setae and spines along the vector of the body, besides the sensilla escamiformes, trichodea and capamiformes. This study may provide a new basis for the taxonomy of this important vector in the search for more information in order to promote better knowledge about the biology and adaptability in regions with different soil and climatic characteristics. / Lutzomyia longipalpis tem grande importância na saúde publica por ser transmissor da leishmaniose visceral no Novo Mundo. O presente estudo teve como objetivo observar com o auxilio da Microscopia Eletrônica de Varredura os aspectos morfológicos e ultraestruturais relevantes das formas imaturas (ovos e larvas e pupa) e adultos de laboratório da espécie L. longipalpis, comparando os oriundos de campo com os oriundos em colônia de laboratório. Observações do exocório dos ovos mostraram que a espécie L. longipalpis possui ornamentações de cristas não conectadas e presença de tubérculos ao longo de toda sua superfície. Em geral, todas as fases larvais da espécie são similares. Contudo, tanto características morfológicas quanto ultraestruturais distintas foram observadas. Na morfologia: tamanhos das larvas nas diferentes fases de crescimento apresentavam forma vermiforme, coloração branca translucida, cerdas caudais pequenas e delicadas nas larvas de primeiro estágio desenvolvendo-se ao longo do crescimento larval, detalhamento da parede frontal da larva de primeiro estágio, segmentos caudais. Características ultraestruturais como pseudo-pés, mandíbula, cerdas tricóides, cerdas filiformes foram observadas. Podemos observar nas pupas exuvia larval, segmentos do corpo, formação das asas, antenas e pernas. Já em relação à análise dos adultos tanto de campo quanto dos oriundos de colônia em laboratório, podemos observar suas características morfológicas das genitálias masculina e feminina e sensilas. Sobre as observações ultraestruturais foram visibilizados: formas e distribuição de cerdas e espinhos ao longo do corpo do vetor, além das sensilas escamiformes, tricóides e capamiformes. Este estudo poderá estabelecer novas bases para a taxonomia desse importante vetor na busca de mais informações visando maior entendimento sobre biologia e capacidade de adaptação em regiões com diferentes características edafoclimáticas.
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Efeito da suplementação oral do óleo de arroz na congelabilidade do sêmen ovinoMONTEIRO, Juliana Arandas Borba 27 February 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-02-27 / The aim was to carry out a bibliographic study about the sperm and the influence of reactive oxygen species (ROS) and antioxidant therapies on ram semen cryopreservation, as wel as evaluated experimentally the effects of supplementary feeding with commercial rice oil in ram semen freezability. For the latter purpose, were used 16 crossbred sheep, with a mean weight of 35 kg and average age of 15 months, previously evaluated clinical and andrologicaly. These animals were divided into two groups according to the quality of semen, where the control group included animals with approved seminal parameters, and the treatment group for individuals with lower semen quality. The animals from treatment group were supplemented daily, by oral way, with 100 mL per day commercial rice oil (Horse Range), during 63 days. In turn, animals in the control group received 100 mL of saline solution daily, by oral way, during the same period. Semen and blood samples were obtained by artificial vagina and jugular venipuncture, respectively, at wich 21 days, where the first sample was taken immediately before treatment start (day zero D0). Semen from each breeder was subjectively evaluated and individually processed for freezing (-196 oC), while from the blood was recovered the serum, which was stored under freezing (- 4 oC). After thawing, the semen was evaluated for sperm kinematics in the computerized system (CASA), as well as for plasma membrane and acrosomal integrity in a flow cytometry. The blood serum was used for testosterone determination by electrochemiluminescence. At D0, total (MT) and progressive (MP) motility, VCL, VAP and VSL were higher (P<0.05) in control than in the treatment group. On the other hand, after 21 days of treatment (D21), VCL, VAP and VSL from treatment group were higher (P<0.05) than the control group. Similarly, after 63 days of treatment the MP, VCL, VAP, VSL and total sperm with intact acrosome were higher (P<0.05) in the treatment than in the control group. Furthermore, according comparison of each group over time, was observed that while the seminal parameters from control group decrease throughout the study (P<0.05), those from treatment group are increase (P <0.05). There was no significant difference (P> 0.05 ) between the experimental groups with respect to serum testosterone concentration, regardless of evaluation time. Thus, it is concluded that oral administration of rice oil acts positively on the kinematics parameters and acrosomal integrity of ram semen subjected to cryopreservation, and that it not influence the plasma levels of testosterone. / Neste trabalho objetivou-se avaliar os efeitos da alimentação suplementar com óleo de arroz comercial na congelabilidade do sêmen ovino, onde foram utilizados 16 ovinos mestiços, com peso de 35 kg e idade de 15 meses, em média, previamente submetidos à avaliação clínico-andrológica. Os animais foram separados em dois grupos experimentais, de acordo com a qualidade do sêmen, onde o grupo controle foi formado por animais aprovados quanto aos parâmetros seminais e o grupo tratamento por indivíduos com qualidade de sêmen inferior. Os animais do grupo tratamento foram suplementados diariamente, por via oral, com 100 mL por dia de óleo de arroz comercial (Gama Horse), durante 63 dias. Os animais do grupo controle receberam diariamente 100 mL, por via oral, de soro fisiológico durante o mesmo período. Colheitas de sêmen e sangue foram realizadas por vagina artificial e venopunção da jugular, respectivamente, a cada 21 dias, tendo sido a primeira colheita realizada imediatamente antes do início do tratamento (dia zero: D0). O sêmen de cada reprodutor foi avaliado subjetivamente e processado individualmente para a congelação (-196 oC), enquanto que da amostra de sangue foi recuperado o soro, o qual foi armazenado sob congelação (- 4 oC). Após descongelação, o sêmen foi avaliado quanto à cinética espermática no sistema computadorizado (CASA), bem como a integridade de membrana acrossomal e plasmática com fluorocromos no citômetro de fluxo. O soro sanguíneo foi utilizado para a dosagem de testosterona por eletroquimioluminescência. No D0, as motilidades total (MT) e progressiva (MP), VCL, VAP e VSL foram maiores (P<0,05) no grupo controle do que no grupo tratamento. Por outro lado, aos 21 dias de tratamento (D21), os valores de VCL, VAP e VSL do grupo tratamento foram superiores (P<0,05) aos do grupo controle. Da mesma forma, aos 63 dias de tratamento a MP, VCL, VAP, VSL e total de espermatozoides com acrossoma íntegro foram maiores (P<0,05) no grupo tratamento do que no grupo controle. Além disso, por meio da comparação de cada grupo ao longo do tempo, pode-se constatar que, enquanto os parâmetros seminais do grupo controle diminuíram ao decorrer do estudo (P<0,05), os do grupo tratamento aumentaram (P<0,05). Não foi observada diferença (P>0,05) entre os grupos experimentais com relação à concentração sérica de testosterona, independente do tempo de avaliação. Assim, conclui-se que a administração oral de óleo de arroz age positivamente sobre os parâmetros cinéticos e de integridade do acrossoma de espermatozoides de carneiros submetidos à criopreservação, e que não influencia os níveis séricos de testosterona.
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Ocorrência do herpesvírus bovino 5 em bovinos procedentes de matadouros do Sertão do Araripe - PESIMÕES, Salomé Gonçalves 11 September 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-09-11 / The knowledge of diseases that affect cattle is extremely important, the neurological manifestation of disease are frequent and caused by various agents , the Bovine herpesvirus type 5 ( BoHV - 5 ) is a virus that causes neuropathy in cattle , latency in the central nervous system ( SNC) and clinical manifestation in periods of stress. The object of the study was to research the DNA presence of Herpesvirus Type 5 in cattle through the Real Time Polymerase Chain Reaction (qPCR) based upon the utilization of two protocols and analyze the histopathological findings in samples of the cattle central nervous system. Forty-eight (48) cattle samples of the central nervous system samples were obtained comprised of brain, cerebellum, brain stem and spinal cord derived from three slaughterhouses located in the cities of Ouricuri, Bodocó and Exú, Araripe Wilderness in the state of Pernambuco. Under molecular analysis the efficiency of the protocols was compared using the following primers. With the primers used in protocol 1 there was obtained 29.16% (14/48) of the positive samples, however, the utilized primers in protocol 2 resulted in well defined peaks with regard to positivity of the positive controls and all of the samples were negative toward the qPCR. Based on histopathology analysis of central nervous system samples from Ouricuri-PE the following lesions became evident: lymphocytic infiltrate 90% (18/20), gliosis 80% (16/20), neuronophagia 80% (16/20), edema 70% (14/20), macrophages 65% (13/20), congestion 65% (13/20), demyelination 45% (9/20), bleeding 35% (7/20), necrosis 15% (3/20), gitter cell 5% (1/20), spongiosis 5% (1/20) and perivascular cuff 5% (1/20). As a result of the diversity of pathogens and similarity of neurological diseases in cattle the use of primers that present few crossed reactions (dimers) is fundamental for the efficiency and success of the qPCR against BoHV – 5. / O conhecimento das enfermidades que acometem bovinos é de extrema importância, as doenças de manifestação neurológica são frequentes e causadas por vários agentes, o Herpesvírus bovino tipo 5 ( BoHV – 5 ) é um vírus que provoca neuropatia em bovinos, latência no sistema nervoso central (SNC) e manifestação clínica em períodos de estresse. Objetivou-se com este estudo pesquisar a ocorrência da infecção pelo BoHV-5 em bovinos pela reação em cadeia da polimerase em tempo real (qPCR) com base na utilização de dois protocolos e analisar os achados histopatológicos de amostras de sistema nervoso central de bovinos. Foram obtidas 48 amostras de SNC de bovinos, constituídas por encéfalo, cerebelo, tronco encefálico e medula, procedentes de três matadouros localizados nas cidades de Ouricuri, Bodocó e Exu, Sertão do Araripe, Pernambuco. Na análise molecular foram utilizados dois protocolos com diferentes primers. Com os iniciadores utilizados no protocolo 1 obteve-se 29,16% (14/48) das amostras positivas, no entanto, os iniciadores utilizados no protocolo 2, resultaram em picos bem definidos no controle positivo e todas as amostras resultaram negativas pela qPCR. Com base na análise histopatológica do SNC das amostras provenientes de bovinos do matadouro de Ouricuri-PE evidenciou-se as seguintes lesões: infiltrado linfocitário 90% (18/20), gliose 80% (16/20), neuronofagia 80% (16/20), edema 70% (14/20), macrófagos 65% (13/20), congestão 65% (13/20), desmielinização 45% (9/20), hemorragias 35% (7/20), necrose 15% (3/20), células gitter 5% (1/20), espongiose 5% (1/20) e manguito perivascular 5% (1/20). Em decorrência da diversidade de patógenos e similaridade das enfermidades neurológicas em bovinos, o uso de primers que apresentem poucas reações cruzadas (dímeros) é fundamental para a eficiência e o êxito do diagnóstico na qPCR frente ao BoHV-5.
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Ocorrência de ovinos portadores da infecção por Campylobacter spp. na microrregião Garanhuns, PernambucoLÚCIO, Érica Chaves 15 February 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-02-15 / The objective of this study was to determine the occurrence and risk factors associated with infection with Campylobacter spp. in sheep creations in the micro-region Garanhuns, State of Pernambuco, Brazil. Were collected 421 fecal samples from sheep flocks coming 20 for the isolation of Campylobacter spp. and Campylobacter jejuni and Campylobacter fetus species were identified by Polymerase Chain Reaction (PCR). To analyze the risk factors logistic regression was performed from the questionnaire with objective questions about the hygienic-sanitary and reproductive management. The occurrence of Campylobacter spp. it was 4.5% (19/421; C.I. 2.8% - 7.1%). The 19 positive samples in cultivation, eight (1.9% CI 0.9% - 3.9%) were classified as C. fetus subsp. fetus and seven (1.7% CI 0.7% - 3.5%) as C. jejuni, coinfected with four stool samples (0.95%). The number of identified focus was 35.0% (7/20) of the creations of sheep that had at least one positive animal. In logistic regression analysis did not identify any of the variables as a risk factor. This is the first report of infection with Campylobacter spp. in sheep herds in northeastern Brazil, and it is concluded that infection occurs in those herds. Thus, it is necessary to implement prevention and control measures to prevent the propagation of agent between the creations, avoiding damage to sheep production and risk to public health, since campylobacteriosis is considered an emerging zoonosis. / Objetivou-se com este estudo determinar a ocorrência e os fatores de risco associados à infecção por Campylobacter spp. em criações de ovinos na microrregião Garanhuns, no estado de Pernambuco, Brasil. Foram coletadas 421 amostras fecais de ovinos procedentes de 20 rebanhos para o isolamento de Campylobacter spp. As espécies Campylobacter fetus subsp. fetus e Campylobacter jejuni foram identificadas por Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Para análise dos fatores de risco foi realizada uma análise univariada e posteriormente regressão logística a partir de questionário com perguntas objetivas sobre o manejo higiênico-sanitário e reprodutivo. A ocorrência para Campylobacter spp. foi de 4,5% (19/421; I.C. 2,8% - 7,1%). Das 19 amostras positivas no cultivo, oito (1,9%; I.C. 0,9% - 3,9%) foram classificadas como C. fetus subsp. fetus e sete (1,7%; I.C. 0,7% - 3,6%) como C. jejuni, com co-infecção em quatro amostras (0,95%). O número de focos identificados foi de 35,0% (7/20) das criações de ovinos que apresentavam pelo menos um animal positivo. Na análise de regressão logística não foi identificada nenhuma das variáveis como fator de risco. Este é o primeiro registro da infecção por Campylobacter spp. em rebanhos ovinos no Nordeste do Brasil, concluindo-se que a infecção ocorre nesses rebanhos. Dessa forma, se faz necessário à implementação de medidas de controle e prevenção, para impedir a propagação do agente entre as criações, evitando prejuízos para ovinocultura e risco para saúde pública, uma vez que a campilobacteriose é considerada uma zoonose emergente.
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Detecção de Cryptosporidium spp., Leishmania spp. e identificação de ixodídeos e sifonápteros em Didelphis albiventris Lund 1841 (Marsupialia: Didelphidae)SILVA, Edson Moura da 22 February 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-02-22 / Several wild animals are described as reservoirs, hosts and carriers of infectious and parasitic agents, especially the marsupials Didelphis genus, including the Didelphis albiventris. Due to the general and anthropic habit, this animal is recognized as a reservoir of various pathogens, especially Cryptosporidium spp. and Leishmania spp., besides serving as a carrier of arthropods that can parasitize domestic animals, wildlife and humans. Given this context, the objective of this study was to detect Cryptosporidium spp., Leishmania spp. and identify Ixodids in Didelphis albiventris. The capture was performed with the use of Tomahowk live trap. Physical containment was performed with the aid of appropriate leather gloves and chemical containment was performed with the association of Ketamine Hydrochloride (30 to 50 mg / kg / IM) and Xylazine (2 mg / kg / IM). A total of 40 animals were captured, 29 females and 11 males of free life belonging to the Metropolitan Mesoregion of Recife and the Micro-region of Araripina, Pernambuco, Brazil. Stool samples of the animals were subjected to centrifugal sedimentation technique in formalin-ether with subsequent staining Kinyoun method. Blood samples were also collected to investigate the infection by Leishmania spp. by Polymerase Chain Reaction (PCR) and are listed ectoparasites. As a result, it was observed that 15% (6/40) of the fecal samples of D. albiventris were parasitized with Cryptosporidium spp., demonstrating that they can act as important reservoirs of this parasite in the urban-wildland interface.
None of the samples was positive for Leishmania spp. by PCR, noting that the animals are not part of the life cycle of this agent in studied areas. Ectoparasites found were rated as Ixodes loricatus, Amblyomma rotundatum and Amblyomma spp., being reported for the first time the parasitism by Amblyomma rotundatum in D. albiventris. / Vários animais silvestres são descritos como reservatórios, hospedeiros e carreadores de agentes infecciosos e parasitários, tendo como destaque os marsupiais do gênero Didelphis, dentre eles o Didelphis albiventris. Devido ao hábito generalista e antrópico, esse animal é reconhecido como reservatório de vários agentes patogênicos, destacando-se Cryptosporidium spp., e Leishmania spp., além de servir como carreador de artrópodes que podem parasitar animais domésticos, silvestres e o homem. Diante deste contexto, o objetivo deste trabalho foi detectar Cryptosporidium spp., Leishmania spp. e identificar Ixodídeos em Didelphis albiventris. Para captura foram utilizadas armadilhas tipo Tomahowk live trap. Um total de 40 animais foi capturado, sendo 29 fêmeas e 11 machos de vida livre pertencentes à Mesorregião Metropolitana do Recife e a Microrregião de Araripina, Pernambuco, Brasil. Amostras de fezes dos animais foram submetidas à técnica de centrífugo-sedimentação em formol-éter com posterior coloração pelo método de Kinyoun. Amostras de sangue também foram coletadas para investigar a infecção por Leishmania spp. pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), além de serem coletados ectoparasitas. Como resultado, foram observados que 15% (6/40) das amostras fecais dos D. albiventris estavam parasitadas com oocistos de Cryptosporidium spp., demonstrando que os mesmos podem atuar como importantes reservatórios deste parasita na interface urbano-florestal. Nenhuma das amostras foi positiva para Leishmania spp. pela PCR, ressaltando que os animais estudados não fazem parte do ciclo de vida desse agente nas áreas estududas. Os ectoparasitas encontrados foram classificados como Ixodes loricatus, Amblyomma rotundatum e Amblyomma spp., sendo relatado pela primeira vez o parasitismo por Amblyomma rotundatum em D. albiventris.
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Isolamento e caracterização genética de Toxoplasma gondii de gatos ferais no Arquipélago de Fernando de Noronha, Pernambuco, BrasilMELO, Renata Pimentel Bandeira de 18 February 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-02-18 / Toxoplasma gondii is an obligate intracellular coccidian, tissue cyst forming, which causes toxoplasmosis, zoonotic disease of great impact in public health. T. gondii is able to infect most of warm-blooded animals, including humans. Felids are recognized as the only definitive hosts and are important in toxoplasmosis epidemiology, shedding oocysts in feces, contaminating environment. The purpose of this study was to isolate and genotyping T. gondii in feral cats (Felis catus) from the Fernando de Noronha Archipelago, Pernambuco state, Brazil. During one year sick feral cats were caught by Archipelago Animal Vigilance Center. After chemical restraint (ketamine 10% and xylazine 1%) blood samples of 31 feral cats from different locations on the island were collected. These weak animals posteriorly died and fragments of brain, heart, lung, diaphragm, and liver were collected. Blood samples were intended to serology by Indirect Immunofluorescence Assay (IFA) for IgG antibody detection and tissue fragments were submitted to mouse bioassay for T. gondii isolation. Anti-T.gondii antibodies were detected in 18/31 (58%) felines. Tissues from seven animals were submitted to bioassay, obtaining two T. gondii isolates non-pathogenic for mouse. Genotyping was performed by PCR-RFLP using 10 molecular markers (SAG1, SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1 e Apico), identifying an atypical strain of T. gondii (ToxoDB #146). This is the first report of this genotype in feral cats worldwide. The results obtained contribute to molecular epidemiology studies of this pathogen and show/demonstrate T. gondii infection in feline population of the Archipelago. Control measures based on health education should be reinforced to prevent the cat infection and to reduce infection sources for definitive and intermediate hosts, especially to human population of this island. / Toxoplasma gondii é um coccídeo intracelular obrigatório formador de cistos teciduais, responsável pela toxoplasmose, zoonose de grande impacto na saúde pública. É capaz de infectar a maioria dos animais homeotérmicos, incluindo humanos. Os felídeos são os únicos hospedeiros definitivos, apresentando grande importância na epidemiologia da toxoplasmose pela capacidade de eliminar oocistos nas fezes, contaminando o ambiente. Este estudo teve como objetivo isolar e genotipar T. gondii em gatos ferais (Felis catus) do Arquipélago de Fernando de Noronha, Estado de Pernambuco, Brasil. Durante o período de um ano, gatos ferais fracos foram capturados pelo Centro de Vigilância Animal do Arquipélago. Após contenção química (quetamina 10% e xilazina 1%) foram coletadas amostras de sangue de 31 felinos ferais de diferentes localidades da Ilha. Esses animais doentes, posteriormente, vieram a óbito e fragmentos de encéfalo, coração, pulmão, diafragma e fígado foram coletados. As amostras de sangue foram destinadas à sorologia por meio da Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para pesquisa de anticorpos (IgG) anti-T.gondii e os fragmentos de tecido deos felinos positivos na RIFI foram submetidos ao bioensaio em camundongos para isolamento do protozoário. Anticorpos anti-Toxoplasma gondii foram detectados em 18/31 (58%) felinos. Sete animais tiveram seus tecidos submetidos ao bioensaio, obtendo-se dois isolados de T. gondii não patogênicos para camundongos. A genotipagem foi realizada por meio da PCR-RFLP multilocus, utilizando 10 marcadores genéticos (SAG1, SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1 e Apico). Uma cepa atípica de T. gondii (ToxoDB #146) foi identificada, sendo este o primeiro relato deste genótipo em gatos ferais no mundo. Os resultados obtidos neste trabalho contribuem para o estudo da epidemiologia molecular deste agente e permitem concluir que a infecção por T. gondii ocorre na população de felinos do Arquipélago. Medidas de controle baseadas na educação sanitária devem ser reforçadas para prevenir a infecção dos felinos e reduzir as fontes de infecção para outros hospedeiros intermediários, sobretudo para a população humana desta Ilha.
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